KR100704299B1 - 신규한 퀴놀린계 화합물, 및 지네 추출물 또는 이로부터 분리된 화합물을 포함하는 심장순환계 질환의 예방 및 치료용 조성물 - Google Patents

신규한 퀴놀린계 화합물, 및 지네 추출물 또는 이로부터 분리된 화합물을 포함하는 심장순환계 질환의 예방 및 치료용 조성물 Download PDF

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정태숙
오현우
이우송
박두상
윤미애
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Abstract

본 발명은 신규한 퀴놀린계 화합물, 및 지네 추출물 또는 이로부터 분리된 화합물을 포함하는 심장순환계 질환의 예방 및 치료용 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 신규한 퀴놀린계 화합물, 지네 추출물 또는 이로부터 분리된 퀴놀린 화합물과 페놀계 화합물은 저밀도 지질단백질에 대한 항산화 활성이 우수하고, 아실 코에이:콜레스테롤 전이효소(ACAT)의 활성을 효과적으로 억제하기 때문에, 저밀도 지질단백질의 산화 또는 콜레스테릴 에스테르의 합성 및 축적에 의해 유발되는 고지혈증, 동맥경화, 관상동맥 심장병 및 심근경색 등과 같은 심장순환계 질환의 예방 및 치료용 조성물에 유용하게 사용될 수 있다.

Description

신규한 퀴놀린계 화합물, 및 지네 추출물 또는 이로부터 분리된 화합물을 포함하는 심장순환계 질환의 예방 및 치료용 조성물 {NOVEL QUINOLINE COMPOUND, AND COMPOSITION CONTAINING CENTIPEDE EXTRACT OR COMPOUNDS ISOLATED THEREFROM FOR PREVENTION AND TREATMENT OF CARDIOVASCULAR DISEASE}
본 발명은 신규한 퀴놀린계 화합물, 및 지네 추출물 또는 이로부터 분리된 화합물을 포함하는 심장순환계 질환의 예방 및 치료용 조성물에 관한 것이다.
최근 성인병 증가와 더불어 동맥경화 등의 혈관장애 질환이 크게 증가하고 있다. 대표적인 혈관장애 질환으로서 동맥경화는 지질대사와 관련된 유전적 요인과 식습관, 흡연, 운동부족 등의 환경적 요인에 의하여 동맥이 경화되는 질환으로, 뇌동맥 또는 관상동맥에서 일어나기 쉬우며, 이로 인하여 심장질환, 뇌혈관 질환 등의 순환계 질환으로 발전하게 된다. 뇌동맥경화의 경우에는 두통, 현기증, 정신장애 등을 나타내고 뇌연화증의 원인이 되며, 관상동맥경화의 경우에는 심장부에 동통과 부정맥을 일으켜 협심증, 심근경색 등의 원인이 되는 것으로 알려져 있다. 또한 이로 인해 고혈압, 심장병, 뇌일혈 등이 유발되어, 동맥경화로 인한 질병이 현대 사회에 있어, 특히 50∼60대의 남성들에게 가장 큰 사망요인으로 부각되고 있다.
상기 동맥경화의 초기 발생에 관한 가설은 혈관벽의 손상에 대한 만성 염증과정으로, '손상에 대한 반응(responce-to-injury hypothesis)'으로 제시되고 있다[Circ. Res. 2001, 89, 298-304]. 이는 유전적 변이, 과산화물, 고혈압, 당뇨, 혈장 호모시스테인 농도 증가 또는/및 미생물 감염 등의 원인에 의하여 혈관 내피세포가 정상적인 항상성을 유지하지 못하는 기능부전 상태가 되는 것이다.
보다 상세하게, 상기의 원인들로 인하여 혈중 저밀도 지단백질(low-density lipoprotein; LDL)이 산화, 당결합, 집적화, 당단백 결합 등을 거쳐 변형-LDL(highly modified-LDL; HM-LDL)로 변화하게 되고, 이들은 혈관 내피세포 및 평활근을 자극하고 손상을 유발한다. 이로 인하여, 내피세포의 혈관세포부착물질-1(vascular cell adhesion molecule-1; VCAM-1)의 발현 및 염증세포의 염증매개인자 방출이 촉진되면 LDL은 내피세포 아래에 유입 및 축적되고, 축적된 LDL 및 산화된 HM-LDL은 다시 대식세포, T 임파구 등의 면역세포의 유입 및 활성화를 유발하는 과정을 되풀이하여 병변의 염증반응을 촉진시키게 된다. 그 다음, 유입된 대식세포나 임파구로부터 방출된 가수분해효소, 염증매개인자, 성장인자 등의 작용으로 병반은 괴사하게 되고, 괴사된 병소 부위로 단핵구의 유입, 평활근의 이동 및 분화, 섬유성 조직의 형성 등의 반복적인 과정이 이루어진다. 상기 과정을 통해 병 변 조직은 HM-LDL을 핵으로 한 괴사조직에 섬유질이 덮인 복잡한 구조의 섬유질 병변으로 발달하게 되며, 발달된 병변 조직으로부터 혈전이 생성되고 동맥이 경화되어 혈류장애 등 순환기 질환이 나타나게 되는 것이다.
LDL 산화는 죽상경화증(atherosclerosis)을 포함하는 동맥경화를 유발하는 초기 요인으로 가장 중시되고 있다[Circulation, 1995, 91, 2488-2496; Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol., 1997, 17, 3338-3346]. 생체 내외에서 생성되는 산화적 스트레스(oxidative stress)는 혈액 내의 LDL을 산화된-LDL(oxidized-LDL)로 변형시키게 되고, 이것이 부착분자(adhesion molecule)를 통해 맥관내막(intima) 내로 유입된다. 유입된 산화된-LDL을 단핵구(monocyte)가 탐식하여 거품세포(foam cell)를 형성하면서 동맥경화 초기 병변인 지방선조(fatty streak)를 생성하게 된다. 동맥경화 초기 병변의 특징은 동맥 내피세포에서 생성되는 부착분자인 VCAM-1, ICAM-1(intracellular adhesion molecule-1) 및 MCP-1(monocyte chemoattractant protein-1)이 발현된다는 것인데, 이들은 전사인자(transcription factor)인 NF-κB(nuclear factor-κB)에 의해 유도된다. 또한, NF-κB로 인하여 혈관벽 내에 플라그(plaque)의 형성 및 파열이 일어난다. NF-κB는 활성 산소종이나 사이토카인(cytokine) 등과 같은 다양한 요인에 의해 활성화되며, p50과 p65로 구성된 이형 이합체(hetero dimer)로서 많은 세포의 타겟 유전자(target gene)를 조절하는데 포함되는 전사인자이다. 활성화된 NF-κB는 IL-1, VCAM-1, ICAM-1 및 죽상동맥경화(atherosclerosis)의 진행에 관여하는 다른 인자들과 같이 특이적인 프로모터 유전자(promoter gene)에 결합하여 다양한 염증인자의 발현을 조절한다.
항산화제 및 유리기 소거제는 이러한 NF-κB의 활성을 저해하는 것으로 밝혀지고 있으므로 항산화제를 적절히 섭취할 경우, 생체 내(in vivo)에서 LDL의 산화를 저해하고 부착분자의 발현을 억제하며 NF-κB의 활성을 감소시켜 동맥경화를 억제할 것으로 기대되며, 이에 대한 연구들이 진행되고 있다(대한민국 공개특허 제2003-0014155호). 또한, 고지혈증이나 동맥경화 환자에 있어서 LDL 퍼옥사이드의 생성요인과 제거에 관한 연구[Curr. Atheroscler. Res., 2000, 2, 363-372]도 활발히 진행되고 있다.
또한, 혈중 콜레스테롤 농도가 높으면 관상동맥성 심혈관 질환이 유발되기 쉬우므로, 혈중 콜레스테롤 농도를 줄이기 위해서는 콜레스테롤 및 지방의 섭취를 줄이는 식이요법을 시행하거나 지질대사와 관련된 효소를 저해함으로써 콜레스테롤의 흡수를 억제해야 한다. 이에, 콜레스테롤을 에스테르화 하는 효소인 아실 코에이 : 콜레스테롤 전이효소(acyl-CoA: cholesterol acyltransferase; ACAT)에 관한 연구가 많이 행해지고 있다.
ACAT의 작용 기작은 크게 체내의 장, 간 및 혈관벽 세포의 세 부위에서 일어난다.
첫째, 장에서 ACAT는 섭취된 콜레스테롤을 에스테르의 형태로 바꾸어 장내로 흡수되는 것을 촉진시킨다. 둘째, 외부로부터 흡수되거나 체내에서 생합성된 콜레스테롤은 간에서 VLDL(very low-density lipoprotein)이라는 운반체 안에 축적된 후 혈관을 통해 신체 각 기관으로 공급되는데, 이때 ACAT에 의하여 콜레스테롤이 콜레스테릴 에스테르 형태로 전환됨으로써 운반체 내에 콜레스테롤 축적이 가능하게 된다. 셋째, 동맥혈관벽을 이루는 세포 내에서 ACAT는 콜레스테롤을 그의 에스테르 형태로 전환시켜 세포 내에 콜레스테롤이 축적되는 것을 촉진시키는데, 이는 동맥경화를 일으키는 직접적인 원인이 된다. 또한, ACAT 활성에 의해 거품세포가 콜레스테롤로부터 유도된 다량의 콜레스테릴 에스테르를 포함하기 때문에, 실험적, 임상적인 측면에서 대식세포와 평활근세포로부터 유도된 거품세포의 형성은 매우 중요하다. 혈관벽 내의 거품세포의 증식은 ACAT 활성 증가와 직접적으로 연관되어 있기 때문에 강력한 항동맥경화제로서 ACAT 저해제의 개발은 바람직하다.
따라서, ACAT의 활성을 억제하는 약물은 첫째, 장내 콜레스테롤의 흡수를 억제하여 체내로 유입되는 콜레스테롤의 양을 감소시킬 수 있을 것이며, 둘째, 간에서 혈관 내로 콜레스테롤이 방출되는 것을 억제하여 혈중 콜레스테롤 농도를 떨어뜨릴 수 있고, 셋째, 혈관벽 세포에 콜레스테롤이 축적되는 것을 방지하여 직접적으로 동맥경화를 예방할 수 있을 것으로 기대된다.
지금까지 보고된 ACAT 활성 저해제는 쥐간 마이크로좀 ACAT 또는 쥐간 대식세포(J774) ACAT에 대한 활성 저해제이다. 사람의 ACAT에는 hACAT-1(50 kDa) 및 hACAT-2(46 kDa)가 있는데, hACAT-1은 성인의 간, 부신, 대식세포, 신장에서 주로 작용하며, hACAT-2는 소장에서 작용한다[Rudel, L. L. 등, Curr. Opin. Lipidol. 12, 121-127, 2001]. 사람 ACAT 활성을 저해하는 물질은 음식으로부터 유입되는 콜레스테롤의 흡수를 억제하고, 혈관 내벽에 콜레스테릴 에스테르의 축적을 억제하는 기작을 통해 고콜레스테롤증, 콜레스테롤 결석 또는 동맥경화 예방 및 치료제의 표적이 되고 있다[Buhman, K. K. 등, Nature Med. 6, 1341-1347, 2000].
현재 고지혈증 치료제로 사용되고 있는 프로부콜(Probucol), N,N'-디페닐렌디아민(N,N'-Diphenylenediamine), 페놀계 합성 항산화제인 BHA(Butylatedhydroxyanisol)와 BHT(Butylated hydroxy toluene)는 LDL 콜레스테롤을 감소시키고, 산화 정도를 약화시키며, 병변형성을 감소시켜 항산화력은 우수하나, 부작용이 많아 사용이 제한되고 있다.
따라서, 이러한 질병을 예방하려는 목적으로 종전부터 콜레스테롤 흡수의 억제와 생합성의 저해를 통한 혈장 저밀도 지질 단백질(Low-density lipoprotein; LDL)량을 감소시키려는 시도가 진행되어 왔다[Principles in Biochemistry, lipid biosynthesis, 770-817, 제3판, 2000 Worth Publishers, New York; Steinberg, N. Engl. J. Med., 1989, 320, 915-924]. 또한, 고지혈증이나 동맥경화 환자에 있어서 LDL 항산화제와 함께 지질강하제의 병행투여 요법에 대한 관심도가 높아지고 있다.
한편, 지네는 약용동물로서 이를 이용한 종래기술로는 대한민국 등록특허 제 124438호에서 왕지네로부터 혈전용해효소를 분리·정제하는 방법을 공개하고 있으며, 지네에서 분리, 보고된 성분으로는 3,8-다이하이드록시퀴놀린(3,8-dihydroxyquinoline) [Moon 등, J. Nat. Prod. 59: 777-779, 1996], 2-하이드록시-7-[(4-하이드록시-3-메톡시페닐)메틸]-3-메톡시-8-퀴놀릴 설페이트(2-hydroxy-7-[(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)methyl]-3-methoxy-8-quinolyl sulfate) [Noda 등, Chem. Pharm. Bull. 49(7): 930-931, 2001], 8-하이드록시-1H-2-벤조피란-1-온(8-hydroxy-1H-2-benzopyran-1-one) [Kim 등, J. Korean Chem. Soc. 42: 236-239, 1998]의 화합물이 있다. 그러나, 지네의 항산화 효과 또는 지네가 콜레스테롤 대사에 미치는 영향에 관한 연구 결과뿐 아니라 지네를 심장순환계 질환에 사용한 공개된 기술이 존재하지 않는다.
삭제
이에, 본 발명자들은 부작용이 적은 새로운 고지혈증, 동맥경화, 관상동맥 심장병 및 심근경색 등과 같은 심장순환계 질환의 예방 및 치료제를 천연물에서 탐색하던 중, 약용동물인 지네의 추출물, 이로부터 분리한 퀴놀린계 및 페놀계 화합물에서 저밀도 지질 단백질에 대한 항산화 활성 및 ACAT 활성 억제 효과가 우수함을 확인하고, 고지혈증, 관상동맥 심장병, 동맥경화 및 심근경색과 같은 심장순환계 질환의 예방 및 치료에 사용될 수 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
본 발명은 신규한 퀴놀린계 화합물을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 신규한 퀴놀린계 화합물의 제조 방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 지네 추출물, 또는 이로부터 분리한 퀴놀린계 또는 페놀계 화합물을 포함하는 심장순환계 질환의 예방 및 치료용 조성물을 제공한다.
이하, 본 발명에 관하여 상세히 설명한다.
삭제
본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 신규한 퀴놀린계 화합물을 제공한다.
Figure 112005066214334-pat00001
상기 화학식 1로 표시되는 퀴놀린계 화합물은 3,4-다이메톡시-퀴놀린-2,8-다이올 (3,4-dimethoxy-quinoline-2,8-diol)이며, 약학적으로 허용되는 염의 형태로 사용될 수 있고, 통상의 방법에 의해 제조되는 모든 염, 수화물 및 용매화물을 포함한다.
또한, 본 발명은
(a) 건조된 지네를 용매로 추출하여 추출물을 제조하는 단계;
(b) 상기에서 얻은 추출물에 물을 가하여 현탁시키고, n-헥산, 클로로포름 및 에틸아세테이트로 순차 분획하여 클로로포름 가용 추출물을 얻는 단계; 및
(c) 상기에서 얻은 클로로포름 가용 추출물을 크로마토그래피로 분리, 정제하여 퀴놀린계 화합물을 얻는 단계
를 포함하는 상기 화학식 1의 퀴놀린계 화합물의 제조 방법을 제공한다.
단계 (a)에서는 건조된 지네를 용매로 추출하여 추출물을 제조한다.
지네(Scolopendra subepinipes)는 지네과 절지동물인 가시가 적은 큰지네의 건조체를 말하며, 다른 이름으로 오공, 천룡, 백족충이라고 부른다. 등은 녹색이고 복부는 황색이며 머리와 다리가 붉은색이고, 큰 것은 수컷이고 노랗고 가는 것은 암컷이다. 형태는 납작하고 가늘고 길며, 길이는 14 ~ 16 ㎝, 너비는 약 0.6 ~ 1 ㎝이다. 냄새는 특이한 비린내가 나며, 맛은 쓰고 약간 짜다. 한방에서는 한약재로 사용하고 있다. 4 ~ 6월이나 8월에 왕지네, 청지네를 채집하여 대나무 등에 메어 말리거나 끓는 물에 머리를 넣었다가 햇볕에 말린다. 머리와 다리를 떼어내고 몸통을 썰어서 사용하는데, 대표적인 사용법 기록은 오공산(蜈蚣散)·만금고(萬 金膏)·오공성풍산(蜈蚣星風散)이 있다. 민간에서는 소아경풍·늑막염과 뱀에게 물렸을 때 이용한다. 《향약집성방》에 기재된 약성과 약효에 의하면 미신온(味辛溫)·유독(有毒)하며, 귀주충독·담제사충어독·삼충(三蟲;회충·적충·요충)을 없애고 온학·정신착란·오한을 다스린다고 한다.
본 발명에서 지네는 상업적으로 판매하는 것을 구입하거나, 직접 채취하여 사용할 수 있다.
건조된 지네에 용매, 바람직하게는 물, C1 ~ C6 알콜, C5 ~ C7 알칸, 클로로포름, 에틸아세테이트, 아세톤, 에테르, 벤젠, 메틸렌클로라이드(methylene chloride), 사이클로헥산(cyclohexane), 석유에테르(petroleum ether) 또는 이들의 혼합 용매, 보다 바람직하게는 물, C1 ~ C6 알콜, n-헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트, 아세톤 또는 이들의 혼합 용매, 가장 바람직하게는 에탄올 또는 아세톤을 첨가하여 추출한다.
추출용매는 지네 건조 중량의 1 ~ 20 배로 하는 것이 바람직하다. 추출방법은 통상적으로 행하는 모든 추출방법이 가능하며, 바람직하게는, 40 ~ 120 ℃에서 끊이는 열수추출하거나, 에탄올 또는 아세톤 등을 추출용매로 사용할 경우, 상온에서 1일 ~ 5일 동안 방치하여 추출할 수 있다. 상기의 방법으로 얻어진 추출물은 여과지 등을 이용한 여과, 정제, 농축 등의 단계를 더 거쳐 지네 추출물로서 사용될 수 있다.
다음으로, 단계 (b)에서는 상기 단계 (a)에서 얻은 지네 추출물, 바람직하게는 에탄올추출물을 물에 현탁시키고, 이를 n-헥산, 클로로포름 및 에틸아세테이트 순으로 분획하여 얻은 각 용매 가용 추출물 중 클로로포름 가용 추출물 수득한다. 이때, 통상의 분별 추출 방법을 이용할 수 있으며, 바람직하게는 분별 깔데기를 이용할 수 있다.
다음으로, 단계 (c)에서는 상기 단계 (b)에서 얻은 클로로포름 가용 추출물을 크로마토그래피로 분리, 정제하여 상기 화학식 1의 신규한 퀴놀린계 화합물을 얻는다.
크로마토그래피는 이동상으로 물, 클로로포름, C1 ~ C4 알콜 또는 이들의 혼합 용매를 사용할 수 있으며, 통상의 방법으로 수행할 수 있다. 보다 바람직하게 상기 C1 ~ C4 알콜은 메탄올이다. 크로마토그래피는 단일 화합물이 정제될 때까지 1회 ~ 수회에 걸쳐 수행할 수 있으며, 필요에 따라 농축, 재결정을 실시할 수 있다.
보다 상세하게, 지네 에탄올추출물의 클로로포름 가용 추출물에 대해 클로로포름, 메탄올 또는 이들의 혼합 용매를 이용하여 크로마토그래피하여 11개 분획을 얻을 수 있다. 이 가운데 6 번째 분획(F6)에 대해 이동상으로 클로로포름 및 메탄올의 혼합 용매를 이용하여 크로마토그래피를 수행하며, 바람직하게 상기 혼합 용매는 클로로포름 및 메탄올이 20 : 1 부피비로 혼합된 혼합 용매이다. 이를 통해 얻은 분획 가운데 2 번째 분획(F6-2)에 대해 이동상으로 메탄올 및 물의 혼합 용매를 이용하여 크로마토그래피를 수행하여 상기 화학식 1의 퀴놀린계 화합물을 얻을 수 있다. 바람직하게 상기 혼합 용매는 메탄올 및 물이 55 : 45 부피비로 혼합된 혼합 용매이다.
상기의 방법으로 제조한 화학식 1의 퀴놀린계 화합물은 저밀도 지질 단백질(LDL)에 대해 항산화 효과가 뛰어나며, 콜레스테롤을 에스테르화 하는 효소인 아실 코에이 : 콜레스테롤 전이효소(acyl-CoA: cholesterol acyltransferase; ACAT)의 활성을 억제하는 효과가 뛰어나기 때문에, LDL의 산화 또는 콜레스테릴 에스테르의 합성 및 축적으로 유발되는 것으로 알려진 고지혈증, 관상동맥 심장병, 동맥경화 및 심근경색 등과 같은 심장순환계 질환의 예방 및 치료용 조성물에 유용하게 사용할 수 있다.
또한, 본 발명은 지네 추출물을 포함하는 심장순환계 질환의 예방 및 치료용 조성물을 제공한다.
바람직하게는, 상기 지네 추출물은 지네를 물, C1 ~ C6 알콜, C5 ~ C7 알칸, 클로로포름, 에틸아세테이트, 아세톤, 에테르, 벤젠, 메틸렌클로라이드(methylene chloride), 사이클로헥산(cyclohexane), 석유에테르(petroleum ether) 또는 이들의 혼합 용매, 보다 바람직하게는 물, C1 ~ C6 알콜, n-헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트, 아세톤 또는 이들의 혼합 용매, 가장 바람직하게는 에탄올 또는 아세톤으로 추출한 추출물일 수 있다. 이때, 추출용매는 지네 건조 중량의 1 ~ 20 배로 하는 것이 바람직하다. 추출방법은 통상적으로 행하는 모든 추출방법이 가능하며, 바람직하게는 40 ~ 120 ℃에서 2 ~ 24시간 동안 끓이는 열수추출하거나, 에탄올 또는 아세톤 등을 추출용매로 사용할 경우, 상온에서 1일 ~ 5일 동안 방치하여 추출할 수 있다. 상기의 방법으로 얻어진 추출액은 여과지 등을 이용한 여과, 정제, 농축 등의 단계를 더 거쳐 지네 추출물로서 사용될 수 있다.
보다 바람직하게는, 상기 지네 추출물은 지네 추출물을 크로마토그래피로 분획한 분획물이다. 이때, 크로마토그래피는 이동상으로 물, 클로로포름, C1 ~ C4 알콜 또는 이들의 혼합 용매를 사용할 수 있으며, 통상의 방법으로 수행할 수 있다. 이때 보다 바람직하게 C1 ~ C4 알콜은 메탄올이며, 혼합 용매는 클로로포름 및 메탄올의 혼합 용매, 메탄올 및 물의 혼합 용매를 사용할 수 있다.
상기 지네 추출물은 LDL에 대해 항산화 효과가 뛰어나며, 콜레스테롤을 에스테르화 하는 효소인 ACAT의 활성을 억제하는 효과가 뛰어나기 때문에, LDL의 산화 또는 콜레스테릴 에스테르의 합성 및 축적으로 유발되는 것으로 알려진 고지혈증, 관상동맥 심장병, 동맥경화 및 심근경색 등과 같은 심장순환계 질환의 예방 및 치료용 조성물에 유용하게 사용될 수 있다.
또한, 본 발명은 하기 화학식 2로 표시되는 퀴놀린계 화합물 또는 화학식 3으로 표시되는 페놀계 화합물을 포함하는 심장순환계 질환의 예방 및 치료용 조성 물을 제공한다.
상기 퀴놀린계 화합물 및 페놀계 화합물은 상업적으로 판매되는 것을 구입하거나 당업계에 알려진 제조 방법, 본 발명의 제조 방법 또는 이들의 변형된 제조 방법으로 제조하여 사용할 수 있으며, 바람직하게 이들은 지네로부터 추출·분리하여 사용할 수 있다.
Figure 112005066214334-pat00002
(상기 화학식에서, R1, R2 및 R3는 각각 독립적으로 H, OH 또는 C1 ~ C4 알콕시임)
Figure 112005066214334-pat00003
상기 화학식 3으로 표시되는 퀴놀린계 화합물은 2,4-다이-테트-부틸페놀 (2,4-di-tert-butyl-phenol)이다.
보다 바람직하게, 상기 화학식 2의 화합물은
3,8-다이하이드록시퀴놀린 또는
3,4-다이메톡시퀴놀린-2,8-다이올이다.
각각의 화학식은 하기 표 1에 나타내 바와 같다.
화합물 화학식
1
Figure 112005066214334-pat00004
2
Figure 112005066214334-pat00005
상기 화학식 2의 퀴놀린계 화합물 및 화학식 3의 페놀계 화합물은 LDL에 대해 항산화 효과가 뛰어나며, 콜레스테롤을 에스테르화 하는 효소인 ACAT의 활성을 억제하는 효과가 뛰어나다. 따라서, LDL의 산화 또는 콜레스테릴 에스테르의 합성 및 축적으로 유발되는 것으로 알려진 고지혈증, 관상동맥 심장병, 동맥경화 및 심근경색 등과 같은 심장순환계 질환의 예방 및 치료용 조성물에 유용하게 사용될 수 있다.
본 발명의 조성물은 상기 신규한 퀴놀린계 화합물, 지네 추출물, 그로부터 분리한 퀴놀린계 또는 페놀계 화합물에 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다.
본 발명의 조성물은, 투여를 위해서 상기 기재한 유효성분 이외에 추가로 약제학적으로 허용 가능한 담체를 1종 이상 포함하여 제조할 수 있다. 약제학적으로 허용 가능한 담체는 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 덱스트로스 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 1 성분 이상을 혼합하여 사용할 수 있으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다. 또한, 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제를 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주사용 제형, 환약, 캡슐, 과립 또는 정제로 제제화할 수 있다. 더 나아가 당분야의 적정한 방법으로 또는 Remington's Pharmaceutical Science(Mack Publishing Company, Easton PA, 18th, 1990)에 개시되어 있는 방법을 이용하여 각 질환에 따라 또는 성분에 따라 바람직하게 제제화할 수 있다.
본 발명의 조성물은 목적하는 방법에 따라 비경구 투여(예를 들어 정맥 내, 피하, 복강 내 또는 국소에 적용)하거나 경구 투여할 수 있으며, 투여량은 환자의 체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설율 및 질환의 중증도 등에 따라 그 범위가 다양하다. 본 발명에 따른 일일 투여량은 지네 추출물일 경우 10 ~ 2,000 ㎎/㎏ 이며, 바람직하게는 50 ~ 500 ㎎/㎏이다. 또한, 퀴놀린계 또는 페놀계 화합물일 경우 약 0.01 ~ 100 ㎎/㎏이고, 바람직하게는 0.05 ~ 10 ㎎/㎏이며, 하루 일회 내지 수회에 나누어 투여하는 것이 더욱 바람직하다.
본 발명의 신규한 퀴놀린계 화합물, 지네 추출물, 그로부터 분리한 퀴놀린계 또는 페놀계 화합물을 마우스에 경구 투여하여 독성 실험을 수행한 결과, 경구 투여 독성시험에 의한 50% 치사량(LD50)은 적어도 1,000 ㎎/㎏ 이상인 안전한 물질로 판단된다.
본 발명의 조성물은 심장순환계 질환의 예방 및 치료를 위하여 단독으로, 또는 수술, 호르몬 치료, 약물 치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.
본 발명의 조성물은 심장순환계 질환의 개선을 목적으로 건강식품에 첨가될 수 있다. 본 발명의 신규한 퀴놀린계 화합물, 지네 추출물, 그로부터 분리한 퀴놀린계 또는 페놀계 화합물을 식품 첨가물로 사용할 경우, 상기 추출물 또는 화합물들을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에는 본 발명의 신규한 퀴놀린계 화합물, 지네 추출물, 그로부터 분리한 퀴놀린계 또는 페놀계 화합물은 원료에 대하여 0.01 ~ 10 중량부, 바람직하게는 0.05 ~ 1 중량부의 양으로 첨가된다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.
본 발명의 건강음료 조성물은 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ㎖당 일반적으로 약 0.01 ~ 0.04 g, 바람직하게는 약 0.02 ~ 0.03 g 이다.
상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0.01 ~ 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예 및 실험예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예 및 실험예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 실시예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.
실시예 1: 본 발명에 따른 지네 추출물 및 퀴놀린계 화합물과 페놀계 화합물의 제조
1-1: 지네 추출물의 제조
건조된 지네(대전, 대한민국) 250 g에 각각 700 ㎖의 아세톤(CH3COCH3) 또는 에탄올을 첨가하여 실온에서 3일 동안 방치시켜 추출한 후, 여과지를 이용하여 여과하여 추출액 및 고상 잔류물을 얻었다. 수득된 추출액을 감압농축하여 지네 아세톤추출물인 유성물질 85 g과 지네 에탄올추출물인 유성물질 40 g을 얻었다.
상기 지네의 아세톤추출물 및 에탄올추출물에 대해 하기 실험예 1 및 2의 방법에 따라 실험한 결과, 두 추출물 모두 저밀도 지질 단백질에 대한 항산화 활성이 우수하고, ACAT 활성 억제 효과가 뛰어났으며, 좀더 효과가 좋은 에탄올추출물을 이하 실시예에서 사용하였다.
1-2: 지네 추출물로부터 비극성 용매 가용 추출물의 제조
상기 실시예 1-1에서 제조한 지네의 에탄올추출물에 물 700 ㎖을 가하여 현탁시키고, n-헥산(n-hexane), 클로로포름(CHCl3) 및 에틸아세테이트(EtOAc) 순으로 분획하여, n-헥산 가용 추출물(n-hexane-soluble) 26 g, 클로로포름 가용 추출물(CHCl3-soluble) 0.7 g 및 에틸아세테이트 가용 추출물(EtOAc-soluble) 1.5 g을 각각 수득하였다.
상기 각 가용 추출물에 대해 실험예 1 및 2와 같은 방법으로 실험한 결과, 에틸아세테이트 가용 추출물 및 클로로포름 가용 추출물에서 항산화 활성 및 ACAT 활성 억제 효과가 우수함을 확인하고, 하기 실시예 1-3 또는 1-4에서 사용하였다.
1-3: 지네 추출물의 에틸아세테이트 가용 추출물로부터 화합물의 분리
상기 실시예 1-2에서 수득한 에틸아세테이트 가용 추출물 1.5 g을 컬럼 크로마토그래피를 사용하여 분리하였다.
첫 번째로 실리카겔에 에틸아세테이트 가용 추출물의 갈색 고체 물질을 흡착시킨 후, 이동상으로 클로로포름 및 메탄올(100:0 ~ 0:100 부피비)의 혼합 용매를 이용하여 극성을 높여 가면서 실리카겔 크로마토그래피 (φ55 × 250 ㎜)를 수행하여 25개 (F1 ~ F10)의 분획을 얻었다. 25개 각 분획에 대해 실험예 1 및 2와 같은 방법으로 항산화 효과 및 ACAT 활성 억제를 측정한 결과, 분획 2(F2)의 효과가 가장 우수하게 나타나 이를 하기 분리 과정에 사용하였다.
항산화 활성이 우수한 분획 2 (F2, 400 ㎎)에 대해 이동상으로 클로로포름 및 메탄올(99:1~ 1:9 부피비)의 혼합 용매를 이용하여 극성을 높여 가면서 2차 실리카겔 크로마토그래피 (φ23 × 140 ㎜)를 수행하여 16개 (F2-1 ~ F2-16)의 분획을 얻었다. 16개 각 분획에 대해 실험예 1 및 2와 같은 방법으로 항산화 효과 및 ACAT 활성 억제를 측정한 결과, 여덟 번째 분획(F2-8)의 효과가 가장 우수하게 나타나 이를 하기 분리 과정에 사용하였다.
분획 2의 여덟 번째 분획 (F2-8, 189 mg)에 대해 이동상으로 메탄올 및 물이 4 : 1 부피비로 혼합된 혼합 용매를 이용하여 C18 컬럼 크로마토그래피 (φ13 × 115 ㎜)를 수행하여 14개의 분획을 얻었다. 이 중 항산화 활성 및 ACAT 활성 억제 효과가 우수한 2 ~ 6 번째 분획(F-2-8-2 ~ F-2-8-6) 중 3 ~ 5 번째 분획 (F-2-8-3 ~ F-2-8-5)을 합하여, 메탄올과 물이 7.5 : 3.5 부피비로 혼합된 혼합 용매를 이동상으로 C18 컬럼 크로마토그래피하여 항산화 활성 및 ACAT 활성 억제 효과가 좋은 3 및 4 번째 분획 (54 mg)을 얻었다. 이 분획을 다시 메탄올과 물이 7 : 3 부피비로 혼합된 혼합 용매를 이동상으로 하여 C-18 (ODS) 제조용 TLC (Prep-TLC)를 수행하여 항산화 활성이 뛰어난 화합물 1 (39.2 mg)을 수득하였다.
1-4: 지네 추출물의 클로로포름 가용 추출물로부터 화합물의 분리
상기 실시예 1-2에서 수득한 지네 추출물의 클로로포름 가용 추출물 0.7 g에 대해 컬럼 크로마토그래피를 수행하여 본 발명의 화합물을 분리하였다.
실리카겔에 갈색 고체 물질의 클로로포름 가용 추출물을 흡착시킨 후, 클로로포름 및 메탄올(100:0 ~ 1:9 부피비)의 혼합 용매를 이용하여 극성을 높여 가면서 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 (φ52 × 270 mm)를 실행하여 11개 (F1 ~ F11)의 분획을 얻었다. 11개 각 분획에 대해 실험예 1 및 2와 같은 방법으로 항산화 효과 및 ACAT 활성 억제 효과를 측정한 결과, 효과가 우수하게 나타나는 분획은 첫 번째 분획(F1) 및 여섯 번째 분획(F6)을 얻었다.
분획 F1 (14 ㎎)에 대해 이동상으로 메탄올과 물이 100 : 1 부피비로 혼합된 혼합 용매를 이용한 C-18 제조용 TLC (ODS Prep-TLC)로 활성을 나타내는 첫 번째 분획 (F1-1, 3 ㎎)으로부터 화합물 3을 얻었다.
또한, 분획 F6 (40 ㎎)에 대해 이동상으로 클로로포름과 메탄올이 20 : 1 부피비로 혼합된 혼합 용매를 이용한 실리카 제조용 TLC (Prep-TLC)로 활성을 나타내는 두 번째 분획(F6-2)을 분리한 후, 다시 이동상으로 메탄올과 물이 55 : 45 부피비로 혼합된 혼합 용매를 이용한 C18 제조용 HPLC로 여섯 번째 분획 (F6-2-6, 6 ㎎)인 화합물 2를 얻었다.
1-5: 본 발명의 화합물의 구조 분석
상기 실시예 1-3 및 실시예 1-4에서 얻은 세 화합물들의 구조 분석을 위하여, 하기와 같은 분석을 실시하였다.
분자량 및 분자식은 VG 고분해능 GC/MS 분광기 (VG high resolution GC/MS spectrometer, Election Ionization MS, Autospec-Ultima, Micromass, UK)를 사용하여 결정하였으며, 선광도는 편광기(DIP-181 digital polarimeter, Jasco, Japan)를 사용하여 측정하였다. 또한, 핵자기 공명(NMR) 분석(AMX 500, Bruker, Germany)을 통하여 1H NMR, 13C NMR, 호모-코지(HOMO-COSY), NOE (Nuclear Overhauser Exchange), HMQC (1H-Detected heteronuclear Multiple-Quantum Coherence), HMBC (Heteronuclear Multiple-Bond Coherence), DEPT (Distortionless Enhancement by Polarization) 스펙트럼을 얻고, 분자구조를 결정하였다.
이상의 기기분석 결과를 발표된 문헌 [Moon 등, 59: 777-779, 1996; Pouchert, C.J., 1985. The aldrichlibrary of FT-IR spectra vapor phase Edition 1. Vol. 1, 1088B; Pouchert, C.J., Behnke, J., 1993. The aldrich library of 13C and 1H NMR spectra edition 1. Vol. 2, 267]의 것과 비교 분석한 결과, 본 발명의 화합물 1은 3,8-다이하이드록시퀴놀린 (3,8-dihydroxyquinoline)임을 확인하였고, 화합물 2는 3,4-다이메톡시퀴놀린-2,8-다이올 (3,4-dimethoxyquinoline-2,8-diol)인 신규한 화합물로 동정되었다. 또한, 화합물 3은 2,4-다이-테트-부틸페놀 (2,4-di-tert-butylphenol)로 확인되었다.
[화합물 1] 3,8- 다이하이드록시퀴놀린
1) 물성: 노란색 고체
2) 분자량: 161
3) 분자식: C9H7NO2
4) 1H NMR (CD3OD, 500 MHz) δ8.45 (1H, d, J = 2.42, H-2), 7.44 (1H, d, J = 2.38, H-4), 7.29 (1H, t, J = 7.84, H-6), 7.14 (1H, d, J = 8.13, H-5), 6.86 (1H, d, J = 7.43, H-7).
6) 13C NMR (CD3OD, 125 MHz) δ 154.2 (C-8), 153.0 (C-3), 142.3 (C-2), 134.9 (C-8a), 131.9 (C-4a), 129.0 (C-6), 117.9 (C-5), 117.2 (C-4), 109.0 (C-7).
7) EI-MS (70 ev); m/z (%): 161(100) [M]+, 133(90), 104(63), 91(10).
[화합물 2] 3,4- 다이메톡시퀴놀린 -2,8- 다이올
1) 물성: 노란색 고체
2) 분자량: 221
3) 분자식: C11H11NO4
4) 1H NMR (CD3OD, 500 MHz) δ7.33 (1H, d, J = 8.16, H-5), 7.05 (1H, d, J = 8.00, H-6), 6.93 (1H, t, J = 7.78, H-7), 4.22 (3H), 3.88 (3H).
6) 13C NMR (CD3OD, 125 MHz): δ 163.0 (C-2), 155.6 (C-8), 145.2 (C-4), 136.5 (C-8a), 125.6 (C-6), 123.9 (C-3), 119.6 (C-4a), 114.7 (C-5), 114.5 (C-7), 61.4 (-OCH3), 61.2 (-OCH3).
7) EI-MS (70 ev); m/z (%): 221(82) [M]+, 206(100), 192(17), 178(32), 161(23).
[화합물 3] 2,4- 다이 - 테트 - 부틸페놀
1) 물성: 노란색 고체
2) 분자량: 206
3) 분자식: C14H22O
4) 1H NMR (CD3OD, 500 MHz) δ 7.28 (1H, d, J = 2.1, H-3), 7.05 (1H, dd, J = 8.2, 2.2, H-5), 6.57 (1H, d, J = 8.2, H-6), 4.58 (1H, s, -OH), 1.40 (9H, s, H-2',3',4'), 1.28 (9H, s, H-2",3",4")
6) 13C NMR (CD3OD, 125 MHz): 153.5 (C-1), 143.7 (C-4), 135.9 (C-2), 124.8 (C-3), 124.2 (C-5), 116.6 (C-6), 35.4 (C-1"), 35.0 (C-1'), 32.3 (C-2"), 32.3 (C-3"), 32.3 (C-4"), 30.4 (C-2'), 30.4 (C-3'), 30.4 (C-4').
7) EIMS (rel. int.) m/z: EI-MS (70 ev) m/z: 206(16) [M]+, 191(100), 149(5), 119(8), 83(8), 69(34), 57(30).
실험예 1: TBARS ( Thiobarbituric Acid Reactive Substances)법을 이용한 본 발명의 화합물의 항산화 활성 측정
본 발명의 지네 추출물, 그로부터 분리한 퀴놀린계 화합물 및 페놀계 화합물의 저밀도 지질단백질에 대한 항산화 활성을 측정하기 위하여, 하기와 같은 실험을 수행하였다.
항산화 활성은 저밀도 지질단백질의 산화를 유도(Cu2 +-mediated LDL-oxidation)하는 것으로 알려져 있는 Cu2 +로 생성된 불포화 지방산의 산화산물인 디알데히드(dialdehyde)를 TBA(thiobarbituric acid)법으로 측정하였다[Packer, L. Ed., Methods in Enzymology. Vol. 234, Oxygen radicals in biological systems Part D. Academic press, San Diego, 1994].
사람으로부터 혈장 300 ㎖를 채취하여, 초원심분리기로 100,000 × g에서 24 시간 동안 원심분리하여 상층에 부유된 고밀도 지질단백질(VLDL)/킬로마이크론(chylomicron)층을 제거하였다. 다음으로 나머지 용액의 비중을 1.063 g/㎖로 맞춘 후, 100,000 × g에서 24 시간 동안 원심분리하였고, 다시 상층에 부유된 저밀도 지질단백질 25 ㎖(1.5 ~ 2.5 ㎎ 단백질/㎖)을 분리하였다. 상기에서 분리한 저밀도 지질단백질 20 ㎕(단백질 농도, 50～100 ㎍/㎖)을 10 mM 인산완충용액(phosphate-buffered saline, PBS) 210 ㎕와 혼합하고, 상기 실시예에서 제조한 각 용매추출물, 각 분획 및 화합물들의 용액을 각각 10 ㎕씩 첨가하였다. 이때, 화합물들은 DMSO(dimethylsulfoxide)에 녹여 사용하였으며, 실험에 사용하기 전에 여러 농도로 희석하였다. 음성 대조군으로는 용매인 DMSO 만을 첨가한 것을 사용하였으며, 양성 대조군으로는 항산화제로 알려져 있는 프로부콜(Probucol)을 첨가한 것을 사용하였다. 상기 용액에 0.25 mM CuSO4 10 ㎕를 첨가하여 37 ℃에서 4시간 동안 반응시키고, 20% 트리클로로아세트산(trichloroacetic acid, TCA) 용액 1 ㎖를 첨가하여 반응을 중지시켰다. 다음으로, 0.05N NaOH 용액에 녹인 0.67% TBA 용액 1 ㎖를 첨가하고 10 초간 교반시킨 후, 95 ℃에서 5분 동안 가열하여 발색 반응을 일으키고, 얼음물로 용액을 냉각하였다. 이후, 용액을 3000 rpm에서 5분 동안 원심분리하여 상등액을 분리하였으며, 자외선-가시광선 분광기로 540 ㎚에서의 흡광도를 측정하여 상기 발색 반응으로 생성된 말론디알데히드(malondialdehyde, MDA)의 양을 측정하였다.
한편, 말론디알데히드의 표준곡선을 구하기 위하여, 말론알데히드 비스(디메틸아세탈)[malonaldehyde bis(dimethylacetal)]의 저장용액을 희석하여 0 ~ 10 nmol 말론디알데히드를 포함하는 PBS 표준용액을 250 ㎕씩 만들어 상기와 같은 방법으로 발색시키고 540 ㎚에서의 흡광도를 측정하여, 말론디알데히드의 표준곡선을 구하였다. 상기 표준곡선을 이용하여 본 발명의 화합물들로부터 생성된 말론디알데히드의 양을 정량하고, 저해도 또는 IC50을 계산하였다.
결과는 표 2에 나타내었다.
시 료 저해도(%) 또는 IC50 (μM)
지네 아세톤추출물 (40 ㎍/㎖) 73% 저해
지네 에탄올추출물 (40 ㎍/㎖) 80% 저해
n-헥산 가용 추출물 (20 ㎍/㎖) 35% 저해
클로로포름 가용 추출물 (20 ㎍/㎖) 85% 저해
에틸아세테이트 가용 추출물 (20 ㎍/㎖) 98% 저해
화합물 1 2.6 μM
화합물 2 63 μM
화합물 3 8.2 μM
양성대조군 (Probucol) 3.1 μM
표 1에 나타난 바와 같이, 상기 실시예 1-1에서 얻은 지네 아세톤추출물은 40 ㎍/㎖에서 73%의 항산화 효과를 나타내는 반면, 지네 에탄올추출물은 같은 농도에서 80%의 항산화 효과를 나타내어, 두 추출물의 항산화 효과가 좋음을 확인하였다.
또한, 상기 실시예 1-2에서 얻은 각 용매의 가용 추출물 가운데 에틸아세테이트 용매추출물이 20 ㎍/㎖ 농도에서 저밀도 지질 단백질에 대해 98%의 항산화 효과를 나타내어 n-헥산, 클로로포름 가용 추출물에 비해 가장 우수한 항산화 활성이 있음을 확인하였다.
또한, 실시예 1-3에서 얻은 화합물 1인 3,8-다이하이드록시퀴놀린, 화합물 2인 3,4-다이메톡시퀴놀린-2,8-다이올 및 화합물 3인 2,4-다이-테트-부틸페놀의 항산화 활성은 IC50이 각각 2.6 μM, 63 μM 및 8.2 μM로, 화합물 1은 양성 대조군의 IC50보다 낮게 나타나 저밀도 지질 단백질에 대한 항산화 활성이 우수함을 확인하였고, 화합물 2는 양성대조군보다 IC50는 높으나 항산화 활성이 있는 것을 확인하였다. 또한, 화합물 3은 양성대조군보다 IC50는 높으나 항산화 활성이 우수함을 확인하였다.
따라서, 본 발명의 지네 추출물, 이로부터 분리된 퀴놀린계 및 페놀계 화합물은 저밀도 지질 단백질의 산화에 의해 유발되는 고지혈증 또는 동맥경화와 같은 심장순환계 질환의 예방 및 치료용 조성물에 유용하게 사용될 수 있음을 확인되었다.
실험예 2: 본 발명에 따른 추출물 및 화합물들의 ACAT 활성에 미치는 영향 측정
본 발명에 따른 지네 추출물, 그로부터 분리한 퀴놀린계 및 페놀계 화합물의 ACAT 활성에 미치는 영향을 알아보기 위하여, 하기와 같은 실험을 수행하였다.
2-1: ACAT 효소원의 제조
사람 ACAT-1 및 ACAT-2의 활성에 미치는 영향을 알아보기 위하여, 베큘로바이러스 발현체제를 이용하여 hACAT-1 및 hACAT-2 각각의 단백질을 얻었다.
사람 간 cDNA 라이브러리 스크리닝(library screening)을 통하여 얻어진 hACAT-1 및 hACAT-2 각각의 cDNA를 베큘로바이러스 전달 벡터에 삽입하고, 곤충세포인 sf9 세포에 도입하여 바이러스를 제조하였다. 다음으로, 플라크 정제(plaque purification) 방법으로 hACAT-1 및 hACAT-2 각각의 재조합 바이러스를 분리한 후, 3 차례의 증폭과정을 거쳐 저장용 바이러스(viral stock)의 역가(titer)를 높였다. 단백질 발현 효율이 좋은 Hi5 곤충세포에 재조합 바이러스를 감염다중도(Mutiplicity of Infection)가 1이 되도록 감염시킨 후, 27 ℃에서 하루 동안 진탕배양하였다. 배양된 hACAT-1과 hACAT-2가 각각 과량 발현된 Hi5 세포들로부터 마이크로좀 분획을 분리하기 위하여, 500 ×g에서 15분간 원심분리하여 세포들을 모으고 저장완충액(hypotonic buffer)에서 급냉동·급해동 방법으로 세포를 깬 후, 100,000 ×g에서 한 시간 동안 초원심분리하였다. 얻어진 마이크로좀 분획들은 단백질 농도가 8 ㎎/㎖이 되도록 저장완충액으로 현탁하여 사용 전까지 저온냉동기에 보관하였다.
2-2: ACAT 활성 측정
ACAT 활성의 측정은 [1-14C] 올레오일-코에이(oleoyl-CoA)(56.0 μCi/μmol; Amersham)를 기질로 하여 브레쳐 & 찬(Brecher & Chan)의 방법[P. Brecher and C. Chan, Biochim . Biophys . Acta , 617, 458, 1980]을 일부 수정하여 사용하였다.
상기 실시예에서 제조한 지네 추출물 또는 화합물 10 ㎕, 상기 실험예 2-1에서 제조한 마이크로좀 용액 4.0 ㎕, 활성분석 완충액(0.5 M KH2PO4, 10 mM DTT, pH 7.4; Sigma) 20.0 ㎕, 지방이 제거된 우혈청알부민(BSA; bovine serum albumin, 저장액 농도 40 ㎎/㎖; Sigma) 15.0 ㎕, 콜레스테롤(저장액 농도 20 ㎎/㎖; Sigma) 2.0 ㎕, 증류수 41.0 ㎕를 가하여 37 ℃에서 15 분간 예비 반응시켰다. 이 반응액에 [1-14C] 올레오일-코에이(0.05 μCi, 최종농도: 10 μM) 8 ㎕를 첨가하여 다시 37 ℃에서 30 분간 반응시킨 후, 이소프로판올 : 헵탄 혼합물(4 : 1 (v/v)) 1 ㎖을 가하여 반응을 정지시켰다. 여기에 600 ㎕의 헵탄과 200 ㎕의 0.1 M KH2PO4(pH 7.4)을 첨가하고, 혼합물을 볼텍서(vortexer)로 격렬하게 혼합한 후, 300 × g에서 5 분 동안 원심분리를 하였다. 원심분리하여 얻은 100 ㎕의 상층액을 신틸레이션 병(scintillation bottle)에 넣고, 신틸레이션 액(Lipoluma) 4 ㎖을 가하였다. 이 혼합물의 방사선량은 1450 마이크로베타 액체 신틸레이션 계수기(1450 Microbeta liquid scintillation counter, Wallacoy)로 측정하였다.
ACAT 활성은 측정된 방사선량으로부터 시간당 방사선량을 계산하여 1 분 동안 단백질 1 ㎎당 합성된 콜레스테릴 올레이트 피코몰(피코몰/분/㎎ 단백질)로 계산하였다.
결과는 표 3에 나타내었다.
시 료 저해도(%)
hACAT-1 hACAT-2
지네 아세톤추출물 (40 ㎍/㎖) 53 50
지네 에탄올추출물 (40 ㎍/㎖) 61 55
n-헥산 가용 추출물 (20 ㎍/㎖) 28 16
클로로포름 가용 추출물 (20 ㎍/㎖) 80 73
에틸아세테이트 가용 추출물 (20 ㎍/㎖) 72 69
화합물 1 60 50
화합물 2 79 58
화합물 3 63 51
표 3에 나타난 바와 같이, 본 발명에 의한 지네 추출물, 그로부터 분리한 퀴놀린계 및 페놀계 화합물은 hACAT-1 및 hACAT-2에 대한 저해 활성이 우수함을 알 수 있었다.
따라서, 본 발명에 의한 지네 추출물, 그로부터 분리한 퀴놀린계 및 페놀계 화합물들은 콜레스테릴 에스테르의 합성 및 축적으로 유발되는 고지혈증, 관상동맥 심장병, 동맥경화 및 심근경색증 등과 같은 심장순환계 질환의 예방 또는 치료용 조성물에 유용하게 사용할 수 있음을 확인하였다.
실험예 3: 본 발명에 따른 지네 추출물 및 화합물들의 급성 독성실험
본 발명의 지네 추출물, 그로부터 분리한 퀴놀린계 화합물 및 페놀계 화합물들에 대한 급성 독성을 알아보기 위하여, 하기와 같은 실험을 수행하였다.
4주령의 특정 병원체 부재(SPF, specific pathogens free) ICR계 마우스를 암수 각각 3 마리씩 4개군(암수 각각 3마리/실험군)으로 나누어, 온도 22± 3℃, 습도 55 ± 10%, 조명 12L/12D 조건의 동물실 내에서 사육하였다. 마우스는 실험에 사용되기 전 1주일 정도 순화시켰다. 실험 동물용 사료(마우스 및 랫트용, (주)제일제당, 서울, 대한민국) 및 음수를 멸균한 후 공급하였으며 자유 섭취시켰다.
상기 실시예에서 제조한 지네 추출물, 그로부터 분리한 퀴놀린계 화합물 및 페놀계 화합물들을 0.5% 트윈(tween) 80에 50 ㎎/㎖ 농도로 조제한 후, 마우스 체중 20 g 당 0.04 ㎖(100 ㎎/㎏), 0.2 ㎖(500 ㎎/㎏) 및 0.4 ㎖(1,000 ㎎/㎏)씩 경구 투여하였다. 시료는 단회 경구 투여하였으며, 투여 후 7일 동안 다음과 같이 부작용 또는 치사 여부를 관찰하였다. 즉, 투여 당일은 투여 후 1 시간, 4 시간, 8 시간, 12 시간 뒤에, 그리고 투여 익일부터 7 일째까지는 매일 오전, 오후 1 회 이상씩 일반 증상의 변화 및 사망 동물의 유무를 관찰하였다. 또한, 투여 7 일째에 동물을 치사시켜 해부한 후 육안으로 내부 장기를 검사하였다. 투여 당일부터 1일 간격으로 체중의 변화를 측정하여 지네 추출물, 그로부터 분리한 퀴놀린계 화합물 또는 페놀계 화합물들에 의한 동물의 체중 감소 현상을 관찰하였다.
실험 결과, 시료를 투여한 모든 마우스에서 특기할 만한 임상증상이 나타나지 않았고 폐사된 마우스도 없었으며, 또한 체중변화, 혈액검사, 혈액생화학 검사, 부검소견 등에서도 독성변화는 관찰되지 않았다.
따라서, 본 발명에 따른 지네 추출물, 퀴놀린계 화합물 및 페놀계 화합물들은 모든 마우스에서 1,000 ㎎/㎏까지 독성변화를 나타내지 않았으며, 경구투여 최소치사량(LD50)이 1,000 ㎎/㎏ 이상인 안전한 물질로 판단되었다.
하기에 본 발명의 조성물을 위한 제제예를 예시한다.
제제예 1: 약학적 제제의 제조
1-1: 산제의 제조
본 발명에 따른 지네 추출물, 퀴놀린계 화합물 또는 페놀계 화합물 2 g
유당 1 g
상기의 성분을 혼합한 후, 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.
1-2: 정제의 제조
본 발명에 따른 지네 추출물, 퀴놀린계 화합물 또는 페놀계 화합물 100 ㎎
옥수수전분 100 ㎎
유 당 100 ㎎
스테아린산 마그네슘 2 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조 방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.
1-3: 캡슐제의 제조
본 발명에 따른 지네 추출물, 퀴놀린계 화합물 또는 페놀계 화합물 100 ㎎
옥수수전분 100 ㎎
유 당 100 ㎎
스테아린산 마그네슘 2 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 캡슐제의 제조 방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
1-4: 주사액제의 제조
본 발명에 따른 지네 추출물, 퀴놀린계 화합물 또는 페놀계 화합물 10 ㎍/㎖
묽은 염산 BP pH 3.5로 될 때까지
주사용 염화나트륨 BP 최대 1㎖
적당한 용적의 주사용 염화나트륨 BP 중에 본 발명에 따른 지네 추출물, 퀴놀린계 화합물 또는 페놀계 화합물을 용해시키고, 생성된 용액의 pH를 묽은 염산 BP를 사용하여 pH 3.5로 조절하고, 주사용 염화나트륨 BP를 사용하여 용적을 조절하고 충분히 혼합하였다. 용액을 투명 유리로 된 5 ㎖ 타입 I 앰플 중에 충전시키고, 유리를 용해시킴으로써 공기의 상부 격자하에 봉입시키고, 120 ℃에서 15 분 이상 오토클래이브시켜 살균하여 주사액제를 제조하였다.
제제예 2: 식품의 제조
본 발명에 따른 지네 추출물, 퀴놀린계 화합물 또는 페놀계 화합물을 포함하는 식품들을 다음과 같이 제조하였다.
2-1: 밀가루 식품의 제조
본 발명에 따른 지네 추출물, 퀴놀린계 화합물 또는 페놀계 화합물 0.1 ~ 10.0 중량부를 밀가루에 첨가하고, 이 혼합물을 이용하여 통상의 방법으로 빵, 케이크, 쿠키, 크래커 및 면류를 제조하여 건강 증진용 식품을 제조하였다.
2-2: 스프 및 육즙(gravies)의 제조
본 발명에 따른 지네 추출물, 퀴놀린계 화합물 또는 페놀계 화합물 0.1 ~ 1.0 중량부를 스프 및 육즙에 첨가하여 통상의 방법으로 건강 증진용 육가공 제품, 면류의 수프 및 육즙을 제조하였다.
2-3: 그라운드 비프(ground beef)의 제조
본 발명에 따른 지네 추출물, 퀴놀린계 화합물 또는 페놀계 화합물 10 중량부를 그라운드 비프에 첨가하여 통상의 방법으로 건강 증진용 그라운드 비프를 제조하였다.
2-4: 유제품(dairy products)의 제조
본 발명에 따른 지네 추출물, 퀴놀린계 화합물 또는 페놀계 화합물 0.1 ~ 1.0 중량부를 우유에 첨가하고, 상기 우유를 이용하여 통상의 방법으로 버터 및 아이스크림과 같은 다양한 유제품을 제조하였다.
2-5: 선식의 제조
현미, 보리, 찹쌀, 율무를 공지의 방법으로 알파화시켜 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다.
검정콩, 검정깨, 들깨도 공지의 방법으로 쪄서 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다.
본 발명에 따른 지네 추출물, 퀴놀린계 화합물 또는 페놀계 화합물을 진공 농축기에서 감압, 농축하고, 분무, 열풍건조기로 건조하여 얻은 건조물을 분쇄기로 입도 60 메쉬로 분쇄하여 건조분말을 얻었다.
상기에서 제조한 곡물류, 종실류 및 본 발명에 따른 지네 추출물, 퀴놀린계 화합물 또는 페놀계 화합물의 건조분말을 다음의 비율로 배합하여 통상의 방법으로 제조하였다.
곡물류(현미 30 중량부, 율무 15 중량부, 보리 20 중량부),
종실류(들깨 7 중량부, 검정콩 8 중량부, 검정깨 7 중량부),
본 발명에 따른 지네 추출물, 퀴놀린계 화합물 또는 페놀계 화합물의 건조분말(1 중량부),
영지(0.5 중량부),
지황(0.5 중량부)
제제예 3: 음료의 제조
본 발명에 따른 지네 추출물, 퀴놀린계 화합물 또는 페놀계 화합물을 포함하는 음료를 다음과 같이 제조하였다.
3-1: 건강음료의 제조
액상과당(0.5%), 올리고당(2%), 설탕(2%), 식염(0.5%), 물(75%)과 같은 부재료와 본 발명에 따른 지네 추출물, 퀴놀린계 화합물 또는 페놀계 화합물을 균질하게 배합하여 순간 살균을 한 후, 이를 유리병, 패트병 등 소포장 용기에 포장하여 건강음료를 제조하였다.
3-2: 야채쥬스의 제조
본 발명에 따른 지네 추출물, 퀴놀린계 화합물 또는 페놀계 화합물 0.5 g을 토마토 또는 당근 등의 야채의 쥬스 1,000 ㎖에 가하여 통상의 방법으로 건강 증진용 야채쥬스를 제조하였다.
3-3: 과일쥬스의 제조
본 발명에 따른 지네 추출물, 퀴놀린계 화합물 또는 페놀계 화합물 0.1 g을 사과 또는 포도 등의 과일의 쥬스 1,000 ㎖에 가하여 통상의 방법으로 건강 증진용 과일쥬스를 제조하였다.
본 발명의 신규한 퀴놀린계 화합물, 지네 추출물, 그로부터 분리된 퀴놀린계 및 페놀계 화합물들은 LDL에 대한 항산화 활성이 우수할 뿐만 아니라 ACAT의 활성을 효과적으로 억제뿐 아니라 마우스에서 급성독성을 나타내지 않는다.
따라서, 본 발명의 조성물은 LDL이 산화되어 유발되거나 콜레스테릴 에스테르의 합성 및 축적으로 유발되는 고지혈증, 관상동맥 심장병, 동맥경화 및 심근경색증 등과 같은 심장순환계 질환의 예방 및 치료용 조성물에 유용하게 사용될 수 있다.

Claims (13)

  1. 하기 화학식 1로 표시되는 퀴놀린계 화합물:
    [화학식 1]
    Figure 112006090205668-pat00006
  2. 제 1항에 있어서, 상기 화합물은 지네로부터 추출·분리하여 얻은 것임을 특징으로 하는 화합물.
  3. 건조된 지네를 용매로 추출하여 추출물을 제조하는 단계;
    상기에서 얻은 추출물에 물을 가하여 현탁시키고, n-헥산, 클로로포름 및 에틸아세테이트로 순차 분획하여 클로로포름 가용 추출물을 얻는 단계; 및
    상기에서 얻은 클로로포름 가용 추출물을 크로마토그래피로 분리, 정제하여 퀴놀린계 화합물을 얻는 단계를 포함하는 제 1항의 퀴놀린계 화합물의 제조 방법.
  4. 제 3항에 있어서, 상기 추출하는 단계에서 용매가 물, C1 ~ C6 알콜, C5 ~ C7 알칸, 클로로포름, 에틸아세테이트, 아세톤, 에테르, 벤젠, 클로로포름, 메틸렌클로라이드(methylene chloride), 사이클로헥산(cyclohexane), 석유에테르(petroleum ether) 또는 이들의 혼합 용매인 것을 특징으로 하는 제조 방법.
  5. 제 3항에 있어서, 상기 클로로포름 가용 추출물을 크로마토그래피로 분리, 정제하는 단계에서 이동상으로 물, 클로로포름, 메탄올 또는 이들의 혼합 용매를 이용하는 것을 특징으로 하는 제조 방법.
  6. 지네 추출물을 포함하는, 고지혈증, 관상동맥 심장병, 동맥경화 또는 심근경색의 예방 및 치료용 조성물.
  7. 제 6항에 있어서, 상기 지네 추출물은 지네를 물, C1 ~ C6 알콜, C5 ~ C7 알칸, 클로로포름, 에틸아세테이트, 아세톤, 에테르, 벤젠, 메틸렌클로라이드, 사이클로헥산, 석유에테르 또는 이들의 혼합 용매로 추출한 것임을 특징으로 하는 조성물.
  8. 제 7항에 있어서, 상기 지네 추출물은 지네 추출물을 크로마토그래피로 분획한 분획물인 것을 특징으로 하는 조성물.
  9. 제 8항에 있어서, 상기 크로마토그래피 시 이동상으로 물, 클로로포름, 메탄올 또는 이들의 혼합 용매를 사용하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  10. 하기 화학식 2로 표시되는 퀴놀린계 화합물 또는 하기 화학식 3으로 표시되는 페놀계 화합물을 포함하는, 고지혈증, 관상동맥 심장병, 동맥경화 또는 심근경색의 예방 및 치료용 조성물:
    [화학식 2]
    Figure 112006090205668-pat00007
    (상기 화학식에서, R1, R2 및 R3는 각각 독립적으로 H, OH 또는 C1 ~ C4 알콕시임)
    [화학식 3]
    Figure 112006090205668-pat00008
  11. 제 10항에 있어서, 상기 화학식 2의 화합물은
    3,8-다이하이드록시퀴놀린 또는
    3,4-다이메톡시퀴놀린-2,8-다이올인 것을 특징으로 하는 조성물.
  12. 제 10항 또는 제 11항에 있어서, 상기 화합물들은 지네로부터 분리된 것임을 특징으로 하는 조성물.
  13. 삭제
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105004809A (zh) * 2015-07-13 2015-10-28 鲁南制药集团股份有限公司 蜈蚣药材的质量控制方法

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9101160B2 (en) 2005-11-23 2015-08-11 The Coca-Cola Company Condiments with high-potency sweetener
US8017168B2 (en) 2006-11-02 2011-09-13 The Coca-Cola Company High-potency sweetener composition with rubisco protein, rubiscolin, rubiscolin derivatives, ace inhibitory peptides, and combinations thereof, and compositions sweetened therewith
CN104529891B (zh) * 2015-01-21 2017-11-17 天津理工大学 少棘蜈蚣中喹啉类生物碱作为***药品的制备及应用
CN105294561B (zh) * 2015-11-27 2018-03-30 中国药科大学 一种异喹啉及其制备方法和应用
CN110357815B (zh) * 2018-04-09 2022-08-05 鲁南制药集团股份有限公司 蜈蚣喹啉类化合物及其制备方法、用途
CN111471012B (zh) * 2019-01-23 2023-04-25 鲁南制药集团股份有限公司 一种蜈蚣喹啉类化合物、制备方法及其应用

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR19980075448A (ko) * 1997-03-31 1998-11-16 박원훈 3,8-디하이드록시퀴놀린 화합물, 이의 제조방법 및 이를 포함하는 타이로시나제 활성 저해용 조성물

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2164317A1 (en) * 1993-06-03 1994-12-22 Basil Don Roufogalis Use of natural products and related synthetic compounds for the treatment of cardiovascular disease
US5824689A (en) * 1996-05-31 1998-10-20 Samsung General Chemicals Co., Ltd. Quinoline compound extracted from scolopendra subspinipes, and derivatives thereof

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR19980075448A (ko) * 1997-03-31 1998-11-16 박원훈 3,8-디하이드록시퀴놀린 화합물, 이의 제조방법 및 이를 포함하는 타이로시나제 활성 저해용 조성물

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105004809A (zh) * 2015-07-13 2015-10-28 鲁南制药集团股份有限公司 蜈蚣药材的质量控制方法

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