KR101060794B1

KR101060794B1 - 식물 추출물로 이루어진 인플루엔자 바이러스에 대한 항바이러스제 및 이를 함유하는 위생용품

Info

Publication number: KR101060794B1
Application number: KR1020050015032A
Authority: KR
Inventors: 김민주; 김윤석; 강윤석
Original assignee: 주식회사 엘지생활건강
Priority date: 2005-02-23
Filing date: 2005-02-23
Publication date: 2011-08-30
Also published as: KR20060093907A

Abstract

본 발명은 인체에 독감을 발병시키는 인플루엔자 바이러스 (Influenza Virus)에 대하여 항바이러스 활성을 나타내는 항바이러스제 및 이를 함유하는 항바이러스 위생용품에 관한 것이다. 본 발명의 인플루엔자 바이러스에 대한 항바이러스제는 식물로부터 추출한 천연 항바이러스 추출물로서, 부평초 추출물, 오미자 추출물, 측백엽 추출물, 택란 추출물, 목적 추출물 및 조각자 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 식물 추출물로 이루어진다. 본 발명에 따라 인플루엔자 바이러스에 대한 항바이러스제로 사용되는 부평초 추출물, 오미자 추출물, 측백엽 추출물, 택란 추출물, 목적 추출물 및 조각자 추출물은 한약재로 쓰이는 식물로부터 추출된 추출물로서 인체에 대한 안전성이 검증되어 있을 뿐만 아니라 인플루엔자 바이러스에 대한 항바이러스 효과가 우수하므로, 구강 세정제, 피부 세정제, 주방식기 세정제 등의 위생용품에 첨가되어 유용하게 사용될 수 있다.

부평초, 오미자, 측백엽, 택란, 목적, 조각자, 인플루엔자

Description

식물 추출물로 이루어진 인플루엔자 바이러스에 대한 항바이러스제 및 이를 함유하는 위생용품{Anti-influenza viral agent of extract of plant and health supplies containing the same}

본 발명은 인체에 독감을 발병시키는 인플루엔자 바이러스 (Influenza Virus)에 대하여 항바이러스 활성을 나타내는 항바이러스제 및 이를 함유하는 항바이러스 위생용품에 관한 것이다.

일반적으로 인플루엔자 바이러스는 호흡기에 염증을 유발시키며, 감염자의 기침 및 타액으로 공기중으로 직접 전달되거나 감기환자의 접촉물 등에 의해 간접적으로도 타인에게 전염될 수 있는 전염력이 강한 바이러스이다. 잠복기는 24~30시간 정도이며 바이러스는 A, B 및 C type으로 크게 나뉜다. 인플루엔자 바이러스에 감염되면 각 호흡기기관의 저항력이 약화되어 기관지염, 인후염 및 폐렴 등의 합병증을 유발하게 된다. 만성질환자, 노인, 어린이 및 장기 입원환자는 면역력이 약하여 특히 위험할 수 있다. 이에 따라, 독감 질환을 예방하기 위하여 방역 및 독감 백신 등의 연구가 진행되고 있다. 그러나, 백신은 접종해야 하므로 번거로울 뿐만 아니라, 독감이 유행할 시기에 맞추어서 유행할 특정의 인플루엔자 바이러스를 예상하여 백신을 제조해야 하는 문제점이 있다.

한편, 한방에서의 독감 치료는 일반적으로 한약재를 복합처방하여 물로 끊여 그 추출물을 복용하는데, 그 종류로는 인삼패독산, 구미강활산, 갈근탕, 마황탕, 대청룡탕, 승마갈근탕, 청조구폐탕, 이향산, 백호가인삼탕 등이 있다. 전술한 한약재에는 여러가지 종류가 사용되고 있으나, 인플루엔자 바이러스에 대한 항바이러스제로서의 기능보다는 인체의 면역력을 강화시켜 치료하는데 중점을 두고 있다.

따라서, 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 상기 문제점을 해결하여, 인체에 대한 안전성이 검증되어 있을 뿐만 아니라 인플루엔자 바이러스에 대한 항바이러스 효과가 우수하여 구강 세정제, 피부 세정제, 주방식기 세정제 등의 위생용품에 첨가되어 유용하게 사용될 수 있는 천연 추출물로 된 항바이러스제 및 이를 함유하는 위생용품을 제공하는데 있다.

상기 기술적 과제를 달성하기 위하여, 본 발명의 인플루엔자 바이러스에 대한 항바이러스제는 부평초 추출물, 오미자 추출물, 측백엽 추출물, 택란 추출물, 목적 추출물 및 조각자 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 식물 추출물로 이루어진다.

전술한 식물 추출물로 이루어진 항바이러스제는 구강 세정제 조성물, 피부 세정제 조성물, 주방용품 세정제 조성물, 화장료 조성물과 같은 위생용품에 적량 첨가되어 각각의 위생용품 본래의 기능 외에 인플루엔자 바이러스에 대한 항바이러 스의 기능을 수행할 수 있다.

이하, 본 발명의 인플루엔자 바이러스에 대한 항바이러스제 및 이를 함유하는 위생용품에 대하여 상세히 설명한다.

본 발명에 따라 인플루엔자 바이러스에 의한 독감을 예방할 수 있는 항바이러스제는 부평초 추출물, 오미자 추출물, 측백엽 추출물, 택란 추출물, 목적 추출물 및 조각자 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 식물 추출물로 이루어진다.

부평초 (Spirodela polyrhiza) 는 수평, 머구리밥, 자평이라고 한다. 논이나 연못의 물위에 떠서 산다. 가을에 모체에서 생긴 타원형의 작은 겨울눈이 물속에 가라앉아서 겨울을 나고 이듬해 봄에 물위로 나와 번식한다. 엽상체는 달걀을 거꾸로 세운 모양으로 길이 5∼8mm, 나비 4∼6mm이고 앞면은 녹색이나 뒷면은 자주색이다. 엽상체 뒷면 가운데에서 가는 뿌리가 5∼11개 나오고 그 옆에서 새로운 싹이 생겨 번식한다. 꽃은 흰색이며 7∼8월에 간혹 피는 것이 있으나 매우 작아서 찾아보기 어렵다. 1개의 포 안에 2개의 수꽃과 1개의 암꽃이 생기며, 수꽃의 수술은 1개, 암꽃의 암술도 1개이며 화피가 없다. 열매는 포과로 10월에 익는다. 관상용으로 연못에 키우기도 한다. 한방에서는 풀 전체를 소변불리, 수종, 단독, 가려움증, 두드러기, 암종 등에 처방한다. 민간에서는 이질로 탈항이 되었을 때 가루로 빻아 상처에 뿌린다. 아시아·유럽·아프리카·오스트레일리아·남북아메리카의 온대에서 열대에 걸쳐 분포한다.

오미자(Schiznadra chinensis)는 공 모양으로 지름 약 1cm이고 짙은 붉은 빛 깔이다. 속에는 붉은 즙과 불그스레한 갈색 종자가 1~2개 들어 있다. 단맛, 신맛, 쓴맛, 짠맛, 매운맛의 5가지 맛이 나며 그 중에서도 신맛이 강하다. 종류에는 오미자(북오미자), 남오미자, 흑오미자 등이 있다. 오미자는 주로 태백산 일대에 많이 자라고 남오미자는 남부 섬지방, 흑오미자는 제주도에서 자란다. 한국을 비롯하여 일본, 사할린섬, 중국 등지에서 생산한다. 시잔드린, 고미신, 시트럴, 사과산, 시트르산 등의 성분이 들어 있어 심장을 강하게 하고 혈압을 내리며 면역력을 높여 주어 강장제로 쓴다. 폐 기능을 강하게 하고 진해, 거담 작용이 있어서 기침이나 갈증 등을 치료하는 데 도움이 된다.

측백엽(Thuja orientalis L.)은　한방에서 측백나무 잎을 약재로 이르는 말로서 보혈제나 지혈제, 수렴제로 쓴다.

택란(Eupatorium lindleyanum) 은 산과 들에서 자란다. 높이 약 70cm이다. 뿌리줄기는 짧고 풀 전체에 털이 난다. 줄기는 곧게 서고 원기둥 모양이다. 잎은 길이 6∼12cm, 나비 8∼20mm이고 바소꼴 또는 줄 모양 바소꼴로 마주나며, 밑쪽이 3갈래로 갈라지기 때문에 돌려나는 것처럼 보인다. 양면에 털이 나고 뒷면에는 선점(腺點)이 있으며, 가장자리에는 불규칙한 톱니가 있다. 7∼10월에 줄기 끝에 많은 꽃자루가 나와 흰색 또는 연한 홍자색 꽃이 산방꽃차례로 핀다. 꽃차례의 지름은 6∼9cm이다. 총포는 원통 모양이고 길이 4∼5mm이다. 작은꽃은 5개, 포 비늘은 9개인데 2줄로 배열하고 자줏빛을 띤다. 열매는 수과로 5각 원뿔 모양이며 관모는 흰색이다. 어린 순을 나물로 먹고 관상용으로도 심는다. 한방에서는 당뇨병, 중풍, 고혈압 등의 치료에 쓰며 한국·일본·동아시아의 온대에 널리 분포한다.

목적(Horsetail)의 일반명은 속새풀이라 하며, 속새과의 다년생 식물로서 특히 여드름과 습진을 크게 완화시키는 데 쓰인다.

조각자(Gleditsia sinensis) 중국 원산이다. 가시는 큰 것은 길이 10cm 이상으로 방추형 비슷하다. 잎은 어긋나고 3∼6쌍의 작은잎으로 구성된 깃꼴겹잎이다. 작은잎은 긴 타원형 또는 바소꼴로 양끝이 좁고 길이 1∼9cm, 나비 5∼35cm이다. 꼬투리는 편평하고 길이 20cm, 나비 3cm이며 비틀리지 않고 쪼개면 매운 냄새가 난다.

구강 세정제 조성물, 비누, 핸드솝, 전신세정제 등의 피부 세정제 조성물, 식기나 싱크대, 도마 등을 세정하기 위한 주방용품 세정제 조성물, 에센스, 크림 등의 화장료 조성물과 같은 위생용품에 유효성분으로 첨가하면, 각각의 위생용품 본래의 기능 외에 인플루엔자 바이러스에 대한 항바이러스의 기능을 수행할 수 있다.

부평초, 오미자, 측백엽, 택란, 목적 및 조각자는 시중에서 쉽게 구입할 수 있는데, 예를 들어 에탄올, 메탄올, 프로판올, 부탄올, 에틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜 등의 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올, 에틸아세테이트, 아세톤, 물, 헥산 등의 용제를 각각 단독으로 또는 이들을 1종이상 혼합한 용제로 추출한 다음, 감압 및 농축하여 추출물을 얻을 수 있다. 전술한 방법으로 얻어진 건조 추출물은 구강 세정제 조성물, 피부 제성제 조성물, 주방용품 세정제 조성물, 화장료 조성물과 같은 위생용품에 위생용품 총 중량을 기준으로 0.01 내지 20중량% 첨가하여 사용할 수 있다.

이하, 본 발명을 구체적으로 설명하기 위해 실시예와 비교예를 들어 설명한다. 그러나 본 발명에 따른 실시예들은 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 아래에서 상술하는 실시예들에 의해 한정되는 것은 아니다.

< 부평초, 오미자, 측백엽, 택란, 목적, 조각자 추출물의 제조 >

부평초, 오미자, 측백엽, 택란, 목적, 조각자을 얇은 조각으로 썰거나 10내지 200메쉬 크기로 분쇄한 100g에 에탄올 500ml을 가한 후 상온에서 48시간 냉침 후 와트만 No.2호 여과지를 이용하여 여과하였다. 여과된 추출물을 50℃에서 감압 농축하여 각각의 어성초, 오가피, 방풍, 시호 추출물을 얻었다.

물론, 에탄올 이외에도 각종 용재로 메탄올, 프로판올, 부탄올, 에틸렌 글리콜, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 에틸아세테이트, 아세톤, 물, 헥산 등으로 추출, 감압, 농축하여 추출물을 제조할 수 있다. 물을 이용한 열수 추출물의 경우 상기 한약재100g에 1ℓ증류수를 넣고 끓어 넘치지않게 화력을 조절하여 5시간 정도 끓이고 다음 상온으로 식힌 다음 순면 거즈로 1차여과를 시켰다. 여액을 원심분리 (1000g,15분) 한 상등액을 동결 건조시켜 열수 추출액을 제조하였다.

< 인플루엔자 바이러스 제조 >

본 발명에서는 시험대상인 인플루엔자 바이러스 2종｛A/brazil/1/79(H1N1), A/Johannesburg/33/94(H3N2)｝을 국립보건원으로부터 분양 받아 시험에 사용하였다.

인플루엔자 바이러스 배양에 필요한 숙주세포로서 MDCK(Mardin-Darby Canine Kidney)동물세포를 사용하였다. MDCK의 배양에 이용되는 배지로는 Minimum essential medium (MEM)에 10%농도로 페탈보빈세럼과 0.27%농도로 소듐비카보네이트첨가하고, 곰팡이 오염을 방지하기 위하여 0.005%농도로 젠타마이신을 첨가한 후 필트레이션(filtration)방법으로 멸균한 배지이다.

동물세포 배양병 (크기:75㎝²)에 15ml의 MEM배지를 분주하고 동물세포 MDCK를 접종한 후, 37℃온도의 CO₂인큐베이터에서 3~4일간 배양하였다. MDCK가 90%이상 성장하였을 때 배양 상등액은 제거하고 인플루엔자 바이러스를 접종하였다.

또한, 페탈보빈세럼과 젠타마이신이 포함되지 않은 MEM배지를 15ml넣은 후 33℃온도의 CO₂인큐베이터에서 3~4일간 배양하면서 90%정도 MDCK가 사멸됐을 때 그 배양액을 원심분리하여 MDCK가 제거된 인플루엔자 바이러스 용액을 얻을 수 있다.

< 인플루엔자 바이러스 역가 측정 >

MDCK에서 배양된 인플루엔자 바이러스의 역가를 측정하기 위하여 인플루엔자 바이러스의 특징인 적혈구 응집반응 (HA;heamagglutination assay)을 이용하였다.

배양된 인플루엔자 바이러스용액을 96웰 플레이트(96well plate)의 1번웰과 2번웰에 50㎕를 가하였다. 2번웰 부터 12번웰까지 phosphate buffered saline(PBS, pH7.4)을 50㎕씩 가하였다. 2번웰에서 50㎕을 취하여 3번웰에 가하여 희석하고 이와 같은 방법으로 12웰까지 2배 희석(two fold dilution)방식으로 희석하였다.

0.75%의 기니아피그 적혈구용액을 50㎕씩 1번웰부터 12번웰까지 가한 후 상온에서 90분간 정치 반응하여 적혈구 응집반응이 일어나는 희석배수를 측정하였다.

HA역가 = 2ⁿ(n:응집이 발생한 마지막 웰번호)

< 적혈구 용액 제조 >

기니아피그에서 혈액을 채취하여 혈액응고 방지제인 알시버용액(Alsever's solution)이 30%정도로 혈액에 첨가한 후, 원심분리기에서 1800g에서 10분간 원심분리시켜 상등액인 혈장을 제거하고 적혈구에 phosphate buffered saline(PBS, pH7.4)을 가하여 적혈구 농도가 0.75%가 되도록 하였다.

< 부평초, 오미자, 측백엽, 택란, 목적, 조각자의 항바이러스 측정 >

인플루엔자 바이러스에 대한 항바이러스 효과를 측정하기 위하여 적혈구응집억제시험 (Heamagglutination inhibition test; HIT)법을 응용하여 이용하였다.

역가가 32HA인 H1N1과 H3N2 인플루엔자 바이러스용액 500㎕에 각각의 추출물을 농도별로 첨가하여 25℃에서 1시간 반응한 후 인플루엔자 바이러스 역가시험인HA 시험하여 역가의 감소를 백분율로 환산하였다.

대조군으로는 인플루엔자 바이러스의 항바이러스제로 알려진 아만타딘으로 하여 비교하였다.

상기 표1의 항바이러스 시험결과와 같이 부평초, 오미자, 측백엽, 택란, 목적, 조각자의 에탄올 추출물은 대조구인 아만타딘 보다 우수한 항바이러스 효과를 나타냈다. 특히, 조각자는 가장 우수한 항바이러스 활성을 나타내며, 10ppm농도에서도 인플루엔자 바이러스 역가의 50%를 감소시켰다. H1N1타입과 H3N2 타입에서 거의 같은 항바이러스 효과를 나타내므로 인플루엔자 바이러스에 대한 특이성을 나타내지 않는 것으로 판단되며 이것은 광범위하게 항바이러스 효과를 낼 수 있는 것으로 해석된다.

열수 추출물에서는 대조구인 아만타딘 보다 약한 항바이러스 활성을 나타냈지만 항바이러스 활성은 가지고 있는 것으로 시험되었다.

< 부평초, 오미자, 측백엽, 택란, 목적, 조각자 추출물을 함유하는 위생용품에 대한 항바이러스 효과 평가 >

가) 구강 세정제 실시예 1 내지 18 및 비교예 1

표2 및 표 3에서 제시한 실시예 및 비교예 대로 각 베이스성분 및 부평초, 오미자, 측백엽, 택란, 목적, 조각자의 에탄올 추출물을 중량별로 첨가하여 혼합기에서 교반, 가열, 냉각 등의 과정을 거쳐 균일하게 혼합되도록 구강세정제 조성물을 제조하였다.

상기 실시예 및 비교예에서 제조한 구강 세정제를 인플루엔자 바이러스에 대한 항바이러스 효과를 측정하였다. 측정방법은 실시예 및 비교예에서 제조한 구강세정제를 농도별로 인플루엔자 바이러스와 1시간 반응시킨 뒤 인플루엔자 바이러스에 대한 적혈구응집반응인 HA시험을 하여 역가 감소를 측정한 후 감소량을 백분율로 하였다.

결과는 표 4에 나타내었으며 부평초, 오미자, 측백엽, 택란, 목적, 조각자 추출물이 첨가된 구강세정제 모두 항바이러스 활성을 나타내었으며 특히 조각자 에탄올 추출물함유 구강세정제는 탁월한 항바이러스 효과를 나타냈다. 인플루엔자 바이러스 H1N1, H3N2 type에 모두 효과를 나타내므로 광범위한 인플루엔자 바이러스에 대한 항바이러스 활성을 나타낸다. 그러므로 구강을 세정할 때 인플루엔자 바이러스 불활성화에 도움이 될 것으로 판단되며, 이것은 치약 및 타블렛형의 구강세정제 등의 구강 세정제 위생용품에 제공된다.

나) 전신세정제 실시예 19내지 36 및 비교예 2

표 5및 표 6에서 제시한 실시예 및 비교예 대로 각 베이스성분 및 부평초, 오미자, 측백엽, 택란, 목적, 조각자의 에탄올 추출물을 중량별로 첨가하여 혼합기에서 교반, 가열, 탈기, 냉각 등의 과정을 거쳐 균일하게 혼합되도록 전신세정제 조성물을 제조하였다.

하기 표7을 참조하면, 부평초, 오미자, 측백엽, 택란, 목적, 조각자 추출물이 함유된 전신세정제 모두 항바이러스 활성을 나타내었으며, 조각자 함유 전신세정제는 탁월한 항바이러스 효과를 나타냈다. 인플루엔자 바이러스 H1N1, H3N2 type에 모두 효과를 나타내므로 광범위한 인플루엔자 바이러스에 대한 항바이러스 활성을 나타낸다. 그러므로 피부세정 시 인플루엔자 바이러스 불활성화에 도움이 될 것으로 판단되며, 이것은 비누 및 핸드솝 등의 피부세정 제품에도 제공할 수 있다.

다) 주방식기세정제 실시예 37 내지 54 및 비교예 3

표 8및 표 9에서 제시한 실시예 및 비교예 대로 각 베이스성분 및 부평초, 오미자, 측백엽, 택란, 목적, 조각자의 에탄올 추출물을 중량별로 첨가하여 혼합기에서 교반, 가열, 탈기, 냉각 등의 과정을 거쳐 균일하게 혼합되도록 주방식기 세정제 조성물을 제조하였다.

하기 표10을 참조하면, 부평초, 오미자, 측백엽, 택란, 목적, 조각자의 에탄올 추출물이 함유된 주방식기 세정제 모두 항바이러스 활성을 나타내었으며, 조각자 추출물 함유 주방식기 세정제는 탁월한 항바이러스 효과를 나타냈다. 인플루엔자 바이러스 H1N1, H3N2 type에 모두 효과를 나타내므로 광범위한 인플루엔자 바이러스에 대한 항바이러스 활성을 나타낸다. 그러므로 식기 세정시 식기에 자연 부착된 인플루엔자 바이러스 불활성화에 도움이 되는 것으로 판단되며, 또한 이것은 씽크대, 도마 등의 주방위생용 스프레이등으로 구성되는 주방 위생제품 조성물에도 제공될 수 있다.

이상에서 살펴본 바와 같이, 본 발명에 따라 인플루엔자 바이러스에 대한 항바이러스제로 사용되는 부평초 추출물, 오미자 추출물, 측백엽 추출물, 택란 추출 물, 목적 추출물 및 조각자 추출물은 한약재로 쓰이는 식물로부터 추출된 추출물로서 인체에 대한 안전성이 검증되어 있을 뿐만 아니라 인플루엔자 바이러스에 대한 항바이러스 효과가 우수하므로, 구강 세정제, 피부 세정제, 주방식기 세정제 등의 위생용품에 첨가되어 유용하게 사용될 수 있다.

Claims

부평초 추출물, 오미자 추출물, 측백엽 추출물, 택란 추출물, 목적 추출물 및 조각자 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 식물 추출물로 이루어진 인플루엔자 바이러스에 대한 항바이러스제.
제1항에 있어서, 상기 식물 추출물은 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올, 에틸아세테이트, 아세톤, 물 및 헥산으로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 용제로 추출된 것을 특징으로 하는 인플루엔자 바이러스에 대한 항바이러스제.
제1항 또는 제2항의 항바이러스제를 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 위생용품.
제3항에 있어서, 상기 위생용품은 항바이러스제를 조성물 총 중량을 기준으로 0.01 내지 20중량% 함유하는 구강 세정제 조성물인 것을 특징으로 하는 위생용품.
제3항에 있어서, 상기 위생용품은 항바이러스제를 조성물 총 중량을 기준으로 0.01 내지 20중량% 함유하는 피부 세정제 조성물인 것을 특징으로 하는 위생용품.
제3항에 있어서, 상기 위생용품은 항바이러스제를 조성물 총 중량을 기준으로 0.01 내지 20중량% 함유하는 주방용품 세정제 조성물인 것을 특징으로 하는 위생용품.
제3항에 있어서, 상기 위생용품은 항바이러스제를 조성물 총 중량을 기준으로 0.01 내지 20중량% 함유하는 화장료 조성물인 것을 특징으로 하는 위생용품.