KR100554079B1

KR100554079B1 - 금은화의 진통효과 검증방법 및 금은화 진통 제제

Info

Publication number: KR100554079B1
Application number: KR1020020057527A
Authority: KR
Inventors: 심인섭; 함대현; 이혜정; 황혜정; 이배환; 임사비나
Original assignee: 학교법인 경희대학교; 심인섭
Priority date: 2002-09-23
Filing date: 2002-09-23
Publication date: 2006-02-22
Also published as: KR20040026170A

Abstract

본 발명은, 행동학적 지표인 신경병리성 통증(neuropathic pain) 모델과 포르말린 테스트(formalin test))를 이용한 동물모델을 이용한 통증에 대한 금은화의 진통효과 검증방법 및 이 진통효과 검증방법을 이용하여 진통효과가 검증된 금은화를 유효성분으로 하는 금은화 진통 제제에 대한 것으로, 신경손상으로 통증을 느끼는 동통환자뿐만 아니라, 일반 동통질환에도 상기 약재의 이용을 통하여 통증 완화효과를 기대할 수 있다.

Description

금은화의 진통효과 검증방법 및 금은화 진통 제제{LONICERA JAPONICA THUNB}

도1a 및 도1b는 본 발명에 따른 신경병리성 통증 모델의 통증부위 사진 및 개념도.

도2는 본 발명에 따른 금은화의 기계적 이질통 억제에 미치는 효과 그래프.

도3은 본 발명에 따른 금은화의 냉각 이질통 억제에 미치는 효과 그래프.

도4a는 본 발명에 사용되는 포르말린 테스트 장치의 사진.

도4b 및 도4c는 포르말린 테스트에 의한 동물의 행동 사진들.

도5는 본 발명에 따른 금은화의 포르말린 테스트에 따른 금은화의 통증의 억제에 미치는 효과 그래프

본 발명은 행동학적 지표인 신경병리성 통증(neuropathic pain) 모델과 포르말린 테스트(formalin test))를 이용한 동물모델을 이용한 통증에 대한 금은화의 진통효과 검증방법 및 이 진통효과 검증방법을 이용하여 진통효과가 검증된 금은화를 유효성분으로 하는 금은화 진통 제제에 대한 것이다.

통증, 특히 만성 통증(chronic pain)은 인간에게 몹시 견디기 어려운 것으로, 만성 통증을 가진 환자는 그 아픔 때문에 정상적인 생활을 영위하는데 많은 어려움을 겪게 된다. 이러한 고통으로부터 해방되기 위해 환자는 통증을 호소하며 도움을 청하게 되며, 통증을 제어하고자 하는 노력은 의학계에서 끊임없이 진행되어져 왔다. 한약은 오랜 기간동안 전통한의학에서 사용되어져 통증에 대한 우수한 치료효과를 보여 왔다. 최근 여러 가지 한약재가 통증 억제에 어떠한 영향을 미치며 어떠한 작용기전에 매개되는지를 연구할 필요성이 제기되어 왔다.

기존에 한약물을 이용한 진통억제효과에 대한 보고를 살펴보면, 우슬약침액은 CFA(complete Freund's adjuvant) 관절염 유발 쥐에 작용하여 염증을 억제시키고, 염증상태를 나타내는 백혈구의 총수를 유의성있게 감소시키며, 혈청내 면역 글로불린(Globulin) 및 알부민(albumin)에 작용하여 조직학적으로 근육조직의 괴사를 억제시켜 관절염으로 인한 염증에 대하여 치유 효과를 나타내는 등의 효과가 검증된 바 있었다. 또한, 포공영은 초산법을 이용하여 Writhing syndrome의 빈도를 측정한 결과 포공영의 진통효과가 유의성 있었다. 또한, 초산법과 후지가압법에 의해 갈근을 주재로 한 갈근해기탕의 진통효과가 인정되었다.

한편, 이전 연구에서 금은화를 이용하여 항암효과(한두석등, 1998)와 함염효과(최유진등, 2001)가 보고되었으나 여러 통증모델에서 통증억제에 관한 보고는 거의 없었다.

본 발명은 상기와 같은 종래기술의 필요성과 문제점을 해결하기 위한 것으로, 금은화의 유효한 진통효과를 검증하기 위해 사용되어지는 행동학적 지표인 신경병리성 통증(neuropathic pain) 모델과 포르말린 테스트(formalin test)를 이용한 동물모델을 제공하는 것을 그 목적으로 한다.

또한, 본 발명의 목적은, 행동학적 지표인 신경병리성 통증(neuropathic pain) 모델과 포르말린 테스트(formalin test)를 이용한 동물모델을 이용하여 금은화의 유효한 진통효과를 검증하는 것이다.

이러한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은, 실험동물의 경골신경과 비복신경의 결찰 및 절단을 통해 신경병리성 동통증후군을 유발할 수 있는 동물모델을 만든 다음, 이질통 검사를 실시하여 통증에 대한 금은화의 진통효과를 검증하는 금은화의 진통효과 검증방법을 제공한다.

상기 이질통 검사는 폰 프레이 헤어(von-Frey hair)에 의한 기계적 이질통 검사와 아세톤(acetone)에 의한 냉각 이질통 검사 중 어느 하나일 수 있다.

상기 신경병리성 동통은 관절염, 근육통, 만성통 중 어느 하나일 수 있다.

또한 본 발명은, 실험동물에 포르말린을 투여하여 실험동물에 직접적 자극을 가한 다음, 금은화의 통증에 대한 진통효과를 검증하는 금은화의 진통효과 검증방 법을 제공한다.

상기 통증은, 염증성 통증(inflammation pain)과 같은 지속성 통증(tonic pain)일 수 있다.

또한 본 발명은, 상기 진통효과 검증방법을 이용하여 진통효과가 검증된 금은화의 주요성분을 유효성분으로 하는 진통 제제를 제공한다.

상기 금은화의 주요성분은, 비닐산(Vanillic acid), 유지놀(Eugenol), 클로로겐산(Chlorogenic acid), 2-페닐에탄올(2-Phenylethanol), 벤질알코올(Benzyl alcohol), 카페인산 메틸에스테르(Caffeic acid methyl ester), 콜린(Choline), β-카로틴(β-Carotene)(all-trans), 크리프토산틴(Cryptoxanthin), 제아크산틴(Zeaxanthin)(all E-form) 중 어느 하나 또는 하나 이상일 수 있다.

참고로, 본 발명의 한약제인 금은화에 대하여 간단히 살펴보면 다음과 같다.

인동초(Lonicera japonica)는 인동과의 반상록 덩굴식물로 산과 들의 양지바른 곳에서 자란다. 한방에서는 인동초의 잎과 줄기를 인동이라 하고, 꽃봉우리를 금은화라 한다. 인동초의 각 마디는 두 송이씨의 꽃을 피우는데, 흰꽃으로 피어났던 꽃은 시간이 지나면서 점차 노란색으로 변하여 인동초의 꽃은 금은화라고 한다.

실시예1

1. 신경병리성 동통 모델

가. 개요

신경병리성 통증 증후군(neuropathic pain syndrome)은, 관절염, 근육통, 만성통과 같이 만성 통증의 하나로서 말초 신경이나 조직이 손상을 받았을 때 발생하게 된다. 신경의 손상으로 인해 유발되는 신경병리성 동통(neuropathic pain)은 매우 고통스러울 뿐만 아니라, 아편제를 비롯한 통상적인 진통제를 사용하더라도 자주 재발된다(Tanelian and Cousins, 1989; Brose and Cousins, 1991).

신경병리성 동통의 증후군은 과통증(hyperalgesia), 이질통(allodynia), 자발적 동통(spontaneous pain) 등이 있다. 정상의 경우에도 통증을 유발시킬 수 있는 정도의 자극에 대해 그 이상의 과도한 통증을 유발하는 것을 "과통증"이라 하고, 정상적으로는 통증을 유발시킬 수 없을 정도의 미약한 자극에 민감하게 반응하여 통증을 유발하는 경우를 "이질통"이라 하며, 아무런 자극이 없는 경우에도 통증이 나타나는 것을 "자발적 동통"이라고 한다.

본 발명자들중 이배환 등은 좌골신경의 말초 쪽의 분지를 손상시키는 새로운 모델(Lee et al., 2000)을 개발하였다. 좌골신경에 말초 쪽에서 접근하면 3개의 분지가 있는데, 이들 신경 분지를 여러 가지 집단으로 나누어 선택적으로 손상시켜 신경병리성 동통이 발생되는 정도를 비교한 결과, 총비골신경(common peroneal nerve)은 남겨두고, 경골신경(tibial nerve)과 비복신경(sural nerve)을 손상시킨 집단에서 가장 격심한 동통 증상이 유발되었다(Lee et al., 2000). 이러한 좌골신경 분지의 손상으로 유발된 신경병리성 동통은 손상이 일어난 후 점차 증가하다가 손상 후 2주 정도에서 최고도에 달하였다. 그 후 점차 감소하는 추세를 보였으나 수술 후 약 28주에 이르기까지 지속되었다.

본 실시예는, 실험동물의 경골신경과 비복신경의 결찰 및 절단을 통해 신경병리성 동통증후군을 유발할 수 있는 동물모델을 만든 다음, 폰프레이 헤어(von-Frey hair)에 의한 기계적 이질통 검사와 아세톤(acetone)에 의한 냉각 이질통 검사를 실시하여 금은화의 처치가 이러한 검사에서 유효한 효과가 나타나는지를 측정하였다.

나. 실험내용

(1) 신경병리성 동통 모델 제작

실험동물로는 체중 150-200 gm내외의 흰쥐를 사용한다.

먼저 할로세인(halothane)으로 쥐를 마취시킨 후 뒷다리 피부의 털을 깎고 포비돈 아이오다인 (povidone iodine) 용액과 이소프로필 알콜(isopropyl alcohol)로 소독한다. 피부를 절개한 후 실체 줌 현미경을 사용하여 좌골신경을 찾아 좌골신경에서 경골 신경(tibial nerve)와 비골신경(common peroneal nerve) 및 비복신경(sural nerve)를 확인한 후 마이크로포셉(microforcep)으로 주변 조직 및 혈관으로 부터 분리시킨 다음, 총비골신경(common peroneal nerve)은 남겨두고, 경골 신경(tibial nerve)와 비복신경(sural nerve)는 현미경 하에서 6.0 명주실(silk thread)로 결찰한 후 미세 수술 가위로 절단한다. 절개된 부위는 카나마이신(kanamycin)을 점적하고 피부를 봉합하여 회복한 후 다음 실험에 들어간다.

(2) 한약재의 주입

금은화 300g을 정확히 평량한 후, 수욕상에서 80% 메탄올을 사용하여 3회 추출하였으며, 추출물을 감압 농축한 후 그 추출물을 동결건조(-66 , 10mmHg)시켜 분말 건조하였다. 건조시켜 얻은 금은화의 수득율은 21.98%이다.

금은화는 생리식염수에 녹여 50mg/10ml/kg, 100mg/10ml/kg, 200mg/10ml/kg, 400mg/10ml/kg의 용량으로 구강내 주입하였다. 각 실험군은 한약재 투여전의 pretest를 실시한 후, 한약재를 투여하고 난 후 2시간 동안 시간경과에 따른 진통효과의 변화를 관찰하였다. 한편, 금은화를 투여하지 않은 실험군을 대조군으로 사용하였다.

(3) 동통 반응의 관찰

신경병리성 동통에 관한 행동 검사는 수술전, 수술후 여러 차례에 걸쳐 시행하여 수술 후 2주 까지 관찰한다.

외부 자극에 대한 철회반응(withdrawal response)을 보기 위해 실험 동물(쥐)을 망으로 된 우리(cage)에 옮겨 안정시킨 후 실험을 진행한다.

자극은 폰 프레이 필라멘트(von Frey filament), 아세톤(acetone)을 사용하는데, 폰 프레이 필라멘트(von Frey filament)는 기계적 자극에 대한 이질통을 검사하기 위한 것으로서 낮은 강도에서 높은 강도로 자극하여 반응의 역치를 찾는다. 이는 수초 간격으로 좌우 발바닥에 각각 10회씩 자극하여, 발의 철회반응의 횟수를 얻어 백분율로 표시한다. 아세톤(acetone)은 온도자극에 대한 이질통을 검사하기 위한 것으로서, 양쪽 발에 5분 간격으로 각각 5회씩 주사기를 이용, 통각유발부위에 가하여 철회반응의 횟수를 센 다음 백분율을 자료로 삼는다.

(4) 실험절차

① 신경병리성 통증(neuropathic pain) 수술후 2주일째 되는 날 약물검사를 실시한다.

② 실험동물을 여러 집단으로 나누고 약물은 구강에 주입한다. 대조군은 생리식염수 동일 용량을 주입한다.

③ 기계적 이질통(mechanical allodynia), 냉각 이질통(cold allodynia)를 검사한다.

다. 실험결과

(1) 기계적 이질통에 대한 한약재의 효능

도2는, 금은화의 기계적 이질통 억제에 미치는 효과 그래프이다.

도2를 참조하면, 폰 프레이 필라멘트(von frey filament) 자극에 대한 기계적 이질통에 대한 한약재의 진통효과 검사에서 집단간 유의미한 차이를 보였다. 즉, LSD반복측정측정 결과, 60분에서 금은화 400mg/㎏집단과 통제군 사이에 유의미한 차이를 보여(p<0.05) 대조군보다 우수한 이질통 억제효과가 나타났다.

특히, 금은화 50mg/㎏ 집단과 금은화 100mg/㎏ 집단, 200mg/㎏ 집단은 대조 군(controll)과 큰 차이를 보이지 않았으나, 금은화 400mg/㎏집단은 다른 집단들과 60분에서 유의미한 차이를 나타내었다. 따라서, 기계적 이질통 억제를 위해서 실험동물(쥐)의 경우, 금은화를 400mg/㎏ 이상 투여하여야 효과가 있다는 것을 알 수 있었다.

(2) 냉각 이질통에 대한 한약재의 효능

도3은 금은화의 냉각 이질통 억제에 미치는 효과 그래프이다.

도3을 참조하면, 아세톤(acetone) 자극에 대한 냉각 이질통에 대한 한약재의 진통효과 검사에서 집단간 유의미한 차이는 보이지 않았다(F4,21=0.7, p>0.55).

즉, 금은화 50mg/㎏ 집단과 금은화 100mg/㎏ 집단, 200mg/㎏ 집단, 금은화 400mg/㎏집단 모두 대조군(controll)과 큰 차이를 보여 냉각 이질통에 금은화를 미량만 투여하더라도 효과가 있음을 알 수 있었다. 또한, 금은화의 냉각 이질통 억제는 투여하자마자 효과를 나타내었으며, 10분이 경과하여 그 효과가 더욱 뚜렸해 졌다.

실시예2

2. 포르말린 테스트(formalin test) 동물모델

가.개요

Tail-flick test와 hot-plate test와 같은 전통적인 통증 검사는 대부분 강한 강도의 자극을 일시적으로 제시한다. 이와 같은 방식으로 유발되는 통증 경험 은 지속기간이 짧고, 따라서 자극 자체에 의해 개시되는 조절 기전을 평가하는 데에는 적절하지 못하다. 이에 비해 지속성 통증(tonic pain)은 일시적인 자극에 의해 유발되는 통증과는 다르게 조절될 수 있다. 포르말린 테스트(formalin test)는 일시적으로 제시되는 기계적 또는 온도 자극을 사용한 검사보다도 임상적인 통증을 검사할 수 있는 보다 타당한 모델이라 할 수 있다(Dubuisson & Dennis, 1977; Abbott et al., 1981, 1982; Alreja et al., 1984).

포르말린(formalin)은 일찍이 통각 유발물질로 사용되어 왔으며(Lewis & Kellgren, 1939; Melzack & Melinkoff, 1974), 쥐에서 말초의 염증 반응을 연구하는 자극으로도 사용되어 왔다(Selye, 1949; Winter, 1965). 1977년 Dubuisson과 Dennis는 포르말린(formalin)으로 유발되는 행동을 자세히 기술함은 물론, 유발된 통증을 수량화하기 위한 방식을 개발하였으며, 이후 수많은 연구자들이 이 검사를 이용해 왔다.

포르말린(formalin)을 주입하면 통증 반응을 나타내는 두 가지 독특한 페이즈(phase)가 발생한다. 첫 번째 페이즈(phase)는 주입 직후 발생하는 것으로 약 5분간 지속되고, 두 번째 페이즈(phase)는 주입 후 약 20분후 시작한다(Dubbuisson & Dennis, 1977). 인간에게 포르말린(formalin)을 주입하면 국부적인 화끈거리는 통각, 박동통(poorly localized, burning, throbbing pain)을 야기하며, 그 시간경과(time course)는 동물에게서 나타나는 행동적 변화와 일치한다(Dubbuisson & Dennis, 1977). Hunskaar와 Hole의 연구(1987)에 의하면 첫 번째 페이즈(phase)는 포르말린(formalin)이 직접수용기에 작용하여 급성 통증(acute pain)을 야기하고, 두 번째 페이즈(phase)는 지속성 통증(tonic pain)으로서 염증성 통증을 일으키는 것으로 알려져 있다.

이와 같이 포르말린 테스트(formalin test)는 급성 통증(acute pain)과 지속성 통증(tonic pain)을 동시에 반영하는 검사이기 때문에 어떤 약물이 급성 통증(acute pain)을 감소시키는지 아니면 지속성 통증(tonic pain)을 감소시키는가를 알아보는 데에는 매우 적절한 검사법이라 할 수 있다.

예를 들면, Viana 등(2000)은 레몬그라스(Cymbopogon citratus)에서 추출한 정류(essential oil)가 포르말린 테스트(formalin test)에서 두 번째 페이즈(phase)를 선택적으로 억제함을 보고하였으며, Leal 등(2000)은 쿠마린(coumarin)을 함유하고 있는 브라질산 여러 약초들이 마찬가지로 포르말린 테스트(formalin test)의 두 번째 페이즈(phase)를 억제함을 보고하였다. 또한 Abdel-Fattah 등(2000)은 니겔라 오일(Nigella sativa oil)을 쥐의 구강으로 주입한 경우 포르말린 테스트(formalin test)에서 첫 번째 페이즈(phase)를 억제하였으며, 니겔라 오일(Nigella sativa oil)의 주성분인 티모퀴논(thymoquinone)을 구강, 복강, 뇌실을 통해 주입하였을 때에는 포르말린 테스트(formalin test)에서 첫 번째 뿐만 아니라 두 번째 페이즈(phase)도 억제됨을 보고하였다.

나. 실험내용

(1) 실험동물

체중 25-35g되는 ICR 마우스를 각 집단에 8-9마리씩 사용하였다. 동물은 한 우리에 4-5마리씩 집단으로 사육하였으며 먹이와 물은 자유로이 섭취하게 하였으며, 통증 검사 당일 최소한 2시간 전에 실험실로 데려와 검사 환경에 적응할 수 있게 하였다.

(2) 한약재의 주입

금은화는 생리식염수에 녹여 50mg/10ml/kg, 100mg/10ml/kg, 200mg/10ml/kg, 400mg/10ml/kg의 용량으로 통증 검사 30분전에 복강내 주입하였다. 약물을 쥐에게 주입하고 포르말린 테스트(formalin test)를 실시하였으며, 이를 정상 쥐(controll)를 사용한 포르말린 테스트(formalin test) 결과와 비교하였다.

(3) 동통 반응의 실험장치

포르말린(formalin)으로 유발된 통증 반응을 관찰하기 위해 도4a와 같이 투명 아크릴을 이용하여 관찰 상자를 제작하였는데, 그 제원은 12×30×13cm이었다. 관찰 상자의 아래에 도4b와 같이 평면 반사경을 45도의 각도로 설치하고, camcorder(JVC S-VHS)를 이용하여 기록하였다.

(4) 실험절차

26-gauge needle이 달린 미세주사기(microsyringe)를 사용하여 쥐(mouse) 뒷발등 피하에 2% 포르말린(formalin)을 20㎕ 주사하였다. 주입 직후 쥐를 관찰 상자에 한 마리씩 넣고 통증 행동을 기록하였다. 이러한 통증 행동의 off-line 분석 을 위해, 실험을 마친 뒤 기록된 통증 행동을 TV 모니터(TV monitor)를 이용하여 한 마리의 마우스 당 두 명의 평가자가 포르말린이 주입된 발이나 다리를 핥거나 깨무는 시간의 양을 5분 단위로 평가하였다.

다. 실험결과

정상동물에게 포르말린(formalin)을 주입한 결과 특징적인 페이즈1(phase 1)과 페이즈2(phase 2)의 통증 반응이 잘 관찰되었다. 이를 근간으로 한약재의 주입이 통증 반응에 미치는 영향을 비교하였는데 그 결과는 도5에 제시되어 있다. 도5는 포르말린(formalin) 주입 후 시간 경과에 따른 통증 행동의 변화 양상을 보여주고 있다.

페이즈1(Phase 1)은 포르말린(formalin) 주입 직후부터 10분까지의 반응을 합한 평균을, 페이즈2(phase 2)는 그 이후에 나타나는 반응의 합을 평균하여 제시한 것이다. 도5에서 볼 수 있는 바와 같이, 페이즈1(phase 1)에서는 금은화가 정상(normal or controll) 집단과 아무런 차이가 없었으나(Kruskal-Wallis One Way Analysis of Variance on Ranks, p>.05), 페이즈2(Phase 2)에서는 Kruskal-Wallis One Way ANOVA on Ranks 검증을 수행한 결과 통계적으로 유의미한 차가 있었다(p<0.001). 또한, Dunnett's test를 사용한 multiple comparison 결과, 금은화 집단은 정상 집단과 통계적으로 유의미한 차이가 있었다(p<.05).

이러한 결과는 금은화가 페이즈1(phase 1)에는 별다른 효과가 없었으므로 급성 통증(acute pain)을 감소시키는 데에는 효과적이지 않지만, 페이즈2(phase 2)에 서는 통증 억제 효과를 나타내므로 염증성 통증(inflammation pain)과 같은 지속성 통증(tonic pain)을 완화시키는데 효과적일 수 있다는 것을 시사한다.

3. 기타

이러한 금은화를 유효성분으로 하는 진통제는, 관절염, 근육통, 만성통과 같은 신경병리성 동통이나, 염증성 통증(inflammation pain)과 같은 지속성 통증(tonic pain)에 효과가 있을 것임은 상기 동물모델들을 통해 검증되었다.

금은화 주요성분은 바닐산(Vanillic acid), 유지놀(Eugenol), 클로로겐산(Chlorogenic acid), 2-페닐에탄올(2-Phenylethanol), 벤질알코올(Benzyl alcohol), 카페인산 메틸에스테르(Caffeic acid methyl ester), 콜린(Choline), β-카로틴(β-Carotene)(all-trans), 크리프토산틴(Cryptoxanthin), 제아크산틴(Zeaxanthin)(all E-form) 등이다. 따라서, 상기 실시예들에 따른 진통효과는 이들을 주요성분으로 함으로써 가능할 것이다.

위 실시예및 실험예들에서는 실험용 동물을 쥐로 하였으나, 다른 동물, 예를 들면 개나 원숭이 등일 수 있다. 따라서, 통증 동물모델도 쥐, 마우스 뿐만 아니라 다른 동물일 수 있다.

위 실시예에서 제제화 방법으로 추출물 제조만을 언급하였으나, 통상적으로 약제학적으로 허용되는 부형제와 함께 약제학적으로 허용되는 약학적 제제, 예를 들면 주사제, 액제, 시럽제, 정제, 캡슐제, 약침액 등으로 제제화하여 통증억제 예 방 및 치료를 위한 약학적 제제로 사용될 수 있다.

본 발명에 따른 약제학적 조성물은 임상적으로 투여시 경구, 복강, 피하 투여 등의 방법으로 투여할 수 있다.

본 발명에 따른 약제학적 조성물의 임상적 투여용량은 환자의 연령, 증상, 투여제형 또는 약물의 종류에 따라 다양하게 조절할 수 있다. 특정한 상태에서 바람직한 투여량을 결정하는 것은 공지된 기술에 해당한다.

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한두석, 배경현, 최은규,곽정숙. 한국산 생약으로부터 항암물질의 개발 (제6 보) 금은화 Ethyl Acetate 가용성 분획의 인체 구강유상피암종세포에 미치는 세포독성작용. 생약학회지, Vol.29, No.1,22-28,1998.

이상과 같이 본 발명에 의하면, 금은화의 유효한 진통효과를 검증하기 위해 사용되어지는 행동학적 지표인 신경병리성 통증(neuropathic pain) 모델과 포르말린 테스트(formalin test))를 이용한 동물모델을 제공하는 효과가 있다.

또한, 본 발명은, 행동학적 지표인 신경병리성 통증(neuropathic pain) 모델과 포르말린 테스트(formalin test))를 이용한 동물모델을 이용하여 금은화의 유효한 진통효과를 검증할 수 있는 효과가 있다.

이와 같이, 본 발명은, 우수한 진통효과를 보일 것으로 추정되는 금은화를 정제하여 추출한 후, 신경병리성 통증(neuropathic pain) 모델에서 기계적 및 냉각 이질통(mechanical and cold allodynia)에 대한 억제효과와 포르말린 테스트(formalin test))에서 직접적 자극에 대한 통증 및 염증성 반응에 의한 통증에 대한 억제 효과를 검사하는 등의 최근 진행되는 통증에 대한 여러 가지 지표에 대한 검사를 실시하여, 금은화의 우수한 진통억제 효과를 발견하였다.

본 발명은 신경병리성 동통 모델과 포르말린 테스트(formalin test)에서 금은화의 우수한 진통효과를 입증함으로써, 신경손상으로 통증을 느끼는 동통환자뿐만 아니라, 일반 동통질환에도 상기 약재의 이용을 통하여 통증 완화효과를 기대해볼 수 있을 것이다.

Claims

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금은화 300g을 수욕상에서 80% 메탄올을 사용하여 3회 추출하고, 상기 추출물을 감압 농축한 후, 그 추출물을 영하 66도, 10mmHg의 압력에서 동결건조시켜 분말상태로 제조되는 것을 특징으로 하는 금은화 진통 제제.
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