KR100806529B1 - 수성 라이신 함유 동물 사료 보충물 및 이의 제조방법 - Google Patents

수성 라이신 함유 동물 사료 보충물 및 이의 제조방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은, 발효로부터의 불활성화된 미생물을 임의로 함유하고 pH가 7 미만인 수성 L-라이신 함유 동물 사료 보충물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.
L-라이신, 동물 사료 보충물, 동물 사료 첨가물

Description

수성 라이신 함유 동물 사료 보충물 및 이의 제조방법{Aqueous lysine-containing animal feed supplements and process for the production thereof}
본 발명은 발효 공정으로부터의, 바람직하게는 불활성화된 미생물을 임의로 함유하는 수성 L-라이신 함유 동물 사료 보충물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.
필수 아미노산 L-라이신은 동물 사료 보충물로서 광범위하게 사용된다.
L-라이신은 코리네형 세균, 특히 코리네박테리움 글루타미쿰(Corynebacterium glutamicum)의 균주를 발효시킴으로써 생성되는 것으로 공지되어 있다. 이의 주목할 만한 중요성 때문에, 생성 공정을 개선하기 위한 노력이 끊임없이 있어 왔다. 공정의 개선은, 예를 들면, 돌연변이 및 선별에 의한 미생물의 고유한 성능 특성; 예를 들면, 교반 및 산소 공급과 같은 발효 기술에 관한 수단; 예를 들면, 발효 동안의 당 농도와 같은 영양 배지의 조성; 또는 예를 들면, 이온 교환 크로마토그래피 또는 결정화에 의한 생성물의 후처리에 관한 것일 수 있다.
선행기술에 따르면, L-라이신 함유 발효 브로스(broth)로부터 제조된 3가지 상이한 그룹의 L-라이신 함유 생성물들이 존재한다.
가장 잘 알려진 그룹에는, 예를 들면, L-라이신 모노하이드로클로라이드와 같은 염 형태로 통상적으로 존재하는, 정제되거나 순수한 L-라이신으로부터 수득된 분말상 생성물 또는 결정질 생성물이 포함된다.
예를 들면, 유럽 특허공보 제0 533 039호에 기술된 바와 같은 고체 생성물의 또 다른 그룹에는, 예를 들면, L-라이신 이외에, 발효 공정 동안 사용된 공급 재료가 함유되고 사용된 미생물의 불활성화된 바이오매쓰(biomass)가 임의로 함유된다.
분말상 생성물, 결정질 생성물 또는 사실상 과립상 생성물은 조작 특성 및 용도 측면에서 명확하게 불리하다. 기후 영향의 결과로서 발생할 수 있는 케이킹(caking)으로 인하여 사용시 생성물의 저장 수명 및 분배 특성이 손상되기 때문에, 생성물의 품질은, 예를 들면, 높은 대기 습도 수준과 같은 기후에 의해 상당한 영향을 받을 수 있다. 무수 분말상 L-라이신 함유 생성물의 가공은 바람직하지 않은 분말로 전개될 수 있다.
L-라이신 함유 생성물의 제3 그룹은 농축 알카리 수용액을 포함하며, 이 때문에 위에서 언급된 문제점을 피하게 된다[참조: 유럽 특허공보 제0 534 865호].
각종 생성물의 제공에 있어서, L-라이신 함유 발효 브로스로부터 L-라이신 함유 생성물을 제조하기 위한 다수의 상이한 공정이 공지되어 있다.
고형의 순수한 L-라이신을 제조하기 위한 필수적인 2개의 상이한 공정이 현재 공지되어 있다.
라이신은, 불활성화된 바이오매쓰를 적합한 방법으로 분리 제거한 후, 상응하는 발효 브로스로부터 결정화시킴으로써 모노하이드로클로라이드(Lys-HCl)로서 수득할 수 있다. 추가의 농축을 수행하기 전, 일반적으로 여러 단계에 걸친 이온 교환 크로마토그래피에 의해 여액을 정제한다. 무엇보다도 먼저, 이온 교환 수지 상에 라이신이 용이하게 흡착되도록 하기 위해, 바이오매쓰로부터 분리된 발효 브로스를 바람직하게는 염산(HCl) 또는 황산(H2SO4)을 가하여 산성화시킨다. 발효에 의해 제조된 L-라이신 이외에, 발효 브로스에 존재하는 각종 기타 양이온이 결합한다. 일반적으로, 서로 연결된 각종 이온 교환 컬럼이 순수한 생성물의 수득에 필요하다. 이어서, 흡착된 라이신을 바람직하게는 암모니아 용액에 의해 용출시키고, 이온 교환 컬럼을 재생한다. 이어서, 이러한 방법으로 수득된 라이신 용액을 농축시키고, 염산을 사용하여 중화시킨 후, 결정질 형태의 라이신-HCl을 수득한다.
또 다른 방법으로 활성 탄소(SU-183581)를 사용하여 정제한 후, 결정질 염의 형태인 라이신을 수득할 수 있다. 라이신 함유 발효 브로스를 습윤 가열을 사용하는 표준 공정에 의해 불활성화시키고, 여과에 의해 바이오매쓰로부터 분리 제거한다. 여액을 pH 5로 산성화시킨 후, 4 내지 5%의 활성 탄소를 일정한 교반하에 50 내지 55℃에서 가하여 원치않는 불순물을 여액으로부터 분리 제거하고 결정의 변색을 방지한다. 이후의 추가의 여과 단계에서, 활성 탄소를 분리 제거하고, 수산화칼슘을 가하여 용해된 황산염을 황산칼슘으로서 침강시킨다. 이를 여과 제거한 후, 암모니아 성분을 진공하에 회전 증발기에서 제거하고, 냉각시 결정화가 발생할 때까지 용액을 농축시킨다.
이들 2가지 후처리 방법의 단점은 다수의 개별적인 단계와 이온 교환 크로마토그래피를 사용하는 복잡한 정제 공정으로 이루어진다는 것이다. 불필요한 염의 제거 또는 상이한 용출 매질의 사용으로 인하여 추가의 폐기 스트림이 발생하며, 이들은 복잡한 방법 또는 고가의 처리에 의해 제거되어야 한다.
유럽 특허공보 제0 533 039호에는, 바이오매쓰를 임의로 함유하는 모든 발효 공급 재료가 상승된 온도에서 농축되고 분무 건조된다는 단점이 있다.
미국 특허공보 제5,990,350호에는 바이오매쓰를 함유하지 않는 L-라이신 함유 과립의 제조방법이 기재되어 있다. 당해 방법에서, 바이오매쓰는 우선 한외여과에 의해 발효 브로스로부터 분리되고 제거된다. 이어서, 물을 광범위하게 증발시켜, 이러한 방법으로 회수된 여액을 농축시킨다. 마지막으로, 당해 방법으로 수득된 농축물을 건조시키고 유동층 분무 과립화에 의한 복잡한 방법으로 후처리하여 과립을 제조한다.
유럽 특허공보 제0 534 865호에는 발효 브로스로부터 염기성 L-라이신 함유 수용액을 제조하는 방법이 공지되어 있다. 기재된 방법에서, 바이오매쓰는 발효 브로스로부터 분리 제거된다. 예를 들면, 수산화나트륨, 수산화칼륨 또는 수산화암모늄과 같은 염기를 사용하여 pH 값을 9 내지 11로 조정한다. 광물 성분(무기염)은 농축 및 냉각 후의 결정화에 의해 브로스로부터 분리되며, 이는 비료 또는 폐기물(쓰레기 매립)로서 사용된다.
본 발명의 목적은 사료 보충물로서 적합한 L-라이신 및 이의 염으로 이루어진 신규한 수성 제제를 제공하는 것이다.
또한, 본 발명의 목적은 현재 공지된 방법보다 경제적이고 효과적인 제조방법을 제공하는 것이다.
필수 아미노산인 라이신은 동물 사료 보충물로서 광범위하게 사용된다.
코리네박테리움속의 미생물은 상대적으로 짧은 기간 동안 고농도의 L-라이신을 상응하는 발효 배지에 분비할 수 있는 능력에 의해 특징된다. 제조 공정은 일반적으로 공급 배치 공정(fed batch process)으로 수행된다. 발효에 의해 제조된 L-라이신은 주로 결정질 생성물, 분말 또는 과립의 제조를 위해 후처리된다.
본 발명은,
a) L-라이신 및/또는 이의 염,
b) 발효 동안 형성된 바이오매쓰 0 내지 100중량%, 바람직하게는 50 내지 100중량%, 가장 바람직하게는 90 내지 100중량% 및
c) 발효 브로스 중에 용해 및 현탁된 기타 성분의 절반 이상을 함유하고,
d) 임의로 현탁액과 같은 액상 형태로 존재하며,
e) pH가 7 미만인, 발효 브로스-기재 동물 사료 보충물을 제공한다.
동물 사료 보충물의 라이신 함량(라이신 염기로서의 함량)은, 당해 보충물의 총량에 대해, 10 내지 35중량%, 바람직하게는 15 내지 35중량%, 특히 바람직하게는 18 내지 35중량%, 가장 바람직하게는 21 내지 34중량%이다. pH는 7 미만, 바람직하게는 2 내지 6.5, 특히 바람직하게는 2.5 내지 6 및 가장 바람직하게는 2.5 내지 5이다.
보충물의 총 고형물 함량은 10 내지 55중량%, 바람직하게는 20 내지 55중량%, 특히 바람직하게는 35 내지 55중량% 및 가장 바람직하게는 45 내지 54중량%이다. 고체 함유물은, 분리 또는 여과와 같은 적합한 방법으로 분리 제거되지 않는한 라이신 이외에,
- 바람직하게는 제조된 미생물의 바이오매쓰,
- 발효 브로스의 무기 성분 및 기타 유기 성분 및
- 발효 동안 제조된 부산물을 함유한다.
바이오매쓰가 보충물에 완전하게 또는 부분적으로 잔류하는 경우, 바이오매쓰가 부분적으로 잔류한 보충물에는 미생물 단백질이 최대 4중량% 이하의 농도로 함유되어 있다.
보충물은 무기 성분으로서, 특히 칼슘, 마그네슘, 인산염 형태의 인 및 황산염 형태의 황을 함유하고, 유기 성분으로서, 특히 바이오틴 및 티아민과 같은 비타민 또는 이소말토즈와 같은 당을 함유한다.
발효 동안 소량으로 생성되는 유기 부산물에는, L-알라닌, L-아스파라긴, L-글루타민, L-메티오닌, L-트레오닌 및 L-발린을 포함하는 그룹으로부터 선택된 L-아미노산이 포함된다. 또한, 이들 부산물에는, 예를 들면, 락트산, 아세트산 및 말산과 같은 카복실 그룹을 1 내지 3개 갖는 유기산이 포함된다. 마지막으로, 이들 부산물에는, 예를 들면, 트레할로스와 같은 당도 포함된다.
보충물의 원자가를 개선시키는 경우, 이들 화합물이 바람직할 수 있다.
또한, 본 발명은 라이신 및/또는 이의 염을 함유하는 수성 용액/현탁액의 제조방법을 제공하며, 당해 제조방법은
L-라이신 함유 브로스를 발효에 의해 생성시키는 단계(a),
L-라이신 함유 기질을 임의로 가하여 목적하는 라이신 농도를 맞추는 단계(b),
용액/현탁액의 pH 값을 7 미만으로 조정하는 단계(c),
본 방법에서 수득된 브로스를 진공하에 임의로 농축시키는 단계(d)를 포함[여기서, 단계(b), 단계(c) 및 단계(d)의 순서는 변경될 수 있다]함을 특징으로 한다.
또한, 마지막으로, 본 발명은 라이신 및/또는 이의 염을 함유하는 수성 용액/현탁액의 제조방법을 제공하며, 당해 제조방법은
L-라이신 브로스를 발효에 의해 생성시키는 단계(a),
본 방법에서 수득된 브로스의 pH 값을 7 미만으로 조정하는 단계(b),
바이오매쓰를 용액/현탁액으로부터 임의로 완전하게 또는 부분적으로 분리 제거하는 단계(c),
L-라이신 함유 기질을 가하여 목적하는 라이신 농도를 임의로 맞추는 단계(d),
수득된 브로스를 임의로 진공하에 농축시키는 단계(e)를 포함[여기서, 단계(b), 단계(c), 단계(d) 및 단계(e)의 순서는 변경될 수 있다]함을 특징으로 한다.
L-라이신을 제조하는 돌연변이 코리네형 세균은, 예를 들면, 미국 특허공보 제4,657,860호와 같은 선행기술에 상세하게 기재되어 있다.
L-라이신의 제조를 위해, 이들 균주를 배치 공정 또는 공급 배치 공정 또는 반복되는 공급 배치 공정을 사용하여 연속적으로 또는 불연속적으로 배양시킬 수 있다. 공지된 배양 방법은 문헌[참조: Chmiel, Bioprozesstechnik 1. Einfuhrung in die Bioverfahrenstechnik(Gustav Fischer Verlag, Stuttgart, 1991)] 또는 문헌[참조: Storhas, Bioreaktoren und periphere Einrichtungen(Vieweg Verlag, Braunschweig/Wiesbaden, 1994)]에 요약되어 있다.
사용되는 배양 배지는 특정 균주의 요구를 적절히 만족시켜야 한다. 사용할 수 있는 탄소 공급원은 당 및 탄수화물, 예를 들면, 글루코즈, 슈크로즈, 락토즈, 프럭토즈, 말토즈, 몰라세즈, 전분 및 셀룰로즈; 오일 및 지방, 예를 들면, 두유, 해바라기유, 땅콩유 및 코코넛유; 지방산, 예를 들면, 팔미트산, 스테아르산 및 리놀레산; 알콜, 예를 들면, 글리세롤 및 에탄올; 및 유기산, 예를 들면, 아세트산이다. 이들 물질은 각각 사용하거나 혼합물로 사용할 수 있다. 사용할 수 있는 질소 공급원은 질소 함유 유기 화합물, 예를 들면, 펩톤, 효모 추출물, 고기 추출물, 맥아 추출물, 옥수수 침지액, 콩가루 및 우레아; 또는 무기 화합물, 예를 들면, 황산암모늄, 염화암모늄, 인산암모늄, 탄산암모늄 및 질산암모늄이다. 질소 공급원은 각각 사용하거나 혼합하여 사용될 수 있다. 사용할 수 있는 인 공급원은 인산이수소칼륨 또는 인산수소이칼륨 또는 상응하는 나트륨 함유 염이다. 배양 배지는 생장에 필수적인 금속염, 예를 들면, 황산마그네슘 또는 황산철을 추가로 함유해야 한다. 마지막으로, 필수 생장 촉진 물질, 예를 들면, 아미노산 및 비타민을 상기 언급된 물질에 추가하여 사용할 수 있다. 또한, 적합한 전구체를 배양 배지에 가할 수 있다. 언급된 공급 재료 물질은 단일 배치로서 배양물에 가하거나 배양 동안 적절하게 공급할 수 있다.
수산화나트륨, 수산화칼륨, 암모니아와 같은 염기성 화합물 또는 인산, 황산과 같은 산성 화합물을 적절하게 사용하여 배양물의 pH를 조절할 수 있다. 거품을, 예를 들면, 지방산 폴리글리콜 에스테르와 같은 소포제를 사용하여 조절할 수 있다. 항생제와 같은 적합한 선택적 작용 물질을 배지에 첨가하여 플라스미드 안정성을 유지시킬 수 있다. 산소 또는 공기와 같은 산소 함유 기체 혼합물을 배양물에 도입하고 적합한 교반 시스템 또는 기체 스트림을 사용하여 혼합시켜, 호기성 조건을 유지시킬 수 있다. 배양물의 온도는 통상적으로 25 내지 37℃이다. L-라이신이 최대의 양으로 형성될 때까지 배양을 지속한다. 이러한 목표는 일반적으로 10 내지 160시간 이내에 달성된다.
적합한 발효 배지의 예는, 예를 들면, 유럽 특허공보 제0 532 867호, 미국 특허공보 제5,840,551호 및 미국 특허공보 제5,990,350호에서 찾을 수 있다.
L-라이신의 분석은 문헌[참조: Spackman et al., Analytical Chemistry, 30, (1958), 1190]에 기술된 바와 같은 음이온 교환 크로마토그래피 및 후속적인 닌하이드린 유도체화에 의해 수행하거나, 문헌[참조: Lindroth et al., Analytical Chemistry (1979) 51: 1167-1174]에 기술된 바와 같은 역상 HPLC에 의해 수행할 수 있다.
본 발명에 따르는 방법에서 사용되는 발효 브로스의 L-라이신 함량(라이신 염기로서의 함량)은, 5.0g/ℓ미만인 비-대사성 당의 함량에 대해, 60g/ℓ를 초과한다. 10중량%를 초과하는 총 고형물 함량에 대해, 바이오매쓰 1 내지 4중량%가 바람직하다. 발효 과정으로부터의 부산물 및 비타민(아미노산, 유기산)의 함량은 2중량% 미만인 것이 바람직하다.
본 발명에 따르는 방법에서, 발효 브로스에 존재하는 바이오매쓰는 일반적으로 개시 시점에, 예를 들면, 열 처리에 의해 불활성화되거나 파괴된다. 그러나, 불활성화는 임의로 제외시킬 수 있다. 무기산, 예를 들면, 황산, 염산 또는 인산, 유기산, 예를 들면, 시트르산, 아세트산 또는 포름산, 또는 상이한 산의 혼합물을 사용하여, 발효 브로스의 pH 값을 7 미만, 바람직하게는 2 내지 6.5, 특히 바람직하게는 2.5 내지 6, 가장 바람직하게는 2.5 내지 5로 맞춘다. 일반적으로, 바이오매쓰는 임의로 공지된 분리 또는 여과방법에 의해 산성화 전 또는 후에 완전하게 또는 부분적으로 분리 제거할 수 있다. 일반적으로, 광물 성분의 분리 제거는 불필요하다. 이어서, L-라이신 함유 산성 용액 또는 산성 현탁액을 공지된 방법(예: 회전 증발기, 박막 증발기 또는 경사 박막 증발기)을 사용하여, 바람직하게는 진공하에, 10 내지 55중량%, 바람직하게는 20 내지 55중량%, 특히 바람직하게는 35 내지 55중량%, 가장 바람직하게는 45 내지 54중량%의 총 고형물 함량에 대하여, 라이신 함량(라이신 염기로서의 함량)이 10 내지 35중량%, 바람직하게는 15 내지 35중량%, 특히 바람직하게는 20 내지 35중량%, 가장 바람직하게는 21 내지 34중량%인 액상 생성물이 수득될 때까지 농축시킨다. 일반적으로, 바람직하게는 브로스 중의 어떠한 광물 성분(무기염)도 침강되지 않고 라이신은 용액 중에 존재하도록 브로스를 농축시킨다. 특정한 단계에서 L-라이신 함유 물질을 가하여, 생성물 중의 L-라이신의 바람직한 농도를 임의로 맞춘다.
이러한 방법으로 수득된, 산성 pH 값을 갖는 용액/현탁액은 운송이 용이하고, 즉시 분배될 수 있으며, 미생물적으로 안정적이고, 저장 수명이 알카리성 용액보다 길다.
또한, 산성화를 농축 후 또는 농축 동안 수행할 수 있다. 발효 전일지라도, 황산염, 염화물, 인산염, 시트르산염 등과 같이 작용하는 음이온을 시판 가능한 염의 형태로 배지에 가할 수 있다.
현탁액이라는 용어는 바람직하게는 불활성화된 미생물이 본 발명의 생성물 중에 용해되지 않은 형태로 존재한다는 사실을 고려한 것이다.
실시예
본 발명은 다음과 같은 실시예에 의해 더욱 상세하게 설명된다.
실시예 1
L-라이신 함유 발효 브로스의 제조
본 발명에 따라 후처리된 라이신 함유 브로스의 제조를 위한 발효 공정이 다수의 선행 특허[참조: 유럽 특허공보 제0 532 867호 및 미국 특허공보 제5,840,551호]에 기재되어 있다.
실시예 2
바이오매쓰를 함유하지 않는 생성물의 제조
라이신의 함량(라이신 염기로서의 함량)이 약 9.5중량%인 발효 브로스 20kg을 실시예 1에 따라 제조하였다. 우선, 발효 브로스에 존재하는 바이오매쓰를 80℃에서 30분 동안 열처리하여 불활성화시켰다. 독일 뒤쎌도르프에 소재한 헤레우스(Heraeus)에서 제조한 바이오퓨즈-스트라토스 실험실용 원심분리기(Biofuge-Stratos Laboratory centrifuge)를 사용하여 불활성화된 바이오매쓰를 4000rpm에서 20분 동안 원심 분리하여 분리 제거하였다. 이러한 방법으로 정제된 현탁액 1.0ℓ에 농축 황산을 단계적으로 가하여 pH를 약 4로 조정하였다. 이어서, 독일 콘스탄츠에 소재한 부히-라보테친크 게엠베하(Buchi-Labortechnik GmbH)에서 제조한 부히 로타베이퍼 RE-120 실험실용 회전 증발기(Buchi Rotavapor RE-120 laboratory rotary evaporator)를 진공하에 사용하여 원심 분리물의 액상 함유물 중의 무수물 함량을 대략 50%로 감소시켰다.
본 방법에서 수득된 액상 생성물의 L-라이신(라이신 염기로서) 함량은 31.5중량%이고 pH는 4이었다. 총 고형물 함량은 49.3중량%이었다.
실시예 3
바이오매쓰 함유 생성물의 제조
라이신의 함량(라이신 염기로서의 함량)이 약 9.5중량%인 발효 브로스 20kg을 실시예 1에 따라 제조하였다. 발효 브로스에 존재하는 바이오매쓰를 80℃에서 30분 동안 열처리하여 생물반응기 중에서 직접 불활성화시켰다. 이어서, 바이오매쓰 함유 발효 브로스 1.0ℓ에 농축 황산을 단계적으로 가하여 pH를 약 4로 조정하였다. 독일 콘스탄츠에 소재한 부히-라보테친크 게엠베하에서 제조한 부히 로타베이퍼 RE-120 실험실용 회전 증발기를 사용하여 당해 산성 라이신 함유 발효 브로스의 액상 함유물 중의 무수물 함량을 대략 50%로 감소시켰다.
본 방법에서 수득된 액상 생성물의 L-라이신 함량(라이신 염기로서의 함량)은 21.8중량%이고 pH는 4이었다. 총 고형물 함량은 50.7중량%이었다. 20℃에서 16개월 동안 저장한 후, 함유물에는 어떠한 유의한 변화도 관측되지 않았다.
본 발명에 의해, 동물 사료 보충물로서 적합한 L-라이신 및 이의 염이 보다 경제적이고 효과적인 방법으로 제공된다.

Claims (12)

  1. a) 동물 사료 보충물의 총량에 대해, L-라이신 염기로서 계산된 함량이 18 내지 35중량%인 L-라이신, 이의 염, 또는 L-라이신과 이의 염 및
    b) 발효 동안 형성된 바이오매쓰(biomass)를 함유하고,
    c) pH가 2 내지 6.5인, 액상 형태의 발효 브로스-기재 동물 사료 보충물.
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. L-라이신 함유 브로스를 발효에 의해 생성시키는 단계(a),
    수득된 브로스의 pH를 2 내지 6.5로 조정하는 단계(b),
    L-라이신 염기로서 계산된, L-라이신, 이의 염, 또는 L-라이신과 이의 염의 함량이 18 내지 35중량%인 생성물을 분리하는 단계(c)
    를 포함하는, 제1항의 액상 형태의 발효 브로스-기재 동물 사료 보충물의 제조방법.
  5. 제4항에 있어서, 단계(b)를 수행한 후에, 브로스로부터 바이오매쓰를 부분적으로 분리 제거하는 단계를 추가로 포함하는 제조방법.
  6. 삭제
  7. 제1항에 있어서, 발효 동안 형성된 바이오매쓰를, 바이오매쓰의 총량을 기준으로 하여 50 내지 100중량% 함유하는, 발효 브로스-기재 동물 사료 보충물.
  8. 제1항에 있어서, 발효 동안 형성된 바이오매쓰를, 바이오매쓰의 총량을 기준으로 하여 90 내지 100중량% 함유하는, 발효 브로스-기재 동물 사료 보충물.
  9. 제4항에 있어서, L-라이신 또는 L-라이신 함유 용액을 첨가하여 L-라이신의 목적하는 농도를 맞추는 제조방법.
  10. a) 동물 사료 보충물의 총량에 대해, L-라이신 염기로서 계산된 함량이 18 내지 35중량%인 L-라이신, 이의 염, 또는 L-라이신과 이의 염을 함유하고,
    c) pH가 2 내지 6.5임을 특징으로 하는, 액상 형태의 발효 브로스-기재 동물 사료 보충물.
  11. L-라이신 함유 브로스를 발효에 의해 생성시키는 단계(a),
    수득된 브로스의 pH를 2 내지 6.5로 조정하는 단계(b),
    브로스로부터 바이오매쓰를 완전하게 분리 제거하는 단계(c) 및
    L-라이신 염기로서 계산된, L-라이신, 이의 염, 또는 L-라이신과 이의 염의 함량이 18 내지 35중량%인 생성물을 분리하는 단계(d)
    를 포함하는, 제10항의 액상 형태의 발효 브로스-기재 동물 사료 보충물의 제조방법.
  12. 제11항에 있어서, L-라이신 또는 L-라이신 함유 용액을 첨가하여 L-라이신의 목적하는 농도를 맞추는 제조방법.
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