KR0142110B1 - Production of 2:3:-dideoxy-2:3:-dihydronucleosides - Google Patents

Abstract

본 발명은 리보누클레오시드를 출발물질로 하여 2',3'-디데옥시-2',3'-디데히드로누클레오시드를 제조하는 개량된 방법에 관한 것이다.The present invention relates to an improved process for preparing 2 ', 3'-dideoxy-2', 3'-didehydronucleosides with ribonucleosides as starting material.

Description

2',3'-디데옥시-2',3'-디데히드로누클레오시드의 제조 방법Process for preparing 2 ', 3'-dideoxy-2', 3'-didehydronucleoside

본 발명은 2',3'-디데옥시-2',3'-디데히드로누클레오시드를 제조하는 개량된 방법에 관한 것이다.The present invention relates to an improved process for preparing 2 ', 3'-dideoxy-2', 3'-didehydronucleosides.

후천성 면역 결핍증(AIDS)은 인체 면역 결핍 바이러스류(HIV)의 감염에 따른 결과이다.⁽¹⁾이러한 레트로바이러스는 이들을 소모시키는 헬퍼/유도 인자 T 세포⁽²⁾에 대하여 특이적 친화성(specific tropism)을 나타낸다. 그 결과로 일어나는 면역 억제는 HIV 환자에 생명을 위협하는 통성 감염(通性 感染, opportunistic infection)을 일으킨다.AIDS is the result of infection with human immunodeficiency viruses (HIV).^(One)These retroviruses are helper / inducing factor T cells that consume them⁽²⁾Specific tropism for. The resulting immunosuppression leads to life-threatening opportunistic infections in HIV patients.

비록 현재는 AIDS 에 대한 치료법이 없으나, 3'-아지도-3'-데옥시티미딘 (AZT, Retrovir^TM)은 이미 임상 실험에서 AIDS 치료에 효과적인 약제로 판명된 바 있으며, AIDS 환자에게 유용한 적절한 조절제로서 공인되어 왔다.⁽³⁾다수의 기타 화학적 및 생물학적 약제들이 HIV에 대하여 생물학적 활성이 있다고 보고되어 왔다. 2',3'-디데옥시시티딘(ddC), 2',3'-디데옥시아데노신 (ddA)⁽⁴⁾, 2',3'-디데옥시-2',3'-디데히드로시티딘(d4C)⁽⁵⁾, 수라민 및 그 유사물⁽⁶⁾, 리바바린⁽⁷⁾, 포스카넷⁽⁸⁾, HPA-23⁽⁹⁾, d-페니실라민⁽¹⁰⁾, 카스타노스퍼민⁽¹¹⁾, 후시드산⁽¹²⁾, 3'-아지도구아노신(AZG)⁽¹³⁾및 3'-플루오로-3'-데옥시티미딘(FDDT)⁽¹⁴⁾는 모두 HIV 에 대한 활성이 있다고 보고되어 있다.Although there is currently no cure for AIDS, 3'-azido-3'-deoxythymidine (AZT, Retrovir^TM) Has already been shown to be an effective drug for treating AIDS in clinical trials and has been recognized as a suitable modulator useful for AIDS patients.⁽³⁾Many other chemical and biological agents have been reported to be biologically active against HIV. 2 ', 3'-dideoxycytidine (ddC), 2', 3'-dideoxyadenosine (ddA)⁽⁴⁾, 2 ', 3'-dideoxy-2', 3'-didehydrocytidine (d4C)⁽⁵⁾, Suramin and the like⁽⁶⁾, Rivabarin⁽⁷⁾, Poscanet⁽⁸⁾, HPA-23⁽⁹⁾, d-penicillamine¹⁰, Castanospermine⁽¹¹⁾, Fusidic acid⁽¹²⁾, 3'-azidoguanosine (AZG)⁽¹³⁾And 3'-fluoro-3'-deoxythymidine (FDDT)⁽¹⁴⁾Are all reported to be active against HIV.

2',3'-디데옥시-2',3'-디데히드로티미딘(d4T)는 몇 가지 세포주에서 HIV에 대해 시험관내 활성이 있는 것으로 문헌에 다수 보고되어 있다⁽¹⁵⁾.2 ', 3'-dideoxy-2', 3'-didehydrothymidine (d4T) has been reported in the literature as having in vitro activity against HIV in several cell lines ⁽¹⁵⁾ .

호르비츠(Horwitz) 등은 두 가지 다른 경로를 통해 2',3'-디데옥시-2',3'-디데히드로티미딘(d4T)을 제조하였다^(16)(17). 그 첫번째 합성 경로는 티미딘의 3',5'-안히드로 유도체를 제거 반응 조건에 부치는 것이다. 두번째 합성 경로는 티미딘의 5'-O-보호된 2,3'-안히드로 누클레오시드 유도체를 개환 제거 반응 조건에 부치는 것이다.Horwitz et al. Produced 2 ', 3'-dideoxy-2', 3'-didehydrothymidine (d4T) via two different routes ^{(16) (17)} . The first synthetic route is to add 3 ', 5'-anhydro derivatives of thymidine to the removal reaction conditions. The second synthetic route is to subject the 5'-O-protected 2,3'-anhydro nucleoside derivative of thymidine to the ring opening elimination reaction conditions.

종래 누클레오시드를 합성하기 위한 중간체로서 안히드로 누클레오시드를 사용하는 것은 본 발명과 관련된 당해 기술 분야에 충분히 공지되어 있다⁽¹⁸⁾.The use of anhydronucleosides as intermediates for synthesizing conventional nucleosides is well known in the art ⁽¹⁸⁾ .

2',3'-디데옥시-2',3'-디데히드로티미딘(d4T)의 항HIV 제제로서의 효능이 최근 밝혀짐에 따라, d4T를 비롯한 2',3'-디데옥시-2',3'-디데히드로- 누클레오시드를 대량으로 저렴하게 제조할 수 있는 방법이 중요시되고 있다.As the efficacy of 2 ', 3'-dideoxy-2', 3'-didehydrothymidine (d4T) as an anti-HIV agent has recently been discovered, 2 ', 3'-dideoxy-2', including d4T, There is a growing importance for methods to produce 3'-didehydro-nucleosides in bulk inexpensively.

3',5'-안히드로 화합물⁽¹⁶⁾로부터 d4T 를 제조하는 상기 호르비츠 경로는 대규모로는 실행할 수 없는데, 그 이유는 호르비츠 방법에 사용된 다량의 DMSO 를 완전히 제거하는 것이 매우 어렵고 오랜시간동안 고도의 진공상태(0.01 mmHg 및 약 40℃ 내지 50℃ 의 온도 범위로 가열)가 요구되기 때문이다. 이러한 조건하에서는 글리코시드 결합이 개열(開裂)되어 불필요한 부산물인 티민이 생성된다. 또한, DMSO 이외의 다른 용매(예를 들어, THF, DMF)를 사용할 경우에 요구되는 염기성 조건에 장기간 노출시킴에 따라, 다시 d4T 가 분해되어 불필요한 부산물인 티민이 생성된다.The Horzwitz route for preparing d4T from 3 ', 5'-anhydrous compound ⁽¹⁶⁾ is not feasible on a large scale because it is very difficult to completely remove the large amount of DMSO used in the Horbitz method and it is highly This is because a vacuum state of (0.01 mmHg and heating to a temperature range of about 40 ° C to 50 ° C) is required. Under these conditions, glycosidic bonds cleave to produce thymine, an unnecessary byproduct. In addition, prolonged exposure to the basic conditions required when using solvents other than DMSO (eg, THF, DMF) results in the degradation of d4T again to produce thymine, an unnecessary byproduct.

별도의 호르비츠 방법에서는 상기 2,5'-안히드로 누클레오시드가 형성되기 전에 5'-OH 위치를 보호해야 한다. 이러한 2,5'-안히드로 누클레오시드는 개환되어 5'-O-보호된 누클레오시드를 형성할 수 있다.In a separate Horbitz method, the 5'-OH position must be protected before the 2,5'-anhydro nucleoside is formed. Such 2,5'-anhydro nucleosides can be ring-opened to form 5'-0-protected nucleosides.

바람직한 2,3'-안히드로 누클레오시드는, 티미딘을 디에틸-(2-클로로-1,1-2-트리플루오로에틸)아민과 반응시켜 직접 제조할 수 있다⁽¹⁹⁾.Preferred 2,3'-anhydro nucleosides can be prepared directly by reacting thymidine with diethyl- (2-chloro-1,1-2-trifluoroethyl) amine ⁽¹⁹⁾ .

본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 2',3'-디데옥시-2',3'-디데히드로누클레오시드를 고수율로, 그리고 비교적 대규모로 제조하는 방법에 관한 것이다.The present invention relates to a process for producing 2 ', 3'-dideoxy-2', 3'-didehydronucleoside represented by the following formula (1) in high yield and on a relatively large scale.

본 발명의 하나의 특징에 의하면, 본 발명의 방법은 (a) 하기 화학식 3으로 표시되는 2'-데옥시누클레오시드를 하기 화학식 4로 표시되는 반응성 3',5'-안히드로-2'-데옥시누클레오시드 중간체로 전환시키는 단계와 (b) 강염기의 존재하에서 상기 단계 (a)로부터 얻은 반응성 3',5'-안히드로-2'-데옥시누클레오시드를 상기 2',3'-디데옥시-2',3'-디데히드로누클레오시드로 전환시키는 단계로 이루어진 하기 화학식 1로 표시되는 2',3'-디데옥시-2',3'-디데히드로누클레오시드의 제조 방법에 있어서,According to one feature of the present invention, the method of the present invention comprises (a) reacting a 2'-deoxynucleoside represented by the following formula (3) with a reactive 3 ', 5'-anhydro-2' Converting to a deoxynucleoside intermediate and (b) reacting the reactive 3 ′, 5′-anhydro-2′-deoxynucleoside obtained from step (a) in the presence of a strong base with the 2 ′, 3 Preparation of 2 ', 3'-dideoxy-2', 3'-didehydronucleoside represented by the following Chemical Formula 1, comprising converting to '-dideoxy-2', 3'-didehydronucleoside In the method,

(i) DMSO, THF, DMF, DME 및 이들의 혼합물 중에서 선택된 극성 용매의 존재하에 상기 3',5'-안히드로-2'-데옥시누클레오시드를 KOtBu, nBuLi, NaH, 및 LDA 중에서 선택된 강염기와 반응시키는 단계;(i) the 3 ', 5'-anhydro-2'-deoxynucleoside is selected from KOtBu, nBuLi, NaH, and LDA in the presence of a polar solvent selected from DMSO, THF, DMF, DME and mixtures thereof Reacting with a strong base;

(ii) 그 결과 얻은 염을 유기 용매의 존재하에 분쇄(triturating)시키는 단계;(ii) triturating the resulting salt in the presence of an organic solvent;

(iii) 상기 단계 (ii)에서 얻은 고형의 미정제 염 중간체를 수집하는 단계;(iii) collecting the crude crude salt intermediate obtained in step (ii) above;

(iv) 단계 (iii)에서 얻은 염을 물에 용해시키는 단계;(iv) dissolving the salt obtained in step (iii) in water;

(v) 단계 (iv)에서 얻은 염을 중화시키는 단계; 및(v) neutralizing the salt obtained in step (iv); And

(vi) 고형의 누클레오시드 유리 염기 생성물을 얻는 단계를 수행하는 것을 특징으로 하는 하기 화학식 1로 표시되는 2',3'-디데옥시-2',3'-디데히드로누클레오시드의 제조 방법에 관한 것이다.(vi) A process for preparing 2 ', 3'-dideoxy-2', 3'-didehydronucleoside represented by the following formula (1), characterized by performing a step of obtaining a solid nucleoside free base product. It is about.

화학식 1Formula 1

상기 각 식에 있어서,In each said formula,

염기 부분은 피리미딘, 아자-피리미딘 및 데아자-피리미딘으로 이루어진 비치환 및 미치환의 염기군 중에서 선택되는 것이고;The base moiety is selected from the group of unsubstituted and unsubstituted bases consisting of pyrimidine, aza-pyrimidine and deaza-pyrimidine;

X는 N 및 C-H 중에서 선택되며;X is selected from N and C-H;

Y는 C-R⁵및 N 중에서 선택되고;Y is selected from CR ⁵ and N;

Z는 C-H 및 N 중에서 선택되며;Z is selected from C-H and N;

R⁴는 OH 및 NH₂중에서 선택되고;R ⁴ is selected from OH and NH ₂ ;

R⁵는 H, 화학식 C_nH_2nA 의 미치환 및 할로 치환 알킬 및 화학식 -(CH₂)_m-CH=CHA (식 중, m 은 0, 1, 2 및 3 중에서 선택된 정수이고, n 은 1, 2 및 3 중에서 선택된 정수이며, A 는 H, F, Cl, Br 및 I 중에서 선택된다.)로 표시되는 미치환 및 할로 치환된 알케닐이다.R ⁵ is H, unsubstituted and halo substituted alkyl of formula C _n H _2n A and formula-(CH ₂ ) _m -CH = CHA wherein m is an integer selected from 0, 1, 2 and 3, n is Is an integer selected from 1, 2 and 3, and A is selected from H, F, Cl, Br and I.) and unsubstituted and halo substituted alkenyl.

다른 특징에 의하면, 본 발명은 (a) 하기 화학식 3으로 표시되는 2'-데옥시누클레오시드를 하기 화학식 5로 표시되는 반응성 2,3'-안히드로-2'- 데옥시누클레오시드 중간체로 전환시키는 단계와;According to another feature, the present invention provides a reactive 2,3'- anhydro-2'- deoxynucleoside intermediate represented by the following formula (a) 2'-deoxynucleoside represented by the following formula (3) Switching to;

(b) 비친핵성 및 친핵성 염기 중에서 선택된 염기의 존재하에 상기 단계 (a)에서 얻은 반응성 2,3'-안히드로-2'-데옥시누클레오시드를 상기 2',3'-디데옥시-2,3'- 디데히드로누클레오시드로 전환시키는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 하기 화학식 1로 표시되는 2',3'-디데옥시-2',3'-디데히드로누클레오시드의 제조 방법에 관한 것이다.(b) reacting the reactive 2,3'-anhydro-2'-deoxynucleoside obtained in step (a) in the presence of a base selected from non-nucleophilic and nucleophilic bases with the 2 ', 3'-dideoxy- Method for preparing 2 ', 3'-dideoxy-2', 3'-didehydronucleoside represented by the following Chemical Formula 1, comprising converting to 2,3'-didehydronucleoside It is about.

화학식 1Formula 1

화학식 3Formula 3

상기 각 식에 있어서,In each said formula,

염기 부분은 피리미딘, 아자-피리미딘 및 데아자-피리미딘으로 이루어진 치환 및 미치환된 염기군 중에서 선택되고;The base moiety is selected from the group of substituted and unsubstituted bases consisting of pyrimidine, aza-pyrimidine and deaza-pyrimidine;

X는 N 및 C-H 중에서 선택되고;X is selected from N and C-H;

Y는 C-R⁵및 N 중에서 선택되고;Y is selected from CR ⁵ and N;

Z는 C-H 및 N 중에서 선택되고;Z is selected from C-H and N;

R⁴는 OH 및 NH₂중에서 선택되며;R ⁴ is selected from OH and NH ₂ ;

R⁵는 H, 화학식 C_nH_2nA 로 표시되는 미치환 및 할로 치환 알킬 및 화학식 C_nH_nA(식중, n 은 1, 2, 및 3 중에서 선택된 정수이고, A 는 H, F, Cl, Br, 및 I 중에서 선택된다)으로 표시되는 미치환 및 할로 치환 알케닐 중에서 선택된다.R ⁵ is H, unsubstituted and halo substituted alkyl represented by the formula C _n H _2n A and formula C _n H _n A (wherein n is an integer selected from 1, 2, and 3, and A is H, F, Cl , Br, and I), and unsubstituted and halo substituted alkenyl.

또 다른 특징에 의하면, 본 발명은 (a) 출발 물질인 하기 화학식 6의 리보누클레오시드를 무수 조건에서 극성 용매의 존재하에 트리메틸 오르토포르메이트와 반응시켜 하기 화학식 7의 반응성 중간체를 얻는 단계;According to another feature, the present invention provides a method for preparing a reactive intermediate of formula (7), which comprises: (a) reacting a starting material ribonucleoside of formula (6) with trimethyl orthoformate in anhydrous conditions in the presence of a polar solvent;

(b) 상기 단계 (a)에서 얻은 중간체는 약 120 내지 160℃ 의 고온에서 약 4 내지 8 시간 동안 p-TsOH 로 처리하여 제거 반응시키는 단계; 및(b) removing the intermediate obtained in step (a) by treating with p-TsOH at a high temperature of about 120 to 160 ° C. for about 4 to 8 hours; And

(c) 그 결과 형성된 5'-OAC기를 온화한 염기 가수 분해 조건하에서 처리하여 탈보호시키는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는, 하기 화학식 2의 2',3'-디데옥시- 2',3'-디데히드로누클레오시드의 제조 방법에 관한 것이다.(c) treating the resulting 5'-OAC group under mild base hydrolysis conditions to deprotect it, wherein the 2 ', 3'-dideoxy-2', 3'- It relates to a process for preparing didehydronucleosides.

상기 각 식에 있어서,In each said formula,

B는 퓨린, 아자-퓨린, 데아자-퓨린, 피리미딘, 아자-피리미딘, 데아자-피리미딘 및 트리아졸 고리 염기로 이루어진 염기군 중에서 선택된다.B is selected from the group of bases consisting of purine, aza-purine, deaza-purine, pyrimidine, aza-pyrimidine, deaza-pyrimidine and triazole ring bases.

또 하나의 특징에 의하면, 본 발명은 (a) 출발 물질인 하기 화학식 6의 리보누클레오시드를 5'-히드록실(1급 히드록실)기를 선택적으로 보호하는 데 효과적인 히드록시 보호기 반응물과 반응시키는 단계,According to another feature, the present invention provides a process for reacting (a) a ribonucleoside of formula (6), which is a starting material, with a hydroxy protecting group reactant that is effective to selectively protect a 5′-hydroxyl (primary hydroxyl) group. step,

(b) 무수 조건하에서 상기 단계 (a)로 부터 얻은 5'-OH-보호된 리보누클레오시드를 1,1-티오카르보디이미다졸 및 티오포스겐과 반응시켜 하기 화학식 8의 반응성 중간체를 얻는 단계;(b) reacting the 5′-OH-protected ribonucleoside obtained from step (a) with 1,1-thiocarbodiimidazole and thiophosgene under anhydrous conditions to obtain a reactive intermediate of formula ;

(c) 상기 단계 (b)에서 얻은 중간체를 약 140 내지 175℃에서 30분 내지 4 시간 동안 극성 용매 중의 P(OEt)₃로 처리하여 제거 반응시키는 단계; 및(c) removing and reacting the intermediate obtained in step (b) with P (OEt) ₃ in a polar solvent at about 140 to 175 ° C. for 30 minutes to 4 hours; And

(d) 그 결과 형성된 5'-O-보호기를 온화한 산 가수 분해 조건하에서 처리하여 탈보호시키는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는, 하기 화학식 2의 2',3'-디데옥시- 2',3'-디데히드로누클레오시드의 제조 방법에 관한 것이다.(d) treating the resulting 5′-O-protecting group under mild acid hydrolysis conditions to deprotect the 2 ′, 3′-dideoxy-2 ′, 3 It relates to a process for the preparation of '-didehydronucleosides.

화학식 2Formula 2

화학식 6Formula 6

상기 각 식에 있어서,In each said formula,

B는 퓨린, 아자-퓨린, 데아자-퓨린, 피리미딘, 아자-피리미딘, 데아자-피리미딘 및 트리아졸 고리 염기로 이루어진 염기군 중에서 선택된다.B is selected from the group of bases consisting of purine, aza-purine, deaza-purine, pyrimidine, aza-pyrimidine, deaza-pyrimidine and triazole ring bases.

또 다른 특징에 의하면, 본 발명은 (a) 출발 물질인 하기 화학식 6의 리보누클레오시드를 무수 조건하에 약 75 내지 100℃의 고온에서 약 1 내지 3 시간 동안 극성 용매 중의 아실옥시이소부티릴 브로마이드, 바람직하게는 2-아세톡시 이소부티릴 브로마이드와 반응시켜 하기 화학식 9의 반응성 중간체를 얻는 단계;According to another feature, the present invention provides a process for preparing acyloxyisobutyryl bromide in a polar solvent for (a) a ribonucleoside of formula (6) as starting material for about 1 to 3 hours at an elevated temperature of about 75 to 100 ° C. under anhydrous conditions. Preferably, reacting with 2-acetoxy isobutyryl bromide to obtain a reactive intermediate of formula (9);

(b) 상기 단계 (a)에서 얻은 중간체를 비양성자성 극성 용매 중에서 Zn/Cu 반응 물질로 처리하여 제거 반응시켜 하기 화학식 10의 중간체를 얻는 단계; 및(b) treating the intermediate obtained in step (a) with a Zn / Cu reactant in an aprotic polar solvent to remove and react to obtain an intermediate of Formula 10; And

(c) 상기 단계 (b)에서 얻은 중간체를 온화한 염기, 바람직하게는 메탄올성 암모니아로 처리하여 상기 중간체의 5'-O-보호기를 탈보호시켜 2',3'-디데옥시- 2',3'-디데히드로 누클레오시드 유도체를 얻는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는, 하기 화학식 2의 2',3'-디데옥시-2',3'-디데히드로누클레오시드의 제조 방법에 관한 것이다.(c) treating the intermediate obtained in step (b) with a mild base, preferably methanolic ammonia, to deprotect the 5'-0-protecting group of the intermediate to obtain 2 ', 3'-dideoxy-2', 3 It relates to a method for preparing 2 ', 3'-dideoxy-2', 3'-didehydronucleoside of the formula (2), comprising the step of obtaining a '-didehydro nucleoside derivative.

화학식 2Formula 2

화학식 6Formula 6

상기 각 식에 있어서,In each said formula,

B는 퓨린, 아자-퓨린, 데아자-퓨린, 피리미딘, 아자-피리미딘, 데아자-피리미딘 및 트리아졸 고리 염기로 이루어진 염기군 중에서 선택되고;B is selected from the group of bases consisting of purine, aza-purine, deaza-purine, pyrimidine, aza-pyrimidine, deaza-pyrimidine and triazole ring bases;

R은 아실옥시이소부티릴기이며,R is an acyloxyisobutyryl group,

R'는 아실옥시이소부티릴 브로마이드의 아실기이다.R 'is an acyl group of acyloxyisobutyryl bromide.

전술한 바와 같이, 본 발명은 출발 물질이 2'-데옥시누클레오시드이고, 염기 성분 B가 치환 또는 미치환 피리미딘, 또는 아자-피리미딘 또는 데아자-피리미딘, 바람직하게는 치환 또는 미치환 피리미딘으로 이루어진 염기군 중에서 선택된 염기로부터 유도되는 2',3'-디데옥시-2',3'-디데히드로 누클레오시드를 제조하는 방법의 2가지 구체적인 예에 관한 것이다. 이러한 2가지 구체적인 예에 있어서, 염기 부분은, 적절한 치환 및 미치환 피리미딘 염기와 관련하여 후술하는 설명 및 화학식에 상응하는 치환 또는 미치환 피리미딘인 것이 보다 바람직하다. 이러한 2가지 구체적인 예에 있어서, 염기 부분이 티민(5-메틸-2,6-디히드록시-피리미딘), 시토신(2-히드록시-6-아미노피리미딘), 우라실(2,6-디히드록시-피리미딘), 5-에틸-2,6-디히드록시피리미딘-3-일, 5-비닐-2,6,-디히드록시피리미딘-3-일, 5-할로비닐-2,6-디히드록시피리미딘-3-일, 5-할로메틸-2,6-디히드록시피리미딘-3-일 및 5-할로에틸-2,6-디히드록시피리미딘-3-일중에서 선택되는 것이 더욱 바람직하다. 이러한 2 가지 구체적인 예에 있어서 염기 부분이 티민인 것이 가장 바람직하다.As described above, the present invention provides that the starting material is 2'-deoxynucleoside and the base component B is substituted or unsubstituted pyrimidine, or aza-pyrimidine or deaza-pyrimidine, preferably substituted or unsubstituted. Two specific examples of methods for preparing 2 ', 3'-dideoxy-2', 3'-didehydronucleosides derived from bases selected from the group of bases consisting of substituted pyrimidines are described. In these two specific examples, the base moiety is more preferably a substituted or unsubstituted pyrimidine corresponding to the descriptions and formulas described below in connection with appropriate substituted and unsubstituted pyrimidine bases. In these two specific examples, the base moiety is thymine (5-methyl-2,6-dihydroxy-pyrimidine), cytosine (2-hydroxy-6-aminopyrimidine), uracil (2,6-di Hydroxy-pyrimidine), 5-ethyl-2,6-dihydroxypyrimidin-3-yl, 5-vinyl-2,6, -dihydroxypyrimidin-3-yl, 5-halovinyl-2 , 6-dihydroxypyrimidin-3-yl, 5-halomethyl-2,6-dihydroxypyrimidin-3-yl and 5-haloethyl-2,6-dihydroxypyrimidin-3-yl It is more preferable to select from among. In these two specific examples it is most preferred that the base moiety is thymine.

전술한 바와 같이, 본 발명의 출발 물질은 리보누클레오시드이고 염기 성분 B가 치환 및 미치환 퓨린, 아자-퓨린, 데아자-퓨린, 피리미딘, 아자-피리미딘, 데아자-피리미딘 및 트리아졸 고리 염기로 이루어진 염기군 중에서 선택된 염기로부터 유도되는 2',3'-디데옥시-2',3'-디데히드로 누클레오시드를 제조하는 방법의 3 가지 구체예에 관한 것이다. 상기 염기는 퓨린 및 피리미딘 염기중에서 선택되는 것이 바람직하다. 상기 염기가 우라실 및 티민기 중 하나를 포함하는 피리미딘 염기인 것이 더욱 바람직하다.As mentioned above, the starting materials of the invention are ribonucleosides and the base component B is substituted and unsubstituted purine, aza-purine, deaza-purine, pyrimidine, aza-pyrimidine, deaza-pyrimidine and tria Three embodiments of a method for preparing 2 ', 3'-dideoxy-2', 3'-didehydronucleosides derived from a base selected from the group of bases consisting of sol ring bases. The base is preferably selected from purine and pyrimidine bases. More preferably, the base is a pyrimidine base comprising one of uracil and thymine groups.

적합한 치환 및 미치환 퓨린 염기에는 하기 화학식으로 표시되는 퓨린 염기가 포함된다.Suitable substituted and unsubstituted purine bases include purine bases represented by the formula:

상기 식 중,In the above formula,

R¹및 R²는 동일하거나 상이하고, 수소, 히드록시, 할로(F, Cl, Br), 아미노, 모노알킬아미노, 디알킬아미노, 알콕시 및 시아노기이고, 상기 알킬 부분은 C₁내지 C₃알킬기 중에서 선택된다.R ¹ and R ² are the same or different and are hydrogen, hydroxy, halo (F, Cl, Br), amino, monoalkylamino, dialkylamino, alkoxy and cyano groups, wherein the alkyl moiety is C ₁ to C ₃ It is selected from an alkyl group.

적합한 치환 및 미치환 피리미딘 염기에는 하기 화학식으로 표시되는 피리미딘 염기가 포함된다.Suitable substituted and unsubstituted pyrimidine bases include pyrimidine bases represented by the formula:

상기 식 중,In the above formula,

R³는 히드록시, 아미노 및 설프히드릴기 중에서 선택되고;R ³ is selected from hydroxy, amino and sulfhydryl groups;

R⁴는 히드록시, 아미노 및 설프히드릴기 중에서 선택되거나, 또는R ⁴ is selected from hydroxy, amino and sulfhydryl groups, or

R⁴는 수소이고;R ⁴ is hydrogen;

R⁵는 히드록시 및 아미노 중에서 선택되며;R ⁵ is selected from hydroxy and amino;

R⁶는 수소, C₁- C₁알킬, C₂- C₃알케닐, 위에 정의된 바와 같은 1 내지 5개의 할로기를 지닌 C₂- C₃할로알케닐, C₂- C₃알키닐, 알킬 부분이 C₁- C₃인 알콕시, 시아노 및 할로(F, Cl, Br 및 I) 중에서 선택된다.R ⁶ is hydrogen, C ₁ -C ₁ alkyl, C ₂ -C ₃ alkenyl, C ₂ -C ₃ haloalkenyl, C ₂ -C ₃ alkynyl, alkyl having 1 to 5 halo groups as defined above The moiety is selected from alkoxy, cyano and halo (F, Cl, Br and I) with C ₁ -C ₃ .

퓨린 염기로부터 유도될 경우, B의 대표적인 예로는 6-아미노퓨린 -9-일, 2-아미노퓨린-9-일, 2,6-디아미노퓨린-9-일, 2-아미노-6-히드록시퓨린-9-일(구아닌-9-일) 및 6-히드록시퓨린-9-일을 들 수 있다.Representative examples of B, when derived from a purine base, are 6-aminopurin-9-yl, 2-aminopurin-9-yl, 2,6-diaminopurin-9-yl, 2-amino-6-hydroxy Purin-9-yl (guanine-9-yl) and 6-hydroxypurin-9-yl.

상기예 이외에도, B 성분으로는 2-할로퓨린-9-일, 6-할로퓨린-9-일, 또는 2,6-디할로퓨린-9-일을 들 수 있으며, 이러한 경우에는 단계 (e)에서 축합 또는 결합 반응을 일으키기 위해서 염기 성분을 활성화, 예를 들면 완전 실릴화시킬 필요가 없다.In addition to the above examples, component B includes 2-halopurin-9-yl, 6-halopurin-9-yl, or 2,6-dihalopurin-9-yl, in which case step (e) It is not necessary to activate the base component, for example complete silylation, in order to cause a condensation or binding reaction in

피리미딘 염기로부터 유도될 경우, B의 대표적인 예로는 2,4-디히드록시피리미딘-1-일, 5-메틸-2,4-디히드록시피리미딘-1-일, 5-에틸-2,4-아미노피리미딘-1-일, 2-히드록시-4-아미노피리미딘-1-일, 5-비닐-2,4-디히드록시피리미딘-1-일, 5-할로비닐-2,4-디히드록시피리미딘-1-일, 5-할로에틸-2,4-디히드록시피리미딘-1-일 및 5-할로에틸-2,4-디히드록시피리미딘-1-일을 들 수 있다.When derived from pyrimidine bases, representative examples of B include 2,4-dihydroxypyrimidin-1-yl, 5-methyl-2,4-dihydroxypyrimidin-1-yl, 5-ethyl-2 , 4-aminopyrimidin-1-yl, 2-hydroxy-4-aminopyrimidin-1-yl, 5-vinyl-2,4-dihydroxypyrimidin-1-yl, 5-halovinyl-2 , 4-dihydroxypyrimidin-1-yl, 5-haloethyl-2,4-dihydroxypyrimidin-1-yl and 5-haloethyl-2,4-dihydroxypyrimidin-1-yl Can be mentioned.

전술한 5-메틸 및 5-에틸 치환체의 대표적인 예는 5-알킬 치환체이고, 상기 5-비닐 치환체의 대표적인 예는 5-알케닐 치환체이다. 상기 5-할로비닐(또는 5-할로알케닐)기상의 할로기의 예로는 1 내지 4개의 F, Cl, 및 Br 기가 있다.Representative examples of the foregoing 5-methyl and 5-ethyl substituents are 5-alkyl substituents, and representative examples of the 5-vinyl substituents are 5-alkenyl substituents. Examples of halo groups on the 5-halovinyl (or 5-haloalkenyl) groups include 1-4 F, Cl, and Br groups.

본 발명의 방법의 제 1 구체예에 있어서, 그 첫번째 단계에서는 출발 물질인 2'-데옥시누클레오시드로부터 중간체인 반응성 3',5'-안히드로-2'-데옥시누클레오시드를 제조한다. 이러한 공지된 중간체는 통상의 조건하에서 상응하는 2'-데옥시누클레오시드와 충분량의 통상적인 활성화 히드록시 보호기 반응물, 예를 들어 MsCl 또는 TsCl 을 반응시켜 제 1 중간체인 3',5'-O- 보호기-2'-데옥시누클레오시드를 수득한 후, 상기 제 1 중간체를 물 및 에탄올 중에서 선택된 용매 중의 KOH 및 NaOH 중에서 선택된 강염기와 반응시킴으로써 제조된다. 본 발명과 관련된 당해 기술분야에 유용한 공지된 활성화 히드록시 보호기 반응물을 사용할 수도 있지만, 호르비츠 등의 방법에 따르면 메실 클로라이드가 가장 바람직하다.In a first embodiment of the process of the invention, in its first step an intermediate 3 ', 5'-anhydro-2'-deoxynucleoside is prepared from the starting material 2'-deoxynucleoside. do. Such known intermediates are reacted with a corresponding amount of conventional activating hydroxy protecting group reactant, e.g., MsCl or TsCl, under conventional conditions to the first intermediate 3 ', 5'-0. After obtaining protecting group-2′-deoxynucleoside, the first intermediate is prepared by reacting a strong base selected from KOH and NaOH in a solvent selected from water and ethanol. Although known activated hydroxy protecting group reactants useful in the art related to the present invention may be used, mesyl chloride is most preferred according to the method of Horwitz et al.

상기 구체적인 예의 제 2 단계에서는 공지된 바와 같이 강염기의 존재하에, 그리고 극성 용매의 존재하에 H 원자 제거 반응이 이루어지는데, 이에 의해 상기 3',5'-안히드로 고리가 개환되고, 2'-엔 이중 결합을 형성하여 바람직한 2',3'-디데옥시-2',3'-디데히드로누클레오시드를 형성한다.In the second step of this specific example, the H atom removal reaction takes place in the presence of a strong base and in the presence of a polar solvent as is known, whereby the 3 ', 5'-anhydro ring is ring-opened, and the 2'-ene Double bonds are formed to form the preferred 2 ', 3'-dideoxy-2', 3'-didehydronucleosides.

상기한 본 발명에 따른 방법의 제 1 구체적인 예에 있어서, 본 발명은 반응물, 중간체 및 생성물의 선택, 취급 및 처리 과정을 개량한 점을 특징으로 한다. 이와 같은 특징은 하기 단계들을 포함한다.In a first specific example of the process according to the invention described above, the invention is characterized by an improvement in the selection, handling and treatment of reactants, intermediates and products. This feature includes the following steps.

(i) 상기 3',5'-안히드로-2'-데옥시누클레오시드를 DMSO, THF, DMF, DME, 및 이들의 혼합물 중에서 선택된 극성 용매의 존재하에, 바람직하게는 약 18~80℃ 범위의 온도, 보다 바람직하게는 약 18~22℃ 에서 KOtBu, nBuLi, NaH, 및 LDA 중에서 선택된 강염기와 반응시키는 단계;(i) the 3 ', 5'-anhydro-2'-deoxynucleoside is prepared in the presence of a polar solvent selected from DMSO, THF, DMF, DME, and mixtures thereof, preferably about 18-80 ° C. Reacting with a strong base selected from KOtBu, nBuLi, NaH, and LDA at a temperature in the range, more preferably about 18-22 ° C .;

(ii) 생성된 염을 유기 용매의 존재하에 분쇄시키는 단계;(ii) milling the resulting salt in the presence of an organic solvent;

(iii) 단계 (ii)의 미정제 고체염 중간체를 수집하는 단계;(iii) collecting the crude solid salt intermediate of step (ii);

(iv) 단계 (iii)의 염을 물에 용해시키는 단계;(iv) dissolving the salt of step (iii) in water;

(v) 단계 (iv)의 염을 중화시키는 단계; 및(v) neutralizing the salt of step (iv); And

(vi) 고형의 누클레오시드 유리 염기 생성물을 얻는 단계.(vi) obtaining a solid nucleoside free base product.

전술한 바와 같은 단계 (b)에서의 특징 이외에도, 단계 (a)에서는, KOH 첨가시 용매의 양을 감소시키고 중화시킨 후 원래 부피의 약 20%까지 슬러리를 농축시킴으로써, 상기 바람직한 중간체 침전물을 여과에 의해서 수집할 수 있는 반면, 부산물인 KCl 염은 용매 중에 잔류되었다. 이에 따라 완전 증발된 단계 (a)의 반응 혼합물을 고온의 아세톤으로 처리하여 반응성 중간체를 회수할 필요가 없게 되었다.In addition to the features in step (b) as described above, in step (a), the preferred intermediate precipitate is subjected to filtration by reducing and neutralizing the amount of solvent upon KOH addition and then concentrating the slurry to about 20% of its original volume. While the byproduct KCl salt remained in the solvent. This eliminated the need for recovering the reactive intermediates by treating the fully evaporated reaction mixture of step (a) with hot acetone.

상응하는 2'-데옥시누클레오시드로부터 바람직한 2',3'-디데옥시-2',3'-디데히드로누클레오시드를 제조하는 다른 대안은 상응하는 리보누클레오시드를 출발 물질로 하는 것이다. 따라서, 본원 발명자는 우리딘을 트리메틸 오르토포르메이트로 처리하여 상응하는 오르토 에스테르 반응성 중간체를 얻을 수 있음을 발견하였다.Another alternative for preparing preferred 2 ', 3'-dideoxy-2', 3'-didehydronucleosides from the corresponding 2'-deoxynucleosides is to use the corresponding ribonucleoside as starting material. . Thus, the inventors have found that treatment of uridine with trimethyl orthoformate can yield the corresponding ortho ester reactive intermediates.

상기 제 1 구체예의 단계 (ii)에서, 용매로는 반응물 및 단계 (i)에서 형성된 중간체 염과 상용성인 임의의 유기 용매를 사용할 수 있다. 상기 용매는 톨루엔, 아세톤, 및 에틸 아세테이트 중에서 선택되는 것이 바람직한데, 가장 바람직한 용매는 톨루엔이다. 단계 (ii)에서의 분쇄 과정 중의 온도는 약 0℃ 내지 10℃가 바람직하며, 가장 바람직한 온도는 0℃ 내지 4℃ 이다.In step (ii) of the first embodiment, as the solvent, any organic solvent compatible with the reactant and the intermediate salt formed in step (i) can be used. The solvent is preferably selected from toluene, acetone, and ethyl acetate, with the most preferred solvent being toluene. The temperature during the grinding process in step (ii) is preferably about 0 ° C. to 10 ° C., and most preferably 0 ° C. to 4 ° C.

본 발명의 방법의 제 2 구체예에 있어서, 제 1 단계에서는 상응하는 출발 물질인 2'-데옥시누클레오시드를 2,3'-안히드로-2'-데옥시누클레오시드를 형성하는 데 유효한 강염기와 반응시킴으로써 공지된 반응성 2,3'-안히드로-2'-데옥시누클레오시드 중간체를 제조한다. 이러한 고리 형성 단계를 수행하는 데 적당한 반응물은 공지된 반응물인 디에틸(2-클로로-1,1,2-트리플루오로에틸)아민이다. 이러한 공지된 중간체를 친핵체와 반응시켜, 예를 들면 3'-아지도-2',3'-디데옥시티미딘(AZT)과 같은 치환된 누클레오시드를 얻었다.⁽²⁰⁾ In a second embodiment of the process of the invention, the first step is to form the corresponding starting material 2'-deoxynucleoside to form 2,3'-anhydro-2'-deoxynucleoside. Known reactive 2,3'-anhydro-2'-deoxynucleoside intermediates are prepared by reaction with an effective strong base. Suitable reactants for carrying out this ring forming step are the known reactants, diethyl (2-chloro-1,1,2-trifluoroethyl) amine. Such known intermediates were reacted with nucleophiles to obtain substituted nucleosides such as, for example, 3'-azido-2 ', 3'-dideoxythymidine (AZT). ²⁰

이러한 구체예의 제 2 단계에서는 친핵성 부가 반응이 아니라 상기 반응성 중간체의 안히드로 고리의 개환 반응이 이루어진다. 이러한 개환 반응을 수행하기에 적절한 반응물은 테트라부틸 암모늄 플루오라이드와 같은 비친핵성 염기 또는 KOtBu, NaOH, KOH 등에서 선택된 친핵성 염기이다.In the second step of this embodiment, the ring opening of the anhydrocyclic ring of the reactive intermediate is carried out, not the nucleophilic addition reaction. Suitable reactants for carrying out this ring opening reaction are non-nucleophilic bases such as tetrabutyl ammonium fluoride or nucleophilic bases selected from KOtBu, NaOH, KOH and the like.

본 발명의 방법의 제 3 구체예에 있어서, 제 1 단계에서는 출발 물질인 리보누클레오시드를 무수 조건^(21,22)하에 극성 용매 중에서 트리메틸오르토 포르메이트와 반응시켜 하기 화학식으로 표시되는 오르토 에스테르 반응성 중간체를 얻는다.In a third embodiment of the process of the invention, in the first step, the starting material ribonucleoside is reacted with trimethylortho formate in a polar solvent under anhydrous conditions ^(21,22) to represent an ortho ester reactivity represented by the following formula Obtain an intermediate.

화학식 7Formula 7

다음 단계에서는 상기 반응성 중간체를 약 120 내지 160℃의 고온에서 Ac₂O 중의 p-TsOH 와 같은 유기산으로 약 4 내지 8 시간 동안 처리하여 제거 반응시킨다⁽²³⁾. 최종적으로, 마지막 단계에서는 온화 염기 가수 분해 조건하에 상기 오르토 에스테르 반응성 중간체의 5'-OAc기를 처리함으로써 탈보호시킨다^(15b).In the next step, the reactive intermediate is removed and reacted by treatment with an organic acid such as p-TsOH in Ac ₂ O at a high temperature of about 120 to 160 ° C. for about 4 to 8 hours ⁽²³⁾ . Finally, the last step is deprotection by treating the 5'-OAc group of the ortho ester reactive intermediate under mild base hydrolysis conditions ^(15b) .

본 발명의 방법의 제 4 구체예에 있어서, 제 1 단계에서는 출발 물질인 리보누클레오시드를 5'-히드록시기(즉, 당-고리-결합 2급 히드록시기와 구별되는 1급 히드록시기)를 선택적으로 보호하기에 효과적인 임의의 통상적인 히드록시 보호기 중의 하나와 반응시킨다. 제 2 단계에서는 무수 조건하에 5'-O-보호된 리보누클레오시드와 1,1-티오카르보닐디이미다졸 및 티오포스겐 중의 하나를 반응시켜 하기 화학식 8로 표시되는 반응성 티오카르보네이트 중간체를 얻는다 :In a fourth embodiment of the process of the invention, the first step selectively protects the starting material ribonucleoside with a 5'-hydroxy group (i.e., a primary hydroxyl group that is distinct from a sugar-ring-binding secondary hydroxyl group). React with one of any conventional hydroxy protecting groups effective for In the second step, a reactive thiocarbonate intermediate represented by the following formula (8) is reacted by reacting 5′-O-protected ribonucleoside with one of 1,1-thiocarbonyldiimidazole and thiophosgene under anhydrous conditions. Get:

화학식 8Formula 8

다음 단계에서는 상기 반응성 중간체를 30분 내지 4 시간 동안 약 140 내지 175℃의 고온하에 극성 용매 중의 P(OEt)₃로 처리함으로써, 상기 중간체를 제거 반응시킨다. 끝으로, 제 4 단계 및 최종 단계에서는 반응성 티오카르보네이트 중간체의 5'-O-보호기를 온화한 산가수 분해 조건하에서 처리함으로써 탈보호시킨다.In the next step, the intermediate is removed by treating the reactive intermediate with P (OEt) ₃ in a polar solvent at a high temperature of about 140 to 175 ° C. for 30 minutes to 4 hours. Finally, in the fourth and final step, the 5'-O-protecting group of the reactive thiocarbonate intermediate is deprotected by treating it under mild acid hydrolysis conditions.

본 발명의 방법의 마지막 제5 구체예에 있어서, 제 1 단계에서는 출발 물질인 리보누클레오시드를 2-아세톡시이소부티릴 브로마이드⁽²⁴⁾와 반응시켜 하기 화학식 9로 표시되는 반응성 중간체를 얻는다.In a final fifth embodiment of the process of the invention, in the first step, the starting material ribonucleoside is reacted with 2-acetoxyisobutyryl bromide ⁽²⁴⁾ to obtain a reactive intermediate represented by the following formula (9 ⁾ .

화학식 9Formula 9

이어서, 비양성자성 극성 용매 중에서 Zn/Cu 반응물과 상기 반응성 중간체 혼합물을 반응시켜 제거 반응을 수행함으로써 목적하는 2',3'-디데옥시-2',3'-디데히드로누클레오시드 생성물을 얻는다⁽²⁵⁾.Subsequently, the Zn / Cu reactant and the reactive intermediate mixture are reacted in an aprotic polar solvent to carry out the elimination reaction to obtain the desired 2 ', 3'-dideoxy-2', 3'-didehydronucleoside product. ²⁵ .

하기 반응식 1은 본 발명에 따른 대표적인 방법을 도식적으로 설명한 것이다. 경로 (A)는 반응성 중간체인 3',5'-안히드로, 또는 “옥세탄”을 통해 진행되는 제 1 구체예를 설명한 것이다. 경로 (B)는 2,3'-안히드로 반응성 중간체를 통해 진행되는 제 2 구체예를 설명한 것이다. 경로 (C)는 리보누클레오시드를 출발 물질로하여 각각 오르토 에스테르 또는 티오카르보네이트 반응성 중간체를 거쳐 진행되는 제 3 및 제 4 구체예를 설명한 것이다. 경로 (D)는 3'-O-아세틸-2'-브로모-2'-데옥시 리보누클레오시드 및/또는 3'-브로모-2'-O-아세틸 중간체를 거쳐 진행되는 제5 구체예를 설명한 것이다.Scheme 1 below schematically illustrates a representative process according to the present invention. Route (A) illustrates the first embodiment, which proceeds via the reactive intermediate 3 ', 5'-anhydro, or "oxetane". Route (B) illustrates a second embodiment, which proceeds through the 2,3'-anhydro reactive intermediate. Route (C) describes the third and fourth embodiments, which proceed via ortho ester or thiocarbonate reactive intermediate, respectively, with ribonucleoside as starting material. Route (D) is a fifth sphere that proceeds via 3′-O-acetyl-2′-bromo-2′-deoxy ribonucleoside and / or 3′-bromo-2′-O-acetyl intermediate An example is explained.

경로 (A):Path (A):

경로 (B):Path (B):

경로 (C):Path (C):

경로 (D):Path (D):

3',5'-안히드로 중간체를 거쳐 진행되는 호르비츠등에 의한 이른바 “옥세탄”경로를 실행하고자 할 때 제기되는 문제점은 주로 대규모의 최종 제거 반응과 관련된다. 상기 용매를 다량 제거할 경우에는, 장기간 열에 노출되기 때문에 티민 제거 반응이 일어난다. 염기를 더 다량 사용할 경우에도 역시 불필요한 생성물인 티민이 생긴다.The problems raised when trying to implement the so-called “oxetane” pathway by Horwitz et al., Which proceed through the 3 ', 5'-anhydro intermediates, are mainly related to large-scale final elimination reactions. When a large amount of the solvent is removed, a thymine removal reaction occurs because it is exposed to heat for a long time. The use of higher bases also results in unnecessary thymine.

본 발명의 하나의 구체적인 예를 이루는 이러한“옥세탄”경로에 대하여 행한 특정의 개량 방법은 (1) 메실레이트를 옥세탄으로 전환하는 데 훨씬 소량의 물을 이용함으로써 더욱 농축된 조건하에서 상기 반응을 수행하고, (2) 최종 공정의 절차를 변형하여, 상기 반응성 중간체의 KOtBu/DMSO 처리를 포함하여 최종 공정으로부터 칼륨염을 분쇄법(trituration)에 의해 침전시키는 것을 포함한다. 그 밖에 반응액을 중화시키고, 물의 양을 감소시키며, 생성물을 수집하는 것으로 단계 (a)의 절차를 단순화시켜 놓았다. 이 방법은 물을 완전하게 제거하고, 형성된 염을 고온의 아세톤 중에 현탁시키고, 여과한 다음, 여과액을 세정하는 것보다 훨씬 용이하다. 이에 따라 상기 생성물의 수집, 중화 및 재수집을 가능하게 한다. 종래 문헌에 기재된 방법에 비해서 본 발명에 의해 얻어지는 장점은, 진공하에서 다량의 DMSO를 제거할 필요가 없다는 점이고, 또한 진공하에서 DMSO를 제거할 때 필요한 장기간의 가열에 의해 생성물이 파괴되는 것을 피할 수 있다는 점이다. 이러한 특징의 결과로서, 비교적 순수한 생성물을 다량 얻게 된다.A particular refinement of this “oxetane” route, which constitutes one specific example of the present invention, involves (1) the reaction under more concentrated conditions by using much less water to convert mesylate to oxetane. And (2) modifying the procedure of the final process to precipitate potassium salts from the final process by trituration, including KOtBu / DMSO treatment of the reactive intermediates. In addition, the procedure of step (a) was simplified by neutralizing the reaction solution, reducing the amount of water and collecting the product. This method is much easier than completely removing the water and suspending the formed salt in hot acetone, filtering and then washing the filtrate. This enables the collection, neutralization and recollection of the product. The advantage obtained by the present invention over the methods described in the prior art is that there is no need to remove large amounts of DMSO under vacuum, and that the product can be avoided from being destroyed by the long-term heating required when removing DMSO under vacuum. Is the point. As a result of these features, large quantities of relatively pure product are obtained.

상기 2,3'-안히드로 반응성 중간체를 통해 목적하는 2',3'-디데옥시-2',3'- 디데히드로누클레오시드를 제조하는 상기 문헌 기재의 방법의 문제점은 제조하기 곤란하고 특수한 장비를 필요로 하는 플루오르아민 반응물의 일종인 디에틸 (2-클로로-1,1,2-트리플루오로에틸)아민을 사용한다는 것이다. 대안으로서, 상기 문헌에는 5'-O-트리틸화, 3'-O-메실화, 탈트리틸화 및 안히드로 형성을 포함하는 장시간에 걸친 4 단계 공정이 보고되어 있다. 상기 문헌에는 바람직한 2',3'-디데옥시-2',3'-디데히드로누클레오시드 생성물 이외의 여러 가지 생성물 및 부산물의 생성에 대해서도 보고되어 있다.The problem of the above-described method of preparing the desired 2 ', 3'-dideoxy-2', 3'-didehydronucleoside via the 2,3'-anhydroreactive intermediate is difficult to prepare It is to use diethyl (2-chloro-1,1,2-trifluoroethyl) amine, which is a kind of fluoroamine reactant requiring equipment. As an alternative, the document reports a long time four step process including 5'-0-tritylation, 3'-0-mesylation, detritylation and anhydrous formation. The document also reports on the production of various products and by-products other than the preferred 2 ', 3'-dideoxy-2', 3'-didehydronucleoside products.

상기 2,3'-안히드로 반응성 중간체를 거쳐 진행되는 상기 공지된 방법에 있어서 행한 특정의 개량 방법은, 비친핵성 조건하에서 테트라부틸 암모늄 플루오라이드(TBAF)를 사용하여 상기 바람직한 생성물을 고수율 및 고순도로 제조할 수 있다는 발견을 포함하고 있다. 대안으로서, THF 또는 DMF 중의 TBAF 대신에 NaCN/DMF 또는 DBU/DMF 또는 NaOH/MeOH 또는 KOtBu/BuOH 가 아닌 KOtBu/DMSO 및 NaOH/DMF 를 사용할 경우 바람직한 생성물을 얻게 되지만, 수율이 낮고, NaOH/DMF 를 사용하기 때문에 어느 정도 원치않는 부산물 (3'-에피-티미딘)이 생성된다.Certain refinements performed in the above known process, which proceed through the 2,3'-anhydroreactive intermediate, utilize tetrabutyl ammonium fluoride (TBAF) under non-nucleophilic conditions to produce the desired product in high yield and high purity. It includes the discovery that it can be prepared by. As an alternative, use of NatN / DMF or DBU / DMF or KOtBu / DMSO and NaOH / DMF rather than NaOH / MeOH or KOtBu / BuOH in place of TBAF in THF or DMF yields the desired product, but yields are low, NaOH / DMF Some unwanted unwanted byproducts (3'-epi-thymidine) are produced.

따라서, 본 발명에 따른 방법은 항비루스성, 항대사성 및 항종양성 활성은 물론, 인체 면역 결핍 비루스에 대한 활성이 있는 다수의 2',3'-디데옥시-2',3'-디데히드로누클레오시드, 특히 피리미딘 및 퓨린 누클레오시드를 제조하는 데 유용하다.Thus, the method according to the invention has a number of 2 ', 3'-dideoxy-2', 3'-didehydronus having antiviral, anti-metabolic and anti-tumor activity as well as activity against human immunodeficiency viruses. Useful for preparing cleosides, in particular pyrimidine and purine nucleosides.

이하의 실시예는 본 발명의 방법의 몇 가지 대표적인 구체예를 설명한 것으로서, 당업자에게 본 발명의 실시 방법을 교시하고자 제시한 것이며, 본 발명의 보호 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것은 아니다. 특별히 언급하지 않는 한 모든 부 및 % 는 중량을 기준으로 한 것이고 온도는 섭씨 온도이다.The following examples illustrate some representative embodiments of the methods of the present invention and are presented to teach those skilled in the art how to practice the present invention, and the scope of protection of the present invention is not limited to these examples. Unless otherwise noted, all parts and percentages are by weight and temperatures are in degrees Celsius.

본 발명의 방법에 의해 제조된 d4T 의 항HIV 데이타를 비롯한 생물학적 데이타를 하기 표 I 에 나타내었다. 이들 데이타는 공개된 데이타와 동일하다.Biological data including anti-HIV data of d4T prepared by the method of the present invention are shown in Table I below. These data are identical to the published data.

참고 문헌references

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(3). 피슐, 엠. 에이.; 리취만, 디. 디.; 그리코, 엠. 에이치.; 고트리브, 엠. 에스.; 볼버딩, 피. 에이.; 라스킨, 오. 엘.; 리덤, 제이. 엠.; 그룹만, 제이. 이.; 밀드반, 디.; 슐리, 알. 티.; 잭슨, 지. 지.; 듀락, 디. 티.; 킹, 디.의 New Engl. J. Med., 1987, 317, 185.(3). Fisch, M. a.; Richman, D. D.; Gricco, M. H .; Gotlive, M. s.; Ball birding, blood. a.; Raskin, oh. L.; Lytham, Jay. M.; Group only, Jay. this.; Mildban, D .; Schlie, R. tea.; Jackson, G. G.; Durak, D. tea.; King, D. New Engl. J. Med., 1987, 317, 185.

(4). 미츠야, 에이치. ; 브로더, 에스. 의, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 1986, 83, 1911- 1915.(4). Mitsuya, H. ; Broder, S. Of, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 1986, 83, 1911-1915.

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(b) 발자리니, 제이. ; 포웰스, 알.; 허드윈, 피.; 드 클러크, 이.; 쿠니, 디. 에이.; 강, 지-제이.; 달랄, 엠.; 존스, 디. 지.; 브로더, 에스.의 Biochem. Biophys. Res. Comm. 1986, 140, 735.(b) Balzini, Jay. ; Powells, R .; Hudwin, P .; De clerk, E .; Kuni, D. a.; Kang, G-J .; Dalal, M .; Jones, D. G.; Broder, S. Biochem. Biophys. Res. Comm. 1986, 140, 735.

(6). 체손, 비. 디.; 레빈, 에이. 디.; 밀드반, 디.; 카프란, 엘. 디.; 울페, 피.; 리오스, 에이.; 그룹만, 제이.; 길, 피.; 볼브더링, 피. 에이.; 포이에즈, 비. 제이.; 고트리브, 엠. 에스.; 홀덴, 에이치.; 볼스키, 디. 제이.; 실버, 에스. 에스.; 호킨스, 엠. 제이.의 J. Amer. Med. Assoc. 1987, 258, 1347.(6). Body loss, rain. D.; Levin, a. D.; Mildban, D .; Capran, l. D.; Wolf, p .; Rios, A .; Group only, J .; Road, blood; Ball branding, blood. a.; Poise, rain. second.; Gotlive, M. s.; Holden, H .; Volski, D. second.; Silver, s. s.; Hawkins, M. J. Amer of J. Med. Assoc. 1987, 258, 1347.

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(11). 팀스, 에이. 에스.; 베리, 이. 엠.; 라이더, 티. 에이.; 내쉬, 알. 제이.; 헤거티, 엠. 피.; 테일러, 디. 엘.; 모벌리, 엠. 에이.; 데이비스, 제이. 엠.; 벨, 이. 에이.; 제프리스, 디. 에이.; 테일러-로빈슨, 디.; 펠로우스, 엘. 이. Lancet 1987, ii, 1025.(11). Tims, a. s.; Berry, this. M.; Rider, T. a.; Nash, Al. second.; Hagerty, M. blood.; Taylor, D. L.; Mobley, M. a.; Davis, Jay. M.; Bell, this. a.; Jeffreys, D. a.; Taylor-Robinson, D .; Fellows, L. this. Lancet 1987, ii, 1025.

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(13). (a) 하트만, 에이치.; 헌스만, 지.; 엑스타인, 에프. Lancet 1987, i, 40.(13). (a) Hartman, H .; Hearnsman, G .; Ecstein, f. Lancet 1987, i, 40.

(b) 바바, 엠.; 포웰스, 알.; 발자리니, 제이; 허드 윈, 피.; 드 클러크, 이. 의 Biochem. Biophys, Res. Comm. 1987, 145, 1080.(b) baba, m .; Powells, R .; Balzini, Jay; Hurdwin, P .; De Clerk, this. Biochem. Biophys, Res. Comm. 1987, 145, 1080.

(14). (a) 허드윈, 피.; 발자리니, 제이.; 드 클러크, 이.; 포웰스, 알.; 바바, 엠.; 브로더, 에스.; 반더해게, 에이치. 이. J. Med. Chem. 1987, 30. 1270.(14). (a) Hudwin, P .; Balzini, Jay .; De clerk, E .; Powells, R .; Baba, M .; Broder, S .; Add to it, H. this. J. Med. Chem. 1987, 30. 1270.

(b) 매트스, 이.; 레만, 씨.; 숄츠, 디.; 폰 쟌타-리핀스키 엠.; 거트너, 케이.; 로센탈, 에이치. 에이.; 란겐, 피. Biochem. Biophys. Res. Comm. 1987, 148, 78.(b) mates, E .; Leman, Mr .; Scholtz, D .; Von Gutta-Lipinski M .; Gartner, K .; Rosenthal, H. a.; Langen, blood. Biochem. Biophys. Res. Comm. 1987, 148, 78.

(c) 폴스키, 비.; 골드, 제이. 엠. 더블유.; 하디, 더블유. 디.; 바론, 피. 에이.; 주커만, 이. 이.; 조, 티-씨.; 레빈, 에스. 엠.;플로멘버그, 엔.; 왕, 엘.; 와타나베, 케이. 에이.; 폭스, 제이. 제이.; 암스트롱, 디. 의 27th ICAAC 1987, 요약부 368, p161.(c) Polski, B .; Gold, jay. M. W.; Hardy, W. D.; Baron, blood. a.; Zuckerman, this. this.; Joe, T-C .; Levin, S. M.; Flomenburg, N .; King, L .; Watanabe, K. a.; Fox, Jay. second.; Armstrong, D. 27th ICAAC 1987, abstract 368, p161.

(15). (a) 리, 티. 에스.; 첸, 엠. 에스.; 가오, 와이-에스.; 가졸리, 아이.; 프루소프, 더블유. 에이치. 의 J. Med. Chem. 1987, 30, 440.(15). (a) Lee, T. s.; Chen, M. s.; Gao, Y-S .; Gazoly, child; Prusov, W. H. J. Med. Chem. 1987, 30, 440.

(b) 린, 티. 에스.; 시나지, 알. 에프.; 프루소프, 더블유. 에이치. 의 Biochem. Pharmacol. 1987, 17, 2713.(b) Lynn, T. s.; Sinage, al. F.; Prusov, W. H. Biochem. Pharmacol. 1987, 17, 2713.

(c) 바바, 엠.; 포웰스, 알.; 드 클러크, 이.; 데스미터, 제이.; 반데푸트, 엠. 의 Biochem. Biophys. Res. Comm. 1987, 142, 128.(c) baba, m .; Powells, R .; De clerk, E .; Desmeter, jay; Vandeput, M. Biochem. Biophys. Res. Comm. 1987, 142, 128.

(d) 발자리니, 제이.; 강, 지-제이.; 달락, 엠.; 허드윈, 피.; 드 클러크, 이.; 브로더, 에스.; 존스, 디. 지. 의 Mol. Pharmacol. 1987, 32, 162. A.(d) Balzini, J .; Kang, G-J .; Dalac, M .; Hudwin, P .; De clerk, E .; Broder, S .; Jones, D. G. Mol. Pharmacol. 1987, 32, 162. A.

(e) 하마모토, 와이.; 나카시마, 에이치.; 마츠이, 티.; 마츠다, 에이; 위다, 티.; 야마모토, 엔. Antimicrob. Agents Chemother. 1987, 31, 907.(e) Hamamoto, Y .; Nakashima, H .; Matsui, T .; Mazda, A; Above, T .; Yamamoto, Yen. Antimicrob. Agents Chemother. 1987, 31, 907.

(16). 호르비츠, 제이.; 츄아, 제이. 의“Synthetic Procedures in Nucleic Acid Chemistry”(1권), 조바하, 더블유. 더블유.; 팁슨 알. 에스.(저자); Interscience, 뉴욕, p. 344.(16). Horwitz, J .; Chua, Jay. Synthetic Procedures in Nucleic Acid Chemistry (Vol. 1), Zovaha, W., et al. W.; Tipson R. S. (author); Interscience, New York, p. 344.

(17). 호르비츠, 제이.; 츄아. 제이.; 다 루게, 엠. 에이.; 노엘, 엠.; 클런트, 아이. 엘. 의 J. Org. Chem. 1986, 31, 205.(17). Horwitz, J .; Chua. second.; Darge, M. a.; Noel, M .; Clerant, child. L. J. Org. Chem. 1986, 31, 205.

(18). 폭스, 제이. 제이.; 밀러, 엔. 씨. 의 J. Org. Chem., 1963, 28, 936.(18). Fox, Jay. second.; Miller, Yen. Seed. J. Org. Chem., 1963, 28, 936.

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(20). 글린스키, 알. 피.; 칸, 엠. 에스, ; 칼라마스, 알. 엠.; 스폰, 엠. 비. 의 J. Org. Chem. 1973, 38, 4299.(20). Glinsky, R. blood.; Khan, M. s, ; Calamas, R. M.; Spawn, M. ratio. J. Org. Chem. 1973, 38, 4299.

(21). 데이비슨, 브이. 제이., 데이비스, 디. 알., 딕시트, 브이. 엠.; 폴터, 씨. 디. 의 J. Org. Chem. 1987, 52, 1794.(21). Davidson, V. J., Davis, D. R., Dixit, V. M.; Mr. Poulter. D. J. Org. Chem. 1987, 52, 1794.

(22). 그리핀, 비. 이.; 자만, 제이.; 리스, 씨. 비.; 슐스턴, 제이. Tetrahedron, 1967, 23, 230.(22). Griffin, rain. this.; But, J .; Reese, mr. ratio.; Schulston, Jay. Tetrahedron, 1967, 23, 230.

(23). 안도, 엠.; 오하라, 에이치.; 다카세, 케이. Chem. Lett., 1986, 879.(23). Ando, M .; O'Hara, H .; Takase, K. Chem. Lett., 1986, 879.

(24). 제인, 티. 씨.; 젠킨스, 아이. 디.; 러쎌, 에이 에프.; 버헤이든, 제이.피. 에이치.; 모파트, 제이. 에이치., J. Org. Chem., 1974, 39, 80.(24). Jane, T. Seed.; Jenkins, child. D.; Rush, F .; Burden, J. P. H .; Mopart, Jay. H., J. Org. Chem., 1974, 39, 80.

실험Experiment

융점은 전자 가열식 모세관 장치로 측정하고, 보정하지 않았다. TLC는 이. 머크 앤드 컴패니로부터 구입한 실리카겔 60F-254 판상에서 수행하고, 컬럼 크로마토그래피는 플래쉬 실리카겔(입자 크기 40μM, 베이커)에서 수행하였다. 원소 분석은 월링포드에 소재하는 브리스톨-마이어즈의 분석과에서 수행하였다. 내부 표준 물질로서 테트라메틸실란을 사용하여 AM360 Bruker NMR 분광계로¹H 및¹³C NMR 스펙트럼을 기록하였다. 화학적 이동은 ppm으로 기록하였다. HPLC 분석은 워터스 C18 역상 컬럼상에서 수행하였다.Melting points were measured with an electronic heated capillary device and were not corrected. TLC has this. Column chromatography was performed on silica gel 60F-254 plates purchased from Merck and Company, and column chromatography was performed on flash silica gel (particle size 40 μΜ, Baker). Elemental analysis was performed in Bristol-Meyers' analysis at Wallingford. ¹ H and ¹³ C NMR spectra were recorded on an AM360 Bruker NMR spectrometer using tetramethylsilane as internal standard. Chemical shifts are reported in ppm. HPLC analysis was performed on a Waters C18 reversed phase column.

3',5'-디-O-(메탄설포닐) 티미딘3 ', 5'-di-O- (methanesulfonyl) thymidine

3 리터용 3목 둥근바닥 플라스크에 상부 교반기와 패들, 500 mL용 적하 깔대기 및 건조관과 온도계가 구비된 클라이센 어댑터를 설치하였다. 상기 플라스크에 티미딘(200 g, 0.82 M) 및 피리딘(750 mL)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 교반하고 물중탕으로 가온하여(20분) 투명한 용액을 얻었다. 이어서, 상기 용액을 빙욕조에서 0 내지 3℃ 로 냉각시킨 후, 상기 적하 깔대기에는 메탄설포닐 클로라이드(206.5 g, 1.08 M)를 투입하였다. 이어서, 메탄설포닐 클로라이드를 40분간 적가하였는데, 이 때 발열 현상은 관찰되지 않았다. 상기 용액을 0℃ 에서 1 시간 동안 교반한 후 5℃ 에서 18 시간 저장하였다. 이어서, 얼음(약 500 g)이 들어 있는 급속 교반수(3 L)에 상기 담갈색 혼합물을 추가하였다. 목적 생성물이 즉시 결정화되었다. 30분 동안 교반한 후, 상기 생성물을 여과에 의해 수집하고 물로 수회 세척하였다(100 mL씩 3회). 이어서, 백색 고체를 진공하에 밤새 건조시켰다(미정제 중량 322 g, 수율 98%). 상기 생성물을 고온의 아세톤으로부터 재결정화하여 267 g의 백색 고체를 얻었다(수율 81%). mp: 169 ~ 171℃(문헌 기재 : 170 ~ 171℃).A 3-liter three necked round bottom flask was equipped with a top stirrer and paddle, a 500 mL dropping funnel and a Klysene adapter with drying tube and thermometer. To the flask was added thymidine (200 g, 0.82 M) and pyridine (750 mL). The mixture was stirred and warmed in a water bath (20 minutes) to give a clear solution. Subsequently, the solution was cooled to 0 to 3 ° C. in an ice bath, and then methanesulfonyl chloride (206.5 g, 1.08 M) was added to the dropping funnel. Subsequently, methanesulfonyl chloride was added dropwise for 40 minutes, at which time no exothermic phenomenon was observed. The solution was stirred at 0 ° C. for 1 hour and then stored at 5 ° C. for 18 hours. Then the light brown mixture was added to rapid stirred water (3 L) containing ice (about 500 g). The desired product immediately crystallized. After stirring for 30 minutes, the product was collected by filtration and washed several times with water (3 times in 100 mL). The white solid was then dried under vacuum overnight (crude weight 322 g, yield 98%). The product was recrystallized from hot acetone to give 267 g of a white solid (yield 81%). mp: 169-171 degreeC (document description: 170-171 degreeC).

¹H NMR (360 MHz, d₆-DMSO) 11.40 (s, 1H, NH), 7.50(s, 1H, H-6), 6.21(t, 1H, H-1'), 5.29(m, 1H, H-3'), 4.45(m, 2H, H-5'), 4.35(m, 1H, H-4'), 3.31(s, 6H, SO₂CH₃), 2.50(m, 2H, H-2'), 1.78(s, 3H, CH₃). ¹ H NMR (360 MHz, d ₆ -DMSO) 11.40 (s, 1H, NH), 7.50 (s, 1H, H-6), 6.21 (t, 1H, H-1 '), 5.29 (m, 1H, H-3 '), 4.45 (m, 2H, H-5'), 4.35 (m, 1H, H-4 '), 3.31 (s, 6H, SO ₂ CH ₃ ), 2.50 (m, 2H, H- 2 '), 1.78 (s, 3H, CH ₃ ).

원소 분석(C₁₂H₁₈N₂O₉S₂) C, H, N.Elemental Analysis (C ₁₂ H ₁₈ N ₂ O ₉ S ₂ ) C, H, N.

1-(3,5-안히드로-2-데옥시-β-D-트레오-펜토푸라노실)티민1- (3,5-Anhydro-2-deoxy-β-D-threo-pentofuranosyl) thymine

물(1.6 L) 중에 수산화나트륨(74.7 g, 1.87 M)을 용해시켜 교반한 용액에 3',5'-디-O-(메탄설포닐)티미딘(248 g, 0.62 M)을 조금씩 첨가하였다. 첨가하면, 상기 반응 혼합물은 황색-오렌지색 용액으로 되었다. 이어서, 상기 교반된 용액을 2 시간 동안 가열 환류하였다. 일단 상기 반응 혼합물을 실온으로 냉각시킨 후, 6 N의 염산(100 mL)을 첨가하였다. 1.3 L의 물을 제거하여 상기 반응 혼합물을 진공 농축시켰다. 생성된 슬러리를 2 시간 동안 빙욕조에서 냉각시켰다. 이어서, 고체를 여과하고 얼음물로 약간 세척한후 일정한 중량 (103.7 g, 74%)이 될 때까지 진공 건조시켰다. 융점이 188℃ 내지 190℃ (문헌 기재, 190℃ 내지 193℃)인 생성물(3)을 더 이상 정제하지 않고 사용하였다.To the stirred solution was dissolved sodium hydroxide (74.7 g, 1.87 M) in water (1.6 L) and 3 ', 5'-di-O- (methanesulfonyl) thymidine (248 g, 0.62 M) was added in portions. . Upon addition, the reaction mixture turned into a yellow-orange solution. The stirred solution was then heated to reflux for 2 hours. Once the reaction mixture was cooled to room temperature, 6 N hydrochloric acid (100 mL) was added. 1.3 L of water was removed and the reaction mixture was concentrated in vacuo. The resulting slurry was cooled in an ice bath for 2 hours. The solid was then filtered, washed slightly with ice water and vacuum dried until constant weight (103.7 g, 74%). The product (3) having a melting point of 188 ° C to 190 ° C (document literature, 190 ° C to 193 ° C) was used without further purification.

¹H NMR (360 NHz, d₆-DMSO) 11.35 (s, 1H, NH), 8.01(s, 1H, H-6), 6.49(q, 1H, H-1'), 5.47(m, 1H, H-3'), 4.88 및 4.67(m, 2H, H-5'), 4.22(d, 1H, H-4'), 2.47(m, 2H, H-2'), 1.77(s, 3H, CH₃). ¹ H NMR (360 NHz, d ₆ -DMSO) 11.35 (s, 1H, NH), 8.01 (s, 1H, H-6), 6.49 (q, 1H, H-1 '), 5.47 (m, 1H, H-3 '), 4.88 and 4.67 (m, 2H, H-5'), 4.22 (d, 1H, H-4 '), 2.47 (m, 2H, H-2'), 1.77 (s, 3H, CH ₃ ).

¹³C NMR(75 MHz, d₆-DMSO) 163.64 (C2), 151.10(C4), 136.57(C6), 109.62(C5), 88.29(C4'), 86.85(C1'), 79.83(C3'), 75.14 (C5'), 37.17(C2'), 12.33(CH₃). ¹³ C NMR (75 MHz, d ₆ -DMSO) 163.64 (C2), 151.10 (C4), 136.57 (C6), 109.62 (C5), 88.29 (C4 '), 86.85 (C1'), 79.83 (C3 '), 75.14 (C5 ′), 37.17 (C2 ′), 12.33 (CH ₃ ).

원소 분석(C₁₀H₁₂N₂O₄) C, H, N.Elemental Analysis (C ₁₀ H ₁₂ N ₂ O ₄ ) C, H, N.

1-(2,3-디데옥시-β-D-글리세로-펜트-2-에노푸라노실)티민1- (2,3-dideoxy-β-D-glycero-pent-2-enofuranosyl) thymine

기계적 교반기, 온도계 및 질소 주입구가 장착된 1 L용 3목 둥근바닥 플라스크에 무수 DMSO (400mL) 및 옥세탄(90.0g, 0.402M)을 첨가하였다. 상기 용액에 97% KOtBu(74g, 0.643 M)을 1.5g씩 25분에 걸쳐 가하였다. 외부 빙욕조를 사용하여 온도를 18℃ 내지 22℃ 로 유지시켰다. 첨가를 완결한 후, 상기 반응물을 추가로 1 시간 동안 교반하였는데, 더 이상의 온도 상승은 관찰되지 않았다. TLC 분석 결과 반응은 대략 90% 완결된 것으로 나타났다. 상기 반응액을 21℃ 에서 16 시간 동안 교반시키고, 그 후 TLC 분석 결과 반응이 완료된 것으로 나타났다. 생성된 점성 용액을 저온(4℃)의 톨루엔(3 L)에 주입하자, 베이지색 침전물이 형성되었다. DMSO 용액을 첨가했을 때 상기 혼합물의 온도는 7℃로 상승하였다. 상기 화합물을 20분에 걸쳐 간헐적으로 교반한 후, 18.5 cm의 뷔흐너 깔대기로 여과하였다. 수집된 황색 고체를 저온의 톨루엔으로 2회 세척하고 1 시간 동안 흡인 건조시켰다. 상기 고체를 300 mL 의 물에 용해시킴에 따라 2개의 층이 형성되었다. 상기 혼합물을 분리 깔대기에 넣고 상층(잔류 톨루엔 함유)을 제거하였다. 수성층은 pH 탐침, 자기 교반봉 및 온도계가 구비된 1 L 비이커에 넣었다. 외부 빙욕조를 사용하여 온도를 10℃ 로 냉각시켰다. 온도가 15℃ 이하로 유지되는 속도로 진한 HCl을 그 교반 용액에 적가하였다. HCl(50.5 mL, 0.61 M)을 첨가한 후, pH는 7±0.1로 되고, 침전물이 형성되기 시작하였다. 이 농후한 혼합물에 염화칼륨(70g)을 첨가하고 5℃ 에서 1 시간 동안 계속 교반하였다. 침전물을 수집하여 2 시간 동안 흡인 건조시킨후, 16 시간 동안 공기 건조시켰다. 생성된 고체를 완전히 분쇄하여 고온의 아세톤(500 mL)중에서 슬러리로 만들고 여과하였다. 여과지상의 잔류물을 고온의 아세톤으로 세정한 후(200 mL씩 2회), 고온의 아세톤(300 mL)을 사용해서 다시 슬러리로 만들고, 여과한 후, 다시 고온의 아세톤으로 세척하였다(100 mL 씩 2회). 여과액을 합쳐서 농축 건고시켜 회백색 고체인 d4T를 51.3g (57%) 얻었다. mp 165 ~ 166℃. [α]²⁰ _D-46.1(c=O.7, 물).Anhydrous DMSO (400 mL) and oxetane (90.0 g, 0.402M) were added to a 1 L three neck round bottom flask equipped with a mechanical stirrer, thermometer and nitrogen inlet. 97% KOtBu (74 g, 0.643 M) was added to the solution over 1.5 minutes at 1.5 g each. The temperature was maintained at 18 ° C. to 22 ° C. using an external ice bath. After the addition was complete, the reaction was stirred for an additional hour, with no further temperature rise observed. TLC analysis showed that the reaction was approximately 90% complete. The reaction solution was stirred at 21 ° C. for 16 hours, after which TLC analysis showed that the reaction was complete. The resulting viscous solution was injected into low temperature (4 ° C.) toluene (3 L), yielding a beige precipitate. The temperature of the mixture rose to 7 ° C. when DMSO solution was added. The compound was stirred intermittently over 20 minutes and then filtered through a 18.5 cm Buchner funnel. The collected yellow solid was washed twice with cold toluene and suction dried for 1 hour. Two layers formed as the solid was dissolved in 300 mL of water. The mixture was placed in a separating funnel to remove the upper layer (containing residual toluene). The aqueous layer was placed in a 1 L beaker equipped with a pH probe, magnetic stir bar and thermometer. The temperature was cooled to 10 ° C. using an external ice bath. Concentrated HCl was added dropwise to the stirred solution at a rate such that the temperature was maintained at 15 ° C. or lower. After addition of HCl (50.5 mL, 0.61 M), the pH was 7 ± 0.1 and a precipitate began to form. Potassium chloride (70 g) was added to this thick mixture and stirring continued at 5 ° C for 1 hour. The precipitate was collected, suction dried for 2 hours and then air dried for 16 hours. The resulting solid was completely triturated, slurried in hot acetone (500 mL) and filtered. The residue on the filter paper was washed with hot acetone (2 × 200 mL), then slurried using hot acetone (300 mL), filtered and washed again with hot acetone (100 mL each). Episode 2). The combined filtrates were concentrated to dryness to give 51.3 g (57%) of d4T as an off-white solid. mp 165-166 ° C. [α] ²⁰ _D -46.1 (c = O.7, water).

¹H NMR (360 MHz, d₆-DMSO) 11.29(s, 1H, NH), 7.63(s, 1H, H-6), 6.80(d, 1H, J = 1.2 Hz, H-1'), 6.38(d, 1H, J = 5.9 Hz, H-3'), 5.90(dd, 1H, J = 1.1, 4.7 Hz, H-3'), 5.01(m, 1H, OH), 4.76(s, 1H, H-4'), 3.60(dd, 2H, J = 4.8, 3.6 Hz, H-5'), 1.71(d, 3H, J = 1.2 Hz, CH₃). ¹ H NMR (360 MHz, d ₆ -DMSO) 11.29 (s, 1H, NH), 7.63 (s, 1H, H-6), 6.80 (d, 1H, J = 1.2 Hz, H-1 '), 6.38 (d, 1H, J = 5.9 Hz, H-3 '), 5.90 (dd, 1H, J = 1.1, 4.7 Hz, H-3'), 5.01 (m, 1H, OH), 4.76 (s, 1H, H-4 '), 3.60 (dd, 2H, J = 4.8, 3.6 Hz, H-5'), 1.71 (d, 3H, J = 1.2 Hz, CH ₃ ).

¹³C NMR (75 MHz, d₆-DMSO) 164.42 (C4), 151.30(C2), 137.23(C2'), 135.36(C3'), 126.35(C6), 109.33(C5), 89.15(C1'), 87.56 (C4'), 62.41(C5'), 12.15(C5CH₃). MS m/e(메탄 DCI) (상대적 강도) 225 (M+H, 20), 207(15), 193(8), 155(13), 127(100), 90(20). ¹³ C NMR (75 MHz, d ₆ -DMSO) 164.42 (C4), 151.30 (C2), 137.23 (C2 '), 135.36 (C3'), 126.35 (C6), 109.33 (C5), 89.15 (C1 '), 87.56 (C4 ′), 62.41 (C5 ′), 12.15 (C5CH ₃ ). MS m / e (methane DCI) (relative strength) 225 (M + H, 20), 207 (15), 193 (8), 155 (13), 127 (100), 90 (20).

IR (cm^-1) 3463, 3159, 3033, 1691, 1469, 1116, 1093.IR (cm- ¹ ) 3463, 3159, 3033, 1691, 1469, 1116, 1093.

원소 분석(C₁₀H₁₂N₂O₄) C, H, N.Elemental Analysis (C ₁₀ H ₁₂ N ₂ O ₄ ) C, H, N.

1-(2,3-디데옥시-β-D-글리세로-펜트-2-에노푸라노실)티민1- (2,3-dideoxy-β-D-glycero-pent-2-enofuranosyl) thymine

테트라부틸 암모늄 플루오라이드(0.22 mL, 0.22 mM, 1.0 M)를 무수 THF(3 mL) 중의 안히드로누클레오시드(25 mg, 0.11 mM) 현탁액에 첨가하였다. 22℃ 에서 3 시간 동안 교반한 후, TLC 분석 결과 출발 물질만이 나타났다. 상기 혼합물을 18 시간 동안 가열 환류하는데, 이 때 반응이 완료된 것으로 나타났다. 냉각 후, 상기 용매를 진공하에서 제거하고 잔류물을 CH₂Cl₂/MeOH/NH₄OH (90:10:1) 중에 용해시켰다. CH₂Cl₂/MeOH/NH₄OH(90:10:1)를 용출액으로 사용하여 20 mm 플래쉬 크로마토그래피 컬럼에서 정제하였다. 상기 생성물을 함유하고 있는 분획을 농축시켜 18mg(72%)의 d4T 를 얻었다.Tetrabutyl ammonium fluoride (0.22 mL, 0.22 mM, 1.0 M) was added to the suspension of anhydronucleoside (25 mg, 0.11 mM) in dry THF (3 mL). After stirring for 3 h at 22 ° C., TLC analysis showed only starting material. The mixture was heated to reflux for 18 hours at which time the reaction was found to be complete. After cooling, the solvent was removed in vacuo and the residue was dissolved in CH ₂ Cl ₂ / MeOH / NH ₄ OH (90: 10: 1). CH ₂ Cl ₂ / MeOH / NH ₄ OH (90: 10: 1) was purified on a 20 mm flash chromatography column using eluent. Fractions containing the product were concentrated to give 18 mg (72%) of d4T.

1-(5'-O-트리틸-2',3'-티오카르보닐리보푸라노실)우라실1- (5'-O-trityl-2 ', 3'-thiocarbonyllipofranosyl) uracil

5'-O-트리틸우리딘(10.6 gm, 22 mM)을 아르곤 대기하에서 건조 상태의 250 mL용 둥근바닥 플라스크에 넣었다. 무수 테트라히드로푸란(110mL)를 첨가하고, 상기 반응 혼합물이 균일해질 때까지 교반하였다. 상기 용액에 1,1-티오카르보닐디이미다졸 (4.3 gm, 27 mM)을 첨가하였을 때, 상기 반응물은 황색으로 되었다. 이어서, 실온에서 72 시간 동안 교반하였다. 상기 용매를 진공하에 제거하고 생성된 시럽을 에틸 아세테이트/헥산(75:25)를 용출액으로 사용하여 실리카상에서 플래쉬 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 분리한 후, 무수 에탄올로부터 재결정시켜 회백색의 분말을 얻었다(0.8 g, 77%).5'-0-trityluridine (10.6 gm, 22 mM) was placed in a dry 250 mL round bottom flask under an argon atmosphere. Anhydrous tetrahydrofuran (110 mL) was added and stirred until the reaction mixture became homogeneous. When 1,1-thiocarbonyldiimidazole (4.3 gm, 27 mM) was added to the solution, the reaction turned yellow. Then stirred at room temperature for 72 hours. The solvent was removed in vacuo and the resulting syrup was purified by flash chromatography on silica using ethyl acetate / hexane (75:25) as eluent. The product was separated and then recrystallized from anhydrous ethanol to give an off-white powder (0.8 g, 77%).

¹H NMR (360 MHz, CDCl₃) 8.9(br s, 1H, NH), 7.3(m, 16H, 3xC₆H₅, H6), 5.7(d, 1H, H5), 5.6(m, 2H, H2', H3'), 5.4(m, 1H, H1'), 3.4(q, 2H, H5'). ¹ H NMR (360 MHz, CDCl ₃ ) 8.9 (br s, 1H, NH), 7.3 (m, 16H, 3xC ₆ H ₅ , H6), 5.7 (d, 1H, H5), 5.6 (m, 2H, H2 ', H3'), 5.4 (m, 1H, H1 '), 3.4 (q, 2H, H5').

5'-O-트리틸-2',3'-디데옥시-2',3'-디데히드로우리딘5'-O-trityl-2 ', 3'-dideoxy-2', 3'-didehydrouridine

1-(5'-O-트리틸-2',3'-티오카르보닐리보푸라노실)우라실(6.0 g, 11.5 mM)을 트리에틸 포스파이트(30 mL)에 첨가하였다. 상기 트리에틸 포스파이트는 160℃ 로 예열한 것이다. 상기 반응 혼합물을 160℃ 에서 1 시간 동안 가열하였다. 이어서, 상기 용매를 진공하에서 제거한 후, 생성된 유리질 고체를 에틸 아세테이트/헥산(75:25)을 용출액으로 사용하여 실리카상에서 플래쉬 크로마토그래피로 정제하였다. 목적하는 생성물을 상기 컬럼으로부터 분리시킨후 에틸 아세테이트/헥산에서 재결정시켜 백색 고체로서 수집하였다. (2.0 g, 40%). m.p. 188 내지 191℃.1- (5'-O-trityl-2 ', 3'-thiocarbonylibofuranosyl) uracil (6.0 g, 11.5 mM) was added to triethyl phosphite (30 mL). The triethyl phosphite was preheated to 160 ° C. The reaction mixture was heated at 160 ° C. for 1 hour. The solvent was then removed in vacuo and the resulting glassy solid was purified by flash chromatography on silica using ethyl acetate / hexanes (75:25) as eluent. The desired product was separated from the column and then recrystallized in ethyl acetate / hexanes to collect as a white solid. (2.0 g, 40%). m.p. 188 to 191 ° C.

¹H NMR (360 MHz, CDCl₃) 8.95(br2, 1H, NH), 8.00(d, 1H, H6), 7.5(m, 15H, 3xC₆H₅), 7.2(m, 1H, H1'), 6.7(m, 1H, H2'), 6.05(m, 1H, H3'), 5.2(dd, 1H, H5), 5.10(br s, 1H, H4'), 3.6(m, 2H, H5'). ¹ H NMR (360 MHz, CDCl ₃ ) 8.95 (br 2, 1 H, NH), 8.00 (d, 1 H, H ₆ ), 7.5 (m, ₁₅ H, 3 × C ₆ H ₅ ), 7.2 (m, 1H, H 1 ′), 6.7 (m, 1H, H2 '), 6.05 (m, 1H, H3'), 5.2 (dd, 1H, H5), 5.10 (br s, 1H, H4 '), 3.6 (m, 2H, H5').

2',3'-디데옥시-2',3'-디데히드로우리딘(d4U)2 ', 3'-dideoxy-2', 3'-didehydrouridine (d4U)

5'-O-트리틸-2',3'-디데옥시-2',3'-디데히드로우리딘(0.5 g, 1.1 mM)을 2% p-톨루엔설폰산을 함유하고 있는 클로로포름(10 mL)과 메탄올(2 mL)과의 혼합물에 용해시켰다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 45분 동안 교반한 후 2N 의 NaOH (0.5mL)로 중화시켰다. 상기 용매를 진공하에서 제거하고, 그 잔류물은 용출액으로서 클로로포름/아세톤(2:1)을 사용하여 실리카상에서 크로마토그래피로 정제하였다. 목적하는 생성물을, 다른 방법으로 생성시킨 d4U 와 동일한 물리적 및 분광분석학적 특성을 가진 백색 결정형 고체로서 분리시켰다. m.p. 155℃.5'-O-trityl-2 ', 3'-dideoxy-2', 3'-didehydrouridine (0.5 g, 1.1 mM) in chloroform (2 mL) containing 2% p-toluenesulfonic acid ) And methanol (2 mL). The reaction mixture was stirred at room temperature for 45 minutes and then neutralized with 2N of NaOH (0.5 mL). The solvent was removed in vacuo and the residue was purified by chromatography on silica using chloroform / acetone (2: 1) as eluent. The desired product was isolated as a white crystalline solid with the same physical and spectroscopic properties as d4U produced by other methods. m.p. 155 ° C.

¹H NMR (360 MHz, D₂O/DMSO), 7.8(d, 1H, H6), 6.7(m, 1H, H1'), 6.37(m, 1H, H2'), 5.8(m, 1H, H3'), 5.56(d, 1H, H5), 4.7(m, 1H, H4'), 3.6(m, 2H, H5').¹³C NMR(70Mhz, D₂O/DMSO) 163(C4), 151(C2), 141(C2'), 135(C3'), 126(C6), 101(C5), 89(C1'), 87(C4'), 62(C5'). ¹ H NMR (360 MHz, D ₂ O / DMSO), 7.8 (d, 1H, H6), 6.7 (m, 1H, H1 '), 6.37 (m, 1H, H2'), 5.8 (m, 1H, H3 '), 5.56 (d, 1H, H5), 4.7 (m, 1H, H4'), 3.6 (m, 2H, H5 '). ¹³ C NMR (70Mhz, D ₂ O / DMSO) 163 (C4), 151 (C2), 141 (C2 '), 135 (C3'), 126 (C6), 101 (C5), 89 (C1 '), 87 (C4 '), 62 (C5').

2',3'-메톡시메틸리덴우리딘2 ', 3'-methoxymethylideneuridine

우리딘(50 g, 205 M)을 질소 대기하에 1 리터용 둥근바닥 플라스크에 넣었다. 금방 증류시킨 무수 테트라히드로푸란(500 mL), 피리디늄 p-톨루엔 설포네이트(5 g, 20 mM)를 상기 반응 혼합물에 첨가하였다. 이어서, 트리메틸 오르토포르메이트(109 g, 1.03 M)를 첨가 깔대기를 통하여 서서히 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 상온에서 18 시간 동안 교반하였는데, 이 기간 동안에 상기 반응물은 균질화되었다. 물(18 g, 1 M)을 첨가하고 상기 반응물을 30분 동안 더 교반한 후 피리딘(20 mL)을 첨가하였다. 상기 반응물을 상온에서 18 시간 동안 더 교반한후, 용매를 진공하에서 제거하였다. 생성된 백색 고체를 실리카상에서 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 백색 고체인 목적하는 생성물을 얻었다(40 g, 68%). m.p. 188~190℃.(문헌 기재, 189~190℃).Uridine (50 g, 205 M) was placed in a 1 liter round bottom flask under a nitrogen atmosphere. Quickly distilled anhydrous tetrahydrofuran (500 mL) and pyridinium p-toluene sulfonate (5 g, 20 mM) were added to the reaction mixture. Trimethyl orthoformate (109 g, 1.03 M) was then added slowly via addition funnel. The reaction mixture was stirred at room temperature for 18 hours during which time the reaction was homogenized. Water (18 g, 1 M) was added and the reaction further stirred for 30 minutes before pyridine (20 mL) was added. The reaction was stirred further for 18 hours at room temperature, then the solvent was removed in vacuo. The resulting white solid was purified by flash chromatography on silica to give the desired product as a white solid (40 g, 68%). m.p. 188-190 degreeC. (Documentary description, 189-190 degreeC).

5-O-아세틸-2',3'-디데옥시-2',3'-디데히드로우리딘5-O-acetyl-2 ', 3'-dideoxy-2', 3'-didehydrouridine

상기 메톡시메틸리덴 화합물(11.8 g, 41 mM)을 아세트산(110 mL)에 용해시킨 후, p-톨루엔 설포네이트(20 mg)를 첨가하고 140℃ 로 6 시간 동안 가열하였다. 상기 반응물을 냉각시킨 후 트리에틸아민(1 mL)을 첨가하였다. 진공하에서 용매를 제거하고 용출액으로서 클로로포름/아세톤(4:1)을 사용하여 실리카상에서 크로마토그래피로 정제하여 투명한 유상 물질인 목적 생성물을 얻었다.The methoxymethylidene compound (11.8 g, 41 mM) was dissolved in acetic acid (110 mL), then p-toluene sulfonate (20 mg) was added and heated to 140 ° C. for 6 hours. After cooling the reaction, triethylamine (1 mL) was added. The solvent was removed in vacuo and purified by chromatography on silica using chloroform / acetone (4: 1) as eluent to afford the desired product as a clear oily material.

¹H NMR (360 MHz, DMSO), 11.3(br s, 1H, NH), 7.4(d, 1H, H6), 6.8(m, 1H, H1'), 6.4(m, 1H, H2'), 5.9(m, 1H, H3'), 5.6(d, 1H, H5), 5.0(m, 1H, H4'), 4.2(m, 2H, H5'). 2.0(s, 3H, CH₃). ¹ H NMR (360 MHz, DMSO), 11.3 (br s, 1H, NH), 7.4 (d, 1H, H6), 6.8 (m, 1H, H1 '), 6.4 (m, 1H, H2'), 5.9 (m, 1H, H3 '), 5.6 (d, 1H, H5), 5.0 (m, 1H, H4'), 4.2 (m, 2H, H5 '). 2.0 (s, 3H, CH ₃ ).

5'-O-(2'-아세톡시이소부티릴)3-O-아세틸-2'-브로모-2'-데옥시우리딘5'-O- (2'-acetoxyisobutyryl) 3-O-acetyl-2'-bromo-2'-deoxyuridine

우리딘(5.0 g, 0.021 M)을 아세토니트릴(90 mL)에 현탁시키고 15분에 걸쳐 2-아세톡시이소부티릴 브로마이드(12.85 g, 0.063 M)를 첨가하고, 이어서 상기 반응물을 80℃ 에서 3 시간 동안 가열하였다. 상기 균질 용액을 실온으로 냉각시킨 후 용매를 진공하에서 제거하였다. 생성된 시럽을 EtOAc(200 mL)에 용해시키고 NaHCO₃로 세척하였다(100 mL씩 3회). 유기층을 MgSO₄로 건조시키고 용매를 진공하에서 제거하였다. SiO₂(75% EtOAc/25% Hex) 상에서 크로마토그래피로 정제하여 백색 포말체 6.7 g을 얻었다(67%). m.p. 68℃ 내지 70℃(m.s. m⁺477).Uridine (5.0 g, 0.021 M) is suspended in acetonitrile (90 mL) and 2-acetoxyisobutyryl bromide (12.85 g, 0.063 M) is added over 15 minutes, and then the reaction is added at 80 ° C. in 3 Heated for hours. After cooling the homogeneous solution to room temperature, the solvent was removed under vacuum. The resulting syrup was dissolved in EtOAc (200 mL) and washed with NaHCO ₃ (3 × 100 mL). The organic layer was dried over MgSO ₄ and the solvent was removed in vacuo. Purification by chromatography on SiO ₂ (75% EtOAc / 25% Hex) gave 6.7 g of a white foam (67%). mp 68 ° C. to 70 ° C. (ms m ⁺ 477).

2',3'-디히드로-2',3'-디데옥시우리딘(D4U)2 ', 3'-dihydro-2', 3'-dideoxyuridine (D4U)

브로모우리딘(2 g, 4.2 mM)을 3 mL 의 DMF 에 용해시키고 무수 DMF (25mL) 중의 Zn/Cu (0.70 g, 10.5 mM) 슬러리에 적가하였다. TLC 분석 결과로 출발 물질이 관찰되지 않을 때까지 상기 반응물을 실온에서 2 시간 30분 동안 교반하였다. 반응액을 셀라이트를 통해 여과하고 여과액을 고진공계의 진공하에 20℃ 에서 농축시켰다. 생성된 백색 고체(1.1 g, 85%)를 MeOH 에 용해시킨 후 빙수욕조를 사용하여 0℃로 냉각시켰다. 무수 암모니아를 20분 동안 기포 통과시킨 후 상기 용액을 18 시간에 걸쳐 60℃ 로 가온시켰다. TLC 분석 결과 d4u에 상응하는 반점이 나타났다. 용매를 제거하고 생성된 백색 고체를 SiO₂(10% MeOH/CH₂Cl₂) 상에서 크로마토그래피로 정제하여 목적 생성물 0.5 g (55%)을 얻었다. m.p. 155℃ (문헌 기재 : 154 내지 155℃).Bromouridine (2 g, 4.2 mM) was dissolved in 3 mL of DMF and added dropwise to a slurry of Zn / Cu (0.70 g, 10.5 mM) in anhydrous DMF (25 mL). The reaction was stirred at room temperature for 2 hours 30 minutes until no starting material was observed by TLC analysis. The reaction was filtered through celite and the filtrate was concentrated at 20 ° C. under vacuum in a high vacuum system. The resulting white solid (1.1 g, 85%) was dissolved in MeOH and then cooled to 0 ° C. using an ice water bath. Anhydrous ammonia was bubbled through for 20 minutes and then the solution was warmed to 60 ° C. over 18 hours. TLC analysis revealed spots corresponding to d4u. The solvent was removed and the resulting white solid was purified by chromatography on SiO ₂ (10% MeOH / CH ₂ Cl ₂ ) to afford 0.5 g (55%) of the desired product. mp 155 ° C (document description: 154 to 155 ° C).

AZT 및 d4T 의 생체내 항 HIV 효율a 및 세포독성의 비교Comparison of in vivo anti-HIV efficiencya and cytotoxicity of AZT and d4T 화합물compound ID₅₀ ^c(μM) ID ₅₀ ^c (μM) TCID₅₀ ^d(μM)TCID ₅₀ ^d (μM) AZTAZT 0.450.45 54.054.0 d4Td4T 0.330.33 39.039.0 (예, p. 28)(E.g. p. 28)

a HIV (LAV 균주)로 감염된 CEM 세포에 대한 항비루스 시험을 행하였다.Antiviral tests were performed on CEM cells infected with a HIV (LAV strain).

b 세포 독성은 CEM 세포내에서 측정하였다.b Cytotoxicity was measured in CEM cells.

c 50% 억제 투여량.c 50% inhibitory dose.

d 50% 조직 배양 억제 투여량.d 50% tissue culture inhibition dose.

본 발명에 의하면, 의약 기술분야에 유용성을 갖는 2',3'-디데옥시-2',3'-디데히드로누클레오시드를 대량으로, 그리고 저렴하게 제조할 수 있는 방법에 제공된다.According to the present invention, there is provided a method capable of producing a large amount and inexpensively 2 ', 3'-dideoxy-2', 3'-didehydronucleoside having utility in the medical art.

Claims (12)

(a) 출발물질인 하기 화학식 6의 리보누클레오시드를, 무수 조건하에 극성용매의 존재하에서 트리메틸오르토포르메이트와 반응시켜 하기 화학식 7의 반응성 중간체를 수득하는 단계;(a) reacting the starting material ribonucleoside of formula (6) with trimethylorthoformate in the presence of a polar solvent under anhydrous conditions to obtain a reactive intermediate of formula (7); (b) 상기 단계(a)에서 얻은 중간체를 약 120 내지 160℃ 의 고온하에 약 4-8 시간 동안 Ac₂O 중의 유기 산으로 처리함으로써 제거 반응시키는 단계, 및(b) subjecting the intermediate obtained in step (a) to a removal reaction by treating with an organic acid in Ac ₂ O at a high temperature of about 120 to 160 ° C. for about 4-8 hours, and (c) 형성된 5'-OAc 기를 온화한 염기 가수분해 조건하에서 처리함으로써 탈보호시키는 단계를 포함하여,(c) deprotecting by treating the formed 5′-OAc group under mild base hydrolysis conditions, 하기 화학식 2의 2',3'-디데옥시-2',3'-디데히드로누클레오시드를 제조하는 방법:To prepare a 2 ', 3'-dideoxy-2', 3'-didehydronucleoside of formula (2): 화학식 2Formula 2

화학식 6Formula 6

화학식 7Formula 7

상기 식중,In the above formula, B 는 퓨린, 아자-퓨린, 데아자-퓨린, 피리미딘, 아자-피리미딘, 데아자-피리미딘, 및 트리아졸 고리 염기중에서 선택된다.B is selected from purine, aza-purine, deaza-purine, pyrimidine, aza-pyrimidine, deaza-pyrimidine, and triazole ring bases. 제 1 항에 있어서,The method of claim 1, 상기 염기 B 가 퓨린 및 피리미딘 염기중에서 선택되는 방법.Wherein base B is selected from purine and pyrimidine bases. 제 2 항에 있어서,The method of claim 2, 상기 염기 B 가 피리미딘 염기인 방법.Wherein said base B is a pyrimidine base. 제 3 항에 있어서,The method of claim 3, wherein 상기 피리미딘 염기가 우리딘 및 5-메틸-우리딘중에서 선택되는 방법.Wherein said pyrimidine base is selected from uridine and 5-methyl-uridine. (a) 출발물질인 하기 화학식 6의 리보누클레오시드를 5'-히드록시(1급 히드록시)기를 선택적으로 보호하는데 효과적인 히드록시 보호기 반응물과 반응시키는 단계;(a) reacting the starting material ribonucleoside of Formula 6 with a hydroxy protecting group reactant effective to selectively protect the 5'-hydroxy (primary hydroxy) group; (b) 상기 단계(a)에서 얻은 5'-OH-보호된 리보누클레오시드를 무수 조건하에서 1,1-티오카르보디이미다졸 및 티오포스겐중에서 선택된 반응물과 반응시켜 하기 화학식 8의 반응성 중간체를 생성시키는 단계;(b) reacting the 5′-OH-protected ribonucleoside obtained in step (a) with a reactant selected from 1,1-thiocarbodiimidazole and thiophosgene under anhydrous conditions to obtain a reactive intermediate of formula (8) Generating; (c) 단계(b)에서 얻은 중간체를 약 140℃ 내지 175℃ 의 고온하에 극성 용매중에서 P(OEt)₃로 약 30 분 내지 4 시간동안 처리하여 제거 반응시키는 단계; 및(c) subjecting the intermediate obtained in step (b) to a removal reaction by treating the intermediate obtained in step (b) with P (OEt) ₃ for about 30 minutes to 4 hours in a polar solvent at a high temperature of about 140 ° C to 175 ° C; And (d) 형성된 5'-O-보호기를 완만한 산 가수분해 조건하에서 처리함으로써 탈보호시키는 단계를 포함하며, 하기 화학식 2의 2',3'-디데옥시-2',3'-디데히드로누클레오시드를 제조하는 방법:(d) deprotecting by treating the formed 5'-0-protecting group under mild acid hydrolysis conditions, wherein the 2 ', 3'-dideoxy-2', 3'-didehydronude of Formula 2 How to prepare cleoside: 화학식 2Formula 2

화학식 6Formula 6

화학식 8Formula 8

상기 식중,In the above formula, B 는 퓨린, 아자-퓨린, 데아자-퓨린, 피리미딘, 아자-피리미딘, 데아자-피리미딘, 및 트리아졸 고리 염기중에서 선택된다.B is selected from purine, aza-purine, deaza-purine, pyrimidine, aza-pyrimidine, deaza-pyrimidine, and triazole ring bases. 제 5 항에 있어서,The method of claim 5, 상기 염기 B 가 퓨린 및 피리미딘 염기중에서 선택되는 방법.Wherein base B is selected from purine and pyrimidine bases. 제 6 항에 있어서,The method of claim 6, 상기 염기 B 가 피리미딘 염기인 방법.Wherein said base B is a pyrimidine base. 제 7 항에 있어서,The method of claim 7, wherein 상기 피리미딘 염기가 우리딘 및 5-메틸우리딘중에서 선택되는 방법.Wherein said pyrimidine base is selected from uridine and 5-methyluridine. (a) 출발물질인 하기 화학식 6의 리보누클레오시드를 약 75℃ 내지 100℃ 의 고온에서 무수 조건하에 극성 용매중에서 아실옥시이소부티릴 브로마이드와 약 1 내지 3 시간 동안 반응시켜 하기 화학식 9의 반응성 중간체를 생성시키는 단계;(a) Reactivating the ribonucleoside of Formula 6, which is a starting material, with acyloxyisobutyryl bromide for about 1 to 3 hours in a polar solvent under anhydrous conditions at a high temperature of about 75 to 100 ℃ Creating an intermediate; (b) 상기 단계(a)에서 얻은 중간체를 비양성자성 극성 용매중에서 Zn/Cu 반응물로 처리하여 제거 반응시키므로써 하기 화학식 10으로 표시되는 중간체를 생성시키는 단계; 및(b) treating the intermediate obtained in step (a) with a Zn / Cu reactant in an aprotic polar solvent to remove and react to produce an intermediate represented by the following Chemical Formula 10; And (c) 상기 단계(b)에서 얻은 중간체를 온화한 염기로 처리하여 상기 중간체의 5'-O-보호기를 제거하므로써 하기 화학식 2의 2',3'-디데옥시-2',3'-디데히드로누클레오시드를 생성시키는 단계를 포함하여, 상기 2',3'-디데옥시-2',3'-디데히드로 누클레오시드를 제조하는 방법:(c) treating the intermediate obtained in step (b) with a mild base to remove the 5'-O-protecting group of the intermediate, thereby removing 2 ', 3'-dideoxy-2', 3'-didehydro- A method of preparing the 2 ', 3'-dideoxy-2', 3'-didehydro nucleoside, comprising generating a nucleoside: 화학식 2Formula 2

화학식 6Formula 6

화학식 9Formula 9

화학식 10Formula 10

상기 식중,In the above formula, B 는 퓨린, 아자-퓨린, 데아자-퓨린, 피리미딘, 아자-피리미딘, 데아자 -피리미딘, 및 트리아졸 고리 염기로 이루어진 염기 군중에서 선택되고;B is selected from a base crowd consisting of purine, aza-purine, deaza-purine, pyrimidine, aza-pyrimidine, dea-pyrimidine, and triazole ring bases; R 은 아실옥시이소부티릴기를 나타내며;R represents an acyloxyisobutyryl group; R' 는 아실옥시이소부티릴 브로마이드의 아실기를 나타낸다.R 'represents an acyl group of acyloxyisobutyryl bromide. 제 9 항에 있어서,The method of claim 9, 상기 염기 B 가 퓨린 및 피리미딘 염기중에서 선택되는 방법.Wherein base B is selected from purine and pyrimidine bases. 제 10 항에 있어서,The method of claim 10, 상기 염기 B 가 피리미딘 염기인 방법.Wherein said base B is a pyrimidine base. 제 11 항에 있어서,The method of claim 11, 상기 피리미딘 염기가 우리딘 및 5-메틸우리딘중에서 선택되는 방법.Wherein said pyrimidine base is selected from uridine and 5-methyluridine.