KR101173169B1 - 직접 치환 방법을 통하여 구리 이온을 감지하는 아연 이핵체 화합물과 그의 제조방법 - Google Patents
직접 치환 방법을 통하여 구리 이온을 감지하는 아연 이핵체 화합물과 그의 제조방법 Download PDFInfo
- Publication number
- KR101173169B1 KR101173169B1 KR1020100043143A KR20100043143A KR101173169B1 KR 101173169 B1 KR101173169 B1 KR 101173169B1 KR 1020100043143 A KR1020100043143 A KR 1020100043143A KR 20100043143 A KR20100043143 A KR 20100043143A KR 101173169 B1 KR101173169 B1 KR 101173169B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- compound
- aqueous solution
- mmol
- copper ions
- ions
- Prior art date
Links
- 229910001431 copper ion Inorganic materials 0.000 title claims abstract description 73
- JPVYNHNXODAKFH-UHFFFAOYSA-N Cu2+ Chemical compound [Cu+2] JPVYNHNXODAKFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 71
- 238000000034 method Methods 0.000 title abstract description 20
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title description 10
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 title 1
- 150000003751 zinc Chemical class 0.000 title 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract description 32
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 21
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims abstract description 6
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 5
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 63
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 37
- 239000013078 crystal Substances 0.000 claims description 18
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 15
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 12
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 8
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000002441 X-ray diffraction Methods 0.000 claims description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 5
- BVHLGVCQOALMSV-JEDNCBNOSA-N L-lysine hydrochloride Chemical compound Cl.NCCCC[C@H](N)C(O)=O BVHLGVCQOALMSV-JEDNCBNOSA-N 0.000 claims description 4
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 claims description 4
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 3
- 229960001860 salicylate Drugs 0.000 claims description 3
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-M salicylate Chemical compound OC1=CC=CC=C1C([O-])=O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 claims description 2
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 claims description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims 2
- BVHLGVCQOALMSV-NUBCRITNSA-N D-lysine hydrochloride Chemical compound Cl.NCCCC[C@@H](N)C(O)=O BVHLGVCQOALMSV-NUBCRITNSA-N 0.000 claims 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 claims 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims 1
- 239000000047 product Substances 0.000 claims 1
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 abstract description 40
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 abstract description 36
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 abstract description 28
- 239000011701 zinc Substances 0.000 abstract description 23
- 239000003446 ligand Substances 0.000 abstract description 18
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 abstract description 13
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 abstract description 13
- 239000002262 Schiff base Substances 0.000 abstract description 12
- -1 lysine Schiff base Chemical class 0.000 abstract description 12
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 abstract description 12
- 239000002184 metal Substances 0.000 abstract description 12
- 150000003752 zinc compounds Chemical class 0.000 abstract description 12
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 abstract description 10
- 150000004753 Schiff bases Chemical class 0.000 abstract description 9
- 239000010949 copper Substances 0.000 abstract description 9
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 abstract description 8
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 7
- 229940126214 compound 3 Drugs 0.000 abstract description 7
- 230000008569 process Effects 0.000 abstract description 7
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 6
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 abstract description 6
- KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N D-lysine Chemical compound NCCCC[C@@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N 0.000 abstract description 5
- 235000019766 L-Lysine Nutrition 0.000 abstract description 5
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 abstract description 5
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 4
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 abstract description 4
- 230000008275 binding mechanism Effects 0.000 abstract description 3
- 238000012306 spectroscopic technique Methods 0.000 abstract description 2
- WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-N Caprylic acid Natural products CCCCCCCC(O)=O WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 abstract 1
- FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N n-hexanoic acid Natural products CCCCCC(O)=O FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 abstract 1
- 238000004467 single crystal X-ray diffraction Methods 0.000 abstract 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 17
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 description 15
- 230000008859 change Effects 0.000 description 15
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 13
- PTFCDOFLOPIGGS-UHFFFAOYSA-N Zinc dication Chemical compound [Zn+2] PTFCDOFLOPIGGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000000295 emission spectrum Methods 0.000 description 10
- 150000002500 ions Chemical group 0.000 description 10
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 8
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 7
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N iron Substances [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 6
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 6
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 6
- 238000001142 circular dichroism spectrum Methods 0.000 description 5
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 4
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 4
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N nickel Substances [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- AICOOMRHRUFYCM-ZRRPKQBOSA-N oxazine, 1 Chemical compound C([C@@H]1[C@H](C(C[C@]2(C)[C@@H]([C@H](C)N(C)C)[C@H](O)C[C@]21C)=O)CC1=CC2)C[C@H]1[C@@]1(C)[C@H]2N=C(C(C)C)OC1 AICOOMRHRUFYCM-ZRRPKQBOSA-N 0.000 description 4
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 4
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 229910020366 ClO 4 Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 125000000879 imine group Chemical group 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical group CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005033 Fourier transform infrared spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 2
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 2
- 238000000119 electrospray ionisation mass spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 2
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- 150000002466 imines Chemical class 0.000 description 2
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000031700 light absorption Effects 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- OKKJLVBELUTLKV-VMNATFBRSA-N methanol-d1 Chemical compound [2H]OC OKKJLVBELUTLKV-VMNATFBRSA-N 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 2
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 2
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 description 2
- 238000006862 quantum yield reaction Methods 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N salicylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- SXAMGRAIZSSWIH-UHFFFAOYSA-N 2-[3-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]-1,2,4-oxadiazol-5-yl]-1-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)ethanone Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)C1=NOC(=N1)CC(=O)N1CC2=C(CC1)NN=N2 SXAMGRAIZSSWIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BWGRDBSNKQABCB-UHFFFAOYSA-N 4,4-difluoro-N-[3-[3-(3-methyl-5-propan-2-yl-1,2,4-triazol-4-yl)-8-azabicyclo[3.2.1]octan-8-yl]-1-thiophen-2-ylpropyl]cyclohexane-1-carboxamide Chemical compound CC(C)C1=NN=C(C)N1C1CC2CCC(C1)N2CCC(NC(=O)C1CCC(F)(F)CC1)C1=CC=CS1 BWGRDBSNKQABCB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 208000002972 Hepatolenticular Degeneration Diseases 0.000 description 1
- 108091006671 Ion Transporter Proteins 0.000 description 1
- 102000037862 Ion Transporter Human genes 0.000 description 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 1
- VEQPNABPJHWNSG-UHFFFAOYSA-N Nickel(2+) Chemical compound [Ni+2] VEQPNABPJHWNSG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000029797 Prion Human genes 0.000 description 1
- 108091000054 Prion Proteins 0.000 description 1
- 208000018839 Wilson disease Diseases 0.000 description 1
- 229910007541 Zn O Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 150000007942 carboxylates Chemical class 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 229910001429 cobalt ion Inorganic materials 0.000 description 1
- XLJKHNWPARRRJB-UHFFFAOYSA-N cobalt(2+) Chemical compound [Co+2] XLJKHNWPARRRJB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000002050 diffraction method Methods 0.000 description 1
- 229910001385 heavy metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N mercury Chemical compound [Hg] QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052753 mercury Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 229910001453 nickel ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 1
- 239000012038 nucleophile Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N papa-hydroxy-benzoic acid Natural products OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- ZVJXTEDWOZFOQQ-UHFFFAOYSA-N phenol;hydrate Chemical group O.OC1=CC=CC=C1.OC1=CC=CC=C1 ZVJXTEDWOZFOQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-M phenolate Chemical compound [O-]C1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940031826 phenolate Drugs 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 230000010287 polarization Effects 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 229960004889 salicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- WPLOVIFNBMNBPD-ATHMIXSHSA-N subtilin Chemical compound CC1SCC(NC2=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C(C)CC)C(=O)NC(=C)C(=O)NC(CCCCN)C(O)=O)CSC(C)C2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C1NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C1NC(=O)C(=C/C)/NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)CNC(=O)C(NC(=O)C(NC(=O)C2NC(=O)CNC(=O)C3CCCN3C(=O)C(NC(=O)C3NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(=C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(N)CC=4C5=CC=CC=C5NC=4)CSC3)C(C)SC2)C(C)C)C(C)SC1)CC1=CC=CC=C1 WPLOVIFNBMNBPD-ATHMIXSHSA-N 0.000 description 1
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 230000004572 zinc-binding Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F3/00—Compounds containing elements of Groups 2 or 12 of the Periodic Table
- C07F3/06—Zinc compounds
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
Abstract
본 발명은 수용액상에서 구리 이온을 선택적으로 감지하는 아미노산 쉬프 염기 아연 이핵체 화합물 및 그의 제조방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 수용액 상태에서 생물학적 중요한 구리 이온을 선택적으로 감지하는 아미노산 쉬프 염기 아연 이핵체 화합물의 단단계 과정으로 합성하는 방법을 제공한다.
본 발명은 라이신 쉬프 염기 리간드를 가지는 이핵체 아연 화합물의 합성에 있어서 라이신 리간드를 기본으로 하여 [Zn2(r,s-lysH)2(μ-OAc)2] (화합물 1), [Zn2(s-lysH)2(NO3)2] (화합물 2) 및 [H2lys = 6-amino-2-{(2-hydroxybenzylidene)amino}hexanoic acid]를 in situ 방법으로 합성한다. 이 이핵체 아연 화합물은 L 또는 D/L-라이신 쉬프 염기 리간드를 이용하여 단단계 과정으로 합성되고, 이 화합물은 다양한 분광학적 기술 및 단결정 X-선 회절 방법으로 분석되었다.
본 발명의 화합물 1과 화합물 2는 형광 특성을 가지며 수용액에 좋은 용해도를 가지므로, 이를 이용하여 생리학적으로 중요한 구리 이온을 중심 금속 직접 치환 방법으로 형광성 및 비색성을 이용하여 생리학적으로 안정한 pH에서 감지한다. 이들 화합물은 중심 금속 이온이 뒤틀어진 사각뿔 결합 구조를 가지고 있음을 확인하게 되었다. 또한 화합물의 결합 메카니즘 분석을 위하여, 화합물 2와 구리 이온을 이용하여 직접 합성 하였으며, 화합물 2와 구조는 비슷하고 중심 금속만 구리로 바뀐 화합물 3를 합성하였다. 이를 통하여 화합물 2와 구리 이온 간의 결합비가 1 : 2 임을 명백히 하였다.
본 발명은 라이신 쉬프 염기 리간드를 가지는 이핵체 아연 화합물의 합성에 있어서 라이신 리간드를 기본으로 하여 [Zn2(r,s-lysH)2(μ-OAc)2] (화합물 1), [Zn2(s-lysH)2(NO3)2] (화합물 2) 및 [H2lys = 6-amino-2-{(2-hydroxybenzylidene)amino}hexanoic acid]를 in situ 방법으로 합성한다. 이 이핵체 아연 화합물은 L 또는 D/L-라이신 쉬프 염기 리간드를 이용하여 단단계 과정으로 합성되고, 이 화합물은 다양한 분광학적 기술 및 단결정 X-선 회절 방법으로 분석되었다.
본 발명의 화합물 1과 화합물 2는 형광 특성을 가지며 수용액에 좋은 용해도를 가지므로, 이를 이용하여 생리학적으로 중요한 구리 이온을 중심 금속 직접 치환 방법으로 형광성 및 비색성을 이용하여 생리학적으로 안정한 pH에서 감지한다. 이들 화합물은 중심 금속 이온이 뒤틀어진 사각뿔 결합 구조를 가지고 있음을 확인하게 되었다. 또한 화합물의 결합 메카니즘 분석을 위하여, 화합물 2와 구리 이온을 이용하여 직접 합성 하였으며, 화합물 2와 구조는 비슷하고 중심 금속만 구리로 바뀐 화합물 3를 합성하였다. 이를 통하여 화합물 2와 구리 이온 간의 결합비가 1 : 2 임을 명백히 하였다.
Description
본 발명은 아미노산 라이신 리간드를 기본으로 하는 이핵체 화합물 [Zn2(r,s-lysH)2(μ-OAc)2] (화합물 1)와 [Zn2(s-lysH)2(NO3)2] (화합물 2)의 합성과 화합물 1, 2의 수용액 상에서의 선택적인 구리 금속 이온 감지에 관한 것이다.
본 발명은 ‘구리 이온 감지’에 관련된 것으로 구리 금속 이온은 자유로운 이온 형태나 구리 금속화합물 형태로서 모두 생물분야나 질병 분야에서 중요한 역할을 한다. 생물학 적으로 구리 이온의 항상성은 생체내의 물질 수송체 및 생명 현상의 균형을 의미한다. 이러한 항상성이 깨지게 되면, 병리학적으로 신경감퇴를 포함한 징후가 나타난다. 이러한 신경감퇴 징후로는 윌슨 병, 알츠하이머 병, 프리온-유발 질병 등이 있다. 따라서 생명 시스템에서 구리 이온의 작용을 이해하기 위해 구리 이온 수송체 및 수용액 상에서 구리 이온의 감지에 대한 다양한 연구가 진행되고 있다.
화학 및 생화학 분양에서 금속 이온 감지의 중요성은 상당히 주목을 받고 있으며 유기 화학 및 리간드-금속 호스트-게스트 화학 분야를 통한 다양한 접근 방법이 이루어지고 있다. 금속 감지기를 개발하기 위해서는 몇 가지 중요한 특징을 가지고 있어야 한다. 금속 이온에 대한 선택성 및 민감성이 요구 된다. 다양한 금속 이온의 혼합물 속에서 특정 이온만 검출해낼 수 있는 선택성이 요구된다. 또한 수용체의 물리 및 화학적 안정성도 요구되며, 이는 감지기와 감지 대상간의 결합의 가역성도 포함한다. 또한 수용액 상에서 감지를 통하여 형광 특성이 ‘on-off’ 및 ‘off-on’ 변화가 나타나는 감지기도 보고되어 왔다. (L. Zeng, E. W. Miller, A. Pralle, E. Y. Isacoff, C. J. Chang, J. Am. Chem. Soc. 2006, 128, 10-11; Y. Zheng, J. Orbulescu, X. Ji, F. M. Andreopoulos, S. M. Pham, R. M. Leblanc, J. Am. Chem. Soc. 2003, 125, 2680-2686; S. H. Kim, J. S. Kim, S. M. Park, S.-K. Chang, Org. Lett. 2006, 8, 371-374).
감지기 설계에 있어서 상대적으로 간단한 합성방법도 큰 장점이다. 이는 재생산성과도 직결되는 문제이다. 이러한 감지기 개발에 있어서 중요한 것은 생체내에서 감지기는 본래의 목적이외의 역할에 대하여서는 간섭하지 않아야 한다. 예를 들어서 중앙 신경 시스템에 관계되는 화학 감지기라면 이는 뇌혈관 장벽의 작용에는 영향을 끼치지 않아야 한다.
즉 감지기의 개발에 있어서 선택적인 금속 결합 능력이 있어야 하며, 광학적 특성 변화의 최적화가 이루어져야 한다.
따라서 본 발명을 통해 단단계 합성 과정을 가지는 수용성 이핵체 아연 화합물의 합성 및 그의 선택적인 구리 이온 감지방법을 제공하고자 한다.
본 발명의 목적은 수용성의 쉬프 염기 구조를 가지는 이핵체 아연 화합물을 단단계 과정을 통하여 제조하고 직접 치환방법을 통한 구리 이온 감지능력을 확인하는 것에 있다. 이들 화합물의 구리 이온 감지 능력을 갖는 새로운 화학 감지기로서의 가능성을 제시하고, 이를 통하여 화학 감지기를 제공하고자 한다.
본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제들은 이상에서 언급한 기술적 과제들로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 기술적 과제들은 본 발명의 기재로부터 당해 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
상기와 같은 목적으로 달성하고자 본 발명에서는 아미노산 쉬프 염기 리간드를 가지는 수용성의 이핵체 아연 화합물의 단단계 과정을 통한 합성방법을 제공한다.
나아가 수용액 상에서 이핵체 아연 화합물의 구리 이온에 대한 직접 치환을 통한 선택적 감지성을 확인하였고, 이핵체 아연 화합물과 구리 이온의 직접적인 반응을 통한 결합 메카니즘의 확인하였다.
본 발명인 ‘직접 치환 방법을 통하여 구리 이온을 감지하는 아연 이핵체 화합물과 그의 제조방법’에서 제공하는 이핵체 아연 화합물들은 수용액에서 좋은 용해도를 나타낸다. 나아가 분광학적 기술에 기반한 금속 이온 치환 방법을 통하여 구리 이온을 선택적으로 감지하는 능력을 나타내는 유리한 효과가 있다.
도 1은 화합물 1 및 화합물 2의 합성 과정을 나타낸 것이다.
도 2는 화합물 1의 결정 구조로서 30% 확률 수준의 열역학적 타원면에 관한 것이다.
도 3은 화합물 1의 결정학적 c-축으로 배열된 2D 결정구조이다. 점선은 수소 결합을 의미한다.
도 4는 화합물 2의 결정 구조이다. 30% 확률 수준의 열역학적 타원면에 관한 것이다.
도 5는 수용액 완충 용액(pH 7.4, 0.01 M HEPES, 물 : 메탄올 = 9 : 1)에서의 구리 이온 양(100 μM)의 증가에 따른 화합물 1(50 μM)의 자외선-가시광선흡수 스펙트럼의 변화에 관한 것이다.
도 6는 수용액 완충 용액(pH 7.4, 0.01 M HEPES, 물 : 메탄올 = 9 : 1)에서의 화합물 1(50 μM)에 다양한 금속 이온(100 μM)의 존재에 따른 자외선-가시광선 흡수 스펙트럼에 관한 것이다.
도 7은 수용액 완충 용액(pH 7.4, 0.01 M HEPES, 물 : 메탄올 = 9 : 1)에서의 화합물 1(50 μM)에 다양한 금속 이온(100 μM)의 존재에 따른 방출 스펙트럼에 관한 것이다.
도 8는 수용액 완충 용액(pH 7.4, 0.01 M HEPES, 물 : 메탄올 = 9 : 1)에서의 구리 이온 양(100 μM)의 증가에 따른 화합물 1(50 μM)의 방출 스펙트럼의 변화에 관한 것이다.
도 9는 수용액 완충 용액(pH 7.4, 0.01 M HEPES, 물 : 메탄올 = 9 : 1)에서의 화합물 1(50 μM)의 구리 이온(100 μM, 2 당량) 및 아연 이온(40 당량)의 존재에 따른 방출 스펙트럼의 변화에 관한 것이다.
도 10은 (A열) 수용액 완충 용액(pH 7.4, 0.01 M HEPES, 물 : 메탄올 = 9 : 1)에서의 다양한 금속 이온(500 μM)의 존재에 따른 화합물 1(50 μM)의 방출 강도. (B열) 화합물 1(50 μM)과 다른 금속 이온(500 μM) 및 구리 이온(100 μM) 혼합 용액의 방출 강도에 관한 것이다.
도 11은 수용액 완충 용액(pH 7.4, 0.01 M HEPES)에서의 구리 이온 양(100 μM)의 증가에 따른 화합물 2(50 μM)의 자외선-가시광선흡수 스펙트럼의 변화에 관한 것이다.
도 12는 수용액 완충 용액(pH 7.4, 0.01 M HEPES)에서의 화합물 2(50 μM)에 다양한 금속 이온(100 μM)의 존재에 따른 자외선-가시광선 흡수 스펙트럼에 관한 것이다.
도 13은 수용액 완충 용액(pH 7.4, 0.01 M HEPES)에서의 화합물 2(50 μM)에 다양한 금속 이온(100 μM)의 존재에 따른 방출 스펙트럼에 관한 것이다.
도 14는 수용액 완충 용액(pH 7.4, 0.01M HEPES)에서의 구리 이온 양(100 μM)의 증가에 따른 화합물 2(50 μM)의 방출 스펙트럼의 변화에 관한 것이다.
도 15는 수용액 완충 용액(pH 7.4, 0.01 M HEPES)에서의 철 이온(Fe2+) 양(100 μM)의 증가에 따른 화합물 2(50 μM)의 자외선-가시광선흡수 스펙트럼의 변화에 관한 것이다.
도 16은 (A열) 수용액 완충 용액(pH 7.4, 0.01 M HEPES, 물 : 메탄올 = 9 : 1)에서의 다양한 금속 이온(500 μM)의 존재에 따른 화합물 2(50 μM)의 방출 강도. (B열) 화합물 2(50 μM)과 다른 금속 이온(500 μM) 및 구리 이온(100 μM) 혼합 용액의 방출 강도에 관한 것이다.
도 17은 수용액 완충 용액(pH 7.4, 0.01 M HEPES)에서의 구리 이온 양(200 μM)의 증가에 따른 화합물 2(100 μM)의 자외선-가시광선흡수 스펙트럼의 변화이다. 550-750 nm 범위에서 d-d 전이 밴드가 확연하게 나타난 것에 관한 것이다.
도 18은 수용성 완충 용액(pH 7.4, 0.01 M HEPES)에서 화합물 2와 그에 2.0 당량의 구리 이온을 가했을 때의 원편광 이색성 스펙트럼 (셀 길이 = 1 cm )이다.
도 19는 화합물 2의 D2O 용매에서의 1H 핵자기 공명 스펙트럼에 관한 것이다.
도 20은 화합물 2와 2.0 당량의 구리 이온 존재하에서 D2O 용매에서의 1H 핵자기 공명 스펙트럼에 관한 것이다.
도 21은 화합물 1의 D2O 용매에서의 1H 핵자기 공명 스펙트럼에 관한 것이다.
도 22는 화합물 3의 결정구조로서 30% 확률 수준의 열역학적 타원면에 관한 것이다.
도 23은 결정 구조분석을 통하여 화합물 2와 구리 이온이 1 : 2로 결합하고, 용액상에서의 Job plot을 통한 화합물 2와 구리 이온의 직접 치환을 통한 결합비도 1 : 2로 나타남을 확인할 수 있는 그래프이다.
도 24은 구리 이온 존재 유무에 따른 (좌) 자연빛과 (우) 자외선(365 nm) 하에서의 화합물 1 용액의 색변화이다.
도 25는 수용액 완충 용액(pH 7.4, 0.01 M HEPES)에서의 구리 이온 양(200 μM)의 증가에 따른 화합물 1(100 μM)의 자외선-가시광선흡수 스펙트럼의 변화이다. 500-800 nm 범위에서 d-d 전이 밴드가 확연하게 나타난 것에 관한 것이다.
도 26는 결정 구조분석을 통하여 화합물 1과 구리 이온이 1 : 2로 결합하고, 용액상에서의 Job plot을 통한 화합물 1과 구리 이온의 직접 치환을 통한 결합비도 1 : 2로 나타남을 확인할 수 있는 그래프이다. [X = [1]/([1]+[Cu2+])]
도 27는 화합물 1의 ESI 질량 스펙트럼이다.
도 2는 화합물 1의 결정 구조로서 30% 확률 수준의 열역학적 타원면에 관한 것이다.
도 3은 화합물 1의 결정학적 c-축으로 배열된 2D 결정구조이다. 점선은 수소 결합을 의미한다.
도 4는 화합물 2의 결정 구조이다. 30% 확률 수준의 열역학적 타원면에 관한 것이다.
도 5는 수용액 완충 용액(pH 7.4, 0.01 M HEPES, 물 : 메탄올 = 9 : 1)에서의 구리 이온 양(100 μM)의 증가에 따른 화합물 1(50 μM)의 자외선-가시광선흡수 스펙트럼의 변화에 관한 것이다.
도 6는 수용액 완충 용액(pH 7.4, 0.01 M HEPES, 물 : 메탄올 = 9 : 1)에서의 화합물 1(50 μM)에 다양한 금속 이온(100 μM)의 존재에 따른 자외선-가시광선 흡수 스펙트럼에 관한 것이다.
도 7은 수용액 완충 용액(pH 7.4, 0.01 M HEPES, 물 : 메탄올 = 9 : 1)에서의 화합물 1(50 μM)에 다양한 금속 이온(100 μM)의 존재에 따른 방출 스펙트럼에 관한 것이다.
도 8는 수용액 완충 용액(pH 7.4, 0.01 M HEPES, 물 : 메탄올 = 9 : 1)에서의 구리 이온 양(100 μM)의 증가에 따른 화합물 1(50 μM)의 방출 스펙트럼의 변화에 관한 것이다.
도 9는 수용액 완충 용액(pH 7.4, 0.01 M HEPES, 물 : 메탄올 = 9 : 1)에서의 화합물 1(50 μM)의 구리 이온(100 μM, 2 당량) 및 아연 이온(40 당량)의 존재에 따른 방출 스펙트럼의 변화에 관한 것이다.
도 10은 (A열) 수용액 완충 용액(pH 7.4, 0.01 M HEPES, 물 : 메탄올 = 9 : 1)에서의 다양한 금속 이온(500 μM)의 존재에 따른 화합물 1(50 μM)의 방출 강도. (B열) 화합물 1(50 μM)과 다른 금속 이온(500 μM) 및 구리 이온(100 μM) 혼합 용액의 방출 강도에 관한 것이다.
도 11은 수용액 완충 용액(pH 7.4, 0.01 M HEPES)에서의 구리 이온 양(100 μM)의 증가에 따른 화합물 2(50 μM)의 자외선-가시광선흡수 스펙트럼의 변화에 관한 것이다.
도 12는 수용액 완충 용액(pH 7.4, 0.01 M HEPES)에서의 화합물 2(50 μM)에 다양한 금속 이온(100 μM)의 존재에 따른 자외선-가시광선 흡수 스펙트럼에 관한 것이다.
도 13은 수용액 완충 용액(pH 7.4, 0.01 M HEPES)에서의 화합물 2(50 μM)에 다양한 금속 이온(100 μM)의 존재에 따른 방출 스펙트럼에 관한 것이다.
도 14는 수용액 완충 용액(pH 7.4, 0.01M HEPES)에서의 구리 이온 양(100 μM)의 증가에 따른 화합물 2(50 μM)의 방출 스펙트럼의 변화에 관한 것이다.
도 15는 수용액 완충 용액(pH 7.4, 0.01 M HEPES)에서의 철 이온(Fe2+) 양(100 μM)의 증가에 따른 화합물 2(50 μM)의 자외선-가시광선흡수 스펙트럼의 변화에 관한 것이다.
도 16은 (A열) 수용액 완충 용액(pH 7.4, 0.01 M HEPES, 물 : 메탄올 = 9 : 1)에서의 다양한 금속 이온(500 μM)의 존재에 따른 화합물 2(50 μM)의 방출 강도. (B열) 화합물 2(50 μM)과 다른 금속 이온(500 μM) 및 구리 이온(100 μM) 혼합 용액의 방출 강도에 관한 것이다.
도 17은 수용액 완충 용액(pH 7.4, 0.01 M HEPES)에서의 구리 이온 양(200 μM)의 증가에 따른 화합물 2(100 μM)의 자외선-가시광선흡수 스펙트럼의 변화이다. 550-750 nm 범위에서 d-d 전이 밴드가 확연하게 나타난 것에 관한 것이다.
도 18은 수용성 완충 용액(pH 7.4, 0.01 M HEPES)에서 화합물 2와 그에 2.0 당량의 구리 이온을 가했을 때의 원편광 이색성 스펙트럼 (셀 길이 = 1 cm )이다.
도 19는 화합물 2의 D2O 용매에서의 1H 핵자기 공명 스펙트럼에 관한 것이다.
도 20은 화합물 2와 2.0 당량의 구리 이온 존재하에서 D2O 용매에서의 1H 핵자기 공명 스펙트럼에 관한 것이다.
도 21은 화합물 1의 D2O 용매에서의 1H 핵자기 공명 스펙트럼에 관한 것이다.
도 22는 화합물 3의 결정구조로서 30% 확률 수준의 열역학적 타원면에 관한 것이다.
도 23은 결정 구조분석을 통하여 화합물 2와 구리 이온이 1 : 2로 결합하고, 용액상에서의 Job plot을 통한 화합물 2와 구리 이온의 직접 치환을 통한 결합비도 1 : 2로 나타남을 확인할 수 있는 그래프이다.
도 24은 구리 이온 존재 유무에 따른 (좌) 자연빛과 (우) 자외선(365 nm) 하에서의 화합물 1 용액의 색변화이다.
도 25는 수용액 완충 용액(pH 7.4, 0.01 M HEPES)에서의 구리 이온 양(200 μM)의 증가에 따른 화합물 1(100 μM)의 자외선-가시광선흡수 스펙트럼의 변화이다. 500-800 nm 범위에서 d-d 전이 밴드가 확연하게 나타난 것에 관한 것이다.
도 26는 결정 구조분석을 통하여 화합물 1과 구리 이온이 1 : 2로 결합하고, 용액상에서의 Job plot을 통한 화합물 1과 구리 이온의 직접 치환을 통한 결합비도 1 : 2로 나타남을 확인할 수 있는 그래프이다. [X = [1]/([1]+[Cu2+])]
도 27는 화합물 1의 ESI 질량 스펙트럼이다.
본 발명은 화합물 1인 [Zn2(r,s-lysH)2(μ-OAc)2]과 화합물 2인 [Zn2(s-lysH)2(NO3)2]을 제조하는 단계, 그들의 결정 구조, 자외선-가시광선 흡수 스펙트럼 및 방출 스펙트럼, 구리 이온 감지, 1H 핵자기 공명(NMR) 및 원편광 이색성(CD) 스펙트럼을 확인하는 단계 및 결합 메카니즘 확인을 위한 화합물 3의 제조 단계로 구성된다.
이하에서 첨부된 도면을 참조한 실시예에 의거하여 구체적으로 설명한다.
<실시예 1> 화합물 1 [Zn2(r,s-lysH)2(μ-OAc)2]의 제조방법
Zn(OAc)2?2H2O (1.09 g, 5.00 mmol) 수용액을 살리실알데히드 (0.52 mL, 5.00 mmol)를 메탄올에 녹인 용액에 가한다. 상온에서 30분 동안 교반시킨 후, D/L-라이신 일염산 (0.913 g, 5.00 mmol) 수용액을 반응물에 첨가한다. 그 후 수산화나트륨 (0.20 g, 5.00 mmol) 수용액과 소듐아세테이트 (0.41 g, 5.00 mmol) 수용액을 천천히 반응물에 가하여 pH를 7-8 정도로 유지시킨다. 그 후 12 시간동안 교반시키다. 노란색의 침전물이 형성되면 이를 거르고 메탄올로 씻는다. 그 후 공기 중에서 건조시킨다. 물 : 메탄올 (3 : 1) 용액에서 재결정을 통해서 X-선 회절 측정에 적합한 무색의 단결정을 얻을 수 있다. 수득률은 42%에 달한다.
C, H, N 원소분석과 관련하여 C30H40N4O10Zn2 (M = 747.40 g mol-1)의 이론값은 C는 48.21, H는 5.39, N은 7.50에 해당하고, 실험값은 C는 48.34, H는 5.22, N는 7.51에 해당한다. FT-IR (KBr, νmax /cm-1 )결과 2947, 1638, 1601, 1450, 1384, 1305, 1195, 1155으로 확인되었으며, 1H-NMR (D2O : δ 4.63)결과 1.27-1.39 (m, 2Hγ), 1.53-1.60 (m, 2Hδ), 1.79-1.89 (m, 2Hβ), 1.83 (s, 3H-O-C(=O)Me), 2.85-2.90 (t, 3JH-H = 7.6 Hz, 2Hε), 3.84-3.88 (t, 3JH-H = 5.9 Hz, 1Hα), 6.65-6.73 (m, 2H11,13), 7.22-7.31 (m, 2H10,12), 8.27 (s, 1Himine)로 확인되었다. 질량분석결과(ESI, C28H35N4O8Zn2 [1 - (CH3COO- + 2H+)]-) 이론값(m/z)은 685.1007에 해당하고, 실험값(m/z)은 685.1043에 해당한다([도 1] 참조).
13C-NMR (D2O/MeOD)결과 (4:1): 22.21 (C4), 27.64 (C5), 35.37 (C3), 40.14 (C6), 68.69 (C2), 116.75 (C11), 120.43 (C8), 122.64 (C13), 135.55 (C10), 136.88 (C12), 169.09 (C7), 170.71 (C9), 181.07 (C1)으로 확인되었다([도 1] 참조).
<실시예 2> 화합물 2 [Zn2(s-lysH)2(NO3)2]의 제조 방법
Zn(NO3)2 (1.49 g, 5.00 mmol) 수용액을 살리실알데히드 (0.50 mL, 5.00 mmol)를 메탄올에 녹인 용액에 가한다. 상온에서 30분 동안 교반시킨 후, L-라이신 일염산 (0.731 g, 5.00 mmol) 수용액을 반응물에 천천히 가한다. 그 후 수산화나트륨 (0.20 g, 5.00 mmol) 수용액을 가한다. 트리에틸아민 (0.7 mL, 5.00 mmol)을 메탄올에 녹인 용액을 천천히 반응물에 가하여 pH를 7-8 정도로 유지시킨다. 그 후 12 시간동안 교반시킨다. 반응물을 건조시키고, 용매를 증발시키면 노란색의 고체를 얻을 수 있다. 이 고체를 거르고 에탄올로 씻은 후 진공 하에서 건조시킨다. 물 : 메탄올 (3 : 1) 용액에서 재결정을 통해서 X-선 회절 측정에 적합한 무색의 단결정을 얻을 수 있다. 수득률은 42%에 달한다. C, H, N 원소분석과 관련하여 C26H40N6O15Zn2(M = 807.38 g mol-1)의 이론값은 C는 38.68, H는 4.99, N는 10.41에 해당하고, 실험값은 C는 38.82, H는 5.09, N은 10.38에 해당한다. FT-IR (KBr, νmax /cm-1 )결과 3425, 2947, 1639, 1600, 1448, 1385, 1290으로 확인되었으며, 1H-NMR (D2O : δ 4.63)결과 1.13-1.28 (m, 2Hγ), 1.44-1.50 (m, 2Hδ), 1.68-1.76 (m, 2Hβ), 2.75-2.79 (t, 3JH-H = 7.6 Hz, 2Hε), 3.73-3.76 (t, 3JH-H = 5.8 Hz, 1Hα), 6.58-6.63 (m, 2H11,13), 7.14-7.20 (m, 2H10,12), 8.14 (s, 1Himine)으로 확인되었다. 13C-NMR (D2O/MeOD)결과 (4:1): 22.21 (C4), 27.64 (C5), 35.37 (C3), 40.14 (C6), 68.69 (C2), 116.75 (C11), 120.43 (C8), 122.64 (C13), 135.55 (C10), 136.88 (C12), 169.09 (C7), 170.71 (C9), 181.07 (C1)으로 확인되었다([도 1] 참조).
<실시예 3> 화합물 1의 결정 구조
화합물 1는 삼사정계 공간군 P-1 시스템으로 결정화 된다. 화합물 1의 분자 구조는 [도 2], [도 3]와 같다. X-선 회절분석 결과 3의 비대칭 단위체는 분자의 반쪽만을 포함하며 이는 반전점을 중심으로 하여 위치하여있다. 단위체는 아연 중심 금속에 하나의 D- 또는 L- 라이신 리간드가 붙어있는 형태이다. 아세트산염 리간드는 두 개의 아연 금속 원자를 포함하며 [O1, N1, O2, Zn1]으로 이루어진 평면과 거의 수직이다. 이러한 결합 형태로 인하여 두 개의 아연 금속을 중심으로 모두 뒤틀어진 사각뿔 형태로 결합이 형성되어있다. 관찰된 Zn-O 결합 길이는 1.982 ~ 2.109 Å이다. 이 화합물은 중성이다. 연결고리 역할을 하는 두 개의 아세트산염 작용기 때문에 NH2 작용기는 양성자를 얻게 된다. 본 합성에서는 D/L-라이신을 사용하였기 때문에 이 이핵체 화합물은 라세믹 화합물이며, 두 개의 리간드 이성질체(D-라이신 및 L-라이신)를 포함하고 있다. 고체 상태에서 말단의 NH3 작용기의 수소 원자는 쉬프 염기 리간드의 카르복시산염의 산소 원자와 페놀레이트의 산소 원자 방향을 위치해 있음을 알 수 있다([도 1] 및 [도 2] 참조). 이는 수소 결합에 기인하다는 것을 알 수 있으며 이를 통하여 화합물의 2차원 구조를 파악할 수 있다([도 3] 참조).
<실시예 4> 화합물 2의 결정구조
화합물 2는 단사정계 공간군 C2 시스템으로 결정화된다. 두 개의 아연 원자는 모두 뒤틀어진 사각뿔 형태의 결합 구조를 가지며 s-라이신 리간드가 세 군데 위치에서 결합한다. 또한 연결 고리 역할을 하는 페놀레이트 산소 원자가 존재하면 수직 방향으로는 질산염 이온이 존재한다([도 4] 참조).
<실시예 5> 화합물 1의 구리 이온 감지 실험
화합물 1은 수용액 상에서 높은 푸른색 형광 특성을 나타낸다(양자 수율 : 0.16). 고체 상에서도 형광 특성을 나타낸다.[도 24] 일반적으로 쉬프 염기 리간드는 금속 이온이 존재하지 않을 때 약간 녹색 형광을 띄지만, 중금속인 수은(Hg2+)이나 납(Pb2+) 또는 d-족 금속 원소인 구리 이온(Cu2+)이 존재할 때에는 형광 증가가 나타나지 않는다.
그러나 아연 이온 존재시에는 이민기(C=N)의 질소 원자가 아연 이온(Zn2+)과 강하게 결합함으로써 페닐기에 콘쥬게이션이 일어나지 않게 됨으로 인하여 강한 푸른색의 형광으로 나타난다. 이를 통하여 다른 금속 이온을 이용한 직접 치환 방법을 통한 형광 감소를 예측할 수 있다.
수용액(pH 7.4, 0.01 M HEPES 완충용액, 물 : 메탄올 = 9 : 1)에서 (다양한 금속 이온 존재(Na+, K+, Ca2+, Co2+, Ni2+, Mn2+, Cu2+, Zn2+, Cd2+, Ag+, Hg2+, Pb2+)에 따른 화합물 1의 흡수 및 방출 스펙트럼의 변화를 살펴보았다.
화합물 1의 자외선-가시광선 흡수 스펙트럼을 살펴보면, 267 nm와 354 nm에서 두 개의 밴드가 나타나며 이는 리간드내 전하 이동 전이에 따른 흡수 스펙트럼이다. 2.0 당량의 구리 이온을 가하게 되면, 흡광도가 약간 감소하며 최대 흡수 파장이 358 nm로 적색 이동이 일어난다. 2.0 당량 이후 구리 이온을 더 많은 가하여도 더 이상의 스펙트럼의 변화는 나타나지 않았다(100 당량 까지). 동일한 조건하에서 다른 금속 이온(Ca2+, Mn2+, Co2+, Ni2+, Hg2+, Cd2+, Na+, K+ , Ca2+, Mg2+)을 가하였을 때는 흡수 스펙트럼에서 변화가 거의 나타나지 않았다([도 5] 참조). 2 당량의 납 이온(Pb2+)을 가하였을 때는 약간의 흡광도 증가가 나타났으며, ~12 nm 정도의 최대 흡수 파장의 청색 이동이 나타났다. 납 이온을 가하였을 시 흡광도의 변화는 있었지만, 방출 스펙트럼에서는 어떠한 변화도 나타나지 않았다([도 6] 참조).
화합물 1 용액(100 μM)에 구리 이온 용액을 천천히 가하였을 때 (0-200 μM) 전형적인 구리 이온 화합물의 d-d 전이 흡수 밴드 (500-800 nm)가 나타나는 것을 관찰할 수 있다. 이 역시 구리 이온에 의한 아연 이온의 화합물의 직접 치환의 증거이다([도 25] 참조).
화합물 1은 푸른색 형광을 나타낸다. 354 nm의 빛으로 여기시켰을 때, 452 nm에서 빛을 방출한다. 화합물 1 용액에 여러 금속 이온 2.0 당량을 가했을 때 구리 이온의 경우에만 특별한 특성을 보인다. 다른 이온들을 가했을 때는 부분적으로 방출 강도가 줄어들지만, 구리 이온을 가했을 때는 완전히 없어진다. 2.0 당량을 가하면 약 2660배 정도로 방출 강도가 감소한다([도 7] 참조). 452 nm에 나타나는 방출 밴드가 점차적으로 감소하여 2.0 당량을 가하면 완전히 없어진다. Job' plot 분석을 통하여 화합물 1과 구리 이온이 1 : 2 로 결합하는 것을 알 수 있다.[도 26 참조] 적정을 통하여 얻은 결합 상수(Ka)는 약 1.14 (± 0.012) × 108 M-1 이다([도 8] 참조). 다른 금속 경우 2.0 당량을 가했을 때 니켈 이온의 경우 1.4배, 코발트 이온의 경우 1.9배의 방출 강도가 감소한다. 이는 구리 이온의 경우 보다 현저히 작은 수치이다. 구리 이온 감지가 화합물 1에 있는 아연 이온과의 치환을 통하여 일어나기 때문에, 그 역반응도 생각해볼 수 있다. 화합물 1과 2.0 당량의 구리 이온이 들어있는 수용액에 다시 40.0 당량의 아연 이온을 가하였을 때, 형광 특성을 회복되지 않았다. 이를 통해 구리 이온이 아연 이온에 비해 r-H2slys 리간드와 강한 결합성을 가짐을 알 수 있다([도 9] 참조).
화합물 1은 수용액 상에서 다른 이온의 존재 하에서도 선택적으로 구리 이온을 감지해낼 수 있다. 화합물 1과 다른 금속 이온 10.0 당량 혼합 용액에 2.0 당량의 구리 이온을 가하였을 때 발광 강도가 완전히 감소하는 것을 볼 수 있다([도 10] 참조). 예를 들어 Ni2+나 Co2+ 2.0 당량을 가하였을 때 각각 2배, 4.9배의 형광 감소가 나타나는 것을 관찰할 수 있다.
<실시예 6> 화합물 2의 구리 이온 감지 실험
화합물 2는 용액 상에서 높은 푸른색 형광 특성을 가진다(양자 수율 = 0.21). 화합물 1과 같이 아연 이온의 결합에 의한 이민기의 콘쥬게이션이 일어나지 않음으로써 형광 특성을 가지게 된다. 수용액 상(pH 7.4, 0.01 M HEPES 완충용액)에서 화합물 2 용액(50 μM)에 다양한 금속 이온을 첨가하였을 때의 자외선/가시광선 흡수 스펙트럼을 방출 스펙트럼을 측정하였다. 흡수 스펙트럼에서는 267 nm와 352 nm에서 큰 흡수 밴드가 나타난다. 이 밴드는 리간드내 전하 이동 전이에 의한 것이다. 2.0 당량의 구리 이온(100 μM)을 첨가하였을 때 흡광도가 약간 감소하며 최대흡수파장이 357 nm로 적색 이동이 일어난다. 같은 조건에서 다른 금속 이온(Ca2+, Pb2+, Mn2+, Co2+, Ni2+, Hg2+, Cd2+)을 첨가하열 때는 스펙트럼의 변화가 거의 나타나지 않는다([도 11] 및 [도 12] 참조).
방출 스펙트럼을 살펴보면 다른 이온들을 첨가하였을 때는 방출 강도가 약간 감소하지만 2.0 당량의 구리 이온을 첨가하면 방출 강도가 최대 1290 배 정도 감소한다([도 13] 및 [도 14] 참조). 이 스펙트럼을 통해서 얻어진 결합 상수(Ka)는 1.5 (± 0.14) × 108 M-1이다. 화합물 1과 마찬가지로 화합물 2의 구리 이온 감지 역시 미리 존재하눈 아연 이온의 치환을 통하여 일어나는 반응이므로, 이 반응의 가역성을 확인해볼 수 있다. 화합물 2와 2.0 당량의 구리 이온을 넣은 용액에 약 40 당량의 아연 이온을 첨가해보았지만, 방출 강도의 변화는 나타나지 않았다. 따라서 s-H2lys 리간드와 구리 이온 간의 결합이 아연 이온 간의 결합보다 훨씬 강함을 알 수 있다. 또한 화합물 2의 경우에서는 철 이온(Fe2+)을 가하였을 때 역시 방출 강도가 완전히 감소하였는데, 이는 반응 중에 Fe2+ 이온이 Fe3+ 이온으로 산화가 되며, 이 Fe3+가 쉬프 염기 리간드를 가수 분해시키기 때문이다([도 15] 참조).
화합물 2 역시 다른 이온의 존재 하에서도 선택적으로 구리 이온을 감지할 수 있는 능력을 보인다([도 16] 참조). 10.0 당량의 다른 금속 이온 존재 시, 2.0 당량의 구리 이온을 첨가하게 되면 방출 강도가 완전히 감소하는 것을 볼 수 있다.
또한 구리 이온을 가함에 따라 500 - 800 nm에서 구리 이온 화합물의 전형적인 d-d 전이 밴드가 나타남을 확인할 수 있다([도 17] 참조).
<실시예 7> 1H 핵자기 공명 스펙트럼 및 원편광 이색성 스펙트럼
화합물 2는 L-라이신 존재로 인하여 광학 활성을 가진다. 수용액 완충 용액에서 원편광 이색성 스펙트럼을 살펴보면, 354 nm에서 음의 코튼 효과를 가짐을 알 수 있다. 그리고 구리 이온을 2.0 당량 첨가하면 359 nm에서 새로운 밴드가 나타나고 이는 금속 이온 치환을 통한 새로운 화합물이 형성되었음을 알 수 있다([도 18] 참조). 화합물 2의 1H 핵자기 공명 스펙트럼을 살펴보면 2.0 당량의 구리 이온을 가하였을 때 전체적으로 피크가 넓어지고, 이민기와 α-양성자의 피크가 약 0.1 ppm 정도 쉬프트되는 것을 볼 수 있다([도 19] 및 [도 20] 참조). 따라서 위의 원편광 이색성 스펙트럼과 핵자기 공명 스펙트럼의 결과를 통하여 화합물 2의 아연 이온이 구리 이온으로 직접적으로 치환이 일어난다는 것을 알 수 있다. 화합물 1의 1H 핵자기 공명 스펙트럼도 측정하였다([도 21] 참조). 1H 핵자기 공명 스펙트럼을 통하여 각각의 양성자들의 피크들을 확인할 수 있다. 스펙트럼에서 1.83 ppm에서 나오는 피크는 연결역할을 하는 아세테이트 작용기의 메틸기다. 이 피크들은 라이신의 -CH2 기들과 겹쳐서 나타난다 (1.79-1.89 ppm). 또한 ESI 질량 스펙트럼을 통하여 m/z 685.1의 주 피크를 관찰할 수 있는데, 이는 아연 이핵체 화합물에 단지 하나의 아세테이트 연결 작용기가 존재할 때의 질량이다[C28H35N4O8Zn2 {1(CH3COO + 2H+)}]. [도 27] 이를 통하여 화합물 1은 묽은 수용액에서는 경쟁 음이온들이라 용매 물분자의 존재에 의하여 약간 불안정하여 아세테이트 연결 작용기가 쉽게 끊어질 수 있음을 알 수 있다. 그러나 진한 농도의 수용액(0.001 M)에서는 화합물은 상대적으로 안정하다. 3주 정도 놓아두었을 때도 화학적 안정성을 나타냈으며 X선 회절분석에 적합한 단결정(두 개의 아세테이트 작용기 존재 확인)을 얻을 수 있다. 화합물 1은 원편광 이색성 스펙트럼에 비활성 특성을 나타내는데 이는 화합물이 라세믹(racemic)이기 때문이다. 화합물 3 용액은 D-라이신과 L-라이신 쉬프 염기 리간드를 다 가지고 있다.
<실시예 8> 화합물 2와 구리 이온과의 반응 실험 (화합물 3의 합성)
화합물 2와 구리 이온간의 확실한 반응 메카니즘을 확인하기 위하여, 화합물 2와 Cu(ClO4)?6H2O 및 Na(ClO4)를 물과 메탄올 (1 : 1) 용매에서 반응시켰다. 반응물은 반응이 진행됨에 따라 노란색에서 초록색으로 변하였고, 에탄올 용매에서 단결정 회절 분석에 적합한 결정을 얻을 수 있다(화합물 3). 화합물 3의 결정구조는 밑의 [도 22]와 같다. 이 화합물은 두 개의 구리 이온을 가지고 있다. 구리 원자 결합 구조는 화합물 2의 아연 원자의 그것과 같이 뒤틀어진 사각뿔 구조를 가지고 있으며, 수직축으로 물분자와 결합하고 있다. 화합물 3의 단위세포 속에는 Na(ClO4)가 포함되어 있으며 이는 결정화에 도움을 준다. 결정 구조분석을 통하여 화합물 2와 구리 이온이 1 : 2로 결합함이 명백해졌다. 용액상에서 Job plot을 통한 화합물 2와 구리 이온의 직접 치환을 통한 결합비도 1 : 2로 나타난다([도 23] 참조).
이상에서 첨부된 도면을 참조한 실시예에 의거하여 구체적으로 설명했다. 그러나 이는 본 발명을 예시하기 위한 것으로 본 발명의 권리범위를 이에 한정하고자 하는 것은 아니고, 이들을 대체할 수 있는 다양한 균등물이 존재한다. 또한 본 명세서 및 청구범위에 사용된 용어나 단어는 통상적이거나 사전적인 의미로 한정해서 해석되어서는 안 되고, 발명자는 그 자신의 발명을 가장 최선의 방법으로 설명하기 위해 용어의 개념을 적절하게 정의할 수 있다는 원칙에 입각하여 본 발명의 기술적 사상에 부합하는 의미와 개념으로 해석되어야만 한다.
화학 및 생화학 분양에서 금속 이온 감지는 매우 중요하다. 이에 유기 화학 및 리간드-금속 호스트-게스트 화학 분야를 통한 다양한 접근 방법이 이루어지고 있다. 다만 금속 이온 감지기로서 유효한 효과를 가지려면 선택성 및 민감성이 요구되고; 생체 내에서 본래의 목적이외의 역할에 대하여서는 간섭하지 않아야 하며; 선택적인 금속 결합 능력이 있되, 광학적 특성 변화의 최적화가 이루어져야 하고; 나아가 경제적 측면에서 상대적으로 간단한 합성방법에 의해야 한다.
이에 본 발명은 단단계 합성 과정을 가지는 수용성 이핵체 아연 화합물의 합성 및 그의 선택적인 구리 이온 감지방법을 제공한다는 점에서 효율성, 안정성은 물론 경제적 측면에서도 산업상 이용가능성이 우수하다고 할 것이다.
나아가 본 발명에서 합성한 쉬프 염기 리간드를 가지는 이핵체 아연 화합물들은 수용액에서 좋은 용해도를 보이며 수용액 상에서 구리 이온을 선택적으로 금속 이온 직접 치환을 통하여 감지할 수 있음을 분광학적 방법을 통하여 확인하였는바, 이러한 쉬프 염기 이핵체 아연 화합물은 새로운 화학 센서 물질로서의 응용이 가능함은 물론, 생리학적으로 중요한 구리 이온을 감지할 수 있는 물질로서 병리학적 측면에서 산업상 이용가능성이 매우 우수하다고 할 것이다.
Claims (12)
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 수용액 상에서 구리 이온을 선택적으로 감지할 수 있는 아미노산 쉬프 염기를 포함하는 이핵체 화합물인 [Zn2(r,s-lysH)2(μ-OAc)2]의 제조방법에 있어서,
상기 제조방법은 살리실알데히드 (0.52 mL, 5.00 mmol)를 메탄올에 녹인 용액에, Zn(OAc)2?2H2O (1.09 g, 5.00 mmol) 수용액을 첨가하는 단계; 그 후 상온에서 30분 동안 교반시킨 후, D/L-라이신 일염산 (0.913 g, 5.00 mmol) 수용액을 반응물에 첨가하는 단계; 그 후 수산화나트륨 (0.20 g, 5.00 mmol) 수용액과 소듐아세테이트 (0.41 g, 5.00 mmol) 수용액을 첨가하고, pH를 7-8 정도로 유지시키는 단계; 그 후 12 시간동안 교반하는 단계; 노란색의 침전물이 형성되면 상기 침전물을 거르고 메탄올로 씻는 단계; 그 후 상온에서 건조시키는 단계; 그 후 물 : 메탄올 (3 : 1) 용액에서 재결정을 통해서 X-선 회절 측정에 적합한 무색의 단결정을 얻는 단계; 를 포함하는 것을 특징으로 하는 [Zn2(r,s-lysH)2(μ-OAc)2]의 제조방법.
- 삭제
- 수용액 상에서 구리 이온을 선택적으로 감지할 수 있는 아미노산 쉬프 염기를 포함하는 이핵체 화합물인 [Zn2(s-lysH)2(NO3)2]의 제조방법에 있어서,
상기 제조방법은 살리실알데히드 (0.50 mL, 5.00 mmol)를 메탄올에 녹인 용액에, Zn(NO3)2 (1.49 g, 5.00 mmol) 수용액을 첨가하는 단계; 그 후 상온에서 30분 동안 교반시킨 후, L-라이신 일염산 (0.731 g, 5.00 mmol) 수용액을 반응물에 첨가하는 단계; 그 후 수산화나트륨 (0.20 g, 5.00 mmol) 수용액 및 트리에틸아민 (0.7 mL, 5.00 mmol)을 메탄올에 녹인 용액을 첨가하고, pH를 7-8 정도로 유지시키는 단계; 그 후 12 시간동안 교반하는 단계; 그 후 용매를 증발시켜 건조시키는 단계; 상기 건조물을 에탄올로 세척한 후 진공 하에서 다시 건조시키는 단계; 그 후 물 : 메탄올 (3 : 1) 용액에서 재결정을 통해서 X-선 회절 측정에 적합한 무색의 단결정을 얻는 단계; 를 포함하는 것을 특징으로 하는 [Zn2(s-lysH)2(NO3)2]의 제조 방법.
- 삭제
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020100043143A KR101173169B1 (ko) | 2010-05-07 | 2010-05-07 | 직접 치환 방법을 통하여 구리 이온을 감지하는 아연 이핵체 화합물과 그의 제조방법 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020100043143A KR101173169B1 (ko) | 2010-05-07 | 2010-05-07 | 직접 치환 방법을 통하여 구리 이온을 감지하는 아연 이핵체 화합물과 그의 제조방법 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20110123586A KR20110123586A (ko) | 2011-11-15 |
| KR101173169B1 true KR101173169B1 (ko) | 2012-08-16 |
Family
ID=45393723
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020100043143A KR101173169B1 (ko) | 2010-05-07 | 2010-05-07 | 직접 치환 방법을 통하여 구리 이온을 감지하는 아연 이핵체 화합물과 그의 제조방법 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR101173169B1 (ko) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108586382B (zh) * | 2018-04-08 | 2021-09-28 | 山西大学 | 一种希夫碱化合物及其制备和在铜离子检测中的应用 |
| CN114410296B (zh) * | 2022-03-15 | 2023-08-22 | 贵州医科大学 | 基于异亮氨酸衍生物配体的mof复合材料的制备方法及应用 |
-
2010
- 2010-05-07 KR KR1020100043143A patent/KR101173169B1/ko not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Direct Dizinc Displacement Approach for Efficient Detection of Cu2+ in Aqueous Media: Acetate versus Phenolate Bridging Platforms, 대한화학회 105회 2010년 춘계 학술발표회 포스터 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR20110123586A (ko) | 2011-11-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US8962339B2 (en) | Fluorescent probe compounds, preparation method and application thereof | |
| Wang et al. | Anion dependent self-assembly of drum-like 30-and 32-metal Cd–Ln nanoclusters: visible and NIR luminescent sensing of metal cations | |
| Wang et al. | Highly selective and sensitive detection of Hg 2+, Cr 2 O 7 2−, and nitrobenzene/2, 4-dinitrophenol in water via two fluorescent Cd-CPs | |
| Chen et al. | A rhodamine-based fluorescent probe for detecting Hg 2+ in a fully aqueous environment | |
| Wu et al. | Dansyl-based fluorescent chemosensors for selective responses of Cr (III) | |
| Zhang et al. | A highly selective ratiometric fluorescent chemosensor for Ag+ based on a rhodanineacetic acid–pyrene derivative | |
| Fang et al. | An excited-state intramolecular proton transfer (ESIPT)-based aggregation-induced emission active probe and its Cu (II) complex for fluorescence detection of cysteine | |
| Mohan et al. | Dual responsive salen-type Schiff bases for the effective detection of L-arginine via a static quenching mechanism | |
| Bian et al. | Imidazole-bearing tetraphenylethylene: fluorescent probe for metal ions based on AIE feature | |
| Ma et al. | A simply and highly selective “turn-on” type fluorescent chemosensor for Hg2+ based on chiral BINOL-Schiff’s base ligand | |
| Qu et al. | Syntheses, crystal structures, chirality and aggregation-induced phosphorescence of stacked binuclear platinum (II) complexes with bridging Salen ligands | |
| He et al. | Syntheses and crystal structures of new dinuclear lanthanide complexes based on 3-(4-hydroxyphenyl) propanoic acid: Hirshfeld surface analyses and photoluminescence sensing | |
| Pan et al. | A novel dual channel fluorescent probe for Ca2+ and Zn2+ based on a coumarin Schiff base | |
| Ma et al. | Two 3D metal− organic frameworks as multi-functional materials to detect Fe3+ ions and nitroaromatic explosives and to encapsulate Ln3+ ions for white-light emission | |
| Majumdar et al. | Synthesis, characterizations and single crystal structure of di-nuclear azido-bridged Cd (II) coordination polymer with Schiff base precursor (H2LpentOMe): DFT, fluorescence, solvatochromism and in vitro antimicrobial assay | |
| Kumar et al. | Copper (II) complexes as turn on fluorescent sensors for nitric oxide | |
| Xu et al. | A “turn-on” lanthanide complex chemosensor for recognition of lead (II) based on the formation of nanoparticles | |
| KR101173169B1 (ko) | 직접 치환 방법을 통하여 구리 이온을 감지하는 아연 이핵체 화합물과 그의 제조방법 | |
| KR101539821B1 (ko) | Ｏ-페놀살리실이민（ｐｓｉ） 화합물 및 그 유도체를 포함하는 알루미늄 이온 검출제, 이를 이용한 검출 방법 및 검출장치 | |
| Kaur et al. | Extending photophysical behavior of Schiff base tripod for the speciation of iron and fabrication of INHIBIT type molecular logic gate for fluorogenic recognition of Zn (II) and Cd (II) ions | |
| Chiang et al. | Ligand dissociation/recoordination in fluorescent ionic zinc–salicylideneimine compounds: Synthesis, characterization, photophysical properties, and 1H NMR studies | |
| Yuksel et al. | New insight in coordination of vic-dioximes: Bis-and tris (E, E-dioximato) Ni (II) complexes | |
| Zhang et al. | Conformational switching fluorescent chemodosimeter for the selective detection of silver (I) ions | |
| CN111072988A (zh) | 一类基于镧系金属与四苯乙烯基团的MOFs制备及应用 | |
| Khatua et al. | Direct dizinc displacement approach for efficient detection of Cu2+ in aqueous media: acetate versus phenolate bridging platforms |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A201 | Request for examination | ||
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
| GRNT | Written decision to grant | ||
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20150729 Year of fee payment: 4 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20170111 Year of fee payment: 5 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20170725 Year of fee payment: 6 |
|
| LAPS | Lapse due to unpaid annual fee |