KR101056952B1

KR101056952B1 - 단목재배를 이용한 검은비늘버섯의 대량생산방법

Info

Publication number: KR101056952B1
Application number: KR1020090018951A
Authority: KR
Inventors: 최종운; 박정헌; 전두식; 심상준; 이영식
Original assignee: 박정헌; 강원도
Priority date: 2009-03-05
Filing date: 2009-03-05
Publication date: 2011-08-17
Also published as: KR20100100201A

Abstract

본 발명은 단목재배를 이용한 검은비늘버섯의 대량생산방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 검은비늘버섯(Pholiota adiposa)의 생산방법에 있어서, 균사체의 선발단계; 상기 균사체를 액체배양 배지에 첨가하고, 배양시키는 단계; 상기 배양된 액체배지종균을 단목에 접종시키는 단계; 및 상기 액체배지종균이 접종된 단목에서 검은비늘버섯의 자실체를 형성시키는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 단목재배를 이용한 검은비늘버섯의 생산방법에 관한 것이다.

본 발명은 환경오염 및 자생지 파괴, 무분별한 채취로 산림버섯유전자원의 고갈로 인한 식용버섯인 검은비늘버섯의 대량생산기술에 관한 것으로 기존의 톱밥재배를 이용한 버섯재배 방법에서 탈피하여 산림내 간벌목을 일차적으로 이용할 수 있도록 균주선발 및 액체배양 기법을 확립하고 검은비늘버섯의 자실체 유도 및 대량생산기술을 도모함으로써 농가의 신소득자원의 확보는 물론 청정 식용 임산버섯으로 버섯산업의 활력을 개척할 수 있을 것이다.

단목재배, 검은비늘버섯, 자실체, 진탕배양, 액체배양

Description

단목재배를 이용한 검은비늘버섯의 대량생산방법{Mass production method of Pholiota adiposa using short tree cultivation}

검은비늘버섯은 담자균류 주름버섯목 독청버섯과의 버섯으로 학명은 Pholiota adipose 이며, 분포지역은 한국, 중국, 일본, 유럽, 북아메리카 등이다. 북한에서는 기름비늘갓버섯이라고 한다. 갓은 지름 3~8cm로 어릴 때는 둥근 모양이나 차차 편평하게 펴진다. 갓 표면은 습하며 점성이 있고 황갈색이며, 갓 둘레는 담황색이고 갓 전면에 삼각형의 백색 비늘조각들이 있으며 점차 갈황색이 된다. 가 장자리는 처음에는 안쪽으로 말리며 실모양의 갓막이 있다. 주름살은 완전히 붙은 형이며 약간 빽빽하고 처음에는 황백색이나 차차 갈색으로 변한다. 대는 길이가 7∼14cm, 직경 0.7∼0.9cm이며 구부러졌다. 위 아래 굵기가 같고, 아랫부분은 황갈색의 비늘조각으로 덮여 있고 담황색 턱받이가 있다. 대의 속은 처음에는 차 있다가 차차 해면질로 되거나 거의 빈다. 포자는 타원형이며, 표면은 매끈하고 포자문은 적갈색이다.

검은비늘버섯은 식용버섯이며, 활엽수톱밥을 이용한 인공 재배가 가능하며, 봄부터 가을에 걸쳐 활엽수의 죽은가지 그루터기에 속생하는 목재 갈색부후성 버섯이다. 포자는 타원형이며 표면은 평활하고 발아공이 있으며 포자문은 적갈색이다. 검은비늘버섯은 한국, 일본, 중국 등 북반구 일대에 자생하며 항종양 등 약리작용이 우수한 것으로 알려져 있다. 현재 검은비늘버섯의 재배는 치감과 맛 향 그리고 생리활성 물질 때문에 중국 및 일본 등에서는 톱밥을 이용한 인공재배가 이루어지고 있으나 우리나라에서는 인공재배에 관한 연구가 미흡한 실정으로 느타리버섯 계통의 대체 버섯식품으로의 대량재배기술이 필요한 실정이다.

우리나라에서 검은비늘버섯에 관한 연구는 미미한 실정이며, 비늘버섯속균(Pholioa sp)의 특징과 자실체형성(1998, 성재모 등)에 대한 연구보고가 있으며, 이상선 등에 의해서 야생에서 채집된 검은비늘버섯(Pholioa adiposa)균에 관한 연구(1998,한국균학회지26(4):574~582)가 시작되었다. 이후 검은비늘버섯에 관한 연구는 주로 성분분석과 균사생장 특성에 관한 연구가 있으며, 그중 금봉이 검은비늘버섯과 Pholiota 속간 유연관계 및 생리활성 분석(장후봉 외4인), 금봉이 검은비늘 버섯 수량 증수를 위한 배지 개발(장후봉 외3, 2004)에서는 균사생장특성 규명 및 최적배지 조성에 관한 연구가 이루어졌다. 검은비늘버섯의 인공재배에 관한 연구는 이민웅의 유용버섯자원의 발굴과 대량 재배기술개발에 관한 연구보고서에서 톱밥을 이용한 인공재배법 대하여 보고되었다. 그러나 톱밥을 이용한 인공재배보다 재배방법이 훨씬 용이하고 생산성이 향상된 단목재배에 관한 연구보고는 없는 실정이다.

본 발명의 목적은 기존의 검은비늘버섯의 재배방법에 비하여 훨씬 용이하고 생산성이 향상된 단목재배를 이용한 검은비늘버섯의 대량생산방법을 제공하고자 함이다.

상기의 과제를 해결하기 위하여,

본 발명은 검은비늘버섯의 생산방법에 있어서, 균사체의 선발단계; 상기 균사체를 액체배양 배지에 첨가하고, 배양시키는 단계; 상기 배양된 액체배지종균을 단목에 접종시키는 단계; 및 상기 액체배지종균이 접종된 단목에서 검은비늘버섯의 자실체를 형성시키는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 단목재배를 이용한 검은비늘버섯의 생산방법을 제공한다.

본 발명은 환경오염 및 자생지 파괴, 무분별한 채취로 산림버섯유전자원의 고갈로 인한 식용버섯인 검은비늘버섯의 대량생산기술에 관한 것으로 기존의 톱밥재배를 이용한 버섯재배 방법에서 탈피하여 산림내 간벌목을 일차적으로 이용할 수 있도록 균주선발 및 액체배양 기법을 확립하고 검은비늘버섯의 자실체 유도 및 대량생산기술을 도모함으로써 농가의 신소득자원의 확보는 물론 청정 식용 임산버섯 으로 버섯산업의 활력을 개척할 수 있을 것이다.

또한 본 발명을 통하여 검은비늘버섯의 대량생산기술을 확립하여 침체된 버섯산업의 활로를 개척하고 버섯농가의 신소득자원으로 육성할 수 있을 것이다.

본 발명은 검은비늘버섯(Pholiota adiposa)의 생산방법에 있어서, 균사체의 선발단계; 상기 균사체를 액체배양 배지에 첨가하고, 배양시키는 단계; 상기 배양된 액체배지종균을 단목(short tree)에 접종시키는 단계; 및 상기 액체배지종균이 접종된 단목에서 검은비늘버섯의 자실체를 형성시키는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 단목재배를 이용한 검은비늘버섯의 생산방법을 제공한다.

본 발명에서 상기 균사체는 검은비늘버섯(Pholiota adiposa) 균주가, YMA(Yeast extract malt extract agar) 배지에서 pH 6~8, 20~30℃의 조건하에서 6~8일간 배양되어 선발된 것일 수 있다.

또한 본 발명에서 상기 액체배양 배지는 SDB(Soybean powder Dextrose Broth) 배지이며, 배양시 통기량은 0.5~1.5 vvm으로 조절된 것일 수 있다.

또한 본 발명에서 상기 균사체 배양은 상기 선발된 균사체를 상기 액체배양 배지에 첨가하고 23~27℃의 무균실에서 6~8일간 배양하는 것일 수 있다.

또한 본 발명에서 상기 단목은 참나무이며 상기 참나무를 지름 18~22㎝, 길이 23~27㎝로 절단하고, 무수황산마그네슘(Magnesium Sulfate Anhydrous), 질산칼륨(Potassium Nitrate) 및 버섯전용제제를 함유하는 용수에 1~3일간 침수시킨 후, 118~124℃에서 50~70분간 고압 멸균 후 상온에서 냉각한 것일 수 있다.

또한 본 발명에서 상기 검은비늘버섯의 자실체 형성은 14~16℃에서 7~20일간의 조건에서 자실체가 형성되는 것일 수 있다.

본 발명은 상기의 방법으로 생산된 검은비늘버섯을 제공한다.

이하 본 발명의 단목재배를 이용한 검은비늘버섯의 대량생산방법에 대하여 보다 상세하게 설명한다.

본 발명은 검은비늘버섯의 단목재배를 통한 대량생산기술을 위한 목적으로 균주의 선발로부터 자실체 발생까지의 과정을 통하여 검은비늘버섯의 단계별 과정을 특성화하는 것으로 다음과 같이 구성된다.

제 1단계 : 검은비늘버섯(Pholiota adiposa)의 단목재배에 적합한 균주의 선발과정, 제 2단계 : 검은비늘버섯의 단목재배에 적합한 액체배양 배지조성 과정, 제 3단계 : 액체배양된 균사체의 접종 및 단목재배과정 유도과정, 제 4단계 : 검은비늘버섯의 자실체 발생환경조성 과정을 포함하여 구성된다.

상기 제 1단계에서 상기 균사체는 검은비늘버섯(Pholiota adiposa) 균주가, YMA 배지에서 pH 6~8, 20~30℃의 조건에서 6~8일간 배양되어 선발된 것일 수 있다.

바람직하게는 상기 균사체는 검은비늘버섯(Pholiota adiposa) 균주로서, 균사 신장력이 우수한 춘천 1호 균주(GFRI200601P: Gangwon Forest Research Institut 200601P) 또는 IUM909 균주(Incheon University Mushroom 909)를, YMA 배지에서 pH 7, 25℃의 조건에서 7일간 배양되어 선발된 것일 수 있다.

상기 제 2단계에서 상기 액체배양 배지는 SDB 배지이며, 배양시 통기량은 0.5~1.5 vvm으로 조절된 것일 수 있다.

바림직하게는 상기 액체배양 배지는 SDB 배지이며, 배양시 통기량은 1 vvm으로 조절된 것일 수 있다.

상기 제 3단계에서 상기 균사체 접종은 상기 선발된 균사체를 상기 액체배양배지에 첨가하고 23~27℃의 무균실에서 6~8일간 배양시킨 것일 수 있다.

바람직하게는 상기 균사체 접종은 상기 선발된 균사체를 상기 액체배양배지에 첨가하고 25℃의 무균실에서 7일간 배양시킨 것일 수 있다.

또한 상기 제 3단계에서 상기 단목은 참나무이며 상기 참나무를 지름 18~22㎝, 길이 23~27㎝로 절단하고, 무수황산마그네슘, 질산칼륨 및 버섯전용제제를 함유하는 용수에 1~3일간 침수시킨 후, 118~124℃에서 50~70분간 고압 멸균 후 상온에서 냉각한 것일 수 있다.

상기에서 버섯전용제제는 버섯의 영양생리에 알맞도록 대구에서 개발된 것으로 발아균일, 초기생육촉진, 수확시기단축, 병발생 감소 등에 효과가 탁월한 시판되는 액제(주식회사 대유에서 생산하는 제품[버섯나라액제])를 말한다. 상기 버섯전용제제에는 수용성 붕소 0.07%, 수용성 아연 0.05% 및 수용성 몰리브덴 0.002%를 포함하고 있다.

바람직하게는 상기 단목은 참나무이며 상기 참나무를 지름 20㎝, 길이 25㎝로 절단하고, 무수황산마그네슘, 질산칼륨 및 버섯전용제제를 함유하는 용수에 2일간 침수시킨 후, 121℃에서 60분간 고압 멸균 후 상온에서 냉각한 것일 수 있다.

상기 제 4단계에서 상기 검은비늘버섯의 자실체 형성은 14~16℃에서 7~20일간의 조건에서 자실체가 형성되는 것일 수 있다.

바람직하게는 상기 검은비늘버섯의 자실체 형성은 15℃에서 15일간의 조건에서 자실체가 형성되는 것일 수 있다.

본 발명은 상기의 방법으로 생산된 검은비늘버섯을 제공한다. 상기의 방법은 기존의 톱밥재배방식으로 생산된 것에 비하여 보다 신속하며, 다량의 검은비늘버섯을 생산해 낼 수 있다. 검은비늘버섯은 맛 뿐만 아니라, 항종양 등의 약리작용도 우수하여 여러가지 식품용이나 의약용으로의 이용이 가능하다.

이하 본 발명의 실시예 및 실험예를 설명한다. 다만, 이하의 실시예 등은 본 발명을 보다 구체적으로 설명하고자 한 것으로, 본 발명의 권리범위를 이들에 한정하고자 하는 것은 아니다.

<실시예 1> 단목재배를 이용한 검은비늘버섯의 생산

1. 춘천 1호 균주(GFRI200601P: Gangwon Forest Research Institut 200601P)를 YMA 배지에서 pH 7 및 25℃의 조건하에 7일간 배양하여 균사체를 제조하였다.

2. 상기 균사체를 SDB 배지에 첨가하고, 통기량은 1 vvm으로 조절하여 25℃의 무균실에서 7일간 배양하였다.

3. 참나무를 지름 20㎝, 길이 25㎝로 절단하고, 무수황산마그네슘, 질산칼륨 및 버섯전용제제를 함유하는 용수에 2일간 침수시킨 후, 121℃에서 60분간 고압 멸 균 후 상온에서 냉각하고, 상기 참나무의 상부에 상기 2.의 배양된 액체배지종균을 접종하고, 참나무를 밀봉하였다.

4. 상기 3.의 밀봉된 참나무를 15℃에서 15일간 두어 자실체를 형성시켰다.

<실시예 2-10 및 비교예 1> 최적의 균사체의 선발

1. 본 발명의 생산방법으로 대량의 검은비늘버섯을 얻기 위해서는 버섯생산의 시발점이 되는 균사체의 엄선이 요구된다. 따라서 최초 이용 균주, 상기 균주를 키울 배지 및 최적의 균사체 생산의 환경조건을 검토하여 보았다.

2. 상기 실시예 1의 1. 과 같은 방법을 포함하여 균사체를 제조하되 균주, 배지, 배양시 pH 및 온도를 달리하여 균사체를 선발하였다(이하 표 1 참조).

[표 1]

	pH	온도	최초 균주 및 배지의 종류
실시예 2	6	20	춘천 1호 균주 (YMA 배지)
실시예 3	6	25
실시예 4	6	30
실시예 5	7	20
실시예 6	7	30
실시예 7	8	20
실시예 8	8	25
실시예 9	8	30
실시예 10	7	25	IUM 909 균주 (YMA 배지)
비교예 1	7	25	춘천 1호 균주 (PDA 배지)

(상기 표 1에서 IUM 909 균주는 Incheon University Mushroom 909로서, 검은비늘버섯의 일종이다.)

(1) PDA(Potato dextrose agar) 배지 또는 YMA 배지를 1000ml 삼각플라스크에 500ml 분주한 후, 121℃에서 20분간 가압멸균하여 평판배지를 만들고 평판배지에 멸균된 코크보러를 이용하여 균주별로 접종하여 25℃항온기에서 7일간 배양하여 각 균주의 균사 신장력을 조사하였다.

또한 균사생장에 적합한 pH를 알기위해 배지의 pH를 4.0에서 8.0까지 1.0간격으로 조절하여 배지를 만들었고, 평판 배지 위에서 균사 신장력이 우수한 IUM 909 균주와 춘천1호 균주를 접종하여 pH별 균사 신장력을 조사 하였다. 배지내 균사생장 최적 온도를 파악하기 위해 배양온도를 20℃에서 30℃범위에서 각각 접종된 균주를 10일간 배양하여 조사 하였다.

(2) 상기의 실시예에 따라 생산된 균주의 균사 신장력을 조사한 결과 YMA배지에서 균사생장이 우수한 것으로 조사되었다[실시예 1-10]. 이에 반하여 PDA 배지를 사용한 경우[비교예 1]에는 균사 신장력이 현저히 떨어졌다. 최초 이용 균주의 선택에 있어서는, 수치상의 임계적 차이는 없었으나 IUM 909 균주보다는 춘천1호 균주 이용시[실시예 1-9] 균사 생장이 더욱 우수했다.

또한 균사성장이 우수한 춘천1호 균주를 YMA배지에서 배양하며, pH별 균사생장 신장력을 조사한 결과 pH 6~8에서 균사신장력이 우수하며, 특히 pH 7에서 균사신장력이 가장 우수하다는 것을 알 수 있었다. 배양온도가 균사생장에 미치는 영향을 조사한 결과 25℃에서 가장 빠른 균사 신장력을 나타냈으며 대체로 20℃에서 30 ℃사이에서 고른 균사생장이 이루어졌다.

결론적으로 검은비늘버섯의 생산을 위한 최적의 균사 신장력의 조건은 춘천 1호 균주를 이용하며, YMA 배지를 사용하고, 배양조건은 pH 6~8(보다 최적은 pH 7) 및 20~30℃(보다 최적은 25℃)임을 알 수 있었다.

상기 실시예 1에서 선발된 균사체를 이용하여, 보다 경제적이며 효율적인 검은비늘버섯의 생산을 위한 최적의 조건을 찾기 위하여, 액체배양 배지 및 자실체 형성시의 조건(온도, 일수)을 각각 달리하여 이하를 실시하였다.

<실시예 11-17>

1. 액체배양 배지조건을 달리한 산물 생산

상기 실시예 1과 같은 방법으로 검은비늘버섯을 생산하되, 배지를 이하의 표 2와 같이하여 생산하였다.

[표 2]

	배지
실시예 11	GPB
실시예 12	PDB
실시예 13	MEB

(1) 검은비늘버섯의 단목재배에 적합한 배지를 선발하기 위해 GPB(Glucose Peptone Broth) ,PDB(Potato Dextrose Broth), MEB(Malt Extract Broth), SDB(Soybean poweder Dextrose Broth)등의 혼합배지를 121℃ 1.2기압에서 30분간 고압멸균후 P.D.A 배지에서 10일간 배양한 균사체(실시예 1의 1.로 제조된 균사체)를 코크 보러를 이용 5개씩 각 액체배지에 접종하였다. 각 배지별로 5회 반복하여 25℃ 온도에서 120rpm으로 진탕배양하였다. 10일 배양후 균사체를 종이필터에 거르고 증류수 세척후 건조한후 건조량을 측정하였다.

또한 액체배양 기간별 적합성을 알아보기 위하여 20L 유리병으로 만들어진 액체 배양병에 SDB 배지를 이용하여 25℃에서 암배양하여 15일간 액체배양을 하면서 3일 간격으로 균사체의 건중량을 측정하였다.

(2) 상기 (1)의 실험결과, 각 배지별로 유사한 균사성장률과 균체량을 보였으나 가장 저렴하고 쉽게 구할수 있는 SDB 배지를 검은비늘버섯의 최적 배지로 선발하였다. 또한 액체배양 기간별 적합성을 알아보기 위한 실험에서, 균사체의 양은 일정기간을 기점으로 증가량의 속도가 감소하는 현상이 일어났으며 최적 배양기간은 7일이 가장 적당한 것으로 판단되었다.

2. 배양시 통기량을 달리한 산물 생산

상기 실시예 1과 같은 방법을 포함하여 검은비늘버섯을 생산하되, 배양시 통기량을 이하의 표 3과 같이하여 생산하였다.

[표 3]

	통기량 (단위: vvm)
실시예 14	0.1
실시예 15	0.5
실시예 16	1.5
실시예 17	2.0

(1) 액체배양시 통기량에 따른 균사체의 증가량을 알아보기 위하여 25℃에서 암배양하며 통기량을 0.1vvm, 0.5vvm, 1.0vvm, 1.5vvm, 2.0vvm으로 조절하여 7일간 배양한 후 균사체의 건조중량을 측정하였다.

(2) 통기량이 균사체 생산에 미치는 영향을 조사한 결과 일반적으로 통기량이 증가할수록 건조 균체량은 증가하였다. 그러나 통기량의 증가는 배지내 수분의 증발을 유도하므로 적정한 통기량은 1.0vvm(vol.of air/vol.of medium/min)인 것으로 조사되었다.

<실시예 18-25 및 비교예 2-4>

1. 단목재배 이용여부를 달리한 산물 생산

(1) 검은비늘버섯의 생산을 위한 액체배지종균의 접종 대상별 균사 신장력을 측정하기 위하여 톱밥배지[비교예 2], 혼합배지(면자각+비트펄프+톱밥)[비교예 3], 폐면배지[비교예 4] 및 참나무 단목을 이용하여 검은비늘버섯[실시예 1]을 제조하였다. 각각의 배지(접종 대상)에서의 균사생장 속도 및 균사의 밀도를 측정하였으며 각 배지는 2kg 멸균용 비닐봉지에 1.5kg 중량을 재고 적외선 수분측정기를 이용 하여 65±1%로 조정하고 액체배지종균 50ml을 무균상에서 접종후 25℃의 배양실에서 배양하여 최종 배양일수를 측정하였다.

(2) 상기 (1)의 실험결과, 실시예 및 비교예들의 결과는 이하 표 4와 같음을 알 수 있었다(다만, 비교예들의 경우도 다른 조건은 실시예 1과 같은 조건으로 하되, 배지(액체배지종균 접종 대상)만을 달리하여 검은비늘버섯을 생산한 것이다.).

[표 4]

	균사생장속도	균사의 밀도	최종배양일수
실시예 1의 방법으로 생산된 검은비늘버섯	120㎎/day	3.3g/ℓ	15
비교예 2의 방법으로 생산된 검은비늘버섯	107㎎/day	2.5g/ℓ	25
비교예 3의 방법으로 생산된 검은비늘버섯	112㎎/day	2.8g/ℓ	22
비교예 4의 방법으로 생산된 검은비늘버섯	104㎎/day	2.3g/ℓ	27

상기 표 4에서 알 수 있듯이, 실시예의 방법으로 제조된 검은비늘버섯이 비교예들의 방법으로 제조된 검은비늘버섯보다 균사생장속도 및 균사의 밀도가 높다는 것을 알 수 있었다. 또한 최종배양일수는 오히려 짧아, 보다 신속한 버섯의 생산이 가능하다는 것도 알 수 있었다.

2. 검은비늘버섯 자실체 형성시의 조건을 달리한 산물 생산

상기 실시예 1과 같은 방법으로 검은비늘버섯을 생산하되, 자실체 형성의 단계서 유지온도에 따른 자실체 발생 시간을 이하의 표 5와 같이하여 생산하였다.

[표 5]

	온도(℃)	시간(자실체 발생일)
실시예 18	12	30
실시예 19	13	26
실시예 20	14	20
실시예 1	15	15
실시예 21	16	7
실시예 22	17	21
실시예 23	18	26
비교예 5	10	39
비교예 6	20	37

(상기 표 5에서 실시예 1은 다른 실시예들 및 비교예와의 비교를 위하여 표에 첨부한 것이다.)

(1) 버섯의 생육에 온도가 미치는 영향을 살펴보기 위하여, 버섯 생육실의 온도를 10℃~20℃(각 1℃마다 실험)로 각각 조절하여 버섯의 생육정도를 측정하였다. 또한 초기버섯 자실체의 발생까지 걸리는 기간도 측정하였다.

상기 각각의 결과확인을 위하여, 자실체 형성 수량 및 개체중량을 측정하기 위해 15℃ 생육실에서 상대습도 90%이상을 유지하고 버섯 발생을 유도하여 자실체 수량 및 개체중량을 측정하였다.

(2) 배양이 완료된 배지에 자실체를 형성시키기 위하여 생육 온도를 달리하여 자실체 발생을 유도한 결과, 14~16℃의 온도에서 가장 빨리 자실체가 발생되었고 10℃ 및 20℃에서는 자실체 발생이 상당히 늦어졌다.

환기는 이산화탄소 측정기를 사용하여 500ppm에서부터 1500ppm까지 측정하여 자실체 수확량을 비교 측정하였으나 느타리처럼 자실체 수량에 환기가 큰 영향을 미치지 않았다. 그러나 온도에 따라서 자실체 색택이 변화하는 것을 알 수 있었다. 낮은 온도에서는 진한 갈색을 유지하였고 높은 온도에서는 황금색을 유지하였다.

액체접종 및 혼합접종시의 수량성 측정은 이미 실험을 통하여 액체종균을 접종한 배지는 균사의 활착일수 및 자실체 발생시기 등 고체종균 접종에 비해서 경제성을 갖춘 것으로 판단되었으나 액체 고체 혼합접종의 수량성도 액체종균 접종때와 거의 유사하게 나타났으나 두가지 종균을 반복 접종한다는 번거로운점도 있다. 따라서 균 접종시의 무균성만 보장된다면 액체종균 단일접종이 가장 경제성 있는 종균접종 방법으로 나타났다.

또한 자실체 개체중량 및 주기별 소요일수는 1주기 145g 7일, 2주기150g 15일, 3주기 120g 20일로 나타났다. 따라서 검은비늘버섯의 자실체 발생 기간은 7~20일(보다 최적은 15일)이 최적의 기간임을 알 수 있었다.

본 발명은 검은비늘버섯의 신속, 대량생산을 위한 정립된 제조방법을 제공하여 식품분야나 의약분야에의 버섯이용을 가능하게 하며, 검은비늘버섯을 이용하려는 소비자의 욕구를 충족시키며 공급자의 이윤창출에도 기여하여, 궁극적으로 국가의 산업발전에 이바지 할 수 있을 것으로 기대된다.

도 1은 시료가 채취된 모본 버섯자실체를 나타낸다.

도 2는 모본으로부터 분리한 검은비늘버섯 균주를 나타낸다.

도 3은 균주를 진탕배양시키는 것을 나타낸다.

도 4는 정치배양(좌), 통기배양(중), 배양전(우)의 상태를 나타낸 것이다.

도 5는 단목배양 중인 상태를 나타낸 것이다.

도 6은 혼합배양 중인 상태를 나타낸 것이다.

도 7은 액체배양을 통한 단목접종 자실체 발이 초기를 나타낸다.

도 8은 단목과 혼합배지에서의 자실체를 나타낸다.

도 9는 단목재배에 의한 자실체를 나타낸다.

도 10은 수확된 검은비늘버섯을 나타낸다.

도 11은 검은비늘버섯 표피를 확대한 것을 나타낸다.

도 12는 검은비늘버섯 갓, 포자를 확대한 것을 나타낸다.

Claims

검은비늘버섯의 생산방법에 있어서,

균사체의 선발단계;

상기 균사체를 SDB(Soybean powder Dextrose Broth)의 액체배양 배지에 첨가하고, 0.5∼1.5vvm의 통기량으로 조절하여 배양시키는 단계;

상기 배양된 액체배지종균을 단목에 접종시키는 단계; 및

상기 액체배지종균이 접종된 단목에서 검은비늘버섯의 자실체를 형성시키는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 단목재배를 이용한 검은비늘버섯의 생산방법.
제1항에 있어서, 상기 균사체는 검은비늘버섯(Pholiota adiposa) 균주가, YMA(Yeast extract Malt extract Agar) 배지에서 pH 6~8, 20~30℃의 조건하에서 6~8일간 배양되어 선발된 것임을 특징으로 하는 단목재배를 이용한 검은비늘버섯의 생산방법.
삭제
제1항에 있어서, 상기 균사체 배양은 상기 선발된 균사체를 상기 액체배양 배지에 첨가하고 23~27℃의 무균실에서 6~8일간 배양하는 것임을 특징으로 하는 단목재배를 이용한 검은비늘버섯의 생산방법.
제1항에 있어서, 상기 단목은 참나무이며 상기 참나무를 지름 18~22㎝, 길이 23~27㎝로 절단하고, 무수황산마그네슘(Magnesium Sulfate Anhydrous), 질산칼륨(Potassium Nitrate) 및 버섯전용제제를 함유하는 용수에 1~3일간 침수시킨 후, 118~124℃에서 50~70분간 고압 멸균 후 상온에서 냉각한 것임을 특징으로 하는 단목재배를 이용한 검은비늘버섯의 생산방법.
제1항에 있어서, 상기 검은비늘버섯의 자실체 형성은 14~16℃에서 7~20일간의 조건에서 자실체가 형성되는 것임을 특징으로 하는 단목재배를 이용한 검은비늘버섯의 생산방법.
청구항 제1항, 제2항, 제4항 내지 제6항 중에서 선택된 어느 한 항의 방법으로 생산된 검은비늘버섯.