KR100254467B1 - 우황을 함유하는 생약 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 사향을 함유하지 않으면서도 우황청심원과 동등한 약리효과를 나타내는 새로운 처방을 갖는 변방 우황청심원 조성물에 관한 것이다. 더욱 구체적으로, 본 발명은 유효성분약제를 산약 30-280, 감초 50-200, 백삼 50-170, 포황 50-170, 신곡 25-80, 대두황권 40-100, 계피 40-100, 아교 40-100, 작약 30-90, 맥문동 30-90, 황금 90-250, 당귀 30-90, 방풍 30-90, 백출 30-90, 시호 60-150, 길경 60-150, 행인 30-70, 복령 30-70, 천궁 50-150, 우황 10-20, 영양각 30-100, 용뇌 20-60, 백렴 15-45 및 건강 15-45 의 중량비로 혼합조성한 새로운 처방의 변방우황청심원 조성물에 관한 것이다.

Description

우황을 함유하는 생약 조성물

본 발명은 사향이 포함되지 않은 새로운 처방의 우황청심원 조성물(이하에서는 "변방 우황청심원 조성물" 이라 함)에 관한 것이다.

우황청심원은 동의보감에 그 처방이 수재되어 수백년간 뇌졸중(졸중풍, 반신불수, 수족불수, 언어장애, 혼수, 정신혼미, 안면신경마비), 동맥경화증, 고혈압, 심계항진, 호흡곤란, 정신불안, 협심증, 급만성중풍, 자율신경실조증, 인사불성 등에 구급약으로서 사용되어 온 대표적인 한방제제이다.

그러나, 최근에 야생동물의 국제거래에 관한 워싱턴 협약이 발효됨에 따라 우황청심원의 중요한 약효성분인 사향의 국제거래가 금지됨으로써 우황청심원에 사향성분의 사용이 실질적으로 불가능하게 되었다.

사향은 사슴과(Cervidae)에 속하는 사향노루(Moschus moschiferus L.) 또는 기타 근연동물 수컷의 사향선 분비물로서 중추신경흥분작용, 항균작용 및 자궁흥분작용 등의 약리작용을 가지며, 임상적으로는 고열시의 의식장애, 경련발작, 뇌졸중, 정신혼미, 인사불성, 지각장애, 정신불안, 뇌진경 등에 사용된다. 따라서, 우황청심원에 사향성분이 포함되지 않는다면 우황청심원으로 부터 기대되는 중요한 약리효과가 상실 또는 경감될 것은 당연한 것이다.

이와 같이 우황청심원에서 사향이 삭제되는 경우에 대비하여 여러가지 연구가 진행되고 있다. 이러한 연구는 크게 두가지 방향, 즉 사향을 사향의 약리작용을 대신할 수 있는 새로운 생약제로 대체하는 방법과 생약이 아닌 다른 의약품으로 대체시키는 방법으로 진행되고 있다. 그러나, 사향을 우황청심원의 원처방에 포함되지 않은 다른 약제로 대체시키는 경우에는 우황청심원 본래의 약리작용에 심각한 변화를 초래할 수 있어 약리효과 자체로나 심리적으로 본래의 우황청심원과는 전혀 다른 생약조성물이 될 수도 있고 또한 검증되지 않은 새로운 부작용이 나타날 우려를 무시할 수 없다.

이에 본 발명자는 사향을 사용하지 않고도 전통적인 우황청심원의 약리효과를 그대로 유지시킬 수 있는 새로운 처방을 찾아내기 위해 집중적인 연구를 하였으며, 그 결과 사향을 제외하고 우황청심원의 원처방에 포함된 나머지 성분약제만을 사용하여도 그 성분약제의 조성비율을 특정하게 재조정시킴으로써 원방 우황청심원과 동일한 약리효과를 얻을 수 있음을 확인하고 본 발명을 완성하게 되었다.

제1도는 자발성고혈압 랫트(SHR)에게서 본 발명의 변방 우황청심원 조성물이 혈압에 미치는 영향을 사향을 함유하는 우황청심원 조성물(비교조성물)의 효과와 비교하여 나타낸 그래프이다[-●- 대조군, -×- 비교조성물 전처리군, -■- 본 발명의 시험조성물 전처리군].

제2도는 마우스의 응혈시간에 대한 본 발명의 변방 우황청심원 조성물의 효과를 사향을 함유하는 우황청심원 조성물(비교조성물)의 효과와 비교하여 나타낸 그래프이다.

즉, 본 발명에서는 기존의 원방 우황청심원 조성물의 성분약제중에서 사향과 상경작용을 갖는 성분약제는 그 함량을 감소시키는 대신에 사향과 동일하거나 유사한 약리효과를 나타내는 성분약제들의 함량은 증가시킴으로써, 사향을 함유하지 않으면서도 전체적으로는 사향이 포함된 원방 우황청심원과 동일한 약리효과를 나타내도록 성분약제의 조성비율을 재조정하여 변방 우황청심원 조성물을 구성하였다. 따라서, 본 발명의 변방 우황청심원 조성물에서는 기존의 원방 우황청심원 성분약제중에서 산약, 감초 및 신곡의 조성비율은 현저히 줄이고, 그 대신에 황금, 시호, 길경, 천궁 및 영양각의 함량은 4 내지 5 배 증가시킴으로써 전체적으로는 사향이 포함된 원방 우황청심원과 동일한 약리효과를 나타내도록 성분약제의 조성비율을 재조정하였다.

본 발명의 조성물을 구체적으로 설명하면 원방 우황청심원 조성물에서의 성분약제의 함량에 비해 산약은 0.1-1.0 배, 감초는 0.2-0.9 배, 신곡은 0.2-0.9 배로 감량하고, 황금은 1.5-4.0 배, 시호, 길경, 천궁 및 영양각은 각각 1.0-3.0 배로 증량시킨 것이다.

여기서 산약, 감초 및 신곡은 그 조성비율의 범위내에서 어느 하나의 성분이 증가되면 다른 성분은 그에 상응하게 감소시킴으로써 균형을 이루게 할 수 있고 황금, 시호, 길경, 천궁 및 영양각도 상기 조성비율의 범위내에서 어느 성분의 함량이 증가되면 다른 성분을 감소시켜 적절한 약리효과를 기대할 수 있다.

그밖의 원방 우황청심원의 다른 성분들은 기존의 성분함량을 유지시키되 목적하는 치료효과나 개인차에 따라 약간씩 그 조성비율을 변화시킬 수 있으며, 이렇게 변형된 조성비를 갖는 우황청심원 조성물도 본 발명의 범위에 포함된다.

구체적으로, 본 발명의 범위에 속하는 변방 우황청심원 조성물은 다음과 같은 구성성분 및 조성중량비를 갖는다: 산약 30-280, 감초 50-200, 백삼 50-170, 포황 50-170, 신곡 25-80, 대두황권 40-100, 계피 40-100, 아교 40-100, 작약 30-90, 맥문동 30-90, 황금 90-250, 당귀 30-90, 방풍 30-90, 백출 30-90, 시호 60-150, 길경 60-150, 행인 30-70, 복령 30-70, 천궁 50-150, 우황 10-20, 영양각 30-100, 용뇌 20-60, 백렴 15-45 및 건강 15-45.

본 발명의 변방 우황청심원 조성물은 필요에 따라 약제학적으로 허용되는 담체를 사용하여 약제학적 분야에서의 통상의 방법에 따라 환제 또는 현탁제나 겔제와 같은 액제 제형으로 제조할 수 있다.

본 발명의 변방 우황청심원 조성물은 이하의 실험예에 의해 입증되는 바와 같이, 사향을 함유하는 기존의 우황청심원 조성물과 동등하거나 오히려 더 큰 약리효과를 나타내므로 뇌졸중, 동맥경화, 심계항진, 호흡곤란, 정신불안, 급만성경풍 및 자율신경실조증 등에 우황청심원에 대한 대체약물로서 효과적으로 이용될 수 있다. 본 발명의 변방 우황청심원 조성물은 임상적으로 우황청심원과 동일한 용량수준으로 동일한 방식으로 이용될 수 있다.

이하에서는 본 발명을 제조예 및 실험예에 의거 구체적으로 설명한다.

[제조예 1] 현탁제 조성물

산약 3.525g, 감초 5.05g, 백삼 4.85g, 포황 5.0g, 신곡 2.5g, 대두황권 3.5g, 계피 3.5g, 작약 3.0g, 맥문동 3.0g, 황금 9.0g, 당귀 3.0g, 방풍 3.0g, 백출 3.0g, 시호 5.0g, 길경 5.0g, 행인 2.5g, 복령 2.5g, 천궁 5.0g, 영양각 3.5g, 백렴 1.5g, 건강 1.5g 을 혼합한 원료생약 78.425g 에 물 약 630㎖를 가하여 약 80 내지 100℃ 에서 3시간 정도 가열순환식 추출기를 사용하여 1차 추출한 후에 뜨거울때 1차 무명여과하고 100 호체를 통과시켜 1차 추출액으로 하였다. 또한 잔사에 물 210mℓ를 가하여 약 80 내지 100℃에서 약 1 시간 동안 2 차 추출한 다음 뜨거울 때 무명여과하여 100 호체를 통과시켜 2 차 추출액으로 하여 1차 추출액과 합하여 약 40℃ 에서 약 150㎖로 감압하에서 농축시켰다.

별도로 우황 0.7g을 실리카겔 데시케이터에서 4 시간 동안 잘 건조시키고, 미세한 분말로 하여 140 호체에 통과시켰다. 아교 3.5g은 정제수 열탕 70㎖ 에 용해시키고, 용뇌 2.05g, 파라옥시벤조산메틸 에스테르 0.5g, 파라옥시벤조산 프로필 에스테르 0.3g 및 L-멘톨 5㎎ 을 에탄올 35㎖ 에 용해시켰다.

정제수 열탕 100㎖ 에 D-소르비톨액(70%) 350g, 농글리세린 50g, 백당 50g 및 꿀 100g 을 넣어 95 내지 100℃ 에서 약 15 분 동안 가열하여 용해시키고, 여기에 나트륨벤조에이트 0.2g 및 나트륨시트레이트 적량을 넣고 잘 교반하여 용해시킨후, 펙틴 8.75g 및 산탄검 1.6g 을 서서히 교반하면서 용해시킨 후 액의 온도를 50℃ 이하로 냉각시키고 사이클로덱스트린 10g 및 카복시메틸셀룰로즈나트륨 2.0g 을 서서히 교반하면서 용해시켰다. 여기에 상기에서 수득한 생약추출액 150㎖ 및 우황분말 0.7g, 규소수지 0.2g, 열탕에 용해된 아교 3.5g 의 용액(약 45℃ 이하) 및 에탄올 35㎖에 용해된 용뇌 2.05g, 파라옥시벤조산메틸 에스테르 0.5g, 파라옥시벤조산프로필 에스테르 0.3g 및 L-멘톨 5㎎ 의 용액을 가하고 약 20 분 동안 교반하고, 증류수를 가하여 최종용량을 1ℓ 로 조정하여 약 20 분 동안 교반한 후에, 서서히 교반하면서 20㎖ 용량의 약병에 충전하여 본 발명에 따르는 변방 우황청심원 현탁제를 제조하였다. 여기에서 제조된 현탁제는 하기 표 1 에 기재된 조성물 1 과 같은 조성을 갖는다.

[제조예 2] 환제 조성물

우황 140.00g 과 산약 176.25g 을 분쇄기에 넣고 분쇄하였다(생약분말 1). 산약분말 528.75g, 감초분말(1.01kg)과 영양각분말(0.7kg)의 혼합물 1.71kg, 백삼분말 970.00g, 신곡분말(0.5kg)과 맥문동분말(0.6kg)의 혼합물 1.10kg, 계피분말 700.00g, 작약분말 600.00g, 대두황권분말 700.00g, 황금분말 1.80kg, 당귀분말 600.00g, 방풍분말 600.00g, 시호분말 1.00kg, 길경분말 1.00kg, 백출분말 600.00g, 복령분말 500.00g, 천궁분말 1.00kg, 백렴분말 300.00g, 건강분말 300.00g, 용뇌분말 410.00g, 행인분말 500.00g, 포황분말 1.00kg, 아교분말 700.00g에 상기에서 수득한 생약분말 1 을 혼합하여 생약분말 혼합물 16.935kg 을 수득하고, 이것을 32 메쉬 체로 여과한 후에 U형 혼합기에 넣고 혼합하였다.

결합제로서 꿀 15.85kg, 농글리세린 4.50kg 및 나트륨벤조에이트 40.00g 을 스테인레스 용기에 넣고 90 내지 100℃ 로 가온하여 용해시키고 상등부의 불순물을 제거하여 결합액을 수득하였다. 수득된 결합액을 상기에서 수득한 생약분말 혼합물에 소량씩 가하면서 생약분말들을 결합시켰다. 수득된 결합물을 가열기 온도가 85 내지 95℃ 로 가온된 환주기에 넣고 성형시키고, 성형된 환주를 절환기를 이용하여 일정한 크기의 환으로 절환한 후에 팬에 넣고 18rpm 으로 회전시키면서 정환하고 금박을 피복시켜 목적하는 우황청심원 환제 10000 개를 수득하였다. 여기에서 제조된 환제는 하기 표 1 에 기재된 조성물 2 와 같은 조성을 갖는다.

본 발명의 변방 우황청심원 조성물이 뇌졸중, 고혈압, 심계항진, 호흡곤란, 정신불안, 급만성경풍 및 자율신경실조 등의 예방 및 치료를 위해 우황청심원 조성물에 대체하여 사용할 수 있는 유의적인 약리효과를 나타내는지를 확인하기 위하여 다음과 같은 실험을 수행하였다. 이하의 실험에서 "시험조성물"은 제조예 1 에 기재된 방법에 의해 제조된 본 발명에 따르는 변방 우황청심원 조성물(표 1 의 조성물 1)을 의미하며, "비교조성물"은 표 1 에 기재된 비교조성물을 의미한다.

[실험예 1] 변방 우황청심원 조성물의 중추신경계에 대한 영향

본 발명에 따르는 변방 우황청심원 조성물이 사향을 함유하는 기존의 우황청심원이 사용되는 정신불안이나 급만성경풍에 대해 어떠한 효과를 나타내는지를 확인하기 위하여 마우스에게 각각의 시료를 경구투여한 후에 중추신경계에 대한 작용으로서 항펜틸렌테트라졸 작용, 항스트리키닌 작용 및 항피크로톡신 작용, 초산법에 의한 진통작용 및 압자극에 의한 진통작용을 측정하였다.

이하의 실험에서 실험동물로는 대한동물에서 분양받은 체중 25g 내외의 ICR계 암수 마우스를 시판고형사료(삼양유지, 소형동물용)와 물을 충분히 공급하면서 동일한 조건으로 2 주일간 실험실환경에 순응시킨 후에 건강한 동물만을 선별하여 사용하였다.

(1) 화학적 자극에 대한 항경련작용

시험동물에게 시험조성물 및 비교조성물을 각각 4.0㎖/kg 씩의 용량으로 경구투여하고, 30분후에 경련유발제로서 펜틸렌테트라졸 85㎎/kg, 스트리키닌 1.5㎎/kg 및 피크로톡신 5.0㎎/kg 을 각각 피하주사하여 이에 의해 경련을 일으킨 동물 및 사망한 동물을 관찰하였다. 음성대조군에는 동량의 생리식염수를 경구투여하고, 양성대조군에는 페노바르비탈(phenobarbital)을 경구투여하였다. 측정된 결과는 각각 하기 표 2, 3 및 4 에 나타내었다.

상기 표 2 에 기재된 결과로 부터 알 수 있는 바와 같이, 펜틸렌테트라졸-유발된 경련에 대하여 음성대조군이 0% 의 경련억제율을 나타내는데 비하여 페노바르비탈을 투여한 양성대조군에서는 100% 의 경련억제율이 나타났으며, 본 발명에 따르는 시험조성물(변방 우황청심원) 투여군에서는 50% 의 경련억제율을 나타내어 비교조성물 투여군(경련억제율 12.5%)에 비하여 월등히 우수한 진경효과를 나타냄을 알 수 있었다.

상기 표 3 에 기재된 결과로 부터 알 수 있는 바와 같이, 스트리키닌-유발된 경련에 의한 사망에 대해 음성대조군에서는 0% 의 억제율을 나타내는데 비하여 페노바르비탈을 투여한 양성대조군에서는 100% 의 억제율이 나타났으며, 본 발명에 따르는 시험조성물(변방 우황청심원) 투여군에서는 50% 의 억제율을 나타내어 비교조성물 투여군(억제율 12.5%)에 비하여 월등히 우수한 진경효과를 나타냄을 알 수 있었다.

상기 표 4 에 기재된 결과로 부터 알 수 있는 바와 같이, 피크로톡신-유발된 경련에 대하여 음성대조군이 0% 의 경련억제율을 나타내는데 비하여 페노바르비탈을 투여한 양성대조군에서는 83.3%의 경련억제율이 나타났으며, 본 발명에 따르는 시험조성물(변방 우황청심원) 투여군에서는 50% 의 경련억제율을 나타내어 원방 우황청심원인 비교조성물 투여군(경련억제율 37.5%)에 비하여 우수한 진경효과를 나타냄을 알 수 있었다.

(2) 티오펜탈 나트륨의 수면시간에 미치는 영향

홍(洪) 등의 방법[참고: 洪南斗, 蜈蚣(오공; 지네)의 약리학적 연구, 경희약대 논문, 5:27, 1977; 洪南斗, 金鍾禹, 宋一炳, 金南宰, 생약복합제제의 약효연구(제 1 보), 가미삼황탕이 중추신경계에 미치는 영향, 서울: 생약학회지, 12(3): 136, 1981] 따라 실험동물을 각 군당 10 마리씩이 포함되도록 하고 티오펜탈 나트륨 5.0㎎/kg 을 복강내주사하고 정향반사의 소실로 부터 정향반사 출현까지의 시간을 수면시간(분)으로 하였다. 실험군에는 티오펜탈 나트륨 투여 30 분전에 시험조성물 및 비교조성물을 각각 4.0㎖/kg 의 용량으로 경구투여하고, 음성대조군에는 동량의 생리식염수를 경구투여하고 양성대조군에는 페노바르비탈을 경구투여하였다. 측정된 결과는 다음 표 5 에 나타내었다.

상기 표 5 에 기재된 결과로 부터 알 수 있는 바와 같이, 티오펜탈 나트륨으로 유발시킨 수면시간에 대하여 생리식염수를 투여한 음성대조군에서는 11.4±2.0분의 시간을 나타내는데 비하여 페노바르비탈을 투여한 양성대조군에서는 29.2±6.2 분의 수면시간을 나타냈으며, 본 발명에 따르는 시험조성물(변방 우황청심원) 투여군에서는 26.3±3.7 분의 수면시간을 나타내어 비교조성물 투여군(수면시간 23.6±4.3 분)과 마찬가지로 유의적인 수면시간 연장효과를 나타냄을 알 수 있었다.

(3) 초산법에 의한 진통작용 시험

위틀(Whittle)의 방법[참고: Wittle B.A.: The use of changes in capillary permeability in mice to distinguish between narcotic and non-narcotic analgesics, Brit. J. Pharmacol, 22:22, 1949]에 따라 0.7% 초산생리식염수 0.1㎖/10g 을 마우스의 복강내에 주사하고 10 분후에 10분간의 비틀림 증상(writhing syndrome)의 빈도를 관찰하였다. 실험군에는 시료로서 시험조성물과 비교조성물을 각각 초산을 투여하기 30 분전에 각각 4.0㎖/kg 씩의 용량으로 경구투여하고, 음성대조군에는 동량의 생리식염수를 경구투여하고 양성대조군에는 아스피린을 100㎎/kg 의 용량으로 경구투여하였다. 측정된 결과는 다음 표 6 에 나타내었다.

상기 표 6 에 기재된 결과로 부터 알 수 있는 바와 같이, 초산에 의하여 통증을 유발시킨 후에 발생하는 비틀림 증상의 빈도를 측정한 결과, 생리식염수를 투여한 음성대조군에서는 17.18±1.20 회인데 비하여 아스피린을 투여한 양성대조군에서는 9.25±1.22 회로 유의적인 감소가 나타났다. 또한, 비교조성물이나 본 발명에 따르는 시험조성물을 투여한 실험동물군에서도 모두 유의적인 진통효과가 나타났음을 알 수 있다.

상기한 실험결과들을 종합하여 보면, 본 발명에 따르는 변방 우황청심원 조성물은 사향을 함유하는 우황청심원(비교조성물)과 동등하거나 오히려 보다 높은 항경련작용, 수면진정효과 및 진통효과를 나타냄을 알 수 있다. 따라서, 본 발명의 변방 우황청심원 조성물은 심계항진, 호흡곤란, 정신불안, 급만성경풍 및 자율신경실조증 등의 증상을 치료하는데 있어서 우황청심원에 대한 대체약물로 효과적으로 사용될 수 있다.

[실험예 2 ] 변방 우황청심원 조성물의 SHR 고혈압에 대한 영향

본 발명의 변방 우황청심원 조성물의 고혈압 치료효과를 평가하기 위하여 고혈압 모델로서 자발성 고혈압 랫트(spontaneously hypertensive rat; SHR)를 사용하여 다음과 같은 실험을 수행하였다.

실험동물은 체중 200-250g 의 웅성 자발성고혈압 랫트(SHR)를 고형사료(삼양유지)와 물을 충분히 공급하면서 실험실 환경에 적응시켰다. 체중 약 350g 으로 더 이상 증가하지 않는 랫트를 4 주간 혈압측정훈련으로 적응시킨 후, 3 군으로 나누어 실험하였다. 시료로서 대조군(실험동물수 7)에는 생리식염수 4㎖/kg 을 경구투여하고, 나머지 2 군에는 각각 본 발명의 시험조성물(시험조성물 전처리군: 실험동물수 8)과 비교조성물(비교조성물 전처리군: 실험동물수 8)을 4㎖/kg 의 용량으로 경구투여하였다. 혈압은 시료 투여전과 시로투여후 30 분, 1 시간, 2 시간, 4 시간 및 8 시간에 각각 수축기 혈압을 측정하였다. 혈압의 측정방법은 랫트의 꼬리 동맥에서 혈압을 측정하는 간접법(tail cuff method)을 사용하였으며, 변환기(transducer)에 연결시킨 후 이를 폴리그라프(polygraph, Grass Model 7J, U.S.A)와 증폭기(amplifier, Sphygmomanometer EKG-Pulse Preamplifier 7P8K, Grass Polygraph D.C. Driver Amplifier, U.S.A.)로 기록하고, 얻어진 결과는 맥클라브(Maclab, ML/8e, U.S.A.)를 통하여 분석하였다. 측정된 혈압수치를 하기의 식에 따라 계산하여 혈압변화량을 구하였다.

결과는 도 1 에 도시하였다. 도 1 에 도시된 결과로 부터 알 수 있는 바와 같이, 자발성고혈압 랫트에서 본 발명에 따르는 변방 우황청심원 조성물은 비교조성물에 비해서 더 유의적인 혈압강하효과를 나타내었다. 특히, 본 발명의 변방우황청심원 조성물은 투여 4 시간 후에 SHR 의 평균혈압을 11.5% 하강시키는 효과를 나타내었다. 따라서, 본 발명의 조성물은 고혈압에 대하여 우황청심원에 대한 효과적인 대용약제로 사용할 수 있음을 알 수 있다.

[실험예 3] 변방 우황청심원 조성물의 응혈시간과 혈전에 대한 영향

본 발명의 변방 우황청심원 조성물의 뇌졸중에 대한 예방 및 치료효과를 평가하기 위하여 시료를 랫트에게 경구투여한 후 응혈시간 및 혈전에 미치는 영향을 관찰하였다. 실험동물로는 체중 25g 내외의 수컷 마우스와 200g 내외의 스프라그-도울리계 수컷 랫트를 시판고형사료(삼양유지, 소형동물용)와 물을 충분히 공급하면서 2 주일간 실험실 환경에 적응시킨 후에 건강한 동물만을 선별하여 사용하였다.

(1) 응혈시간에 대한 영향

시료로서 생리식염수(대조군, 실험동물수 10), 시험조성물(실험동물수 11) 및 비교조성물(실험동물수 11)을 사용하여 각각을 실험동물인 마우스에게 10㎖/kg의 용량으로 경구투여하고 30 분후에 마우스의 안와정맥총으로 부터 모세관(Chase, U.S.A.)으로 혈액을 채취하여 절단하였을 때 응혈판이 생성될 때까지의 시간을 측정하였다. 측정된 결과는 도 2 에 나타내었다.

도 2 에 도시된 결과로 부터, 대조군에서의 응혈시간은 34.2±4.7 초이고, 비교조성물 투여군에서는 51.3±8.0 초로 응혈시간이 지연되는 경향을 나타내었으며, 이에 비하여 본 발명의 시험조성물 투여군에서는 56.9±10.8 초로 응혈시간이 더 유의적으로 연장되었음을 알 수 있다.

(2) 혈전에 대한 영향

시료로서 생리식염수(정상군, 대조군), 시험조성물 및 비교조성물을 사용하여 각각을 실험동물인 랫트에게 4㎖/kg 의 용량으로 경구투여하고, 30 분후에 정상군을 제외한 실험동물에게 엔도톡신 0.1㎎/kg 을 꼬리정맥에 주사하였다. 4 시간후에 심장천자하여 채혈하고, 다음과 같은 방법에 따라 혈소판수, 프로트롬빈 시간 및 피브리노겐 양을 측정하였다.

[혈소판 계산]

혈소판 계산은 포니오(Fonio) 방법[참고: Fonio A.; Acta Haematol. 1966, 36:5, 371-85]에 준하여 행하였다. 14% 황산마그네슘과 혈액을 3:1 정도가 되도록 혼합하고 슬라이드글라스(slide glass) 위에 도말하여 건조시켰다. 메탄올로 고정하고 물 1.0㎖ 에 김사(Giemsa)액 한방울을 혼합한 것으로 1 시간 동안 고정염색시키고 시야축소기로 각 시야의 적혈구와 혈소판을 세어 적혈구 1,000 까지 세고 적혈구 1,000 에 대해서 혈소판의 수를 p 로 하고, 혈액 1.0㎣ 중에 존재하는 적혈구수를 R 로 하여 다음과 같은 식에 따라 1.0㎣ 중의 혈소판수 P 를 산출하였다.

측정된 결과는 다음 표 7 에 나타내었다.

상기 표 7 에 기재된 결과로 부터 알 수 있는 바와 같이, 정상군의 혈소판수는 734.0±55.8(×10³/㎣)로 감소하였다. 한편, 시료인 비교조성물을 투여한 실험동물에서는 혈소판수가 575.0±67.9(×10⁴/mm³)인데 비하여 대조군은 479.2±48.3(×10³/㎣)으로 대조군에 비해서 혈소판수의 감소가 억제되었으나, 시험조성물을 투여한 군에서는 661.8±62.8(×10³/㎣)로 비교조성물 투여군에 비해서 훨씬 유의적으로 혈소판수의 감소를 억제하였다.

[프로트롬빈 시간 측정]

프로트롬빈 시간은 심플라스틴 킷트(simplastin kit, General Diagnotics)를 사용하여 측정하였다. 3.2% 구연산나트륨 1 용적과 혈액 9 용적을 혼합하여 분취한 구연산혈장 0.1㎖를 소형시험관에 취하여 37℃ 항온수조에 넣어 약 3 분간 가온하고, 동일온도로 보온한 심플라스틴 0.2㎖를 가하는 동시에 초시계를 시동하고 가볍게 흔들어 기울이면서 피브린이 석출할 때까지의 시간을 측정하였다. 측정된 결과는 다음 표 8 에 나타내었다.

상기 표 8 에 기재된 결과로 부터 알 수 있는 바와 같이, 정상군의 프로트롬빈 시간은 14.2±0.5 초인데 비하여 대조군은 16.1±0.5 초로 증가하였다. 한편, 시료인 비교조성물을 투여한 실험동물에서는 프로트롬빈 시간이 14.7±2.6 초로 대조군에 비해서 프로트롬빈 시간의 연장이 억제되었으며, 시험조성물을 투여한 군에서도 비교조성물 투여군과 유사하게 14.9±0.2 초로 유의적으로 프로트롬빈 시간의 연장이 억제되었다.

[피브리노겐 양의 측정]

혈장내의 피브리노겐 양의 측정은 피브리노겐 시험세트(Fibrinogen test set; Medichem)을 사용하여 측정하였다. 피검혈장을 오레인 완충액으로 10 배 희석하고 0.2㎖를 시험관에 취하여 3 분간 가온한 다음, 실온의 트롬빈액 0.1㎖를 가하여 응고시간을 측정하고, 검량선으로부터 피브리노겐의 농도를 구하였다. 측정된 결과는 다음 표 9 에 나타내었다.

상기 표 9 에 기재된 결과로 부터 알 수 있는 바와 같이, 정상군의 피브리노겐 양은 248.0±3.7㎎/㎗ 인데 비하여 대조군은 164.5±24.7㎎/㎗ 로 감소하였다. 한편, 시료인 비교조성물을 투여한 실험동물에서는 피브리노겐 양이 187.2±15.7㎎/㎗ 으로 대조군에 비해서 피브리노겐 양의 감소가 억제되었으며, 시험조성물을 투여한 군에서는 217.5±21.1㎎/㎗ 로 비교조성물 투여군에 비해서 훨씬 유의적으로 피브리노겐 양의 감소를 억제하였다.

상기의 실험결과들로부터, 본 발명의 변방 우황청심원 조성물은 사향을 함유하는 우황청심원 조성물에 비해 오히려 혈액응고시간을 더 연장시키고, 더 유의적인 항혈전효과를 나타냄을 알 수 있으며, 따라서 혈전으로 인하여 유발된 뇌졸증의 예방 및 치료에 있어서 우황청심원에 대체할 수 있는 우수한 약제로 이용될 수 있음을 알 수 있다.

Claims (4)

1. 유효성분약제를 중량을 기준으로하여 산약 30-280, 감초 50-200, 백삼 50-170, 포황 50-170, 신곡 25-80, 대두황권 40-100, 계피 40-100, 아교 40-100, 작약 30-90, 맥문동 30-90, 황금 90-250, 당귀 30-90, 방풍 30-90, 백출 30-90, 시호 60-150, 질경 60-150, 행인 30-70, 복령 30-70, 천궁 50-150, 우황 10-20, 영양각 30-100, 용뇌 20-60, 백렴 15-45 및 건강 15-45 의 비로 혼합조성한 신경계 또는 순환기계 질병 치료용 우황 함유 생약 조성물.
2. 제1항에 있어서, 유효성분약제를 중량을 기준으로하여 산약 70.5, 감초 101, 백삼 97, 포항 100, 신곡 50, 대두황권 70, 계피 70, 아교 70, 작약 60, 맥문동 60, 황금 180, 당귀 60, 방풍 60, 백출 60, 시호 100, 질경 100, 행인 50, 복령 50, 천궁 100, 우황 14, 영양각 70, 용뇌 41, 백렴 30 및 건강 30 의 비로 혼합조성한 우황 함유 생약 조성물.
3. 제1항에 있어서, 환제 형태인 우황 함유 생약 조성물.
4. 제1항에 있어서, 액제 제형인 우황 함유 생약 조성물.

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