KR101227701B1 - 복합 추출물(ｈｃ-6)을 포함하는 피부 개선용 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 피부 개선용 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 상황버섯 추출물, 감초 추출물, 알로에베라겔 및 센텔라아시아티카 추출물을 포함하는 피부 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 따른 상기 조성물은 노화 방지, 염증 억제, 피부 미백 또는 주름 개선 효과가 탁월하여 피부 개선용 화장료 제조시 유용하게 이용될 수 있다.

Description

복합 추출물(ＨＣ-6)을 포함하는 피부 개선용 화장료 조성물{Cosmetic composition for improving skin comprising HC-6 complex extracts}

본 발명은 피부 개선용 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 상황버섯 추출물, 감초 추출물, 알로에베라겔 및 센텔라아시아티카(Centella asiatica) 추출물의 복합 추출물 포함하여 노화 방지, 염증 억제, 피부 미백 또는 주름 개선 효과가 탁월한 피부 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.

피부는 외부 환경과 직접 접해 있으면서, 물리적, 화학적 및 생물학적 자극원으로부터 인체를 보호하는 중요한 보호막 역할을 담당하므로, 다양한 외부 환경적 스트레스에 의해 세포가 손상되어 노화현상이 발생하게 된다. 구체적으로 자외선, 스트레스, 질병상태, 환경인자, 상처, 나이가 들어감에 따라 프리라디칼이 활성화되어 야기될 수 있으며, 이런 상태가 심화될 경우 생체 내에 존재하는 항산화 방어망을 파괴하고, 세포 및 조직을 손상시켜 노화를 촉진하게 된다.

사람의 피부색은 피부 내부의 멜라닌(melanin) 농도와 분포에 따라 결정되어진다. 인체 피부의 멜라닌 세포에서 생성되는 멜라닌 색소는 검은 색소와 단백질의 복합 형태를 갖는 페놀계 고분자 물질로서, 자외선으로 발생하는 피부손상을 차단하는 중요한 역할을 하고 있다. 멜라닌 생합성에는 멜라닌 세포에 존재하는 티로시나아제(tyrosinase)의 작용이 가장 중요한 것으로 보고되어 있고, 티로시나아제는 아미노산의 일종인 티로신(tyrosine)을 멜라닌 중합체 생성의 중간산물인 도파(DOPA), 도파퀴논(dopaquinone)으로 전환함으로써 피부 흑화과정에 핵심적 역할을 수행한다.

피부 주름은 피부의 수분 함유량, 콜라겐 함유량 및 외부 환경에 대한 면역 작용 능력 등 여러 가지 요인들의 복합적인 작용에 의해 생성되는 것으로 알려져 있다. 이러한 요인들 중 주름의 형성에 가장 큰 영향을 미치는 것은 콜라겐의 생성량과 콜라겐의 함량을 감소시키는 콜라겐 분해 효소인 콜라게네이즈의 발현량과 활성이다.

또한, 환경 오염, 스트레스, 인스턴트 음식이나 육류중심의 식생활 변화 등으로 인해 피부면역시스템에 부조화가 초래되어 다양한 피부염, 피부암 등의 피부질환이 발생되고 있다.

최근에는 피부 미용에 대한 관심이 더욱 높아지면서, 다양한 피부 개선 작용, 예를 들면, 노화 방지, 미백, 주름 개선, 탄력 증진, 염증 완화 등의 개선 효과를 동시에 충족시킬 수 있는 다기능성 화장료 개발이 활발하게 이루어지고 있다.

그러나, 이러한 다기능성 화장료는 여러 가지 성분을 복합적으로 첨가하는 경우가 대부분이므로, 다양한 유용 성분 간의 충돌로 인한 생리학적 활성 저하, 피부 자극이 발생할 수 있고, 다수의 성분 첨가에 따른 비용 증진의 문제점이 있다.

또한, 피부 자극을 최소화하고, 자연에서 유용성분을 얻기 위해 천연물 추출물을 이용하여 기능성 화장료를 제조하기 위한 시도가 다양하게 이루어지고 있다. 그러나 이러한 천연물 추출물은 대부분 화학물질에 비해 단가가 비싸 확실한 효과를 기대할 만큼의 농도로 첨가하기에 어려움이 있고, 너무 고농도로 처리할 경우, 피부자극이 발생할 우려가 있다.

본 발명자는 화장료 제조시 상황버섯 추출물, 감초 추출물, 알로에베라겔 및 센텔라아시아티카 추출물을 복합적으로 동시에 적용할 때, 상황버섯 추출물 및 감초 추출물의 공지된 피부 개선 효능인 노화 방지, 염증 억제, 피부 미백 또는 주름 개선 효능을 월등히 증진시킬 수 있음을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.

본 발명의 목적은 상황버섯 추출물, 감초 추출물, 알로에베라겔 및 센텔라아시아티카(Centella asiatica) 추출물의 복합 추출물 포함하여 노화 방지, 염증 억제, 피부 미백 또는 주름 개선 효능이 증진된 피부 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

하나의 양태로서, 본 발명은 상황버섯 추출물, 감초 추출물, 알로에베라겔 및 센텔라아시아티카(Centella asiatica) 추출물을 포함하는 노화 방지, 염증 억제, 피부 미백 또는 주름 개선을 위한 피부 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.

본 발명에서 상기 상황버섯 추출물, 감초 추출물, 알로에베라겔 및 센텔라아시아티카 추출물은 1~5 : 1~5 : 1~10 : 1~15의 혼합비로 함유될 수 있으며, 바람직하게는 1~3 : 1~3 : 1~6 : 1~10의 혼합비로 함유될 수 있다.

본 발명의 상기 조성물은 상황버섯 추출물, 감초 추출물, 알로에베라겔 및 센텔라아시아티카 추출물을 0.01 내지 30중량%로 함유할 수 있다.

본 발명에서 상기 상황버섯 추출물, 감초 추출물, 및 센텔라아시아티카 추출물은 물, 탄소수 1-4개의 저급 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트 및 1,3 부틸렌 글리콜로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 용매를 사용하여 추출된 것일 수 있다.

본 발명의 상기 조성물은 항산화 활성, 항염 활성 및 항암 활성을 가짐을 특징으로 한다. 또한, 상기 항염 활성은 iNOS(inducible nitric oxide synthase) 억제 작용을 통한 것일 수 있다.

본 발명의 상기 조성물은 멜라닌 생합성 저해 활성을 가져 미백 작용을 나타내며, 콜라게나아제(collagenase) 저해 활성을 가져 주름 개선 작용을 나타낸다.

또한, 본 발명의 상기 조성물은 폴리페놀을 높은 함량으로 포함하며, 수렴 효과를 갖는다.

본 발명의 상기 조성물은 상기 성분 외에 녹차 추출물, 복분자 추출물 및 상백피 추출물 등을 추가로 포함할 수 있다.

본 발명의 상기 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등의 다양한 제형 형태일 수 있다.

본 발명에 따른 상기 화장료 조성물은 상황버섯, 감초, 알로에베라겔 및 센텔라아시아티카의 복합 추출물을 포함하여 항산화 활성, 항염 활성, 항암 활성, 모공 축소, 미백 작용 및 주름 개선 효능이 현저히 증진되고, 피부 자극이 거의 없어 종합적인 피부 개선 효과가 탁월한 장점이 있다.

따라서, 본 발명의 화장료 조성물은 노화 방지, 염증 억제, 피부 미백 또는 주름 개선을 위한 피부 개선용 화장료 개발에 유용하게 이용될 수 있다.

도 1은 본 발명에 따른 HC-6 추출물의 암세포주 melanoma cell에 대한 증식억제 효과를 MTT 평가법으로 측정한 결과이다.
도 2 및 도 3은 본 발명에 따른 HC-6 추출물의 멜라닌 생합성 저해능을 확인한 결과이다.
도 4는 본 발명에 따른 HC-6 추출물의 항염 효과를 확인하기 위해, Raw 264.7 세포에서 LPS 자극시 iNOS 단백질 발현 수준을 측정한 결과이다.

본 발명의 상기 피부 개선용 화장료 조성물은 상황버섯 추출물, 감초 추출물, 알로에베라겔 및 센텔라아시아티카 추출물의 복합 추출물('HC-6 추출물'로 명명함)을 포함하며, 노화 방지, 염증 억제, 피부 미백 또는 주름 개선 효능을 가짐을 특징으로 한다.

이하, 본 발명의 구성을 보다 상세히 설명한다.

본 발명에서 이용되는 상황버섯(Phellinus linteus)은 담자군류 민주름버섯목 진흙버섯과로서, 목질진흙버섯이라고도 불린다. 한국, 일본, 오스트레일리아, 북아메리카 등에 자생하며 갓은 지름 6~12cm, 두께 2~10cm로, 반원모양, 편평한 모양, 둥근 산 모양 등 여러 가지 모양을 하고 있다. 가장자리는 선명한 노란색이고 아랫면은 황갈색이며 살고 황갈색이다. 자루가 없고 포자는 연한 황갈색으로 공모양이다. 이러한 상황버섯에는 여러 종류의 당과 플라보노이드 성분, 섬유질, 이소플라본등이 다량 함유되어 있으며, 약리작용으로는 항암효과, 면역강화기능, 종양저지효과, 자궁출혈, 월경불순 등의 부인병 치료에 효과가 좋다고 알려져 있다. 또한, 화장료로 적용될 때 보습력과 피부 미백 효과, 피부노화 방지기능, 항산화효과, 항염효과, 피부세포재생 및 콜라겐 생성 능력 면에서 효과가 매우 우수한 것으로 보고되고 있다.

본 발명에서 이용되는 감초(甘草, Glycyrrhiza Radix)는 콩과(Leguminosae) 감초(Glycyrrhiza glabra L.)의 뿌리 및 뿌리줄기이다. 다년생 초본으로 키는 30 내지 80㎝로 직립하며, 기부는 목질화하며 가지가 많이 생긴다. 어린줄기에는 털이 있다. 뿌리는 직근(直根)으로 깊게 뻗으며 포복경이 옆으로 뻗으며 부정아에서 새로운 줄기가 발생한다. 잎은 단수우상복엽으로 엽장은 5 내지 20㎝, 소엽은 5 내지 17매이며, 엽병에는 섬모가 밀생한다. 꽃은 길이 2 내지 10㎝이며, 화색은 자색, 백색 또는 황색이고 꽃은 길이 10 내지 24㎜이다. 뿌리와 포복경(匍匐莖)을 이용하며, 약용되는 주성분은 트리터페노이드사포닌(triterpenoid saponin)인 글리시리진산(glycyrrhizic acid)을 3.63~13.06% 함유하며 그 외 여러 종류의 플라본 화합물이 있다. 보기약(補氣藥)으로 폐(肺)와 비(碑)의 기를 보하여 외부의 탁한 기운으로 인하여 얼굴의 혈액순환이 장애되는 것을 방지하고 내부의 습(濕)을 제거하여 안과 밖으로 피부를 건강하게 만드는 작용을 한다.

본 발명에서 알로에는 백합과에 속하는 다년초이며, 다육질 잎을 갖는 다즙성의 CAM(Crassulacean Acid Metabolism) 식물로, 3,500년 이상 광범위하고 다목적인 민간 치료제로서 널리 사용되어 왔으며, 400여종 이상의 알로에가 동정되었는데, 이 중 알로에 베라(Aloe vera Linne)의 겔은 제약이나 화장품으로서도 가장 널리 사용되어온 천연소재의 하나이다.

본 발명에서 이용되는 센텔라아시아티카(Centella Asiatica)는 미나리과의 다년생 풀로서, 아시아티코사이드(Asiaticoside), 아시아트산(Asiatic-acid) 및 마데카스산(Madecassic-acid) 등과 같은 성분을 함유하고 있다. 센텔라아시아티카는 특히 피부재생작용이 뛰어나며, 면역 능력을 강화하고, 활력을 증대시켜, 각종 피부질환 (skin disorders), 상처치료 (wound healing), 강장효과 (tonics), 기억향상(memory enhancer for mental), 스트레스 관련질환 (stress related disorders), 위궤양 (ulcers) 등에 효과가 있는 것으로 알려져 있다.

본 발명에서 상기 상황버섯 추출물, 감초 추출물 및 센텔라아시아티카 추출물은 통상의 추출 용매 및 추출 방법을 이용하여 제조할 수 있으며, 시판되는 것을 이용할 수 있다. 추출 용매로는 예를 들면, 물, 탄소수 1-4개의 저급 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 에테르, 클로로포름 및 1,3 부틸렌 글리콜 등을 이용할 수 있다. 상기 추출용매는 건조된 재료 중량 기준으로 2~40배 정도로 혼합하여 추출할 수 있다. 추출온도는 각 재료의 유용성분의 유효활성이 제거되지 않을 정도의 온도이면 특별히 제한되지 않으나, 바람직하게는 50 내지 100℃ 정도이며, 더욱 바람직하게는 60 내지 80℃이다.

또한, 본 발명의 추출물은 상술한 추출 용매에 의한 추출물뿐만 아니라, 통상적인 정제 과정을 거친 추출물도 포함한다. 예컨대, 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외여과막을 이용한 분리, 다양한 크로마토그래피(크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 분획도 본 발명의 추출물에 포함되는 것이다. 본 발명의 추출물은 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조될 수 있다.

본 발명의 조성물에 포함되는 알로에 베라겔은 바람직하게는 알로에 베라로부터 얻어진 겔(gel)을 단독으로 사용하거나, 알로에 베라 겔을 분말화시켜 사용하거나, 또는 알로에 베라겔과 분말을 적합한 비율로 혼합한 것을 사용할 수 있다.

본 발명의 상기 조성물은 상황버섯 추출물, 감초 추출물, 알로에베라겔 및 센텔라아시아티카 추출물을 동시에 포함할 때, 각 재료의 유용성분 간에 상승작용이 발생하여 노화 방지, 염증 억제, 피부 미백 또는 주름 개선 효능을 효과적으로 증진시킬 수 있으며, 일정 조성비로 포함할 때, 이러한 효능을 더욱 월등하게 증진시킬 수 있다. 본 발명의 조성물은 상기 상황버섯 추출물, 감초 추출물, 알로에베라겔 및 센텔라아시아티카 추출물을 1~5 : 1~5 : 1~10 : 1~15의 혼합비로 함유하는 것이 바람직하며, 바람직하게는 1~3 : 1~3 : 1~6 : 1~10의 혼합비이다. 이러한 혼합비에서, 노화 방지, 염증 억제, 피부 미백 또는 주름 개선의 탁월한 증진효과를 기대할 수 있다.

본 발명에서 상황버섯 추출물, 감초 추출물, 알로에베라겔 및 센텔라아시아티카 추출물 조성물 총 중량에 대해 0.01 내지 30 중량%로 포함될 수 있으며, 바람직하게는 0.05 내지 10 중량%, 더욱 바람직하게는 1 내지 5 중량%이다. 추출물의 함량이 너무 낮으면 노화 방지, 염증 억제, 피부 미백 및 주름 개선 등의 피부 개선 효과를 기대하기 어렵고, 함량이 너무 높으면 피부가 자극될 수 있다.

본 발명의 상기 피부 개선용 조성물은 항산화 활성, 항염 활성 및 항암 활성을 갖는 것을 특징으로 한다. 구체적으로 상기 조성물은 전자공여능, 라디칼 소거능 및 SOD 유사 활성을 통한 항산화 활성을 가지며, 이를 통해 피부 노화를 방지할 수 있다. 또한, 상기 조성물은 iNOS(inducible nitric oxide synthase) 억제 작용을 통한 항염 활성을 가지며, 이를 통해 피부 염증 억제, 아토피 완화 작용을 나타낼 수 있다. 또한, 상기 조성물은 암세포 증식 억제 작용을 나타내어 피부암 개선에 효과적이다.

본 발명의 상기 피부 개선용 조성물은 티로시나아제(Tyrosinase) 억제 작용을 통한 멜라닌 생합성 저해 활성을 가지며, 이를 통해 미백 효과를 나타낼 수 있다. 또한, 상기 조성물은 콜라게나아제(collagenase) 저해 활성을 가지며, 이를 통해 피부 재생, 주름 억제 효과가 탁월한 특징이 있다.

또한, 본 발명의 상기 조성물은 폴리페놀을 높은 함량으로 포함하여 피부 노화방지, 주름개선, 미백, 보습 효능을 나타내며, 수렴 효과를 나타내어 모공 축소 및 피부 탄력에도 도움을 줄 수 있다.

본 발명의 상기 피부 개선용 조성물은 상황버섯 추출물, 감초 추출물, 알로에베라겔 및 센텔라아시아티카 추출물 외에도 녹차 추출물, 복분자 추출물 및 상백피 추출물 등을 추가로 포함시켜 이용할 수 있다. 또한, 이외에도 본 발명의 유효 활성을 저해하지 않는 범위에서 피부 개선을 위한 공지의 천연물 추출물이나 기타 성분을 추가로 포함시켜 이용할 수 있다.

본 발명의 상기 화장료 조성물은 유효 성분으로서 포함되는 상황버섯 추출물, 감초 추출물, 알로에베라겔 및 센텔라아시아티카 추출물 외에도 화장료 조성물에 통상적으로 첨가되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예를 들면, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제나 담체를 포함할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들면, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 구체적으로는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이, 파우더, 팩트, 립글로즈, 립스틱, 섀도우, 샴푸 및 린스 등의 제형으로 제조될 수 있다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

[ 실시예 ]

이하, 본 발명의 바람직한 실시예를 통해 본 발명의 구성 및 작용을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 다만, 하기 실시예는 본 발명의 이해를 돕기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 하기 실시예에 한정되지는 않는다. 여기에 기재되지 않은 내용은 이 기술 분야에서 숙련된 자이면 충분히 기술적으로 유추할 수 있는 것이므로 그 설명을 생략하기로 한다.

실시예 1~8, 비교예 1~3. 피부 개선용 조성물 제조

본 발명에 따른 피부 개선용 조성물을 제조하기 위해, 상황버섯 추출물, 감초 추출물, 알로에베라겔 및 센텔라아시아티카 추출물을 옴니허브에서 구입하여 준비하였다.

하기 표 1에 기재된 혼합조성비로 각 시료를 혼합하여 실시예1~8 및 비교예1~3의 피부 개선용 조성물을 제조하였다.

	상황버섯 추출물	감초 추출물	알로에 베라겔	센텔라아시아티카 추출물
실시예 1	1	1	12	5
실시예 2	1	1	3	17
실시예 3	1	1	1	10
실시예 4	1	1	1	1
실시예 5	1	1	6	1
실시예 6	1	1	1	6
실시예 7	1	1	3	1
실시예 8	1	1	1	3
비교예 1	1	-	-	-
비교예 2	-	1	-	-
비교예 3	1	1	-	-

시험예 1. 시료 조성비에 따른 효능 비교 측정

상기 실시예1~8 및 비교예1~3에서 제조한 피부 개선용 조성물을 대상으로 시료의 혼합 조성비에 따른 항산화 효과, 주름 개선, 미백 및 항염 효과를 비교 측정하였다.

<1-1> 항산화 효과 측정

상기 조성물의 항산화 효과 측정을 위해 전자공여능을 조사하였으며, 구체적으로 전자공여능(EDA:electron donating ability)은 Blois의 방법을 변형하여 측정하였다.

각 시료용액 2mL에 0.2mM의 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl(DPPH) 1mL 넣고 교반한 후 30분간 방치한 다음 517nm에서 흡광도를 측정하였다. 전자공여능은 시료용액의 첨가군과 무첨가군의 흡광도 감소율로 나타내었다.

실시예1~8 및 비교예1~3 조성물의 DPPH 라디칼 소거활성(IC₅₀ of DPPH(㎍/㎖))을 측정하여 표 2에 나타내었다.

	IC50 of DPPH(㎍/㎖)
실시예 1	98
실시예 2	81
실시예 3	64
실시예 4	52
실시예 5	51
실시예 6	50
실시예 7	50
실시예 8	50
비교예 1	133
비교예 2	128
비교예 3	109
※ IC50 값 : 50% 활성을 억제하는 농도로, 값이 낮을수록 좋음

상기 표 2에서 보듯이, 상황버섯 추출물, 감초 추출물, 알로에베라겔 및 센텔라아시아티카 추출물을 동시에 함유한 실시예1~8의 조성물은 상황버섯 추출물 및 감초 추출물을 단독으로 첨가하거나(비교예1~2), 상황버섯 및 감초 두 가지만을 포함한 조성물(비교예3)에 비해, 전체적으로 항산화 활성이 높은 것으로 나타났다.

또한, 상황버섯 추출물, 감초 추출물, 알로에베라겔 및 센텔라아시아티카 추출물을 1~5 : 1~5 : 1~10 : 1~15의 혼합비로 함유할 때, 항산화 활성 증진효과가 더욱 높은 것으로 나타났다.

<1-2> 주름 개선 효과 측정

상기 조성물의 주름 개선 효과 측정을 위해 콜라게나아제(Collagenase) 저해활성을 측정하였으며, 이는 Wunsch 등의 방법에 따라 측정하였다. 구체적으로, 반응구는 0.1M tris-HCl buffer (pH 7.5)에 4mM CaCl₂를 첨가하여, 4-phenylazobenzyloxycarbonyl-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg(0.3mg/mL)를 녹인 기질액 0.25mL 및 시료용액 0.1mL의 혼합액에 Collagenase(0.2mg/mL) 0.15mL를 첨가하여 실온에서 20분간 방치한 후 6% citric acid 0.5mL을 넣어 반응을 정지시킨 후, ethyl acetate 1.5mL을 첨가하여 320nm에서 흡광도를 측정하였다. Collagenase 저해 활성은 시료용액의 첨가군과 무첨가군의 흡광도 감소율로 나타내었다.

상기 실시예1~8 및 비교예1~3 조성물의 콜라게나아제 저해 활성을 측정하여 표 3에 나타내었다.

	IC50 of Collagenase(㎍/㎖)
실시예 1	157
실시예 2	149
실시예 3	138
실시예 4	129
실시예 5	126
실시예 6	125
실시예 7	125
실시예 8	124
비교예 1	201
비교예 2	184
비교예 3	171

상기 표 3에서 보듯이, 상황버섯 추출물, 감초 추출물, 알로에베라겔 및 센텔라아시아티카 추출물을 동시에 함유한 실시예1~8의 조성물은 상황버섯 추출물 및 감초 추출물을 단독으로 첨가하거나(비교예1~2), 상황버섯 및 감초 두 가지만을 포함한 조성물(비교예3)에 비해, 전체적으로 콜라게나아제 저해 활성이 높은 것으로 나타났으며, 이를 통해 실시예1~8의 조성물이 높은 주름 개선 효과를 나타낼 것을 기대할 수 있다.

또한, 상황버섯 추출물, 감초 추출물, 알로에베라겔 및 센텔라아시아티카 추출물을 1~5 : 1~5 : 1~10 : 1~15의 혼합비로 함유할 때, 콜라게아나제 저해 활성 증진효과가 더욱 높은 것으로 나타났다.

<1-3> 미백 효과 측정

상기 조성물의 미백 효과 측정을 위해, 티로시나아제(Tyrosinase) 저해 활성을 측정하였으며, 이는 Yagi 등의 방법에 따라 측정하였다. 구체적으로 반응구는 0.175M sodium phosphate buffer(pH 6.8) 0.5mL에 10mM L-DOPA를 녹인 기질액 0.2mL 및 시료용액 0.1mL의 혼합액에 mushroom tyrosinase(110U/mL) 0.2mL을 첨가하여 25℃에서 2분간 반응시켜 반응액 중에 생성된 DOPA chrome을 475nm에서 측정하였다. tyrosinase 저해활성은 시료용액의 첨가군과 무첨가군의 흡광도 감소율로 나타내었다.

상기 실시예1~8 및 비교예1~3 조성물의 티로시나아제 저해 활성을 측정하여 표 4에 나타내었다.

	IC50 of Tyrosinase(㎍/㎖)
실시예 1	98
실시예 2	87
실시예 3	64
실시예 4	53
실시예 5	51
실시예 6	51
실시예 7	50
실시예 8	50
비교예 1	126
비교예 2	110
비교예 3	102

상기 표 4에서 보듯이, 상황버섯 추출물, 감초 추출물, 알로에베라겔 및 센텔라아시아티카 추출물을 동시에 함유한 실시예1~8의 조성물은 상황버섯 추출물 및 감초 추출물을 단독으로 첨가하거나(비교예1~2), 상황버섯 및 감초 두 가지만을 포함한 조성물(비교예3)에 비해, 전체적으로 티로시나아제 저해 활성이 높은 것으로 나타났으며, 이를 통해 실시예1~8의 조성물이 높은 미백 효과를 나타낼 것을 기대할 수 있다.

또한, 상황버섯 추출물, 감초 추출물, 알로에베라겔 및 센텔라아시아티카 추출물을 1~5 : 1~5 : 1~10 : 1~15의 혼합비로 함유할 때, 티로시나아제 저해 활성 증진효과가 더욱 높은 것으로 나타났다.

시험예 2. 추출물 농도에 따른 효능 측정

상기 실시예1~8의 조성물 중, 항산화효과, 주름 개선, 미백 및 항염 효과에서 모두 높은 효능을 나타내는 실시예8의 조성물(이하, 'HC-6 추출물'로 기재함)을 대표적인 혼합비로 선정한 후, 추출물 농도에 따른 다양한 피부 개선 효능을 측정하였다.

<2-1> 항산화 활성 시험

<2-1-1> 전자공여능 확인 시험

HC-6 추출물의 전자공여능은 Blois의 방법을 변형하여 실시하였다. 전자공여능(EDA:electron donating ability)은 Blois의 방법을 변형하여 측정하였다. 각 시료용액 2mL에 0.2mM의 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl(DPPH) 1mL 넣고 교반한 후 30분간 방치한 다음 517nm에서 흡광도를 측정하였다. 전자공여능은 시료용액의 첨가군과 무첨가군의 흡광도 감소율로 나타내었다.

상기 HC-6 추출물에 대한 DPPH 라디칼 소거활성을 측정하여 하기 표 5에 나타내었다. 활성산소 소거능력은 추출물의 농도에 의존적으로 증가하는 것을 확인할 수 있었고 1000㎍/㎖에서 96%의 탁월한 효과를 나타내어 본 발명의 추출물이 탁월한 전자공여능을 가짐을 확인할 수 있었다.

시료	시료의농도(㎍/㎖)	DPPH 라디칼 소거효과(%)
HC-6	10	3.0±1.2
	100	86.2±0.4
	1000	96.0±0.9

<2-1-2> SOD 유사 활성 검증 시험

SOD 유사활성은 Marklund의 방법에 준하여 측정하였다. 각 시료용액 0.2mL 에 Tris-HCl 완충용액 (50mL tris+10mM EDTA, pH 8.5) 2.6mL와 7.2mM Pyrogallol 0.2mL를 가하여 반응을 정지시키고 반응액 중 산화된 Pyrogallol의 양을 420nm에서 흡광도를 측정하였다.

실험 결과 하기 표 6에 나타난 바와 같이, 혼합추출물의 농도별 SOD 유사활성은 HC-6추출물 1000㎍/㎖에서 96%의 높은 효과를 나타내어 항산화 효과가 뛰어남을 확인할 수 있었다.

시료	시료의농도(㎍/㎖)	SOD 유사활성(%)
HC-6	10	0±1.2
	100	4.5±0.2
	1000	96.0±0.2

<2-1-3> 수퍼옥사이드 음이온 라디칼(Superoxide anion radical) 소거능 측정

수퍼옥사이드 음이온 라디칼 소거능은 nitroblue tetrazolium(NBT) 환원방법에 의해 측정하였다. 각 시료용액 0.1mL와 0.1M potassium phosphate buffer(pH 7.5) 0.6mL xanthine (0.4mL)과 NBT(0.24mM)을 녹인 기질액 1mL를 첨가하고 xanthine oxidase(0.049 U/mL) 1mL를 가하여 37℃에서 20분간 반응시킨 후 1N HCl 1mL를 가하여 반응을 종료시킨 다음, 반응액 중에 생성된 superoxide anion radical의 양을 560nm에서 흡광도를 측정하였다.

실험 결과, 하기 표 7에 나타난 바와 같이, 농도가 증가할수록 효과가 높아지는 것을 확인할 수 있었으며 1000㎍/㎖에서 100%의 최대 효과를 나타내어 항산화 효과가 매우 뛰어난 것을 확인할 수 있었다.

시료	시료의 농도(㎍/㎖)	라디칼 소거효과(%)
HC-6	10	27.5±0.6
	100	81±0.4
	1000	100±0.2

<2-2> 수렴 효과 측정

상기 HC-6 추출물의 수렴 효과 실험을 위해 아스트린젠트(Astringent) 활성 을 Lee 등의 방법에 따라 측정하였다. 구체적으로 피부 단백질과 유사한 혈액 단백질(hemoglobin)을 사용하여, 원심 분리관 용기에 각각의 시료용 액과 헤모글로빈 용액을 1:1로 넣어서 진탕 혼합한 다음 1,500rpm에서 3분간 원심 분리 후 576nm에서 흡광도를 측정하였다. Astrigent 활성 측정은 시료용액의 첨가군과 무첨가군의 흡광도 감소율로 나타내었다.

실험 결과, 표 8에 나타난 바와 같이 Astrigent 수렴효과는 1000㎍/㎖에서 90%의 높은 효과를 나타내어 수렴효과가 뛰어남을 확인할 수 있었다.

시료	시료의 농도(㎍/㎖)	Astrigent 수렴효과(%)
HC-6	10	12.0±0.9
	100	32.0±0.3
	1000	90.1±0.1

<2-3> 주름 개선 효과 측정

상기 HC-6 추출물의 주름 개선 효과 실험을 위해 콜라게나아제(Collagenase) 저해 활성을 측정하였으며, 이는 Wunsch 등의 방법에 따라 실험하였다. 즉 반응구는 0.1M tris-HCl buffer (pH 7.5)에 4mM CaCl₂를 첨가하여, 4-phenylazobenzyloxycarbonyl-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg (0.3mg/mL)를 녹인 기질액 0.25mL 및 시료용액 0.1mL의 혼합액에 Collagenase (0.2mg/mL) 0.15mL를 첨가하여 실온에서 20분간 방치한 후 6% citric acid 0.5mL을 넣어 반응을 정지시킨 후, ethyl acetate 1.5mL을 첨가하여 320nm에서 흡광도를 측정하였다. 콜라게나아제 저해 활성은 시료용액의 첨가군과 무첨가군의 흡광도 감소율로 나타내었다.

실험 결과, 표 9에 나타난 바와 같이 Collagenase 주름 효과는 1000㎍/㎖에서 82%의 효과를 나타내어 피부에 주름이 생성되는 것을 어느 정도 막아주는 주름억제효과를 확인할 수 있었다.

시료	시료의 농도(㎍/㎖)	콜라게나아제 저해효과(%)
HC-6	10	0.5±0.4
	100	10.0±0.6
	1000	82.1±0.3

<2-4> 미백 효과 측정

상기 HC-6 추출물의 미백 효과 실험을 위해 티로시나아제(Tyrosinase) 저해 활성을 측정하였으며, Yagi 등의 방법에 따라 실험하였다. 반응구는 0.175M sodium phosphate buffer(pH 6.8) 0.5mL에 10mM L-DOPA를 녹인 기질액 0.2mL 및 시료용액 0.1mL의 혼합액에 mushroom tyrosinase(110U/mL) 0.2mL을 첨가하여 25℃에서 2분간 반응시켜 반응액 중에 생성된 DOPA chrome을 475nm에서 측정하였다. tyrosinase 저해활성은 시료용액의 첨가군과 무첨가군의 흡광도 감소율로 나타내었다.

실험 결과, 표 10에 나타난 바와 같이 Tyrosinase 저해 활성을 통한 미백 효과는 1000㎍/㎖에서 99.95 %의 아주 높은 효과를 나타내어 미백효과가 뛰어난 것을 확인할 수 있었다.

시료	시료의 농도(㎍/㎖)	Tyrosinase 저해효과(%)
HC-6	10	11.0±0.6
	100	83.0±0.3
	1000	99.0±0.9

<2-5> 폴리페놀 함량 측정

상기 HC-6 추출물의 총 폴리페놀 함량을 측정하였다. 폴리페놀은 피부 노화방지, 주름개선, 미백, 보습 효능을 갖는 것으로 알려져 있다.

폴리페놀 정량은 AOAC에 준하여 정량하였다. 즉, 100배 희석한 시료 용액 3mL에 Folin-Ciocalteu phenol reagent 시약 1mL를 가하고, 1N HCl 0.2mL을 넣은 후, Na₂CO₃ 포화용액 1mL를 가하여 혼합한 후 1시간 실온에서 방치하고, 640nm에서 흡광도를 측정한 후, 표준 물질인 tannic acid로 미리 작성한 표준곡선의 흡광도 값과 비교하여 폴리페놀 함량을 산출하였다.

HC-6 추출물에 대한 폴리페놀 함량을 측정하여 하기 표 11에 나타내었다. HC-6 추출물의 폴리페놀 함량은 Tannic acid의 폴리페놀 함량보다 월등히 높은 것을 이 실험을 통해 확인할 수 있었다.

시료	폴리페놀 함량(mg TEA/g)
HC-6 complex	17.14
Tannic acid	5.94

<2-6> 항암 효과 측정

상기 HC-6 추출물의 항암 효과 실험을 위해 암세포주 melanoma cell에 대한 증식억제 효과를 MTT 평가법으로 측정하였으며, 이는 Carmichael의 방법에 따라 MTT assay로 실험하였다. 구체적으로, melanoma cell을 96 well plate에 2×10³ cells/well이 되게 180㎕ 분주하고 시료를 농도별로 조제하여 20 ㎕ 첨가한 후 37℃, 5% CO₂ 배양기에서 24시간 배양하였고, 대조군은 시료와 동량의 증류수를 첨가하여 동일한 조건으로 배양하였다. 여기에 5㎍/㎖ 농도로 제조한 MTT 용액 20㎕를 첨가하여 4시간 배양한 후 배양액을 제거하고 각 웰당 DMSO:EtOH(1:1) 150㎕를 가하여 30분간 교반한 뒤 엘리사(ELISA) 판독기로 550nm에서 흡광도를 측정하여 암세포주의 성장억제효과를 측정하여 항암효과를 판정하였다. 비교 실험을 위해 시료 대신 비타민C를 농도별로 처리한 후, 동일한 방법으로 실험한 후 흡광도 값을 측정하였다. 그 결과를 도 1에 나타내었다.

세포 생존율을 확인하기 위한 MTT 검색법은 많은 시료를 간단하게 판독할 수 있어 세포 독성 및 세포증식 검색법으로서 널리 사용 되고 있는 방법 중 한 방법이다. 암세포의 경우 대사 과정에서 미토콘드리아의 탈수소 효소 작용에 의해 노란색 수용성 MTT tetrazolium을 자주색을 띠는 비수용성의 MTT formazan으로 환원시킨다. MTT formazan의 흡광도는 550nm 근처 파장에서 최대가 되면, 이는 대사적으로 왕성한 세포의 농도를 반영하는 것이다.

도 1에서 보듯이, HC-추출물은 melanoma cell의 증식을 억제하는 것으로 나타났다.

<2-7> 미백 효과 측정

상기 HC-6 추출물의 미백 효과 실험을 위해, 멜라닌 생합성 저해능을 측정하였으며, 피부 멜라노마 세포로부터의 멜라닌 생합성 저해 측정은 Hosoi의 방법에 따라 측정하였다. DMEM 배지로 배양된 melanoma cell을 100mm culture dish에 1×10⁶ cells/dish가 되게 분주하고 24시간 배양 후 시료를 농도별로 조제하여 2mL 첨가하고, 48시간 후에 PBS(pH 7.4)으로 세척하였다. 그 다음 0.25M Trypsin-EDTA 용액으로 세포를 탈착한 후 수확한 세포를 세포당 1mL의 5% TCA로 처리하고, 2,500rpm으로 2회 원심분리 한 후 분리된 melanin을 PBS로 세척한 뒤 ether:ethanol(1:3) 1mL를 가하여 2회 원심분리 한 후 ether 1mL로 세척 건조시켰다. 건조된 멜라닌에 1N NaOH를 1mL 가하여 80℃에서 1시간 반응시킨 후 분광 광도계 405nm에서 흡광도를 측정하였다. 정확한 비교를 위해, 미백 효과가 뛰어난 것으로 알려진 비타민C의 멜라닌 생합성 저해능을 함께 측정하였다. 멜라닌 생합성 저해는 시료용액의 첨가군과 무첨가군의 흡광도 감소율로 나타내었다.

HC-6 추출물의 melanoma cell(B16F10)에서의 멜라닌 생합성 저해능을 확인한 결과 도 2 및 도 3과 같이 나타났다. HC-6 추출물의 경우 1000ppm에서 80%이상의 효능 효과를 보였다.

<2-8> 항염 효과 측정

상기 HC-6 추출물의 항염 효과 실험을 위해, 면역관련 세포에서 염증관련 인자 단백질인 iNOS(inducible nitric oxide synthase) 발현 수준을 측정하였다.

실험에 앞서 먼저, HC-6 복합 추출물에 의한 Raw 264.7 세포의 독성을 확인한 결과 10ppm, 50ppm, 100ppm, 500ppm, 1000ppm 각각의 농도에서 99.5%, 98.5%, 99.2%, 78.9%, 75.9%의 세포 독성을 보였다. 고농도 시료에 의해 세포의 변성, 치사, 기능 손상을 초래할 우려가 있으므로, 세포 독성이 거의 나타나지 않는 100ppm이하의 농도로 실험에 적용하였다.

항염 효과 실험은 구체적으로, Raw 264.7 세포를 60mm tissue culture dish에 2×10⁴ cells/well 되도록 분주하고 24시간 동안 배양하였다. 이후 PBS로 2회 세척하고 serum excluded DMEM을 넣고, LPS(1㎍/㎖)로 1시간 전처리 한 후, HC-6 추출물을 농도별(0, 10, 50, 100ppm)로 처리하였다. 24시간 배양후 PBS로 2회 세척하였다. 이후, Lysis buffer 100㎕를 첨가하여 세포를 융해시키고 원심분리하여(4℃, 12000rpm, 20min) 세포막 성분들을 제거하였다. 원심분리하여 얻은 단백질은 Bradford assay로 정량하였으며, 60㎕의 단백질을 10% SDS-PAGE를 이용하여 전기 영동한 후, 항체의 비특이적 결합을 억제시키기 위해 PVDF membrance에 옮긴 다음 30~40V에서 2시간 이상 tranefer하였다. transfer가 끝나면 ponceau에 담근 후 band를 확인하고 TBST로 2회 이상 씻은 후 꺼내서 5% skim milk로 overnight시켜 Background는 제거시켰다. 3회 Washing 후 1차 antibody(1:100)(actin : mouse, iNos : rabit)를 1시간 동안 붙인 후 다시 2차 antibody(1:1000)(actin : mouse, iNos : rabit)를 붙이고 ECL kit(Amersham Pharmacia, England)를 이용하여 필름에 옮겨 측정하였다. band density는 Gel doc(Bid-rad, America)으로 확인하였다. 상기 항염 효과 실험 결과를 도 4에 나타냈으며, 그 결과, 100ppm 농도에서 iNOS 단백질 발현 수준이 50% 이하로 감소되는 것을 확인할 수 있었다.

제조예1 ~4. 피부 개선용 화장료 제조

상기 실시예1~8의 조성물 중, 항산화효과, 주름 개선, 미백 및 항염 효과에서 모두 높은 효능을 나타내는 실시예8의 조성물(이하, 'HC-6 추출물'로 기재함)을 대표적인 혼합비로 선정한 후, 화장료 제조시 이용하였다.

제조예1 . 스킨의 제조

하기 표 12의 조성으로 통상의 스킨 제조방법을 이용하여 피부 개선용 스킨을 제조하였다.

번호	성분	중량(%)
1	HC-6추출물	3.0
2	글리세린	1.0
3	카르복시비닐폴리머	0.2
4	알코올	5.0
5	티트리오일	0.02
6	페녹시에탄올	0.3
7	소폴리언스	0.2
8	파라옥시안식향산메틸	0.15
9	시트릭산	0.04
10	소듐시트레이드	0.
11	향료	0.05
12	정제수	잔량
	계	100.0

제조예2 . 로션의 제조

하기 표 13의 조성으로 통상의 로션 제조방법을 이용하여 피부 개선용 로션을 제조하였다.

번호	성분	중량(%)
1	HC-6추출물	3.0
2	글리세린	7.0
3	카르복시비닐폴리머	0.6
4	비즈왁스	1.8
5	데카글리세릴 미리스테이트	2.0
6	스쿠알란	6.0
7	메틸 폴리실옥산	2.0
8	비사보롤	0.1
9	페녹시 에탄올	0.7
10	파라옥시안식향산부틸	0.1
11	향료	0.1
12	정제수	잔량
	계	100.0

제조예3 . 세럼의 제조

하기 표 14의 조성으로 통상의 세럼 제조방법을 이용하여 피부 개선용 세럼을 제조하였다.

번호	성분	중량(%)
1	HC-6추출물	3.0
2	아미노코트	7.0
3	카르복시비닐폴리머	0.6
4	알부틴	1.8
5	에탄올	6.0
6	1,3-부틸렌글라이콜	2.0
7	트리에탄올아민	0.1
8	파라옥시안식향산메틸	0.1
9	향료	0.1
10	정제수	잔량
	계	100.0

제조예4 . 크림의 제조

하기 표 15의 조성으로 통상의 크림 제조방법을 이용하여 피부 개선용 크림을 제조하였다.

번호	성분	중량(%)
1	HC-6추출물	3.0
2	스테아릭산	0.5
3	세탄올	1.5
4	글리세린	7.0
5	솔비탄올리베이트	0.3
6	메틸폴리실옥산	0.3
7	페녹시에탄올	0.7
8	베타글루칸	3.0
9	파라옥시안식향산메틸	0.2
10	비사보롤	0.05
11	향료	0.1
12	정제수	잔량
	계	100.0

시험예 3. 인체 첩포시험

상기 제조예1~4에서 제조한 화장료의 피부 자극정도를 알아보기 위해, 피부 첩포시험을 실시하였다. 피검자는 20~50세의 시험 부위에 피부 질환이 없는 사람으로 선정하였으며 총 15명에게 실시하였다. 첩포부위인 상박부를 70% 에탄올로 닦아내고 건조시킨 후, 핀챔버(fin chamber)를 사용하여 물을 블랭크로, 제품을 0.02g씩 가하여 인체 상박부에 24시간 첩포하고, 첩포 제거 후 1시간 이내에 피부 반응을 검사하고, 다음날(48시간 후) 다시 검사하였다. 피부 반응 판정은 인체 첩포시험의 검사기준인 표 16에 의해 판정하였다.

제조예1~4에 따른 화장료의 피부 첩포시험 결과를 표 17에 나타내었다.

피부반응	점수
-	0	반응없음
±	1	미약한 양성 반응 (홍반)
+	2	양성 반응 (홍반)
++	3	강한 양성 반응 (홍반, 부종)
+++	4	심한 양성 반응 (홍반, 부종, 수포)

시험물질	24시간 후 반응 있는 피검자수(명)					48시간 후 반응 있는 피검자수(명)
	0	1	2	3	4	0	1	2	3	4
제조예1(스킨)	15	0	0	0	0	15	0	0	0	0
제조예2(로션)	15	0	0	0	0	15	0	0	0	0
제조예3(세럼)	15	0	0	0	0	15	0	0	0	0
제조예4(크림)	15	0	0	0	0	15	0	0	0	0

인체 첩포시험 검사 결과 제조예1~4의 화장료는 무자극 범위에 속하여 인체에 안전한 물질임을 확인하였다.

Claims (10)

1. 상황버섯 추출물, 감초 추출물, 알로에베라겔 및 센텔라아시아티카(Centella asiatica) 추출물을 포함하고, 상기 상황버섯 추출물, 감초 추출물, 알로에베라겔 및 센텔라아시아티카 추출물은 1~5 : 1~5 : 1~10 : 1~15의 혼합비로 함유되는, 노화 방지, 피부 미백 또는 주름 개선을 위한 피부 개선용 화장료 조성물.
   
2. 삭제
3. 제1항에 있어서,
   상기 상황버섯 추출물, 감초 추출물, 알로에베라겔 및 센텔라아시아티카 추출물은 1~3 : 1~3 : 1~6 : 1~10의 혼합비로 함유되는 것을 특징으로 하는, 피부 개선용 화장료 조성물.
   
4. 제1항에 있어서,
   상기 조성물은 상황버섯 추출물, 감초 추출물, 알로에베라겔 및 센텔라아시아티카 추출물의 복합 추출물을 0.01 내지 30중량%로 함유하는 것을 특징으로 하는, 피부 개선용 화장료 조성물.
   
5. 제1항에 있어서,
   상기 상황버섯 추출물, 감초 추출물, 및 센텔라아시아티카 추출물은 물, 탄소수 1-4개의 저급 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 에테르, 클로로포름 및 1,3 부틸렌 글리콜로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 용매를 사용하여 추출된 것임을 특징으로 하는, 피부 개선용 화장료 조성물.
   
6. 제1항에 있어서,
   상기 조성물은 항산화 활성을 갖는 것을 특징으로 하는, 피부 개선용 화장료 조성물.
   
7. 삭제
8. 제1항에 있어서,
   상기 조성물은 멜라닌 생합성 저해 활성 및 콜라게나아제(collagenase) 저해 활성을 갖는 것을 특징으로 하는, 피부 개선용 화장료 조성물.
   
9. 제1항에 있어서,
   상기 조성물은 녹차 추출물, 복분자 추출물 및 상백피 추출물 중 어느 하나 이상을 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는, 피부 개선용 화장료 조성물.
   
10. 제1항에 있어서,
    상기 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 것을 특징으로 하는, 피부 개선용 화장료 조성물.
    

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