KR100225416B1

KR100225416B1 - 유사 펩타이드 유도체, 이들의 제조방법 및 이들을 유효성분으로 함유하는 라스 변이세포 성장억제 조성물(Peptidomimetic ras transformed cell growth inhibitors, a process for preparation thereof, and a composition comprising thereof)

Info

Publication number: KR100225416B1
Application number: KR1019970021243A
Authority: KR
Inventors: 이봉용; 이정훈; 방기훈; 황현준
Original assignee: 김선진; 주식회사유한양행
Priority date: 1997-05-28
Filing date: 1997-05-28
Publication date: 1999-10-15
Also published as: KR19980085233A

Abstract

본 발명은 일반식(I)로 표시되는 신규의 유사 펩타이드 유도체 및 이들의 무독성염, 이들의 제조방법 및 이들을 유효성분으로 함유하는 라스(Ras) 변이세포 성장억제 조성물에 관한 것이다.

상기에서 R₁은 수소, 직쇄 또는 분지상의 C₁- C₃알킬, 시아노로 치환된 직쇄 또는 분지상의 C₁- C₃알킬, 또는 아세틸이고, A는 -CH₂- 또는 -CO- 이다. 또한, X는 나프탈렌, 치오펜-2-일, C₁- C₃알콕시로 치환된 페닐, 또는 C₁- C₃알콕시로 치환된 C₁- C₃알킬이고, Y는 나프탈렌, 퀴놀린, 치오펜-2-일, 치오펜-2-일-메틸, 페녹시메틸, 벤질옥시메틸, 에톡시카르보닐에틸, 치환기를 갖거나 갖지 않는 페닐, 치환기를 갖거나 갖지 않는 페닐메틸, 치환기를 갖거나 갖지 않는 직쇄 또는 분지상의 C₁- C₅알킬 또는 알케닐, 또는 C₃- C₅시클로알킬이다.

Description

유사 펩타이드 유도체, 이들의 제조방법 및 이들을 유효성분으로 함유하는 라스 변이세포 성장억제 조성물(Peptidomimetic ras transformed cell growth inhibitors, a process for preparation thereof, and a composition comprising thereof)

본 발명은 신규의 유사 펩타이드 유도체 및 이들의 무독성염에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 하기 일반식(I)로 표시되는 신규의 유사 펩타이드 유도체 및 이들의 무독성염, 이들의 제조방법 및 이들을 유효성분으로 함유하는 라스(Ras) 변이세포 성장억제 조성물에 관한 것이다.

상기에서 R₁은 수소, 직쇄 또는 분지상의 C₁- C₃알킬, 시아노로 치환된 직쇄 또는 분지상의 C₁- C₃알킬, 또는 아세틸이고, A는 -CH₂- 또는 -CO- 이다. 또한, X는 나프탈렌, 치오펜-2-일, C₁-C₃알콕시로 치환된 페닐, 또는 C₁-C₃알콕시로 치환된 C₁-C₃알킬이고, Y는 나프탈렌, 퀴놀린, 치오펜-2-일, 치오펜-2-일-메틸, 페녹시메틸, 벤질옥시메틸, 에톡시카르보닐에틸, 치환기를 갖거나 갖지 않는 페닐, 치환기를 갖거나 갖지 않는 페닐메틸, 치환기를 갖거나 갖지 않는 직쇄 또는 분지상의 C₁- C₅알킬 또는 알케닐, 또는 C₃- C₅시클로알킬이다.

포유동물의 라스단백질(Ras protein)은 라스유전자(Ras gene)에 의하여 합성되는 단백질로서 2종의 프레닐트랜스퍼라제(Frenyltransferase) 즉, 파르네실 단백질 트랜스퍼라제(Farnesyl protein transferase, 이하 ＂FPT＂라 한다. ) 또는 제라닐제라닐 단백질 트랜스퍼라제(Geranylgeranyl protein transferase, 이하 ＂GGPT＂라 한다.)에 의해 파르네실화(Farnesylation) 또는 제라닐제라닐화(Geranylgeranylation)되어 세포내벽으로 이동하여 GDP가 결합된 불활성화 상태 또는 GTP가 결합된 활성화 상태로 존재하게 된다. 라스단백질이 활성화 상태일 경우 하위 단계의 신호전달 체계를 단계적으로 활성화 시킴으로써 세포 외부의 신호를 핵내로 전달하게 되고, 이 정보는 전사인자(myc, jun, fos등)를 활성화시켜 세포의 성장 또는 세포의 분핵을 촉진시키게 되는데 이러한 일련의 정보전달체계를 라스신호전달체계라 한다(M. Barbacid, Annu. Rev. Biochem., 56, 779, 1987, P J. Casey et al., Natl. Acad. Sci. U.S.A. 86, 8323, 1989).

한편, 라스유전자의 돌연변이(예를들어, H-Ras, N- Ras, K- RasA, K- RasB등)로 인해 변이성 라스단백질이 생성될 경우 즉, 이들은 GTP와 결합하여 지속적인 활성화 상태로 유지됨으로써 세포의 암화를 유발하게 된다. 다수의 인체암 중에서 특히 대장암과 췌장암의 환자에서 이러한 돌연변이성 라스유전자가 각각 50%와 90% 정도로 발견되고 있으며, 폐암(50%)이나 갑상선암(30%)등에서 높은 빈도로 돌연변이된 라스유전자가 확인되고 있다(S. Rodenhuis, Semin. Cancer Biol. 3, 241, 1992).

따라서, 변이성 라스단백질로 인한 변이세포 억제제를 개발하기 위하여 많은 연구가 진행되고 있다. 이중 특히, 변이성 라스단백질이 세포내벽으로 이동하는 것을 차단할 수 있는 FPT 저해제에 대한 많은 연구가 진행되고 있다.

예를들어, 라스단백질의 카르복실산 잔기(Cys-A1-A2-Met)와 유사한 구조를 갖는 Cys-Val-Phe-Met이 FPT의 저해제로 작용한다고 개시된 바 있다(J. L. Goldstein et al., J. Biol. Chem., 266. 15575, 1991; A. M. Garcia et al., J. Biol. Chem., 268, 18415. 1993; S. L. Graham et al., J. Med. Chem., 37, 725, 1994).

또한, Cys-lle-Phe-Met를 기본구조로 하여 다수의 유도체들이 개발중에 있으며, 대표적으로는 Phe-Met 부위를 방향족알킬아민으로 대체한 화합물이 GGPT에 비하여 FPT를 선택적으로 억제한다는 보고가 있고(S. J. Desolms et al., J. Med. Chem., 38, 3967, 1995), 시스테인과 트랜스-3(S)-에틸프롤린에 아미노메틸나프탈렌을 결합시킨 카보실아미드 화합물이 FPT에 대해 억제력을 나타낸다고 개시한 바 있으며(WO9606609, 1996), 시스테인을 이미다졸에틸기로 변환시킨 유사펩타이드 화합물들도 FPT 저해효과를 갖는 것으로 보고되고 있다(J. H. Hunt et al., J. Med. chem., 39, 353, 1996; WO9610035, 1996; WO9610034, 1996; WO9609836, 1996). 이밖에 머크사는 Cys-lle-Phe-Met의 시스테인을 p-니트로벤질이미다졸아세테이트로, 페닐알라닌을 (N-나프틸메틸)글라이신으로 변환한 화합물이 FPT에 대해 억제력을 갖는다고 보고하고 있다(WO9610034, 1996).

그러나, 상기와 같은 종래의 개발중인 FPT 저해제들은 실제로 대부분의 인체암에서 발견되는 K-Ras 변이세포내에서는 파르네실화를 효과적으로 억제하지 못한다고 최근에 보고된 바 있다. 즉, 인체암 세포에서 가장 발견빈도가 높은 K-RasB는 FPT 저해제에 의해 라스단백질의 파르네실화가 억제되면 대신 GGPT(특히, GGPT-1)에 의하여 프레닐화됨으로써 라스단백질의 활성을 유지한다고 최근에 보고되었다(G. L. James et al., J. Biol. Chem. 270, 6221, 1995).

또한, 상기와 같은 종래의 개발중인 FPT 저해제들은 두 개 이상의 아미드 결합과 카르복실산을 보유한 펩타이드성 화합물로서 세포투과성이 낮고 펩티다제에 의해 쉽게 가수분해될 수 있다는 점이 문제점으로 지적되고 있다.

이에 본 발명자들은 FPT 또는 GGPT 저해기전을 갖는 종래의 라스단백질 생성억제제와 그 기전이 전혀 상이한 라스변이세포 자체의 성장을 억제할 뿐 아니라, 종래의 펩타이드성 화합물들이 갖는 문제점인 펩티다제에 의한 가수분해 영향을 줄일 수 있는 새로운 라스단백질 성장억제제를 개발하고자 연구를 거듭한 결과, 일반식(Ⅰ)의 유사 펩타이드 유도체가 효과적으로 라스 변이세포의 성장을 억제할 수 있다는 것을 발견하여 본 발명을 완성하게 되었다.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.

본 발명은 라스변이세포 성장억제효과를 갖는 신규의 유사 펩타이드 유도체 및 이들의 무독성염을 제공하는 것을 목적으로 한다.

또한, 본 발명의 목적은 상기 유사 펩타이드 유도체 및 이들의 무독성염의 제조방법을 제공하는 것을 포함한다.

또한, 본 발명의 목적은 상기 유사 펩타이드 유도체 및 이들의 무독성염을 유효성분으로 함유하는 라스변이세포 성장억제 조성물을 제공하는 것을 포함한다.

이하, 본 발명을 더욱 상세히 설명한다.

본 발명은 하기 일반식(Ⅰ)로 표시되는 신규의 유사 펩타이드 유도체 및 이들의 무독성염을 포함한다.

상기에서 R₁은 수소, 직쇄 또는 분지상의 C₁- C₃알킬, 시아노로 치환된 직쇄 또는 분지상의 C₁- C₃알킬, 또는 아세틸이고, A 는 -CH₂- 또는 -CO- 이다. 또한, X는 나프탈렌, 치오펜-2-일, C₁-C₃알콕시로 치환된 페닐, 또는 C₁-C₃알콕시로 치환된 C₁-C₃알킬이고, Y는 나프탈렌, 퀴놀린, 치오펜-2-일, 치오펜-2-일-메틸, 페녹시메틸, 벤질옥시메틸, 에톡시카르보닐에틸, 치환기를 갖거나 갖지 않는 페닐, 치환기를 갖거나 갖지 않는 페닐메틸, 치환기를 갖거나 갖지 않는 직쇄 또는 분지상의 C₁- C₅알킬 또는 알케닐, 또는 C₃- C₅시클로알킬 이다.

본 발명에 따른 유사 펩타이드 유도체는 약제학적으로 허용가능한 염의 형태일 수 있으며, 그 염으로는 항암제 분야에서 통상적으로 사용가능한 무독성염, 예를들면, 비독성 무기산 또는 유기산으로부터 생성된 염의 형태일 수 있다. 이러한 통상적인 비독성 염에는 염산, 브롬화수소산, 황산, 설팜산, 인산, 질산 등과 같은 무기산으로부터 유도된 염 및 아세트산, 프로피온 산, 숙신산, 글리콜산, 스테아르산, 파모산, 말레산, 하이드록시말레산, 페닐아세트산, 글루탐산, 벤조산, 살리실산, 설파닐산, 2-아세톡시-벤조산, 푸마르산, 톨루엔설폰산, 메탄디설폰산, 에탄디설폰산, 옥살산, 트리플루오로아세트산과 같은 유기산으로부터 제조된 염등을 포함한다.

일반식(Ⅰ)로 표시되는 본 발명에 따른 유사 펩타이드 유도체는 다음 일반식으로 표시한 바와 같이 부재탄소를 함유함으로써 다양한 입체이성질체의 형태일 수 있으며, 또한 이들이 혼합된 형태일 수 있다. 따라서 따로 언급하지 아니하는 한, 본 발명은 이들 모두를 포함하는 것으로 이해되어야 한다.

상기 본 발명에 따른 화합물중에서 보다 바람직한 화합물의 예를들면 다음과 같다.

본 발명은 일반식(1)로 표시되는 유사 펩타이드 유도체 및 그의 무독성 염의 제조방법을 포함한다. 이들 유도체의 제조방법을 반응식으로 표시하면 다음과 같다.

[반응식 1]

[반응식 2]

상기 반응식에서 A, R₁, X 및 Y는 상기에서 정의한 바와 동일하여, Boc는 t-부톡시카르보닐 등의 통상의 아미노 보호기이며, Pr은 아미노 보호기(Boc)와 동시에 제거될 수 있는 설프히드릴기의 보호기로서 예를들면, 트리페닐메틸 또는 S-t-부틸 등이다.

상기 반응식을 각 단계별로 설명하면 다음과 같다.

[반응 1]

환원적 알킬화 반응

출발물질인 일반식(Ⅱ)의 t-부톡시카보닐(Boc)로 보호된 이소루이신 알데히드 유도체는 기지의 제조방법 (Org. Syn. Vol. 67, 1988, 69 및 Synthesis, 1983, 676)에 의하여 제조할 수 있으며 나트륨 시아노보로하이드라이드 등의 공지의 환원제 존재하에서 X-메틸아민을 가하여 환원적 알킬화 반응을 수행하여 일반식(Ⅲ)의 화합물을 제조할 수 있다. 이때 KOAc 및 3A 분자체등을 가하여 반응을 촉진시킬 수 있다.

[반응 2]

아실화 또는 알킬화 반응

일반식(Ⅲ)의 화합물에 Y-카르복실산을 적절한 융합제와 반응시키거나 Y-카르보닐할라이드를 적절한 염기존재하에서 반응시켜 일반식(Ⅳ)의 화합물을 제조할 수 있다. Y-카르복실산과 함께 사용할 수 있는 융합제로는 히드록시벤조트리아졸, 디알킬카보디이미드, 또는 이들의 혼합용액을 사용할 수 있다. 용매로는 디메틸포름아미드, 디클로로메탄, 또는 이들의 혼합용액 등을 사용할 수 있다.

[반응 3]

아미노보호기의 제거반응

아미노 보호기를 갖는 일반식(Ⅳ)의 화합물을 디클로로메탄 등의 적절한 유기용매에 용해시킨 뒤 트리플루오로아세트산등의 탈보호제를 반응시켜 보호기를 제거한다.

[반응 4]

아실화반응 또는 환원적 알킬화 반응

[반응 4-1]

아실화반응 (A가 -CO- 인 경우)

일반식(Ⅴ)의 화합물에 적절한 보호기가 부착된 시스테인(예를들어, N-t-부톡시카보닐-S-트리페닐메틸-L-시스테인)을 히드록시벤조트리아졸, 디알킬카보디이미드의 융합제를 N-메틸모르포린과 같은 적절한 염기 존재하에서 아실화 반응을 수행하면, A가 -CO- 인 일반식(Ⅵ)의 화합물을 제조할 수 있다.

[반응 4-2]

환원적 알킬화반응(A가 -CH₂- 인 경우)

일반식(Ⅴ)의 화합물에 적절한 보호기가 부착된 시스테인 알데히드(예를들어, N-t-부톡시카보닐-S-트리페닐메틸-L-시스테인 알데히드)를 반응시키고 나트륨 시아노보로하이드라이드 등의 환원제를 가하여 환원시키면 A가 -CH₂- 인 일반식(Ⅵ)의 화합물을 제조할 수 있다. 이때 KOAc 또는 3A 분자체등을 가하여 반응을 촉진시킬 수 있다.

[반응 5]

탈보호기 반응

아미노 보호기 및 설프히드릴기의 보호기로 보호된 일반식(Ⅵ)의 화합물에 트리플루오로아세트산 등의 산성조건하에서 트리에틸실란과 같은 카르보니움 이온 제거제를 가하여 아미노 보호기 및 설프히드릴 보호기를 동시에 제거하여 R₁이 수소인 일반식(Ⅰ)의 화합물을 제조할 수 있다.

[반응 6]

알킬화 및 탈보호기 반응

아미노 보호기 및 설프히드릴기의 보호기로 보호된 일반식(Ⅵ)의 화합물과 R₁할라이드를 K₂CO₃와 같은 적절한 염기 존재하에서 반응시켜 알킬화 반응을 수행하여 일반식(Ⅶ)의 화합물을 제조한 다음 반응5와 동일한 방법으로 탈보호기 반응을 수행하여 R₁이 수소가 아닌 일반식(Ⅰ)의 화합물을 제조할 수 있다.

본 발명에 따른 화합물의 약제학적으로 허용가능한 무독성 염은 염기성 잔기를 함유하는 본 발명의 화합물로부터 통상적인 방법으로 제조할 수 있다. 일반적으로, 염은 유기 염기를 화학량론적 양 또는 과량의 목적하는 염-형성 무기산 또는 유기산과 적합한 용매 또는 용매들의 다양한 배합물중에서 반응시켜 제조할 수 있다.

본 발명은 일반식(Ⅰ)로 표시되는 유사 펩타이드 유도체를 유효성분으로 함유하고 약제학적으로 허용가능한 담체를 함유하는 라스변이세포 성장억제 조성물을 포함한다. 본 발명에 따른 조성물은 락토즈, 옥수수전분 등의 부형제, 마그네슘 스테아레이트 등의 윤활제, 공지되어 사용가능한 유화제, 현탁제, 완충제, 등장화제 등을 포함할 수 있으며, 경우에 따라 감미제 및/또는 향미제를 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 조성물은 경구투여하거나, 정맥내, 복강내, 피하, 직장 및 국소 투여를 포함한 비경구 투여를 실시할 수 있다. 즉, 본 발명에 따른 조성물은 정제 또는 캡슐제 형태로, 또는 수성용제 또는 현탁제로서 투여할 수 있다. 경구용 정제의 경우 통상 사용되는 담체에는 락토즈 및 옥수수 전분이 포함되고, 마그네슘 스테아레이트와 같은 윤활제를 통상 가할 수 있다. 캡술제 형태의 경우 유용한 희석제로서 락토즈 및 건조 옥수수 분말을 포함할 수 있다. 경구용으로 수성 현탁제가 필요할 경우 활성성분을 유화제 및 현탁제를 포함할 수 있다. 경우에 따라 특정 감미제 및/또는 향미제를 가할 수 있다. 근육내, 복강내, 피하 및 정맥내 투여의 경우, 통상 활성 성분의 멸균 용액을 제조하고, 용액의 pH를 적합하게 조절할 수 있는 완충제로 포함할 수 있으며, 정맥내 투여의 경우 용질의 총 농도는 제제에 등장성이 부여되도록 조절할 수 있는 등장화제를 포함할 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 조성물은 pH가 7.4인 염수와 같은 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 수용액제의 형태가 될 수 있으며, 용액제의 형태로 국소적으로 환자의 근육내 혈류에 도입할 수 있다.

본 발명에 따른 화합물은 라스변이세포의 성장을 효과적으로 억제함으로써 결장암, 직장암, 췌장암, 또는 골수성 백혈병 등의 암환자에게 투여될 수 있으며, 그 투여용량은 통상 각 환자의 연령, 체중 및 반응, 및 환자의 증상에 따라 일반적으로 변화시킬 수 있는 용량, 예를들어 1일 약 0.1mg/kg 내지 약 20mg/kg, 바람직하게는 1일 0.5mg/kg 내지 약 10mg/kg 으로 투여될 수 있다.

이하, 본 발명을 실시예를 통하여 더욱 상세히 설명한다. 그러나, 이것이 본 발명의 범위를 제한하는 것은 아니다.

[참조예 1]

N-t-부톡시카르보닐-L-이소루이신 알데히드의 제조

[단계 1]

N-t-부톡시카르보닐-L-이소루이신-N-메틸, N-메톡시아미드

N,O-디메틸히드록시아민 (6.1g, 62.5 mmol)의 디클로로메탄(60 mL) 현탁액에 N-메틸모르폴린 (7.6 mL, 69.1 mmol)을 -10℃에서 적가한 후, 이 용액을 -10℃에서 보관하였다. 다른 용기에 N-t-부톡시카르보닐-L-이소루이신 (15g, 62.4 mmol)을 디클로로메탄(300 mL)에 녹이고 온도를 -20℃로 냉각한 후, N-메틸 모르폴린 (7.6 mL, 69.1 mmol)과 이소부틸클로로포르메이트(8.1 mL, 62.4 mmol)를 적가하였다. 적가하는 동안 온도는 -20℃를 유지시켰다. 5분 후에, 이 혼합물에 N,O-디메틸히드록시아민 용액을 적가한 후 상온에서 철야 교반하였다. 반응 혼합물에 물(100 mL)을 가한 뒤 에틸 아세테이트 (100 mL × 3)로 추출하였다. 유기층을 물(100 mL × 2)과 소금물 (100 mL)용액으로 세척한 뒤 MgSO₄로 여분의 물을 제거하고 농축하였다. 농축물을 EtOAc/n-Hex (1/4)용액으로 관 크로마토그래피한 후 농축하여 표제 화합물(15.1g, 89%)을 무색의 유상으로 얻었다.

[단계 2]

N-t-부톡시카르보닐-L-이소루이신 알데히드

리튬알루미늄 히드라이드 2.4 g (54.7 mmol)을 무수 테트라하이드로퓨란 300 mL에 현탁시키고 -45℃로 냉각시킨 다음, 여기에 30 mL의 무수 테트라하이드로퓨란에 녹인 N-t-부톡시카르보닐-L-이소로이신 N-메틸, N-메톡시아미드 (15 g, 54.7 mmol)용액을 소량씩 가하여 온도가 -45℃에서 -35℃ 사이가 되도록 하였다. 적가 완결 후, 냉각조를 제거하여 온도가 5℃가 되도록 한 다음, 다시 이 반응 용액을 -35℃로 냉각시킨 뒤, KHSO₄(12.7 g, 35 mL)수용액을 서서히 적가하였다. 적가가 완결되면 냉각조를 제거하여 온도를 상온으로 높이고, 1시간후에 셀라이트를 가하여 알루미늄염을 집합시킨 뒤, 반응 용액을 여과하고 알루미늄염은 EtOAc로 세척하였다. 모여진 유기층을 감압 농축하고 EtOAc를 가한 뒤 물 (100 mL)을 가하여 세척한 뒤 무수 Na₂SO₄로 여분의 물을 제거하고 농축하여 N-t-부톡시카보닐-L-이소로이신알데히드 (8.2 g, 69 %)을 무색의 유상으로 얻었다. 이때, 온도는 30℃를 넘지않도록 하였으며, 정제과정없이 다음 반응에 이용되었다.

[참조예 2]

N-t-부톡시카르보닐-S-트리페닐메틸 시스테인 알데히드의 제조

N-t-부톡시카르보닐-S-트리페닐메틸 시스테인을 사용하여 참조예 1과 동일한 방법으로 표제화합물을 제조하였다.

[실시예 1]

N-(1-나프토일)-N-(치오펜-2-일-메틸)-2(S)-[(2(R)-아미노-3-머캅토프로필)아미노]-3(S)-메틸펜틸아민

[단계 1]

1-(치오펜-2-일-메틸아미노)-2(S)-(t-부톡시카르보닐)아미노-3(S)-메틸펜틸아민

2-치오펜메틸아민 (1.3g, 11.6mmol)을 메탄올(15mL)에 녹이고 참조예 1에서 제조한 N-t-부톡시카보닐이소로이신 알데히드 (2.5g, 11.6 mmol), KOAc (1.14 g, 11.6 mmol)와 3A 분자체(3A molecular sieves) (0.5 g)을 가하였다. 여기에 11.6, ml의 소디움시아노보로하이드라이드 용액 (1M)을 적가한 후 실온에서 철야 교반하였다. 반응 혼합물의 침전물을 걸러낸 후 100 mL의 물을 가하고 EtOAc (100 mL)로 추출하였다. 유기층은 무수 MgSO₄로 여분의 물을 제거하고 농축하였다. 농축물을 EtOAc/n-Hex(1/2)용액으로 칼럼크로마토그래피하고 농축하여 목적 화합물 (1.62 g, 45%)을 노란 유상으로 얻었다.

[단계 2]

N-(1-나프토일)-N-(치오펜-2-일-메틸)아미노-2(S)-(t-부톡시카르보닐)아미노-3(S)-메틸펜틸아민

단계1에서 제조한 화합물 (0.5 g, 1.6mmol)을 디메틸포룸아마이드/디클로로메탄 (3 mL/ 7 mL)용액에 녹이고 1-나프토일산 (0.33 g, 1.92 mmol), EDCl (0.37 g, 1.93 mmol)와 HOBt (0.26 g, 1.92 mmol)를 가한 후 실온에서 5시간동안 교반하였다. 반응 혼합물에 물 (100 mL)을 가한 뒤 EtOAc (100 mL × 3)로 추출하였다. 유기층을 물 (100 mL × 2)과 포화 식염수 (100 mL)용액으로 세척한 뒤 무수 MgSO₄로 여분의 물을 제거하고 농축하였다. 농축물을 EtOAc/n-Hex (1/7)용액으로 칼럼크로마토그래피한 후 농축하여 목적 화합물 (0.58 g, 78%)을 노란 거품상으로 얻었다.

[단계 3]

N-(1-나프토일)-N-(치오펜-2-일-메틸)-2(S)-아미노-3(S)-메틸펜틸아민

단계2에서 제조한 화합물(0.5g, 1.07 mmol)을 디클로로메탄 (4.0 mL)에 녹인 뒤 트리플루오로아세틸산 (1.0 mL0를 가하여 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하여 목적 화합물(0.52 g, 100%)을 노란 유상으로 얻었다.

¹H NMR (CDCl₃) δ0.60 - 1.20 (m, 8H), 1.60(M, 1H), 3.40 (m, 2H), 4.50 (m, 3H), 6.80 - 8.40 (m, 10H), 12.20 (brs, 3H)

[단계 4]

N-(1-나프토일)-N-(치오펜-2-일-메틸)-2(S)-[2(R)-(t-부톡시카르보닐)아미노-3-트리페닐메틸치오프로필]아미노-3(S)-메틸펜틸아민

단계3에서 제조한 화합물 (0.52 g, 1.07 mmol)을 메탄올 (5 mL)에 녹이고 참조예 2에서 제조한 N-t-부톡시카르보닐-S-트리틸시스테인 알데히드 (0.8 g, 1.79 mmol), KOAc (0.28 g, 2.85mmol)과 3A 분자체 (1.0 g)을 가하였다. 반응용액에 1.2 mL 의 소디움시아노보로하이드라이드 용액 (1M)을 적가한 후 실온에서 철야 교반하였다. 반응 혼합물의 침전물을 여과하여 제거한 후, 여액에 100 ml의 물을 가하고 EtOAc(100mL)로 추출하여 무수 MgSO₄로 여분의 물을 제거하고 농축하였다. 농축물을 EtOAc/n-Hex/EtOH (20/100/1)용액으로 칼럼크로마토그래피하고 농축하여 의 목적 화합물 (0.22 g, 26%)을 투명한 유상으로 얻었다.

[단계 5]

N-(1-나프토일)-N-(치오펜-2-일-메틸)-2(S)-(2(R)-아미노-3-머캅토프로필)아미노-3(S)-메틸펜틸아민

단계4에서 제조한 화합물 (0.22 g, 0.28 mmol)을 디클로로메탄 (3.0 mL), 트리플루오로아세틸산 (0.9 mL) 및 트리에틸실란 (0.4 mL, 2.5 mmol)용액에 녹여 실온에서 17시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하고 헥산 (100 mL × 2)으로 세척 후 동결 건조하여 목적 화합물 (180 mg, 94%)을 트리플루오로아세틸산 염으로 얻었다.

¹H NMR(DMSO-d6+ TFA) δ0.80 - 1.50 (m, 8H), 2.00 (m, 1H), 2.80 - 3.80 (m, 8H), 4.70 (brs, 2H), 6.80-8.20 (m, 10H)

Analytical HPLC (gradient, 0.1 % TFA in 70 % Acetonitrile/0.1 % TFA in Water, 0-1 min (0/100), 1-21 min (0/100-100/0), 21-35 min (100/0), 35-4 min (100/0-0/100), Rt = 18.44 min.

[실시예 2 - 5]

상응하는 화합물을 출발물질로 하여 실시예 1과 동일한 방법으로 반응시켜 다음의 유사 펩타이드 유도체를 제조하였다.

[실시예 2]

N-(3-퀴놀린카르보닐)-N-(치오펜-2-일-메틸)-2(S)-[(2(R)-아미노-3-머캅토프로필)아미노]-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR(DMOS-d6+TFA) δ0.80-1.50(m,8H), 2.00(m,1H), 2.60-3.80(m,8H), 4.90(brs,2H), 6.90-9.50(m,9H);

analytical HPLC (gradient, 0.1% TFA in 70% Acetonitrile/0.1% TFA in water, 0-1 min(0/100), 1-21 min (0/100-100/0), 21-35 min (100/0), 35-45 min (100/0-0/100), Rt = 16.45 min

[실시예 3]

N-(1-나프토일)-N-(4-메톡시벤질)-2(S)-[(2(R)-아미노-3-머캅토프로필)아미노]-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR(DMSO-d6+TFA) δ 6.0-8.0 (m, 11H), 4.35 (q, 2H), 3.1-4.8 (m, 9H), 2.76 (s, 2H), 0.8-1.3 (m, 9H);

Anaytical HPLC (Gradient, 0.1 % TFA in 70 % Acetonitrile/0.1 % TFA in Water, 0-1 min (0/100), 1-21 min (0/100-100/0), 21-35 min (100/0), 35-45 min (100/0-0/100), Rt = 17.80 min at 220.

[실시예 4]

N-(1-나프토일)-N-(2-메톡시에틸)-2(S)-[(2(R)-아미노-3-머캅토프로필)아미노]-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR(CDCl3+TFA) δ 7.35-8.20 (m, 7H), 3.30-3.62 (m, 5H), 3.62-4.80 (m, 6H), 3.00-3.30 (m, 4H), 0.80-1.60 (m, 9H);

Anaytical HPLC (Gradient, 0.1 % TFA in 70 % Acetonitrile in Water, 0-1 min (0/100), 1-21 min (0/100-100/0), 21-35 min (100/0), 35-45 min (100/0-0/100), Rt=17.81 min., 18.24 min. at 220 nm.

[실시예 5]

N-(1-나프토일)-N-(3-에톡시프로필)-2(S)-[(2(R)-아미노-3-머캅토프로필)아미노]-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR(CDCl3 + TFA) δ 7.35-8.20 (m, 7H), 4.20-4.40 (m, 1H), 3.60-4.10 (m, 2H), 3.20-3.60 (m, 6H), 2.10-2.90 (m, 2H), 1.20-2.10 (m, 9H), 0.80-1.25 (m, 9H);

Anaytical HPLC (Gradient, 0.1 % TFA in 70 % Acetonitrile in Water, 0-1 min (0/100), 1-21 min (0/100-100/0), 21-35 min (100/0), 35-45 min (100/0-0/100), Rt=18.82 min., 19.07 min. at 220 nm.

[실시예 6]

N-(치오펜-2-일-카르보닐)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-[(2(R)-아미노-3-머캅토프로필)아미노]-3(S)-메틸펜틸아민 트리풀루오로아세트산염

[단계 1]

N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-(t-부톡시카르보닐아미노)-3(S)-메틸펜틸아민

2-치오펜메틸아민 대신에 1-아미노메틸나프탈렌 (3.00g, 19.1mmol)을 사용하여 실시예 1의 단계1과 동일한 방법으로 반응시켜 N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-(t-부톡시카르보닐아미노)-3(S)-메틸펜탄아민을 노란 유상(1.86 g, 28%)으로 얻었다.

TLC, RF = 0.20(EtOAc/n-Hex = 1/2)

1H NMR (CDCl3) δ7.40-8.25 (m, 7H), 4.65 (d, 1H), 4.15-4.40 (m, 2H), 3.60-3.80 (m, 1H), 2.70-2.90 (m, 2H), 1.40-1.70 (m, 13H), 0.80-1.00 (m, 6H)

[단계 2]

N-(치오펜-2일-카르보닐)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-(t-부톡시카르보닐아미노)-3(S)-메틸펜틸아민

단계1에서 제조한 화합물 (0.92 g, 2.60 mmol)을 10 ml의 무수 디메틸포롬아마이드에 녹이고 2-치오펜카르복실산 (1.0 g, 7.80 mmol)과 히드록시벤조트리아졸 (1.05 g, 7.80 mmol) 그리고 디이소프로필카보디이미드 (1.22 ml, 7.80 mmol)을 가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 철야 교반한 후 물 (100mL)을 가하고 에틸아세테이트 (100 ml × 3 )로 추출하였다. 추출한 유기층을 물 (100 mL × 2)과 소금물 (100 mL)으로 닦아준 뒤 MgSO₄로 여분의 물을 제거하고 농축하였다. 농축된 혼합물을 EtOAc/n-Hex(1/3)용액으로 칼럼크로마토그래피한 후 농축하여 목적물을 투명한 유상(0.59 g, 49%)으로 얻었다.

TLC Rf = 0.31 (EtOAc/n-Hex = 1 / 3)

1H NMR (CDCl3) δ7.9 (m, 3H), 7.4-7.6 (m, 5H), 7.15 (d, 1H), 6.83 (s, 1H), 5.0-5.6 (dd, 2H), 3.9-4.4 (m, 2H), 2.95 (d, 1H), 1.45 (s, 9H), 0.8-1.2 (m, 9H)

[단계 3]

N-(치오펜-2일-카르보닐)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-[2(R)-(t-부톡시카르보닐)아미노-3-트리페닐메틸치오프로필]아미노-3(S)-메틸펜틸아민

단계2에서 제조한 화합물 (0.59 g, 1.26 mmol)을 10mL 의 50% 트리플루오로아세틸산 용액에 녹이고 실온에서 2시간동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축한 후 트리에틸아민을 pH가 8-9에 이르도록 적가하였다. 이 혼합물을 메탄올 (10mL)에 녹이고 참조예 2에서 제조한 N-t-부톡시카보닐-S-트리페닐메틸-L-시스테인 알데히드 (0.68 g, 1.52 mmol)과 KOAc (0.15 g, 1.52 mmol) 그리고 3A 분자체 (0.5 g)을 가하였다. 여기에 1.52 mL 의 소디움시아노보로하이드라이드 용액 (1M)을 적가한 후 실온에서 철야 교반하였다. 반응 혼합물의 침전물을 걸러낸 후 100 mL의 물을 가하고 에틸아세테이트(100mL)로 추출하여 MgSO₄로 여분의 물을 제거하고 농축하였다. 농축물을 EtOAc/n-Hex(1/3)용액으로 칼럼크로마토그래피하고 농축하여 목적 화합물을 흰 거품상(350 mg, 35%)로 얻었다.

TLC Rf = 0.20 (EtOAc/n-Hex = 1/3)

1H NMR (CDCl3) δ6.8-8.0 (m, 25H), 5.1-5.5 (m, 2H), 4.8 (d, 1H), 4.4 (dd, 1H), 3.3-3.7 (m, 2H), 2.3-2.9 (m, 5H), 1.44 (s, 9H), 0.6-1.4 (m, 9H)

[단계 4]

N-(치오펜-2일-카르보닐)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-[(2(R)-아미노-3-머캅토프로필)아미노]-3(S)-메틸펜틸아민 트리풀루오로아세트산염

단계 3에서 제조한 화합물 (140mg, 0.18mmol)을 트리풀루오로아세틸산 (9 mL)과 트리에틸실란 (1 mL)용액에 녹여 실온에서 2시간동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하고 n-헥산 (100 mL × 2)으로 닦아준 후 동력 건조하여 표제 화합물을 트리풀루오로아세틸산 염(91mg, 74%)으로 얻었다.

HPLC (gradient, A; 0.1 % TFA-Water, B; 0.1 % TFA-70 % Acetonitrile, 1-21 min (B; 0 →100 %), 21-35 min (100 %), 35-55 min (100 →0 %), retention time = 18.38 min at 220 nm

1H NMR (CDCl3) δ 6.8-8.0 (m, 10H), 5.2-5.6 (q, 2H), 3.9-4.4 (m, 2H), 2.8-3.8 (m, 6H), 0.7-2.0 (m, 9H)

[실시예 7 - 13]

상응하는 화합물을 출발물질로 하여 실시예 6과 동일한 방법으로 반응시켜 다음의 유사 펩타이드 유도체를 제조하였다.

[실시예 7]

N-(3-클로로벤조일)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-[(2(R)-아미노-3-머캅토프로필)아미노]-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃) δ7.2-8.0 (m, 11H), 5.05 (s, 2H), 4.0-4.3 (m, 3H), 2.9-3.6 (m, 5H), 0.8-1.0 (m, 9H)

Anaytical HPLC (Gradient, 0.1 % TFA in 70 % Acetonitrile/0.1 % TFA-Water, 0-1 min (0/100), 1-21 min (0/100-100/0), 21-35 min (100/0), 35-45 min (100/0-0/100), retention time= 19.39 min at 220 nm.

[실시예 8]

N-(3,4-디클로로벤조일)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-[(2(R)-아미노-3-머캅토프로필)아미노]-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃) δ7.2-8.0 (m, 10H), 5.1 (s, 2H), 4.0-4.5 (m, 3H), 2.9-3.6 (m, 6H), 0.8-1.1 (m, 9H)

Anaytical HPLC (Gradient, 0.1 % TFA in 70 % Acetonitrile/0.1 % TFA-Water, 0-1 min (0/100), 1-21 min (0/100-100/0), 21-35 min (100/0), 35-45 min (100/0-0/100), retention time= 20.55 min at 220 nm.

[실시예 9]

N-(4-메톡시벤조일)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S )-[(2(R)-아미노-3-머캅토프로필)아미노]-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃) δ6.8-8.0 (m, 10H), 5.2-5.6 (dd, 2H), 4.6-4.8 (m, 1H), 4.4-4.6 (m, 1H), 3.8-4.1 (m, 2H), 2.6-3.5 (m, 8H), 0.6-2.0 (m, 9H)

Anaytical HPLC (Gradient, 0.1 % TFA in 70 % Acetonitrile/0.1 % TFA-Water, 0-1 min (0/100), 1-21 min (0/100-100/0), 21-35 min (100/0), 35-45 min (100/0-0/100), retention time= 19.05 min, 19.46 min at 220 nm.

[실시예 10]

N-(치오펜-2-일-메틸카르보닐)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-[(2(R)-아미노-3-머캅토프로필)아미노]-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃) δ 6.8-8.0 (m, 10H), 5.2 (d, 2H), 3.0-4.3 (m, 8H), 2.86 (bs, 2H), 0.8-1.3 (m, 9H)

Anaytical HPLC (Gradient, 0.1 % TFA in 70 % Acetonitrile/0.1 % TFA-Water, 0-1 min (0/100), 1-21 min (0/100-100/0), 21-35 min (100/0), 35-45 min (100/0-0/100), retention time= 18.36 min at 220 nm.

[실시예 11]

N-(2-메틸벤조일)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-[(2(R)-아미노-3-머캅토프로필)아미노]-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃) δ7.20-8.40 (m, 11H), 4.70-5.20 (m, 2H), 3.75-4.30 (m, 2H), 2.50-3.75 (m, 6H), 2.40 (s, 3H), 1.10-2.00 (m, 3H), 0.40-1.00 (m, 6H)

Anaytical HPLC (Gradient, 0.1 % TFA in 70 % Acetonitrile/0.1 % TFA-Water, 0-1 min (0/100), 1-21 min (0/100-100/0), 21-35 min (100/0), 35-45 min (100/0-0/100), retention time=17.97 min., 18.74 min. at 220 nm.

[실시예 12]

N-(4-메틸벤조일)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-[(2(R)-아미노-3-머캅토프로필)아미노]-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃) δ7.20-8.20 (m, 11H), 4.90-5.30 (m, 2H), 3.75-4.40 (m, 2H), 2.70-3.70 (m, 6H), 2.40(S, 3H), 1.20-2.00 (m, 3H), 0.40-1.00 (m, 6H)

Anaytical HPLC (Gradient, 0.1 % TFA in 70 % Acetonitrile/0.1 % TFA-Water, 0-1 min (0/100), 1-21 min (0/100-100/0), 21-35 min (100/0), 35-45 min (100/0-0/100), retention time=18.26 min. at 220 nm.

[실시예 13]

N-(페닐아세틸)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-[(2(R)-아미노-3-머캅토프로필)아미노]-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃) δ6.8-7.4 (m, 9H), 2.8-4.7 (m, 15H), 0.7-1.4 (m, 9H)

Anaytical HPLC (Gradient, 0.1 % TFA in 70 % Acetonitrile/0.1 % TFA-Water, 0-1 min (0/100), 1-21 min (0/100-100/0), 21-35 min (100/0), 35-45 min (100/0-0/100), retention time=15.98 min at 220 nm.

[실시예 14]

N-(1-나프토일)-N-(치오펜-2-일-메틸)-2(S)-[(2(R)-아미노-3-머캅토프로필)- N-메틸아미노]-3(S)-메틸펜틸아민

[단계 1]

N-(1-나프토일)-N-(치오펜-2-일-메틸)-2(S)-[N-(2(R)-(t-부톡시카르보닐아미노)-3-트리페닐치오프로필)]-N-메틸아미노]-3(S)-메틸펜틸아민

실시예1의 단계4에서 제조한 N-(1-나프토일)-N-(치오펜-2-일-메틸)-2(S)-[(2(R)-(t-부톡시카르보닐아미노)-3-트리페닐치오프로필아미노]-3(S)-메틸펜틸아민(0.21 g, 0.26 mmol)을 10mL의 디메틸포룸아마이드에 녹이고 K₂CO₃(1 g)를 가하여 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물에 물(100mL)을 가한 후 EtOAc(100mL)로 추출하였다. 유기층을 물(100mL × 2)과 소금물 (100 mL)용액으로 세척한 뒤 MgSO₄로 여분의 물을 제거하고 농축하였다. 농축물을 EtOAc/ n-헥산 (1/3)용액으로 칼럼크로마토그래피한 후 농축하여 목적 화합물을 흰 거품상(100 mg, 47%)으로 얻었다.

TLC Rf = 0.41 (EtOAc/n-Hex = 1/3)

¹H NMR (CDCl₃) δ6.8-8.0 (m, 25H), 5.2-5.8 (m, 2H), 4.85 (d, 1H), 3.6-3.8 (m, 2H), 3.2-3.5 (m, 1H), 1.9-3.0 (m, 8H), 1.43 (d, 9H), 0.6-1.4 (m, 9H)

[단계 2]

N-(1-나프토일)-N-(치오펜-2-일-메틸)-2(S)-[(2(R)-아미노-3-머캅토프로필)-N-메틸아미노]-3(S)-메틸펜틸아민

단계1에서 제조한 화합물 (80 mg, 0.1 mmol)을 트리플루오로아세틸산 (4.5 mL)와 트리에틸실란 (0.5 mL)용액에 녹여 실온에서 2시간동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하고 n-Hex (100 mL × 2)으로 닦아준 후 동결 건조하여 표제 화합물을 트리플루오로아세틸산 염(35.8 mg, 52%)으로 얻었다.

HPLC (gradient, A; 0.1 % TFA-Water, B; 0.1 % TFA-70 % Acetonitrile, 1-21 min (B; 0 →100%), 21-35 min (B; 100 %), 35-55 (B; 100 →0 %)), retention time = 19.05 min, 19.46 min at 220 nm;

¹H NMR (CDCl₃) δ6.8-8.0 (m, 10H), 5.2-5.6 (dd, 2H), 4.6-4.8 (m, 1H), 4.4-4.6 (m, 1H), 3.8-4.1 (m, 2H), 2.6-3.5 (m, 8H), 0.6-2.0 (m, 9H);

[실시예 15 - 24]

상응하는 화합물을 출발물질로 하여 실시예 14와 동일한 방법으로 반응시켜 다음의 유사 펩타이드 유도체를 제조하였다.

[실시예 15]

N-(3,4-디클로로벤조일)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-[(2(R)-아미노-3-머캅토프로필)-N-메틸아미노]-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃) δ7.2-8.0 (m, 10H), 5.1 (s, 2H), 4.0-4.6 (m, 3H), 2.7-3.3 (m, 8H), 0.8-1.35 (m, 9H)

Anaytical HPLC (Gradient, 0.1 % TFA in 70 % Acetonitrile/0.1 % TFA-Water, 0-1 min (0/100), 1-21 min (0/100-100/0), 21-35 min (100/0), 35-45 min (100/0-0/100), retention time= 21.69 min, 22.06 min at 220 nm.

[실시예 16]

N-(2,4-디플루오로벤조일)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-[(2(R)-아미노-3-머캅토프로필)-N-메틸아미노]-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃) δ6.8-8.0 (m, 10H), 5.0 (dd, 2H), 4.55 (dd, 1H), 3.8-4.1 (m, 2H), 2.8-3.2 (m, 5H), 2.7 (s, 3H), 0.8-1.36 (m, 9H)

Anaytical HPLC (Gradient, 0.1 % TFA in 70 % Acetonitrile/0.1 % TFA-Water, 0-1 min (0/100), 1-21 min (0/100-100/0), 21-35 min (100/0), 35-45 min (100/0-0/100), retention time= 20.05 min at 220 nm.

[실시예 17]

N-(치오펜-2-일-메틸카르보닐)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-[(2(R)-아미노-3-머캅토프로필)-N-메틸아미노]-3(S)-메틸펜틸아민

[실시예 18]

N-(4-메톡시벤조일)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-[(2(R)-아미노-3-머캅토프로필)-N-메틸아미노]-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃) δ6.8-8.0 (m, 11H), 5.0-5.2 (dd, 2H), 4.6 (m, 1H), 4.3 (m, 1H), 3.8-4.1 (m, 5H), 2.6-3.3 (m, 8H), 0.6-2.0 (m, 9H)

Anaytical HPLC (Gradient, 0.1 % TFA in 70 % Acetonitrile/0.1 % TFA-Water, 0-1 min (0/100), 1-21 min (0/100-100/0), 21-35 min (100/0), 35-45 min (100/0-0/100), retention time= 19.83 min at 220 nm.

[실시예 19]

N-(2-치오펜-2-일-메틸카르보닐)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-[(2(R)-아미노-3-머캅토프로필)-N-메틸아미노]-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃) δ6.8-8.0 (m, 10H), 5.2 (d, 2H), 3.0-4.3 (m, 8H), 2.86 (bs, 2H), 0.8-1.3 (m, 9H)

Anaytical HPLC (Gradient, 0.1 % TFA in 70 % Acetonitrile/0.1 % TFA-Water, 0-1 min (0/100), 1-21 min (0/100-100/0), 21-35 min (100/0), 35-45 min (100/0-0/100), retention time= 19.22 min at 220 nm.

[실시예 20]

N-(2-치오펜-2-일-메틸카르보닐)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-[(2(R)-아미노-3-머캅토프로필)-N-프로필아미노]-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃) δ6.8-8.0 (m, 10H), 5.18 (dd, 2H), 2.8-4.2 (m, 12H), 0.6-1.4 (m, 14H)

Anaytical HPLC (Gradient, 0.1 % TFA in 70 % Acetonitrile/0.1 % TFA-Water, 0-1 min (0/100), 1-21 min (0/100-100/0), 21-35 min (100/0), 35-45 min (100/0-0/100), retention time= 18.52 min at 220 nm.

[실시예 21]

N-(4-메톡시벤조일)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-[(2(R)-아미노-3-머캅토프로필)-N-시아노메틸아미노]-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃) δ6.76-7.9 (m, 11H), 5.03 (dd, 2H), 4.0-4.2 (m, 2H), 3.7-3.9 (m, 5H), 2.7-3.6 (m, 8H), 0.6-1.4 (m, 9H)

Anaytical HPLC (Gradient, 0.1 % TFA in 70 % Acetonitrile/0.1 % TFA-Water, 0-1 min (0/100), 1-21 min (0/100-100/0), 21-35 min (100/0), 35-45 min (100/0-0/100), retention time= 17.93 min at 220 nm.

[실시예 22]

N-(2-메틸벤조일)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-[(2(R)-아미노-3-머캅토프로필)-N-메틸아미노]-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃) δ7.10-8.00 (m, 11H), 4.80-5.20 (m, 2H), 3.60-4.70 (m, 4H), 2.50-3.40 (m, 7H), 2.35 (s, 3H), 1.40-1.80 (m, 3H), 0.40-1.00 (m, 6H)

Anaytical HPLC (Gradient, 0.1 % TFA in 70 % Acetonitrile/0.1 % TFA-Water, 0-1 min (0/100), 1-21 min (0/100-100/0), 21-35 min (100/0), 35-45 min (100/0-0/100), retention time=19.22 min., 20.87 min. at 220 nm.

[실시예 23]

N-(4-메틸벤조일)- N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-[(2(R)-아미노-3-머캅토프로필)-N-메틸아미노]-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃) δ7.00-8.00 (m, 11H), 4.80-5.30 (m, 2H), 3.60-4.70 (m, 2H), 2.40-3.60 (m, 9H), 2.30 (s, 3H), 1.40-1.80 (m, 3H), 0.40-1.00 (m, 6H)

Anaytical HPLC (Gradient, 0.1 % TFA in 70 % Acetonitrile/0.1 % TFA-Water, 0-1 min (0/100), 1-21 min (0/100-100/0), 21-35 min (100/0), 35-45 min (100/0-0/100), retention time=20.50 min., 21.98 min. at 220 nm.

[실시예 24]

N-(페닐아세틸)-N-(4-메톡시벤질)-2(S)-[(2(R)-아미노-3-머캅토프로필)-N-메틸아미노]-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃) δ6.8-7.4 (m, 9H), 3.6-4.8 (m, 9H), 2.8-3.3 (m, 7H), 0.7-1.4 (m, 9H)

Anaytical HPLC (Gradient, 0.1 % TFA in 70 % Acetonitrile/0.1 % TFA-Water, 0-1 min (0/100), 1-21 min (0/100-100/0), 21-35 min (100/0), 35-45 min (100/0-0/100), retention time= 16.43 min at 220 nm.

[실시예 25]

N-(1-나프토일)-N-(치오펜-2-일-메틸)-2(S)-[(2(R)-아미노-3-머캅토프로필)-N-아세틸아미노]-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃) δ6.8-8.0 (m, 10H), 4.4-4.8 (m, 2H), 3.1-4.1 (m, 6H), 2.8-3.0 (m, 2H), 2.37 (s, 3H), 0.8-1.6 (m, 9H)

Anaytical HPLC (Gradient, 0.1 % TFA in 70 % Acetonitrile/0.1 % TFA-Water, 0-1 min (0/100), 1-21 min (0/100-100/0), 21-35 min (100/0), 35-45 min (100/0-0/100), retention time= 18.62 min at 220 nm.

[실시예 26]. N-(벤조일)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-(시스테이닐아미노)-3(S)-메틸펜틸아민 트리풀루오로아세트산염

[단계 1]

치오펜-2-일-메틸아민 대신에 1-아미노메틸나프탈렌 (3.00g, 19.1mmol)을 사용하여 실시예 1의 단계1과 동일한 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 노란 유상(1.86 g, 28%)으로 얻었다 :

TLC, Rf = 0.20 (EtOAc/n-Hex = 1/2)

1H NMR (CDCl₃) δ7.40-8.25 (m, 7H), 4.65 (d, 1H), 4.15-4.40 (m, 2H), 3.60-3.80 (m, 1H), 2.70-2.90 (m, 2H), 1.40-1.70 (m, 13H), 0.80-1.00 (m, 6H)

[단계 2]

n-(벤조일)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-(t-부톡시카르보닐아미노)-3(S)-메틸펜틸아민

단계 1에서 제조한 화합물 (0.15 g, 0.423 mmol)을 10 mL의 무수 디메틸포룸아마이드에 녹이고 벤조일산 (0.518 g, 0.423 mmol)와 히드록시벤조트리아졸 (0.086 g, 0.653 mmol) 그리고 디이소프로필카보이미드 (0.081 g, 0.423 mmol)을 가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 철야 교반한 후 물 (100 mL)을 가하고 에틸아세테이트 (100 mL × 3)로 추출하였다. 추출한 유기층을 물 (100mL × 2)과 소금물(100 mL)으로 닦아준 뒤 MgSO₄로 여분의 물을 제거하고 농축하였다. 농축된 혼합물을 EtOAc/ n-헥산 (1/3) 용액으로 칼럼크로마토그래피한 후 농축하여 목적물을 투명한 유상(0.09 g, 46%)으로 얻었다 :

TLC Rf = 0.36 (EtOAc/n-Hex = 1 / 3);

¹H NMR (CDCl₃) δ7.2-8.2 (m, 12H), 4.98 (s, 2H), 4.78 (d, 1H), 3.9-4.3 (m, 2H), 2.86 (d, 1H), 1.55 (s, 9H), 0.65-1.2 (m, 9H) :

[단계 3]

N-(벤조일)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-[N-t-부톡시카르보닐-S-트리페닐메틸-L-시스테이닐]아미노-3(S)-메틸펜틸아민

단계 2에서 제조한 화합물 (0.09 g, 0.196 mmol)을 10mL의 50% 트리플루오로아세틸산 용액에 녹이고 실온에서 2시간동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축한 후, 무수 디메틸포름아마이드/메틸렌클로라이드 용매하에서 N-메틸모르포린 (1 mL)과 N-t-부톡시카보닐-S-트리페닐메틸-L-시스테인 (365 mg, 0.784 mmol), 히드록시벤조트리아졸 (119 mg, 0.882 mmol) 그리고, 디이소프로필카보이미드 (150 mg, 0.784 mmol)을 가하여 철야 교반하였다. 이 반응액에 물을 가하고 에틸아세테이트 (100 mL × 3)로 추출하였다. 추출한 유기층을 물 (100 mL × 2)과 소금물 (100 mL)으로 닦아준 뒤 MgSO₄로 여분의 물을 제거하고 농축하였다. 농축된 혼합물을 EtOAc/n-Hex (1/3) 용액으로 칼럼크로마토그래피한 후 농축하여 목적물을 투명한 유상(121 mg, 76.6%)으로 얻었다

TLC Rf = 0.645 (EtOAc/n-Hex = 1/1)

¹H NMR (CDCl₃) δ7.0-7.9 (m, 27H), 6.65 (d, 1H), 4.99 (s, 2H), 4.78 (d, 1H), 4.0-4.3 (m, 2H), 3.05 (d, 1H), 2.6-2.8 (m, 2H), 1.40 (s, 9H), 0.8-1.1 (m, 9H)

[단계 4]

N-(벤조일)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-(시스테이닐아미노)-3(S)-메틸펜틸아민 트리풀루오로아세트산염

단계 3에서 제조한 화합물 (0.121 g, 0.150 mmol)을 트리플루오로아세틸산 (9mL)와 트리에틸실란 (1 mL)용액에 녹여 실온에서 2시간동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하고 n-헥산 (100 mL × 2)으로 닦아준 후 동결 건조하여 표지 화합물을 트리플루오로아세틸산 염(52 mg, 61 %)으로 얻었다 :

HPLC (gradient, A; 0.1 % TFA-Water, B; 0.1 % TFA-70 % Acetonitrile, 1-21 min (B; 0 →100 %), 21-35 min (100 %), 35-55 min (100 →0 %), retention time = 15.49 min at 220 nm;

¹H NMR (CDCl₃) δ7.2-8.2 (m, 12H), 4.99 (s, 2H), 3.8-4.4 (m, 3H), 3.05 (bs, 3H), 0.8-1.2 (m, 9H) :

[실시예 27 - 57]

상응하는 화합물을 출발물질로 하여 실시예 26와 동일한 방법으로 반응시켜 다음의 유사 펩타이드 유도체를 제조하였다.

[실시예 27]

N-(1-나프토일)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-(시스테인닐아미노)-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃) δ7.2-8.2 (m, 14H), 4.99 (s,2H), 3.8-4.4 (m, 3H), 3.05 (bs, 3H), 0.8-1.2 (m, 9H)

Anaytical HPLC (Gradient, 0.1 % TFA in 70 % Acetonitrile/0.1 % TFA-Water, 0-1 min (0/100), 1-21 min (0/100-100/0), 21-35 min (100/0), 35-45 min (100/0-0/100), retention time=20.00 min.

[실시예 28]

N-(3-클로로벤조일)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-(시스테인닐아미노)-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃) δ7.2-8.2 (m, 11H), 4.99 (s, 2H), 3.8-4.4(m, 3H), 3.05 (bs, 3H), 0.8-1.2 (m, 9H)

Anaytical HPLC (Gradient, 0.1 % TFA in 70 % Acetonitrile/0.1 % TFA=Water, 0-1 min (0/100), 1-21 min (0/100-100/0), 21-35 min (100/0), 35-45 min (100/0-0/100), retention time= 19.82 min at 220 nm.

[실시예 29]

N-(3-브로모페닐아세틸)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S) -(시스테인닐아미노)-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃) δ7.0-8.0 (m, 11H), 5.12(dd, 2H), 4.1-4.3 (m, 3H), 3.64 (dd, 2H), 2.9-3.2 (m, 3H), 0.7-1.4 (m, 9H)

Anaytical HPLC (Gradient, 0.1 % TFA in 70 % Acetonitrile/0.1 % TFA-Water, 0-1 min (0/100), 1-21 min (0/100-100/0), 21-35 min (100/0), 35-45min (100/0-0/100), retention time= 20.26 min at 220 nm.

[실시예 30]

N-(4-메톡시벤조일)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-(시스테인닐아미노)-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃) δ6.80-8.20 (m, 11H), 5.10-5.40 (b, 1H), 4.30-4.70 (b, 2H), 3.82 (s, 3H), 2.80-3.30 (m, 2H), 1.40-2.00 (m, 4H), 0.40-1.40 (m, 8H)

[실시예 31]

N-(크로로아세틸)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-(시스테인닐아미노)-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃+ TFA) δ 7.00-8.00 (m, 7H), 5.00-5.40 (dd, 2H), 4.00-4.60 (m, 4H), 2.90-3.40 (m, 3H), 1.50-2.00 (m, 2H), 0.40-1.50 (m, 8H)

[실시예 32]

N-(2,4-디플루오로벤조일)- N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-(시스테인닐아미노)-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃+ TFA) δ 6.80-8.00 (m, 10H), 5.00 (s, 2H), 4.20-4.60 (m, 2H), 3.80-4.20 (m, 1H), 2.80-3.30 (m, 2H), 1.40-2.00 (m, 2H), 0.40-1.40 (m, 8H)

[실시예 33]

N-(크로톤일)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-(시스테인닐아미노)-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃+ TFA) δ 7.00-8.00 (m, 7H), 6.20 (d, 1H), 4.80-5.40 (m, 2H), 4.00-4.60 (m, 3H), 2.80-3.30 (m, 3H), 1,72-2.00 (m, 2H), 1.47-1.70 (m, 2H), 0.60-1.47 (m, 8H)

[실시예 34]

N-(시클로프로판노카보닐)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-(시스테인닐아미노)-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃+ TFA) δ 7.00-8.00 (m, 7H), 5.00-5.60 (dd, 2H), 4.10-4.60 (m, 2H), 2.90-3.30 (m, 2H), 1.50-2.00 (m, 4H), 0.60-1.50 (m, 12H)

[실시예 35]

N-(아세틸)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-(시스테인닐아미노)-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃+ TFA) δ 7.00-8.00 (m, 7H), 5.10 (dd, 1H), 4.25-4.80 (m, 2H), 4.00-4,23 (m, 1H), 2.90-3.50 (m, 2H), 2.32 (s, 3H), 1.50-2.00 (m, 3H), 0.60-1.50 (m, 8H)

[실시예 36]

N-(치오펜-2일-메틸카르보닐)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-(시스테인닐아미노)-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃+ TFA) δ 6.80-8.00 (m, 10H), 5.00-5.42 (dd, 2H), 4.22-4.60 (m, 2H), 3.90-4.20 (m, 2H), 2.80-3.20 (m, 2H), 2.52-2.70 (m, 1H), 1.50-2.00 (m, 2H), 0.40-1.50 (m, 8H)

[실시예 37]

N-(페녹시아세틸)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-(시스테인닐아미노)-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃+ TFA) δ 6.70-8.00 (m, 12H), 5.13 (d, 1H), 4.62-5.08 (dd, 2H), 4.33-4.60 (m, 2H), 4.00-4.30 (m, 1H), 2.90-3.30 (m, 2H), 1.50-2.00 (m, 3H), 0.40-1.50 (m, 8H)

[실시예 38]

N-(치오펜-2일-카보닐)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-시스테인닐아미노)-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃+ TFA) δ 6.90-8.00 (m, 10H), 4.20-4.80 (b, 1H), 3.00-3.60 (b, 1H), 1.50-2.00 (m, 2H), 0.40-1.50 (m, 13H)

[실시예 39]

N-(2-메틸벤조일)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-(시스테인닐아미노)-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃+ TFA) δ 7.20-8.00 (m, 11H), 5.00 (b, 2H), 4.40 (b, 2H), 2.80-3.30 (m, 2H), 2.40 (s, 3H), 1.50-2.00 (m, 3H), 0.40-1.50 (m, 8H)

[실시예 40]

N-(펜타노일)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-(시스테인닐아미노)-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃+ TFA) δ 7.00-8.00 (m, 7H), 5.10 (dd, 2H), 4.41 (m, 2H), 4.00-4.21(m, 1H), 2.80-3.30 (m, 2H), 2.40-2.62 (m, 1H), 1.40-2.00 (m, 3H), 1.10-1.40 (m, 4H), 0.60-1.40 (m, 11H)

[실시예 41]

N-(4-메틸벤조일)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-(시스테인닐아미노)-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃+ TFA) δ 7.00-8.00 (m, 11H), 5.10 (m, 2H), 4.20-4.60 (m, 2H), 3.80-4.05 (m, 1H), 2.70-3.20 (m, 2H), 2.32 (s, 3H), 1.40-2.00 (m, 2H), 0.60-1.40 (m, 8H)

[실시예 42]

N-(프로피온일)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-(시스테인닐아미노)-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃+ TFA) δ 7.00-8.10 (m, 7H), 4.90-5.40 (m, 2H), 4.00-4.90 (m, 2H), 2.80-3.40 (m, 2H), 2.40-2.80(m, 2H), 1.50-2.00 (m, 3H), 1.20-1.50 (m, 3H), 0.60-1.50 (m, 8H)

[실시예 43]

N-(2-브로모이소부틸일)- N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-(시스테인닐아미노)-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃+ TFA) δ 7.00-8.20 (m, 7H), 6.00 (d, 1H), 5.20 (m, 1H), 4.20-4.80 (m, 2H), 2.80-3.50 (m, 3H), 1.90-2.20 (m, 3H), 1.50-1.90 (m, 4H), 0.40-1.50 (m, 9H)

[실시예 44]

N-(2-브로모프로피온닐)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-(시스테인닐아미노)-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃+ TFA) δ 6.80-8.00 (m, 7H), 4.80-5.40 (m, 2H), 3.80-4.80 ( m, 2H), 2.80-3.30 (m, 2H), 1.40-2.20 (m, 4H), 0.40-1.40 (m, 11H)

[실시예 45]

N-(3-브로모프로피온닐)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-(시스테인닐아미노)-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃+ TFA) δ 7.00-8.00 (m, 7H), 6.40 (m, 2H), 5.82 (d, 1H), 4.82-5.30 (dd, 2H), 3.90-4.60 (m, 3H), 2.70-3.20 (m, 3H), 1.40-2.00 (m, 2H), 0.40-1.40 (m, 8H)

[실시예 46]

N-(이소부틸카르보닐)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-(시스테인닐아미노)-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃+ TFA) δ 7.00-8.00 (m, 7H), 4.90-5.40 (dd, 2H), 4.30-4.60 (m, 2H), 4.00-4.20 (m, 1H), 3.08-3.40 (m, 1H), 2.70-3.07 (m, 2H), 1.50-2.00 (m, 2H), 1.00-1.50 (m, 6H), 0.60-1.00 (m, 8H)

[실시 예 47]

N-(4-크로로부탄카르보닐)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-(시스테인닐아미노)-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃+ TFA) δ 7.00-8.00 (m, 7H), 4.90-5.40 (m, 2H), 4.30-4.80 (m, 1H), 3.40-4.00 (m, 2H), 2.40-3.40 (m, 3H), 2.00-2.20 (m, 1H), 1.50-2.00 (m, 3H), 0.40-1.50 (m, 11H)

[실시예 48]

N-(3-클로로프로피온닐)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-(시스테인닐아미노)-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃+ TFA) δ 7.00-8.00 (m, 7H), 6.42 (bs, 1H), 5.90 (m, 1H), 4.90-5.40 (m, 2H), 4.20-4.60 (m, 2H), 2.80-3.20 (m, 2H), 1.50-2.00 (m, 2H), 1.20-1.50 (m, 3H), 0.40-1.20 (m, 8H)

[실시예 49]

N-(에틸숙신닐)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-(시스테인닐아미노)-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃+ TFA) δ 7.00-8.10 (m, 7H), 4.97-5.40 (m, 2H), 4.36-4.80 (m, 2H), 3.90-4.35 (m, 3H), 3.72 (dd, 1H), 2.40-3.40 (m, 6H), 1.58 (bs, 1H), 1.20-1.40 (m, 5H), 0.60-1.20 ( m, 6H)

[실시예 50]

N-(디클로로아세틸)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-(시스테인닐아미노)-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃+ TFA) δ 7.00-8.05 (m, 7H), 6.20 (s, 1H), 5.00-5.40 (dd, 2H), 4.20-4.60 (m, 2H), 3.12-3.40 (m, 1H), 2.80-3.10 (m, 2H), 1.50-2.00 (m, 2H), 0.60-1.50 (m, 8H)

[실시예 51]

N-시클로부탄카보닐)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-(시스테인닐아미노)-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃+ TFA) δ 7.00-8.00 (m, 7H), 5.02 (dd, 2H), 4.21-4.70 (m, 2H), 4.10 (bs, 1H), 3.50( m, 1H), 2.80-3.37 (m, 2H), 2.10-2.50 ( m, 2H), 1.63-2.08 ( m, 2H), 1.48-1.63 ( m, 1H), 0.60-1.45 (m, 10H)

[실시예 52]

N-(아크릴로일)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-(시스테인닐아미노)-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃+ TFA) δ 7.00-8.05 (m, 7H), 6.50 (m, 1H), 5.90 (m, 1H), 4.90-5.40 (dd, 2H), 4.15-4.70 (m, 3H), 2.80-3.40 (m, 3H), 1.50-2.00 (m, 2H), 0.40-1.50 (m, 8H)

[실시예 53]

N-(벤질옥시아세틸)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-(시스테인닐아미노)-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃+ TFA) δ 7.00-8.10 (m, 12H), 4.92 ( bs, 2H), 4.00-4.90 (m, 5H), 2.80-3.30 (m, 2H), 1.50-2.00 (m, 2H), 0.40-1.50 (m, 10H)

[실시예 54]

N-(4-니트로벤조일)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-(시스테인닐아미노)-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃+ TFA) δ 7.00-8.40 (m, 11H), 4.90-5.45 (b, 1H), 4.20-4.90 (m, 2H), 3.00-3.65 (m, 2H), 1.50-2.00 (m, 2H), 0.40-1.50 (m, 10H)

[실시예 55]

N-(3,4-디클로로벤조일)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-(시스테인닐아미노)-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃+ TFA) δ 7.00-8.05 (m, 10H), 5.21 (m, 1H), 4.00-4.80 (b, 1H), 2.80-3.50 (m, 2H), 1.50-2.00 (m, 3H), 0.40-1.50 (m, 10H)

[실시예 56]

N-(3,5-디니트로벤조일)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-(시스테인닐아미노)-3(S)-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃+ TFA) δ 7.00-9.03 (m, 10H), 5.02 (s, 1H), 4.10-4.70 (m, 2H), 2.90-3.40 (m, 2H), 1.40-2.00 (m, 2H), 0.40-1.40 (m, 10H)

[실시예 57]

N-(3,4,5-트리메톡시벤조일)-N-(1-나프탈렌메틸)-2(S)-시스테인닐아미노)-3(S )-메틸펜틸아민

¹H NMR (CDCl₃+ TFA) δ 6.80-8.10 (m, 9H), 5.20 (d, 1H), 4.40-4.62 (m, 2H), 4.00-4.38 (m, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.60 (s, 6H), 3.00-3.38 (m, 2H), 1.50-2.00 (m, 2H), 0.40-1.50 (m, 9H)

[시험예 1]

인체 암세포주에 대한 증식억제 시험

K-라스의 돌연변이로 암화된 인체 암세포주인 NCl-H460(ATCC HTD-177)를 100 ul 배지(10% FBS (fetal bovine serum)가 포함된 DMEM (Dulbecco's modified Eagle's medium) 배지)에 부유시켜 96 웰 플레이트(well plate)에 분주하고, 흡광도 측정용 대조군에는 배지만을 가하여 37 ℃, 5 % CO₂하에서 24시간 동안 배양하였다.

실시예에서 제조한 화합물을 배지에 용해시켜 1, 5, 10, 25, 50 uM 농도의 시료를 제조한 다음, 이들 시료를 NCl-H460 함유 웰(well) 및 대조군 웰(well)에 100 ul씩 첨가하여 37 ℃, 5 % CO₂하에서 120시간 동안 배양하였다.

배양된 플레이트(plate)에 0.1mg의 3-(4,5-디메틸치아졸-2-일)-2,5-디페닐-2H-테트라졸리움브로마이드(MTT)를 모든 웰(well)에 가해 주고 다시 37 ℃, 5 % CO₂하에서 4시간 동안 배양한 다음, 배지를 완전히 제거하고 HCl-이소프로필 알콜 혼합액을 100 ul씩 가한 후 가볍게 3분간 진탕하였다. 마이크로프랫트 리더(microplate reader, DL1000, Dynatech Laboratories Co.)로 570 nm에서 흡광도를 측정하였으며, 이를 근거로하여 세포성장을 50% 억제하는 농도(IC₅₀)를 구하였다. 그 결과는 표 1과 같다.

[표 1]

상기 표1의 결과로부터 본 발명에 따른 일반식(Ⅰ)의 화합물은 매우 우수한 라스변이세포 증식억제효과를 가지고 있음을 확인할 수 있다.

Claims

하기 일반식(Ⅰ)로 표시되는 유사 펩타이드 유도체 또는 이들의 무독성염.

상기에서 R₁은 수소, 직쇄 또는 분지상의 C₁- C₃알킬, 시아노로 치환된 직쇄 또는 분지상의 C₁- C₃알킬, 또는 아세틸이고, A 는 -CH₂- 또는 -CO-이다. 또한, X는 나프탈렌, 치오펜-2-일, C₁- C₃알콕시로 치환된 페닐, 또는 C₁- C₃알콕시로 치환된 C₁- C₃알킬이고, Y는 나프탈렌, 퀴놀린, 치오펜-2-일, 치오펜-2-일-메틸, 페녹시메틸, 벤질옥시메틸, 에톡시카르보닐에틸, 치환기를 갖거나 갖지 않는 페닐, 치환기를 갖거나 갖지 않는 페닐 메틸, 치환기를 갖거나 갖지 않는 직쇄 또는 분지상의 C₁- C₅알킬 또는 알케닐, 또는 C₃- C₅시클로알킬이다.
제1항에 있어서,

틸아민 으로 구성된 군으로부터 선택된 것을 특징으로 하는 유사 펩타이드 유도체 또는 이들의 무독성염.
일반식(Ⅱ)의 화합물에 X-메틸아민 및 환원제를 반응시켜 일반식(Ⅲ)의 화합물을 제조한 다음, Y-카르복실산을 융합제와 함께 반응시키거나 Y-카르보닐할라이드를 염기존재하에 반응시켜 일반식(Ⅳ)의 화합물을 제조한 후 탈보호기시켜 일반식(Ⅴ)의 화합물을 제조한 다음, 아실화 또는 알킬화 반응을 수행하여 일반식(Ⅵ)의 화합물을 제조한 후 탈보호기시키는 것을 특징으로 하는 일반식(Ⅰ)'의 화합물의 제조방법.

상기에서 A, X 및 Y는 제1항에서 정의한 바와 같다. 또한, Boc는 아미노 보호기이며, Pr은 설프히드릴기의 보호기이다.
일반식(Ⅱ)의 화합물에 X-메틸아민 및 환원제를 반응시켜 일반식(Ⅲ)의 화합물을 제조한 다음, Y-카르복실산을 융합제와 함께 반응시키거나 Y-카르보닐할라이드를 염기존재하에 반응시켜 일반식(Ⅳ)의 화합물을 제조한 후 탈보호기시켜 일반식(Ⅴ)의 화합물을 제조한 다음, 아실화 또는 알킬화 반응을 수행하여 일반식(Ⅵ)의 화합물을 제조한 후 R1-할라이드를 반응시켜 일반식(Ⅶ)의 화합물을 제조한 다음, 탈보호기 하는 것을 특징으로 하는 일반식(Ⅰ)''의 화합물의 제조방법

상기에서 A, X 및 Y는 제1항에서 정의한 바와 같고, R₁은 직쇄 또는 분지상의 C₁- C₃알킬, 시아노로 치환된 직쇄 또는 분지상의 C₁- C₃알킬, 또는 아세틸이다. 또한, Boc는 아미노 보호기이며, Pr은 설프히드릴기의 보호기이다.