KR0165938B1 - 청호 추출물을 함유하는 육모제 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 청호의 디클로로메탄 추출물을 유효성분으로 함유하는 육모제 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따르는 청호의 디클로로메탄 추출물은 부작용이 거의 없이 우수한 육모효과를 나타내므로 탈모증, 특히 남성형 탈모증의 육모촉진 및 탈모방지를 위해 사용할 수 있다.

Description

청호 추출물을 함유하는 육모제 조성물

본 발명은 청호 추출물을 함유하는 신규한 육모제 조성물에 관한 것이다. 더욱 구체적으로, 본 발명은 청호의 디클로로메탄 추출물을 유효성분으로 함유하는 육모제 조성물에 관한 것이다.

탈모의 원인은 정확히 알 수 없으나 지금까지 밝혀진 내용에 의하면 국소혈류장애에 의한 영양장해설, 세균감염설, 자가면역질환설, 내분비장해설, 자율신경계장해설 등으로 나뉘고 있으나, 무엇보다도 유전적인 요인이 가장 큰 것으로 생각되며, 통상 여러 가지 원인들이 복합적으로 작용하여 탈모가 나타나는 것으로 알려져 있다.

그러나 탈모증의 원인에 대해서는 비교적 소상히 연구되어 있는 반면, 그 치료방법에 대해서는 아직 만족할 만한 성과를 얻지 못하고 있는데, 그 가장 큰 이유는 탈모의 원인이 단순하지 않기 때문이다.

두발의 탈모방지 및 증모를 위하여 현재까지 사용되고 있는 방법으로는 증모제의 도포, 모근이 있는 피부에 대한 물리적자극 등의 방법이 있다. 현재 탈모증의 예방 또는 치료를 위한 증모제로는 각종 제제, 예를 들면 부신피질호르몬, 여성호르몬, 비타민, 아미노산, 생약 추출물, 여러 가지 살균제, 각질용해제, 피부기능항진제 및 멘톨과 같은 말초신경자극제 등이 사용되고 있다.

그런, 여성호르믄 제제는 장기 사용시에 각종 암을 유발할 유려가 있으며, 생약추출물로는 머위 또는 머위민들레의 추출물을 함유한 것(일본국 특허공고(소) 58-11923호), 다목나무, 시호, 물거머리 등의 추출물을 함유한 것(일본 특허공고 (소) 58-40923호) 등이 보고되고 있으나, 이들은 원료생약의 입수가 상당히 곤란하고, 그 밖의 상기 다른 방법들도 탈모증을 예방, 치료 또는 완화하는 효과가 만족스럽지 못하였다.

한편, 1980년대에 들어와 항고혈압제로 널리 사용되던 미녹시딜에 발모 효과가 있음이 확인되었으며, 그 효과는 종전의 육모제가 내분비계와 관련되어 작용을 나타내는 것과는 달리 피부의 혈류를 증가시키는데 원인이 있는 것으로 추측되고 있다[참조 : Weiss,V.C., et al., J. Am. Acad. Dermatol. 5, 224-226 (1981)]. 그러나, 미녹시딜을 육모제로 사용하는 경우에는, 미녹시딜의 항고혈압작용, 즉 혈관확장효과에 의한 허탈감, 저혈압, 빈맥 등이 유발되는 부작용을 일으킬 염려가 있어 장기 사용시에는 적합한 약물이 될 수 없다.

이에 따라 본 발명자들은 상기 언급한 바와 같은 기존의 육모제들이 갖고 있는 부작용이 없으면서도 우수한 육모효과를 나타낼 수 있는 물질을 개발하기 위하여 집중적인 연구를 수행하였다. 그 결과 천연식물인 청호의 디클로로메탄 추출물이 탁월한 육모효과를 가지면서도 부작용을 거의 나타내지 않음을 확인하고 본 발명을 완성하게 되었다.

따라서, 본 발명은 청호의 디클로로메탄 추출물을 유효성분으로서 함유하는 육모제 조성물에 관한 것이다.

청호는 아르테미시아 아피아세 한스(Artemisia apiacea Hance)의 전초를 건조시킨 것으로 고미질(苦味質), β-불포넨, 팔네실아세테이트, 칼리오필렌, β-프므렌, ε-카디넨, δ-카디넨, α-피넨, β-피넨, 칸펜, 리모넨, 1,8-시네올, 알테미시아케톤, α-트욘, 코바엔, γ-카디넨 등의 정유성분 및 아브로타닌, 비타민 A 등이 함유되어 있는 것으로 밝혀져 있으며, 주로 피부진균에 대한 항균, 해열, 지혈, 진통 등의 효과가 있는 것으로 알려져 왔으며, 또한 식요본초(食療本草)나 일화자제가본초(日華子諸家本草) 등에는 청호가 모발의 성장을 돕거나 모발을 검게하는 효과가 있다고 기술되어 있다.

지금까지 청호는 일반적으로 건강한 모발을 유지하기 위하여 민간에서 물로 달여 먹거나, 건조된 생약 자체를 그대로 분말화하여 외용하는 방법으로 사용되어 왔다. 그런, 단지 이러한 방법에 의해서는 실제로 모발에 대해 상기한 바와 같은 효과를 얻을 수 없었다. 특히 물추출물을 그대로 적용하는 경우에는 두피에 침투되지 않고 그대로 남아 원하는 효과를 얻을 수 없을 뿐 아니라 때로는 발적과 진균증 등을 야기시키는 단점이 있다. 이에 본 발명자들은 청호로부터 육모효과를 가장 잘 나타내는 추출물을 얻기 위하여 청호를 각종 유기용매로 추출하여 그 추출물의 육모효과를 검증하였으며, 그 결과 청호의 디클로로메탄 추출물이 탁월한 육모효과를 나타내면서도 부작용 및 독성이 거의 없어서 이러한 목적을 달성할 수 있음을 확인하였다.

본 발명에 따른 조성물에서 유효성분으로 사용되는 청호의 디클로로메탄 추출물은 청호를 알콜로 추출하고, 이 알콜 추출물을 물에 현탁시켜 헥산으로 추출한 후에, 수층을 분리하여 디클로로메탄으로 추출함으로써 수득된다.

본 발명의 추출과정에서 1차 추출용매인 알콜로는 바람직하게는 탄소수 1내지 4의 저급알콜, 예를들면 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올 등이 사용될 수 있으며, 특히는 메탄올이 사용된다. 이 때 알콜의 사용량은 알콜의 종류에 따라 약간의 차이가 있지만, 대체로 청호 1kg 당 10내지 20ℓ, 바람직하게는 14 내지 15ℓ의 비로 사용한다. 이 추출과정은 가열하에 환류냉각장치를 이용하여 5 내지 15시간, 바람직하게는 9 내지 10시간에 걸쳐 수행하는 것이 바람직하다.

이렇게하여 수득된 알콜 추출물은 물, 바람직하게는 증류수에 현탁시켜 헥산으로 2차 추출한다. 이 때 물은 원생약인 청호 1kg에 대해 0.5ℓ 내지 1ℓ, 바람직하게는 0.7 내지 0.8ℓ의 비로 사용하며, 헥산은 사용된 물과 등용적으로 사용하는 것이 바람직하다.

헥산 추출물을 분리한 후에 남은 수층을 디클로로메탄으로 추출하고 추출물로부터 용매를 증발시켜 본 발명에서 목적하는 청호의 디클로로메탄 추출물을 건조된 형태로 수득할 수 있다. 이 때 디클로로메탄은 원생약인 청호 1kg에 대하여 1.5 내지 3ℓ, 바람직하게는 2.1 내지 2.4ℓ의 비로 사용한다.

본 발명의 추출과정에서 각각의 추출단계는 필요에 따라 1회 또는 수회 반복하여 수행할 수 있으며, 바람직하게는 2 내지 3회 반복하여 추출한다.

상기 본 발명의 방법에 따라 수득된 청호의 디클로로메탄 추출물은 필요에 따라 더 분획화시킴으로써 더 우수한 육모효과를 나타내는 분획만을 분리시킬 수도 있다. 청호의 디클로로메탄 추출물의 분획화는 용출제로서 클로로포름과 메탄올의 혼합용매를 20:1 내지 1:1의 구배로 사용하여 칼럼크로마트그라피를 수행하여 용출물을 극성에 따라 분획화시킴으로써 이루어질 수 있다. 즉, 용출제인 클로로포름과 메탄올의 혼합비를 각각 20:1, 15:1, 10:1, 7:1, 5:1, 2:1로 변화시켜 용출시키고 용출제를 증발시킴으로써 각각 분획 1 내지 6을 분리하여 수득할 수 있다. 이렇게하여 수득되는 분획중에서 1번, 4번 및 5번 분획이 특히 탁월한 육모효과를 나타내는 것으로 확인되었다. 따라서, 청호의 디클로로메탄 추출물의 이러한 분획들이 본 발명에 따라 특히 유용하게 사용될 수 있다.

상기한 바와 같은 본 발명의 방법에 따라 수득되는 청호의 디클로로메탄 추출물은 다음과 같은 기전에 의해 육모효과를 나타내는 것으로 판단된다.

1. 모낭(follicle) 주위의 말초혈관에 작용하여 국소적 혈류증가를 유발시켜 모발의 성장을 촉진시킨다.

2. 두피조직에 대한 국소적인 남성호르몬 억제작용으로 모낭의 생리학적 상태를 정상화시킨다.

3. 직접적으로 모낭상피에 작용하여 모발의 성장을 유발한다.

상기 언급한 바와 같이 본 발명에 따르는 청호의 디클로로메탄 추출물은 부작용이나 독성이 거의 없이 탁월한 육모효과를 나타내므로 탈모증, 특히 남성형 탈모증이 있는 인간 및 동물에게서 육모를 촉진시키거나 탈모를 방지하기 위해 유용하게 사용할 수 있다.

본 발명에 따르는 청호의 디클로로메탄 추출물을 함유하는 조성물은 육모촉진 및 탈모방지를 목적으로 사용할 때에 통상적인 약제학적 방법에 따라 약제학적 분야에서 통상적인 제제, 예를들면 정제, 캅셀제, 트로치제, 액제, 현탁제 등의 경구투여용 제제, 주사용 용액 또는 현탁액, 또는 주사시에 주사용 증류수로 재조제하여 사용할 수 있는 즉시 사용형 주사용 건조분말 등의 형태인 주사용 제제, 연고제, 크림제, 로숀제, 액제, 스프레이제 등의 국소적용형 제제 등의 다양한 제제로 제형화시켜 이용할 수 있다.

본 발명의 조성물의 제형화를 위해 사용될 수 있는 담체는 약제학적 분야에서 통상적인 것으로, 예를 들어 경구투여용 제제의 경우에는 결합제, 현탁화제, 붕해제, 부형제, 가용화제, 분산제, 안정화제, 색소, 향료 등이 있으며, 주사제의 경우에는 보존제, 무통화제, 가용화제, 안정화제 등이 있고, 국소투여용 제제의 경우에는 기제, 부형제, 윤활제, 보존제, 추진제 등이 있다. 이렇게 제조된 약제학적 제제는 경구적으로 투여하거나, 비경구적으로 예를들면 정맥내, 피하, 복강내 등의 경로로 주사하여 투여하거나, 또는 국소적용할 수 있다. 본 발명의 조성물은 바람직하게는 연고제, 로숀제, 스프레이제 등의 국소적용형 제제로 제형화사켜 탈모부위에 직접 적용시키는 것이 효과적이다.

본 발명의 조성물에는 또한, 필요에 따라 발명의 청호의 디클로로메탄 추출물의 육모효과를 더욱 증진시킬 수 있는 하나 또는 그 이상의 추가의 생약성분을 포함시킬 수 있다. 이러한 목적으로 포함시킬 수 있는 생약성분으로는 예를들어 상기생, 대두황권, 향부, 하수오, 측백엽, 하숙, 담채, 숙지황 등이 이용될 수 있다. 이러한 추가의 생약성분이 본 발명의 조성물에 포함되는 경우에 이들의 함량은 조성물의 총중량을 기준으로하여 3% 이내가 되도록 하는 것이 바람직하다.

본 발명에 따른 조성물의 적용량은 탈모증의 종류 및 중증도, 대상환자의 상태 등에 따라 적절히 선택되나, 일반적으로는 성인에게 1일에 체중 kg당 청호의 디클로로메탄 추출물 또는 그의 분획을 3 내지 60mg(건조물로서), 바람직하게는 6 내지 30mg(건조물로서)의 양으로 투여한다.

본 발명은 이하의 실시예 및 실험예에 의해 더욱 상세히 설명되나, 본 발명이 이들에 의해 어떤 식으로든 제한되는 것은 아니다.

[실시예 1 : 청호의 디클로로메탄 추출물의 제조]

청호 5kg을 음건시킨 후에 환류냉각장치를 이용하여 메탄올 20ℓ 씩으로 6시간씩 3회 반복해서 가열추출하고, 추출물을 합하여 용매를 감압하에서 제거하여 메탄올 추출물 254.5g을 수득하였다. 수득된 메탄올 추출물을 증류수 4ℓ에 현탁시키고, 이 현탁액을 등용적의 헥산을 사용하여 3회 추출한 다음, 감압하에서 용매를 제거하여 헥산 추출물 40.4g을 수득하였다. 헥산 추출물을 분리한 후에 남은 수층을 등용적인 디클로로메탄(CH₂Cl₂)으로 3회 추출하고 추출물을 합하여 감압하에서 용매를 제거하여 목적하는 청호의 디클로로메탄 추출물 38g(건조물로서)을 수득하였다.

[실시예 2 : 청호의 디클로로메탄 추출물의 분획화]

실시예 1에서 수득한 청호의 디클로로메탄 추출물 29.8g을 용출제로서 클로로포름(CHCl₃)과 메탄올(MeOH)의 혼합물(20:1 내지 1:1)을 사용하여 구배 실리카겔 칼럼크로마토그라피를 실시하여 클로로포름과 메탄올이 혼합비 20:1, 15:1, 10:1, 7:1, 5:1, 2:1에서 용출되는 6개의 분획으로부터 용출제를 증발시켜 다음과 같이 각각의 분획을 수득하였다: 분획 1 : 3.07g, 분획 2 : 4.85g, 분획 3 : 2.06g, 분획 4 : 4.38g, 분획 5 : 8.11g, 분획 6 : 3.4g

[실험예 1 : 청호의 디클로로메탄 추출물의 육모활성검색]

상기 실시예 1 및 2에서 수득된 청호의 디클로로메탄 추출물 및 그의 분획 1내지 6 각각을 2% 니콜(Nikkol HCO 60), 2% GMO(글리세릴모노올리에이트) 및 트윈 80 적당량을 넣은 다음 30% 에탄올을 가해 2 내지 5%의 시험액을 조제하여 다음과 같은 육모시험방법에 따라 육모활성을 검색하였다.

육모시험을 위한 동물로는 생후 45 내지 53 일된 체중 23 내지 28g의 마우스(C57BL/6)을 사용하였으며, 시험물질로서 제1시험군(10마리)에는 디클로로메탄 추출물의 3% 시험액을, 제2시험군(10마리)에는 디클로로메탄 추출물의 5% 시험액을, 제3내지 7시험군(각군당 10마리)에는 분획 1 내지 6 각각의 2% 시험액을 적용하였고, 대조 1군(10마리)에는 청호의 메탄올 추출물의 5% 시험액을, 대조 2군(10마리)에는 공지의 육모제인 미녹시딜의 2% 시험액을 적용하고, 마지막으로 비처리군(10마리)에는 부형제인 30% 에탄올만을 적용하였다. 구체적인 실험방법은 다음과 같다.

생후 45 내지 53 일된 체중 23 내지 28g의 마우스(C57BL/6)의 등부위의 털을 클립퍼(Clipper, Oster #40) 및 전기면도기를 이용하여 제모처리하였다. 제모처리한 다음날부터 상기한 각각의 시험물질을 각군의 마우스의 제모처리된 피부에 1일에 2ml 씩의 양으로 17일 동안 도포하고, 최초에 처리한 날부터 18일 동안 시간경과에 따른 모의 성장정도를 모발성장 스코어(hair growth score)를 기록하여 검색하였다. 모발성장 스코어는 모의 복원정도 및 복원면적에 따라 완전 탈모상태를 0으로 하고, 모낭이 완전히 복원된 상태를 3으로 하며, 그 사이를 모낭의 길이 및 면적을 측정하여 0.5 단위로 세분하여 판정하였다.

즉, 표1에 기재된 결과로부터 알 수 있는 바와 같이 미녹시딜을 양성대조군으로 하였을 때 청호의 디클로로메탄 추출물 자체의 육모효과는 미녹시딜에 비해 다소 낮았으나, 디클로로메탄 추출물의 각각의 분획, 특히 분획 4는 양성대조군인 미녹시딜에 비해 대략 3배 정도의 우수한 육모효과를 나타내었다. 이러한 결과로부터, 본 발명에 따른 청호의 디클로로메탄 추출물 및 그의 분획들은 기존의 육모제인 미녹시딜에 비해 독성이 작고 육모효과는 수배정도 더 큰 효과를 나타내는 약제인 것으로 확인되었다.

[실험예 2 : 급성독성 시험]

본 발명에 따르는 청호의 디클로로메탄 추출물의 급성독성을 알아보기 위하여 다음과 같은 실험을 수행하였다.

실험동물로는 1군당 생후 5주된 숫컷 마우스(평균체중 30g) 5 마리씩을 사용하였다. 시험물질로는 실시예 1 및 2에서 수득한 청호의 디클로로메탄 추출물과 그의 각 분획을 마우스의 kg 당 1000mg 씩의 용량을 생리식염수 1ml에 현탁시켜 마우스에게 경구투여하고, 투여 7일 후에 각군의 생존동물의 수를 관찰하였다. 대조군에는 따로 생리식염수 1ml 만을 경구투여하였다. 측정된 결과는 다음 표 2에 나타내었다.

상기 표에 기재된 결과로부터 알 수 있는 바와 같이, 청호의 디클로로메탄 추출물 및 그의 각각의 분획들은 시험 최대용량인 1000mg/kg/일 투여량에서 실험동물에 대해 어떠한 독성도 나타내지 않았다. 따라서 본 발명의 화합물은 그 유효용량에서 사람 또는 동물에 독성이 없는 것으로 판단된다.

[실험예 3 : 피부자극시험]

본 발명에 따르는 청소의 디클로로메탄 추출물의 피부자극독성을 알아보기 위하여 다음과 같은 실험을 수행하였다.

시험동물로서는 1군당 생후 5주된 수컷 마우스(평균체중 30g) 20마리씩을 사용하고, 시험물질로서는 시험군에는 실시예 1에서 제조된 청호의 디클로로메탄 추출물을 마우스의 체중 1kg당 1000mg의 양으로 취하여 2% 니콜 HCO 60, 2% GMO(글리세릴모노올리에이트) 및 트윈 80 적당량을 넣은 다음 30% 에탄올로 5% 시험액을 조제하여 30일간 마우스의 피부에 도포하고 대조군에는 30% 에탄올만을 동일한 방식으로 도포하여 시험동물의 피부의 이상 여부를 관찰하였다. 그 결과는 다음 표 3에 나타내었다.

상기 표 3에 기재된 결과로부터 알 수 있는 바와 같이, 본 발명에 따르는 청호의 디클로로메탄 추출물은 시험최대용량인 1000mg/kg 도포군에 있어서 30일간 관찰한 결과, 단순히 우발적인 것으로 판단되는 발적형상이 극히 일부의 실험 동물에서 관찰되었지만 시험동물의 피부에 대해 실질적으로 어떠한 자극독성도 나타나지 않았다. 따라서, 본 발명의 화합물은 피부자극성이 매우 낮으며 사람 또는 동물의 피부에 거의 자극이 없는 것으로 나타났다.

[조성물 예]

이하의 조성예에서 활성물질로 기재된 것은 실시예 1 또는 2에서 제조된 본 발명에 따른 청호의 디클로로메탄 추출물과 거의 각 분획들 중의 어느 것이나 사용할 수 있음을 의미한다. 이하의 조성물에는 또한 필요에 따라 조성물의 총중량에 대해 3% 이하의 범위에서 적정량의 보조생약성분이 포함될 수도 있다.

[조성예 1 : 연고제(1% 및 3% 연고제)]

상기의 성분들을 사용하여 통상의 연고제의 제조방법에 따라 연고제를 제조하였다.

상기와 같은 방법으로 제조된 연고제를 1일 2회, 1회에 0.5 내지 1g씩을 3내지 6개월 동안 지속적으로 환부에 도포한다. 1일 총량이 2g을 초과해서는 안된다. 환부에 도포한 후에는 부드럽게 맛사지 해주어 흡수를 촉진시키는 것이 바람직하다.

[조성예 2 : 로숀제]

상기의 성분들을 사용하여 통상의 로숀제의 제조방법에 따라 로숀제를 제조하였다.

상기와 같은 방법으로 제조된 로숀제를 1일 2회, 1회에 0.5내지 1ml씩을 3 내지 6개월 동안 지속적으로 환부에 도포한다. 1일 총량이 2ml를 초과해서는 안된다.

[조성예 3 : 스프레이제]

상기의 성분들을 사용하여 통상의 스프레이제의 제조방법에 따라 스프레이제를 제조하였다.

상기와 같은 방법으로 제조된 스프레이제를 1회(약 0.12ml 분사)에 4내지 8회 분무하고, 용기내에 잔량이 적어 약액의 분사가 잘 안될때는 붓으로 탈모 부위에 1회에 21내지 42회 바른다. 도포한 후에는 부드럽게 맛사지해주어 흡수를 촉진시키는 것이 바람직하다.

Claims (13)

1. 유효성분으로 청호의 디클로로메탄 추출물 또는 그이 분획을 함유하는 육모제 조성물.
2. 제1항에 있어서, 청호의 디클로로메탄 추출물의 분획이 클로로포름과 메탄올의 구배용출에 의해 분획화된 분획 1 내지 6 중의 어느 하나인 육모제 조성물.
3. 제2항에 있어서, 분획 1 내지 6이 각각 클로로포름과 메탄올의 배합비를 20:1, 15:1, 10:1, 7:1, 5:1 및 2:1 로하여 용출된 분획인 육모제 조성물.
4. 제2항에 있어서, 유효성분인 청호의 디클로로메탄 추출물의 분획이 분획 1, 4 또는 5인 육모제 조성물.
5. 제1항에 있어서, 추가로 상기생, 대두황권, 향부, 하수오, 측백엽, 하숙, 담채 및 숙지황중에서 선택된 보조생약성분을 함유하는 육모제 조성물.
6. 제1항에 있어서, 약제학적으로 허용되는 담체를 이용하여 약제학적 제형으로 제조된 육모제 조성물.
7. 제6항에 있어서, 국소적용형 제제로 제조된 육모제 조성물.
8. 제7항에 있어서, 국소적용형 제제가 연고제, 로숀제 또는 스프레이제인 육모제 조성물.
9. 청호를 알콜로 추출하고, 이 알콜 추출물을 물에 현탁시켜 헥산으로 추출한 후에, 수충을 분리하여 디클로로메탄으로 추출하는 단계를 포함하여 청호의 디클로로메탄 추출물을 제조하는 방법.
10. 제9항에 있어서, 알콜이 탄소수 1내지 4의 저급알콜인 방법.
11. 제10항에 있어서, 알콜이 메탄올인 방법.
12. 제9항에 있어서, 수득된 디클로로메탄 추출물을 계속해서 클로로포름과 메탄올의 혼합용매를 사용하여 구매용출시켜 분획화시키는 방법.
13. 제12항에 있어서, 클로로프름과 메탄올을 20:1 내지 1:1의 비로 구배용출시키는 방법.