KR101202302B1 - 봉독을 함유하는 치주질환, 충치 예방 및 치료용 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 봉독을 유효성분으로 함유하는 치주질환 및 충치 예방 및 치료용 조성물에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 충치 유발균, 잇몸 염증 유발균 및 치주질환 유발균에 대한 항균 활성을 가지며, 구강 내 염증을 억제하는 봉독을 유효성분으로 포함하는 치주질환 및 충치 예방 및 치료용 조성물에 관한 것이다.
Description
본 발명은 봉독을 유효성분으로 함유하는 치주질환 및 충치 예방 및 치료용 조성물에 관한 것이다.
치주질환과 충치의 발생원인은 다양하나, 구강 내 상주하는 세균의 발효작용에 의하여 치아에 부착된 당분이나 전분 등의 탄수화물이 분해되어 생성되는 젖산이 치아 경조직의 석회를 탈각시켜 충치를 일으키는 것으로 알려져 있다. 또한 치주질환은 임상적으로 치은염증과 출혈, 치주낭의 형성 및 치조골의 파괴 등을 인하여 치아의 상실을 가져오는 것을 말한다. 이러한 치주질환은 세균의 집락형성 및 세균의 치주조직 침투, 치주조직의 파괴로 이루어지는 일련의 과정으로 진행되는데, 먼저 구강 내 타액중의 타액 단백질이 상아질과 백악질 표면에 흡착되면서 피막을 형성하고, 이러한 피막표면에 세균이 성장하면서 프라그를 형성하고 시간이 경과함에 따라 이러한 프라그가 치근단 방향으로 이동함과 동시에 혐기성 세균이 성장하여 이러한 세균, 세균성분, 세균산물들이 치은열구상피를 통하여 치은결합조직내고 침투하여 치주낭이 형성된다. 이러한 세균의 대사결과 치주조직에 유독한 황화수소, 암모니아, 아민과 같은 세포의 독소를 분비함과 동시에 세포벽 구성분이 리포폴리사카라이드(lipopolysaccharide)와 같은 내독소에 의하여 직접 조직이 파괴되거나, 동시에 생체 면역계를 자극하여 자극된 체액성 및 세포성 면역계의 여러 작용에 의하여 세포외부로 분비된 활성산소, 인터루킨과 같은 여러종류의 사이토카인 등에 의하여 잇몸 염증이 유발되고, 세균 및 백혈구로부터 분비된 콜라게나제와 같은 효소에 의하여 치주조직의 기질인 콜라겐이 분해되어 잇몸 퇴축이 일어나고 게속 방치하게 되면 치주질환으로 진행된다. 이러한 치주질환의 발생을 예방하기 위한 노력으로 치주질환균을 단시간 노출시켜 사멸시킬 수 있는 다양한 항균제와 소염제가 개발되어 치약, 연고와 같은 구강제품에 적용되어 왔으나, 아직까지도 치주질환의 발생은 근본적으로 예방하지 못하고 있는 실정이다.
또 다른 방법으로 유기 또는 무기 불소에 의한 병원성 세균의 억제 방법 등을 고려할 수 있으나, 장시간 사용시 내성을 갖게 되고, 설사, 구토 등의 부작용을 유발 할 수 있는 단점이 있을 뿐만 아니라 구간 내에 상재하는 균들의 생육이 저해되는 문제점이 있다.
따라서 합성 화합물보다는 치주병인균에 대해 선택적으로 항균작용이 있을 뿐 아니라 손상된 치주의 조기 재생능이 우수한 새로운 의약품의 개발이 필요하다.
국내산 꿀벌(Apis mellifera)의 봉독은 전기충격법을 이용한 봉독 채집장치를 이용하여 꿀벌의 피해 없이 순수한 봉독만을 다량으로 채취하여, 이물질을 제거한 후 동결 건조하여 정제 봉독을 얻을 수 있다. 이렇게 얻어진 봉독은 다양한 성분이 복합적으로 구성되어 있으나, 치주질환, 충치 등에 대한 봉독의 효과에 대해서는 아직 연구 보고된 바가 없다.
이에, 본 발명자들은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위하여 연구 노력한 결과, 봉독이 충치 유발균, 잇몸 염증 유발균 및 치주질환 유발균에 대한 항균 활성을 가지며, 구강 내 염증을 억제할 수 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하게 되었다.
따라서, 본 발명은 봉독을 유효성분으로 함유하는 치주질환과 충치의 예방 및 치료용 조성물, 구강 세정용 조성물 및 기능성 식품을 제공하는데 그 목적이 있다.
본 발명은 봉독을 유효성분으로 함유하는 치주질환, 충치 예방 및 치료용 조성물 조성물을 그 특징으로 한다.
또한, 본 발명은 봉독을 유효성분으로 함유하는 구강 세정용 조성물 및 기능성 식품도 권리범위로 포함한다.
본 발명에 따른 봉독을 함유한 치주질환, 충치의 예방, 치료 효과를 갖는 봉독을 함유한 구강 세정제, 치약, 기능성 식품 등으로 개발하여 국민의 삶의 질을 향상시킬 수 있으리라 생각되며, 국내산 봉독의 고부가가치 용도 개발로 인한 양봉농가의 소득증대에 기여할 것이다.
도 1은 활성화된 치주인대섬유모세포에 대한 봉독의 세포독성을 나타낸 것이다.
도 2a는 활성화된 치주인대섬유모세포에서의 봉독 처리 후 IL-6 생성 억제 효과를 나타낸 것이다.
도 2b는 활성화된 치주인대섬유모세포에서의 봉독 처리 후 IL-8 생성 억제 효과를 나타낸 것이다.
도 2c는 활성화된 치주인대섬유모세포에서의 봉독 처리 후 COX-2 단백질 발현 억제를 나타낸 것이다.
도 3a는 활성화된 치주인대섬유모세포에서의 봉독 처리 후 RT-PCR을 수행하여 IL-6 생성 억제를 확인한 것이다.
도 3b는 활성화된 치주인대섬유모세포에서의 봉독 처리 후 RT-PCR을 수행하여 IL-8 생성 억제를 확인한 것이다.
도 3c는 활성화된 치주인대섬유모세포에서의 봉독 처리 후 RT-PCR을 수행하여 COX-2 단백질 발현 억제를 확인한 것이다.
도 2a는 활성화된 치주인대섬유모세포에서의 봉독 처리 후 IL-6 생성 억제 효과를 나타낸 것이다.
도 2b는 활성화된 치주인대섬유모세포에서의 봉독 처리 후 IL-8 생성 억제 효과를 나타낸 것이다.
도 2c는 활성화된 치주인대섬유모세포에서의 봉독 처리 후 COX-2 단백질 발현 억제를 나타낸 것이다.
도 3a는 활성화된 치주인대섬유모세포에서의 봉독 처리 후 RT-PCR을 수행하여 IL-6 생성 억제를 확인한 것이다.
도 3b는 활성화된 치주인대섬유모세포에서의 봉독 처리 후 RT-PCR을 수행하여 IL-8 생성 억제를 확인한 것이다.
도 3c는 활성화된 치주인대섬유모세포에서의 봉독 처리 후 RT-PCR을 수행하여 COX-2 단백질 발현 억제를 확인한 것이다.
이와 같은 본 발명을 더욱 상세히 설명하면 다음과 같다.
본 발명은 봉독을 유효성분으로 함유하여, 충치 유발균, 잇몸 염증 유발균, 치주질환 유발균 및 구강 내 혐기성 세균 등에 대한 억제 효과를 가지고, 염증 관련 사이토카인의 생성을 억제하며, COX-2를 억제할 수 있어 치주질환, 충치의 예방, 치료에 효과적인 조성물에 관한 것이다.
본 발명에서 봉독은 충치 유발균인 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans), 잇몸 염증 유발균인 스트렙토코커스 상귀스(Streptococcus sanguis), 치주질환 유발균인 포르피로모나스 진지발리스(Porphyromonas Gingivalis) 및 구강내 혐기성 세균인 푸소박테륨 누클레아툼(Fusobacterium nucleatum)에 대한 억제 활성을 나타낸다.
또한 상기 봉독은 염증 관련 사이토카인인 IL-6과 IL-8의 생성을 억제하며, 프로스타글란딘 E2(PGE2)의 생성에 관여하는 COX-2를 억제할 수 있다.
따라서, 봉독은 치주질환과 충치의 예방 및 치료용 조성물뿐만 아니라, 구강 세정용 조성물이나 치약에 적용될 수 있으며, 뿐만 아니라 검, 캔디, 젤리, 초콜릿, 음료, 차 등의 다양한 기능성 식품으로 개발될 수 있다.
본 발명에 따른 봉독 함유 조성물에서 봉독의 함량은 정제봉독 기준으로 0.0001 ~ 10 %(w/v)을 함유하는 것이 바람직하며, 더욱 바람직하기로는 0.01 ~ 1 %(w/v)를 함유하는 것이 적합하다. 만일 0.0001 %(w/v) 미만으로 사용하게 되면 항균 및 항염 효과가 낮아 효능이 반감될 수 있고, 10 %(w/v) 초과를 사용할 경우엔 세포 독성을 초래할 수 있다.
본 발명에 따른 조성물은 유효성분 외에 약제학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 포함할 수 있다.
본 발명의 조성물은 경구 또는 비경구의 여러 가지 제형일 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구 투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 하나 이상의 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한, 단순한 부형제 이외에 스테아린산 마그네슘, 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용된다. 경구 투여를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
본 발명의 조성물은 경구 또는 비경구로 투여될 수 있으며, 비경구 투여 시 드레싱제, 패취제, 밴드, 연고제 등의 피부외용제 또는 주사제로 가능하다.
본 발명의 조성물의 투여량은 환자의 체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설율 및 질환의 중증도에 따라 그 범위가 다양하며, 일일 투여량은 젤라티 효소분해물의 양을 기준으로 0.1 내지 100 mg/kg이고, 바람직하게는 30 내지 80 mg/kg이고, 더욱 바람직하게는 50 내지 60 mg/kg이며, 하루 1 ~ 6 회 투여될 수 있다.
그리고 본 발명의 조성물은 기존의 치주질환, 충치 치료제와 병용하여 사용하는 것도 가능하다.
또한, 본 발명은 봉독을 유효성분으로 함유하는 구강 세정용 조성물을 포함한다. 상기 구강 세정용 조성물은 치주질환의 예방 또는 치료를 위하여, 치약, 구강양치용액, 연고제, 분무제, 드레싱용액, 도포제, 치실 또는 치주포대 등으로 제형화될 수 있다. 상기 구강 세정용 조성물은 제형화하기 위하여 제형에 따라 또는 목적하는 효과에 따라 적당한 성분을 사용해야 하며, 추가로 연마제, 습윤제, 기포제, 가용화제, 결합제, 감미제, pH 조절제, 방부제, 충치예방제, 약효성분, 향료, 증백제, 색소, 수렴제 및 용제 등을 함유할 수 있다. 연마제로는 탄산칼슘, 침강 실리카, 수산화알루미늄, 인산일수소칼슘, 불용성 메타인산나트륨 등이 있으며, 이들 연마제를 단독 혹은 2종 이상 혼합하여 1 ~ 60 중량%, 바람직하게는 10 ~ 50 중량%를 사용한다. 습윤제로서는 글리세린, 소르비톨액, 폴리에틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 등을 단독 혹은 2종 이상 혼합하여 10 ~ 60 중량%, 바람직하게는 20 ~ 50 중량%를 사용한다. 기포제로는 라우릴황산나트륨, 소디움라우릴사르코시네이트, 자당지방산에스테르, 폴리옥시에틸렌경화피마자유, 폴리옥시에틸렌폴리옥시프로필렌 공중합체 등의 음이온 및 비이온 계면활성제를 단독 혹은 2종 이상 혼합하여 0.5 ~ 5 중량%, 바람직하게는 0.5 ~ 3 중량%를 사용한다. 결합제로서는 카르복시메틸셀룰로오스 나트륨, 히드록시메틸셀룰로오스, 카라기난, 잔탄껌, 알긴산 나트륨등을 단독 혹은 2종 이상 혼합하여 0.1 ~ 5 중량%, 바람직하게는 0.1 ~ 2 중량%를 사용한다. 감미제로는 삭카린 나트륨, 아스파탐, 스테비오사이드, 자이리톨, 감초산 등을 단독 혹은 2종 이상 혼합하여 0.05 ~ 5 중량%를 사용하는 것이 좋다. pH 조절제로는 인산나트륨, 인산이나트륨, 인산삼나트륨, 피로인산나트륨, 구연산, 구연산나트륨, 주석산 등이 있고, 방부제로는 파라옥시안식향산메틸, 파라옥시안식향산프로필, 안식향산나트륨을 단독 혹은 2종 이상 혼합하여 사용한다. 약효성분으로는 불화나트륨, 일불소인산나트륨, 불화주석, 클로로헥시딘, 알란토인클로로히드록시알루미네이트, 아미노카프론산, 트라넥사민산, 트리클로산, 염화세틸피리디움, 염화아연, 염산피리독신, 초산토코페롤 등을 단독 혹은 2종 이상 혼합하여 사용하고, 향료로는 페퍼민트오일, 스피아민트오일, 멘톨, 아네톨 등을 적당량 혼합 사용하며, 증백제로는 산화티탄을, 색소로는 식용색소를, 용제로는 정제수, 에탄올을 배합한다.
또한 본 발명은 봉독을 유효성분으로 함유하는 치주질환과 충치의 예방 및 개선용 기능성 식품을 포함한다.
본 발명에 따른 기능성 식품은, 예를 들어, 츄잉껌, 캐러멜 제품, 캔디류, 빙과류, 과자류 등의 각종 식품류, 청량음료, 미네랄워터, 알코올음료 등의 음료 제품, 비타민이나 미네랄 등을 포함한 건강기능성 식품류일 수 있다.
본 발명의 봉독을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 사용 목적(예방, 건강 또는 위생)에 따라 적합하게 결정될 수 있다.
본 발명의 기능성 식품은 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 수크로스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 건강식품 100 중량부당 0.01 ~ 0.04 중량부, 바람직하게는 약 0.02 ~ 0.03 중량부 범위에서 선택하는 것이 바람직하다.
상기 외에 본 발명의 기능성 식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 기능성 식품은 천연 과일주스, 과일주스음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다.
이하, 본 발명은 다음 실시예에 의거하여 구체적으로 설명하겠는 바, 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니다.
실시예 1 : 봉독의 유효성분의 분리
서양종꿀벌(Apis meliffera L.)을 봉독채집 장치를 이용하여 봉독을 채집하고, 채집한 건조봉독을 증류수로 용해, 원심분리, 여과한 후 동결 건조하여 순수한 봉독만을 얻어 실험에 사용하였다.
실시예 2 : 봉독의 충치 유발균 및 잇몸 염증 유발균에 대한 항균활성 측정
충치 유발균으로 알려진 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans, ATCC 27175), 잇몸 염증 유발균인 스트렙토코커스 상귀스(Streptococcus sanguis, ATCC 10556)에 대한 항균 효과를 측정하기 위하여, 액체배지 희석법에 의한 최소 성장억제농도(Minimun Inhibitory Concentration, MIC)를 확인하여 측정하였다.
건조 봉독은 멸균 증류수로 희석한 후 무균 여과하여 액체배지 희석법에 준하여 단계적으로 희석하였다. 스트렙토코커스 뮤탄스는 BHI 브로쓰(Brain heart infusion broth)배지에서, 스트렙토코커스 상귀스는 트립티카제 소이 브로쓰(Trypticase soy broth, 5% sheep blood 첨가)하여 각각 37℃에서 18시간 동한 호기 조건으로 배양한 후 시험에 사용하였다. 각각의 접종 균은 2 × 106 CFU/well이 되도록 조절하고, 상기 희석한 봉독 시료와 함께 18시간 동안 배양한 후, 육안 및 현미경으로 균의 성장을 관찰하였고, 봉독의 희석 농도에 따라, 흡수파장 540nm 에서 흡광도를 측정하여 순수배양액의 흡광도 값과 같은 결과를 얻은 것을 최소억제농도로 결정하였다. 그 결과를 하기 표 1에 나타내었다.
균주 | 최소성장억제농도 (㎍/㎖) |
S. mutans | 0.68 ± 0.029 |
S. sanguis | 0.85 ± 0.042 |
상기 표 1에서 보는 바와 같이, 봉독은 상기 균주에 대하여 우수한 항균 활성을 가지는 것을 확인할 수 있었다.
실시예 3 : 봉독의 치주질환 유발균 및 구강내 혐기성 세균에 대한 항균활성 측정
치주질환 유발균으로 알려진 포르피로모나스 진지발리스(Porphyromonas gingivalis, ATCC 33277) 및 구취를 일으키는 구강내 혐기성 세균인 푸소박테륨 누클레아툼(Fusobacterium nucleatum, ATCC 25286)에 대한 항균 효과를 측정하기 위하여, 액체배지 희석법에 의한 최소 성장억제농도(Minimun Inhibitory Concentration, MIC)를 확인하여 측정하였다.
포르피로모나스 진지발리스와 푸소박테륨 누클레아툼은 초프드 미트 배지(Chopped meat medium)를 이용하여 37℃에서 24시간 동안 CO2 배양기에서 배양하였다. 각각의 접종 균은 2 × 106 CFU/well이 되도록 조절하여 상기 희석한 봉독 시료와 함께 24시간 동안 배양한 후, 육안 및 현미경으로 균의 성장을 관찰하였고, 봉독의 희석 농도에 따라, 흡수파장 540nm에서 흡광도를 측정하여 순수 배양액의 흡광도 값과 같은 결과를 얻은 것을 최소억제농도로 결정하였다. 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.
균주 | 최소성장억제농도 (㎍/㎖) |
P. gingivalis | 3.49 ± 0.13 |
F. nucleatum | 2.79 ± 0.28 |
상기 표 2에서 보는 바와 같이, 봉독은 상기 균주에 대하여도 우수한 항균 활성을 가지는 것을 확인할 수 있었다.
실시예 4 : 봉독의 항균력 지속 시간 측정
상기 실험된 균주에 대한 봉독의 살균력 지속시간(PAE, postantibiotic effect)을 Pankuch와 Appelbaum(2006)의 방법으로 측정하였다. 상기 실시예 2와 3의 균주를 2.5 × 105 CFU/㎖ 로 조절하고, 상기 측정된 최소억제농도의 2배 농도의 봉독 시료와 함께 1시간 동안 배양한 후, 원심분리와 배지 희석법을 사용하여 봉독을 제거하였다. 이후 새로운 배지로 교환하여 37℃ 배양기에서 배양하며 2시간 간격으로 균수를 측정한다. PAE 수치가 클수록 항균 지속 효과가 우수하다고 할 수 있다. PAE를 구하는 식은 하기 수학식 1에 나타내었으며, 상기 측정 결과를 하기 표 3에 나타내었다.
[수학식 1]
PAE = T - C
T : 봉독을 처리한 시험구에서 1log10까지의 생육에 걸리는 시간
C: 무처리구에서 1log10까지의 생육에 걸리는 시간
균주 | PAE(hour) |
S. mutans | 3.30 |
S. sanguis | 3.45 |
P. gingivalis | 2.0 |
F. nucleatum | 2.0 |
상기 표 3에서 보는 바와 같이, 봉독은 상기 균주에 대하여 우수한 항균 지속 활성을 가지는 것을 확인할 수 있었다.
실시예 5 : 치주인대섬유모세포의 IL-6, IL-8 및 COX-2 발현 측정
봉독의 치주질환 유발물질인 IL-6과 IL-8의 발현과 PGE2 생성을 매개하는 COX-2의 발현을 억제할 수 있는지 여부를 확인하기 위하여 일차 배양한 치주인대섬유모세포에 LPS(Lipopolysaccharide)를 처리하여 염증을 유발하였다. 치주인대섬유모세포는 10% FBS가 함유된 DMEM 배지를 사용하여 37℃, 5% CO2 배양기에서 계대배양하여 실험에 사용하였다. 배양세포가 바닥 면적의 90% 가량 차도록 자라면 계대배양을 하고 대수 성장기의 세포를 실험에 사용하였다. 치주인대섬유모세포를 24 웰 플레이트에 5 × 105 cell/ml로 하여 분주하고, LPS(1 ㎍/ml)를 처리한 뒤, 상기 실시예 1의 봉독을 0.01, 0.1, 1, 5 및 10 ㎍/㎖ 의 농도로 희석하여 처리하였다. 37℃, 5% CO2 배양기에서 48시간 배양한 후 세포 생존율을 MTT(methylthiazol-2-yl-2.5-diphenyl tetrazolium bromide) 시약으로 처리하여 ELISA reader로 540 nm에서 흡광도를 측정하여 봉독의 치주인대섬유모세포 독성을 평가하였고, 그 결과를 도 1에 나타내었다. 봉독을 10 ㎍/㎖ 이내로 처리했을 경우에는 치주인대섬유모세포에 독성을 나타내지 아니함을 확인할 수 있었다.
LPS와 봉독을 처리한 세포 현탁액으로부터 IL-6, IL-8과 COX-2의 발현을 ELISA kit를 사용하여 측정하였으며, 그 결과를 도 2에 나타내었다. 상기 도 2에서 보는 바와 같이 봉독이 치주인대섬유모세포의 IL-6, IL-8 및 COX-2의 발현을 크게 억제할 수 있음을 확인하였다.
실시예 6 : RNA 수준에서의 치주인대섬유모세포의 IL-6, IL-8 및 COX-2 발현 측정
세포배양 100㎜ 디쉬에 일차 배양 치주인대섬유모세포를 5 × 105 cell/ml로 하여 분주하고, LPS(1 ㎍/ml)와 봉독(100 ng/ml)을 처리한 후, 37℃, 5% CO2 배양기에서 48시간 배양하였다. 배양된 치주인대섬유모세포로부터 RNA를 추출하고 하기 표 4의 프라이머를 사용하여 RT-PCR을 수행하였으며, 그 결과를 도 3에 나타내었다.
Forward primer | Reverse primer | |
IL-6 | 5'-ATGAACTCCTTCTCCACAAGCGC-3' (서열번호 1) |
5'-GAAGAGCCCTCAGGCTGGACTG-3' (서열번호 2) |
IL-8 | 5'-ATGACTTCCAAGCTGGCCGTGGCT-3' (서열번호 3) |
5'-TCTCAGCCCRCRRCAAAAACTTCTC-3' (서열번호 4) |
COX-2 | 5'-TTCAAATGAGATTGTGGGAAAATTG-3' (서열번호 5) |
5'-AGATCATCTCTGCCTGAGTATCTT-3' (서열번호 6) |
상기 도 3에서 확인한 바와 같이, 상기 프라이머를 사용한 RT-PCR에 의하여 RNA 수준에서 치주인대섬유모세포의 IL-6, IL-8 및 COX-2의 발현을 크게 억제할 수 있음을 확인하였다.
제제예 1 : 치약의 제조
하기 표 5의 a에 속하는 성분들을 70℃의 온도로 제조부에 투입한 후 20분간 교반하여 분체를 완전히 용해한 뒤 상온으로 냉각하였다. 이어서 습윤제, 감미제 및 약효성분의 용해 공정으로서, b에 속하는 성분들을 25℃로 제조부에 투입한 후 15분간 교반 혼합하여 용해하였다. 다음은 c에 속하는 성분들을 25내지 35℃에서 혼합하여 단계적으로 투입하였다. 다음 공정은 기포제 혼합 및 1차 탈로 공정으로서, d에 속하는 성분을 첨가하여 35℃에서 40분 동안에 1차 탈포를 완료하고, 마지막으로 e에 속하는 성분을 첨가하고 35℃에서 2차 탈포하여 치약을 체조하였다.
성분명 | 함량(g) | 비고 |
정제수 | 적량 | a |
디소르비톨액 | 33.00 | |
프로필렌글리콜 | 5.10 | |
농글리세핀 | 8.25 | |
팀강탄산칼슘 | 30.00 | b |
아미노산카프론산 | 0.01 | |
인산일수소칼슘 | 0.01 | |
이산화규소 | 18.84 | |
안식향산나트륨 | 0.18 | |
녹차추출물 | 0.01 | |
삭카린나트륨 | 0.01 | |
자일리톨 | 0.01 | |
키토산 | 0.01 | |
프로폴리스추출물 | 0.01 | |
알로에추출물 | 0.01 | |
봉독 | 0.01 | |
폴리에칠렌글리콜 1500 | 0.48 | c |
카르복시메칠셀룰로오스나트륨 | 0.72 | |
라우릴팡산나트륨 | 2.44 | d |
DL-멘톨 | 적량 | |
페파민트 | 적량 | e |
제제예
2 : 기능성 식품의 제조
<음료의 제조>
봉독 100 ㎎
구연산 1000 ㎎
올리고당 100 g
매실농축액 2 g
타우린 1 g
정제수를 가하여 전체 900 ㎖
통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간 동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2 ℓ용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 음료 조성물 제조에 사용한다.
상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 수요계층, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.
서열목록 전자파일 첨부
Claims (5)
- 정제봉독을 유효성분으로 0.01~1%(w/v)를 함유하는 것을 특징으로 하는 치주질환 유발균인 포르피로모나스 진지빌리스로부터 유발된 치주질환 치료용 조성물.
- 삭제
- 정제봉독을 유효성분으로 0.01~1%(w/v)를 함유하는 것을 특징으로 하는 구강내 혐기성세균인 푸소박테륨 누클레아툼에 대한 항균활성을 갖는 구강세정용 조성물.
- 정제봉독을 유효성분으로 0.01~1%(w/v)를 함유하는 것을 특징으로 하는 잇몸염증 유발균인 스트렙토코커스 상귀스로부터 유발된 잇몸염증 치료용 조성물.
- 삭제
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WO2016182157A1 (ko) * | 2015-05-12 | 2016-11-17 | 대한민국(환경부 국립생물자원관장) | 쇠채아재비 추출물을 유효성분으로 함유하는 치주질환 예방 또는 치료용 조성물 |
KR20220105707A (ko) | 2021-01-20 | 2022-07-28 | (주)제노랩 | 인삼, 홍삼, 고삼, 감초 및 황련 추출물을 유효성분으로 포함하는 치주질환 예방 또는 치료용 조성물 |
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KR102575768B1 (ko) * | 2020-11-30 | 2023-09-07 | 대한민국 | 구강 질환 예방 또는 개선용 천연 가식성 항균 필름 조성물 및 이의 용도 |
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KR100483496B1 (ko) | 2001-09-26 | 2005-04-19 | 마응천 | 봉독 수용성분을 함유하는 소염 및 진통용 조성물 |
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