KR101114006B1

KR101114006B1 - 백화사설초 추출물을 함유하는 피부 미용 또는 성형 조성물

Info

Publication number: KR101114006B1
Application number: KR1020080052041A
Authority: KR
Inventors: 이상민; 송민정; 신동욱; 노민수; 김한곤
Original assignee: (주)아모레퍼시픽
Priority date: 2008-06-03
Filing date: 2008-06-03
Publication date: 2012-02-21
Also published as: KR20090125948A

Abstract

본 발명은 피부 미용 및 성형용 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 백화사설초 추출물을 유효성분으로 함유하여 사람 중간엽줄기세포를 지방세포로 분화하는 것을 촉진시킴으로써 지방세포를 생성하여 피부의 볼륨과 탄력을 부여하는 미용 또는 성형 조성물에 관한 것이다.

백화사설초 * 중간엽 줄기세포 분화 * 지방세포생성

Description

백화사설초 추출물을 함유하는 피부 미용 또는 성형 조성물{Composition for cosmetic or plastic surgery containing the extracts of Hedyotidis Diffusae Herba}

피하지방조직은 피부의 볼륨과 강도를 좌우하는 역할을 하며, 특히 얼굴 부위의 피부는 체중의 증감이나 나이 등의 변화 요인으로 인해 처지고 탄력을 잃기 쉽다. 현대 사회에서 여성 얼굴의 탱탱한 피부는 건강의 상징이 되고 있으며, 많은 여성들이 부작용과 경제적인 부담이 따르는 성형수술을 통해서라도 얼굴의 모양과 크기 및 탄력을 증진시키고자 할 만큼 여성들에게 민감한 문제로 대두되고 있다. 또한 폐경기 여성들에게 발생하게 되는 호르몬, 혈액, 지방 및 뼈 등의 대사 이상 으로 인한 얼굴의 탄력 저하 및 지방의 감소는 여성성에 대한 큰 상실감을 느끼게 한다.

현재 지방 세포의 이식이 널리 행해지고 있다. 특히 지방 이식은 나이로 인하여 노화된 피부의 주름 개선을 비롯하여, 입술선, 턱선, 이마선의 교정, 코 성형과 화상이나 상처로 인하여 함몰된 피부, 암 절제 수술로 상실된 부분 등에 적용, 채워주는 좋은 성과를 보이고 있다. 하지만 지방 이식 수술 후 이식 부피의 40～60%가 흡수되는 등 생존율과 생존기간이 기대에 미치지 못해 재이식이 필요하다는 문제가 있다(S Eremia et al., 2000, Dermatol. Sur. 26, 1150-1158; Fulton JE et al., 2001, Dermatol. Clin. 19(3), 523-530). 따라서 지방이 부족한 부분의 피하 지방층을 증가시킬 수 있는 조성물에 대한 연구가 현재 절실히 필요한 상황이다.

현재까지 피부의 탄력 증진이나 미용 효능의 화장품은 대부분이 피부의 주름 제거 또는 진피 강화 등의 일반적인 효능을 가진 성분을 사용한 것이었다. 그러나, 피부의 기본적인 구조가 피하 지방조직의 부피에 의해 유지되고 있으므로, 피부 외곽층에 있는 진피나 표피에 탄력을 부여하는 방법보다는, 지방 조직의 볼륨을 증가시키는 것이 피부의 볼륨 및 탄력을 유지하는 또 다른 해결책이 될 수 있을 것이다.

백화사설초는 꼭두서니과(Rubiaceae)에 속하는 1년생 초본인 백운풀(Hedyotis lindleyana var. hirsute HARA or Oldenlandia diffusa L. ROXB.)의 일년생 전초로서 높이 20～40㎝이고, 밑부분이 옆으로 자라면서 가지가 갈라져서 비스듬히 서며 다세포로 된 백색털이 다소 있다(Yoshida, Y. et al., Int. J. Immunopharmacol., 19:359, 1997). 백화사설초의 기미는 차가우나 독이 없고 맛은 달고 쓰며, 작용하는 경락은 위경, 대장경 및 소장경 등이고, 본초학적으로 청열해독(淸熱解毒), 이수통림(利水通淋), 활혈화어(活血化瘀) 및 소옹(消癰)의 효능이 있어 폐열기침, 편도선염, 인후염, 충수염, 이질, 황달, 자궁부속기염 및 관절염 등의 각종 염증과 소화기암, 간암, 폐암, 임파암 및 인후암 등의 각종 암에 활용되고 있다(Tong, I.H. et al., Phytochemistry., 25:1988, 1986).

또한 백화사설초는 주름 개선 및 피부의 처짐 방지 등의 효과가 알려져 있으며(Yoshimura K et al., Aesthetic Plast Surg. 2008 ; 32(1):48-55, Hu S et al., Ann Plast Surg. 2007 Jun;58(6):602-7), 한국공개특허공보 제2003-0064107호에는 백화사설초 추출물을 함유하여, 항염증효과, 항바이러스, 항박테리아, 및 항진균 효과가 우수하며, 콜라겐 생합성 촉진 효과 또한 우수한 피부 노화방지용 피부 외용제 조성물이 개시되어 있고, 한국공개특허공보 제2004-0074154호에는 백화사설초 추출액을 액정좀에 내포시켜 안정화시킴으로써, 피부내 침투가 매우 용이하고, 피부 탄력 증진 및 주름 개선에 따른 노화 방지 효과가 뛰어나면서도 매우 안정한, 백화사설초 추출액을 안정화시킨 액정좀을 함유하는 화장료 조성물이 개시되어 있으며, 일본공개특허공보 제2007-126368호에는 백화사설초를 함유하는 항노화제가 개시되어 있다.

또한 중국공개특허공보 제2002-159195호에는 백화사설초를 포함하는 한약재를 유효성분으로 함유하여 당뇨병 및 신장증(nephrosis)을 예방 및 치료하기 위한 한약재가 개시되어 있고, 중국등록특허 제1634352호에는 백화서설초를 포함하는 한 약재를 유효성분으로 함유하여 당뇨병을 치료하는 당-감소 및 지방-감소 제제 및 그 제조방법이 개시되어 있다.

이에 본 발명자들은 지방조직을 이루는 지방세포의 분화를 촉진함으로써 근본적으로 피부의 볼륨감을 증가시켜 줄 수 있는 활성 성분을 개발하기 위하여 천연물 중에서 연구 및 검토한 결과, 백화사설초 추출물을 중간엽줄기세포에 처리할 경우 중간엽줄기세포를 지방세포로 분화하는 것을 촉진하는 효능이 있음을 발견하고 본 발명을 완성하였다.

따라서, 본 발명의 목적은 중간엽줄기세포 분화를 촉진시키는 미용 또는 성형 조성물을 제공하는 것이다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명에서는 백화사설초 추출물을 유효성분으로 함유하는 중간엽줄기세포 분화를 촉진하기 위한 미용 또는 성형 조성물을 제공한다.

본 발명에 의한 조성물은 백화추출물을 유효성분으로 함유함으로써 중간엽줄기세포 분화를 촉진시킴으로써 미용 또는 성형 목적의 지방조직 증가에 유용하였다.

본 발명의 백화사설초 추출물은 중간엽줄기세포(Mesenchymal Stem Cell, MSC)의 분화를 촉진함으로써, 피하지방층을 구성하거나 지방세포를 제공하여 피부의 볼륨과 탄력을 부여하는 효능을 갖는 미용 또는 성형 조성물에 관한 것이다. 상기 중간엽줄기세포 분화 촉진용 조성물의 적용 부위는 신체의 모든 지방 조직을 포함하며, 특정 부위에 한정하지는 않지만, 예를 들면, 지방층이 많은 여성의 가슴 부위를 포함할 수 있다.

또한 상기 중간엽줄기세포는 인간 유래의 것일 수 있으며, 바람직하게는 인간 골수의 중간엽줄기세포이다.

상기 지방조직의 증가 효과로는 미용 또는 성형 목적의 지방조직 증가 효과가 있으나, 이로 한정되지 않는다. 상기 지방세포 분화는 동물, 바람직하게는 포유동물의 지방전구세포 또는 중간엽줄기세포가 지방세포로 분화하는 것이고, 보다 바람직하게는 인간의 중간엽줄기세포가 지방세포로 분화하는 것이며, 가장 바람직하게는 인간의 골수로부터 유래한 중간엽줄기세포가 지방세포로 분화하는 것이다.

본 발명의 조성물은 피부 외용제 조성물로서 사용될 경우에 신체 부위에 따라, 그 제형에 있어서 특별히 한정되지 않는다. 구체적으로 예를 들면, 유연화장수, 영양화장수, 마사지 크림, 영양 크림, 팩, 젤 또는 피부 점착 타입 화장료의 제형을 갖는 화장료 조성물일 수 있으며, 또한 로션, 연고, 겔, 크림, 패취 또는 분무제와 같은 경피 투여형 제형일 수 있다.

또한 각 제형의 외용제 조성물에 있어서, 상기한 본 발명의 백화사설초 추출물 이외의 다른 성분들은 기타 피부 외용제의 제형 또는 사용 목적 등에 따라 당업자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있으며, 이 경우 다른 원료와 동시에 적용할 경우 상승효과가 일어날 수 있다.

본 발명에 의한 백화사설초 추출물은 백화사설초를 물 또는 에탄올과 같은 유기용매로 당업계에 잘 알려진 통상적인 추출 방법에 의해 추출할 수 있다.

또한, 본 발명의 조성물은 약학 조성물로서 사용될 경우에, 방부제, 안정화제, 수화제 또는 유화 촉진제, 삼투압 조절을 위한 염 및/또는 완충제 등의 약제학적 보조제 및 기타 치료적으로 유용한 물질을 추가로 함유할 수 있으며, 통상적인 방법에 따라 다양한 경구 또는 비경구 투여 형태로 제형화할 수 있다.

경구 투여용 제형으로는 예를 들면 정제, 환제, 경질 및 연질 캅셀제, 액제, 현탁제, 유화제, 시럽제, 과립제 등이 있는데, 이들 제형은 유효성분 이외에 희석제(예: 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 만니톨, 솔비톨, 셀룰로오스 및 글리신) 및 활택제(예: 실리카, 탈크, 스테아르산 및 그의 마그네슘 또는 칼슘염 및 폴리에틸렌 글리콜)를 함유할 수 있다. 정제는 또한 마그네슘 알루미늄 실리케이트, 전분 페이스트, 젤라틴, 트라가칸스, 메틸셀룰로오스, 나트륨 카복시메틸셀룰로오스 및 폴리비닐피롤리딘과 같은 결합제를 함유할 수 있으며, 경우에 따라 전분, 한천, 알긴산 또는 그의 나트륨 염과 같은 붕해제, 흡수제, 착색제, 향미제, 및 감미제 등의 약제학적 첨가제를 함유할 수 있다. 정제는 통상적인 혼합, 과립화 또는 코팅 방법에 의해 제조될 수 있다. 또한 비경구 투여용 제형의 대표적인 것은 주사용 제형으로 등장성 수용액 또는 현탁액이 바람직하다.

그러나, 활성 성분의 실제 투여량은 증상의 중증도, 선택된 투여 경로, 대상의 연령, 성별, 체중 및 건강상태 등의 여러 관련 인자에 비추어 결정되어야 하는 것으로 이해되어야 하며, 따라서, 상기 투여량은 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하지 않지만, 통상적으로 동결건조한 본 발명의 백화사설초 추출물 0.1～100mg/kg을 하루에 1회 내지 수회에 나누어 투여하는 것이 바람직하다.

이하, 하기 실시예에 의하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명하고자 한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐 본 발명의 범위가 이들만으로 한정되는 것은 아니다.

[실시예 1] 백화사설초 추출물의 제조

백화사설초(생약명: Hedyotidis Diffusae Herba, 중국산) 30g을 에탄올 (95.0～95.5v/v%), 200ml에 넣은 다음 ASE300 ACCELERATED SOLVENT EXTRACOR(DIONEX Corporation) 기기를 이용하여 50℃에서 1500psi 압력하에 20분간 분쇄하였다. 또한 초음파 세척기(BRANSON Ultrasonics corporation) 소니케이터 기기를 이용하여 50℃에서 3일 정도 추가 분쇄하였다. 이렇게 분쇄된 백화사설초 추출물을 모듈 스핀 40(Modul spin 40; Biotron corporation) 기기를 이용하여 40℃에서 24시간 동안 건조하였으며 백화사설초 추출물 시료를 제조하였다.

[시험예 1] 인간의 골수 중간엽 줄기세포의 지방세포 분화에 대한 백화사설초 추출물의 효과

(1) 인간의 골수 중간엽줄기세포 배양 및 백화사설초 추출물의 지방세포 분화 촉진 효능 발견

인간의 골수 중간엽줄기세포(human bone marrow mesenchymal stem cells, hBM-MSCs)를 론자사(Lonza, Inc. Walkersville, MD, USA)에서 구입하여 론자사의 지침서에 따라 배양하였다. 지방세포 분화는 인도메타신(indomethacin) 대신 트로글리타존(Troglitazone)을 사용하여 중간엽줄기세포의 지방세포 분화를 유도한 점을 제외하고 론자사에서 권장하는 방법을 사용하여 달성하였다. 구체적으로, 중간엽줄기세포의 배양액에 인슐린 1 μg/ml, 덱사메타손(Dexamethasone, DEXA) 1 μM, 이소부틸메틸잔틴(isobutylmethylxanthine, IBMX) 0.5 mM 을 넣고 배양하여 줄기세포를 지방세포로 분화시켰으며, 실험군의 경우 지방세포 분화 유도 시에 백화사설초 추출물 3, 10, 30 ppm을 배지에 첨가하였다. 양성 대조군으로는 글리벤클라마이드(Glibenclamide) 10 μM과 및 트로글리타존(Troglitazone; TRO) 2 μM을 각각 사용하여, IDX 배지와 같이 처치하였다. 중간엽줄기세포의 지방세포 분화를 시작한 지 14일 후, 세포 배양액을 제거하고, 10 ml의 인산염 완충액(Phosphate Buffered Saline, PBS)으로 세포를 세척한 다음, 10% 포르말린/PBS 용액 0.2 ml/㎠을 사용하 여 세포를 10분간 고정시켰다. 고정된 세포를 60% 이소프로판올 용액 0.5 ml/cm²로 1회 세척하고, 오일레드오(Oil Red O)를 60% 이소프로판올에 녹인 염색액 0.2 ml/㎠로 10분간 지방세포 내의 지질체를 염색하였다. 이어서, 헤마톡실린(hematoxylin)으로 재염색을 행하여 세포핵을 쉽게 구분되도록 한 후 현미경으로 관찰하였고, 그 결과를 도 1에 나타내었다. 도 1에서 볼 수 있는 바와 같이, 백화사설초 추출물은 중간엽줄기세포의 세포 사멸을 유도하지 않으면서 지방세포의 분화를 촉진하였다.

(2) 백화사설초 추출물의 인간의 중간엽줄기세포의 지방세포 분화 촉진 효과의 정량적 측정

(1)에서와 같이 중간엽줄기세포로부터 지방세포의 분화를 유도하되, 7개의 군으로 나누어 A군에는 인슐린 1 μg/ml 만 처리하고(대조군), B 군에는 인슐린 1 μg/ml, DEXA 1 μM 및 IBMX 0.5 mM (하기 IDX)를 처리하였으며, C군은 양성 대조군으로서 IDX 외에 글리벤클라마이드 10 μM을 처리하였다. D, E, F 군은 IDX 과 백화사설초 추출물을 각각 3, 10, 30 ppm을 처리하였다. G군은 또 다른 양성 대조군으로서 IDX 외에 트로글리타존 2 μM을 처리하였다. 지방세포 분화 정도를 측정하기 위해, (1)에서와 같이 지방세포를 오일레드오로 염색한 후, 염색된 오일레드오를 100% 이소프로판올 용액으로 용출시킨 다음 500 nm의 파장에서 흡광도를 측정하였으며, 그 결과를 도 2에 나타내었다(각 데이터 값은 인슐린 대조군으로 보정하 였다).

도 2에서 볼 수 있는 바와 같이, IDX 에 의해 지방세포로의 분화를 유도한 경우, 백화사설초 추출물이 처리되지 않은 것에 비해 중간엽줄기세포의 지방세포 분화가 각각 10, 30 ppm의 백화사설초 추출물이 처리된 실험군에서 12%, 20% 정도 증가하였다. 양성 대조군으로 글리벤클라마이드를 10 mM 처치 하였을 때는 25%, 트로글리타존 2 mM 을 처치했을 때는 32% 정도 증가하였다. 이 결과로부터, 백화사설초 추출물 30 ppm 처치 시 인간의 골수 중간엽줄기세포의 지방세포 분화를 용량 의존적으로 촉진한다는 것을 확인할 수 있었다. 이러한 증가는 통계적으로 유의하였으며, 통계는 양측 표준 T 테스트로 검증하였으며, p 값이 0.05 이하일 때 유의적인 차이가 있다고 표시하였다.

하기에 상기 조성물의 제형예를 설명하나, 이는 발명을 한정하고자 함이 아니라 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.

[제형예 1] 정제의 제조

상기 실시예 1에서 제조한 백화사설초 추출물 100mg, 락토오스 400mg, 옥수수 전분 400mg 및 스테아린산 마그네슘 2mg을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.

[제형예 2] 캡슐제의 제조

상기 실시예 1에서 제조한 백화사설초 추출물 100mg, 락토오스 400mg, 옥수수 전분 400mg 및 스테아린산 마그네슘 2mg을 혼합한 후, 통상의 캡슐제의 제조 방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.

도 1은 백화사설초 추출물 처리 후 중간엽줄기세포를 관찰한 현미경 사진이다.

도 2는 백화사설초 추출물에 의한 지방세포 분화 촉진 결과를 보여주는 그래프이다.

Claims

백화사설초 추출물을 유효성분으로 함유하고, 피부함몰 또는 피부가 상실된 부분에 지방조직을 증가시키는 경구용 약학 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 피부 함몰 또는 피부가 상실된 부분은 상처 또는 암에 의한 것임을 특징으로 하는 경구용 약학 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 조성물은 중간엽 줄기세포(mesenchymal stem cell)가 지방세포로 분화되는 것을 촉진하는 것임을 특징으로 하는 경구용 약학 조성물.
제 3항에 있어서, 상기 중간엽 줄기세포가 인간의 중간엽 줄기세포임을 특징으로 하는 경구용 약학 조성물.
제 4항에 있어서, 상기 인간의 중간엽 줄기세포가 인간 골수의 중간엽 줄기세포임을 특징으로 하는 경구용 약학 조성물.