KR100726281B1 - Novel compounds and the composition for treatment of obesity and diabetes containing the same - Google Patents
Novel compounds and the composition for treatment of obesity and diabetes containing the same Download PDFInfo
- Publication number
- KR100726281B1 KR100726281B1 KR1020060071983A KR20060071983A KR100726281B1 KR 100726281 B1 KR100726281 B1 KR 100726281B1 KR 1020060071983 A KR1020060071983 A KR 1020060071983A KR 20060071983 A KR20060071983 A KR 20060071983A KR 100726281 B1 KR100726281 B1 KR 100726281B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- compound
- fatty acid
- acid ester
- obesity
- ester compound
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C69/00—Esters of carboxylic acids; Esters of carbonic or haloformic acids
- C07C69/66—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety
- C07C69/67—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety of saturated acids
- C07C69/675—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety of saturated acids of saturated hydroxy-carboxylic acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
- A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
- A61K31/22—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C67/00—Preparation of carboxylic acid esters
- C07C67/48—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
Abstract
Description
도 1은 희첨으로부터 얻은 신규 지방산 에스테르 화합물 중 화합물 1의 1H-NMR spectrum을 나타낸 것이다.Figure 1 shows the 1 H-NMR spectrum of compound 1 of the novel fatty acid ester compound obtained from the rare.
도 2는 희첨으로부터 얻은 신규 지방산 에스테르 화합물 중 화합물 1의 13C-NMR spectrum을 나타낸 것이다.Figure 2 shows the 13 C-NMR spectrum of compound 1 of the novel fatty acid ester compound obtained from the rare.
본 발명은 신규 지방산 에스테르 화합물 및 이를 유효성분으로 함유하는 당뇨 및 비만의 예방과 치료용 조성물에 관한 것이다. 보다 상세하게는, 본 발명은 상기의 신규 화합물이 단백질 타이로신 탈인산효소 1B(protein tyrosine phosphatase 1B, PTP1B) 저해용으로 사용됨을 특징으로 하며, 특히 희첨을 에탄올 추출한 후 크로마토그래피를 이용하여 순수 분리, 정제하여 얻은 신규한 PTP1B 저 해용 지방산 에스테르 화합물 및 이를 유효성분으로 함유하는 당뇨 및 비만의 예방과 치료용 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a novel fatty acid ester compound and a composition for preventing and treating diabetes and obesity containing the same as an active ingredient. More specifically, the present invention is characterized in that the novel compound is used for protein tyrosine phosphatase 1B (PTP1B) inhibition, in particular pure water separation by chromatography using ethanol extraction, The present invention relates to a novel PTP1B low-soluble fatty acid ester compound obtained by purification and a composition for preventing and treating diabetes and obesity containing the same as an active ingredient.
최근 경제발전에 따른 생활수준의 향상으로 인하여 위생환경이 개선되고 식생활의 향상으로 섭취열량 또한 급속한 증가가 이루어지고 있다. 그러나, 음식으로 섭취열량이 증가하는 반면 운동부족 등으로 소비되는 열량이 적어 비만이 증가하는 경향을 보이고 있다. 비만은 젊은이들에게 있어서 마른 체형을 좋아하는 미용적인 모습을 해칠 뿐만 아니라 비만이 지속됨으로써 여러 가지 질환, 즉 고혈압, 당뇨, 고지혈증, 관상동맥질환 등과 같은 성인병을 비롯하여 유방암, 자궁암 및 대장암 등을 야기하는 것으로 보고 되면서 이제는 치명적인 질병으로 취급되고 있다 [J. Biol. Chem., 273, 32487 - 32490 (1998); Nature, 404, 652 - 660 (2000)].Recently, due to the improvement of living standards according to economic development, the hygiene environment is improved and the intake of calories is rapidly increased due to the improvement of diet. However, while calorie intake increases with food, the amount of calories consumed due to lack of exercise, etc. tends to increase obesity. Obesity not only harms young people's skin-like beauty, but also causes obesity to persist, leading to a number of diseases such as hypertension, diabetes, hyperlipidemia, coronary artery disease, as well as breast cancer, uterine cancer and colon cancer. It is reported that the disease is now a fatal disease [J. Biol. Chem., 273, 32487-32490 (1998); Nature, 404, 652-660 (2000)].
현재 비만을 치료하는 치료제로는 크게 중추 신경계에 작용하여 식욕에 영향을 주는 약물과 위장관에 작용하여 흡수를 저해하는 약물로 나누어 볼 수 있다. 중추 신경계에 작용하는 약물로는 각각의 기전에 따라 세로토닌 (5HT) 신경계를 저해하는 펜플루라민, 덱스펜플루라민 등의 약물, 노르아드레날린 신경계를 통한 에페드린 및 카페인 등의 약물 및 최근에는 세로토닌 및 노르아드레날린 신경계에 동시 작용하여 비만을 저해하는 시부트라민 등의 약물들이 시판되고 있다. 이외에도, 위장관에 작용하여 비만을 저해하는 약물로 장관 리파제를 저해하여 지방의 흡수를 줄여줌으로써 비만 치료제로 허가된 오를리스타트 등이 대표적인 약물로 사용되고 있다. 그러나, 기존에 사용되어온 약물 중 펜플루라민 등의 약물은 부작용으로 원발성 폐고혈압이나 심장 판막병변을 일으켜 최근에 사용이 금지되었으며, 다른 약 물들도 혈압감소나 유산산혈증 등의 문제점이 발생하여 심부전, 신질환 등의 환자에는 사용하지 못하는 문제점이 있다.Current treatments to treat obesity can be divided into drugs that act on the central nervous system and affect appetite and drugs that act on the gastrointestinal tract and inhibit absorption. Drugs that act on the central nervous system include drugs such as fenfluramine and dexfenfluramine that inhibit the serotonin (5HT) nervous system according to their respective mechanisms, drugs such as ephedrine and caffeine through the noradrenaline nervous system, and recently serotonin and noradrenaline nervous system. Drugs such as sibutramine that act and inhibit obesity are commercially available. In addition, orlistat, which is approved as an obesity drug by inhibiting intestinal lipase and reducing fat absorption by acting on the gastrointestinal tract and inhibiting obesity, is used as a representative drug. However, among the previously used drugs, drugs such as fenfluramine have been banned recently because of side effects such as primary pulmonary hypertension or heart valve lesions. Other drugs also cause problems such as blood pressure reduction or lactic acidosis, resulting in heart failure and kidney disease. There is a problem that can not be used in the patient.
한편, 비만이 진행되어 당뇨로 진행되는 제 2 형 당뇨병의 경우에 있어서 중성지방인 팔미테이트들이 점진적으로 췌장의 β세포를 파괴하여 당뇨로 진행된다는 결과들이 알려지고 있으며 [Proc. Natl. Acad. Sci. 95, 2498 - 2502 (1998)], 지방간의 진행에도 중성지방의 축적이 관여되고 있음이 보고되고 있다 [J. Clin. Invest., 98, 1575 - 1584 (1996)]. 현재, 제 2형 당뇨병 치료제로 많이 사용하는 약물로는 인슐린 생성이 부족하거나 인슐린이 충분하다 해도 활성이 낮아 체내에서 당을 제대로 활용하지 못하는 인슐린 내성 (insulin resistance)을 치료하기 위하여 혈당 강하제를 사용한다. 이러한 혈당 강하제는 치료기전 및 작용 약물의 작용점에 따라 나누어지는데, 설포닐우레아 계통은 주로 췌장의 베타 세포 안에 있는 인슐린을 함유한 과립포의 이동을 촉진하여 간접적으로 인슐린을 분비시키는 약물로, 저혈당 유발 등의 심각한 부작용이 보고 되고 있으나 최근에는 부작용을 최소화한 약물이 개발되어지고 있다. 또한, 비구아나이드 계통 약물은 근육세포로 당을 이동시키고 간에서 당이 만들어지지 못하게 하는 약물로, 비만한 당뇨 환자에게 사용하며 저혈당을 일으키지 않는 장점을 갖고 있으나 고령자와 심 혈관 질환 환자에게는 주의해야 한다. 또한, 알파-글루코시다아제 저해제는 소장에서 포도당을 만드는 효소 활동을 억제시켜 식후에 일시적으로 혈당이 급상승하는 것을 막아주고, 부작용이 심하지 않은 편이어서 경증 당뇨병 치료에 이용된다. 최근에는, 지방세포의 분화에 관계되는 피피에알 감마를 활성화하는 피페리디온계 약물도 개발되고 있다. 그러나, 경구용 혈당 강하제만으로는 혈당이 효과적으로 떨어지지 않고 이미 알려진 대부분의 약물에서 부작용이 나타나므로 보다 안전한 당뇨병 치료제 개발이 시급한 실정이다. On the other hand, in the case of type 2 diabetes in which obesity progresses to diabetes, it is known that palmitate, a triglyceride, gradually progresses to diabetes by destroying β cells of the pancreas. [Proc. Natl. Acad. Sci. 95, 2498-2502 (1998), reports that triglyceride accumulation is involved in the progression of fatty liver [J. Clin. Invest., 98, 1575-1584 (1996)]. Currently, drugs commonly used to treat type 2 diabetes use hypoglycemic agents to treat insulin resistance, which is insufficient in insulin production even when insulin production is insufficient or insulin is insufficient. . These hypoglycemic agents are divided according to the treatment mechanism and the action point of the action drug. The sulfonylurea line is a drug that indirectly secretes insulin by promoting the movement of granulocytes containing insulin in the beta cells of the pancreas. Serious side effects have been reported, but recently, drugs with minimal side effects have been developed. In addition, the biguanide-based drug is a drug that transfers sugar to muscle cells and prevents sugar from being produced in the liver. It is used in obese patients and does not cause hypoglycemia. However, care should be taken in elderly and cardiovascular patients. . In addition, alpha-glucosidase inhibitors inhibit glucose activity in the small intestine to prevent blood glucose spikes temporarily after a meal, and side effects are not so severe that they are used for treating mild diabetes. In recent years, piperidione-based drugs for activating PPI-gamma related to the differentiation of adipocytes have also been developed. However, oral hypoglycemic agents alone do not drop blood sugar effectively, and most of the known side effects occur in the drug, so it is urgent to develop a safer diabetes treatment.
최근, 제 2형 당뇨병과 단백질 타이로신 탈인산 효소 1B와의 관련성이 밝혀지면서 이의 저해물질이 당뇨병 치료제로서의 개발 가능성이 대두되고 있다 [Nat. Rev. Drug. Discov, 1, 696 - 709, 2002]. 단백질 타이로신 탈인산 효소 1B 유전자에 결함이 있는 쥐의 경우 인슐린 저항성과 비만을 일으키는 능력이 저해되는 현상을 관찰하였으며 [Nature, 283, 1544 - 1548, 1999], 또한 단백질 타이로신 탈인산 효소 1B 저해물질이 제 2형 당뇨병과 비만증에 선택적으로 효과가 있음이 보고 되었다 [JBC, 275, 10300 - 10307, 2000]. 그러나 지금까지 단백질 타이로신 탈인산 효소 1B 저해제 및 지방산 생합성 저해제로서 천연물 유래의 화합물에 대한 보고는 적은 실정이다. Recently, the association between type 2 diabetes and the protein tyrosine dephosphatase 1B has been revealed, the possibility of the development of its inhibitor as a therapeutic for diabetes has emerged [Nat. Rev. Drug. Discov, 1, 696-709, 2002. In mice with a defective protein tyrosine dephosphatase 1B gene, insulin resistance and obesity-inducing ability were inhibited [Nature, 283, 1544-1548, 1999]. It has been reported to be selectively effective for type 2 diabetes and obesity [JBC, 275, 10300-10307, 2000]. However, there are few reports of compounds derived from natural products as protein tyrosine dephosphorase 1B inhibitors and fatty acid biosynthesis inhibitors.
일반적으로, 새로운 성분의 약제를 개발하기 위한 여러 가지 방법 중 기존 약제의 실험적 변형에 의한 노력보다는 전통 의학에서 사용되고 있는 천연물 약제들로부터 새로운 활성 성분을 발견할 수 있는 가능성이 매우 높으며 오랫동안 사용되어 왔기 때문에 개발된 약물들에 의한 독성 염려가 적은 장점이 있다.In general, there is a high possibility of finding new active ingredients from natural medicines used in traditional medicine rather than the efforts of experimental modifications of existing drugs among the various methods for the development of new ingredients of medicine. There is less concern about toxicity due to the drugs developed.
희첨(Hui-Chum)은 우리나라 제주도 및 남부지방에 서식하는 국화과 (Compositae) 식물로서, 제주진득찰(Siegesbeckia orientalis), 진득찰 (Siegesbeckia glabrescens), 털진득찰(Siegesbeckia pubescens) 등의 전초를 한방에서 고혈압, 중풍, 사지마비, 구안와사증 등에 ‘희첨초’라하여 사용되어 왔다. 이러한 희첨에 관계된 특허 및 문헌보고로는 히스타민 유리 저해 [J Ethnopharmacol., 57, 73 - 79, 1997], 육모제 조성물 [대한민국 특허 등록번호 제 10-165937호], 염증질환 치료조성물 [미국특허 제 US, 5,908,628호], 희첨 분획물의 항당뇨효과 [대한민국특허 등록번호 제 10-454097호] 등이 있으나, 희첨 분획물의 화학구조 및 물리화학적 특성에 관한 보고는 없다. Hui-Chum is a plant of the Asteraceae (Compositae) in Jeju, South Korea, and Siegesbeckia. orientalis ), Squirrel ( Siegesbeckia glabrescens ), Squirrel ( Siegesbeckia) pubescens ) and other outposts have been used in the herbal medicine such as high blood pressure, stroke, quadriplegia, orbital sinusitis as 'hee heecho'. Patents and literature reports related to these rares include histamine free inhibition [J Ethnopharmacol., 57, 73-79, 1997], hair restorer compositions [Korean Patent Registration No. 10-165937], inflammatory disease therapeutic compositions [US Pat. , 5,908,628], antidiabetic effect of rare fractions [Korean Patent Registration No. 10-454097], but there is no report on the chemical structure and physicochemical properties of rare fractions.
이에, 본 발명자들은 각종 자생식물 및 한약재를 채집하여 조사하던 중 희첨을 에탄올 추출한 후 크로마토그래피를 이용하여 순수 분리, 정제하여 신규 화합물인 지방산 에스테르 화합물을 얻고, 이들의 화학구조 및 물리화학적 특성을 구체적으로 규명한 다음 단백질 타이로신 탈인산효소 1B (protein tyrosine phosphatase 1B, PTP1B) 저해활성을 조사함으로써, 본 발명을 완성하였다.Accordingly, the present inventors collected various native plants and herbal medicines, and obtained ethanol extract of rare plant and purified and purified by chromatography to obtain fatty acid ester compound as a novel compound, and the chemical structure and physicochemical characteristics thereof The present invention was completed by investigating protein tyrosine phosphatase 1B (PTP1B) inhibitory activity.
따라서, 본 발명의 목적은 희첨 유래의 단백질 타이로신 탈인산 효소 1B 저해용 신규 지방산 에스테르 화합물을 제공하는 것이다. Accordingly, it is an object of the present invention to provide a novel fatty acid ester compound for inhibiting protein tyrosine dephosphorase 1B derived from rare roots.
또한, 본 발명의 다른 목적은 상기 지방산 에스테르 화합물을 유효성분으로 함유하는 당뇨 및 비만의 예방과 치료용 조성물을 제공하는 것이다. Another object of the present invention is to provide a composition for the prevention and treatment of diabetes and obesity containing the fatty acid ester compound as an active ingredient.
상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명의 희첨 유래의 단백질 타이로신 탈인산효소 1B 저해용 지방산 에스테르 화합물은 하기 화학식 1 내지 6으로 표시되는 화합물 1 ~ 6으로 이루어진 군에서 선택된 것임을 특징으로 한다. In order to achieve the above object, the fatty acid ester compound for inhibiting protein tyrosine dephosphatase 1B derived from the rare earth of the present invention is characterized in that it is selected from the group consisting of compounds 1 to 6 represented by the following formulas (1) to (6).
이하, 본 발명을 보다 상세히 설명한다. Hereinafter, the present invention will be described in more detail.
본 발명은 희첨을 마쇄한 후 에탄올로 추출하고 크로마토그래피를 이용하여 하기 화학식 1~6으로 표시되는 신규 PTP1B 저해용 지방산 에스테르 화합물을 순수하게 분리, 정제하는 과정; 상기 과정에서 얻은 지방산 에스테르 화합물의 화학구 조 및 물리화학적 특성을 조사하는 과정; 및 상기 과정의 지방산 에스테르 화합물의 PTP1B 저해 활성을 조사하는 과정;으로 구성한다.The present invention is a process of purely separating and purifying a novel fatty acid ester compound for inhibition of PTP1B represented by the following Chemical Formulas 1 to 6 by extraction with ethanol and chromatography using crushed rare earth; Examining the chemical structure and physicochemical properties of the fatty acid ester compound obtained in the above process; And investigating PTP1B inhibitory activity of the fatty acid ester compound of the above process.
본 발명의 PTP1B 저해용 지방산 에스테르 화합물의 화학구조는 구체적으로 하기 화학식 1~6으로 표시된다. The chemical structure of the fatty acid ester compound for inhibiting PTP1B of the present invention is specifically represented by the following Chemical Formulas 1-6.
[화학식 1][Formula 1]
[화학식 2][Formula 2]
[화학식 3][Formula 3]
[화학식 4][Formula 4]
[화학식 5][Formula 5]
[화학식 6][Formula 6]
본 발명의 신규한 PTP1B 저해용 지방산 에스테르 화합물은 희첨으로부터 알코올, 에테르, 아세톤 등의 유기용매에 의하여 추출, 헥산과 물의 분배, 칼럼크로마토그래피 등 식물체 성분의 분리 추출에 이용되는 공지의 방법을 단독 또는 적합하게 조합하여 용이하게 얻을 수 있다. 또한, 조추출물은 필요에 따라 상법에 따라서 더욱 정제할 수 있다.The novel PTP1B inhibitory fatty acid ester compounds of the present invention can be prepared by using a known method used for extraction of plant components such as extraction, distribution of hexane and water, column chromatography, and the like by extraction with organic solvents such as alcohol, ether and acetone. Or it can obtain easily by combining suitably. In addition, the crude extract can be further purified according to the commercial method, if necessary.
본 발명에서 사용하는 크로마토그래피에는 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (silica gel column chromatography), 엘에이치-20 칼럼 크로마토그래피 (LH-20 column chromatography), 박층 크로마토그래피 (TLC; thin layer chromatography) 및 고성능 액체 크로마토그래피 (high performance liquid chromatography) 등이 이용될 수 있다.Chromatography used in the present invention includes silica gel column chromatography, L-20 column chromatography, thin layer chromatography (TLC) and high performance liquid chromatography (high). performance liquid chromatography) and the like.
본 발명의 신규한 PTP1B 저해용 지방산 에스테르 화합물의 물리화학적 특성은 핵자기공명 스펙트럼의 해석으로부터 지방산 에스테르 화합물임을 밝혀내고, 이들 화합물이 PTP1B를 저해하는 효과가 있음을 확인하였다. The physicochemical properties of the novel PTP1B inhibitory fatty acid ester compounds of the present invention were found to be fatty acid ester compounds from the analysis of nuclear magnetic resonance spectra, and these compounds were found to have an effect of inhibiting PTP1B.
본 발명의 신규 지방산 에스테르 화합물은 PTP1B에 동시에 작용하므로, 비만 및 당뇨에 효능이 있어 생체 내 이용성이 높아 유리하게 활용할 수 있으며, 상기 화합물은 유효성분으로 당뇨 및 비만의 예방과 치료용 조성물에 함유한다. Since the novel fatty acid ester compound of the present invention acts on PTP1B at the same time, it is effective in obesity and diabetes and has high bioavailability, which can be advantageously used, and the compound is contained in a composition for preventing and treating diabetes and obesity as an active ingredient. .
본 발명의 신규 지방산 에스테르 화합물은 희첨으로부터 쉽게 분리할 수 있을 뿐만 아니라 안정도도 높으므로 식품, 의약품 등의 첨가제로 이용할 수 있다.Since the novel fatty acid ester compound of the present invention can be easily separated from the rare oil and also has high stability, it can be used as an additive for food, medicine and the like.
의약품에 적용할 경우에는 본 발명의 신규 지방산 에스테르 화합물을 유효성분으로하여 상용되는 무기 또는 유기의 담체를 가하여 고체, 반고체 또는 액상의 형태로 경구투여제 혹은 비경구 투여제로 제제화할 수 있다.When applied to pharmaceuticals, the novel fatty acid ester compound of the present invention may be formulated as an oral or parenteral dosage form in the form of a solid, semi-solid or liquid by adding a commercially available inorganic or organic carrier.
상기 경구투여를 위한 제재로서는 정제 (錠劑), 환제 (丸劑), 과립제 (顆粒劑), 연ㆍ경 캡슐제, 산제, 세립제, 분제, 유탁제 (乳濁濟), 시럽제, 펠렛제 등을 들 수 있다. 상기 비경구 투여를 위한 제재로는 주사제, 점적제, 연고, 로션, 스프레이, 현탁제, 유제, 좌제 (坐劑) 등을 들 수가 있다. Examples of the preparation for oral administration include tablets, pills, granules, soft and hard capsules, powders, fine granules, powders, emulsions, syrups, pellets, and the like. Can be mentioned. Examples of preparations for parenteral administration include injections, drops, ointments, lotions, sprays, suspensions, emulsions, suppositories, and the like.
본 발명의 신규한 PTP1B 저해용 지방산 에스테르 화합물을 유효성분으로 제제화하기 위해서는 상법에 따라 실시하면 용이하게 제제화할 수 있으며, 계면활성제, 부형제, 착색료, 향신료, 보존료, 안정제, 완충제, 현탁제, 기타 상용하는 보조제 등을 적당히 사용할 수 있다.In order to formulate the novel PTP1B inhibitory fatty acid ester compound of the present invention as an active ingredient, it can be easily formulated according to the conventional method, and can be formulated with surfactants, excipients, coloring agents, spices, preservatives, stabilizers, buffers, suspensions, and other commercially available compounds. Adjuvant etc. can be used suitably.
본 발명에 따른 상기 약학 조성물은 경구, 비경구, 직장, 국소, 경피, 정맥 내, 근육 내, 복강 내, 피하 등으로 투여될 수 있다. The pharmaceutical composition according to the present invention may be administered orally, parenteral, rectal, topical, transdermal, intravenous, intramuscular, intraperitoneal, subcutaneous.
또한, 상기 활성성분의 투여량은 치료 받을 대상의 연령, 성별, 체중과, 치료할 특정 질환 또는 병리 상태, 질환 또는 병리 상태의 심각도, 투여경로 및 처방자의 판단에 따라 달라질 것이다. 이러한 인자에 기초한 투여량 결정은 당업자의 수준 내에 있으며, 일반적으로 투여량은 0.001mg/kg/일 내지 대략 2000mg/kg/일의 범위이다. 더 바람직한 투여량은 0.5mg/kg/일 내지 2.5mg/kg/일이다. In addition, the dosage of the active ingredient will vary depending on the age, sex and weight of the subject to be treated, the specific disease or pathology to be treated, the severity of the disease or pathology, the route of administration and the judgment of the prescriber. Dosage determination based on these factors is within the level of those skilled in the art, and generally the dosage ranges from 0.001 mg / kg / day to approximately 2000 mg / kg / day. More preferred dosages are from 0.5 mg / kg / day to 2.5 mg / kg / day.
이하, 실시예를 들어 본 발명을 보다 상세히 설명하지만, 본 발명의 권리범위가 이들 예로만 한정되는 것은 아니다. Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples, but the scope of the present invention is not limited only to these examples.
실시예Example 1 : 신규 지방산 에스테르 화합물의 분리 및 정제 1: Isolation and Purification of New Fatty Acid Ester Compounds
희첨의 건조된 전초 500g를 잘게 부순 후 에탄올에 2일간 침지하여 실온에서 추출하였다. 상기 에탄올 추출물을 감압농축한 후, 남은 잔여물과 함께 헥산 용매를 사용하여 분획하였다. 헥산 분획물 (24.2g)을 감압농축하여 헥산/톨루엔/메탄올 (3/2/1)을 전개용매로 하여 세파덱스 엘에이치-20 칼럼 크로마토그래피 (Sephadex LH-20 column chromatography)를 수행하여 여러 개의 분획으로 나누었다. 이후, PTP1B 저해활성을 검색하여 CHCl3:MeOH를 전개용매로 하여 실리카겔 칼럼 크로마토그래피를 실시하였다. 위에서 얻은 활성분획을 농축 (328.3 mg)한 후 90~100% 아세토나이트릴를 용매로 하여 ODS 겔 칼럼 크로마토그래피를 수행하여 신규 PTP1B 및 FAS 저해 화합물 1 (67.9 mg), 화합물 2 (26.3 mg), 화합물 3 (12.3 mg), 화합물 4 (11.0 mg), 화합물 5 (3.8 mg), 및 화합물 6 (4.0 mg)을 분리하였다. 500 g of dried dried starches were crushed finely and then immersed in ethanol for 2 days and extracted at room temperature. The ethanol extract was concentrated under reduced pressure, and then fractionated using the hexane solvent with the remaining residue. Hexane fraction (24.2 g) was concentrated under reduced pressure, and Sepadex LH-20 column chromatography was performed using hexane / toluene / methanol (3/2/1) as a developing solvent. Divided. Thereafter, PTP1B inhibitory activity was detected and silica gel column chromatography was performed using CHCl 3 : MeOH as a developing solvent. The active fractions obtained above were concentrated (328.3 mg) and subjected to ODS gel column chromatography using 90-100% acetonitrile as a solvent to prepare novel PTP1B and FAS inhibitory compound 1 (67.9 mg), compound 2 (26.3 mg), and compound. 3 (12.3 mg), Compound 4 (11.0 mg), Compound 5 (3.8 mg), and Compound 6 (4.0 mg) were isolated.
실시예Example 2 : 신규 화합물 6종의 물리화학적 특성 및 화학구조 분석 2: Physical and chemical properties and chemical structure analysis of 6 new compounds
상기 실시예 1에서 희첨으로부터 분리한 화합물 중 우선 화합물 1의 화학적 구조를 ESI 질량분석기 (Electrospray Ionization mass spectrometer)을 사용하여 얻은 분자량 및 핵자기 공명 분석의 13C-NMR 분석 결과를 토대로 하기와 같이 분자식을 결정하였으며, 분자식이 결정된 화합물의 구조는 추가적인 핵자기공명(NMR) 분석을 통하여 1H-NMR, 13C-NMR, 호모-코지 (HOMO-COSY), HMQC (1H-Detected heteronuclear Multiple-Quantum Coherence), HMBC (Heteronuclear Multiple-Bond Coherence), DEPT (Distortionless Enhancement by Polarization) 스펙트럼을 얻고 분자구조를 결정하였다. 한편, 화합물 2~6은 분자구조가 화합물 1과 유사한 구조를 지니고 있음을 NMR 분석 결과를 토대로 예상할 수 있었으며, 이를 기초로 하여 화합물 1의 분자구조 결정 방법과 유사하게 질량 분석 및 핵자기 공명 분석 결과를 토대로 구조를 결정하였다.In Example 1, the chemical structure of Compound 1, which was separated from the rare species, was based on 13 C-NMR analysis of molecular weight and nuclear magnetic resonance analysis obtained using an ESI mass spectrometer (Electrospray Ionization mass spectrometer) as follows. The molecular formula was determined, and the structure of the compound whose molecular formula was determined was analyzed by additional nuclear magnetic resonance (NMR) analysis, 1 H-NMR, 13 C-NMR, Homo-Cozy (HOMO-COSY) and HMQC (1H-Detected heteronuclear Multiple-Quantum). Coherence), HMBC (Heteronuclear Multiple-Bond Coherence), and DEPT (Distortionless Enhancement by Polarization) spectra were obtained and the molecular structure was determined. On the other hand, compounds 2 to 6 can be expected based on the results of NMR analysis that the molecular structure has a similar structure to compound 1 , based on the mass spectrometry and nuclear magnetic resonance analysis similar to the method of determining the molecular structure of compound 1 The structure was determined based on the results.
각 화합물의 질량분석 및 핵자기공명 측정 결과는 하기 표 1~4와 같으며, 상기 희첨 추출물로부터 분리한 물질은 하기 화학식을 갖는 신규한 화합물로 동정하였다. 본 발명에 따른 신규 PTP1B 저해 지방산 에스테르 화합물 6종의 물리화학적 특성은 다음과 같다. 이들 NMR 데이타의 해석과 상기의 물리화학적 특성을 근거로 신규 PTP1B 저해 화합물 지방산 에스테르 1 ~ 6의 화학구조를 규명하였다. 한편, 화합물 1의 1H-NMR 및 13C-NMR 스펙트럼은 하기 도 1~2에 나타내었다. Mass spectrometry and nuclear magnetic resonance measurement results of each compound are shown in Tables 1 to 4 below, and the material separated from the rare extract was identified as a novel compound having the following formula. The physicochemical characteristics of the six novel PTP1B inhibitory fatty acid ester compounds according to the present invention are as follows. Based on the analysis and the physical and chemical properties of these NMR data it was identified the chemical structure of novel compound inhibiting PTP1B fatty acid esters 1-6. Meanwhile, 1 H-NMR and 13 C-NMR spectra of Compound 1 are shown in FIGS. 1 and 2 below.
실시예Example 3 : 신규 화합물 지방산 에스테르 화합물 1 - 6의 단백질 3: Protein of Novel Compound Fatty Acid Ester Compound 1-6 타이로신Tyrosine 탈인산Dephosphoric acid 효소 1B 저해활성 측정 Determination of enzyme 1B inhibitory activity
단백질 타이로신 탈인산 효소 1B는 BIOMOL에서 제조한 제품을 구입하여 실험에 사용하였다. 분광학적으로 효소 활성을 측정하기 위하여 0.5 ㎍/ml 농도의 단백질 타이로신 탈인산 효소 1B, 단백질 타이로신 탈인산 효소 1B buffer (50 mM citrate, pH 6.0, 0.1M NaCl, 1 mM EDTA, 1mM DTT), 저해제, 20 mM pNPP를 첨가하고 가볍게 흔들어 준 뒤 1시간동안 30℃에서 반응시킨 후 410 nm에서 흡광도를 측정하였다. 효소 저해율은 하기 수학식 1로 계산하였으며, IC50 값은 효소 활성의 저해율이 50 %에 달하는 저해제의 농도로 결정하였다. 그 결과를 하기 표 5에 나타내었다. Protein tyrosine dephosphorase 1B was purchased from BIOMOL was used in the experiment. Protein Tyrosine Dephosphatase 1B, Protein Tyrosine Dephosphatase 1B buffer (50 mM citrate, pH 6.0, 0.1 M NaCl, 1 mM EDTA, 1 mM DTT), inhibitor, to spectroscopically measure enzyme activity , 20 mM pNPP was added and gently shaken and reacted at 30 ° C. for 1 hour, and then absorbance was measured at 410 nm. Enzyme inhibition rate was calculated by the following equation (1), IC 50 value was determined by the concentration of the inhibitor to the inhibition rate of the enzyme activity 50%. The results are shown in Table 5 below.
A : 효소를 넣은 것의 반응 후 흡광도A: absorbance after the reaction of the enzyme
B : 저해제를 넣은 것의 반응 후 흡광도B: Absorbance after the reaction with the inhibitor
C : 저해제와 효소를 넣지 않은 것의 반응 후 흡광도C: absorbance after reaction between inhibitor and enzyme
상기 표 5의 결과로부터 얻어진 지방산 에스테르 화합물 1 ~ 6의 단백질 타이로신 탈인산 효소 1B의 활성을 50％ 저해하는 농도 (IC50)를 측정한 결과 1.1 ± 0.1 μM에서 2.6 ± 0.2 μM으로 나타남을 확인하였다. 또한, 단백질 탈인산 효소의 선택성을 측정하기 위하여 LAR, TC-PTP, YOP, VHR, PPase1 등의 다른 포스파타아제 (phosphatase)를 측정한 결과 신규 지방산 에스테르 화합물 1 ~ 6은 PTP1B에 대하여 상대적으로 활성이 적었으며, 이는 이 화합물들의 다른 포스파타아제 (phosphatase)에 비하여 선택성을 갖고 있음을 보여주는 것이다. Protein tyrosine de-activation of the phosphatase 1B of Table 51-6 fatty acid ester compound obtained from the results of confirmed that appears in the results 1.1 ± 0.1 μM of measuring the concentration (IC 50) that inhibits by 50% to 2.6 ± 0.2 μM . In addition, in order to measure the selectivity of the protein dephosphorase, other phosphatases such as LAR, TC-PTP, YOP, VHR, and PPase1 were measured. As a result, the novel fatty acid ester compounds 1 to 6 were relatively active against PTP1B. This is low, indicating that the compounds have selectivity over other phosphatase.
이상에서 설명한 바와 같이, 본 발명의 희첨 (Siegesbeckia spp .) 유래의 단백질 타이로신 탈인산효소 1B (protein tyrosine phosphatase 1B, PTP1B) 저해용 신규 지방산 에스테르 화합물은 인슐린의 세포막 수용체에서의 작용을 늘려주어 인슐린 저항성 (insulin resistance)을 개선하는 작용과 연관이 있는 PTP1B를 저해하는 작용을 통하여 비만 및 당뇨의 예방과 치료효과를 기대할 수 있을 뿐만 아니라, 한약제로 사용되어 왔던 천연의 희첨으로부터 추출 분리, 정제하여 세포 독성이 적으므로 의약품, 화장품, 식품 등에 유효성분으로 함유할 수 있어 산업상 매우 유용하다. As described above, the present invention ( Siegesbeckia) spp . New fatty acid ester compounds for inhibiting protein tyrosine phosphatase 1B (PTP1B) derived from Not only can it be expected to prevent and treat obesity and diabetes through its inhibitory action, but also extract, isolate, and purify from the natural rare extracts that have been used as herbal medicines, and thus have less cytotoxicity. It is very useful industrially.
Claims (6)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020060071983A KR100726281B1 (en) | 2006-07-31 | 2006-07-31 | Novel compounds and the composition for treatment of obesity and diabetes containing the same |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020060071983A KR100726281B1 (en) | 2006-07-31 | 2006-07-31 | Novel compounds and the composition for treatment of obesity and diabetes containing the same |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR100726281B1 true KR100726281B1 (en) | 2007-06-11 |
Family
ID=38358769
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020060071983A KR100726281B1 (en) | 2006-07-31 | 2006-07-31 | Novel compounds and the composition for treatment of obesity and diabetes containing the same |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR100726281B1 (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20200122865A (en) | 2019-04-19 | 2020-10-28 | 울산대학교 산학협력단 | Antibody for inducing brown adipocyte differentiation and composition for preventing or treating metabolic syndromes containing the same |
| KR20240038198A (en) | 2022-09-15 | 2024-03-25 | 한남대학교 산학협력단 | Antibody for inducing insulin-secreting beta-cell differentiation and composition for preventing or treating metabolic syndromes containing the same |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5245061A (en) | 1991-12-16 | 1993-09-14 | Merck & Co., Inc. | Inhibitors of farnesyl protein transferase |
| US5420157A (en) | 1991-12-16 | 1995-05-30 | Merck & Co., Inc. | Inhibitors of farnesyl protein transferase or prodrugs thereof |
| KR20010080749A (en) * | 1998-12-10 | 2001-08-22 | 추후제출 | REVERSIBLE AQUEOUS pH SENSITIVE LIPIDIZING REAGENTS, COMPOSITIONS AND METHODS OF USE |
| EP1344769A1 (en) | 2002-03-13 | 2003-09-17 | BP Corporation North America Inc. | Polyol ester derivatives of polyamines and their use as dispersants for lubricating oils |
-
2006
- 2006-07-31 KR KR1020060071983A patent/KR100726281B1/en active IP Right Grant
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5245061A (en) | 1991-12-16 | 1993-09-14 | Merck & Co., Inc. | Inhibitors of farnesyl protein transferase |
| US5420157A (en) | 1991-12-16 | 1995-05-30 | Merck & Co., Inc. | Inhibitors of farnesyl protein transferase or prodrugs thereof |
| KR20010080749A (en) * | 1998-12-10 | 2001-08-22 | 추후제출 | REVERSIBLE AQUEOUS pH SENSITIVE LIPIDIZING REAGENTS, COMPOSITIONS AND METHODS OF USE |
| EP1344769A1 (en) | 2002-03-13 | 2003-09-17 | BP Corporation North America Inc. | Polyol ester derivatives of polyamines and their use as dispersants for lubricating oils |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20200122865A (en) | 2019-04-19 | 2020-10-28 | 울산대학교 산학협력단 | Antibody for inducing brown adipocyte differentiation and composition for preventing or treating metabolic syndromes containing the same |
| KR20240038198A (en) | 2022-09-15 | 2024-03-25 | 한남대학교 산학협력단 | Antibody for inducing insulin-secreting beta-cell differentiation and composition for preventing or treating metabolic syndromes containing the same |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Gao et al. | Inhibitory effect on α-glucosidase by the fruits of Terminalia chebula Retz. | |
| Lam et al. | α-Glucosidase inhibitors from the seeds of Syagrus romanzoffiana | |
| Hu et al. | Bioactive constituents from Vitex negundo var. heterophylla and their antioxidant and α-glucosidase inhibitory activities | |
| EP2664361B1 (en) | Extract of fraxinus excelsior seeds and therapeutic applications therefor | |
| KR20150021465A (en) | Composition for treating rheumatoid arthritis comprising monoacetyldiacylglycerol compound and method for treating rheumatoid arthritis using the same | |
| KR20120005037A (en) | Compounds affecting glycemic index | |
| KR101509554B1 (en) | Pharmaceutical composition for prevention and/or treatment of bone disease, functional food or health food comprising the composition, and pharmaceutical preparation comprising the composition as actⅳe ingredient | |
| KR100926798B1 (en) | Antioxidant composition containing hispidin derivatives from the culture broth of fungi Phellinus and Inonotus spp. | |
| Xu et al. | Anti-inflammatory iridoid glycosides from Paederia scandens (Lour.) Merrill | |
| KR100726281B1 (en) | Novel compounds and the composition for treatment of obesity and diabetes containing the same | |
| KR20140100117A (en) | Compositions comprising the extract of Alnus japonica or the compounds derived therefrom for inhibiting adipogenesis | |
| Kempegowda et al. | Inhibitory potency of Withania somnifera extracts against DPP-4: an in vitro evaluation | |
| KR100619498B1 (en) | Pharmaceutical composition for liver protection and for treating liver disease | |
| KR101278273B1 (en) | A composition comprising triterpenoids isolated rhododendron brachycarpum for treating or preventing metabolic diseases | |
| KR101779391B1 (en) | A composition comprising compounds isolated from Agrimonia pilosa Ledeb. for preventing or treating metabolic disorder | |
| KR20100101848A (en) | Composition comprising extract, fraction or compound from glycyrrhiza glabra fisch having diacyl coa:glycerol acyltransferase inhibitory activity | |
| KR100963643B1 (en) | Liver toxicity disorder composition comprising an extract from the seed of opuntia ficus-indica var. saboten and compounds isolated therefrom | |
| KR20090091615A (en) | Tetracera scandens extracts and 4h-chromen-4-one derivatives isolated therefrom increasing glucose uptake in differentiated l6 muscle cells | |
| KR100361090B1 (en) | A novel prenylated flavonoid-type compound showing antiinflammatory activity purified from Broussonetia papyrifera and extracts containing the said compound as a major component, a method for preparing them and pharmaceutical compositions containing them | |
| KR101449575B1 (en) | Composition comprising tenuifoliside A for preventing or treating inflammatory diseases | |
| JP6982192B2 (en) | Fragment of Japanese pepper leaf extract effective for analgesia | |
| JP2000086653A (en) | Disaccharide hydrolase inhibitor | |
| KR20000026053A (en) | Lignan compound isolated from magnolia flower or extract of magnolia flower having inhibition activity for generation of leukotrienes | |
| KR101136361B1 (en) | Novel bioactive substance extracted from Anegelica gigas Nakai, method of extracting the same, and pharmaceutical composition containing the same | |
| KR101841541B1 (en) | Pharmaceutical composition comprising Astragali radix derivatives and Lithospermi radix derivatives for preventing or treating arthritis |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A201 | Request for examination | ||
| E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
| GRNT | Written decision to grant | ||
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20130531 Year of fee payment: 7 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20140529 Year of fee payment: 8 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20150520 Year of fee payment: 9 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20160530 Year of fee payment: 10 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20170329 Year of fee payment: 11 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20190325 Year of fee payment: 13 |