KR0150635B1

KR0150635B1 - 아데노신 수용체 선택성 화합물

Info

Publication number: KR0150635B1
Application number: KR1019900004160A
Authority: KR
Inventors: 폴 피트 노튼; 로우웰 렌츠 넬슨
Original assignee: 개리 디. 스트리트; 메렐 다우 파마슈티칼스 인크
Priority date: 1989-03-29
Filing date: 1990-03-28
Publication date: 1998-10-15
Also published as: IE901142L; PT93589B; IL93893A; JP3014000B2; FI95133B; KR900014390A; ATE111466T1; HU901857D0; IE63545B1; CA2013381C; CN1045974A; NO901424D0; EP0390111B1; EP0390111A3; AR245720A1; NO173997C; HU203349B; DE69012388D1; JPH02289574A; AU623755B2

Abstract

내용없음

Description

아데노신 수용체 선택성 화합물

본 발명은 아데노신 유사체이면서 아데노신 수용체에 선택적으로 작용하는 일군의 화합물에 관한 것이다.

혈압 저하, 진정, 진경 및 혈관 확장 작용이 높은 아데노신은 약 50년전에 처음 발견되었다. 이후에 아데노신에 대해 제시된 생물학적 역할의 수가 상당히 증가하여 왔다. 아데노신 수용체는 다수의 세포에서 아데닐레이트 사이클라제에 연결되어 있는 것으로 생각된다. 각종 아데노신 유사체들이 최근 수년 동안 이러한 수용체 기능에 대한 연구 대상이 되어 왔다. 카페인 및 테오필린과 같은 알킬크산틴은 아데노신 수용체의 가장 잘 알려진 길항체이다.

아데노신은 일반적인 조절 물질로 표현하기도 하는데, 어떤 특정한 세포 유형 또는 조직도 아데노신 형성에 단독으로 관계하는 것으로 보여지지 않기 때문이다. 이 점에 있어서 아데노신은 여러 내분비 호르몬과는 상이하다. 또한 아데노신이 신경세포 또는 기타 세포로부터 저장되고 방출된다는 입증은 없다. 그러므로, 아데노신은 각종 신경 전달 물질과도 상이하다.

아데노신은 생리학적 조절제로서 프로스타글란딘과 비교할 수 있다. 두 경우에서, 대사 형성에 연관되는 효소들은 산재되어 있으며 세포의 생리 상태에서의 변화에 반응하는 것으로 생각된다. 이데노신에 대한 수용체는 프로스타글란딘에 대한 수용체와 마찬가지로 매우 광범위하게 존재하는 것으로 입증되고 있다. 마지막으로, 프로스타글란딘 및 아데노신은 모두 칼슘 이온을 포함하는 기능의 조절에 연관되는 것으로 생각된다. 물론, 프로스타글란딘은 막 전구체로부터 유래하는 반면에, 아데노신은 세포질의 전구체에서 유래한다.

아데노신이 각종 생리 기능에 영향을 미칠 수 있다하더라도, 임상학적으로 적용할 수 있는 작용에 대해서 수년 동안에 걸쳐 특별한 관심이 집중되어 왔다. 가장 대표적인 것으로는 아데노신의 심장혈관에 대한 작용으로, 이들 작용은 혈관 확장 및 혈압 저하 작용을 유도하나, 심장을 압박할 수도 있다. 아데노신의 지방분해억제, 항혈전 및 진경 작용도 다소 주목을 받아 왔다. 아데노신은 부신세포에서 스테로이드 생성을 자극하는데, 아마도, 아네닐레이트 사이클라제의 활성화에 의한 것으로 생각된다. 아데노신은 신경 전달 및 중추 뉴런의 자발 활성에 대한 억제 효과를 갖는다. 최종적으로, 아데노신의 기관지 협착 작용 및 크산틴에 의한 그의 길항 작용은 중요한 연구 분야이다.

현재에는, 아데노신의 작용에 연관되는 세포외 수용체가 하나가 아니라 적어도 2군인 것으로 인식되고 있다. 이중 한 군은 아데노신에 대해 높은 친화성을 가지며 적어도 일부 세포에서 억제 작용시 아데닐레이트 사이클라제에 결합한다. 이들을 일부 사람들은 A-1 수용체라 일컫는다. 다른 군의 수용체는 아데노신에 대해 낮은 친화성을 가지며 다수의 세포 유형에서 자극 작용시 아데닐레이트 사이클라제에 결합한다. 이것은 A-2 수용체라 일컬어진다.

현재, 아데노신 수용체의 특성화는 여러 구조적 유사체를 사용하여 이루어져 왔다. 대사 또는 흡수 기작에 대해 저항성을 갖는 아데노신 유사체가 시판중이다. 이들은 특히 가치가 있는 것으로, 이들의 확실한 효능이 주효기 시스템으로부터의 대사적 제거에 대해 덜 영향을 받기 때문이다. 아데노신 유사체는 A-1 및 1-2 아데노신 수용체에서 효능의 역가 순위를 달리하는 것으로 나타나는데, 이것은 아데노신 수용체의 특성에 대한 생리학적 반응을 분류하는 간단한 방법을 제공한다. 아데노신 수용체의 차단(길항 작용)은 아데노신 수용체 함유에 대한 반응을 분류하는 또다른 방법을 제공한다. A-1 또는 A-2 아데노신 수용체 특이 길항제의 개발이 이러한 연구 분야에서 및 동물내 특정 생리학적 효과를 갖는 아데노신 수용체 선택성 약제의 제조에서 주된 성과가 될 것임을 주목해야 한다.

본 발명은 하기 일반식으로 표시되는 화합물에 관한 것이다.

상기 식에서, R₁은 수소, 페닐 또는 β-D-리보푸라노실이고, R₂는 수소, C₁-₄저급 알킬 또는 C₁-₄저급 알콕시이며, Y는 -N= 또는 -CH=이고, Z은 -N= 또는 -CH이되, 단, Y 및 Z은 동일할 수 없으며, n은 1 내지 3의 정수이고, L은 수소 또는 페닐이며, L이 페닐인 경우를 제외하고는 M은 페닐이고, L이 페닐인 경우 M은 수소 또는 CC₁-₃의 저급 알킬이다.

상기에서 저급 알킬은 1 내지 4의 탄소 원자를 가지며, 하기할 용어에도 동일하게 적용된다. 이와 마찬가지로, 저급 알콕시는 1 내지 4의 탄소 원자를 가지며, 이 정의 하기의 용어에도 동일하게 적용된다. 이러한 알콕시의 예로는 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 및 부톡시가 있다.

일반적으로, 본 발명에 의한 화합물은 하기의 방법으로 제조된다. 즉, 하기 일반식 (1)의 화합물은 하기 일반식 (2)를 하기 일반식 (3)의 화합물과 반응시켜 제조할 수 있으며, 하기할 실시예에서 더 상세히 설명하기로 한다.

상기 식에서, R₁은 수소, 페닐 또는 β-D-리보푸라노실이고, R₂는 일반식 (1)에서는 수소, C₁-₄의 저급 알킬 또는 C₁-₄의 저급 알콕시이며, 일반식 (2)에서는 수소 또는 염소이고, n은 1내지 3의 정수이고, Y는 -N= 또는 -CH=이며, Z은 -N= 또는 -CH=이되, Y 및 Z은 서로 동일알 수 없다.

이와 같이 하여 생성된 하기 일반식 (4)의 화합물을 추가로 염화티오닐 또는 이와 유사한 시약과 반응시켜 하기 일반식 (5)의 화합물을 얻을 수 있다.

상기 식에서, R₁은 수소, 페닐 또는 β-D-리보푸라노실이고, R₂는 수소 또는 염소이고, Y는 -N= 또는 -CH=이고, Z은 -N= 또는 -CH=이되, 단 Y 및 Z은 서로 동일할 수 없고, n은 1 내지 3의 정수이다.

또한, 상기 일반식 (5)중 R₂가 염소인 화합물은 1 내지 4의 탄소 원자를 갖는 선택된 알콜, 예컨대 n-프로판올과 추가로 반응시켜 하기 일반식 (6)의 화합물을 얻을 수 있다.

상기 식에서, R₁은 수소, 페닐 또는 β-D-리보푸라노실이고, R₃은 C₁-₄의 저급 알킬이며, Y는 -N= 또는 -CH=이고, Z은 -N= 또는 -CH=이되, 단 Y 및 Z은 서로 동일할 수 있다.

마찬가지로, 하기 일반식 (7)의 화합물은 하기 일반식 (8)의 화합물을 하기 일반식 (9)인 노르에프리딘의 목적 에난티오머와 반응시켜 하기일반식 (10)의 화합물을 얻을 수 있다.

(C로 나타낸 2개의 탄소 원자는 키랄 중심임)

상기 식에서, R₁은 수소, 페닐 또는 β-D-리보푸라노실이고, R₂는 식 (7)에서는 수소, C₁-₄저급 알킬 또는 C₁-₄저급 알콕시이며, 식 (8) 및 (10)에서는 수소 또는 염소이고, R₃은 C₁-₄의 저급 알킬이며, Y는 -N= 또는 -CH=이고, Z은 -N= 또는 -CH=이되, 단 Y 및 Z은 서로 동일할 수 없다.

상기 일반식 (10)의 화합물을 염화티오닐 또는 그와 유사 화합물과 추가로 반응시켜 하기 일반식 (11)의 화합물을 얻을 수 있다.

상기 식에서, R₁은 수소, 페닐 또는 β-D-리보푸라노실이고, R₂는 수소 또는 염소이며, Y는 -N= 또는 -CH=이고, Z은 -N= 또는 -CH=이되, Y 및 Z은 동일할 수 없다.

또한, 일반식 (11) 중 R₂가 염소인 화합물을 1 내지 4개의 탄소 원자를 갖는 선택된 n-알콜(예, n-프로판올)과 추가로 반응시켜 하기 일반식 (12)의 화합물을 얻을 수 있다.

상기 식에서, R₁은 수소, 페닐 또는 β-D-리보푸라노실이고, R₃은 의 C₁-₄저급 알킬이다.

본 발명의 화합물은 입체 이성질체가 존재할 수 있으며, 상기와 같이 표시된 화학 구조는 가능한 모든 입체 이성질체 및 이러한 입체 이성질체의 라세미 혼합물을 포함한다.

본 발명의 화합물의 예는 다음과 같다.

[아데노신 수용체 선택성 약제의 치료 유용성]

하기표는 본 발명에 의한 아데노신 수용체 선택성 약제의 치료학상 유용성을 보다 상세히 나타낸다.

심장혈관, 폐동맥, 신장계 타겟에 있어서, 수용체 결합에 관한 연구로 동정된 제조 화합물은 인체의 생리학적 반응의 직접적인 지표인 생체내 시험으로 그 기능을 평가할 수 있다. 푸린 수용체에 관한 약물학 및 기능적 중요성에 대해서는 본 명세서에서 참고로 인용하는 M. 윌리암스의 문헌[Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol., 27, 31 (1987)]에 잘 나타나 있다. Therapeutic Targeting of Adenosine Receptor Modulators에 제하에 기재된 부분에서는, 아데노신 작동체는 아편 중단 치료에 있어서 항고혈압제로서, 면역 경쟁 및 레닌 방출의 모듈레이터로서, 정신병 억제제로서 및 최면제로서 효과적일 수 있다. 한편, 길항체는 중추 자극제, 변력제, 강심제, 항스트레스제, 항천식제로서, 또한 호흡 장애의 치료에 유용할 수 있다고 기재하고 있다. 아데노신 수용체 약제에 의해 나타나는 활성의 잡다함 (smorgasbord)은 치료법에 대한 그의 큰 잠재적인 유용도 및 중요 약제에 대한 필요성을 강조하는 것이다.

아데노신은 세포 표면 수용체에 대한 작용을 통해 다양한 생물학적 효과를 낸다. 이러한 아데노신 수용체에는 A-1 및 A-2의 2가지 유형이 있다. A-1 수용체는, 일부 N6-치환된 아데노신 유사체, 예컨대 R-페닐이소프로필아데노신(R-PIA) 및 시클로아데노신(CHA)이 2-클로로아데노신 및 N-5'-에틸카르복스아미도아데노신(NECA)보다 더 강력하게 작용하는 수용체로서 정의된다. A-2 수용체에서의 효능은 NECA 2-클로로아데노신R-RIACHA 순이다.

상기 표에서 설명한 바와 같이, 아데노신 수용체는 다양한 생리학적 기능을 조절한다. 주된 2군의 아데노신 수용체는 이미 정의하였다. 아데닐레이트 사이클라제 억제 효과를 갖는 A-1 아데노신 수용체 및 아데닐레이트 사이클라제 자극 효과를 갖는 A-2 아데노신 수용체가 그들이다. A-1 수용체는 아데노신 및 아데노신 유사체에 대한 친화성이 A-2 수용체보다 더 높다. 아데노신 및 아데노신 유사체의 생리학적 효과는, 아데노신 수용체 비선택성 약제가 먼저 다소 산재된 저친화성 A-2 수용체에 결합한 다음에, 투여량이 증가함에 따라 고친화성의 A-2 수용체에 결합하고, 최종적으로 매우 다량의 투여량에서 매우 고친화성인 A-1 아데노신 수용체에 결합한다는 사실로 복합적인 것이다.[본 명세서에서 참고로 인용하는 J.W. 데일리(Daly) 등의 Subclasses of Adenosine Receptors in the Central Nervous System: Interaction with Caffeine and Related Methlxanthines, Cellular and Molecular Neurobiology, 3(1), 69-80 (1983) 참조].

일반적으로, 아데노신의 생리학적 효과는 아데닐레이트 사이클라제의 자극 또는 억제에 의해 매개된다. 아데닐레이트 사이클라제의 활성화는 일반적으로 세포내 제2 전령으로 인식되고 있는 시클릭 AMP의 세포내 농도를 증가시킨다. 그러므로, 아데노신 유사체의 효과는 배양 세포주내 시클릭 AMP를 증가시키는 능력이나 또는 증가를 길항하는 능력에 의해 측정할 수 있다. 이점에 있어서 중요한 2가지 세포주 중 하나는 VA 13(WI-38 VA 13 2RA), SV-40 형질전환된 WI 38 사람 태아 폐 섬유 아세포로,이들은 A-2 서브타입의 아데노신 수용체를 운반하는 것으로 알려졌으며, 또다른 하나는 지방 세포로, 이것은 A-1 서브타입의 아데노신 수용체를 운반하는 것으로 알려져 있다[본 명세서에서 참고로 인용하는 R.F. 브런즈의 Adenosine Antagonism by Purines, Pteridines and Benzopteridines in Human Fibroblasts, Biochemical Pharmacology, 30, 325-333(1981) 참조].

8-페닐-1,3-디프로필-크산틴의 카르복시산 협동 작용제 (XCC)는 아데노신 수용체에 비선택성이며, 뇌 막내 A-1 수용체에서의 Ki 값이 58±3nM이고, 뇌 편(slice) 분석의 A-2 수용체에서의 Ki 값이 34±13nM이라는 것은 시험관내 연구를 통해 잘 알려져 있다. 한편, 8-페닐-1,3-디프로필-크산틴의 아미노산 협동 작용제 (XAC)는 뇌 편 분석의 A-2 수용체에서의 Ki치인 49±17 nM과 비교시 A-1 아데노신 수용체에 대한 친화성이 Ki 1.2±0.5nM로 40배 더 높다. 또한, XAC는 혈압에 대해서보다는 심박수에 대한 아데노신 유사체의 효과를 길항하는데 보다 더 효능이 좋다. 일반적으로, 아데노신 유사체로 유도되는 심장에 대한 효과는 A-1 수용체를 통해 매개되고 혈압에 대한 효과는 A-2 수용체를 통해 매개되는 것으로 알려져 있으므로, 생체내 조건 하에서 XAC의 선택성은 아데노신 수용체의 시험관내 활성이 아데노신 수용체의 생체내 활성과 상호 연관되며 특정 생리학적 효과는 이러한 선택성의 결과에 의해 구별될 수 있음을 제시한다[본 명세서에서 참고로 인용하는 B.B. 프레드홀름 (Fredholm), K.A. 제이콥슨 (Jacobsen). B. 존슨(Jonzon), K.L. 커트 (Kirt), Y.O. 리(Li) 및 J.W. 데일리(Daly)의 Evidence That a Novel 8-Phenyl-Substituted Xanthine Dervative is a Cardioselective Adenosine Receptor Antagonist In Vivo, Journal of Cardiovascular Pharmacology, 9, 396-400(1987); 및 제이콥슨, 커트, 데일리, 존즌, 리 및 프레드홀름의 Novel 8-Phenyl-Substituted Xanthine Derivative Is Selective Antagonist At Adenosine Receptors In Vivo, Acta Physiol. Scand., 341-342(1985) 참조].

또한, 아데노신은 혈압을 상당히 저하시키는 것으로 알려져 있다. 이러한 혈압 강하는 아마도 A-2 수용체 매개에 의한 말초혈관 저항의 감소에 의존하는 것 같다. 또한, 아데노신 유사체도 심박수를 감소시킬 수 있다. 이 효과는 A-1 서브타입의 아데노신 수용체에 의해 매개되는 것으로 생각된다.

그러므로, 본 명세서에 기재된 아데노신 수용체 선택성 아데노신 유사체를 약리학적으로 투여하면 이들이 A-2 또는 A-1 수용체에 선택적으로 결합하여, 예컨데, 선택적으로 혈압을 감소시키거나 또는 심박수를 감소시키게 되며, 이에 따라서 이들의 생체내 생리학적 효과를 얻게 된다는 것은 명백하다. 이러한 아데노신 수용체 선택성 약제가 갖는 선택성은 하기에 상세히 기재된 방법으로 측정할 수 있다.

[뇌 아데노신 A-2 수용체에 대한 친화성 시험]

하기의 시험은 동물의 뇌막으로부터 제조된 아데노신 A-2 수용체에 대해 리간드 [3H]5'-N-에틸카르복스아미도아데노신(NECA)과 경쟁하는 시험 화합물의 효능을 측정하는데 사용한다[본 명세서에서 참고로 인용하는 R.R. 브런스(Bruns), G.H. 루(Lu), 및 T.A. 퍼그슬리(Pugsley)의 Characterization of the A-2 Adenosine Receptor Labeled by [3H]NECA in Rat Striatal Membranes, Mol. Pharmacol., 29, 331-346(1986) 참조].찰스 리버(Charles River)에서 구입한 어린 수컷 쥐 (C-D종)를 절두하여 치사시키고, 뇌를 얻는다. 리간드가 결합용 막을 쥐의 뇌 선조체로부터 단리한다. 조직을 폴리트론(6 내지 20초 동안 고정)을 사용하여 20 배의 빙냉 50 mM 트리스-HCl 완충액(pH 7.7)에 균질화시킨다. 이 균질물을 4℃에서 10분 동안 50,000 x g로 원심분리한다. 펠릿은 다시 폴리트론내에서 20 배의 완충액에 균질화시키고 상기와 같이 원심분리한다. 펠릿을 최종적으로 조직 1 g(습량)당 40 배의 50 mM 트리스-HCl(pH 7.7)에 재현탁 시킨다.

3개의 배양 튜브에 [3H]-NECA (분석에서 94 nM) 100 μl, 1 μM의 시클로헥실아데노신(CHA) 100 μl, 100 mM의 MgCl₂100 μl, 1 IU/ml의 아데노신 데아미나아제 100 μl, 각종 농도[분석용 완충액(50 mM 트리스-HCl, pH 7.7)으로 10^-10M 내지 10^-4M범위로 희석시킴]의 시험 화합물 100 μl 및 막 현탁액 (5㎎, 습량) 0.2 μl를 채우고, 최종 용적이 1 ml가 되도록 50 mM 트리스-HCI (pH 7.7)을 첨가한다. 배양은 25℃에서 60분 동안 수행한다. 각 튜브를 진공을 사용하여 GF/B 유리섬유 필터로 여과한다. 필터를 빙냉 완충액 5 ml로 2회 세정한다. 필터 상의 막을 신틸레이션 바이알로 옮기고, 여기에 5% 프로토졸이 함유된 옴니플루어(Omnifluor) 8 ml를 첨가한다. 필터를 액상 신틸레이션 분광기로 계측한다.

[3H]NECA의 특이 결합은 100 μM의 2-클로로아데노신의 존재하에 블랭크에 대한 초과량으로 측정한다. 총 막결합 방사능은 시험 튜브에 첨가된 방사능의 약 2.5%이다. 이러한 조건은 총 결합을 방사능의 10% 미만으로 제한하므로, 자유 리간드의 농도는 결합 분석 도중 거의 변하지 않는다. 막에 대한 특이 결합은 총 결합의 약 50%이다. 막 현탁액의 단백질 함량은 본 명세서에서 참고로 인용하는 O.H. 로우리(Lowry), N.J. 로즈브로우(Rosebrough), A.L. 파(Farr) 및 R.J. 랜덜(Randall)의 문헌[Protein Measurements With Folin Phenol Reagent, J. Biol. Chem., 193, 265-275 (1951)]의 방법으로 측정한다.

시험 화합물에 의해 [3H]NECA 결합이 15% 이상 치환됨은 아데노신 A-2 부위에 대한 친화성을 나타낸다. 리간드의 결합을 50% 억제하는 화합물의 몰농도는 IC₅₀이다. 100 내지 1000 nM 범위의 값은 화합물의 효능이 높음을 가리킨다.

[뇌 아데노신 A-1 수요체 결합 부위에 대한 친화성 시험]

하기의 시험은 쥐의 뇌막으로부터 제조된 아데노신 A-1 수용체에 대해 리간드 [3H]시클로아데노신과 경쟁하는 시험 화합물의 효능을 측정하기 위해 사용한다. 스프라크-데일리종의 수컷 쥐를 절두하여 치사시키고 쥐의 뇌에서 막을 단리한다[본 명세서에서 참고로 인용하는 R. 굿맨(Goodman, M. 쿠퍼(Cooper), M. 개비쉬(Gavish) 및 S. 신더(Synder)의 Guanine Nucleotide and Cation Regulation of the Binding of [3H]Diethylphenylxanthine to Adenosine A-1 Receptors in Brain Membrance, Molecular Pharmacology, 21, 329-335 (1982) 참조].

막을 25 배의 빙냉 50 mM 트리스-HCl 완충액(pH 7.7)중에 균질화시킨다 (7 내지 10초 동안 고정시킨 폴리트론을 사용함). 이 균질물을 4℃에서 10분 동안 19,000 rpm으로 원심분리한다. 펠릿을 1 ml당 2 IU의 아데노신 데아미나제를 함유한 25배의 완충액 중에 재현탁시켜 세척하고 37℃에서 30분간 배양한다. 이 균질물을 다시 원심분리한다. 최종 펠릿을 25 배의 빙냉 완충액에 희석시킨다.

3개의 배양 튜브에 0.8 nM의 [3H]시클로헥실아데노신 100 μl, 각종 농도[50 nM의 트리스-HCI 완충액(pH 7.7)으로 10^-10내지 10^-6M 범위로 희석시킴]의 시험 화합물 200 μl, 막 현탁액(8 ㎎ 습량) 0.2 ml 및 트리스 완충액을 최종 용적이 2 ml가 되도록 첨가한다. 배양은 25℃에서 2시간 동안 수행하고, 각각을 진공을 사용하여 GF/B 유리섬유 필터로 여과하여 10초 내에 종결시킨다. 필터상의 막을 신틸레이션 바이알에 옮긴다. 필터를 5% 프로토졸을 함유한 옴니플루어 8 ㎖중에서 액상 신틸레이션 분광기로 계측한다.

[3H]시클로아데노신의 특이 결합은 10^-5M의 2-클로로아데노신의 존재하에 얻은 블랭크 값보다 초과되는 것으로 측정된다. 총 막결합 방사능은 시험 배양 튜브에 첨가된 방사능의 약 5%이다. 막에 대한 특이 결합은 총 결합의 약 90%이다. 막 현탁액의 단백질 함량은 로우리 등(상기 문헌, 265)의 방법으로 측정한다.

[3H]시클로헥실아데노신 결합이 시험 화합물에 의해 15% 이상 치환됨은 아데노신 결합 부위에 대한 친화성을 나타낸다.

상기의 시험 방법을 사용하여 얻은 아데노신 수용제 결합 친화성값

하기의 표는 이미 동정하였던 본 발명의 범위내에 화합물에 대한 아데노신 수용체의 결합 친화성을 나타낸다.

뉴클레오티드 구아노신 트리포스페이트(GTP)는 여러 신경전달물질 수용체에 대한 작동체 및 길항체의 결합에 상이하게 영향을 주는 것으로 나타나있다. 일반적으로,구아닌 뉴클레오티드는 길항체 친화성의 감소를 수반하지 않고 수용체에 대한 작동체의 친화성을 저하시킨다. 따라서, GTP는 아데노신 길항체인 [3H]-3-디에틸-8-페닐크산틴 결합의 억제제로서 작동체의 효능은 가소시키지만 길항체의 효능은 감소시키지 않는 것으로 나타나있다. 일반적으로, GTP는 [3H]-페닐이소프로필 아데노신 결합의 억제제로서 푸린 작동체의 효능은 매우 감소시키지만 길항체의 효능은 감소시키지 않으므로, 작동체와 길항체를 구별하는 유용한 약제이다[L.P. 데이비즈(Davies), S.C. 쵸우(Chow), J.H. 스케리트(Skerritt), D.J. 브라운(Brown) 및 G.A.R. 존스톤(Johnston), Pyrazolo[3,4-d]pyrimidines as adenosine antagonists, Life Sciences, 34, 2117-2128(1984) 참조]. 일반적으로, 아데노신 유사체는 β-D-리보푸라노실이 분자내 R위치에 존재하는 경우에는 작동체로, R이 수소 또는 페닐기인 경우에는 길항체로서 작용한다는 것을 알 수 있다.

[아데노신 수용체 선택성 아데노신 약제의 약학적 제조]

사용하고자 하는 화합물(들)의 정확량, 즉 소정의 효과를 얻기에 충분한 목적 화합물의 양은 사용 화합물, 투여 유형, 동물의 체격, 연령 및 종류, 투여 경로, 시간 및 횟수, 소기의 생리학적 효과의 같은 각종 인자에 좌우된다. 특정 경우에는, 투여량은 통상의 투여량 검인법으로 확정할 수 있다.

화합물은 제약상 허용되는 담체와 혼합하여 이루어진 조성물 형태로 투여하는 것이 바람직한데, 담체는 유효 화합물에 화학적으로 불활성이며 사용 조건하에서 어떠한 부작용이나 독성도 갖지 않는 것이어야 한다. 이러한 조성물은 제약적으로 허용가능한 담체와 배합시 담체 ml 당 활성 화합물을 약 0.1 μg 내지 500 ㎎ 함유하거나 또는 활성 화합물을 약 99 중량%까지 함유할 수 있다.

조성물은 정제, 캡슐제, 과립제, 피드(feed) 혼합물, 피드 첨가물 및 농축제, 분제, 입제와 같은 고상 형태 및 주사용 멸균 현탁제, 경구 투여용 현탁제 또는 용액제와 같은 액상 형태일 수 있다. 제약적으로 허용가능한 담체에는 계면활성 분산제, 현탁제, 정제 결합제, 윤활제, 향료 및 색소와 같은 부형제가 포함될 수 있다. 적절한 부형제는 문헌(Remingtons's Pharmaceutical Manufacturing, 제13판, Mack Publishing Co. 미국 펜실바니아주 이스톤 소재, 1965)에 개시되어 있다.

하기 실시예는 본 발명을 설명하기 위한 것이지 이에 의해 제한하는 것으로 해석되면 안된다.

[실시예 1]

우선, 1-페닐-4,6-디클로로피라졸로[3,4-d)-피리미딘 2.81 g을 에탄올 60 ml에 현탁시켰다. 이어서, 여기에 R-(+)-2-아미노-3-페닐-1프로판올 3.2 g을 교반하면서 첨가하였다. 48시간 후 용매를 진공 하에서 제거하고, 오일을 플래쉬 크로마토그래피(2-5-7% MeOH/CHCl)하여 (R)-β-[(1-페닐-6-클로로-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-일)아미노]벤젠프로판올 3.80 g(수율 95%)을 얻었다.

이어서, (R)-β-[1-페닐-6-클로로-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-일) 아미노]벤젠프로판올 1.234 g을 CHCl50 ml에 용해시키고, SOCl1.69 ml를 교반하면서 첨가하였다. 6시간 후, 이를 -28 ℃의 냉동기에 철야 방치하였다. 이어서, 이것을 여과하여 백색 침전물을 얻고, 이를 냉각 CHCl50 ml로 세정하였다. 백색 고체를 수거하고 70 ℃의 진공 오븐에서 24시간동안 건조시켜, 생성물 (R)-2,7-디히드로-7-페닐-2-(페닐메틸)-5-클로로-3H-이미다조[1,2-c]피라졸로[4,5-e]피리미딘 650 ㎎을 얻었다.

나트륨 50 ㎎을 n-프로판올 20 ml 중에서 반응시켰다. 이어서, (R)-2,7-디히드로-7-페닐-2-(페닐메틸)-5-클로로-3H-이미다조[1,2-c]피라졸로[4,5-e] 피리미딘 650 ㎎을 질소하에 교반하면서 첨가하였다. 실온에서 1.5 시간 후에, 혼탁한 백색 반응물을 NaCl 포화 용액 100 ml 에 붓고, CHCl200 ml로 추출하였다. 유기상을 MgSO상에서 건조시키고, 여과 및 농축시켜 오일을 얻고, 이것을 라디얼(radial) 크로마토그래피(10-20-30% 이소프로필 알콜/헥산, 4 ㎜ 플레이트)로 정제하여 생성물 200 ㎎을 얻었다. 이를 2개의 분리된 계 중에서 박층크로마토그래피한 결과, 순수한 생성물인 것으로 나타났다. 상기 생성물을 재결정화시켜 백색 고체로서 (R)-2,7-디히드로-7-페닐-2-(페닐메틸)-5-프로폭시-3H-이미다조 [1,2-c]피라졸로[4,5-e]피리미딘 132 ㎎을 얻었다(융점 45- 48℃).

[실시예 2]

우선, 6-클로로푸린리보사이드 5.0 g을 무수 CHCl100 ml 에 현탁한 후, 트리에틸아민 8.02 ml를 첨가하였다. 이 반응물을 0℃로 냉각한 다음, 염화벤조일 6.68 ml를 적가하였다. 염화물 첨가 후, 반응물을 실온으로 가온되도록 방치한 후 24 시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 제거하고, 잔류물을 에틸알콜 500 ml에 용해시켰다. 유기상을 물 300 ml, NaHCO포화 요액 300 ml(x 3), NaCl 포화 용액 300 ml로 세정하고, MgSO상에서 건조 후, 여과하고 농축하여 갈색 오일을 얻었다. 이것을 플래쉬 크로마토그래피(10-30-60% 에틸알콜/헥산)로 정제하여 6-클로로-9-β-D-리보푸라노실-2,3,5-트리벤조에이트-9H-푸린 10.3 g을 얻었다.

이어서, 6-클로로-9-β-D-리보푸라노실-2,3,5-트리벤조에이트-9H-푸린 4.0g을 (R)-(+)-2-아미노-3-페닐-1-프로판올 1.01 g, Et3N 0.92 ml 및 무수 에탄올 100 ml와 합하고, 4시간 동안 환류 온도로 가열하였다. 이어서 용매를 진공하에 제거하고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (5-10-20% 메탈올/CHCl)로 정제하여 불순물로서 생성물 약 3.5 g을 얻었다. 이것을 다시 크로마토그래피(5-10 메탄올/CHCL)하여 생성물 3.35g을 얻었다. 이를 다시 크로마토그래피하여 순수한 생성물 (R)-β-[(9-β-D-리보푸라노실-2,3,5-트리벤조에이트-9H-푸린-6-일)아미노]벤젠프로판올 1.78 g 및 불순물 1.26 g을 얻었다.

이어서, 상기 순수한 생성물 (R)-β[(9-β-D-리보푸라노실-2,3,5-트리벤조에이트-9H-푸린-6-일)아미노]벤젠프로판올 1.78 g을 무수 CHCl60 ml에 용해시키고 SOCl1.3 ml로 처리하였다. 이어서, 이것을 4시간 동안 환류 온도로 가열후 실온으로 철야 냉각시켰다. 이어서, 용매를 진공하에 제거하여 생성물 1.94 g을 얻었다. 이를 플래쉬 크로마토그래피(5% MeOH/CHCl)로 정제하여 제1 생성물 300 ㎎ 및 제2 생성물 1,200 ㎎을 얻었다. 제2 생성물을 2회 라디얼 크로마토그래피 (2-4-6% MeOH/CHCl, 2 ㎜ 플레이트)하여, 포말체 생성물로서 R-7,8-디히드로-3-(β-D-리보푸라노실-2,3,5-트리벤조에이트)-8(페닐메틸)-3H-디이미다조[1,2-c:4' ,5'-e]피리미딘 1.10 g을 얻었다.

이어서, 포말체 생성물 R-7,8-디히드로-3-(β-D-리보푸라노실-2,3,5-트리 벤조에이트)-8-(페닐메틸)-3H-디이미다조[1,2-c:4' ,5'-e]피리미딘 580 ㎎을 메탄올 20 ml에 용해시키고, 촉매량의 NaOMe로 처리하였다. 2시간 후, 박층 크로마토그래피 결과는 반응이 완결된 것으로 나타났다. 용매를 제거하고, 잔류물을 라디얼 크로마토그래피 (20-50% MeOH/CHCl, 1 ㎜ 플레이트)로 정제하여 포말체 약 300 ㎎을 얻었다. 이것을 약 30% 이소프로필알콜/헥산으로부터 재결정화하고 39 ℃의 진공 하에 144시간 동안 건조시킨 후에 R-7,8-디히드로-3-(β-D-리보푸라노실)-8-(페닐메틸)-3H-디이미다조[1,2-c:4' ,5'-e]피리미딘 168㎎을 얻었다(융점 140-143℃).

[실시예 3]

우선, 출발 물질인 4-클로로-1-페닐피라졸로[3,4-d]피리미딘 1.13 g을 무수에탄올 60 ml 중의 EtN 0.67 ml 및 (R)-(+)-2-아미노-3-페닐-1-프로판올 0.74 g과 합하고 스팀조에서 4시간 동안 가열하였다. 이어서, 용매를 진공하에서 제거하고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (10-20% 이소프로필 알콜/헥산)로 정제하여 (R)-β-[1-페닐-1H-피라졸로[3,4,-d]피리미딘-4-일)아미노]벤젠프로판올 1.24 g(수율 74%)을 얻었다.

이어서, (R)-β[1-페닐-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-일)아미노]벤젠프로판올 1.24 g을 무수 CHCl60 ml에 용해시키고, 여기에 SOCl1.82 ml를 첨가한 후, 반응물을 환류 온도로 4시간 동안 가열하였다. 이를 냉각시킨 후, 용매를 제거하고 침전물을 부타논 중에서 얻었다. 백색 현탁액을 여과하여 백색 분말을 얻고, 이것을 약 5% MeOH/부타논으로부터 재결정화시키고 85 ℃의 진공하에 4시간 동안 오븐 건조시킨 후, 길고 편편한 맑은 결정으로서 (R)-2,7-디히드로-7-페닐-2-(페닐메틸)-3H-이미다조[1,2-c]피라졸로[4,3-e]피리미딘 229.4 ㎎을 얻었다.(융점 270℃).

[실시예 4]

우선, 6-플로로-9-페닐푸린 2.0 g을 (S)-(-)-2-아미노-3-페닐-1-프로판올 1.38 g, EtN 1.27 ml 및 무수 에탄올 50 ml와 합하고, 환류 온도로 5시간 동안 가열하였다. 이어서, 용매를 진공하에 제거하고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (2.5-5% MeOH/CHCl)로 정제하여 생성물 2.27 g(수율 76%)을 얻었다. 이것을 약 10%의 이소프로필알콜/헥산으로부터 재결정화하고 90 ℃의 진공하에 3일 동안 건조시킨 후에 백색 고체로서 (R)-β-[(9-페닐-9H-푸린-6-일)아미노]벤젠프로판올 0.87 g을 얻었다(융점 130-132℃).

이어서, (R)-β[(9-페닐-9H-푸린-6-일)아미노]벤젠프로판올 1.13 g을 SOCl1.7 ml와 함께 CHCl50 ml에 용해시키고, 6시간 동안 환류 온도로 가열하였다. 이어서, 용매를 진공하에서 제거하고, 잔류물을 부타논 중에서 얻은 후 여과하였다. 백색 침전물을 약 5% MeOH/부타논으로부터 재결정화하고 39℃에서 진공하에 2일 동안 건조시킨 후 (S)-7,8-디히드로-3-페닐-8-(페닐메틸)-5-프로폭시-3H-디이미다조[1,2-c: 4' 5'-e]피리미딘 530 ㎎을 얻었다(융점 270 ℃).

[실시예 5]

우선, 6-클로로푸린 리보사이드 5.0 g을 무수 CHCl100 ml에 현탁시킨 후, 트리에틸아민 8.02 ml를 첨가하였다. 이 반응물을 0 ℃로 냉각시킨 후, 염화벤조일 6.68 ml를 적가하였다. 염화물 첨가 후에 반응물을 실온으로 가온하고, 24 시간 동안 교반화였다. 용매를 진공하에 제거하고, 잔류물을 에틸알콜 500 ml에 용해시켰다. 유기상을 물 300 ml, NaHCO포화용액 300 ml(x3), NaCl 포화 용액 300 ml로 세정시키고, MgSO상에서 건조시킨 후, 여과하고 농축시켜 갈색 오일을 얻었다. 이것을 플래쉬 크로마토그래피 (10-30- 60% 에틸알콜/헥산)로 정제하여 6-클로로-9-β-D-리보푸라노실-2,3,5-트리벤조에이트-9H-푸린 10.3 g을 얻었다.

이어서, 6-클로로-9-β-D-리보푸라노실-2,3,5-트리벤조에이트-9H-푸린 4.0 g을 무수 에탄올 100 ml 중의 (S)-(-)-2-아미노-3-페닐-1-프로판올 1.01 및 EtN 0.92 ml와 합한 후, 환류 온도로 4시간 동안 가열하였다. 이어서, 용매를 진공하에 제거하고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (5% MeOH/CHCl)로 정제하여 (S)-β-[(9-β-D-리부푸라노실-2,3,5-트리벤조에이트-9H-푸린-6-일)아미노]벤젠프로판올 2.36 g 및 불손물 1.73 g을 얻었다.

이어서, (S)-β[(9-β-리보푸라노실-2,3,5-트리벤조에이트-9H-푸린-6-일)아미노]벤젠프로판올 2.36 g을 무수 CHCl80 ml에 용해시키고, SOCl1.7 ml로 처리하였다. 이 반응물을 4시간 동안 환류 온도로 가열하고, 실온에서 냉각시키고 철야 교반한 다음, 진공하에 용매를 제거하였다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (5% MeOH/CHCl)로 정제하여, S-7,8-디히드로-3-(β-D-리보푸라노실-2,3,5-트리벤조에이트(-8-(페닐메틸)-3H-디이미다조[1,2-c:4' ,5'-e]피리미딘 1.77 g(수율 77%)을 얻었다.

S-7,8-디히드로-3-(β-D-리보푸라노실-2,3,5-트리벤조에이트)-8-(페닐메틸)-3H-디이미다조[1,2-c:4' ,5'-e]피리미딘 1.77 g을 메탄올 60 ml에 용해시키고, 촉매량의 NaOMe로 처리하였다. 24시간 후, 용매를 진공하에 제거하고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (10-20-50% MeOH/CHCl, 2 ㎜ 플레이트)로 정제하여 생서물 700 ㎎을 얻었다. 이것을 에테르/헥산(약 5%)로 처리하고, 39 ℃에서 6일동안 진공하에 건조시켜 S-7,8-디히드로-3-(β-D-리보푸라노실)-8-(페닐메틸)-3H-디이미다조[1,2-c:4' ,5'-e]피리미딘 470 ㎎을 얻었다.

[실시예 6]

출발 물질인 1-페닐-4,6-디클로로피라졸로[3,4-d]피리미딘 2.5 g을 에탄올 60 ml에 현탁시켰다. 이어서, (S)-(-)-2-아미노-3-페닐-1-프로판올 4.28 g을 첨가하고 반응물을 24 시간 동안 교반하였다. 이어서 용매를 진공하에 제거하고, 조 오일을 플래쉬 크로마토그래피 (10-15-20% 이소프로필알콜/헥산)로 정제하여 (S)-β-[(1-페닐-6-클로로-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-일)아미노]벤젠프로판올 3.5 g(수율 97%)을 얻었다.

이어서, 상기 생성물 (S)-β-[(1-페닐-6-클로로-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-일)아미노]벤젠프로판올 1.037 g을 CHCl25 ml에 용해시켰다. 이어서, 염화티오닐 1.38 ml를 첨가하고, 반응물을 철야 교반하였다. 이어서 이것을 -28 ℃의 냉동기에 두었다. 5시간 후 침전물을 여과하고 냉각 CHCl로 세정하면서 수거하였다. 백색 고체를 70 ℃의 진공 오븐에서 24시간 동안 건조시켜 (S)-2,7-디히디로-7-페닐-2-(페닐메틸)-5-클로로-3H-이미다조[1,2-c]피라졸로[4,3-e]피리미딘 550 ㎎ (수율 56%)을 얻었다.

이어서, 나트륨 20 ㎎을 n-프로판올 30 ml 중에 반응시켰다. 이 용액을 빙조를 사용하여 냉각시키고, 상기 생성물 (S)-2,7-디히드로-7-페닐-2-(페닐메틸)-5-클로로-3H-이미다조[1,2-c]피라졸로[4,3-e]피리미딘 209 ㎎을 교반하면서 첨가하였다. 1시간 후에 반응물을 NaCl 포화 용액 100 ml에 붓고 CHCl200 ml로 추출하였다. 유기상을 MgSO상에서 건조시키고, 여과하고 농축하여 오일을 얻고, 이것을 라디얼 크로마토그래피 (5-10% MeOH/CHCl, 2 ㎜ 플레이트)로 정제하여 (S)-2,7-디히드로-7-페닐-2-(페닐메틸)-5-프로폭시-3H-이미다조[1,2-c]피라졸로[4,3-e]피리미딘 168 ㎎(수율 75%)을 얻었다.

[실시예 7]

우선, 출발 물질인 1-페닐-4,6-디클로로피라졸로[3,4-d]피리미딘 2 g을 에탄올 50 ml에 현탁시킨 후, 1S,2R-노르에페드린 5.6 g을 첨가하였다. 24 시간 동안 교반한 후, 용매를 진공하에 제거하고, 조 물질을 플래쉬 크로마토그래피(10% 이소프로필알콜/헥산)으로 정제하여 [R-(S,R)]-α-[1-[(1-페닐-6-클로로-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-일)아미노]에틸]벤젠메탄올 1.90 g을 얻었다.

이어서, 상기 생성물 [R-(S,R)]-α-[1-[(1-페닐-6-클로로-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-일)아미노]에틸]벤젠메탄올 1.9g CHCN 150 ml 중의 SOCl2.2 ml와 교반하에 합하였다. 20 시간 후 용매를 진공하에 제거하고,갈색 잔류물을 CHCl250 ml 중에 용해시켰다. 유기상을 HO 200 ml 및 NaCl 포화 용액 200 ml로 세정하고, MgSO상에서 건조시키고, 여과하고 농축하여 갈색 오일을 얻고, 이것을 플래쉬 크로마토그래피 (50% 에탄올/헥산)로 정제하여 맑은 점성 오일로서 (2R-트랜스)-2,7-디히드로-2-메틸-3,7-디페닐-5-클로로-3H-이미다조[1,2-c]피라졸로[4,3-e]피리미딘 850 ㎎을 얻었다.

나트륨 51 ㎎을 n-프로판올 5 ml에 용해시켰다. n-프로판올 15 ml에 용해된 상기 생성물(2R-트랜스)-2,7-디히드로-2-메틸-3,7-디페닐-5-클로로-3H-이미다조[1,2-c]피라졸로[4,3-e]피리미딘 670 ㎎을 교반하면서 프로폭시드 용액에 첨가하였다. 1시간 후에 반응물을 NaCl 포화 용액 200 ml에 붓고, 추출물을 MgSO상에서 건조시키고, 여과하고 농축하여 오일을 얻고, 이를 라디얼 크로마토그래피 (30-50-70-90% 에탄올/헥산, 2 ㎜ 플레이트)로 정제하여 (2R-트랜스)-2,7-디히드로-2-메틸-3,7-디페닐-5-프로폭시-3H-이미다조[1,2-c]피라졸로[4,3-e]피리미딘 600 ㎎을 얻었다.

[실시예 8]

우선, 6-클로로-9-페닐푸린 2.0 g을 (R)-(+)-2-아미노-3-페닐-1-프로판올 1.38 g, EtN 1.27 ml 및 무수 에탄올 50 ml와 합하고, 5시간 동안 환류 온도로 가열하였다. 이어서 용매를 제거하고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (5% MeOH/CHCl)로 정제한 후, 2차 정제(2.5-5% MeOH/CHCl)하여, 백색 포말체 2.66 g(수율 88%)을 얻었다. 이것을 약 10% 이소프로필알콜/헥산으로부터 재결정화하고, 90 ℃에서 4일 동안 진공하에 건조시켜 백색 고체로서 (R)-β-[(9-페닐9H-푸린-6-일)아미노]벤젠프로판올 1.28g을 얻었다(융점 130-132℃).

이어서, 상기 생성물 (R)-β-[(9-페닐9H-푸린-6-일)아미노]벤젠프로판올1.0 g을 CHCl50 ml에서 SOCl1.5 ml와 함께 용해시키고, 6시간 동안 환류 온도로 가열하였다. 용매를 진공하에 제거하고, 잔류물을 부타논 중에서 얻었고 여과하였다. 백색 침전물울 약 5% 메탄올/부타논으로부터 재결정화시키고, 진공하에 3일 동안 건조시킨 후에 (R)-7,8-디히드로-3-페닐-8-(페닐메틸)-3H-디이미다조[1,2-c:4' ,5'-e]피리미딘 430 ㎎을 얻었다.

[실시예 9]

우선, 6-클로로푸린 2.5 g을 무수 에탄올 60 ml에 용해시킨 후, EtN 2.25 ml 및 R-(+)-2-아미노-3-페닐-1-프로판올 2.45 g을 교반하면서 첨가하였다. 이 반응물을 진공하에 제거하고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (10-15% MeOH/CHCl)로 정제하여 생성물 3.35 g을 얻었다. 이것을 약 40% 이소프로필알콜/헥산으로 재결정화하고, 80 ℃에서 48 시간 동안 진공 건조시킨 후 R-β-[(1H-푸린-6-일)아미노]벤젠프로판올 2.23 g을 얻었다.

이어서, 상기 생성물 R-β-[(1H-푸린-6-일)아미노]벤제프로판올 1.5 g을 무수 CHCl60 ml에 현탁시킨 후, SOCl2.85 ml를 첨가하였다. 반응물을 4시간 동안 환류 온도는 가열한 후, 실온으로 철야 냉각시켰다. 용매를 진공하에 제거한 후, 잔류물을 부타논 100 ml 중에서 얻었다. 이것을 여과하여 황색 고체 1670 ㎎을 얻었다. 이를 10% MeOH/부타논으로부터 재결정화시키고 85 ℃의 진공하에 오븐 건조시킨 후에 생성물 690 ㎎을 얻었다. 이것을 NaHCO로 처리하여 유리 염기를 제조하고, 잔류물을 라디얼 크로마토그래피 (10-20% MeOH/CHCl, 2 ㎜ 플레이트)로 정제하고 39 ℃의 고진공하에 6일 동안 건조시킨 후에 (R)-7,8-디히드로-8-(페닐메틸)-1H-디이미다조[1,2-c:4' ,5'-e]피리미딘 97.0 ㎎을 얻었다(융점 140℃).

[실시예 10]

우선, 출발 물질인 4-클로로-1-페닐-피라졸로[3,4-d]피리미딘 1 g을 무수 에탄올 60 ml 중의 (S)-(-)-2-아미노-3-페닐-1-프로판올 651 ㎎ 및 EtN 0.6 ml와 합하고 5시간 동안 환류 온도로 가열하였다. 이어서 용매를 진공하에 제거하고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (10-15-20% 이소프로필 알콜/헥산)로 정제하여 백색 고체를 얻고, 이것을 약 20% 이소프로필 알콜/헥산으로부터 재결정화하고 진공하에 오븐 건조시킨 후에 (S)-β-[(1-페닐-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-일)아미노]벤젠프로판올 1.06 g을 얻었다.(융점 114- 117℃).

이어서, 상기 생성물 (S)-β-[(1-페닐-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-일)아미노]벤젠프로판올 300 ㎎을 CHCl15 ml에 용해시킨 후, SOCl0.44 ml를 첨가하였다. 이 반응물을 환류 온도로 3.5 시간 동안 가열하였다. 이어서 용매를 질소 기류 하에서 제거하였다. 백색 고체를 약 30% 이소프로필 알콜/헥산으로부터 재결정화한 후 약 5% MeOH/부타논으로부터 2차 재결정화한 다음, 39 ℃의 진공하에 5일 동안 건조시켜 (S)-2,7-디히드로-7-페닐-2-(페닐메틸)-3H-이미다조[1,2-c]피라졸로[4,3-e]피리미딘 45 ㎎을 얻었다(융점 255℃).

[실시예 11]

우선, 6-클로로푸린 2.5 g을 에탄올 60 ml에 현탁시켰다. 이어서, (S)-(-)-아미노-3-페닐-1-프로판올 2.45 g 및 EtN 2.25 ml를 첨가하고, 이 반응물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 박층 크로마토그래피 결과는 변화된 것이 없는 것으로 나타났다. 이어서, 이것을 환류 온도로 20시간 동안 가열하였다. 이어서 용매를 진공하에 제거하고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(10% MeOH/CHCl)로 정제하여 생성물 약 3 g을 얻었다. 이것을 약 40% 이소프로필알콜/헥산으로 2회 재결정화하고, 80 ℃의 진공하에 72시간 동안 오븐 건조시켜 백색 고체로서 S-β-[(1H-푸린-6-일)아미노]벤젠프로판올 2.13 g을 얻었다(융점 207-209℃).

다음에는, 상기 생성물 S-β-[(1H-푸린-6-일)아미노]벤젠프로판올 300 ㎎을 CHCl20 ml에 재현탁시켰다. 이어서, SOCl0.57 ml를 첨가하고 반응물을 4시간 동안 환류 온도로 가열하였다. 이어서 용매를 진공하에 제거하고, 백색 고체를 부타논 중에서 얻었다. 이 현탁액을 여과하고, 백색 침전물을 5% MeOH/부타논으로부터 재결정하여 담황색 결정 116.9 ㎎을 얻었다. 이것을 80 ℃의 진공하에 24시간 동안 건조시켜 (S)-7,8-디히드로-8-(페닐메틸)-1H-디이미다조[1,2-c:4' ,5'-e]피리미딘 88 ㎎을 얻었다(융점 268-270℃).

[실시예 12]

우선, 출발 물질인 1-페닐-4,6-디클로로피라졸로[3,4-d]피리미딘 1.5 g을 에탄올 40 ml에 현탁시켰다. 이어서, IR,2S-(-)-노르에페드린 2.6 g을 첨가하고, 이 반응물을 48 시간 동안 교반하였다. 용매를 제거하고, 오일을 플래쉬 크로마토그래피 (50-70% EtO/헥산)하여 [S-(R,S)]-α-[1-[(1-페닐-6-클로로-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-일)아미노]에틸]벤젠메탄올 2.1 g을 얻었다.

이어서, 상기 생성물 [S-(R,S)]-α-[1-[(1-페닐-6-클로로-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-일)아미노]에틸]벤젠메탄올 700 ㎎을 CHCN 50 ml에 용해시킨 후, SOCl0.26 ml를 교반하면서 첨가하였다. 이 반응물을 24 시간 동안 교반하였다. 이어서 용매를 제거하고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(2-4-8-10% MeOH/CHCl)하여 생성물 및 출발 물질의 혼합물 840 ㎎을 얻었다. 이것을 라디얼 크로마토그래피 (20-30-50% 에탄올/헥산, 4 ㎜ 플레이트)로 다시 정제하여 (2S-트랜스)-2,7-디히드로-2-메틸-3,7-디페닐-S-클로로-3H-이미다조[1,2-c]피라졸로[4,3-e]피리미딘 210 ㎎을 얻었다.

이어서, 나트륨 약 16 ㎎을 n-프로판올 1 ml에 용해시킨 후, n-프로판올 4 ml 중의 상기 생성물 (2S-트랜스)-2,7-디히드로-2-메틸-3,7-디페닐-S-클로로-3H-이미다조[1,2-c]피라졸로[4,3-e]피리미딘 210 ㎎을 교반하면서 첨가하였더니 백색 침전물(NaCl)이 생성되었다. 3시간 후에 이 반응물을 NaCl 표화 용액 100 ml에 붓고, CHCl(2회, 100 ml)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 진공하에 농축하여 오일을 얻고, 이것을 라디얼 크로마토그래피(2% MeOH/CHCl, 2 ㎜ 플레이트)로 정제하여 백색 포말제 217 ㎎을 얻었다. 이것을 PO를 사용하여 진공하에 8일 동안 건조시켜 (2S-트랜스)-2,7-디히드로-2-메틸-3,7-디페닐-5-프로폭시-3H-이미다조[1,2-c]피라졸로[4,3-e]피리미딘 약 180 ㎎을 얻었다.

[실시예 13]

바이올루르산 100 g을 물 1 리터에 격렬히 교반하면서 첨가하고, 70℃로 가열하였다. 아황산수소나트륨 200 g을 15분에 걸쳐 조금씩 첨가하였다. 2.5시간 후에 상기 반응물을 여과하고, 침전물을 물로 세정하였다. 고체는 진공하에 98 ℃에서 3시간 동안 건조시켜 5-아미노-2,4,6-트리히드록시피리미딘 75 g을 얻었다.

5-아미노-2,4,6-트리히드록시피리미딘 75 g을 1.5 내지 5% 수산화 나트륨 중에서 격렬히 교반하면서 용해시켜 보라색 용액을 얻었다. 이 반응물을 60 ℃로 가열하고, 이소티오시안산페닐 63 ml를 1.5 시간에 걸쳐 적가하였다. 반응물이 담황색으로 변하였다. 이 반응물을 60 ℃에서 2시간 더 교반하고, 냉각 후 빙초산으로 산성화시키자 담황색 침전물이 생성되었다. 이것을 여과하여 N-(2,4,6-트리히드록시-5-피리미딜)-N'-페닐티오우레아 약 75 g을 얻었다.

N-(2,4,6-트리히드록시-5-피리미딜)-N'-페닐티오우레아 약 75 g을 농축 염산 600 ml와 합하고, 5시간 동안 환류 온도로 가열하였다(포말이 상당히 발생함). 이어서 이것을 물 2 리터로 희석하고, 즉시 여과한 다음 물로 세정하였다. 이를 80 ℃의 진공하에 2일 동안 건조시켜 생성물 50.08 g을 얻었다(바이올루르산으로부터 수율 34%). 소량의 시료를 고온의 빙초산으로 연마하여 중간체인 2,6-디히드록시-9-페닐-8-푸린티올을 얻었다.

2,6-디히드록시-9-페닐-8-푸린티올 10 g을 IN 수산화나트륨 약 100 ml에 용해시킨 후, 라네이 니켈 약 30 g을 첨가하였다. 약간의 포말이 발생하였다. 이 반응물을 환류 온도(오일조 약 120℃)로 서서히 가열하였다. 1.5시간 후에 반응물을 여과하였다. 여액을 약 4℃로 냉각하고 여과하였다. 백색 고체를 목탄처리한 고온수에 용해시키고, 여과한 다음 농축 염산으로 처리하여 백색 침전물을 얻었다. 이것을 여과하고, 80 ℃의 진공하에 3시간 동안 건조시켜 2,6-디히드록시-9-페닐푸린 3.3 g을 얻었다(수율 38%).

2,6-디히드록시-9-페닐푸린 3.3 g을 POCl83 ml 중의 PCl17 g의 교반 현탁액에 첨가하였다. 이 반응물을 환류 온도(오일조 120℃)로 26시간 동안 가열하였다. 냉각시킨 후, 용매를 진공하에 제거하고, 잔류물을 빙수중에서 조심스럽게 급냉시키고 수층을 EtO (3회, 200 ml)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 MgSO상에서 건조시키고, 여과하고 농축하여 생성물 3.52 g을 얻었다. 이를 에탄올/물로부터 재결정화 후, 80 ℃의 진공하에 3일 동안 건조시켜 2,6-디히드로-9-페닐 푸린 1.40 g을 얻었다.

2,6-디클로로-9-페닐푸린 1.24 g을 무수 에탄올 50 ml, 트리에틸아민 0.7 ml, R-(+)-2-아미노-3-페닐-1-프로판올 0.71 g과 합하고 5시간 동안 환류 온도로 가열하였다. 이어서, 용매를 진공하에 제거하고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(5% 메탄올/트리클로로메탄)로 정제하여 (R)-β-[(9-페닐-2-클로로-1H-푸린-6-일)아미노]벤젠프로판올 1.47 g을 얻었다.

나트륨 340 ㎎을 n-프로판올 40 ml에 용해시켰다. (R)-β[(9-페닐-2-클로로-1H-푸린-6-일)아미노]벤젠프로판올 1.4 g을 첨가하고, 이 반응물을 환류 온도로 4시간 동안 가열하였다. 이 반응물을 냉각 후에 95% 염화나트륨 포화 용액 약 200 ml에 붓고, 트리클로로메탄 (3회, 200ml)으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 MgSO상에서 건조시키고, 여과하고 농축하였다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (2% 메탄올/트리클로로메탄)로 정제하여 생성물 1.41 g을 얻었다. 이것을 약 5% 이소프로필알콜/헥산으로부터 재결정화하여 불순한 생성물 1.05 g을 얻었다. 이중 300 ㎎을 다시 5% 이소프로필알콜/헥산으로부터 재결정화하고, 80 ℃의 진공하에 168시간 동안 건조시킨 후에, (R)-β-[(2-프로폭시-9-페닐-1H-푸린-6-일)아미노]벤젠프로판올 211 ㎎을 얻었다(융점 127-128℃).

(R)-β-[(2-프로폭시-9-페닐-1H-푸린-6-일)아미노]벤젠프로판올 750 ㎎을 무수 디클로로메탄 40 ml에 용해시키고, SOCl0.95 ml로 처리하고 3시간 동안 환류 온도로 가열하였다. 이어서 용매를 진공하에 제거하고, 잔류물을 라디얼 크로마토그래피 (5% 메탄올/트리클로로메탄)로 정제하였다. 이어서, 생성물을 약 20% 이소프로필알콜/헥산으로부터 재결정화시켜 생성물 180 ㎎을 얻었다. 이것을 라디얼 크로마토그래피(3-6% 메탄올/트리클로로메탄, 2 ㎜ 플레이트)로 다시 정제하여 잔류물을 얻고, 이를 에테르로 연화하였다. 고체를 수거하고 39℃의 진공하에 168 시간 동안 건조시켜 담갈색 고체로서 생성물 114.2 ㎎을 얻었다. 이것을 라디얼 크로마토그래피(3-6% 메탄올/트리클로로메탄)로 정제하여, (R)-7,8-디히드로-3-페닐-8(페닐메틸)-5-프로폭시-3H-디이미다조[1,2-c:4 '5'-e]피리미딘 60 ㎎을 얻었다.

[실시예 14]

바이올루르산 100 g을 물 1 리터에 격렬히 교반하면서 첨가하고, 70 ℃로 가열하였다. 아황산수소나트륨 200 g을 15분에 걸쳐 조금씩 첨가하였다. 2.5시간 후에 반응물을 여과하고, 침전물을 물로 세정하였다. 고체를 98 ℃의 진공하에 3시간 동안 건조시켜 5-아미노-2,4,6-트리히드록시피리미딘 75 g을 얻었다.

5-아미노-2,4,6-트리히드록시피리미딘 75 g을 1.5 내지 5% 수산화 나트륨에 격렬히 교반하면서 용해시켜 보라색 용액을 얻었다. 이 반응물을 60 ℃로 가열하고, 이소티오시안산페닐 63 ml를 1.5시간에 걸쳐 적가하였다. 반응물이 담황색으로 변하였다. 이 반응물을 60 ℃에서 2시간 더 교반하고, 냉각시키고, 빙초산으로 산성화하여 담황색 침전물을 얻었다. 이것을 여과하여 N-(2,4,6-트리히드록시-5-피리미딜)-N'-페닐티오우레아 약 75 g을 얻었다.

N-(2,4,6-트리히드록시-5-피리미딜)-N'-페닐티오우레아 약 75 g을 농축 염산 600 ml와 합하고, 5시간 동안 환류 온도로 가열하였다 (포말이 상당량 발생). 이어서 이것을 물 2 리터로 희석 후, 즉시 여과하고 물로 세척하였다. 이를 80 ℃의 진공하에 2시간 동안 건조시켜 생성물 50.08 g을 얻었다(바이올루르산으로부터 34% 수율). 소량의 시료를 고온의 빙초산으로 연마하여 2,6-디히드록시-9-페닐-8-푸린티올을 얻었다.

,2,6-디히드록시-9-페닐-8-푸린티올 2.5 g을 1N 수산화나트륨 250 ml에 용해시키고, 라네이 니켈 75 g으로 처리하였다. 이어서 이를 환류 온도로 2시간 동안 가열한 후, 이것을 고온인 채로 셀라이트를 통해 여과시켰다. 여액을 약 4 ℃로 냉각시키고, 백색 침전물은 수거하고, 온수에 용해시키고, 목탄으로 처리하고, 여과한 다음 빙조에서 냉각시키고 농축 염산으로 산성화시켰다. 백색 생성물을 수거하고 70 ℃의 진공하에 2일 동안 건조시켜 2,6-디히드록시-9-페닐푸린 11.3 g을 얻었다.

2,6-디히드록시-9-페닐푸린 11.2 g을 POCl280 ml 및 PCl57 g과 합하고 환류 온도(오일조 120℃)로 24시간 동안 가열하였다. 이어서, 용매를 감압 하에서 제거하고, 잔류물을 얼음 중에서 급냉시켰다. 수층을 에테르 (4회, 500 ml)로 추출하고, 합한 유기 추출물을 MgSO상에서 건조시키고, 여과하고 농축하여 황생 고체로서 생성물 약 4 g을 얻었다. 이것을 에탄올/물로부터 재결정화시키고, 80 ℃의 진공하에 48시간 동안 건조시킨 후에 2,6-디클로로-9-페닐푸린 2.39 g을 얻었다.

2,6-디클로로-9-페닐푸린 2.0 g을 S-(+)-2-아미노-3-페닐-1-프로판올 1.15 g, 트리에틸아민 1.13 ml 및 무수 에탄올 70 ml와 합하였다. 이 반응물을 4시간동안 환류 온도로 가열하였다. 이어서 용매를 진공하에 제거하고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (3-5% 메탄올/트리클로로메탄)로 정제하여 (S)-β-[(9-페닐-2-클로로-1H-푸린-6-일)아미노]벤젠프로판올 2.77 g을 얻었다.

나트륨 836 ㎎을 n-프로판올 60 ml에 용해시켰다. n-프로판올 20 ml 중의 (S)-β-[(9-페닐-2-클로로-1H-푸린-6-일)아미노]벤젠프로판올 2.76 g을 반응물에 첨가하고, 5시간 동안 환류 온도로 가열하였다. 이를 냉각 후에 95% 염화나트륨 200 ml에 붓고, 트리클로로메탄 (3회, 200 ml)으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 MgSO상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켜 잔류물을 얻고, 이것을 플래쉬 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물 2.15 g을 얻었다. 이것을 5% 이소프로필알콜/헥산으로부터 재결정화하고, 70 ℃의 진공하에 24시간 동안 건조시킨 후에 (S)-β-[(2-프로폭시-9-페닐-1H-푸린-6-일)아미노]벤젠프로판올 1.78 g을 얻었다(융점 126-128℃).

(S)-β-[(2-프로폭시-9-페닐-1H-푸린-6-일)아미노]벤젠프로판올 1.2 g을 무수 디클로로메탄 60 ml에 용해시키고, SOCl1.53 ml로 처리하였다. 이 반응물을 N하에서 4시간 동안 환류 온도로 가열하였다. 이어서 용매를 진공하에 제거하고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(5% 메탄올/트리클로로메탄)로 정제하여 생성물 0.99 g을 얻었다. 이것을 39 ℃의 고진공하에 7일 동안 건조시켜 (S)-7,8-디히드로-3-페닐-8-(페닐메틸)-5-프로폭시-3H-디이미다조[1,2-c:4' ,5'-e]피리미딘 437.8 ㎎을 얻었다(융점 74-80℃).

Claims

하기 일반식의 화합물.

식 중, R₁은 수소, C₁-₄저급 알킬 또는 C₁-₄저급 알콕시이며, R₂는 수소, 페닐 또는 β-D-리보푸라노실이고, Y는 -N= 또는 -CH=이며, Z은 -N= 또는 -CH=이되, 단, Y와 Z은 서로 동일하지 않으며, n은 1 내지 3의 정수이고, L은 수소 또는 페닐이며, L이 페닐인 경우를 제외하고는 M은 페닐이고, L이 페닐일 때 M은 수소 또는 C₁-₃저급 알킬이다.
제1항에 있어서, 하기 일반식의 화합물.

식 중, R₁은 수소, 페닐 또는 β-D-리보푸라노실이고, R₂는 수소, C₁-₄저급 알킬 또는 C₁-₄저급 알콕시이고, Y는 -N= 또는 -CH=이며, Z은 -N= 또는 -CH=이되, 단, Y와 Z은 서로 동일하지 않다.
제1항에 있어서, 하기일반식의 화합물.

식 중, R₁은 수소, 페닐 또는 β-D-리보푸라노실이고, R₂는 수소, C₁-₄저급 알킬 또는 C₁-₄저급 알콕시이다.
제1항에 있어서, (R)-7,8-디히드로-3-페닐-8-(페닐메틸)-3H-디이미다조[1,2-c:4' ,5'-e]피리미딘인 화합물.
제1항에 있어서, (S)-7,8-디히드로-3-페닐-8-(페닐메틸)-3H-디이미다조[1,2-c:4' ,5'-e]피리미딘인 화합물.
제1항에 있어서, (S)-7,8-디히드로-3-(β-D-리보푸라노실)-8-(페닐메틸)-3H-디이미다조[1,2-c:4' ,5'-e]피리미딘인 화합물.
제1항에 있어서, (R)-7,8-디히드로-3-(β-D-리보푸라노실)-8-(페닐메틸)-3H-디이미다조[1,2-c:4' ,5'-e]피리미딘인 화합물.
제1항에 있어서, 하기 일반식의 화합물.

식 중, R₁은 수소, 페닐 또는 β-D-리보푸라노실이다.
제1항에 있어서, (R)-7,8-디히드로-8-(페닐메틸)-1H-디이미다조[1,2-c:4' ,5'-e]피리미딘인 화합물.
제1항에 있어서, (S)-7,8-디히드로-8-(페니메틸)-1H-디이미다조[1,2-c:4' ,5'-e]피리미딘인 화합물.
제1항에 있어서, (R)-7,8-디히드로-3-페닐-8-(페닐메틸)-5-프로폭시-3H-디이미다조[1,2-c:4' ,5'-e]피리미딘인 화합물.
제1항에 있어서, (S)-7,8-디히드로-3-페닐-8-(페닐메틸)-5-프로폭시-3H-디이미다조[1,2-c:4' ,5'-e]피리미딘인 화합물.
제1항에 있어서, 하기 일반식의 화합물.

식 중, R₂는 수소, C₁-₄저급 알킬 또는 C₁-₄저급 알콕시이고, R₁은 수소, 페닐 또는 β-D-리보푸라노실이다.
제1항에 있어서, 하기 일반식의 화합물.

식 중, R₁은 수소, 페닐 또는 β-D-리보푸라노실이다.
제1항에 있어서, (R)-2,7-디히드로-7-페닐-2-(페닐메틸)-5-프로폭시-3H-이미다조[1.2-c]피라졸로[4,3-e]피리미딘인 화합물.
제1항에 있어서, (S)-2,7-디히드로-7-페닐-2-(페닐메틸)-5-프로폭시-3H-이미다조[1,2-c]피라졸로[4,5-e]피리미딘인 화합물.
제1항에 있어서, (R)-2,7-디히드로-7-페닐-2-(페닐메틸)-3H-이미다조 [1,2-c]피라졸로[4,5-e]피리미딘인 화합물.
제1항에 있어서, (S)-2,7-디히드로-7-페닐-2-(페닐메틸)-3H-이미다조 [1,2-c]피라졸로[4,5-e]피리미딘인 화합물.
제1항에 있어서, 하기 일반식의 화합물.

식 중, R₁은 수소, 페닐 또는 β-D-리보푸라노실이고, R₂는 수소, C₁-₄저급 알킬 또는 C₁-₄저급 알콕시이다.
제1항에 있어서, 하기 일반식의 화합물.

식 중, R₁은 수소, 페닐 또는 β-D-리보푸라노실이다.
제1항에 있어서, (2R-트랜스)-2,7-디히드로-2-메틸-3,7-디페닐-5-프로폭시-3H-이미다조[1,2-c]피라졸로[4,3-e]피리미딘인 화합물.
제1항에 있어서, (2S-트랜스)-2,7-디히드로-2-메틸-3,7-디페닐-5-프로폭시-3H-이미다조[1,2-c]피라졸로[4,3-e]피리미딘인 화합물.