KR101074347B1 - 녹조류 추출물을 함유하는 항헬리코박터 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 녹조류 추출물을 유효성분으로 포함하는 헬리코박터 파이로리(Helicobacter pylori)에 대한 항균조성물, 상기 항균조성물을 유효성분으로 포함하는 위십이지장 질환 치료 또는 예방용 조성물, 상기 항균조성물을 유효성분으로 포함하는 위십이지장 질환 예방 또는 개선용 식품 조성물에 관한 것으로, 특히 본 발명에 따른 항균 조성물은 헬리코박터 파이로리에 대한 항균 활성이 우수할 뿐만 아니라, 천연물로부터 얻어진 추출물이므로 기존 헬리코박터 파이로리와 관련된 질환에 사용된 항생제 등과 달리 부작용 등의 문제가 없고 안전성이 뛰어나다.
Description
본 발명은 헬리코박터 파이로리(Helicobacter pylori)균에 대한 항균활성을 갖는 조성물에 관한 것이다.
1970년대 초 호주의 병리학자 Warren과 Strickland는 위염을 악성빈혈을 동반하는 자가면역질환의 일종인 A형과 병변분포가 A형과 다르고 악성빈혈에서 관측되는 여러 소견이 발견되지 않는 B형으로 분류하였다. 상기 B형 위염 환자의 위점막에는 나선형의 세균이 존재한다는 사실이 밝혀져, 위장병의 원인이 세균일 수 있다는 새로운 학설이 대두되었다. 1982년 Warren과 내과의사인 Marshall이 미생물학자인 Goodwin의 도움으로 이 나선균의 순수분리 및 배양에 성공하였고, 이후 상기 나선균과 위염, 위궤양 및 십이지장궤양 등과의 관계를 확인하는 연구가 진행되었다.
Marshall을 비롯한 학자들에 의한 연구 결과, 상기 나선균은 인체에 무해하게 서식하는 정상 세균총의 일원이 아닌 B형 날문방(antral) 위염의 원인균으로서, 병원성 세균임을 확인하였고, 사람의 위 점막에 서식하며 다른 동물이나 인체의 다른 장기에서는 분리되지 않는 것으로 확인되었다.
상기 세균은 헬리코박터라는 새로운 속(Genus)으로 분류되었으며, 사람의 위점막에 장기간 서식하면서 만성 위축성 위염, 십이지장궤양, 위궤양을 비롯하여 위암에 이르기까지 다양한 위십이지장 질환을 유발한다는 사실이 밝혀졌다. 상기와 같은 발견은 소화성궤양의 병인론과 발병기전에 대한 이제까지의 개념을 크게 변화시키는 계기가 되었다.
구체적으로, 현재 헬리코박터 파이로리(Helicobacter pylori)는 상부위장관 질환 특히 소화성궤양과 위암과 관련된 것으로 알려져 있으며, 헬리코박터 파이로리 감염 및 이의 치료 또는 예방에 대한 관심은 점차 증가하고 있다. 특히, 1994년 IARC(International Agency for Research on Cancer) 및 세계보건기구는 헬리코박터 파이로리를 발암인자(class I carcinogen)로 규정하였고, 이와 관련하여 위암의 예방 및 진단과 관련하여, 헬리코박터 파이로리의 감염 여부는 매우 중요한 문제로 받아들여지고 있으며, 헬리코박터 파이로리의 감염 인자를 규명하는 것은 국민 보건을 위하여 중요한 문제로 받아들여지고 있다.
헬리코박터 속에 속하는 헬리코박터 파이로리와 유사한 균종은 현재까지 약 20여종이 보고되었으며, 계속하여 헬리코박터 속에 속하는 많은 새로운 균종이 확인될 것으로 예상되고 있다.
또한, 헬리코박터 파이로리는 우수한 운동성과 요소분해효소(urease) 생성능을 가지는 것으로 확인되었다.
상기 운동성과 관련하여, 헬리코박터 파이로리는 대장균(E. coli) 보다 약 20배 이상의 높은 점도에서도 운동성을 나타낼 정도로 강력한 운동성을 나타내며, 이러한 강력한 운동성은 에탄올 등과 같은 몇 가지 화합물 외에는 수소이온 같은 간단한 화합물도 침투하기 어려운 위점액층을 뚫고 들어가 위점막 상피세포의 접합부에 부착하여 살아갈 수 있는 능력을 제공하는 것으로 추정되고 있다.
상기 요소분해효소는 요소를 암모니아와 이산화탄소로 분해하는 효소로, 요소분해효소에 의해 요소가 분해되는 경우 주변 환경의 pH가 상승될 수 있다. 상기 헬리코박터 파이로리가 생성하는 요소분해효소(urea amidohydrolase, EC 3.5.1.5)는 헬리코박터 파이로리가 생산하는 단백질 중 약 6%를 차지하며, 상기 헬리코박터 파이로리의 요소분해효소는 요소에 대한 친화도가 다른 세균이나 식물의 요소분해효소에 비하여 약 20배 정도 높고, 요소로부터 암모니아를 생성할 수 있어, 헬리코박터 파이로리의 서식처인 위점막의 산성을 중화시키기 때문에 위내강의 염산에 의한 공격을 방어하여 위점막에서 서식할 수 있는 것으로 추정되고 있다. 즉, 상기 헬리코박터 파이로리의 요소분해효소는 인체 위점막의 혈장삼출액이나 조직액 내에 있는 요소를 분해하여 강산인 위액을 중화시켜 헬리코박터 파이로리가 생존할 수 있는 환경을 만드는 것으로 추정되고 있다. 이러한 위액의 중화에 의해 위점막에 번식한 헬리코박터 파이로리는 위점막의 점액층을 약화시켜 점막이 위산이나 펩신의 자극에 의해 쉽게 손상될 수 있게 하고, 궤양이 재발될 수 있는 환경을 만드는 것으로 보고되어 있다. 따라서, 상기 헬리코박터 파이로리의 요소분해효소의 활성을 저해하여, 헬리코박터 파이로리의 증식을 억제함으로써, 헬리코박터 파이로리에 의해 유발되는 위장질환 등을 억제 또는 예방하고자 하는 연구가 진행되고 있다.
미국이나 호주와 같은 선진국에서는 20세 이전에는 헬리코박터 파이로리에 의한 감염이 드물게 나타나지만, 60세 이후에는 40 내지 60%의 감염율을 나타낸다고 보고되었으며, 개발도상국의 경우에는 20세 이전에 약 80% 정도가 헬리코박터 파이로리에 의해 감염되어 있는 것으로 보고되고 있다.
또한, 대한 헬리코박터 파이로리 연구회에서 1998년 상부위장관 증상이 없는 사람 5,732명을 대상으로 시행한 전국 역학조사 결과에 따르면, 헬리코박터 파이로리 감염률은 전 국민에서 46.6%였으며, 16세 이상의 성인에서 69.4%, 특히 40대에서 78.5%라는 높은 감염률을 보이는 것으로 확인되었다. 또한, 소화성 궤양 환자 1,031명을 대상으로 헬리코박터 파이로리 감염률을 조사한 결과, 위궤양 환자의 66% 및 십이지장궤양 환자의 79%가 헬리코박터 파이로리에 감염된 것으로 확인되었고, 전체 위 및 십이지장 동반궤양 환자의 71%가 헬리코박터 파이로리에 감염된 것으로 확인하였다.
현재까지 헬리코박터 파이로리에 대한 치료 또는 예방제로 사용된 제제는 비스무스(Bismuth) 제제, 메트로니다졸(Metronidazole) 제제, 테트라사이클린(Tetracycline) 제제, 아목시실린(Amoxicillin) 제제, 클리트로마이신(Clarithromycin) 제제, 시프로프록사신 제제 및 프로톤 펌프 저해제(proton pump inhibitor) 등이 있다. 이중, 현재 헬리코박터 파이로리의 감염을 치료하기 위하여 현재 가장 널리 쓰이는 헬리코박터 파이로리 제균 요법은 강력한 위산 분비 억제제인 프로톤 펌프 저해제(proton pump inhibitor, PPI)와 상기 항생제 중, 아목시실린(Amoxicillin) 제제및 클리트로마이신(Clarithromycin) 제제를 함께 사용하는 PPI 삼제 병합요법이다. 상기 PPI 삼제 병합요법은 초창기에는 효과적으로 헬리코박터 파이로리를 제균하는 것으로 인정받았었다.
그러나, 최근 보고에 의하면 상기 PPI 삼제 병합요법에 사용되는 제제에 대한 항생제 내성률이 증가하여, 그 제균율이 감소된 것으로 보고되고 있다. 상기 항생제 내성률의 증가로 인한 제균율을 감소시키기 위하여, PPI와 비스무스(Bismuth) 제제를 함께 사용하는 방법이나, Rifabutin bismuth을 함께 사용하는 방법이 제시되고 있으나, PPI와 비스무스(Bismuth) 제제를 함께 사용하는 방법은 제균 실패율이 높고, 높은 부작용이 있는 것으로 보고되고 있으며, Rifabutin bismuth의 경우 백혈구와 혈소판 감소증과 골수 부작용 및 결핵균에 대한 내성 출현 가능성 등이 보고되고 있다.
따라서, 만성 위축성 위염, 십이지장궤양, 위궤양을 비롯하여 위암에 이르기까지 다양한 위십이지장의 치료 또는 예방 효과를 가지면서, 기존에 보고된 항균물질과 달리 부작용이 없고 내성이나 안정성에 대한 문제가 대두되지 아니하며, 복용이 용이한 헬리코박터 파이로리 항균 조성물에 대한 개발 요구가 커지고 있는 실정이다. 특히, 제 외국의 연구 동향과 같이 우리나라에서 생산되는 천연물을 위주로 헬리코박터 파이로리에 대한 항균활성을 갖는 물질에 대한 연구가 절실하게 요구되고 있다.
본 발명은 상기와 같은 종래기술의 문제점을 해결하기 위한 것으로서, 본 발명은 녹조류 추출물을 유효성분으로 포함하는 헬리코박터 파이로리(Helicobacter pylori)에 대한 항균조성물, 상기 항균조성물을 유효성분으로 포함하는 위십이지장 질환 치료 또는 예방용 조성물, 상기 항균조성물을 유효성분으로 포함하는 위십이지장 질환 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 상기 목적을 달성하기 위하여 녹조류 추출물을 유효성분으로 포함하는 헬리코박터 파이로리(Helicobacter pylori)에 대한 항균조성물을 제공한다.
또한, 상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 상기 항균조성물을 유효성분으로 포함하는 위십이지장 질환 치료 또는 예방용 조성물을 제공한다.
또한, 상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 상기 항균조성물을 유효성분으로 포함하는 위십이지장 질환 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다. 본 발명의 식품 조성물의 예로는 식품, 식품첨가제, 음료 또는 음료첨가제를 들 수 있다.
이하, 본 발명을 보다 상세하게 설명한다.
본 발명의 발명자들은 헬리코박터 파이로리(Helicobacter pylori)에 대한 항균 활성이 뛰어난 항균 조성물을 인체 안전성이 확보된 천연식물 특히, 해조류 유래의 물질로부터 연구하던 중, 매생이 추출물, 참홑파래 추출물 및 구멍갈파래 추출물은 헬리코박터 파이로리에 대한 항균활성이 우수할 뿐만 아니라 요소분해효소(urease) 저해 활성을 나타내어, 헬리코박터 파이로리의 감염에 의한 만성 위축성 위염, 십이지장궤양, 위궤양을 비롯하여 위암에 이르기까지 다양한 위십이지장 질환의 치료 또는 예방 효과가 뛰어나다는 것을 실험을 통하여 확인하여, 이를 토대로 본 발명을 완성하게 되었다.
본 발명에 있어서, 녹조류(green algae)는 엽록소를 가지고 있어 녹색을 띤 조류로, 단세포, 다세포 또는 비세포성 다핵체 등 여러 가지가 있다. 상기 녹조류는 바람직하게는 매생이(Capsosiphon fulvescens), 참홑파래(Monostroma nitidum) 및 구멍갈파래(Ulva pertusa)로 이루어진 군 중에서 선택된 1종 이상일 수 있다.
상기 매생이(Capsosiphon fulvescens)는 주로 우리나라 완도, 부산 등의 남해안 지역에 서식, 분포하고 있으며 갈파래목 매생이속에 속하는 녹조류이다. 10월 중순경부터 출현하기 시작하여 겨울 동안 번성하다 4월부터 쇠퇴하며, 성장기간 동안 계속 번식한다. 지형적으로 조류가 완만하고 물이 잘 드나드는 지역 중에서 오염되지 않은 깨끗한 지역에 주로 서식한다. 채취는 주로 11월에 시작하여 이듬해 2월까지 이루어진다. 특유의 향기와 맛을 지니고 있어 오래전부터 식용으로 사용되었다.
상기 참홑파래(Monostroma nitidum)는 파도가 조용한 곳의 조간대 상부에 군락을 이루는 녹조류이다. 몸은 막상이고, 뿌리로써 부착하며, 선록색으로 광택이 있고, 체형은 불규칙하며 열편을 이루고 주름이 있으며, 오래전부터 식용으로 사용되어져 왔다.
상기 구멍갈파래(Ulva pertusa)는 갈파래목(Ulvales) 갈파래과(Ulvaceae)에 속하는 녹조류로 갈파래의 대표적인 종이다. 구멍갈파래의 엽체는 단독 또는 2 내지 3개씩 뭉쳐서 나고, 2층의 세포층을 가지며 몸은 불규칙한 넓은 엽상이고 큰 주름살이 있고 가장자리는 다소 파상을 이룬다. 조간대 하부에 큰 군락을 이루며 겨울에서 다음해 늦가을에 걸쳐 번무하며, 여름에는 쇠퇴하여 저조선하에 주로 남게 되며 연중 생육하고, 우리나라 전 연안의 각지에 분포하는 것으로 알려져 있다. 구멍갈파래는 예로부터 식용 또는 사료 등으로 사용되어왔다.
본 발명의 녹조류 추출물은 추출용매로 추출하거나 추출용매로 추출하여 제조한 조추출물에 분획용매를 가하여 분획하여 제조할 수 있다.
상기 추출용매는 물 및 유기용매로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있다. 상기 유기용매는 메탄올, 에탄올 등의 탄소수 1 내지 5의 알코올, 에틸아세테이트 또는 아세톤 등의 극성용매와 에테르, 클로로포름, 벤젠, 헥산 또는 디클로로메탄의 비극성용매 또는 이들의 혼합용매일 수 있다.
본 발명의 녹조류 추출물의 추출용매는 바람직하게는 물 및 탄소수 1 내지 4의 알코올로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 용매일 수 있고, 더욱 바람직하게는 50 내지 99%의 에탄올 등의 탄소수 1 내지 4의 알코올 수용액, 더더욱 바람직하게는 75 내지 97% 에탄올 등의 탄소수 1 내지 4의 알코올 수용액일 수 있다.
본 발명의 녹조류 추출물은 통상의 해조류 추출물의 제조방법에 따라 제조된 것일 수 있으며, 구체적으로는 냉침추출법, 온침추출법 또는 열 추출법 등일 수 있으며, 통상의 추출기기, 초음파분쇄 추출기 또는 분획기를 이용할 수 있다.
또한, 상기 용매로 추출한 추출물은 이후, 헥산, 메틸렌클로라이드, 아세톤, 에틸아세테이트, 에틸에테르, 클로로포름, 물 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 용매로 분획과정을 더욱 실시할 수 있다. 상기 분획용매는 바람직하게는 에탄올 수용액, 물, 에틸아세테이트 및 클로로포름으로 이루어진 군에서 선택된 1 이상일 수 있다.
또한, 상기 분획과정은 일례로, 4℃ 내지 120℃, 또는 50℃ 내지 90℃, 또는 60℃ 내지 80℃에서 수행될 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다.
본 발명에 있어서, 헬리코박터 파이로리에 대한 항균 활성 및 유레아제(urease) 즉, 요소분해효소의 저해 활성을 고려하면, 녹조류 추출물은 매생이 추출물, 참홑파래 추출물 및 구멍 갈파래 추출물로 이루어진 군 중에서 선택된 1종 이상일 수 있고, 바람직하게는 항균활성이 가장 우수한 매생이 추출물이거나 항균활성이 우수한 매생이 추출물과 유레아제 저해활성이 우수한 참홑파래 추출물의 혼합물일 수 있으며, 가장 바람직하게는 항균활성이 가장 우수한 매생이 추출물일 수 있다.
상기 제조된 추출물 또는 상기 분획과정을 수행하여 수득한 분획물은 이후 여과하거나 농축 또는 건조과정을 수행하여 용매를 제거할 수 있으며, 여과, 농축 및 건조를 모두 수행할 수 있다. 구체적으로 상기 여과는 여과지를 이용하거나 감압여과기를 이용할 수 있으며, 상기 농축은 감압 농축기, 일례로 회전 증발기를 이용하여 감압 농축할 수 있으며, 상기 건조는 일례로 동결건조법으로 수행할 수 있다.
본 발명은 녹조류 추출물을 유효성분으로 포함하는 헬리코박터 파이로리(Helicobacter pylori)에 대한 항균조성물에 관한 것이다.
본 발명에 있어서, 항균조성물이란 항미생물제를 총칭하는 의미인 항생제와 같은 의미일 수 있고, 항진균제, 살균제, 방부제, 보존제 또는 제균제와 같은 의미일 수 있으며, 바람직하게는 위십이지장 질환의 원인이 되는 헬리코박터 파이로리의 발육과 생활 기능을 저지 또는 억제할 수 있는 물질을 의미한다.
상기 녹조류 추출물은 매생이 추출물, 구멍갈파래 추출물 및 참홑파래추출물로 이루어진 군 중에서 선택된 1종 이상일 수 있다.
상기 항균조성물에 포함된 상기 녹조류 추출물의 함량은 조성물 총 중량에 대하여 0.001 내지 50 중량%, 바람직하게는 0.1 내지 30 중량%일 수 있으나, 상기 항균조성물의 사용방법 및 사용목적에 따라 유효성분의 함량을 적절히 조절할 수 있다.
본 발명의 항균조성물은 녹조류 추출물 외에 당질, 단백질, 지질, 비타민류 및 미네랄류를 포함할 수 있다. 상기 당질, 단백질, 지질, 비타민류 또는 미네랄류는 그 사용 목적 및 용도에 따라 적의 선택될 수 있으며, 일례로 상기 당질은 벌꿀, 덱스트린, 수크로오스, 팔라티노스, 포도당, 과당, 물엿, 당알콜(sugar alcohol), 소르비톨, 크실리톨, 말티톨일 수 있고 상기 단백질은 카제인(casein), 유청 단백질(whey protein) 등의 우유 유래 단백질, 대두 단백질, 이들 단백질의 트립신, 펩신 등의 동물 유래 효소 및 뉴트라아제(neutrase), 알칼라아제(alkilase)에 의한 가수분해물일 수 있으며, 상기 지질은 제1가 포화지방산, 다가 불포화지방산을 포함하는 해바라기유, 채종유(rapeseed oil), 올리브유, 홍화유(safflower oil), 옥수수유, 대두유, 팜유(palm oil), 야자유 등의 각종 식물 유래 유지, 중쇄 지방산(middle-chain fatty acid), EPA, DHA, 대두유래 인지질, 우유 유래 인지질일 수 있고, 상기 미네랄류는 인산칼륨, 탄산칼륨, 염화칼륨, 염화나트륨, 유산칼슘, 글루콘산칼슘, 판토텐산칼슘, 카제인칼슘, 염화마그네슘, 황산제1철, 탄산수소나트륨일 수 있으나, 각각의 예에 의해 특별히 제한되는 것은 아니다.
상기 당질, 단백질, 지질, 비타민류 및 미네랄류 중 어느 것에 대해서도, 조성물의 항균성이 유지되는 한 상기 구체예에 한정되지 않고 다른 성분을 포함할 수 있으며, 각각의 함량은 항균성이 유지되는 한 제한되지 아니하고, 바람직하게는 전체 조성물 대비 0.1 내지 15 중량%, 바람직하게는 0.5 내지 10 중량%일 수 있다.
또한, 상기 항균조성물은 본 발명의 효과를 유지하고, 상기 첨가되는 성분에 의한 부작용을 발행시키지 아니하는 범위에서, 상기 유효성분 외에 헬리코박터 파이로리의 살균 목적을 위한 첨가제, 바람직하게는 헬리코박터 파이로리에 대한 살균 활성이 인정된 물질을 추가로 포함할 수 있으며, 상기 추가 성분 또는 첨가제는 조성물의 다른 구성으로 방해될 수 없게 제공될 수 있다.
본 발명의 상기 항균조성물은 항균 활성이 요구되는 다양한 목적 및 용도로 사용될 수 있고, 구체적으로는 헬리코박터 파이로리의 생육억제를 위한 용도로 사용될 수 있으며, 바람직하게는 헬리코박터 파이로리에 대한 항생제 또는 상기 헬리코박터 파이로리가 원인균인 위십이지장 질환의 치료, 예방 또는 개선의 목적으로 사용될 수 있다.
보다 구체적으로, 본 발명의 항균조성물은 위십이지장 질환의 원인이 되는 상기 헬리코박터 파이로리에 대한 항균활성이 인정되고, 상기 헬리코박터 파이로리의 위의 생육을 위해 요구되는 요소분해효소의 저해능이 인정되어서, 위십이지장 질환의 치료, 개선 또는 예방에 현저하게 우수한 효과가 있는 것으로 확인되었으므로, 위십이지장 질환의 예방 또는 치료용 조성물이나 위십이지장 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물에 응용할 수 있다.
본 발명은 또한, 상기 항균조성물을 유효성분으로 포함하는 위십이지장 질환의 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다. 본 발명의 녹조류 추출물은 위십이지장 질환의 원인균인 헬리코박터 파이로리에 대한 항균 활성이 인정되고, 헬리코박터리 파이로리의 요소분해효소를 저해할 수 있으므로, 상기 항균조성물은 위십이지장 질환에 대한 예방 및 치료 효과를 갖는다.
본 발명에 있어서, 위십이지장 질환이란 헬리코박터 파이로리에 의해 유발되고, 위 또는 십이지장 부위에 발생하는 질환을 의미하며, 소화성 궤양과 위암을 포함하는 것일 수 있고, 바람직하게는 위염, 십이지장염, 위궤양, 십이지장궤양, 위선암, 위림프종 및 위암으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있으며, 상기 위염은 바람직하게는 만성 위축성 위염일 수 있다. 헬리코박터 파이로리가 발견된 이후로, 상기 위십이지장 질환의 주 원인균은 헬리코박터 파이로리로 보고되고 있다. 상기 헬리코박터파이로리는 위점막 구체적으로는 상피세포 및 점막층에 주로 결합하여, 서식하는 것으로 알려져 있다. 따라서, 상기 위십이지장 질환을 치료하기 위해서는 원인균인 헬리코박터 파이로리에 대한 항균활성이 뛰어나거나, 상기 헬리코박터 파이로리에 대한 항균활성 및 상기 헬리코박터 파이로리의 요소분해효소(urease) 저해능이 우수한 물질을 처방할 수 있다.
본 발명의 위십이지장 질환 예방 또는 치료용 조성물은 인간에 직접 적용될 수 있다. 상기 헬리코박터 파이로리균은 인간의 위점막에서만 서식하므로, 상기 위십이지장 질환의 예방 또는 치료용 조성물의 적용대상은 인간일 수 있다.
상기 위십이지장 질환 예방 또는 치료용 조성물은 상기 항균조성물을 유효성분으로 단독으로 포함할 수 있고, 이외 제형, 사용방법 및 사용목적에 따라 추가성분 즉, 약제학적으로 허용되거나 영양학적으로 허용되는 담체, 부형제, 희석제 또는 부성분을 추가로 포함할 수 있다.
보다 상세하게는 상기 위십이지장 질환 예방 또는 치료용 조성물은 상기 유효성분 외에 추가로 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 중진제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 추가로 함유할 수 있다. 또한, 상기 담체, 부형제 또는 희석제는 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자이리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아키시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 미정질 셀루로오스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸하이드록시벤조에이트, 프로필하이드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유, 덱스트린, 칼슘카보네이트, 프로필렌글리콜, 리퀴드 파라핀, 생리식염수로 이루어진 군에서 선택된 1이상 일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니며 통상의 담체, 부형제 또는 희석제 모두 사용가능하다. 상기 성분들은 상기 유효성분인 항균조성물에 독립적으로 또는 조합하여 추가될 수 있다.
상기 위십이지장 질환 예방 또는 치료용 조성물은 조성물 총 중량에 대하여 상기 항균조성물을 0.001 중량% 내지 99.9 중량%, 바람직하게는 0.1 중량% 내지 99 중량%, 더욱 바람직하게는 1 중량% 내지 50 중량% 포함될 수 있다. 또한, 상기 추가성분의 함량은 바람직하게는 상기 항균 조성물 100 중량부 당 0.1 내지 20 중량부 범위에서 추가할 수 있다.
또한, 상기 위십이지장 질환 예방 또는 치료용 조성물은 약제화하는 경우, 통상의 충진제, 증량제, 결합제, 붕해제, 계면활성제, 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제 또는 방부제 등을 더욱 포함할 수 있으며, 경구 또는 비경구 모두 사용할 수 있다.
구체적으로 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 항균조성물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제 예를 들면, 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
또한, 본 발명의 위십이지장 질환 예방 또는 치료용 조성물의 제형은 사용방법에 따라 바람직한 형태일 수 있으며, 특히 포유동물에 투여된 후 활성 성분의 신속, 지속 또는 지연된 방출을 제공할 수 있도록 당업계에 공지된 방법을 채택하여 제형화할 수 있다. 구체적인 제형의 예로는 과립제, 산제, 시럽제, 액제, 현탁제, 정제, 주사제, 주정제, 카타플라스마제(cataplasma), 캅셀제, 연질 또는 경질 젤라틴 캅셀 등이 있다.
더 나아가 본 발명의 위십이지장 질환 예방 또는 치료용 조성물은 당해 기술 분야의 공지된 적절한 방법을 사용하여 또는 레밍턴의 문헌(Remington's Pharmaceutical Science(최근판), Mack Publishing Company, Easton PA)에 개시되어 있는 방법을 이용하여 바람직하게 제형화될 수 있다.
본 발명에 따른 위십이지장 질환 예방 또는 치료용 조성물의 투여량은, 투여방법, 복용자의 연령, 성별 및 체중, 및 질환의 중증도 등을 고려하여 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 일례로, 본 발명의 위십이지장 질환 예방 또는 치료용 조성물은 상기 항균조성물을 기준으로 할 때, 0.0001 mg/kg 내지 1000 mg/kg으로, 보다 효과적이기 위해서는 0.01 mg/kg 내지 100 mg/kg으로 투여할 수 있다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
또한, 본 발명의 위십이지장 질환 예방 또는 치료용 조성물은, 상기 항균조성물 이외에 공지의 위십이지장 질환의 억제활성을 갖는 화합물 또는 천연물에 대한 추출물을 더욱 포함할 수 있으며, 상기 항균조성물 100 중량부에 대하여 각각 5 중량부 내지 500 중량부로 포함될 수 있다.
또한, 상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 상기 항균조성물을 유효성분으로 포함하는 위십이지장 질환 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
본 명세서에서 식품이란 영양소를 한 가지 또는 그 이상 함유하고 있는 천연물 또는 가공품을 의미하며, 바람직하게는 어느 정도의 가공 공정을 거쳐 직접 먹을 수 있는 상태가 된 것을 의미하며, 통상적인 의미로서, 건강기능식품, 음료, 식품 첨가제 및 음료 첨가제 등을 모두 포함하는 의도이다.
본 발명의 식품은 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강기능식품 등이 있다. 추가로, 본 발명에서 식품에는 특수영양식품(예, 조제유류, 영,유아식 등), 식육가공품, 어육제품, 두부류, 묵류, 면류(예, 라면류, 국수류 등), 건강보조식품, 조미식품(예, 간장, 된장, 고추장, 혼합장 등), 소스류, 과자류(예, 스넥류 등), 유가공품(예, 발효유, 치즈 등), 기타 가공식품, 김치, 절임식품(각종 김치류, 장아찌 등), 음료(예, 과실,채소류 음료, 두유류, 발효음료류, 유산균 등), 천연조미료(예, 라면스프 등)을 포함하나 이에 한정되지 않는다. 상기 식품, 건강기능식품, 음료, 식품 첨가제 및 음료 첨가제는 통상의 제조방법으로 제조될 수 있다.
본 발명에서 건강기능식품이란 식품에 물리적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 이용하여 해당 식품의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 식품군이나 식품 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병방지와 회복 등에 관한 체조절기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 식품을 의미한다.
상기 건강기능식품에는 식품학적으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제를 포함할 수 있으며, 건강기능식품의 제조에 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더욱 포함할 수 있다.
본 발명에서 음료란 갈증을 해소하거나 맛을 즐기기 위하여 마시는 것의 총칭을 의미하며 건강기능음료를 포함하는 의도이다. 상기 음료는 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 항균 조성물을 유효성분으로 포함하는 것 외에 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며, 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.
상기의 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어 포도당, 과당 등 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 수크로스 등 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알코올이다. 상기한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 식품 조성물 100㎖ 당 일반적으로 약 1 내지 20g, 바람직하게는 5 내지 12g일 수 있다. 그밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일 주스, 과일 쥬스 음료, 야채 음료의 제조를 위한 과육을 추가로 함유할 수 있다.
상기 외에 본 발명의 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 이러한 성분을 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하지 않지만, 본 발명의 항균 조성물 100 중량부 당 0 내지 20 중량부 범위에서 선택될 수 있다.
본 발명에서 건강기능음료란 음료에 물리적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 이용하여 해당 음료의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 음료 군이나 음료 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병방지와 회복 등에 관한 체조절기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 음료를 의미한다.
상기 건강기능음료는 지시된 비율로 필수 성분으로서 본 발명의 항균 조성물을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.
상기 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어 포도당, 과당 등 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 수크로스 등 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알코올이다. 상기한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100㎖ 당 일반적으로 약 1 내지 20 g, 바람직하게는 5 내지 12 g이다.
또한, 위십이지장 질환의 예방 또는 개선의 효과를 목적으로 하는 식품 조성물에 있어서, 상기 항균 조성물의 양은 전체 식품 중량의 0.01 내지 15 중량%로 포함할 수 있으며, 음료 조성물은 100 ㎖를 기준으로 0.02 내지 5 g, 바람직하게는 0.3 내지 1g의 비율로 포함할 수 있다.
본 발명의 매생이 추출물, 참홑파래 추출물 및 구멍갈파래 추출물은 헬리코박터 파이로리에 대한 우수한 항균활성 및 우수한 요소분해효소 저해활성을 가질 뿐만 아니라, 식용가능한 천연 해조류의 추출물이므로 독성 및 부작용의 문제가 발생되지 아니하여, 헬리코박터 파이로리에 의한 위장질환을 포함한 다양한 질환의 치료 또는 예방 목적으로 광범위하게 사용될 수 있다.
상술한 바와 같이, 본 발명의 녹조류 추출물 특히, 매생이 추출물, 참홑파래 추출물 및 구멍갈파래 추출물은 헬리코박터 파이로리 균에 대한 우수한 항균 활성을 나타내었고, 헬리코박터 파이로리의 요소분해효소를 억제할 수 있는 것으로 확인되어, 위십이지장질환의 치료, 예방 또는 개선에 유용하게 사용될 수 있을 뿐만 아니라 인체에 부작용을 발생시키지 않고, 항생제 내성의 문제도 발생시키지 아니하므로, 의약 조성물 또는 기능성 식품 조성물로 효과적으로 사용될 수 있다. 또한, 우리나라 남해안에서 풍부하게 서식하는 해조류를 이용하는 것이므로 경제적으로도 유리하여 산업적으로 그 효과가 매우 크다 할 것이다.
이하, 본 발명을 상세히 설명하기 위하여 본 발명의 바람직한 실시예를 기재한다. 하기의 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐 본 발명의 권리범위가 하기 실시예에 의해 어떤 식으로든 제한되는 것은 아니며, 당업계에서 통상적으로 수행되어지는 변형 등도 본 발명의 범위 내에 포함된다.
[
실시예
]
실시예
1: 해조류 추출물의 제조
헬리코박터 파이로리(Helicobacter pyroli)에 대한 항균활성을 갖는 해조류를 확인하는 시험에 사용한 해조류, 구체적으로 매생이, 참홑파래, 구멍갈파래, 청각(Codium fragile), 잎파래(Enteromorpha linza), 대황(Eisenia bicyclis), 톳(Hizikia fusiformis), 지충이(Sargassum thunbergii), 미역쇠(Petalonia binghamiae), 돌미역(Undaria pinnatifida), 돌가사리(Chondracanthus intermedia), 꼬시래기(Gracilaria verrucosa), 참지누아리(Grateloupia filicina), 참가시우무(Hypnea charoides) 및 방사무늬김(Porphyra yezoinsis)은 2007년 및 2008년에 각각 전남 장흥, 완도의 갈문리, 부산의 청사포, 제주 신양 및 제주 이호에서 채집하여 사용하였다.
상기 채집한 해조류의 엽상체는 부착생물을 제거한 후, 깨끗한 담수로 씻어 실온에서 완전히 건조시킨 다음, 마쇄기를 이용하여 분쇄하였다. 상기 분쇄한 각각의 해조류 분쇄물 20g에 95% 에탄올 1,000ml를 가하여 하루 동안 상온에서 추출하여 각각 추출액을 얻었다. 상기 추출액을 여과하여, 수득한 여액을 감압증발기를 사용하여 감압 농축하고, 20μm 필터를 이용하여 제균 처리를 수행하였으며, 상기 제균 처리한 추출물의 농도를 100mg/ml로 조절하여 각각 에탄올 추출물을 제조하였다.
상기 수득한 각 추출물은 사용 시까지 급속 냉동고(deep freezer)에서 -20℃로 보관하였다.
실시예
2: 헬리코박터
파이로리에
대한 항균 활성 측정
매생이 추출물, 참홑파래 추출물 및 구멍갈파래 추출물을 포함한 해조류 추출물의 헬리코박터 파이로리에 대한 항균 활성을 측정하기 위하여, 디스크법(Paper disc method)과 실시하였고, 이 중 항균활성을 가지는 것으로 확인된 추출물에 대해 최소저해농도법(Minimum inhibirory concentration, MIC법)을 이용하였다.
상기 헬리코박터 파이로리에 대한 항균 활성 측정에 사용된 헬리코박터 파이로리 균주는 표준균주인 Helicobacter pylori KCTC 12083을 사용하였고, 상기 균주의 배양 배지는 Brucella broth base(B3051, Sigma-Aldrich Inc,. USA)에 10% horse serum(26050, GIBCO-BRL, NY-USA)을 첨가하여 사용하였으며, 아가(agar)는 Brucella broth base에 5% horse serum을 첨가하여 제조하였고, 상기 세포의 배양조건은 미호기적 조건을 유지시켜주기 위하여 5% CO2 배양기(incubator)에서 37℃로 48시간 배양하였다. 배양기의 습도는 항상 95% 이상으로 유지하였다.
2-1: 녹조류 추출물의 항균활성 측정 1(
Paper
disc
method
)
헬리코박터 파이로리를 상기 5% horse serum을 첨가한 Brucella agar 배지에서 37℃의 조건으로 48시간 배양시킨 후, colony로부터 백금이를 이용하여 채취한 균주를 Brucella broth에 현탁하여 1.0×106cfu/mL의 농도로 희석하였다. 상기 실시예 1에서 제조한 해조류 추출물을 3mg/disc의 농도로 각각 멸균된 paper disc(8.0mm diameter, 1.5mm thickness, ADVANTEC, Japan)에 흡수시킨 후, 30분 이상 방치하여 휘발시켰다. 상기 균주 희석액 0.1mL를 5% horse serum이 첨가된 brucella agar plate 표면 위에 균일하게 펼쳐서 제조된 헬리코박터 파이로리 고체 배양배지 위에 상기 추출물을 분주한 disc를 놓고 37℃의 조건에서 CO2 배양기를 이용하여 48시간동안 배양하였다. 그 후, disc 주위의 저해환(inhibition zone)의 발생여부를 확인하여, 그 결과를 하기 표 1에 나타내었다. 하기 표 1에 항균활성이 있는 균주 즉, 저해환이 발생한 균주의 경우 O라 표시하고, 항균활성이 없는 균주의 경우 X라 표시하였다.
해조류명 | 매생이 | 청각 | 잎파래 | 대황 | 톳 |
활성여부 | O | X | X | X | X |
해조류명 | 참홑파래 | 지충이 | 미역쇠 | 돌미역 | 돌가사리 |
활성여부 | O | X | X | X | X |
해조류명 | 구멍갈파래 | 꼬시래기 | 참지누아리 | 참가시우무 | 방사무늬김 |
활성여부 | O | X | X | X | X |
상기 표 1에 기재된 바와 같이, 대부분의 해조류에서 헬리코박터 파이로리에 대한 항균활성이 나타나지 아니하였으나, 매생이 추출물, 참홑파래 추출물 및 구멍갈파래 추출물의 경우에는 헬리코박터 파이로리에 대한 항균활성이 인정되었다.
상기 항균활성이 인정된 매생이 추출물, 참홑파래 추출물 및 구멍갈파래 추출물에 대해서 헬리코박터 파이로리에 대한 항균활성의 인정여부 및 정도를 측정하기 위하여 추가 실험을 진행하였다.
상기와 동일한 방법으로 실험을 수행하되, 상기 매생이 추출물, 참홑파래 추출물 및 구멍갈파래 추출물을 1mg/disc, 3mg/disc, 5mg/disc의 농도로 각각 멸균된 paper disc(8.0mm diameter, 1.5mm thickness, ADVANTEC, Japan)에 흡수시킨 후, 30분 이상 방치하여 휘발시켜, disc를 제조하고, 상기 제조된 disc를 이용하여 상기와 같은 방법으로 디스크법을 수행한 뒤, disc 주위의 저해환(inhibition zone)의 크기(mm)를 측정하였으며, 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.
저해환 크기(mm) | 수율(%) | |||
시료 농도(mg/disc) | ||||
1 | 3 | 5 | ||
매생이 추출물 | 5.5 | 10.0 | 10.8 | 1.1 |
참홑파래 추출물 | 3.25 | 7.5 | 10.0 | 5.9 |
구멍갈파래 추출물 | 6.0 | 10.0 | 11 | 1.2 |
상기 표 2에 기재된 바와 같이, 상기 해조류 추출물의 비교실험에서 항균활성이 인정된 매생이 추출물, 참홑파래 추출물 및 구멍갈파래 추출물의 헬리코박터 파이로리에 대한 항균활성이 다시 인정되었고, 상기 항균활성은 농도의존적으로 항균활성이 증가하는 것으로 확인되어, 상기 추출물이 상기 항균활성의 유효성분임이 확인되었다. 또한, 전체적인 항균활성의 경향이 상기 매생이 추출물, 참홑파래 추출물 및 구멍갈파래 추출물 중에서, 매생이 추출물의 항균활성이 가장 우수한 것으로 확인되었다.
2-2: 녹조류 추출물의 항균활성 측정 2(최소저해농도측정법,
Minimum
inhibitory
concentration,
MIC
)
상기 실시예 1에서 제조된 해조류 추출물 중, 실시예 2-1을 통하여 헬리코 박터파이로리에 대한 항균활성을 갖는 것으로 인정된 추출물, 참홑파래 추출물 및 구멍갈파래 추출물에 대하여, 액체배지감수성실험(Broth Microdilution Susceptibility Tests)법을 이용하여 상기 시료 즉, 상기 추출물, 참홑파래 추출물 및 구멍갈파래 추출물의 농도를 2배씩 연속희석(two-fold serial dilution)하면서 상기 시료의 최소저지농도(Minimum Inhibitory Concentration, MIC)를 측정하는 방법으로 헬리코박터 파이로리(Helicobacter pylori)에 대한 항균활성을 측정하였다.
상기 액체배지감수성 실험법은 NCCLS Guide Line M7-A6을 응용하였다(National Committee for Clinical Laboratory Standards, Reference methods for antimicicrobial susceptibility testing of aerobic bacteria; Approved Standard-6th eds., Vol.23, NCCLS Document M7-A6. Pennsylvania, NCCLS(2003)).
보다 상세하게는, 최소저지농도를 측정하기 위한 시료는 상기 실시예 1에서 제조된 시료 즉, 녹조류에 대한 에탄올 추출물에 대하여 무균 여과처리를 수행한 후에, 최고 농도 12.5mg/mL에서 최저 0.375μg/mL에 이르도록 2배씩 연속희석하여 제조하였다.
또한, 대상 시험균주인 헬리코박터 파이로리의 대상 균액은 상기 균주를 활성화시키기 위해, Brucella broth base에 10% horse serum을 첨가한 액체배지에서 72시간 동안 전배양하고, 맥파란(Mcfarland) 0.5로 탁도를 조절한 후에, 상기 균주의 세포수가 약 1×106 CFU/mL가 되도록 희석액인 상기 액체배지를 이용하여 희석하여 준비하였다.
상기 2배씩 연속희석하여 제조한 시료를 96-well U-form micro plate(Falcon, USA)의 각 well에 100μL씩 넣고, 상기 최종농도가 약 1×106 CFU/mL가 되도록 조절한 대상 균액을 각 well에 100μL씩 첨가하였다.
상기 각 시료를 첨가한 후, 37℃의 조건에서 CO2 incubator를 이용하여 2일간 배양한 후, 균의 성장 정도를 육안 및 도립현미경(Inverted microscope TMS, Nikon)으로 관찰하여 최소저지농도(MIC)를 결정하였고, 모든 시험은 독립적으로 3회 반복하였다. 상기 실험에 의해 측정된 최소저지농도(MIC)의 평균값으로 나타낸 헬리코박터 파일로리에 대한 최소저지농도를 표 3에 나타내었다.
MIC(㎍/mL) | |
매생이 추출물 | 195 |
참홑파래 추출물 | 391 |
구멍갈파래 추출물 | 391 |
상기 표 3에 나타낸 바와 같이, 디스크법(Paper disc method)과 같이 매생이 추출물이 참홑파래 추출물이나 구멍갈파래 추출물에 비하여 현저하게 우수한 항균활성을 갖는 것으로 확인되었다. 즉, 매생이 추출물의 경우 동일한 농도로 제조될 경우 참홑파래 추출물이나 구멍갈파래 추출물의 50%의 함량으로도 헬리코박터 파이로리에 대한 동일한 항균활성을 나타내는 것으로 확인되었다.
실시예
3: 헬리코박터
파이로리의
요소분해효소 저해 활성 측정
매생이 추출물, 참홑파래 추출물 및 구멍갈파래 추출물의 헬리코박터 파이로리 요소분해효소(urease) 억제활성을 측정하기 위하여, 헬리코박터 파이로리 요소분해효소의 작용에 의해 유레아(urea)로부터 방출된 암모니아가 phenol/nitroprusside와 alkaline hydrochlorite에 의해 indophenol로 전환되는 양을 정량하는 인도페놀 방법(Woo. et al., Arch. Pharm. Res., 1, pp6-11(1998)을 이용하였다.
요소분해효소는 헬리코박터 파이로리를 3일간 고체배지에서 배양한 콜로니(colony)를 회수하여 50mM potassium phosphate buffer(pH 7.5)로 2회 세척한 후 9,000×g에서 15분간 원심분리하여 얻은 상등액을 이용하였으며, 상기 효소의 단백질 함량은 Bradford 방법을 통해 정량하였다.
요소분해효소 저해활성측정은 100mM 유레아(urea)와 매생이 추출물, 참홑파래 추출물 및 구멍갈파래 추출물을 각각 농도별로를 포함하는 50mM potassium phosphate buffer(pH 7.5) 300μL에 상기 요소분해효소 용액 100μL를 가하고 37℃에서 7분간 반응시킨 후 1N H2SO4 100μL를 가하여 반응을 정지시키고 이 반응용액에 phenol-nitroprusside(P6994, Sigma-Aldrich Inc,. USA)와 Alkaline hydrocholrite(A1727,Sigma-Aldrich Inc,. USA)를 각각 2.5mL씩 순차적으로 가하고 65℃에서 20분간 반응시킨 후 630nm에서 흡광도를 측정하여 요소분해효소 억제제(urease inhibitor)를 첨가하지 않은 경우와 비교하여 억제율(%)을 계산하였으며 그 결과를 하기 표 4에 나타내었다.
시료 농도(㎍/mL) | |||
10 | 100 | 1,000 | |
매생이 추출물 | 2.11 | 2.17 | 8.13 |
참홑파래 추출물 | 0.63 | 3.32 | 18.92 |
구멍갈파래 추출물 | 3.40 | 4.98 | 10.35 |
상기 표 4에 기재된 바와 같이, 매생이 추출물, 참홑파래 추출물 및 구멍갈파래 추출물은 모두 요소분해효소 저해 활성을 나타내었고, 저해활성은 농도의존적으로 증가하는 것으로 확인되었다. 상기 표 4와 관련하여, 항균활성이 우수한 매생이 추출물과 요소분해효소가 우수한 참홑파래 추출물을 혼합하여 사용하는 경우, 헬리코박터 파이로리의 생존 및 서식을 제한하여 헬리코박터 파이로리의 감염을 제어할 수 있으므로, 헬리코박터 파이로리의 감염에 의한 위염 등의 위장질환의 치료, 예방 또는 개선에 우수한 효과를 가질 수 있을 것으로 기대된다.
제조예
: 녹조류 추출물을 이용한 제제
제조예
1.
산제의
제조
매생이 추출물 분말 20 mg
유당 100 mg
탈크 10 mg
상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.
제조예
2. 정제의 제조
참홑파래 추출물 분말 10 mg
옥수수전분 100 mg
유당 100 mg
스테아린산 마그네슘 2 mg
상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.
제조예
3. 캡슐제의 제조
구멍갈파래 추출물 분말 10 mg
결정성 셀룰로오스 3 mg
락토오스 14.8 mg
마그네슘 스테아레이트 0.2 mg
통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
제조예
4.
액제의
제조
매생이 추출물 분말 20 mg
이성화당 10 g
만니톨 5 g
정제수 적량
통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체를 정제수를 가하여 전체 100㎖로 조절한 후 갈색병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조하였다.
제조예
5. 건강기능식품의 제조
매생이 추출물 분말 1000 ㎎
비타민 혼합물 적량
비타민 A 아세테이트 70 ㎍
비타민 E 1.0 ㎎
비타민 B1 0.13 ㎎
비타민 B2 0.15 ㎎
비타민 B6 0.5 ㎎
비타민 B12 0.2 ㎍
비타민 C 10 ㎎
비오틴 10 ㎍
니코틴산아미드 1.7 ㎎
엽산 50 ㎍
판토텐산 칼슘 0.5 ㎎
무기질 혼합물 적량
황산제1철 1.75 ㎎
산화아연 0.82 ㎎
탄산마그네슘 25.3 ㎎
제1인산칼륨 15 ㎎
제2인산칼슘 55 ㎎
구연산칼륨 90 ㎎
탄산칼슘 100 ㎎
염화마그네슘 24.8 ㎎
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강기능식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강기능식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강기능식품 제조에 사용할 수 있다.
Claims (4)
- 매생이(Capsosiphon fulvescens) 추출물을 유효성분으로 포함하는 헬리코박터 파이로리(Helicobacter pylori)에 대한 항균 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 추출물은 물 및 탄소수 1 내지 4의 알코올로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 용매로 추출한 용매 추출물인 항균 조성물. - 삭제
- 삭제
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