KR100806226B1 - A composition for the prevention and treatment of cardiovascular disease containing extract of Glycine max Roots or polypenol compounds isolated thereof - Google Patents

Abstract

본 발명은 콩뿌리 추출물 또는 이로부터 분리된 폴리페놀 화합물을 유효성분으로 하는 심혈관계 질환의 예방 및 치료용 조성물에 관한 것으로서, 본 발명의 콩뿌리 추출물 또는 이로부터 분리된 폴리페놀계 화합물은 LDL에 대한 항산화 활성효과가 매우 우수하여, 저밀도 지질 단백질(Low-density lipoprotein, LDL)의 산화에 의해 유발되는 고지혈증, 관상동맥 심장병, 동맥경화 및 심근경색과 같은 심혈관계 질환의 예방 및 치료에 유용하게 사용할 수 있다.The present invention relates to a composition for the prevention and treatment of cardiovascular diseases comprising soybean root extract or polyphenol compound isolated therefrom, wherein the soybean root extract or polyphenolic compound separated therefrom is contained in LDL. It has an excellent anti-oxidant activity, which is useful for the prevention and treatment of cardiovascular diseases such as hyperlipidemia, coronary heart disease, arteriosclerosis, and myocardial infarction caused by oxidation of low-density lipoprotein (LDL). Can be.

폴리페놀계 화합물, LDL, 심혈관계 질환 Polyphenolic compounds, LDL, cardiovascular diseases

Description

콩뿌리 추출물 또는 이로부터 분리된 폴리페놀계 화합물을 유효성분으로 하는 심혈관계 질환의 예방 및 치료용 조성물{A composition for the prevention and treatment of cardiovascular disease containing extract of Glycine max Roots or polypenol compounds isolated thereof}A composition for the prevention and treatment of cardiovascular disease containing extract of Glycine max Roots or polypenol compounds isolated according to the root extract or polyphenol-based compounds isolated therefrom

본 발명은 콩뿌리 추출물 또는 이로부터 분리된 폴리페놀 화합물을 유효성분으로 하는 심혈관계 질환의 예방 및 치료용 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 콩뿌리를 유기용매로 추출하여 얻어지는 콩뿌리 추출물을 포함하는 심혈관계 질환의 예방 및 치료용 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition for the prevention and treatment of cardiovascular diseases comprising soybean root extract or a polyphenol compound isolated therefrom, and more particularly, comprising a soybean root extract obtained by extracting soybean root with an organic solvent. It relates to a composition for preventing and treating cardiovascular diseases.

최근 성인병 증가와 더불어 동맥경화 등의 혈관장애 질환이 크게 증가하고 있다. 대표적인 혈관장애 질환으로서 동맥경화는 지질대사와 관련된 유전적 요인과 식습관, 흡연, 운동부족 등의 환경적 요인에 의하여 동맥이 경화되는 질환으로, 뇌동맥 또는 관상동맥에서 일어나기 쉬우며, 이로 인하여 심장질환, 뇌혈관 질환 등의 순환계 질환으로 발전하게 된다. 뇌동맥경화의 경우에는 두통, 현기증, 정신 장애 등을 나타내고 뇌연화증의 원인이 되며, 관상동맥경화의 경우에는 심장부에 동통과 부정맥을 일으켜 협심증, 심근경색 등의 원인이 되는 것으로 알려져 있다. 또한 이로 인해 고혈압, 심장병, 뇌일혈 등이 유발되어, 동맥경화로 인한 질병이 현대 사회에 있어, 특히 50∼60대의 남성들에게 가장 큰 사망요인으로 부각되고 있다.Recently, vascular disorders such as arteriosclerosis have increased significantly along with the increase in adult disease. Atherosclerosis is a typical vascular disorder. Atherosclerosis is a disease in which the arteries are hardened by genetic factors related to lipid metabolism and environmental factors such as eating habits, smoking, and lack of exercise, and are likely to occur in the cerebral artery or coronary artery. It develops into circulatory diseases such as cerebrovascular diseases. In the case of cerebral arteriosclerosis, headache, dizziness, and mental disorders are indicated and cause cerebral dysfunction. In the case of coronary arteriosclerosis, pain and arrhythmia in the heart are known to cause angina pectoris and myocardial infarction. In addition, this causes high blood pressure, heart disease, cerebral hemorrhage, and atherosclerosis is the leading cause of death in modern society, especially among men in their 50s and 60s.

혈관 내벽의 플라그(plaque) 형성 및 혈관파열은 심근경색 발병의 주요한 요인이며, 동맥경화의 초기 발생에 관한 가설은 혈관벽의 손상에 대한 만성 염증과정으로, 손상기작보다는 오히려 방어기작인 '손상에 대한 반응(responce-to-injury hypothesis)'으로 제시되고 있다[Circ. Res. 2001, 89, 298-304]. 이는 유전적 변이, 과산화물, 고혈압, 당뇨, 혈장 호모시스테인 농도 증가 또는/및 미생물 감염 등의 원인에 의하여 혈관 내피세포가 정상적인 항상성을 유지하지 못하는 기능부전 상태가 되는 것이다.Plaque formation and vascular rupture of the inner wall of blood vessels are major factors in the development of myocardial infarction, and the hypothesis about the early onset of atherosclerosis is a chronic inflammatory process for damage of the vessel wall. (responce-to-injury hypothesis) '. Res. 2001, 89, 298-304. This is a dysfunction state in which vascular endothelial cells fail to maintain normal homeostasis due to genetic variations, peroxides, hypertension, diabetes, increased plasma homocysteine concentrations, and / or microbial infections.

보다 상세하게, 상기의 원인들로 인하여 혈중 저밀도 지단백질(low-density lipoprotein; LDL)이 산화, 당결합, 집적화, 당단백 결합 등을 거쳐 변형-LDL(highly modified-LDL; HM-LDL)로 변화하게 되고, 이들은 혈관 내피세포 및 평활근을 자극하고 손상을 유발한다. 이로 인하여, 내피세포의 혈관세포부착물질-1(vascular cell adhesion molecule-1; VCAM-1)의 발현 및 염증세포의 염증매개인자 방출이 촉진되면 LDL은 내피세포 아래에 유입 및 축적되고, 축적된 LDL 및 산화된 HM-LDL은 다시 대식세포, T 임파구 등의 면역세포의 유입 및 활성화를 유발하는 과정을 되풀이하여 병변의 염증반응을 촉진시키게 된다. 그 다음, 유입된 대식세포나 임파구로부터 방출된 가수분해효소, 염증매개인자, 성장인자 등의 작용으로 병반은 괴사하게 되고, 괴사된 병소 부위로 단핵구의 유입, 평활근의 이동 및 분화, 섬유성 조직의 형성 등의 반복적인 과정이 이루어진다. 상기 과정을 통해 병변 조직은 HM-LDL을 핵으로 한 괴사조직에 섬유질이 덮인 복잡한 구조의 섬유질 병변으로 발달하게 되며, 발달된 병변 조직으로부터 혈전이 생성되고 동맥이 경화되어 혈류장애 등 순환기 질환이 나타나게 되는 것이다.More specifically, these causes cause low-density lipoprotein (LDL) in the blood to change to highly modified-LDL (HM-LDL) through oxidation, glycemic binding, integration, glycoprotein binding, and the like. They stimulate and cause damage to vascular endothelial cells and smooth muscle. As a result, when the expression of vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1) of endothelial cells and the release of inflammatory mediators of inflammatory cells are promoted, LDL enters and accumulates under the endothelial cells, LDL and oxidized HM-LDL in turn to induce the influx and activation of immune cells, such as macrophages, T lymphocytes to promote the inflammatory response of the lesion. Next, the lesions are necrotic by the action of the introduced macrophages or lymphocytes released from hydrolysases, inflammatory mediators, growth factors, etc., and monocytes are introduced into the necrotic lesions, smooth muscle migration and differentiation, and fibrous tissues. Iterative process such as the formation of a. Through this process, the lesion tissue develops into a fibrous lesion of complex structure covered with fibres on the necrotic tissue with HM-LDL as the nucleus, and a thrombosis is formed from the developed lesion tissue and the arteries are hardened to show circulatory diseases such as blood flow disorder. Will be.

LDL 산화는 죽상경화증(atherosclerosis)을 포함하는 동맥경화를 유발하는 초기 요인으로 가장 중시되고 있다[Circulation, 1995, 91, 2488-2496; Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol., 1997, 17, 3338-3346]. 생체 내외에서 생성되는 산화적 스트레스(oxidative stress)는 혈액 내의 LDL을 산화된-LDL(oxidized-LDL)로 변형시키게 되고, 이것이 부착분자(adhesion molecule)를 통해 맥관내막(intima) 내로 유입된다. 유입된 산화된-LDL을 단핵구(monocyte)가 탐식하여 거품세포(foam cell)를 형성하면서 동맥경화 초기 병변인 지방선조(fatty streak)를 생성하게 된다. 동맥경화 초기 병변의 특징은 동맥 내피세포에서 생성되는 부착분자인 VCAM-1, ICAM-1(intracellular adhesion molecule-1) 및 MCP-1(monocyte chemoattractant protein-1)이 발현된다는 것인데, 이들은 전사인자(transcription factor)인 NF-κB(nuclear factor-κB)에 의해 유도된다. 또한, NF-κB로 인하여 혈관벽 내에 플라그(plaque)의 형성 및 파열이 일어난다. NF-κB는 활성 산소종이 나 사이토카인(cytokine) 등과 같은 다양한 요인에 의해 활성화되며, p50과 p65로 구성된 이형 이합체(hetero dimer)로서 많은 세포의 타겟 유전자(target gene)를 조절하는데 포함되는 전사인자이다. 활성화된 NF-κB는 IL-1, VCAM-1, ICAM-1 및 죽상동맥경화(atherosclerosis)의 진행에 관여하는 다른 인자들과 같이 특이적인 프로모터 유전자(promoter gene)에 결합하여 다양한 염증인자의 발현을 조절한다. LDL oxidation is most important as an early cause of atherosclerosis, including atherosclerosis [Circulation, 1995, 91, 2488-2496; Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol., 1997, 17, 3338-3346. Oxidative stress produced in vivo and in vivo transforms LDL in the blood into oxidized-LDL, which enters the intima through an adhesion molecule. Monocytes are introduced into the oxidized-LDL to form foam cells, producing fat streak, an early lesion of atherosclerosis. Atherosclerotic early lesions are characterized by the expression of VCAM-1, intracellular adhesion molecule-1 (IMC-1) and monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1), which are produced by arterial endothelial cells. It is induced by the transcription factor (NF-κB). In addition, NF-κB causes plaque formation and rupture in the vessel wall. NF-κB is activated by various factors such as reactive oxygen species or cytokines, and is a heterodimer composed of p50 and p65, which is a transcription factor involved in regulating the target gene of many cells. to be. Activated NF-κB binds to specific promoter genes such as IL-1, VCAM-1, ICAM-1, and other factors involved in the progression of atherosclerosis, resulting in the expression of various inflammatory factors. Adjust.

항산화제 및 유리기 소거제는 이러한 NF-κB의 활성을 저해하는 것으로 밝혀지고 있으므로 항산화제를 적절히 섭취할 경우, 생체 내(in vivo)에서 LDL의 산화를 저해하고 부착분자의 발현을 억제하며 NF-κB의 활성을 감소시켜 동맥경화를 억제할 것으로 기대되며, 이에 대한 연구들이 진행되고 있다(대한민국 공개특허 제2003-0014155호). 또한, 고지혈증, 관상동맥 심장병, 동맥경화 및 심근경색 환자에 있어서 LDL 퍼옥사이드의 생성요인과 제거에 관한 연구[Curr. Atheroscler. Res., 2000, 2, 363-372]도 활발히 진행되고 있다.Antioxidants and free radical scavengers, so is found to inhibit this NF-κB activity in case of ingestion of antioxidants as appropriate, in vivo (in In vivo ) is expected to inhibit the arteriosclerosis by inhibiting the oxidation of LDL, inhibit the expression of adhesion molecules and decrease the activity of NF-κB (Korean Patent Publication No. 2003-0014155) . In addition, studies on the factors and production of LDL peroxide in hyperlipidemia, coronary heart disease, atherosclerosis and myocardial infarction [Curr. Atheroscler. Res., 2000, 2, 363-372 are also actively progressing.

현재 고지혈증 치료제로 사용되고 있는 프로부콜(Probucol), N,N'-디페닐렌디아민(N,N'-diphenylenediamine), 페놀계 합성 항산화제인 BHA(butylated hydroxyanisol) 및 BHT(butylated hydroxytoluene)는 LDL내 콜레스테롤을 감소시키고, 산화 정도를 약화시켜 병변형성을 감소되며, 상기 고지혈증 치료제는 항산화력은 우수하지만, 부작용이 많아 사용이 제한되고 있다. Probucol, N, N'-diphenylenediamine (N, N'-diphenylenediamine), phenolic synthetic antioxidants BHA (butylated hydroxyanisol) and BHT (butylated hydroxytoluene), which are currently used to treat hyperlipidemia, are cholesterol in LDL. It is reduced, the degree of oxidation is reduced to reduce the lesion formation, the antihyperlipidemic agent is excellent in antioxidant power, but its use is limited because of many side effects.

현재 고지혈증 치료제로 사용되고 있는 프로부콜(Probucol), N,N'-디페닐렌디아민(N,N'-Diphenylenediamine), 페놀계 합성 항산화제인 BHA(Butylated hydroxyanisol)와 BHT(Butylated hydroxy toluene)는 LDL 콜레스테롤을 감소시키 고, 산화 정도를 약화시키며, 병변형성을 감소시켜 항산화력은 우수하나, 부작용이 많아 사용이 제한되고 있다.Probucol, N, N'-Diphenylenediamine (N, N'-Diphenylenediamine), a phenolic synthetic antioxidant, BHA (Butylated hydroxyanisol) and BHT (Butylated hydroxy toluene), which are currently used to treat hyperlipidemia, are LDL cholesterol Reduces the oxidation, weakens the degree of oxidation, reduces the formation of lesions, the antioxidant power is excellent, but many side effects are limited use.

따라서, 이러한 질병을 예방하려는 목적으로 종전부터 콜레스테롤 흡수의 억제와 생합성의 저해를 통한 혈장 LDL양을 감소시키려는 시도가 진행되어 왔다[Principles in Biochemistry, lipid biosynthesis, 770-817, 3rd Edition, 2000 Worth Publishers, New York; Steinberg, N. Engl. J. Med., 1989, 320, 915-924]. 또한, 고지혈증, 관상동맥 심장병, 동맥경화 및 심근경색 환자에 있어서 LDL 항산화제와 함께 지질강하제의 병행투여 요법에 대한 관심도가 높아지고 있다.Therefore, attempts have been made to reduce plasma LDL levels through inhibition of cholesterol absorption and inhibition of biosynthesis in order to prevent such diseases [Principles in Biochemistry, lipid biosynthesis, 770-817, 3rd Edition, 2000 Worth Publishers]. , New York; Steinberg, N. Engl. J. Med., 1989, 320, 915-924. In addition, in patients with hyperlipidemia, coronary heart disease, arteriosclerosis, and myocardial infarction, there is a growing interest in the combination of LDL antioxidant and hypolipidemic therapy.

한편, 콩뿌리는 한방 및 민간요법에서 사용되는 약용식물로서, 이를 사용한 종래기술로는 대한민국 등록특허 제500641호에 개시된 모발재생용 식품, 대한민국 특허출원 제2001-0034791호에 개시된 여드름 피부 및 지루성 피부의 관리를 위한 조성물, 대한민국 특허출원 제2000-7014485호에 개시된 골다공증 및 폐경기 증후군 치료제 등이 있다. 그러나, 아직까지 LDL과 관련된 대사에 미치는 영향에 대해서는 발표된 바 없다.On the other hand, soybean root is a medicinal plant used in herbal and folk medicine, the prior art using the hair regeneration food disclosed in the Republic of Korea Patent No. 500641, acne skin and seborrheic skin disclosed in the Republic of Korea Patent Application No. 2001-0034791 The composition for the management of, osteoporosis and menopausal syndrome therapeutic agents disclosed in Korean Patent Application No. 2000-7014485. However, there are no published reports on the metabolism associated with LDL.

이에, 본 발명자들은 부작용이 적은 새로운 고지혈증, 관상동맥 심장병, 동맥경화 및 심근경색 치료제를 천연물에서 탐색하던 중, 콩뿌리 추출물 또는 이로부터 분리된 폴리페놀계 화합물에서 LDL에 대한 항산화 활성이 있음을 확인하여 본 발명을 완성하였다.Accordingly, the inventors of the present invention, while searching for new hyperlipidemia, coronary heart disease, arteriosclerosis, and myocardial infarction drugs with fewer side effects, confirmed that there was an antioxidant activity against LDL in soybean root extract or a polyphenolic compound isolated therefrom. The present invention was completed.

본 발명은 콩뿌리 추출물 또는 이로부터 분리된 폴리페놀계 화합물을 유효성분으로 함유하는 심혈관계 질환의 예방 및 치료용 조성물을 제공하고자 한다.The present invention is to provide a composition for the prevention and treatment of cardiovascular diseases containing soybean root extract or a polyphenol-based compound isolated therefrom as an active ingredient.

본 발명은 상기 콩뿌리 추출물 또는 이로부터 분리된 폴리페놀계 화합물을 유효성분으로 함유하는 심혈관계 질환의 예방 및 치료용 조성물을 제공하고자 한다. The present invention is to provide a composition for the prevention and treatment of cardiovascular diseases containing the soybean root extract or a polyphenol-based compound isolated therefrom as an active ingredient.

이하, 본 발명에 대해 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명은 콩뿌리 추출물을 포함하는 심혈관 질환의 예방 및 치료용 조성물을 제공한다.The present invention provides a composition for the prevention and treatment of cardiovascular diseases, including soybean root extract.

상기 콩뿌리(Glycine max (L.) Merr.)는 장미목 콩과의 한해살이풀로 식용작물로 널리 재배하고 있는 식물로서 최근 기능성 식품으로 각광받고 있다. 이는 콩의 풍부한 영양원과 항암 활성을 나타내는 트리터펜계 화합물을 함유하기 때문이다. 일찍이 콩은 오곡의 하나로 꼽혀 왔으며 쌀에 부족한 단백질과 지방질을 보완 공급하는데 있어 가장 안성맞춤으로 알려져 있다. 콩의 효능으로는 허준이 쓴 <동의보감>에서는 콩을 장기간 복용하면 보신효과가 있고, 체중이 증가한다고 하였다. 또한 위장의 열을 제거하며 장의 통증, 열독에 효과가 있고, 대소변의 배설을 다스 리며, 부종, 복부팽만 등에 효과가 있다고 하였다. 한편 콩가루도 뱃속과 장을 다스리며, 곡물의 소화를 돕고 종기를 제거하는 효과가 있으며, 콩나물은 무릎의 동통을 다스리고 근육통을 없애 준다고 하였다. 또한 콩은 노인치매를 예방하는 효과가 있으며, 최근에는 에이즈(AIDS) 바이러스에 대한 감염 저해 작용도 있음이 밝혀지고 있다(권태완, 1995, 콩건강여행, 성하출판사). 더욱이 우리가 일상 먹는 콩 발효식품인 된장이 항암효과를 나타낸다고 발표되고 있고, 미국 앨라버마 대학의 스테펜 바너스 박사는 콩을 먹인 쥐와 먹이지 않은 쥐를 비료해 본 결과 콩을 먹인 쥐의 폐암 발생률이 70% 가량 낮았다고 밝힌 바 있다. Glycine max (L.) Merr.) is an annual herb of Rosaceae legumes and is widely cultivated as an edible crop. This is because it contains triterpene-based compounds that have abundant nutrients and anticancer activity. Soybeans have long been one of the five grains and are best known for supplementing the protein and fat deficiencies in rice. The efficacy of soybeans, wrote Huh Jun's consent bogam said that long-term use of soybeans have an effect, and weight gain. In addition, it removes the heat of the stomach and is effective for intestinal pain and heat poisoning, it controls the excretion of urine, it is effective for swelling, bloating. On the other hand, soybean powder also controls the stomach and intestines, helps the digestion of grains, and removes boils. Bean sprouts are said to control knee pain and eliminate muscle pain. In addition, soybeans are effective in preventing elderly dementia, and recently, it has been shown that there is also an inhibitory effect on AIDS (AIDS) virus (Kwon Tae-wan, 1995, Bean Health Travel, Sungha Publishing Co.). Moreover, it is reported that doenjang, a fermented soybean we eat everyday, has anti-cancer effects. This was about 70% lower.

이 같은 콩의 폐암억제 효과는 동물 실험 뿐만 아니라 역학조사에서도 밝혀지고 있는데, 상대적으로 콩을 적게 먹는 미국여성에 비해 콩을 많이 먹는 아시아 지역 여성의 폐암 발생률이 8분의 1 정도로 낮았다고 한다. 또한 콩에 들어 있는 항암성분은 폐암뿐만 아니라 유방암, 난소암, 대장암 등의 발생도 저지시키고 감소시킨다는 항암작용에 대한 보고가 최근 들어 많이 나오고 있다.Soybean lung cancer suppression effects have been shown not only in animal experiments, but also in epidemiological studies. Lung cancer rates in Asian women who eat soybeans are relatively low, compared to US women who eat less soybeans. In addition, a lot of reports have recently been reported on the anti-cancer effect that the anti-cancer component contained in soybean, as well as lung cancer, and also prevent and reduce the occurrence of breast cancer, ovarian cancer, colon cancer.

지금까지 알려진 콩뿌리의 주성분으로는 플라보노이드(flavonoid) 및 트리터페노이드(triterpenoid)등이 있다. 상기 플라보노이드는 세포보호, 피부주름개선, 골다공증 예방, 항스트레스성 등 많은 연구 결과가 알려져 있다.The main components of soybean root known to date include flavonoids and triterpenoids. The flavonoids are known for many studies such as cell protection, skin wrinkle improvement, osteoporosis prevention, antistress.

바람직하게는, 상기 콩뿌리 추출물은 물, C₁-C₄ 알콜 또는 이들의 혼합용매, 보다 바람직하게는 메탄올로 추출한 추출물일 수 있다. 이때, 추출용매는 콩뿌리 의 건중량의 2 ~ 20 배로 하는 것이 바람직하다. 추출방법은 통상적으로 행하는 모든 추출방법이 가능하며, 물, C₁-C₄ 알콜 또는 이들의 혼합용매를 추출용매로 사용할 경우, 상온에서 2일 ~ 20일 동안 방치하여 추출할 수 있다. 상기의 방법으로 얻어진 추출액은 여과지 등을 이용한 여과, 정제, 농축 등의 단계를 더 거쳐 콩뿌리 추출물로서 사용될 수 있다.Preferably, the soybean root extract may be an extract extracted with water, C ₁ -C ₄ alcohol or a mixed solvent thereof, more preferably methanol. At this time, the extraction solvent is preferably 2 to 20 times the dry weight of the bean root. The extraction method can be any extraction method usually performed, and when using water, C ₁ -C ₄ alcohol or a mixed solvent thereof as the extraction solvent, it can be extracted by leaving for 2 to 20 days at room temperature. The extract obtained by the above method may be used as a soybean root extract after further filtration, purification, concentration using a filter paper or the like.

본 발명은 콩뿌리 추출물 또는 이로부터 분리된 하기 표 1로 표시되는 폴리페놀계 화합물을 유효성분으로 하는 심혈관계 질환의 예방 및 치료용 조성물을 제공한다.The present invention provides a composition for the prevention and treatment of cardiovascular diseases comprising soybean root extract or a polyphenol-based compound represented by Table 1 isolated therefrom as an active ingredient.

하기에 표 1의 폴리페놀계 화합물 1은 4',7-디하이드록시이소플라본(4‘,7-dihydroxyisoflavone)이며, 폴리페놀계 화합물 2는 4',5,7-트리하이드록시이소플라본(4',5,7-trihydroxyisoflavone)이며, 폴리페놀계 화합물 3은 2-(1-하이드록시-1- 메틸에틸)-6H-벤조퓨로[3,2-c]퓨로[3,2-g][1]벤조피란-6a,9(11aH)-디올(2-(1-hydroxy-1-methylethyl)-6H-benzofuro[3,2-c]furo[3,2-g][1]benzopyran-6a,9(11aH)-diol)이며, 폴리페놀계 화합물 4는 3,9-디하이드록시-6H-벤조퓨로[3,2-c][1]벤조피란-6-온(3,9-dihydroxy-6H-benzofuro[3,2-c][1]benzopyran-6-one)이며, 폴리페놀계 화합물 5는 3,3',4',5,7-펜타하이드록시플라본(3,3',4',5,7-pentahydroxyflavone)이다.In Table 1, polyphenol-based compound 1 is 4 ', 7-dihydroxyisoflavone (4', 7-dihydroxyisoflavone), and polyphenol-based compound 2 is 4 ', 5,7-trihydroxyisoflavone ( 4 ', 5,7-trihydroxyisoflavone), and the polyphenol compound 3 is 2- (1-hydroxy-1-methylethyl) -6H-benzofuro [3,2-c] puro [3,2-g ] [1] benzopyran-6a, 9 (11aH) -diol (2- (1-hydroxy-1-methylethyl) -6H-benzofuro [3,2-c] furo [3,2-g] [1] benzopyran - 6a, 9 (11aH) -diol ) and, the polyphenol-based compound 4 is a 3,9-dihydroxy--6H- benzo Pew as [3,2-c] [1] benzopyran-6-one (3, 9-dihydroxy-6H-benzofuro [3,2-c] [1] benzopyran-6-one), and the polyphenol compound 5 is 3,3 ', 4', 5,7-pentahydroxyflavone (3, 3 ', 4', 5,7-pentahydroxyflavone).

화합물compound 구조rescue 화학식Chemical formula 1One

4',7-디하이드록시이소플라본4 ', 7-dihydroxyisoflavone 22

4',5,7-트리하이드록시이소플라본4 ', 5,7-trihydroxyisoflavone 33

2-(1-하이드록시-1- 메틸에틸)-6H-벤조퓨로[3,2-c]퓨로[3,2-g][1]벤조피란-6a,9(11aH)-디올2- (1-hydroxy-1-methylethyl) -6H-benzofuro [3,2-c] puro [3,2-g] [1] benzopyran-6a, 9 (11aH) -diol 44

3,9-디하이드록시-6H-벤조퓨로[3,2-c][1]벤조피란-6-온3,9-dihydroxy-6H-benzofuro [3,2-c] [1] benzopyran-6-one 55

3,3',4',5,7-펜타하이드록시플라본3,3 ', 4', 5,7-pentahydroxyflavone

상기 폴리페놀계 화합물은 약학적으로 허용되는 염의 형태로 사용될 수 있으며, 통상의 방법에 의해 제조되는 모든 염, 수화물 및 용매화물, 시판되는 시약을 사용할 수 있으며, 본 발명에서는 콩뿌리로부터 추출, 분리 및 정제하여 사용한다.The polyphenol-based compound may be used in the form of a pharmaceutically acceptable salt, all salts, hydrates and solvates prepared by conventional methods, commercially available reagents may be used, and in the present invention, extraction and separation from soybean roots And purified.

본 발명에 따른 폴리페놀계 화합물의 추출, 분리 및 정제방법은 다음과 같다.Extraction, separation and purification method of the polyphenol-based compound according to the present invention is as follows.

본 발명에 따른 폴리페놀계 화합물은 당업계에 널리 알려진 방법 또는 하기와 같은 본 발명에 따라 추출된 것, 합성된 것 또는 시판중인 것을 선택하여 사용할 수 있다. 바람직하게 상기 폴리페놀계 화합물은 본 발명에 따라 콩뿌리에서 추출될 수 있다.The polyphenol-based compound according to the present invention can be selected and used according to the methods well known in the art or extracted according to the present invention as follows. Preferably the polyphenolic compound may be extracted from the soybean root according to the present invention.

상기 본 발명에 따른 폴리페놀계 화합물은The polyphenol-based compound according to the present invention

(a) 콩뿌리를 유기용매로 추출하여 추출물을 얻는 단계; (a) extracting the bean root with an organic solvent to obtain an extract;

(b) 상기에서 얻은 추출물에 물을 가하여 현탁시키고, 분획하여 가용추출물을 얻는 단계; 및(b) adding water to the extract obtained above, suspending and fractionating to obtain a soluble extract; And

(c) 상기 가용추출물을 실리카겔 크로마토그래피로 화합물을 분리하고 정제하여 폴리페놀계 화합물을 얻는 단계를 포함하는 방법에 의해 콩뿌리에서 추출, 분리 및 정제될 수 있다.(C) the soluble extract can be extracted, separated and purified in the soybean root by a method comprising the step of separating and purifying the compound by silica gel chromatography to obtain a polyphenolic compound.

우선, 단계 (a)에서는 콩뿌리를 유기용매로 추출하여 추출물을 얻는다.First, in step (a) the soybean root is extracted with an organic solvent to obtain an extract.

상기 콩뿌리는 재배한 것 또는 시판되는 것 등 제한 없이 사용할 수 있으며, 깨끗이 세척하고 건조하여 사용한다. 건조된 콩뿌리를 적당한 크기로 분쇄하여 추출용기에 넣고 적당한 양의 유기용매, C₁-C₄의 알코올, 바람직하게는 메탄올을 넣는다. 이를 상온에서 10일 동안 방치한 후 거름종이 등으로 여과하여 본 발명에 따른 폴리페놀계 화합물의 유기용매 추출물을 얻을 수 있다. 추출과정은 수회 반복할 수 있으며, 이후에 농축 또는 동결건조 등의 방법을 추가적으로 거칠 수 있다.The bean root can be used without limitation, such as cultivated or commercially available, it is used to clean and dry. The dried soybean root is ground to an appropriate size and placed in an extraction container, and an appropriate amount of an organic solvent, C ₁ -C ₄ alcohol, preferably methanol is added thereto. This is left for 10 days at room temperature and then filtered with a filter paper to obtain an organic solvent extract of the polyphenol-based compound according to the present invention. The extraction process can be repeated several times, and then additionally subjected to methods such as concentration or lyophilization.

다음으로, 단계 (b)에서는 단계 (a)에서 얻은 유기용매 추출물, 바람직하게는 콩뿌리의 메탄올 추출물에 물을 가하여 현탁시키고, 에틸아세테이트, n-부탄올을 사용하여 순차적으로 분획하여 가용추출물을 얻는다. 이때, 통상의 분별 추출 방법을 이용할 수 있으며, 바람직하게는 분별 깔데기를 사용할 수 있다. 상기 가용추출물은 에틸아세테이트 가용추출물, n-부탄올 가용추출물, 메탄올 가용추출물을 얻을 수 있다Next, in step (b), water is added to the organic solvent extract obtained in step (a), preferably methanol extract of soybean root, suspended, and fractionated sequentially using ethyl acetate and n -butanol to obtain a soluble extract. . At this time, a conventional fractional extraction method can be used, and preferably a fractionation funnel can be used. As the soluble extract, ethyl acetate soluble extract, n -butanol soluble extract, and methanol soluble extract can be obtained.

다음으로, 단계 (c)에서는 상기 단계 (b)에서 얻은 에틸아세테이트 가용추출물을 실리카겔 크로마토그래피를 이용하여 화합물을 분리하고 정제하여 폴리페놀계 화합물을 얻는다. 상기 화합물 분리를 위한 실리카겔 크로마토그래피 시 이동상으로는 바람직하게 n-헥산, n-헥산ㆍ아세톤 혼합용매 및 메탄올을 순차적으로 사용할 수 있고, 추가되는 크로마토그래피에서는 n-헥산ㆍ에틸아세테이트 혼합용매를 사용할 수 있다. 이때 사용되는 n-헥산ㆍ아세톤 혼합용매의 부피비는 50:1 ~ 1:2 부피비가 바람직하며, n-헥산ㆍ에틸아세테이트 혼합용매일 경우에는 60:1 ~ 1:2 부피비가 바람직하다. 상기 크로마토그래피는 단일 화합물이 정제될 때까지 1회 내지 수회에 걸쳐 수행할 수 있으며, 필요에 따라 농축, 재결정을 실시할 수 있다. 분리된 화합물은 분자량 측정, NMR 측정 등의 통상적인 방법으로 분석할 수 있다.Next, in step (c), the ethyl acetate soluble extract obtained in step (b) is separated and purified using silica gel chromatography to obtain a polyphenolic compound. In the silica gel chromatography for separating the compounds, preferably, n -hexane, n -hexane / acetone mixed solvent and methanol may be sequentially used, and in the additional chromatography, n -hexane / ethyl acetate mixed solvent may be used. . In this case, the volume ratio of the n -hexane / acetone mixed solvent used is preferably 50: 1 to 1: 2, and in the case of the n -hexane / ethyl acetate mixed solvent, the volume ratio of 60: 1 to 1: 2 is preferable. The chromatography may be performed once or several times until a single compound is purified, and may be concentrated and recrystallized as necessary. The separated compound can be analyzed by conventional methods such as molecular weight measurement and NMR measurement.

상기와 같은 방법에 의하여, 폴리페놀계 화합물 4',7-디하이드록시이소플라본, 4',5,7-트리하이드록시이소플라본, 2-(1-하이드록시-1-메틸에틸)-6H-벤조퓨로[3,2-c]퓨로[3,2-g][1]벤조피란-6a,9(11aH)-디올, 3,9-디하이드록시-6H-벤조퓨로[3,2-c][1]벤조피란-6-온, 3,3',4',5,7-펜타하이드록시플라본을 각각 얻었다.By the method as described above, polyphenol-based compound 4 ', 7-dihydroxyisoflavone, 4', 5,7-trihydroxyisoflavone, 2- (1-hydroxy-1-methylethyl) -6H -Benzofuro [3,2-c] puro [3,2-g] [1] benzopyran-6a, 9 (11aH) -diol, 3,9-dihydroxy-6H-benzofuro [3, 2-c] [1] benzopyran-6-one and 3,3 ', 4', 5,7-pentahydroxyflavone were obtained, respectively.

본 발명의 상기 콩뿌리 추출물 또는 이로부터 분리된 폴리페놀계 화합물은 LDL에 대하여 우수한 항산화 활성을 나타낸다. 따라서, 본 발명의 상기 조성물은 LDL의 산화에 의해 유발되는 것으로 알려진 고지혈증, 관상동맥 심장병, 동맥경화 및 심근경색과 같은 심혈관계 질환의 예방 또는 치료에 유용하게 사용될 수 있다.The soybean root extract of the present invention or the polyphenol-based compound isolated therefrom exhibits excellent antioxidant activity against LDL. Therefore, the composition of the present invention can be usefully used for the prevention or treatment of cardiovascular diseases such as hyperlipidemia, coronary heart disease, arteriosclerosis and myocardial infarction, which are known to be caused by oxidation of LDL.

본 발명의 조성물은 상기 콩뿌리 추출물 또는 이로부터 분리된 폴리페놀계 화합물에 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상을 함유할 수 있다.The composition of the present invention may contain at least one active ingredient exhibiting the same or similar function in addition to the soybean root extract or a polyphenol-based compound separated therefrom.

본 발명의 상기 조성물은 투여를 위해서 상기에 기재한 유효성분 이외에 추가로 약제학적으로 허용 가능한 담체를 1종 이상 포함하여 제조할 수 있다. 약제학적으로 허용 가능한 담체는 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 덱스트로즈 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 1 성분 이상을 혼합하여 사용할 수 있으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 사용하여 제조할 수 있다. 또한 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제를 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주사용 제형, 환약, 캡슐, 과립 또는 정제로 제제화할 수 있다. 더 나아가 당분야의 적정한 방법으로 또는 Remington's Pharmaceutical Science(최근판), Mack Publishing Company, Easton PA에 개시되어 있는 방법을 이용하여 각 질환에 따라 또는 성분에 따라 바람직하게 제제화할 수 있다.The composition of the present invention may be prepared by including one or more pharmaceutically acceptable carriers in addition to the active ingredient described above for administration. Pharmaceutically acceptable carriers may be used in combination with saline, sterile water, Ringer's solution, buffered saline, dextrose solution, maltodextrin solution, glycerol, ethanol and one or more of these components, if necessary, as antioxidants, buffers And other conventional additives such as bacteriostatic agents. Diluents, dispersants, surfactants, binders and lubricants may also be added in addition to formulate into injectable formulations, pills, capsules, granules or tablets such as aqueous solutions, suspensions, emulsions and the like. Furthermore, it may be preferably formulated according to each disease or component by a suitable method in the art or using a method disclosed in Remington's Pharmaceutical Science (Recent Edition), Mack Publishing Company, Easton PA.

본 발명의 조성물은 목적하는 방법에 따라 비경구 투여(예를 들어 정맥 내, 피하, 복강 내 또는 국소에 적용)하거나 경구 투여할 수 있으며, 투여량은 환자의 체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설율 및 질환의 중증도 등에 따라 그 범위가 다양하다. 폴리페놀계 화합물의 일일 투여량은 0.1 ~ 100 ㎎/㎏ 이고, 바람직하게는 0.5 ~ 10 ㎎/㎏이며, 하루 일회 내지 수회에 나누어 투여하는 것이 더욱 바람직하다.The compositions of the present invention may be administered parenterally (eg, intravenously, subcutaneously, intraperitoneally or topically) or orally, depending on the desired method, and the dosage may be based on the weight, age, sex, health status, The range varies depending on the diet, the time of administration, the method of administration, the rate of excretion and the severity of the disease. The daily dose of the polyphenol-based compound is 0.1 to 100 mg / kg, preferably 0.5 to 10 mg / kg, and more preferably administered once to several times a day.

본 발명의 콩뿌리 추출물 또는 이로부터 분리된 폴리페놀계 화합물을 마우스에 경구 투여하여 독성 실험을 수행한 결과, 콩뿌리 추출물 및 폴리페놀계 화합물은 경구 독성시험에 의한 50% 치사량(LD₅₀)은 적어도 1,000 ㎎/㎏ 이상인 것으로 나타난다.As a result of the toxicity experiment by orally administering the soybean root extract or polyphenol-based compound isolated therefrom to the mouse, the soybean root extract and the polyphenol-based compound were 50% lethal dose (LD ₅₀ ) by oral toxicity test. It appears to be at least 1,000 mg / kg or more.

본 발명의 상기 조성물은 심혈관계 질환의 예방 및 치료를 위하여 단독으로, 또는 수술, 호르몬 치료, 약물 치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.The composition of the present invention can be used alone or in combination with methods using surgery, hormonal therapy, drug therapy and biological response modifiers for the prevention and treatment of cardiovascular diseases.

본 발명의 상기 조성물은 심혈관계 질환의 개선을 목적으로 건강식품에 첨가될 수 있다. 본 발명의 콩뿌리 추출물 또는 이로부터 분리된 폴리페놀계 화합물을 식품 첨가물로 사용할 경우, 상기 콩뿌리 추출물 또는 이로부터 분리된 폴리페놀계 화합물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에는 본 발명의 콩뿌리 추출물 또는 이로부터 분리된 폴리페놀계 화합물은 원료에 대하여 1 ~ 20 중량%, 바람직하게는 5 ~ 10 중량%의 양으로 첨가된다. 그러나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.The composition of the present invention may be added to health food for the purpose of improving cardiovascular disease. When the soybean root extract or polyphenol-based compound separated therefrom is used as a food additive, the soybean-root extract or polyphenol-based compound separated therefrom may be added as it is or used with other food or food ingredients, It can be suitably used according to a conventional method. The mixed amount of the active ingredient may be suitably determined depending on the purpose of use (prevention, health or therapeutic treatment). In general, in the preparation of food or beverage, the soybean root extract of the present invention or the polyphenol-based compound separated therefrom is added in an amount of 1 to 20% by weight, preferably 5 to 10% by weight based on the raw materials. However, in the case of long-term intake for health and hygiene or health control, the amount may be below the above range, and the active ingredient may be used in an amount above the above range because there is no problem in terms of safety. .

상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.There is no particular limitation on the kind of food. Examples of the food to which the substance can be added include dairy products including meat, sausage, bread, chocolate, candy, snacks, confectionery, pizza, ramen, other noodles, gums, ice cream, various soups, drinks, tea, drinks, Alcoholic beverages and vitamin complexes, and the like and include all of the health foods in the conventional sense.

본 발명의 건강음료 조성물은 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ㎖당 일반적으로 약 0.01 ~ 0.04 g, 바람직하게는 약 0.02 ~ 0.03 g 이다.The health beverage composition of the present invention may contain various flavors or natural carbohydrates, etc. as additional components, as in the general beverage. The natural carbohydrates are glucose, monosaccharides such as fructose, disaccharides such as maltose and sucrose, and polysaccharides such as dextrin and cyclodextrin, sugar alcohols such as xylitol, sorbitol and erythritol. As the sweetening agent, natural sweetening agents such as tautin and stevia extract, synthetic sweetening agents such as saccharin and aspartame, and the like can be used. The proportion of the natural carbohydrate is generally about 0.01 to 0.04 g, preferably about 0.02 to 0.03 g per 100 ml of the composition of the present invention.

본 발명의 상기 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. The composition of the present invention can be used in various nutrients, vitamins, electrolytes, flavors, coloring agents, pectic acid and salts thereof, alginic acid and salts thereof, organic acids, protective colloidal thickeners, pH adjusting agents, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohols, carbonic acid. Carbonating agents and the like used in beverages.

또한, 본 발명의 상기 조성물은 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조에 사용될 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만, 본 발명의 조성물 일반적으로 100 중량부 당 0.01 ~ 0.1 중량부의 범위에서 선택된다In addition, the composition of the present invention can be used in the manufacture of natural fruit juices, fruit juice drinks and vegetable drinks. These components can be used independently or in combination. The proportion of such additives is not critical, but the composition of the present invention is generally selected in the range of 0.01 to 0.1 parts by weight per 100 parts by weight.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예 및 실험예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예 및 실험예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 실시예 및 실험예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, preferred examples and experimental examples are presented to help understand the present invention. However, the following Examples and Experimental Examples are provided only to more easily understand the present invention, and the contents of the present invention are not limited by the Examples and Experimental Examples.

<< 실시예Example 1-1> 콩뿌리로부터 추출, 분리 및 정제 1-1> Extraction, Separation and Purification from Soybean Roots

건조된 콩뿌리(경상남도 문산) 3.2 ㎏을 95% 메탄올 10 ℓ에 넣어 상온에서 10일 동안 방치하고 여과지로 여과한 다음, 감압하에서 농축하여 노란색의 분말(500 g)을 얻었다. 여기에 정제수 1 ℓ를 넣어 현탁시키고, 에틸아세테이트, 부탄올 순으로 분획하여 에틸아세테이트 분획(162 g) 및 부탄올 분획(125 g)을 각각 얻었다. 얻은 에틸아세테이트 추출물(162 g)은 실리카겔 컬럼크로마토그래피(1.5 ㎏, 70 ~ 230 메쉬, Merk)를 사용하였으며, 이동상 용매로서는 n-헥산, n-헥산:아세톤(50:1 ~ 1:2 혼합비) 혼합용매 및 메탄올을 순차적으로 사용하여 15개의 분획(Fr.1-1 ~ 15)을 얻었다.3.2 kg of dried soybean root (Munsan, Gyeongsangnam-do) was added to 10 l of 95% methanol and left at room temperature for 10 days, filtered through a filter paper, and concentrated under reduced pressure to obtain a yellow powder (500 g). 1 L of purified water was added and suspended, followed by ethyl acetate and butanol fraction, to obtain an ethyl acetate fraction (162 g) and a butanol fraction (125 g), respectively. The obtained ethyl acetate extract (162 g) was used for silica gel column chromatography (1.5 kg, 70 to 230 mesh, Merk), and as a mobile phase solvent n -hexane, n -hexane: acetone (50: 1 to 1: 2 mixing ratio) 15 fractions (Fr.1-1-15) were obtained using the mixed solvent and methanol sequentially.

Fr.1-6(1.9 g)을 실리카겔(5 g, 70 ~ 230 메쉬)에 흡착시킨 후, 실리카겔 컬럼크로마토그래피(400 g, 230 ~ 400 메쉬)를 하였으며, 이때 이동상 용매로서는 n-헥산 : 아세톤의 혼합용매를 사용하여 Fr.1-6-1 ~ 15을 얻었다. 이중에서 소분획인 Fr.1-6-1 ~ 7은 n-헥산:아세톤(10:1 부피비)의 혼합용매를 이동상 전개용매로 사용하여 두 번째 컬럼크로마토그래피(5 g, 230 ~ 400 메쉬)를 하여 화합물 1 (24 mg)을 얻었다.Fr.1-6 (1.9 g) was adsorbed onto silica gel (5 g, 70 to 230 mesh), followed by silica gel column chromatography (400 g, 230 to 400 mesh), where n -hexane: acetone was used as the mobile phase solvent. Using a mixed solvent of Fr.1-6-1 to 15 were obtained. Fr.1-6-1 to 7, a small fraction, of the second column chromatography (5 g, 230 to 400 mesh) using a mixed solvent of n -hexane: acetone (10: 1 volume ratio) as the mobile phase developing solvent. Compound 1 (24 mg) was obtained.

Fr.1-6-5(450 mg)을 실리카겔(700 mg, 70 ~ 230 메쉬)에 흡착시킨 후, 실리카겔 컬럼크로마토그래피(5 g, 230 ~ 400 메쉬)를 하였으며, 이때 이동상 용매로서는 n-헥산:아세톤(10:1 ~ 1:2 부피비)의 혼합용매를 사용하여 Fr.1-6-5-1~7을 얻었다. 이 중에서 소분획인 Fr.1-6-5-2를 얻었고, n-헥산:아세톤(10:1 ~ 1:2 부피비)의 혼합용매를 이용하여 재결정을 함으로써 화합물 2 (32 mg)을 얻었다.Fr.1-6-5 (450 mg) was adsorbed onto silica gel (700 mg, 70 to 230 mesh), and silica gel column chromatography (5 g, 230 to 400 mesh) was used, where n -hexane was used as the mobile phase solvent. Fr. 1-6-5-1-7 were obtained using the mixed solvent of acetone (10: 1-1: 2 volume ratio). Among them, a small fraction of Fr. 1-6-5-2 was obtained, and compound 2 (32 mg) was obtained by recrystallization using a mixed solvent of n -hexane: acetone (10: 1 to 1: 2 by volume).

Fr.1-8(3.5 g)을 실리카겔(9 g, 70 ~ 230 메쉬)에 흡착시킨 후, 실리카겔 컬럼크로마토그래피(500 g, 230 ~ 400 메쉬)를 하였으며, 이때 이동상 용매로서는 클로로포름:아세톤(20:1 ~ 1:1 부피비)의 혼합용매를 사용하여 Fr.1-8-1~43의 소분획을 얻었다. 이 중에서 소분획인 Fr.1-8-2~3은 분취 박층액체크로마토그래피(preparative TLC)를 사용하였으며, 전개용매로서는 클로로포름:아세톤(3:1 부피비)의 혼합용매를 이용하여 화합물 3 (125 mg)을 얻었다.Fr.1-8 (3.5 g) was adsorbed onto silica gel (9 g, 70 to 230 mesh), followed by silica gel column chromatography (500 g, 230 to 400 mesh), where chloroform: acetone (20) was used as the mobile phase solvent. A small fraction of Fr.1-8-1 to 43 was obtained using a mixed solvent of 1: 1 to 1: 1 volume ratio). Among them, a small fraction Fr.1-8-2 to 3 was used for preparative thin layer chromatography (preparative TLC), and as a developing solvent, Compound 3 (125) was prepared using a mixed solvent of chloroform: acetone (3: 1 volume ratio). mg).

Fr.1-9(2.6 g)을 실리카겔(9.5 g, 70 ~ 230 메쉬)에 흡착시킨 후, 실리카겔 컬럼크로마토그래피(540 g, 230 ~ 400 메쉬)를 하였으며, 이때 이동상 용매로서는 클로로포름:아세톤(12:1 ~ 2:1 부피비)의 혼합용매를 사용하여 Fr.1-9-1~110의 소분획을 얻었다. 이 중에서 비슷한 Rf값을 가지는 8개의 소분획인 Fr.1-9-1~8로 다시 합치고 나누었다. Fr.1-9-7(430 mg)은 실리카겔 컬럼크로마토그래피(160 g, 230 ~ 400 메쉬)를 하였으며, 전개용매로서는 클로로포름:아세톤(2:1 부피비)의 혼합용매를 이용하여 50개의 소분획 Fr.1-9-7-1~50을 얻었다. 이때 Fr.1-9-7-25~32를 농축하여 화합물 4 (112 mg)을 얻었다.Fr.1-9 (2.6 g) was adsorbed onto silica gel (9.5 g, 70 to 230 mesh), followed by silica gel column chromatography (540 g, 230 to 400 mesh), where chloroform: acetone (12) was used as the mobile phase solvent. A small fraction of Fr.1-9-1 to 110 was obtained using a mixed solvent of 1: 1 to 2: 1 by volume. Of these, eight subfractions with similar Rf values, Fr.1-9-1 ~ 8, were combined and divided again. Fr.1-9-7 (430 mg) was subjected to silica gel column chromatography (160 g, 230 to 400 mesh). As a developing solvent, 50 small fractions were prepared using a mixed solvent of chloroform: acetone (2: 1 volume ratio). Fr. 1-9-7-1-50 were obtained. At this time, Fr.1-9-7-25 ~ 32 was concentrated to give Compound 4 (112 mg).

Fr.1-4(1.8 g)은 실리카겔 컬럼크로마토그래피(7 g, 230 ~ 400 메쉬)를 하였으며, 이때 이동상 용매로서는 클로로포름:메탄올(15:1 ~ 1:1 부피비)의 혼합용매를 사용하여 Fr.1-4-1~40개의 소분획을 얻었다. 이 중에서 비슷한 Rf값을 가지는 7개의 소분획인 Fr.1-4-1~7로 다시 합치고 나누었다. Fr.1-4-2(480 mg)은 실리카겔 컬럼크로마토그래피(60 g, 230 ~ 400 메쉬)를 하였으며, 전개용매로서는 클로로포름:메탄올(3:1 부피비)의 혼합용매를 이용하여 30개의 소분획 Fr.1-4-2-1~30을 얻었다. 이때 Fr.1-4-2-13~20은 다시 실리카겔 컬럼크로마토그래피를 하였고, 이동상 용매로서는 클로로포름:메탄올 (10:1 부피비)의 혼합용매를 이용하여 화합물 5 (180 mg)을 얻었다.Fr.1-4 (1.8 g) was subjected to silica gel column chromatography (7 g, 230 to 400 mesh), and as a mobile phase solvent, Fr using a mixed solvent of chloroform: methanol (15: 1 to 1: 1 volume ratio). .1-4-1-40 small fractions were obtained. Of these, seven subfractions with similar Rf values, Fr.1-4-1 ~ 7, were combined and divided again. Fr.1-4-2 (480 mg) was subjected to silica gel column chromatography (60 g, 230 to 400 mesh). As a developing solvent, 30 small fractions were prepared using a mixed solvent of chloroform: methanol (3: 1 volume ratio). Fr.1-4-2-1-30 were obtained. At this time, Fr.1-4-2-13 ~ 20 was subjected to silica gel column chromatography again, and compound 5 (180 mg) was obtained using a mixed solvent of chloroform: methanol (10: 1 volume ratio) as a mobile phase solvent.

<< 실시예Example 1-2> 폴리페놀계 화합물의 구조 분석 1-2> Structural Analysis of Polyphenolic Compounds

상기 실시예 1-1에서 얻은 물질은, VG 고분해능 GC/MS 분광기(VG high resolution GC/MS spectrometer, Election Ionization MS, Autospec-Ultima)를 사용하여 분자량 및 분자식을 결정하였으며, 선광도는 편광기(Jasco DIP-181 digital polarimeter)를 사용하여 측정하였다. 또한 핵자기공명 분석(Bruker AMX 500)을 통하여 ¹H NMR, ¹³C NMR, 호모-코지(HOMO-COSY), HMQC(¹H-Detected heteronuclear Multiple-Quantum Coherence), HMBC(Heteronuclear Multiple-Bond Coherence), DEPT(Distortionless Enhancement by Polarization) 스펙트럼을 얻고, 분자구조를 결정하였다.The material obtained in Example 1-1 was determined using a VG high resolution GC / MS spectrometer, Election Ionization MS, Autospec-Ultima, and the molecular weight and molecular formula were determined by using a polarizer (Jasco). Measurement was performed using a DIP-181 digital polarimeter. Nuclear Magnetic Resonance Analysis (Bruker AMX 500) also revealed ¹ H NMR, ¹³ C NMR, Homo-Cozy, HMQC ( ¹ H-Detected heteronuclear Multiple-Quantum Coherence, and HMBC (Heteronuclear Multiple-Bond Coherence). , DEPT (Distortionless Enhancement by Polarization) spectrum was obtained, and the molecular structure was determined.

측정 결과는 하기와 같으며, 화합물 1인 4',7-하이드록시이소플라본, 화합물 2인 4',5,7-트리하이드록시이소플라본, 화합물 3인 2-(1-하이드록시-1-메틸에틸)-6H-벤조퓨로[3,2-c]퓨로[3,2-g][1]벤조피란-6a,9(11aH)-디올, 화합물 4인 3,9-디하이드록시-6H-벤조퓨로[3,2-c][1]벤조피란-6-온, 화합물 5인 3,3',4',5,7-펜타하이드록시플라본으로 동정하였다.The measurement results are as follows. Compound 1 is 4 ', 7-hydroxyisoflavone, compound 2 is 4', 5,7-trihydroxyisoflavone, compound 3 is 2- (1-hydroxy-1- methylethyl) -6H- benzo Pew as [3,2-c] furo [3,2-g] [1] benzopyran -6a, 9 (11aH) - diol, the compound 4-hydroxy-3,9-di- 6H-benzofuro [3,2-c] [1] benzopyran-6-one, compound 5 , identified as 3,3 ', 4', 5,7-pentahydroxyflavone.

[화합물 1]: 4',7-[Compound 1]: 4 ', 7- 하이드록시이소플라본Hydroxyisoflavones

1) 물성 : 노란색 침상 결정체(녹는점 : 317 ~ 320 ℃) 1) Physical property: Yellow needle crystal (melting point: 317 ~ 320 ℃)

2) 분자량 : 254 2) Molecular Weight: 254

3) 분자식 : C₁₅H₈O₄ 3) Molecular formula: C ₁₅ H ₈ O ₄

4) ¹H-NMR(500 MHz, DMSO-d ₆ ) δ 6.85(d, ¹H, J = 2.0 Hz, H-8), 6.93(dd, 1H, J = 8.8, 2.1 Hz, H-6), 6.99(d, 2H, J = 8.6 Hz, H-3' and H-5'), 7.38(d, 2H, J = 8.6 Hz, H-2' and H-6'), 7.96(d, 1H, J = 8.8 Hz, H-5), 8.28 ( s, 1H,H-2). 4) ¹ H-NMR (500 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 6.85 (d, ¹ H, J = 2.0 Hz, H-8), 6.93 (dd, 1H, J = 8.8, 2.1 Hz, H-6) , 6.99 (d, 2H, J = 8.6 Hz, H-3 'and H-5'), 7.38 (d, 2H, J = 8.6 Hz, H-2 'and H-6'), 7.96 (d, 1H , J = 8.8 Hz, H-5), 8.28 (s, 1H, H-2).

5) ¹³C-NMR (125 MHz, DMSO-d ₆ ) δ 102.5(C-8), 115.4(C-3' 및 C-5'는 대칭 탄소), 115.6(C-6), 117.0(C-4a), 123.0(C-1'), 123.9(C-3), 127.7(C-5), 130.5(C-2' 및 C-6', 대칭 탄소), 153.2(C-2), 157.6(C-4'), 157.9(C-8a), 163.1(C-7), 175.1(C-4).5) ¹³ C-NMR (125 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 102.5 (C-8), 115.4 (C-3 'and C-5' are symmetric carbon), 115.6 (C-6), 117.0 (C- 4a), 123.0 (C-1 '), 123.9 (C-3), 127.7 (C-5), 130.5 (C-2' and C-6 ', symmetric carbon), 153.2 (C-2), 157.6 ( C-4 '), 157.9 (C-8a), 163.1 (C-7), 175.1 (C-4).

[화합물 2]: 4',5,7-[Compound 2]: 4 ', 5,7- 트리하이드록시이소플라본Trihydroxyisoflavones

1) 물성 : 비결정 분말(녹는점 : 297 ~ 298 ℃) 1) Physical property: amorphous powder (melting point: 297 ~ 298 ℃)

2) 분자량 : 270 2) Molecular Weight: 270

3) 분자식 : C₁₅H₁₀O₅ 3) Molecular formula: C ₁₅ H ₁₀ O ₅

4) ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 6.12(1H, d, J = 2.1 Hz, H-6), 6.28(1H, d, J = 2.1 Hz, H-8), 6.99(2H, dd, J = 6.7, 1.8 Hz, H-3' 및 H-5'), 7.28(2H, dd, J = 6.7, 1.8 Hz, H-2' 및 H-6'), 8.20(1H, s, H-2), 및 12.8(1H, s, 5-OH). 4) ¹ H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆ ) δ 6.12 (1H, d, J = 2.1 Hz, H-6), 6.28 (1H, d, J = 2.1 Hz, H-8), 6.99 (2H , dd, J = 6.7, 1.8 Hz, H-3 'and H-5'), 7.28 (2H, dd, J = 6.7, 1.8 Hz, H-2 'and H-6'), 8.20 (1H, s , H-2), and 12.8 (1H, s, 5-OH).

5) ¹³C NMR(125 MHz, DMSO-d₆) d 94.0(C-8), 99.3(C-6), 104.8(C-4a), 115.4(C-3' 및 C-5'는 대칭 탄소), 121.6(C-3), 122.7(C-1'), 130.5(C-2' 및 C-6'는 대칭탄소), 154.3(C-2), 157.8(C-4'), 158.0(C-8a), 162.4(C-5), 164.7(C-7), 및 180.6 (C-4).5) ¹³ C NMR (125 MHz, DMSO-d ₆ ) d 94.0 (C-8), 99.3 (C-6), 104.8 (C-4a), 115.4 (C-3 'and C-5' are symmetric carbons) ), 121.6 (C-3), 122.7 (C-1 '), 130.5 (C-2' and C-6 'are symmetric carbon), 154.3 (C-2), 157.8 (C-4'), 158.0 ( C-8a), 162.4 (C-5), 164.7 (C-7), and 180.6 (C-4).

[화합물 3]: 2-(1-[Compound 3]: 2- (1- 하이드록시Hydroxy -1--One- 메틸에틸Methylethyl )-6H-) -6H- 벤조퓨로[3,2-c]퓨로Benzofuro [3,2-c] furo [3,2-g][1]벤조피란-6a,9(11[3,2-g] [1] benzopyran-6a, 9 (11 aHaH )-)- 디올Dior

1) 물성 : 무색 침상 결정체(녹는점 : 181 ~ 183 ℃) 1) Physical property: Colorless needle crystal (melting point: 181 ~ 183 ℃)

2) 분자량 : 354 2) Molecular Weight: 354

3) 분자식 : C₂₀H₁₈O₅ 3) Molecular formula: C ₂₀ H ₁₈ O ₅

4) ¹H-NMR (500 MHz, CD₃OD) d 1.60(s, 6H, 15-CH₃ 및 16-CH₃), 3.98(d, 1H, J = 11.4 Hz, H-6b), 4.16(d, 1H, J = 11.4 Hz, H-6a), 5.37(s, 1H, H-11a), 6.23(d, 1H, J = 2.1 Hz, H-10), 6.42(dd, 1H, J = 8.2, 2.1 Hz, H-8), 6.60(d, 1H, J = 0.6 Hz, H-12), 6.97(s, 1H, H-4), 7.18(d, 1H, J = 8.2 Hz, H-7), 7.63(s, 1H, H-1). 4) ¹ H-NMR (500 MHz, CD ₃ OD) d 1.60 (s, 6H, 15-CH ₃ and 16-CH ₃ ), 3.98 (d, 1H, J = 11.4 Hz, H-6b), 4.16 ( d, 1H, J = 11.4 Hz, H-6a), 5.37 (s, 1H, H-11a), 6.23 (d, 1H, J = 2.1 Hz, H-10), 6.42 (dd, 1H, J = 8.2 , 2.1 Hz, H-8), 6.60 (d, 1H, J = 0.6 Hz, H-12), 6.97 (s, 1H, H-4), 7.18 (d, 1H, J = 8.2 Hz, H-7 ), 7.63 (s, 1 H, H-1).

5) ¹³C-NMR (125 MHz, CD3OD) δ 29.3(C-15 및 C-16), 70.1(C-14), 72.1(C-6), 78.0(C-6a), 87.2(C-11a), 99.3(C-10), 99.4(C-4), 101.4(C-12), 109.9(C-8), 118.8(C-11b), 121.6(C-6b), 124.5(C-1), 125.4(C-2), 125.6(C-7), 154.5(C-4a), 157.2(C-2), 161.6(C-9), 162.7(C-10a), 165.7(C-13).5) ¹³ C-NMR (125 MHz, CD3OD) δ 29.3 (C-15 and C-16), 70.1 (C-14), 72.1 (C-6), 78.0 (C-6a), 87.2 (C-11a ), 99.3 (C-10), 99.4 (C-4), 101.4 (C-12), 109.9 (C-8), 118.8 (C-11b), 121.6 (C-6b), 124.5 (C-1) , 125.4 (C-2), 125.6 (C-7), 154.5 (C-4a), 157.2 (C-2), 161.6 (C-9), 162.7 (C-10a), 165.7 (C-13).

[화합물 4]: 3,9-[Compound 4]: 3,9- 디하이드록시Dihydroxy -6H--6H- 벤조퓨로[3,2-c][1]벤조피란Benzofuro [3,2-c] [1] benzopyran -6-온-6-on

1) 물성 : 노란색 침상 결정체(녹는점 : 355 ~ 359 ℃) 1) Physical property: Yellow needle crystal (melting point: 355 ~ 359 ℃)

2) 분자량 : 268 2) Molecular Weight: 268

3) 분자식 : C₁₅H₈O₅ 3) Molecular formula: C ₁₅ H ₈ O ₅

4) ¹H-NMR(500 MHz, DMSO-d₆) δ 6.92(d, 1H, J = 2.2 Hz, H-4), 6.94(dd, 1H, J = 8.5, 2.1 Hz, H-2), 6.96(dd, 1H, J = 8.3, 2.1 Hz, H-8), 7.18(d, 1H, J = 2.0 Hz, H-10), 7.71(d, 1H, J = 8.4 Hz, H-7), 7.87(d, 1H, J = 8.6 Hz, H-1). 4) ¹ H-NMR (500 MHz, DMSO-d ₆ ) δ 6.92 (d, 1H, J = 2.2 Hz, H-4), 6.94 (dd, 1H, J = 8.5, 2.1 Hz, H-2), 6.96 (dd, 1H, J = 8.3, 2.1 Hz, H-8), 7.18 (d, 1H, J = 2.0 Hz, H-10), 7.71 (d, 1H, J = 8.4 Hz, H-7), 7.87 (d, 1 H, J = 8.6 Hz, H-1).

5) ¹³C-NMR(125 MHz, DMSO-d6) δ 99.1(C-10), 102.4(C-6a), 103.4(C-4), 104.5(C-1a), 114.2(C-2), 114.4(C-8), 115.0(C-6b), 121.0(C-7), 123.1(C-1), 155.0(C-4a), 156.3(C-9), 157.4(C-10a), 158.0(C-6), 160.0(C-11a), 161.6(C-3).5) ¹³ C-NMR (125 MHz, DMSO- d6 ) δ 99.1 (C-10), 102.4 (C-6a), 103.4 (C-4), 104.5 (C-1a), 114.2 (C-2), 114.4 (C-8), 115.0 (C-6b), 121.0 (C-7), 123.1 (C-1), 155.0 (C-4a), 156.3 (C-9), 157.4 (C-10a), 158.0 (C-6), 160.0 (C-11a), 161.6 (C-3).

[화합물 5]: 3,3',4',5,7-[Compound 5]: 3,3 ', 4', 5,7- 펜타하이드록시플라본Pentahydroxyflavones

1) 물성 : 노란색 분말(녹는점 : 282 ~ 285 ℃) 1) Physical property: Yellow powder (melting point: 282 ~ 285 ℃)

2) 분자량 : 302 2) Molecular Weight: 302

3) 분자식 : C₁₅H₁₀O₇ 3) Molecular formula: C ₁₅ H ₁₀ O ₇

4) ¹H-NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 6.21(d, 1H, J = 1.8 Hz, H-6), 6.43(d, 1H, J = 1.8 Hz, H-8), 6.90(d, 1H, J = 8.5 Hz, H-5'), 7.56(dd, 1H, J = 8.5, 2.1 Hz, H-6'), 7.69(d, 1H, J = 2.1 Hz, H-2').4) ¹ H-NMR (500 MHz, DMSO-d ₆ ) δ 6.21 (d, 1H, J = 1.8 Hz, H-6), 6.43 (d, 1H, J = 1.8 Hz, H-8), 6.90 ( d, 1H, J = 8.5 Hz, H-5 '), 7.56 (dd, 1H, J = 8.5, 2.1 Hz, H-6'), 7.69 (d, 1H, J = 2.1 Hz, H-2 ') .

5) ¹³C-NMR (125 MHz, DMSO-d₆) δ 93.7(C-8), 98.5(C-6), 103.3(C-10), 115.4(C-2'), 115.9(C-5'), 120.3(C-6'), 122.3(C-1'), 136.0(C-3), 145.3(C-3'), 147.1(C-2), 147.9(C-4'), 156.5(C-9), 160.8(C-5), 164.1(C-7), 176.1(C-4).5) ¹³ C-NMR (125 MHz, DMSO-d ₆ ) δ 93.7 (C-8), 98.5 (C-6), 103.3 (C-10), 115.4 (C-2 '), 115.9 (C-5 '), 120.3 (C-6'), 122.3 (C-1 '), 136.0 (C-3), 145.3 (C-3'), 147.1 (C-2), 147.9 (C-4 '), 156.5 (C-9), 160.8 (C-5), 164.1 (C-7), 176.1 (C-4).

<< 실험예Experimental Example 1>  1> TBARSTBARS 법에 의한 콩뿌리 추출물 또는 이로부터 분리된 폴리페놀계 화합물의 항산화 활성Antioxidant Activity of Soybean Root Extracts or Polyphenol-Based Compounds Isolated from the Extracts

본 발명의 콩뿌리 추출물 또는 이로부터 분리된 폴리페놀계 화합물의 LDL에 대한 항산화 활성을 알아보기 위하여, 하기와 같이 실험을 수행하였다.In order to determine the antioxidant activity of the soybean root extract of the present invention or the polyphenol-based compound isolated therefrom, the experiment was performed as follows.

Cu^{2 +}은 LDL의 산화를 유도하는 것으로 알려져 있다. 따라서 본 발명에서는 Cu^{2 +}은 LDL의 산화를 유도에 의해 생성된 불포화 지방산의 산화산물인 디알데하이드(dialdehyde)를 TBARS(thiobarbituric acid-reactive substances)법으로 측정하여, 콩뿌리 추출물 또는 이로부터 분리된 폴리페놀계 화합물의 항산화 활성을 조사하였다(Packer, L. Ed. (1994) Methods in Enzymology Vol. 234, Oxygen radicals in biological systems Part D. Academic press, San Diego).Cu ^{2 +} is known to induce the oxidation of LDL. Therefore, in the present invention, Cu ^{2 +} by measuring the di-aldehyde (dialdehyde) oxidation products of unsaturated fatty acids produced by the induced oxidation of LDL by TBARS (thiobarbituric acid-reactive substances) method, the soybean root extract or separate therefrom The antioxidant activity of polyphenolic compounds was investigated (Packer, L. Ed. (1994) Methods in Enzymology Vol. 234, Oxygen radicals in biological systems Part D. Academic press, San Diego).

사람의 혈장 300 ㎖를 초원심분리기로 100,000 × g에서 24시간 동안 원심분리하여 상층에 부유된 초LDL(very low density lipoprotein, VLDL)/킬로마이크론(chylomicron)층을 제거하고 나머지 용액의 비중을 1.063 g/㎖로 맞춘 후, 100,000 x g에서 24시간 동안 원심분리하여 다시 상층에 부유된 LDL 25 ㎖(1.5 ~ 2.5 ㎎ 단백질/㎖)를 분리하였다.300 ml of human plasma was centrifuged with an ultracentrifuge at 100,000 × g for 24 hours to remove the very low density lipoprotein (VLDL) / chylomicron layer suspended in the upper layer and the specific gravity of the remaining solution was 1.063. After adjusting to g / ml, 25 ml (1.5-2.5 mg protein / ml) suspended in the upper layer was again separated by centrifugation at 100,000 × g for 24 hours.

이렇게 분리한 LDL 20 ㎕(단백질 농도, 50 ~ 100 ㎍/㎖)를 10 mM 인산완충용액(phosphate-buffered saline, PBS) 210 ㎕와 혼합하고, 상기 실시예 에서 제조한 콩뿌리 추출물 또는 이로부터 분리된 폴리페놀계 화합물의 용액을 각각 10 ㎕씩 첨가하였다.20 μl of this isolated LDL (protein concentration, 50-100 μg / ml) was mixed with 210 μl of 10 mM phosphate-buffered saline (PBS), and the soybean root extract prepared in the above example or separated therefrom. 10 μl of a solution of the polyphenol-based compound was added.

콩뿌리 추출물 또는 이로부터 분리된 폴리페놀계 화합물은 DMSO(dimethylsulfoxide)에 녹여 사용하였으며, 실험에 사용하기 전에 여러 농도로 희석하였다. 음성 대조군으로는 용매만을 첨가한 것을 사용하였으며, 양성 대조군으로는 프로부콜을 첨가한 것을 사용하였다.Soybean root extract or polyphenol-based compound isolated therefrom was dissolved in DMSO (dimethylsulfoxide) and diluted to various concentrations before use in experiments. As the negative control, only the solvent was added, and as the positive control, the probucol added was used.

상기 용액에 0.25 mM 황산구리 10 ㎕를 첨가하여 37 ℃에서 4시간 동안 반응시키고, 20% 트리클로로아세트산(trichloroacetic acid, TCA) 용액 1 ㎖를 첨가하여 반응을 중지시켰다. 0.05 N 수산화나트륨 용액에 녹인 0.67% TBA 용액 1 ㎖를 첨가하고 10초간 교반시킨 후 95 ℃에서 5분 동안 가열하여 발색반응이 일어나도록 하고 얼음물로 용액을 냉각하였다. 이 용액을 3000 rpm에서 5분 동안 원심분리하여 상등액을 분리하였으며, 자외선-가시광선 분광기로 540 ㎚에서의 흡광도를 측정하여 상기 발색 반응으로 생성된 말론디알데하이드(malondialdehyde, MDA)의 양을 구하였다.10 μl of 0.25 mM copper sulfate was added to the solution for 4 hours at 37 ° C., and 1 ml of 20% trichloroacetic acid (TCA) solution was added to stop the reaction. 1 ml of a 0.67% TBA solution dissolved in 0.05 N sodium hydroxide solution was added thereto, stirred for 10 seconds, and heated at 95 ° C. for 5 minutes to cause a color reaction, and the solution was cooled with ice water. The solution was centrifuged at 3000 rpm for 5 minutes to separate the supernatant, and the absorbance at 540 nm was measured by UV-vis spectrophotometry to determine the amount of malondialdehyde (MDA) produced by the color reaction. .

테트라메톡시프로판(말론알데하이드 비스(디메틸아세탈)) [tetramethoxypropane malonaldehyde bis(dimethylacetal)]의 저장용액을 이용하여, 말론디알데하이드를 인산완충용액으로 0 ~ 10 n㏖로 희석하여 표준물질을 250㎕씩 만들었다.Tetramethoxypropane malonaldehyde bis (dimethylacetal) was used to store malondialdehyde in a phosphate buffer solution and diluted to 0-10 nmol using a stock solution of tetramethoxypropane malonaldehyde bis (dimethylacetal). made.

이 표준물질을 상기와 같은 방법으로 발색시켜 540 ㎚에서의 흡광도를 측정하고, 말론디알데하이드의 표준곡선을 구하였다.This standard was developed in the same manner as described above, the absorbance at 540 nm was measured, and the standard curve of malondialdehyde was obtained.

콩뿌리 추출물 또는 이로부터 분리된 폴리페놀계 화합물을 사용한 상기 실험에서 말론디알데하이드의 양은 이 표준곡선을 이용하여 정량하였다.The amount of malondialdehyde in this experiment using soybean root extract or polyphenol-based compound isolated therefrom was quantified using this standard curve.

결과는 하기의 표 2에 나타내었다.The results are shown in Table 2 below.

화합물compound 화합물명Compound name IC₅₀(μM)IC ₅₀ (μM) 콩뿌리 메탄올추출물Soybean Root Methanol Extract 메탄올 추출물Methanol extract 20 ㎍/㎖에서 85% 저해85% inhibition at 20 μg / ml 폴리페놀계 화합물 Polyphenolic compounds 1One 4',7-하이드록시이소플라본4 ', 7-hydroxyisoflavones 6.66.6 22 4',5,7-트리하이드록시이소플라본4 ', 5,7-trihydroxyisoflavone 9.49.4 33 2-(1-하이드록시-1-메틸에틸)-6H-벤조퓨로[3,2-c]퓨로[3,2-g][1]벤조피란-6a,9(11aH)-디올2- (1-hydroxy-1-methylethyl) -6H-benzofuro [3,2-c] puro [3,2-g] [1] benzopyran-6a, 9 (11aH) -diol 8.88.8 44 3,9-디하이드록시-6H-벤조퓨로[3,2-c][1] 벤조피란-6-온3,9-dihydroxy-6H-benzofuro [3,2-c] [1] benzopyran-6-one 9.49.4 55 3,3',4',5,7-펜타하이드록시플라본3,3 ', 4', 5,7-pentahydroxyflavone 9.29.2 양성 대조군Positive control 프로부콜Probucol 12.012.0

상기 표 2에 나타난 바와 같이, 본 발명의 콩뿌리 추출물 또는 이로부터 분리된 폴리페놀계 화합물은 LDL에 대한 항산화 활성이 우수함을 알 수 있었다.As shown in Table 2, it was found that the soybean root extract of the present invention or the polyphenol-based compound isolated therefrom has excellent antioxidant activity against LDL.

따라서, 본 발명에 의한 콩뿌리 추출물 또는 이로부터 분리된 폴리페놀계 화합물은 LDL이 산화되어 유발되는 것으로 알려진 고지혈증, 관상동맥 심장병, 동맥경화 및 심근경색과 같은 심혈관계 질환의 예방 또는 치료에 유용하게 사용할 수 있다.Therefore, the soybean root extract according to the present invention or the polyphenol-based compound isolated therefrom is useful for the prevention or treatment of cardiovascular diseases such as hyperlipidemia, coronary heart disease, arteriosclerosis, and myocardial infarction, which are known to be caused by oxidation of LDL. Can be used.

<< 실험예Experimental Example 2> 마우스에 대한 경구투여 급성 독성실험 2> Acute Toxicity of Oral Administration in Mice

본 발명에 따른 콩뿌리 추출물 또는 이로부터 분리된 폴리페놀계 화합물의 급성 독성을 알아보기 위하여, 하기와 같은 실험을 수행하였다.In order to determine the acute toxicity of the soybean root extract or polyphenol-based compound isolated therefrom, the following experiment was carried out.

4주령의 특정 병원체 부재(specific pathogens free) ICR 마우스 암컷 12 마리와 숫컷 12마리(암수 각각 3마리/용량군)를 온도 22 ±3 ℃, 습도 55 ±10%, 조명 12L/12D의 동물실 내에서 사육하였다. 마우스는 실험에 사용되기 전 1주일 정도 순화시켰다. 실험동물용 사료((주)제일제당, 마우스 및 랫트용) 및 음수는 멸균한 후 공급하였으며 자유 섭취시켰다.12 females and 12 males (3 males and 3 females each) at 4 weeks of age for specific pathogens-free ICR mice were housed in an animal room with temperature 22 ± 3 ° C, humidity 55 ± 10%, and illumination 12L / 12D. Breeding in. Mice were allowed to acclimate for about a week before being used in the experiment. Feed for experimental animals (Jeil Jedang Co., Ltd., mice and rats) and drinking water were supplied after sterilization and freely ingested.

상기 실시예에서 제조한 콩뿌리 추출물 또는 이로부터 분리된 폴리페놀계 화합물을 0.5% 트윈 80을 용매로 하여 50 mg/㎖ 농도로 조제한 후, 마우스 체중 20 g 당 0.04 ㎖(100 mg/kg), 0.2 ㎖(500 mg/kg), 0.4 ㎖(1,000 mg/kg)씩 경구 투여하였다. 시료는 단회 경구 투여하였으며, 투여 후 7일 동안 다음과 같이 부작용 또는 치사 여부를 관찰하였다. 즉, 투여 당일은 투여 후 1시간, 4시간, 8시간, 12시간 뒤에, 그리고 투여 익일부터 7일째까지는 매일 오전, 오후 1회 이상씩 일반증상의 변화 및 사망동물의 유무를 관찰하였다.After preparing soybean root extract or polyphenol-based compound isolated therefrom at a concentration of 50 mg / ml using 0.5% Tween 80 as a solvent, 0.04 ml (100 mg / kg) per 20 g of mouse body weight, 0.2 ml (500 mg / kg) and 0.4 ml (1,000 mg / kg) were administered orally. Samples were administered orally once and observed for side effects or lethality for 7 days after administration. That is, on the day of administration, changes in general symptoms and the presence of dead animals were observed at least once in the morning, at least once every afternoon from 1 hour, 4 hours, 8 hours, 12 hours, and the next day after the administration.

또한, 투여 7일째에 동물을 치사시켜 해부한 후 육안으로 내부 장기를 검사하였다. 투여 당일부터 1일 간격으로 체중의 변화를 측정하여 콩뿌리 추출물 또는 이로부터 분리된 폴리페놀계 화합물에 의한 동물의 체중 감소 현상을 관찰하였다.In addition, on the 7th day of administration, animals were killed and dissected, and the internal organs were visually examined. Changes in body weight were measured at daily intervals from the day of administration, and the weight loss of the animals by the soybean root extract or the polyphenol-based compound isolated therefrom was observed.

시험 결과, 시험물질을 투여한 모든 마우스에서 특기할 만한 임상증상은 없었고 폐사된 마우스도 없었으며, 또한 체중변화, 혈액검사, 혈액생화학 검사, 부검소견 등에서도 독성변화는 관찰되지 않았다.As a result, all mice treated with test substance showed no clinical symptoms and no dead mice, and no toxicity change was observed in weight change, blood test, blood biochemistry test and autopsy findings.

따라서, 본 발명에 따른 콩뿌리 추출물 또는 이로부터 분리된 폴리페놀계 화합물은 모든 마우스에서 1,000 mg/kg까지 독성변화를 나타내지 않았으며, 경구투여 최소치사량(LD₅₀)이 적어도 1,000 mg/kg 이상인 안전한 물질로 판단되었다.Therefore, the soybean root extract or the polyphenol-based compound isolated therefrom did not show toxicity change up to 1,000 mg / kg in all mice, and the minimum lethal dose (LD ₅₀ ) of at least 1,000 mg / kg was safe. It was judged to be a substance.

하기에 본 발명의 조성물을 위한 제제예를 예시한다. Examples of preparations for the compositions of the present invention are illustrated below.

<< 제제예Formulation example 1> 약학적 제제의 제조 1> Preparation of Pharmaceutical Formulations

<1-1> <1-1> 산제의Powder 제조 Produce

콩뿌리 추출물 또는 폴리페놀계 화합물 중 1종 2 g2 g of soybean root extract or one of polyphenolic compounds

유 당 1 g1 g lactose

상기의 성분을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.The above ingredients were mixed and filled in airtight cloth to prepare a powder.

<1-2> 정제의 제조<1-2> Preparation of Tablet

콩뿌리 추출물 또는 폴리페놀계 화합물 중 1종 100 ㎎One 100 mg of soybean root extract or polyphenolic compound

옥수수전분 100 ㎎Corn starch 100 mg

유 당 100 ㎎Lactose 100 mg

스테아린산 마그네슘 2 ㎎2 mg magnesium stearate

상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.After mixing the above components, tablets were prepared by tableting according to a conventional method for producing tablets.

<1-3> 캡슐제의 제조<1-3> Preparation of Capsule

콩뿌리 추출물 또는 폴리페놀계 화합물 중 1종 100 ㎎One 100 mg of soybean root extract or polyphenolic compound

옥수수전분 100 ㎎Corn starch 100 mg

유 당 100 ㎎Lactose 100 mg

스테아린산 마그네슘 2 ㎎2 mg magnesium stearate

상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 캡슐제의 제조방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.After mixing the above components, the capsule was prepared by filling in gelatin capsules according to the conventional method for producing a capsule.

<1-4> 주사액제의 제조<1-4> Preparation of Injection Solution

콩뿌리 추출물 또는 폴리페놀계 화합물 중 1종 10 ㎍/㎖10 ㎍ / mL one kind of soybean root extract or polyphenolic compound

묽은 염산 BP pH 3.5로 될 때까지Dilute hydrochloric acid BP until pH 3.5

주사용 염화나트륨 BP 최대 1 ㎖Injectable sodium chloride BP up to 1 ml

적당한 용적의 주사용 염화나트륨 BP 중에 콩뿌리 추출물 또는 폴리페놀계 화합물을 용해시키고, 생성된 용액의 pH를 묽은 염산 BP를 사용하여 pH 3.5로 조절하고, 주사용 염화나트륨 BP를 사용하여 용적을 조절하고 충분히 혼합하였다. 용액을 투명유리로된 5 ㎖ 타입 I 앰플 중에 충전시키고, 유리를 용해시킴으로써 공기의 상부 격자하에 봉입시키고, 120 ℃에서 15분 이상 오토클래이브시켜 살균하여 주사액제를 제조하였다.Soybean root extract or polyphenolic compound was dissolved in an appropriate volume of sodium chloride BP for injection, and the pH of the resulting solution was adjusted to pH 3.5 with dilute hydrochloric acid BP, and volume was adjusted with sodium chloride BP for injection and Mixed. The solution was filled into a 5 ml Type I ampoule made of clear glass, dissolved under glass to be sealed under an upper grid of air, and sterilized by autoclaving at 120 ° C. for at least 15 minutes to prepare an injection solution.

<< 제제예Formulation example 2> 식품의 제조 2> Manufacture of food

콩뿌리 추출물 또는 폴리페놀계 화합물을 포함하는 식품들을 다음과 같이 제조하였다.Foods containing soybean root extract or polyphenolic compounds were prepared as follows.

<2-1> 조리용 양념의 제조<2-1> Preparation of Cooking Seasoning

콩뿌리 추출물 또는 폴리페놀계 화합물 0.2 ~ 10 중량%로 건강 증진용 조리용 양념을 제조하였다.0.2 ~ 10% by weight of soybean root extract or polyphenol-based compound was prepared for cooking spices for health promotion.

<2-2> 토마토 <2-2> tomato 케찹ketchup 및 소스의 제조 And preparation of sauces

콩뿌리 추출물 또는 폴리페놀계 화합물 0.2 ~ 1.0 중량%를 토마토 케찹 또는 소스에 첨가하여 건강 증진용 토마토 케찹 또는 소스를 제조하였다.Health promotion tomato ketchup or sauce was prepared by adding 0.2 ~ 1.0 wt% of soybean root extract or polyphenolic compound to tomato ketchup or sauce.

<2-3> 밀가루 식품의 제조<2-3> Preparation of flour food

콩뿌리 추출물 또는 폴리페놀계 화합물 0.1 ~ 5.0 중량%를 밀가루에 첨가하고, 이 혼합물을 이용하여 빵, 케이크, 쿠키, 크래커 및 면류를 제조하여 건강 증진용 식품을 제조하였다.0.1 to 5.0 wt% of soybean root extract or polyphenolic compound was added to the flour, and bread, cake, cookies, crackers, and noodles were prepared using the mixture to prepare foods for health promotion.

<2-4> <2-4> 스프soup 및 육즙( And juicy ( graviesgravies )의 제조Manufacturing

콩뿌리 추출물 또는 폴리페놀계 화합물 0.1 ~ 1.0 중량%를 스프 및 육즙에 첨가하여 건강 증진용 육가공 제품, 면류의 수프 및 육즙을 제조하였다.Soy root extract or 0.1% to 1.0% by weight of a polyphenolic compound was added to soups and broth to prepare meat products for health promotion, soups and noodles of noodles.

<2-5> 그라운드 <2-5> ground 비프(ground beef)의Ground beef 제조 Produce

콩뿌리 추출물 또는 폴리페놀계 화합물 10 중량%를 그라운드 비프에 첨가하여 건강 증진용 그라운드 비프를 제조하였다.10% by weight of soybean root extract or polyphenolic compound was added to ground beef to prepare ground beef.

<2-6> 유제품(<2-6> dairy products ( dairydairy productsproducts )의 제조Manufacturing

콩뿌리 추출물 또는 폴리페놀계 화합물 0.1 ~ 1.0 중량%를 우유에 첨가하고, 상기 우유를 이용하여 버터 및 아이스크림과 같은 다양한 유제품을 제조하였다.0.1-1.0 wt% of soybean root extract or polyphenolic compound was added to milk, and various dairy products such as butter and ice cream were prepared using the milk.

<2-7> <2-7> 선식의Linear 제조 Produce

현미, 보리, 찹쌀, 율무를 공지의 방법으로 알파화시켜 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다.Brown rice, barley, glutinous rice, and yulmu were alphad by a known method, and then dried and roasted to prepare a powder having a particle size of 60 mesh.

검정콩, 검정깨, 들깨도 공지의 방법으로 쪄서 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다.Black beans, black sesame seeds, and perilla were also steamed and dried by a known method, and then ground to a powder having a particle size of 60 mesh.

콩뿌리 추출물 또는 폴리페놀계 화합물을 진공 농축기에서 감압하에서 농축하고, 분무, 열풍건조기로 건조하여 얻은 건조물을 분쇄기로 입도 60 메쉬로 분쇄하여 건조분말을 얻었다.The soybean root extract or polyphenol-based compound was concentrated under a reduced pressure in a vacuum concentrator and dried by spraying and drying with a hot air dryer to grind the dried powder to a particle size of 60 mesh using a grinder to obtain a dry powder.

상기에서 제조한 곡물류, 종실류 및 콩뿌리 추출물 또는 폴리페놀계 화합물의 건조분말을 다음의 비율로 배합하여 제조하였다.It was prepared by combining the dry powder of the grains, seeds and soybean root extract or polyphenol-based compound prepared in the following ratio.

- 곡물류(현미 30 중량%, 율무 15 중량%, 보리 20 중량%),Cereals (30% by weight brown rice, 15% by weight barley, 20% by weight barley),

- 종실류(들깨 7 중량%, 검정콩 8 중량%, 검정깨 7 중량%),Seeds (7% by weight perilla, 8% by weight black beans, 7% by weight black sesame seeds),

- 콩뿌리 추출물 또는 폴리페놀계 화합물의 건조분말(1 중량%),-Dry powder (1% by weight) of soybean root extract or polyphenolic compound,

- 영지(0.5 중량%),-Ganoderma lucidum (0.5% by weight),

- 지황(0.5 중량%)-Sulfur (0.5 wt%)

<< 제제예Formulation example 3> 음료의 제조 3> Manufacture of beverage

<3-1> 탄산음료의 제조<3-1> Preparation of Carbonated Drink

설탕 5 ~ 10%, 구연산 0.05 ~ 0.3%, 카라멜 0.005 ~ 0.02%, 비타민 C 0.1 ~ 1%의 첨가물을 혼합하고, 여기에 79 ~ 94%의 정제수를 섞어서 시럽을 만들고, 상기 시럽을 85 ~ 98 ℃에서 20 ~ 180초간 살균하여 냉각수와 1 : 4의 비율로 혼합한 다음 탄산가스를 0.5 ~ 0.82% 주입하여 콩뿌리 추출물 또는 폴리페놀계 화합물을 함유하는 탄산음료를 제조하였다.5 to 10% of sugar, 0.05 to 0.3% of citric acid, 0.005 to 0.02% of caramel, 0.1 to 1% of vitamin C are mixed, and 79 to 94% of purified water is mixed to make a syrup, and the syrup is 85 to 98 Sterilizing at 20 ℃ for 180 seconds, mixed with a cooling water and a ratio of 1: 4, and then injected with 0.5 ~ 0.82% carbon dioxide gas to prepare a carbonated beverage containing soybean root extract or polyphenol-based compound.

<3-2> <3-2> 건강음료의Health drink 제조 Produce

액상과당(0.5%), 올리고당(2%), 설탕(2%), 식염(0.5%), 물(75%)과 같은 부재료와 콩뿌리 추출물 또는 폴리페놀계 화합물을 균질하게 배합하여 순간 살균을 한 후 이를 유리병, 패트병 등 소포장 용기에 포장하여 건강음료를 제조하였다.Instant sterilization by homogeneously mixing subsidiary materials such as liquid fructose (0.5%), oligosaccharide (2%), sugar (2%), salt (0.5%), water (75%) and soybean root extract or polyphenolic compound After that, it was packaged in small packaging containers such as glass bottles and plastic bottles to prepare healthy drinks.

<3-3> <3-3> 야채쥬스의Vegetable juice 제조 Produce

콩뿌리 추출물 또는 폴리페놀계 화합물 0.5 g을 토마토 또는 당근 쥬스 1,000 ㎖에 가하여 건강 증진용 야채쥬스를 제조하였다.0.5 g of soybean root extract or polyphenolic compound was added to 1,000 ml of tomato or carrot juice to prepare vegetable juice for health promotion.

<3-4> <3-4> 과일쥬스의Fruit juice 제조 Produce

콩뿌리 추출물 또는 폴리페놀계 화합물 0.1 g을 사과 또는 포도 쥬스 1,000 ㎖에 가하여 건강 증진용 과일쥬스를 제조하였다.0.1 g of soybean root extract or polyphenolic compound was added to 1,000 ml of apple or grape juice to prepare fruit juice for health promotion.

본 발명의 콩뿌리 추출물 또는 이로부터 분리된 폴리페놀계 화합물은 LDL에 대한 항산화 활성효과가 매우 우수하며, 마우스에서 급성 독성을 나타내지 않는다.Soybean root extract of the present invention or a polyphenol-based compound isolated therefrom is very excellent in antioxidant activity against LDL, and does not exhibit acute toxicity in mice.

따라서, 본 발명의 상기 조성물은 LDL의 산화에 의해 유발되는 것으로 알려진 고지혈증, 관상동맥 심장병, 동맥경화 및 심근경색과 같은 심혈관계 질환의 예방 및 치료에 유용하게 사용될 수 있다.Therefore, the composition of the present invention can be usefully used for the prevention and treatment of cardiovascular diseases such as hyperlipidemia, coronary heart disease, arteriosclerosis and myocardial infarction, which are known to be caused by oxidation of LDL.

Claims (9)

삭제delete 2-(1-하이드록시-1-메틸에틸)-6H-벤조퓨로[3,2-c]퓨로[3,2-g][1]벤조피란-6a,9(11aH)-디올 또는 약학적으로 허용 가능한 그의 염을 유효성분으로 포함하는 고지혈증, 관상동맥 심장병, 동맥경화 또는 심근경색의 예방 또는 치료용 조성물.2- (1-hydroxy-1-methylethyl) -6H-benzofuro [3,2-c] puro [3,2-g] [1] benzopyran-6a, 9 (11aH) -diol or pharmaceutical A composition for the prevention or treatment of hyperlipidemia, coronary heart disease, arteriosclerosis or myocardial infarction comprising a salt thereof acceptable as an active ingredient. 삭제delete 제2항에 있어서, 상기 화합물이 콩뿌리 추출물로부터 분리된 것임을 특징으로 하는 고지혈증, 관상동맥 심장병, 동맥경화 또는 심근경색의 예방 또는 치료용 조성물.The composition for preventing or treating hyperlipidemia, coronary heart disease, arteriosclerosis or myocardial infarction according to claim 2, wherein the compound is isolated from the soybean root extract. 2-(1-하이드록시-1-메틸에틸)-6H-벤조퓨로[3,2-c]퓨로[3,2-g][1]벤조피란-6a,9(11aH)-디올 또는 약학적으로 허용 가능한 그의 염을 포함하는 것을 특징으로 하는 고지혈증, 관상동맥 심장병, 동맥경화 또는 심근경색의 예방 또는 개선용 기능성 건강식품.2- (1-hydroxy-1-methylethyl) -6H-benzofuro [3,2-c] puro [3,2-g] [1] benzopyran-6a, 9 (11aH) -diol or pharmaceutical A functional health food for preventing or ameliorating hyperlipidemia, coronary heart disease, arteriosclerosis or myocardial infarction, characterized in that it contains a salt which is acceptable as a matter. 제5항에 있어서, 상기 기능성 건강식품은 조리용 양념, 토마토 케찹, 토마토 소스, 밀가루 식품, 스프, 육즙, 그라운드 비프, 유제품 및 선식으로 구성되는 군으로부터 선택되는 하나의 형태인 것을 특징으로 하는 고지혈증, 관상동맥 심장병, 동맥경화 또는 심근경색의 예방 또는 개선용 기능성 건강식품.According to claim 5, The functional health food is hyperlipidemia characterized in that one form selected from the group consisting of cooking seasoning, tomato ketchup, tomato sauce, flour food, soup, gravy, ground beef, dairy products and wire type A functional health food for the prevention or improvement of coronary heart disease, arteriosclerosis or myocardial infarction. 2-(1-하이드록시-1-메틸에틸)-6H-벤조퓨로[3,2-c]퓨로[3,2-g][1]벤조피란-6a,9(11aH)-디올 또는 약학적으로 허용 가능한 그의 염을 포함하는 것을 특징으로 하는 고지혈증, 관상동맥 심장병, 동맥경화 또는 심근경색의 예방 또는 개선용 기능성 음료.2- (1-hydroxy-1-methylethyl) -6H-benzofuro [3,2-c] puro [3,2-g] [1] benzopyran-6a, 9 (11aH) -diol or pharmaceutical A functional beverage for the prevention or amelioration of hyperlipidemia, coronary heart disease, arteriosclerosis or myocardial infarction, characterized in that it contains a salt which is acceptable as a matter. 제2항에 있어서, 상기 조성물은 산제, 정제, 캡슐제 또는 주사액제의 형태인 것을 특징으로 하는 고지혈증, 관상동맥 심장병, 동맥경화 또는 심근경색의 예방 또는 치료용 조성물.3. The composition for preventing or treating hyperlipidemia, coronary heart disease, atherosclerosis or myocardial infarction according to claim 2, wherein the composition is in the form of a powder, tablet, capsule or injection. 삭제delete