KR100616426B1 - Strip biosensor - Google Patents

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KR100616426B1
KR100616426B1 KR1020050037898A KR20050037898A KR100616426B1 KR 100616426 B1 KR100616426 B1 KR 100616426B1 KR 1020050037898 A KR1020050037898 A KR 1020050037898A KR 20050037898 A KR20050037898 A KR 20050037898A KR 100616426 B1 KR100616426 B1 KR 100616426B1
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substrate
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KR1020050037898A
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배병우
이성동
석홍성
김민선
유재현
이기원
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주식회사 인포피아
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Abstract

본 발명은 스트립 바이오센서에 관한 것으로, 소수성 재질의 기판과; 시료를 모세관 현상에 의해 이동시키는 니트로셀룰로오즈 멤브레인과; 분석물질과 제1효소 기질을 포함한 시료를 주입하는 시료패드와; 상기 니트로셀룰로오즈 멤브레인을 통해 이동된 물질을 흡수하는 흡수패드와; 상기 시료에 의해 용해되어 전개되는 제2효소 기질과 탐지항체-제2효소 결합물질을 포함하는 결합체 패드와; 상기 니트로셀룰로오즈 멤브레인에 모세관 현상에 상관없이 물리적으로 고정되는 제1효소와 포획항체를 포함하는 측정부를 포함하여 구현하여 시료가 전개되면서 두가지 효소에 의해 면역반응과 효소반응이 순차적으로 일어나게 되어, 분석물질의 농도에 따른 발색이 나타나므로, 기질을 따로이 첨가하지 않고도 한번의 시료 전개에 의해 분석물질을 정량분석할 수 있도록 한 것이다.The present invention relates to a strip biosensor, comprising: a substrate made of a hydrophobic material; A nitrocellulose membrane for moving the sample by capillary action; A sample pad for injecting a sample including the analyte and the first enzyme substrate; An absorbent pad absorbing material moved through said nitrocellulose membrane; A binder pad comprising a second enzyme substrate and a detection antibody-second enzyme binding material which are dissolved and developed by the sample; The nitrocellulose membrane is implemented by including a measuring unit including a first enzyme and a capture antibody that are physically fixed regardless of capillary phenomena, and then the immune and enzymatic reactions are sequentially performed by two enzymes as the sample is developed. The color development is shown according to the concentration of, so that it is possible to quantitatively analyze the analyte by one sample development without adding a substrate separately.

스트립 바이오센서, 면역반응, 효소반응, 정량분석. Strip Biosensor, Immune Reaction, Enzyme Reaction, Quantitative Analysis.

Description

스트립 바이오센서{Strip biosensor}Strip biosensor

도 1 은 본 발명에 따른 스트립 바이오센서의 일 실시예에 따른 단면도1 is a cross-sectional view according to an embodiment of a strip biosensor according to the present invention.

도 2 는 본 발명에 따른 스트립 바이오센서의 동작관계를 도시한 도면2 is a view showing the operation of the strip biosensor according to the present invention

도 3 은 본 발명에 따른 스트립 바이오센서의 또 다른 실시예에 따른 사시도3 is a perspective view according to another embodiment of a strip biosensor according to the present invention;

<도면의 주요 부분에 대한 부호의 설명><Explanation of symbols for the main parts of the drawings>

100 : 스트립 바이오센서 110 : 기판100: strip biosensor 110: substrate

120 : 니트로셀룰로오즈 멤브레인 130 : 시료패드120: nitrocellulose membrane 130: sample pad

140 : 흡수패드 150 : 결합체 패드140: absorption pad 150: binder pad

160 : 측정부 170 : 제1커버체160: measuring unit 170: first cover body

171 : 시료투입구 180 : 제2커버체171: sample entrance 180: second cover body

181 : 측정창 200 : 분석물질181: measuring window 200: analyte

300 : 제1효소 기질 400 : 제2효소 기질300: first enzyme substrate 400: second enzyme substrate

500 : 탐지항체-제2효소 결합물질 510 : 탐지항체500: detection antibody-second enzyme binding material 510: detection antibody

520 : 제2효소 600 : 제1효소 반응 생성물520: second enzyme 600: first enzyme reaction product

700 : 라텍스비드-제1효소 결합물질 710, 810 : 라텍스 비드700 latex bead-first enzyme binding agent 710, 810 latex beads

720 : 제1효소 800 : 라텍스비드-포획항체 결합물질720: first enzyme 800: latex bead-captured antibody binding material

820 : 포획항체820: capture antibody

본 발명은 스트립 바이오센서에 관한 것으로, 분석물질을 포함한 시료에 대한 면역반응 및 효소반응에 의하여 발색된 신호를 측정함으로써 분석물질을 정량분석할 수 있는 면역크로마토그래피(Immuno Chromatographic Assay) 기술을 기반으로한 스트립 바이오센서에 관련한 것이다.The present invention relates to a strip biosensor, based on an immunochromatography (Immuno Chromatographic Assay) technology capable of quantitative analysis of analyte by measuring signals developed by an immune reaction and an enzyme reaction on a sample including an analyte. It relates to a strip biosensor.

면역반응과 효소반응을 이용한 면역크로마토그래피(Immuno Chromatographic Assay) 기술을 기반으로한 스트립 바이오센서는 공개특허공보 제2004-93048호(2004. 11. 04)에서 제시한 발명과 같이 다수의 패드를 적층하여 이루어지는 층상 구조를 이루는 것이 통상적이며, 이 층상구조를 이루는 다수의 패드 각각에 어떠한 반응물질을 사용하느냐에 따라 특이성을 가지게 된다.Strip biosensors based on immunochromatographic (Immuno Chromatographic Assay) technology using immune and enzymatic reactions are laminated with a plurality of pads as invented in Korean Patent Laid-Open Publication No. 2004-93048 (2004. 11. 04). It is common to form a layered structure made of a layered structure, which has specificity depending on which reactant is used for each of the plurality of pads forming the layered structure.

본 발명자는 면역반응 및 효소반응에 의하여 발색된 신호를 측정함으로써 분석물질을 정량분석할 수 있는 면역크로마토그래피(Immuno Chromatographic Assay) 기술을 기반으로 하되, 두가지 효소를 이용함으로써 시료가 전개되면서 면역반응과 효소반응이 순차적으로 일어나게되어, 분석물질의 농도에 따른 발색이 나타나므로, 기질을 따로이 첨가하지 않고도 한번의 시료 전개에 의해 분석물질을 정량분석할 수 있으며, 종래의 면역분석에서 요구되는 면역반응하지 않고 남은 물질들을 제거하기 위한 세척과정이 없어 사용이 편리한 스트립 바이오센서에 관한 연구를 하게 되었다.The present inventors are based on immunochromatography (Immuno Chromatographic Assay) technology that can quantitate analytes by measuring signals developed by immune and enzymatic reactions. Enzyme reaction occurs sequentially, color development according to the concentration of the analyte appears, it is possible to quantitatively analyze the analyte by a single sample development without adding a substrate separately, the immune response required in the conventional immunoassay Since there is no washing process to remove the remaining substances, the research on the easy-to-use strip biosensor has been conducted.

본 발명은 상기한 취지하에 발명된 것으로, 두가지 효소를 이용함으로써 시료가 전개되면서 면역반응과 효소반응이 순차적으로 일어나게되어, 분석물질의 농도에 따른 발색이 나타나므로, 기질을 따로이 첨가하지 않고도 한번의 시료 전개에 의해 분석물질을 정량분석할 수 있는 스트립 바이오센서를 제공함을 그 목적으로 한다.The present invention has been invented under the above-described purpose, and by using two enzymes, a sample is developed and an immune reaction and an enzymatic reaction occur sequentially, so that color development occurs according to the concentration of the analyte. It is an object of the present invention to provide a strip biosensor capable of quantitative analysis of analyte by sample development.

상기한 목적을 달성하기 위한 본 발명의 일 양상에 따르면, 본 발명에 따른 스트립 바이오센서는 소수성(Hydrophobic) 재질의 기판과; 상기 기판위에 적층되되, 시료를 모세관 현상에 의해 이동시키는 니트로셀룰로오즈 멤브레인과; 상기 니트로셀룰로오즈 멤브레인의 일측단 위에 부분 적층되되, 분석물질과 제1효소 기질을 포함한 시료를 주입하는 시료패드와; 상기 니트로셀룰로오즈 멤브레인의 타측단 위에 적층되되, 상기 니트로셀룰로오즈 멤브레인을 통해 이동된 물질을 흡수하는 흡수패드와; 상기 시료패드와 흡수패드간의 니트로셀루로오즈 멤브레인 위에 적층되되, 상기 시료에 의해 용해되어 전개되는 제2효소 기질과 탐지항체-제2효소 결합물질을 포함하는 결합체 패드와; 상기 결합체 패드와 흡수패드간의 니트로셀룰로오즈 멤브레인 위에 형성되되, 상기 니트로셀룰로오즈 멤브레인에 모세관 현상에 상관없이 물리적으로 고정되는 제1효소와 포획항체를 포함하는 측정부를 포함하여 이루어지는 것을 특징으로 한다.According to an aspect of the present invention for achieving the above object, a strip biosensor according to the present invention comprises a substrate of a hydrophobic (Hydrophobic) material; A nitrocellulose membrane laminated on the substrate, the nitrocellulose membrane moving the sample by capillary action; A sample pad partially stacked on one end of the nitrocellulose membrane and injecting a sample including an analyte and a first enzyme substrate; An absorbent pad stacked on the other end of the nitrocellulose membrane, the absorbent pad absorbing material moved through the nitrocellulose membrane; A binder pad stacked on the nitrocellulose membrane between the sample pad and the absorbent pad, the binder pad comprising a second enzyme substrate and a detection antibody-second enzyme binding material that are dissolved and developed by the sample; It is formed on the nitrocellulose membrane between the binder pad and the absorbent pad, characterized in that it comprises a measuring unit comprising a first enzyme and a capture antibody that is physically fixed to the nitrocellulose membrane irrespective of the capillary phenomenon.

따라서, 본 발명에 따른 스트립 바이오센서는 제1효소 기질과 제1효소가 효소반응하여 제1효소 반응 생성물이 생성되고, 이 제1효소 반응 생성물과 제2효소 기질이 제2효소의 기질로 작용하여 제2효소의 효소반응이 일어나 발색되는 현상을 측정함으로써 분석물질을 정량적으로 분석할 수 있게 된다.Therefore, in the strip biosensor according to the present invention, a first enzyme reaction product is produced by enzymatic reaction between the first enzyme substrate and the first enzyme, and the first enzyme reaction product and the second enzyme substrate act as substrates of the second enzyme. By measuring the development of the enzyme reaction of the second enzyme color development it is possible to quantitatively analyze the analyte.

이 때, 상기 발색의 정도는 분석물질의 서로 다른 부분을 인식하여 결합하는 탐지항체 제2효소 결합물질과 포획항체에 의한 면역반응에 의해 포획되는 분석물질의 농도에 따르게 된다.At this time, the degree of color development depends on the concentration of the analyte captured by the immune response by the detection antibody second enzyme binding agent and the capture antibody to recognize and bind different portions of the analyte.

이하, 첨부된 도면을 참조하여 기술되는 바람직한 실시예를 통하여 본 발명을 당업자가 용이하게 이해하고 재현할 수 있도록 상세히 기술하기로 한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to the accompanying drawings so that those skilled in the art can easily understand and reproduce the present invention.

도 1 은 본 발명에 따른 스트립 바이오센서의 일 실시예에 따른 단면도, 도 2 는 본 발명에 따른 스트립 바이오센서의 동작관계를 도시한 도면이다.1 is a cross-sectional view according to an embodiment of a strip biosensor according to the present invention, and FIG. 2 is a diagram illustrating an operation relationship of the strip biosensor according to the present invention.

도면에 도시한 바와같이, 본 발명에 따른 스트립 바이오센서(100)는 기판(110)과, 니트로셀룰로오즈 멤브레인(120)과, 시료패드(130)와, 흡수패드(140)와, 결합체 패드(150)와, 측정부(160)를 포함하여 이루어진다.As shown in the figure, the strip biosensor 100 according to the present invention includes a substrate 110, a nitrocellulose membrane 120, a sample pad 130, an absorption pad 140, and a combination pad 150. And a measurement unit 160.

상기 기판(110)은 본 발명에 따른 스트립 바이오센서(100)를 구성하는 니트로셀룰로오즈 멤브레인(120)과, 시료패드(130)와, 흡수패드(140)와, 결합체 패드(150)와, 측정부(160)를 적층하기 위한 베이스 기판으로, 플라스틱 카드 등의 소수성(Hydrophobic) 재질의 물질인 것이 바람직하다.The substrate 110 may include a nitrocellulose membrane 120, a sample pad 130, an absorption pad 140, a combination pad 150, and a measurement unit constituting the strip biosensor 100 according to the present invention. The base substrate for laminating the 160 is preferably a material of a hydrophobic material such as a plastic card.

상기 니트로셀룰로오즈 멤브레인(120)은 상기 기판(110)위에 적층되되, 시료를 모세관 현상에 의해 이동시킨다.The nitrocellulose membrane 120 is stacked on the substrate 110 to move the sample by capillary action.

이 때, 상기 니트로셀룰로오즈 멤브레인(120)은 모세관 현상에 의한 시료의 이동시 시료의 불균일한 흐름과 비특이적 반응을 제거하기 위하여 단백질, 고분자 물질, 계면활성제 등으로 처리하는 것이 바람직하다. 이러한 시료의 불균일한 흐름과 비특이적 반응을 제거하기 위한 처리는 이 출원 이전에 이미 다양하게 공지되어 시행되는 통상의 기술이므로, 이에 대한 자세한 설명은 생략하기로 한다.At this time, the nitrocellulose membrane 120 is preferably treated with a protein, a polymeric material, a surfactant, etc. in order to remove the non-uniform flow and non-specific reaction of the sample during the movement of the sample by the capillary phenomenon. The treatment to remove the non-uniform flow and non-specific reaction of such a sample is a conventional technique that is already known and implemented variously before this application, a detailed description thereof will be omitted.

상기 시료패드(130)는 상기 니트로셀룰로오즈 멤브레인(120)의 일측단 위에 부분 적층되되, 분석물질(200)과 제1효소 기질(300)을 포함한 시료를 주입한다.The sample pad 130 is partially stacked on one end of the nitrocellulose membrane 120, and injects a sample including the analyte 200 and the first enzyme substrate 300.

이 때, 상기 시료패드(130)에 주입되는 시료가 모세관 현상에 의해 상기 니트로셀룰로오즈 멤브레인(120)을 통해 이동시 시료의 균일한 흐름을 위해 계면활성제를 더 포함하는 것이 바람직하다. 이 계면활성제는 시료가 혈액일 경우 적혈구를 용혈하는 등의 목적으로도 이용될 수 있다.At this time, it is preferable that the sample injected into the sample pad 130 further includes a surfactant for the uniform flow of the sample when moving through the nitrocellulose membrane 120 by the capillary phenomenon. The surfactant may also be used for the purpose of hemolysis of red blood cells when the sample is blood.

한편, 시료에 포함되는 분석물질(200)과, 제1효소 기질(300) 및 계면활성제는 모세관 현상에 의해 상기 니트로셀룰로오즈 멤브레인(120)을 따라 전개가 가능하도록, 상기 분석물질(200)과, 제1효소 기질(300) 및 계면활성제의 크기가 상기 니트로셀룰로오즈 멤브레인(120)의 미세구멍 크기보다 작은 것이 바람직하다.On the other hand, the analyte 200, the first enzyme substrate 300 and the surfactant contained in the sample is to be developed along the nitrocellulose membrane 120 by the capillary phenomenon, the analyte 200, It is preferable that the size of the first enzyme substrate 300 and the surfactant is smaller than the size of the micropore of the nitrocellulose membrane 120.

상기 흡수패드(140)는 상기 니트로셀룰로오즈 멤브레인(120)의 타측단 위에 적층되되, 상기 니트로셀룰로오즈 멤브레인(120)을 통해 이동된 물질을 흡수한다.The absorbent pad 140 is stacked on the other end of the nitrocellulose membrane 120, and absorbs the material moved through the nitrocellulose membrane 120.

즉, 이 흡수패드(140)는 면역반응 및 효소반응에 의해 결합되지 못한 여분의 물질들을 흡수한다.In other words, the absorption pad 140 absorbs the extra substances not bound by the immune and enzyme reactions.

상기 결합체 패드(150)는 상기 시료패드(130)와 흡수패드(140)간의 니트로셀룰로오즈 멤브레인(120) 위에 적층되되, 상기 시료에 의해 용해되어 전개되는 제2 효소 기질(400)과 탐지항체-제2효소 결합물질(500)을 포함한다.The binder pad 150 is stacked on the nitrocellulose membrane 120 between the sample pad 130 and the absorbent pad 140, and is dissolved and developed by the sample. It comprises a two enzyme binding material (500).

이 때, 상기 결합체 패드(150)가 제2효소 기질(400)과 제2효소(520)간에 효소반응을 일으키는 제1효소 반응 생성물(600)이 결합체 패드내에 존재하지 않으므로, 결합체 패드내에 제2효소 기질(400)과 탐지항체-제2효소 결합물질(500)이 동시에 포함되어도 효소반응이 일어나지 않게 된다.At this time, since the first enzymatic reaction product 600 in which the conjugate pad 150 causes an enzymatic reaction between the second enzyme substrate 400 and the second enzyme 520 does not exist in the conjugate pad, a second portion in the conjugate pad is present. Enzyme reaction does not occur even though the enzyme substrate 400 and the detection antibody-second enzyme binding material 500 are included at the same time.

한편, 상기 제2효소 기질(400) 및 탐지항체-제2효소 결합물질(500)이 모세관 현상에 의해 상기 니트로셀룰로오즈 멤브레인(120)을 따라 전개가 가능하도록, 상기 제2효소 기질(400) 및 탐지항체-제2효소 결합물질(500) 크기가 상기 니트로셀룰로오즈 멤브레인(120)의 미세구멍 크기보다 작은 것이 바람직하다.Meanwhile, the second enzyme substrate 400 and the detection antibody-second enzyme binding material 500 may be developed along the nitrocellulose membrane 120 by capillary action. Preferably, the detection antibody-second enzyme binding agent 500 size is smaller than the micropore size of the nitrocellulose membrane 120.

상기 탐지항체(510)와 제2효소(520)는 물리 또는 화학적 방법으로 접합시킬 수 있으며, 이러한 접합 기술은 이 출원 이전에 이미 다양하게 공지되어 시행되는 통상의 기술이므로, 이에 대한 자세한 설명은 생략하기로 한다.The detection antibody 510 and the second enzyme 520 may be conjugated by a physical or chemical method, and this conjugation technique is a conventional technique that is already known and practiced in various ways before the present application, and thus detailed description thereof will be omitted. Let's do it.

상기 측정부(160)는 상기 결합체 패드(150)와 흡수패드(140)간의 니트로셀룰로오즈 멤브레인(120) 위에 형성되되, 상기 니트로셀룰로오즈 멤브레인(120)에 모세관 현상에 상관없이 물리적으로 고정되는 제1효소(720)와 포획항체(820)를 포함한다.The measuring unit 160 is formed on the nitrocellulose membrane 120 between the binder pad 150 and the absorption pad 140, and is a first enzyme that is physically fixed to the nitrocellulose membrane 120 regardless of capillary phenomenon. 720 and capture antibody 820.

상기 니트로셀루로오즈 멤브레인(120)에 모세관 현상에 상관없이 제1효소(720)와 포획항체(820)를 물리적으로 고정하는 방법은 다양하게 실시 가능하며, 제1효소(720)와 포획항체(820)를 각각 라텍스비드(710)(810)에 접합시켜 상기 니트로셀룰로오즈 멤브레인(120)에 고정하는 것이 바람직하다.Regardless of the capillary phenomenon, the first enzyme 720 and the capture antibody 820 may be physically fixed to the nitrocellulose membrane 120, and the first enzyme 720 and the capture antibody ( Each of the 820s is bonded to the latex beads 710 and 810 to be fixed to the nitrocellulose membrane 120.

상기 라텍스비드(710)(810)는 폴리스티렌(polystyrene), 폴리메틸 메타크릴레이트(polymethyl metacrylate), 폴리비닐톨루엔(polyvinyltoluene) 등의 수지계 비드를 사용하거나, 실리카 비드가 사용 되어질 수 있다. 상기에서 라텍스비드(710)(810)를 사용하는 이유는 측정의 용이를 위해서 이며, 상기 라텍스비드(710)(810)에 제1효소(720)나 포획항체(820)를 물리적인 방법으로 접합시킬 수 도 있으며, 카르복실기나 아민기로 활성화된 라텍스비드(710)(810)를 사용할 경우 제1효소(720)나 포획항체(820)를 화학적인 방법으로 접합시킬 수 있다. 상기한 라텍스비드(710)(810)에 제1효소(720)나 포획항체(820)를 접합하는 방법은 이 출원 이전에 이미 다양하게 공지되어 시행되는 통상의 기술이므로, 이에 대한 자세한 설명은 생략하기로 한다.The latex beads 710 and 810 may use resin beads such as polystyrene, polymethyl methacrylate, polyvinyltoluene, or silica beads. The reason for using the latex beads 710 and 810 is for ease of measurement, and the first enzyme 720 or the capture antibody 820 is physically conjugated to the latex beads 710 and 810. In addition, when the latex beads 710 and 810 activated by a carboxyl group or an amine group are used, the first enzyme 720 or the capture antibody 820 may be conjugated by a chemical method. Since the method for conjugating the first enzyme 720 or the capture antibody 820 to the latex beads 710 and 810 is conventionally known and practiced in various ways before this application, a detailed description thereof will be omitted. Let's do it.

이 때, 라텍스비드-제1효소 결합물질(700)과 라텍스비드-포획항체 결합물질(800)을 각각 따로 인접한 거리에 위치하도록 니트로셀룰로오즈 멤브레인(120)에 고정할 수 도 있으며, 라텍스비드-제1효소 결합물질(700)과 라텍스비드-포획항체 결합물질(800)을 같이 섞어서 니트로셀룰로오즈 멤브레인(120)에 고정할 수 도 있다.At this time, the latex bead-first enzyme binding material 700 and the latex bead-capturing antibody binding material 800 may be fixed to the nitrocellulose membrane 120 so as to be positioned separately adjacent to each other. The enzyme binding material 700 and the latex bead-trapping antibody binding material 800 may be mixed together and fixed to the nitrocellulose membrane 120.

이와는 달리, 라텍스비드-제1효소-포획항체 결합물질을 제작하여 이를 니트로셀룰로오즈 멤브레인(120)에 고정할 수 도 있다.Alternatively, the latex bead-first enzyme-captured antibody binding material may be prepared and fixed to the nitrocellulose membrane 120.

한편, 라텍스비드를 사용하지 않고 직접 제1효소(720)와 포획항체(820)를 니트로셀룰로오즈 멤브레인(120)에 상기 제1효소(720)와 포획항체(820)가 각각 따로 인접한 거리에 위치하도록 또는 섞어서 고정할 수 도 있다.Meanwhile, the first enzyme 720 and the capture antibody 820 are directly positioned on the nitrocellulose membrane 120 at a distance adjacent to the first enzyme 720 and the capture antibody 820 without using latex beads. You can also mix and fix.

상기 측정부(160)는 제1효소 기질(300)과 제1효소(720)가 효소반응하여 제1효소 반응 생성물(600)이 생성되고, 이 제1효소 반응 생성물(600)과 제2효소 기질(400)이 제2효소(520)의 기질로 작용하여 제2효소(520)의 효소반응이 일어나 발색되게 된다.The measuring unit 160 generates a first enzyme reaction product 600 by enzymatic reaction between the first enzyme substrate 300 and the first enzyme 720, and the first enzyme reaction product 600 and the second enzyme. The substrate 400 acts as a substrate of the second enzyme 520 to generate an enzymatic reaction of the second enzyme 520.

이 때, 상기 발색의 정도는 분석물질(200)의 서로 다른 부분을 인식하여 결합하는 탐지항체-제2효소 결합물질(500)과 포획항체(820)에 의한 면역반응에 의해 포획되는 분석물질(200)의 농도에 따르게 된다.At this time, the degree of color development is analytes captured by the immune response by the detection antibody-second enzyme binding material 500 and the capture antibody 820 to recognize and bind to different portions of the analyte 200 ( 200).

한편, 상기 제1효소(720)와, 제2효소(520)가 산화환원효소(Oxidoreductases)인 것이 바람직하다.On the other hand, it is preferable that the first enzyme 720 and the second enzyme 520 are Oxidoreductases.

상기 제1효소(720)는 산화효소(Oxidase)로서, 글루코오즈 산화효소(Glucose Oxidase), 디-아미노산 산화효소(D-amino acid Oxidase), 디아민 산화효소(Diamine Oxidase), 단일아민 산화효소(Monoamine Oxidase) 등을 사용할 수 있다.The first enzyme 720 is an oxidase, a glucose oxidase, a di-amino acid oxidase, a diamine oxidase, a monoamine oxidase Monoamine Oxidase) can be used.

상기 제2효소(520)는 과산화효소(Peroxidase)로서, 겨자무 과산화효소(Horseradish Peroxidase), 알쓰로마이시스 라모서스 과산화효소(Arthromyces ramosus Peroxidase) 등을 사용할 수 있다.The second enzyme 520 may be used as a peroxidase (Horseradish Peroxidase), Althromysis ramosus Peroxidase (Arthromyces ramosus Peroxidase) and the like.

상기 제1효소 기질(300)과 제2효소 기질(400)은 상기 각각의 제1효소(720) 및 제2효소(520)에 알맞은 기질이 사용되게 된다. 만일, 제1효소(720)가 글루코오즈 산화효소인 경우에는 제1효소 기질(300)은 글루코오즈(Glucose)가 사용되며, 제2효소 기질(400)은 효소반응으로 인하여 발색을 나타낼 수 있는 물질이 사용된다. 예컨데, 제2효소(520)가 겨자무 과산화효소(Horseradish Peroxidase)인 경우 제2효 소 기질(400)로 3-메틸-2-벤조티아조리논 하이드라존(3-methyl-2-benzothiazolinone hydrazone)과 3-디메틸아미노벤조익산(3-dimethylaminobenzoic acid)를 같이 사용하면 푸른색의 발색을 육안으로 확인할 수 있다. 또한, 제2효소 기질(400)로 3,3',5,5'-테트라메틸벤지딘(3,3',5,5'-tetramethylbenzidine) 또는 4-클로로-1-나프톨(4-chloro-1-naphtol)을 사용해도 푸른색의 발색을 육안으로 확인할 수 있다.As the first enzyme substrate 300 and the second enzyme substrate 400, substrates suitable for the first enzyme 720 and the second enzyme 520 are used. If the first enzyme 720 is glucose oxidase, glucose is used as the first enzyme substrate 300, and the second enzyme substrate 400 may display color due to the enzymatic reaction. Substances are used. For example, when the second enzyme 520 is a mustard peroxidase, 3-methyl-2-benzothiazolinone hydrazone (3-methyl-2-benzothiazolinone hydrazone) as the second enzyme substrate 400. ) And 3-dimethylaminobenzoic acid can be seen with the naked eye. In addition, 3,3 ', 5,5'-tetramethylbenzidine (3,3', 5,5'-tetramethylbenzidine) or 4-chloro-1-naphthol (4-chloro-1) as the second enzyme substrate (400). -Naphtol) can also be used to visually see the blue color.

상기 제1효소(720)와, 제2효소(520)가 산화환원효소(Oxidoreductases)일 경우, 상기 제1효소 기질(300)과 제1효소(720)가 효소반응하여 생성되는 제1효소 반응 생성물(600)이 과산화수소(H2O2)가 된다.When the first enzyme 720 and the second enzyme 520 are Oxidoreductases, the first enzyme reaction is generated by the first enzyme substrate 300 and the first enzyme 720. Product 600 becomes hydrogen peroxide (H 2 O 2 ).

상기한 구성을 갖는 본 발명에 따른 두가지 효소를 이용한 스트립 바이오센서(100)의 동작을 도 2 를 참조하여 알아본다.The operation of the strip biosensor 100 using the two enzymes according to the present invention having the above configuration will be described with reference to FIG. 2.

먼저, 본 발명에 따른 두가지 효소를 이용한 스트립 바이오센서(100)의 니트로셀룰로오즈 멤브레인(120)의 일측단 위에 부분 적층된 시료패드(130)에 분석물질(200)과 제1효소 기질(300)을 포함한 시료를 주입하면, 모세관 현상에 의해 시료가 소수성(Hydrophobic) 재질의 기판(110) 위에 적층된 니트로셀룰로오즈 멤브레인(120)을 통해 이동된다.First, the analyte 200 and the first enzyme substrate 300 are placed on a sample pad 130 partially stacked on one end of the nitrocellulose membrane 120 of the strip biosensor 100 using the two enzymes according to the present invention. When the sample is injected, the sample is moved through the nitrocellulose membrane 120 stacked on the hydrophobic substrate 110 by capillary action.

분석물질(200)과 제1효소 기질(300)을 포함한 시료가 이동하다가 니트로셀룰로오즈 멤브레인(120) 위에 적층된 결합체 패드(150)에 도달하면, 시료는 결합체 패드(150)에 포함된 제2효소 기질(400)과 탐지항체-제2효소 결합물질(500)을 용해 시켜 모세관 현상에 의해 제2효소 기질(400)과 탐지항체-제2효소 결합물질(500)을 니트로셀룰로오즈 멤브레인(120)을 통해 전개시킨다.When the sample including the analyte 200 and the first enzyme substrate 300 moves and reaches the conjugate pad 150 stacked on the nitrocellulose membrane 120, the sample includes a second enzyme contained in the conjugate pad 150. By dissolving the substrate 400 and the detection antibody-second enzyme binding material 500, the nitrocellulose membrane 120 was formed by dissolving the second enzyme substrate 400 and the detection antibody-second enzyme binding material 500 by capillary action. Deploy through.

이 때, 분석물질(200)에 대하여 탐지항체-제2효소 결합물질(500)의 탐지항체(510)가 면역반응하여 분석물질(200)과 탐지항체-제2효소 결합물질(500)이 결합되어 전개되게 된다.At this time, the detection antibody 510 of the detection antibody-second enzyme binding material 500 with respect to the analyte 200 is immunoreacted to bind the analyte 200 and the detection antibody-second enzyme binding material 500 to each other. To develop.

제1효소 기질(300)과, 제2효소 기질(400)과, 분석물질(200)과 탐지항체-제2효소 결합물질(500)이 결합된 물질이 이동하다가 니트로셀루로오즈 멤브레인(120) 위에 형성된 측정부(160)에 도달하면, 제1효소 기질(300)과 측정부(160)에 고정된 라텍스비드-제1효소 결합물질(700)의 제1효소(720)가 효소반응하여 제1효소 반응 생성물(600)이 생성된다.The first enzyme substrate 300, the second enzyme substrate 400, the analyte 200 and the detection antibody-second enzyme binding material 500 is bound to move the nitrocellulose membrane 120 Upon reaching the measuring unit 160 formed above, the first enzyme 720 of the latex bead-first enzyme binding material 700 fixed to the first enzyme substrate 300 and the measuring unit 160 is subjected to an enzymatic reaction. Monozyme reaction product 600 is produced.

한편, 측정부(160)에 고정된 라텍스비드-포획항체 결합물질(800)의 포획항체(820)는 분석물질(200)과 탐지항체-제2효소 결합물질(500)이 결합된 물질의 분석물질(200)과 면역반응하여 결합된다. 즉, 이는 탐지항체(510)와 포획항체(820)가 분석물질(200)의 서로 다른 부분을 인식하여 결합하는 성질을 이용한 것이다.On the other hand, the capture antibody 820 of the latex bead-captured antibody binding material 800 fixed to the measuring unit 160 is an analysis of a material combined with the analyte 200 and the detection antibody-second enzyme binding material 500 Immune reaction with the substance 200 is combined. That is, the detection antibody 510 and the capture antibody 820 uses a property of recognizing and combining different portions of the analyte 200.

그러면, 상기 제1효소 기질(300)과 제1효소(720)가 효소반응하여 생성된 제1효소 반응 생성물(600)과 제2효소 기질(400)이 제2효소(520)의 기질로 작용하여 제2효소(520)의 효소반응이 일어나 발색되게 된다. 이 과정에서 제2효소 기질(400)로 어떠한 물질을 사용하느냐에 따라 발색되는 색이 달라질 수 있다.Then, the first enzyme reaction product 600 and the second enzyme substrate 400 generated by the first enzyme substrate 300 and the first enzyme 720 act as the substrate of the second enzyme 520. As a result, the enzymatic reaction of the second enzyme 520 occurs and color develops. In this process, the color developed may vary depending on which material is used as the second enzyme substrate 400.

이 때, 상기 발색의 정도는 분석물질(200)의 서로 다른 부분을 인식하여 결합하는 탐지항체-제2효소 결합물질(500)과 라텍스비드-포획항체 결합물질(800)에 의한 면역반응에 의해 포획되는 분석물질(200)의 농도에 따르게 되므로, 포획되는 분석물질(200)의 양이 많을 수 록 색이 진해지게 되므로, 이 색을 관찰함에 의해 분석물질을 정략적으로 분석할 수 있게된다. 만일, 라텍스비드-제1효소 결합물질(700)과 라텍스비드-포획항체 결합물질(800)에 결합되는 라텍스비드(710)(810)를 사용하면 분석물질 측정시 방해되지 않으므로 측정이 용이하다.At this time, the degree of color development is due to the immune response by the detection antibody-second enzyme binding material 500 and the latex bead-capturing antibody binding material 800 that recognize and bind different portions of the analyte 200. Since the color depends on the concentration of the analyte 200 to be captured, the more the amount of the analyte 200 to be captured, the darker the color becomes, so that the analyte can be regularly analyzed by observing this color. If the latex bead-first enzyme binding material 700 and the latex bead-trapping antibody binding material 800 are used, the latex beads 710 and 810 are not disturbed when the analyte is measured.

분석물질을 정량분석하는 방법으로는 포토다이오드 또는 포토트랜지스터를 이용한 확산반사분광법(Diffusive reflectance spectrophotometry)을 이용한 기기분석방법 등에 의해 가능하다. 상기 확산반사분광법은 발색되어진 색의 고유의 파장의 확산 반사 정도를 측정하고 수치화함으로써 정량화하는 방법으로, 이 출원 이전에 이미 다양하게 공지되어 시행되는 통상의 기술이므로, 이에 대한 자세한 설명은 생략하기로 한다.As a method of quantitative analysis of the analyte, it is possible to use a device analysis method using diffusive reflectance spectrophotometry using a photodiode or phototransistor. The diffuse reflection spectroscopy is a method of quantifying by measuring and quantifying the degree of diffuse reflection of the intrinsic wavelength of the color to be developed, and since it is a conventional technique already known and practiced before this application, a detailed description thereof will be omitted. do.

한편, 상기 측정부(160)에 고정된 라텍스비드-제1효소 결합물질(700) 및 라텍스비드-포획항체 결합물질(800)에 의해 포획되지 않은 여분의 물질들은 상기 니트로셀루로오즈 멤브레인(120)의 타측단 위에 적층된 흡수패드(140)를 통해 흡수되게 되므로, 기존과는 달리 면역분석법에서 항체와 결합하지 못하고 남은 물질들을 세척과정을 통해 제거할 필요가 없게 된다.Meanwhile, the extra substances not captured by the latex bead-first enzyme binding material 700 and the latex bead-trapping antibody binding material 800 fixed to the measuring unit 160 are the nitrocellulose membrane 120. Since it is absorbed through the absorption pad 140 stacked on the other end of the), unlike the conventional immunoassay it does not need to remove the remaining material through the washing process without binding to the antibody.

따라서, 위와 같이 함에 의해 본 발명에 따른 스트립 바이오센서는 두가지 효소를 이용함으로써 시료가 전개되면서 면역반응과 효소반응이 순차적으로 일어나게되어, 분석물질의 농도에 따른 발색이 나타나므로, 기질을 따로이 첨가하지 않고도 한번의 시료 전개에 의해 분석물질을 정량분석할 수 있게 된다.Therefore, as described above, the strip biosensor according to the present invention, by using two enzymes, the sample develops, the immune reaction and the enzyme reaction occur sequentially, and color development occurs according to the concentration of the analyte, so that the substrate is not added separately. It is possible to quantitatively analyze analytes by one sample development without the need.

도 3 은 본 발명에 따른 스트립 바이오센서의 또 다른 실시예에 따른 사시도이다.3 is a perspective view according to another embodiment of a strip biosensor according to the present invention.

이 실시예는 도 1 에 도시한 스트립 바이오센서를 커버체를 이용해 수납함으로써, 스트립 바이오센서의 오염을 효과적으로 방지할 수 있도록 한 실시예이다.This embodiment is an embodiment in which the strip biosensor shown in FIG. 1 is accommodated using a cover body, thereby effectively preventing contamination of the strip biosensor.

이 실시예에 따른 스트립 바이오센서는 도 1 에 도시한 실시예의 구성에 부가하여, 제1커버체(170)와, 제2커버체(180)를 더 포함하여 이루어진다.The strip biosensor according to this embodiment further includes a first cover body 170 and a second cover body 180 in addition to the configuration of the embodiment shown in FIG. 1.

상기 제1커버체(170)는 상기 시료패드(130)에 시료를 투입하기 위한 시료투입구(171)가 형성된 소수성(Hydrophobic) 재질로 이루어진다.The first cover body 170 is made of a hydrophobic (Hydrophobic) material formed with a sample inlet 171 for injecting a sample into the sample pad 130.

상기 제2커버체(180)는 상기 제1커버체(170)와 대응하여 결합되어 기판(110)과, 니트로셀룰로오즈 멤브레인(120)과, 시료패드(130)와, 흡수패드(140)와, 결합체 패드(150)와, 측정부(160)를 수납하되, 상기 측정부(160)에 의해 포획된 분석물질의 농도를 확인하기 위한 측정창(181)이 형성된 소수성(Hydrophobic) 재질로 이루어진다.The second cover body 180 is coupled to correspond to the first cover body 170, the substrate 110, the nitrocellulose membrane 120, the sample pad 130, the absorption pad 140, The binder pad 150 and the measurement unit 160 are accommodated, and the measurement window 181 for checking the concentration of the analyte captured by the measurement unit 160 is formed of a hydrophobic (Hydrophobic) material.

따라서, 이 실시예에 따른 스트립 바이오센서(100)는 상기 제1커버체(170) 및 제2커버체(180)에 의해 기판(110)과, 니트로셀룰로오즈 멤브레인(120)과, 시료패드(130)와, 흡수패드(140)와, 결합체 패드(150)와, 측정부(160)가 수납되고, 상기 제1커버체(170)에 형성된 시료투입구(171)를 통해 시료패드(130)에 시료를 주입하고, 상기 제2커버체(180)에 형성된 측정창(181)을 통해 분석물질의 농도를 확인할 수 있으므로, 오염물질이 내부로 유입되는 것을 방지할 수 있어 분석물질에 대한 정량분석의 정확성을 향상시킬 수 있게 된다.Accordingly, the strip biosensor 100 according to the present embodiment includes the substrate 110, the nitrocellulose membrane 120, and the sample pad 130 by the first cover body 170 and the second cover body 180. ), The absorbent pad 140, the binder pad 150, and the measuring unit 160 are accommodated, and the sample is placed on the sample pad 130 through the sample inlet 171 formed in the first cover body 170. Injection, and the concentration of the analyte can be confirmed through the measurement window 181 formed in the second cover body 180, so that contaminants can be prevented from flowing into the inside. It will be possible to improve.

이상에서 설명한 바와 같은 본 발명에 따른 스트립 바이오센서는 두가지 효소를 이용함으로써 시료가 전개되면서 면역반응과 효소반응이 순차적으로 일어나게되어, 분석물질의 농도에 따른 발색이 나타나므로, 기질을 따로이 첨가하지 않고도 한번의 시료 전개에 의해 분석물질을 정량분석할 수 있으며, 기존과는 달리 면역분석법에서 항체와 결합하지 못하고 남은 물질들을 세척과정을 통해 제거할 필요가 없어 사용이 편리한 효과를 가진다.As described above, the strip biosensor according to the present invention uses two enzymes to sequentially develop an immune reaction and an enzymatic reaction as the sample develops, so that color development occurs according to the concentration of the analyte. The analyte can be quantitatively analyzed by a single sample development, and unlike the conventional method, the immunoassay does not need to remove the remaining substances through the washing process.

본 발명은 첨부된 도면에 의해 참조되는 바람직한 실시예를 중심으로 기술되었지만, 이러한 기재로부터 후술하는 특허청구범위에 의해 포괄되는 범위내에서 본 발명의 범주를 벗어남이 없이 다양한 변형이 가능하다는 것은 명백하다.While the invention has been described with reference to the preferred embodiments, which are referred to by the accompanying drawings, it is apparent that various modifications are possible without departing from the scope of the invention within the scope covered by the following claims from this description. .

Claims (13)

소수성(Hydrophobic) 재질의 기판과;A substrate made of a hydrophobic material; 상기 기판위에 적층되되, 시료를 모세관 현상에 의해 이동시키는 니트로셀룰로오즈 멤브레인과;A nitrocellulose membrane laminated on the substrate, the nitrocellulose membrane moving the sample by capillary action; 상기 니트로셀룰로오즈 멤브레인의 일측단 위에 부분 적층되되, 분석물질과 제1효소 기질을 포함한 시료를 주입하는 시료패드와;A sample pad partially stacked on one end of the nitrocellulose membrane and injecting a sample including an analyte and a first enzyme substrate; 상기 니트로셀룰로오즈 멤브레인의 타측단 위에 적층되되, 상기 니트로셀룰로오즈 멤브레인을 통해 이동된 물질을 흡수하는 흡수패드와;An absorbent pad stacked on the other end of the nitrocellulose membrane, the absorbent pad absorbing material moved through the nitrocellulose membrane; 상기 시료패드와 흡수패드간의 니트로셀루로오즈 멤브레인 위에 적층되되, 상기 시료에 의해 용해되어 전개되는 제2효소 기질과 탐지항체-제2효소 결합물질을 포함하는 결합체 패드와;A binder pad stacked on the nitrocellulose membrane between the sample pad and the absorbent pad, the binder pad comprising a second enzyme substrate and a detection antibody-second enzyme binding material that are dissolved and developed by the sample; 상기 결합체 패드와 흡수패드간의 니트로셀룰로오즈 멤브레인 위에 형성되되, 상기 니트로셀룰로오즈 멤브레인에 모세관 현상에 상관없이 물리적으로 고정되는 제1효소와 포획항체를 포함하는 측정부를;포함하여 이루어지는 것을 특징으로 하는 스트립 바이오센서.A strip biosensor formed on the nitrocellulose membrane between the binder pad and the absorption pad, the measuring unit including a first enzyme and a capture antibody physically fixed to the nitrocellulose membrane regardless of capillary action; . 제 1 항에 있어서, 상기 시료패드에 주입되는 시료가:The method of claim 1, wherein the sample injected into the sample pad is: 시료의 균일한 흐름을 위한 계면활성제를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 스트립 바이오센서.Strip biosensor further comprising a surfactant for uniform flow of the sample. 제 1 항에 있어서, 상기 결합체 패드가,The method of claim 1, wherein the binder pad, 제2효소 기질과 제2효소간에 효소반응을 일으키는 제1효소 반응 생성물이 결합체 패드내에 존재하지 않으므로, 결합체 패드내에 제2효소 기질과 탐지항체-제2효소 결합물질이 동시에 포함되어도 효소반응이 일어나지 않는 것을 특징으로 하는 스트립 바이오센서.Since the first enzyme reaction product that causes the enzymatic reaction between the second enzyme substrate and the second enzyme is not present in the conjugate pad, the enzyme reaction does not occur even if the second enzyme substrate and the detection antibody-second enzyme binding agent are simultaneously included in the conjugate pad. Strip biosensor, characterized in that not. 제 1 항에 있어서, 상기 측정부에 포함되는 제 1 효소와 포획항체가:The method of claim 1, wherein the first enzyme and the capture antibody included in the measurement unit: 폴리스티렌(polystyrene), 폴리메틸 메타크릴레이트(polymethyl metacrylate), 폴리비닐톨루엔(polyvinyltoluene) 등의 수지계 비드인 라텍스비드나, 실리카 비드에 물리적 또는 화학적으로 접합되어 상기 니트로셀룰로오즈 멤브레인에 고정되는 것을 특징으로 하는 스트립 바이오센서.Latex beads, such as resin-based beads such as polystyrene, polymethyl methacrylate, polyvinyltoluene, or the like, are physically or chemically bonded to silica beads, and are fixed to the nitrocellulose membrane. Strip biosensor. 제 1 항에 있어서, 상기 분석물질과, 제1효소 기질과, 제2효소 기질 및 탐지항체-제2효소 결합물질이:The method of claim 1, wherein the analyte, the first enzyme substrate, the second enzyme substrate and the detection antibody-second enzyme binding agent are: 모세관 현상에 의해 상기 니트로셀룰로오즈 멤브레인을 따라 전개가 가능하도록, 상기 분석물질과, 제1효소 기질과, 제2효소 기질 및 탐지항체-제2효소 결합물질 크기가 상기 니트로셀루로오즈 멤브레인의 미세구멍 크기보다 작은 것을 특징으로 하는 스트립 바이오센서.The size of the analyte, the first enzyme substrate, the second enzyme substrate, and the detection antibody-second enzyme binding material are micropores of the nitrocellulose membrane so that the capillary phenomenon can be developed along the nitrocellulose membrane. Strip biosensor, characterized in that smaller than the size. 제 1 항 내지 제 5 항 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 측정부가:The method of any one of claims 1 to 5, wherein the measuring unit: 제1효소 기질과 제1효소가 효소반응하여 제1효소 반응 생성물이 생성되고, 이 제1효소 반응 생성물과 제2효소 기질이 제2효소의 기질로 작용하여 제2효소의 효소반응이 일어나 발색되는 것을 특징으로 하는 스트립 바이오센서.The first enzyme substrate and the first enzyme react with each other to produce a first enzyme reaction product, and the first enzyme reaction product and the second enzyme substrate act as substrates of the second enzyme to generate an enzyme reaction of the second enzyme. Strip biosensor, characterized in that. 제 6 항에 있어서, 상기 발색의 정도는 분석물질의 서로 다른 부분을 인식하여 결합하는 탐지항체-제2효소 결합물질과 포획항체에 의한 면역반응에 의해 포획되는 분석물질의 농도에 따르는 것을 특징으로 하는 스트립 바이오센서.The method of claim 6, wherein the color development is characterized by the concentration of the analyte captured by the immune response by the detection antibody-second enzyme binding agent and the capture antibody to recognize and bind to different portions of the analyte. Strip biosensor. 제 7 항에 있어서, 상기 제1효소와, 탐지항체-제2효소 결합물질에 포함된 제2효소가 산화환원효소(Oxidoreductases)인 것을 특징으로 하는 스트립 바이오센서.8. The strip biosensor according to claim 7, wherein the first enzyme and the second enzyme included in the detection antibody-second enzyme binding material are Oxidoreductases. 제 8 항에 있어서, 상기 제1효소가 산화효소(Oxidase)인 것을 특징으로 하는 스트립 바이오센서.10. The strip biosensor of claim 8, wherein the first enzyme is an oxidase. 제 8 항에 있어서, 상기 제2효소가 과산화효소(Peroxidase)인 것을 특징으로 하는 스트립 바이오센서.The strip biosensor of claim 8, wherein the second enzyme is a peroxidase. 제 6 항에 있어서, 상기 제1효소 반응 생성물이 과산화수소(H2O2)인 것을 특 징으로 하는 스트립 바이오센서.The strip biosensor according to claim 6, wherein the first enzyme reaction product is hydrogen peroxide (H 2 O 2 ). 제 1 항 내지 제 5 항중의 어느 한 항에 있어서, 상기 스트립 바이오센서가:The method of claim 1, wherein the strip biosensor is: 상기 시료패드에 시료를 투입하기 위한 시료투입구가 형성된 소수성(Hydrophobic) 재질의 제1커버체와;A first cover body made of a hydrophobic material having a sample inlet for injecting a sample into the sample pad; 상기 제1커버체와 대응하여 결합되어 기판과, 니트로셀룰로오즈 멤브레인과, 시료패드와, 흡수패드와, 결합체 패드와, 측정부를 수납하되, 상기 측정부에 의해 포획된 분석물질의 농도를 확인하기 위한 측정창이 형성된 소수성(Hydrophobic) 재질의 제2커버체를;더 포함하는 것을 특징으로 하는 스트립 바이오센서.It is coupled to correspond to the first cover body to accommodate the substrate, the nitrocellulose membrane, the sample pad, the absorbent pad, the binder pad, and the measurement unit, but for confirming the concentration of the analyte captured by the measurement unit And a second cover body made of a hydrophobic material having a measurement window formed thereon. 제 6 항에 있어서, 상기 스트립 바이오센서가:The method of claim 6, wherein the strip biosensor is: 상기 시료패드에 시료를 투입하기 위한 시료투입구가 형성된 소수성(Hydrophobic) 재질의 제1커버체와;A first cover body made of a hydrophobic material having a sample inlet for injecting a sample into the sample pad; 상기 제1커버체와 대응하여 결합되어 기판과, 니트로셀룰로오즈 멤브레인과, 시료패드와, 흡수패드와, 결합체 패드와, 측정부를 수납하되, 상기 측정부에 의해 포획된 분석물질의 농도를 확인하기 위한 측정창이 형성된 소수성(Hydrophobic) 재질의 제2커버체를;더 포함하는 것을 특징으로 하는 스트립 바이오센서.It is coupled to correspond to the first cover body to accommodate the substrate, the nitrocellulose membrane, the sample pad, the absorbent pad, the binder pad, and the measurement unit, but for confirming the concentration of the analyte captured by the measurement unit And a second cover body made of a hydrophobic material having a measurement window formed thereon.
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2013176458A1 (en) * 2012-05-22 2013-11-28 고려대학교 산학협력단 Optical biosensor
KR20180058646A (en) * 2016-11-24 2018-06-01 고려대학교 세종산학협력단 Biochemical-immunological hybrid biosensor and sensor system including the same
WO2022114530A1 (en) * 2020-11-26 2022-06-02 바디텍메드(주) Diagnostic cartridge for immune diagnosis, and reader and diagnostic system using same

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20020004246A1 (en) 2000-02-07 2002-01-10 Daniels Robert H. Immunochromatographic methods for detecting an analyte in a sample which employ semiconductor nanocrystals as detectable labels
US20040171092A1 (en) 2001-03-26 2004-09-02 Response Biomedical Corporation Compensation for variability in specific binding in quantitative assays
US20040214253A1 (en) 2003-04-25 2004-10-28 Paek Se Hwan Membrane strip biosensor system for point-of-care testing
KR20060009665A (en) * 2004-07-26 2006-02-01 주식회사 인포피아 Hba1c sensor using immuno chromatographic assay

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20020004246A1 (en) 2000-02-07 2002-01-10 Daniels Robert H. Immunochromatographic methods for detecting an analyte in a sample which employ semiconductor nanocrystals as detectable labels
US20040171092A1 (en) 2001-03-26 2004-09-02 Response Biomedical Corporation Compensation for variability in specific binding in quantitative assays
US20040214253A1 (en) 2003-04-25 2004-10-28 Paek Se Hwan Membrane strip biosensor system for point-of-care testing
KR20060009665A (en) * 2004-07-26 2006-02-01 주식회사 인포피아 Hba1c sensor using immuno chromatographic assay

Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2013176458A1 (en) * 2012-05-22 2013-11-28 고려대학교 산학협력단 Optical biosensor
KR20130130640A (en) * 2012-05-22 2013-12-02 고려대학교 산학협력단 Optical biosensor
KR101670032B1 (en) 2012-05-22 2016-10-28 고려대학교 산학협력단 Optical biosensor
US9903856B2 (en) 2012-05-22 2018-02-27 Korea University Research And Business Foundation Optical biosensor
KR20180058646A (en) * 2016-11-24 2018-06-01 고려대학교 세종산학협력단 Biochemical-immunological hybrid biosensor and sensor system including the same
KR101916608B1 (en) 2016-11-24 2018-11-08 고려대학교 세종산학협력단 Biochemical-immunological hybrid biosensor and sensor system including the same
WO2022114530A1 (en) * 2020-11-26 2022-06-02 바디텍메드(주) Diagnostic cartridge for immune diagnosis, and reader and diagnostic system using same
KR20220073277A (en) * 2020-11-26 2022-06-03 바디텍메드(주) Diagnostic cartridge for immunodiagnosis and diagnostic device and system using the same
KR102530556B1 (en) 2020-11-26 2023-05-09 바디텍메드(주) Diagnostic cartridge for immunodiagnosis and diagnostic device and system using the same

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