KR0138996B1

KR0138996B1 - 치환된 아데닌 유도체 및 이를 함유하는 약제학적 조성물

Info

Publication number: KR0138996B1
Application number: KR1019890702130A
Authority: KR
Inventors: 에이. 카슨 데니스; 제이. 카레라 카를로스
Original assignee: 레이몬드 에이치. 칸; 스크립스 클리닉 앤드 리서치 화운데이션
Priority date: 1988-03-16
Filing date: 1989-03-16
Publication date: 1998-04-30
Also published as: DE68924319T2; JP3090456B2; KR900700495A; DE68924319D1; ATE128141T1; WO1989008658A1; JPH03501258A; AU626296B2; EP0364559B1; EP0364559A4; EP0364559A1; AU3410589A; CA1339964C; FI895447A0

Abstract

내용없음.

Description

[발명의 명칭]

치환된 아데닌 유도체 및 이를 함유하는 약제학적 조성물

[발명의 상세한 설명]

[기술]

본원은 본 명세서에서 참고문헌으로 인용되는, 1988년 3월 16일자로 출원된 계류중인 특허원 제169,618호의 부분 연속 출원이다.

[기술분야]

본 발명은 만성 염증 질환, 감염증, 및 자기 면역 질환의 치료에 유용한 치료제에 관한 것이다. 더욱 상세하게는, 본 발명은 단핵세포＝매개 질환 또는 질병 증상(질환)을 치료하는 화합물 및 치료방법에 관한 것이다. 특정 양태로, 본 발명은 병원체가 단핵세포에 존재하는 질환을 치료하는 방법에 관한 것이다. 두 번째 양태로, 본 발명은 자기면역 질환, 또는 단핵세포 활성화가 질병의 병변에 기여하는 기타 만성 질환의 치료에 관한 것이다.

[발명의 배경]

최근 보고서에는 인간 면역결핍 바이러스(HIV)는 T 세포이외에 대식세포 및 단핵세포를 감염시킨다고 나타나 있다[참조 : Levy et al(1985)Virology. 147 : 441-448 ; Garther et al. (1986)Science, 233 : 215-219 ; and Wiley et al. (1986) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 83 : 7089-7093]. 후천성 면역 결핍증(AIDS)은 또한 인산 T-임파추향성 바이러스 형 Ⅲ(HTLV-Ⅲ)으로 공지된 HIV로의 감염에 의해 발생한다.

AIDS는 환자의 생명을 위협하는 기회성 감염 뿐만 아니라 비통상적인 형태의 신생물로 환자가 병에 걸리기 쉽게 되는 광범위한 면역억제가 그 특징이다. 인간 T-임파추향성 바이러스의 기타 공지된 아그룹 또는 종류로서, 타입 I(HTLV-I)은 백혈병에 있어서 T-세포의 증식을 유발시키는 것으로 믿어진다. HTLV-Ⅱ가 모상 세포 백혁병의 T세포 변종의 희귀한 경우와 관련되 있지만, 발병학에 있어서 이의 역할은 불분명하다[참조 : Golde et al. (1986), Seminars in Hematol. 23 : 3-9].

숙주 DNA로의 레트로바이러스의 통합 및 신규한 비리온(virion)의 발생 모두에 바이러스 RNA에 대해 상보적인 DNA의 합성이 요구되는 것으로 간주된다. 이런 이유로, HIV-암호화된 역 전사효소가 후천성 면역결핍증, 및 레트로바이러스 기원 기타 질병을 앓고 있는 환자를 치료하기 위한 약제를 개발하기 위한 필연적인 목표이다[참조 : De clercq et al.(1986) J. Med. Chem., 29 : 1561-1569]

미쯔야등[참조 : Mitsuya et al.(1985) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A 82 : 7006 : 7100]은 3'-아지도-3'-데옥시티미딘(AZT)이 배양시킨 인간 T임파아구에서의 HIV복제를 차단하고, 바이러스의 세포병 효과(cytopathic effect)를 억제시킨다고 보고하였다. AZT는 아마 T-세포에 의해 인산화되어 5'-트리포스페이트 유도체로 전환되는 것 같다. 상기 저자는 상기 유도체를 HIV 역전사 효소 활성 억제제인 것으로 보고하였다. 야르코안 등[참조 : Yarchoan et al. (1986)Lancet i : 575-580]은 AZT은 AIDS또는 ADIS-관련 합병증에 걸린 환자에게 투여하였다. 상기 약물은 내성이 크고 혈액/뇌관문을 교차시킨다고 보고되었다.

최근, 미쯔야등[참조 : Mitsuya et al.(1986) Proc. Natal. Acad. Sci. U.S.A, 83 : 1911-1915]은 아데노신, 구아노신, 이노신, 시티딘 및 티미딘의 2',3'-디데옥시뉴클레오시드 유도체가 또한 비감염 T세포의 증식을 차단하는 농도의 10 내지 20배 농도에서 시험관 내 시험 HIV의 감염성 및 세포병 효과를 억제시킨다고 보고하였다. 이들 화합물은 또한 숙주 T세포에 대해 상당히 비-독성인 것으로 보고되었다. 아데노신 및 시티딘 유도체가 구아노신 및 이노신 유도체보다 더욱 강력한 것으로 보고되었다.

2',3'-디데옥시뉴클레오시드는 T세포중에서 5'-위치에서 인산화되어 5'-뉴클레오시드 트리포스 페이트 유도체를 형성시킨다. 이러한 유도체는 역 전사 효소 분자에 대한 기질로 익히 공지되어 있다[참조 : Ono et al. (1986) Biochem. Biophys. Res. Comm. 2 : 498-507].

또한 이러한 2',3'-디데옥시뉴클레오시드 5'-트리포스페이트는 포유동물 DNA 폴리머라제 베타 및 감마에 의해 이용된다[참조 : Waquar et al.(1984) J. Cell. Physiol., 121 : 402-408]. 그러나, 이들은 DNA 폴리머라제-알파(이는, 인간 임파구에서의 DNA합성의 수선 및 복제 모두에 관여하는 주효소이다)에 대해서는 좋지 않은 기질이다. 부분적으로, 이들 특성은 2',3'-디데옥시뉴클레오시드의 선택적 항-HIV활성을 설명할 수 있다.

챤 등[참조 : Chan et al.(1982) J. Cell Physiol, 111 : 28-32]은 쥐의 복강내 대식세포 및 단핵세포에서 피리미딘 뉴클레오티드 대사 경로를 연구하여, 이들 세포에 있어서 감지불능 농도의 데옥시티딘 키나제 또는 티비딘 카나제를 보고하였다. 그러나, 고농도의 아데노신 키나제가 발견되었다.

본 발명자들이 수행하는 연구중 유사한 고농도의 아데노신 키나제가 인간 단핵세포 및 인간 단핵세포-유래 대식세포(MDM)에서 발견되었다. 선행 연구에서, MDM은 우리딘, 데옥시시티딘 및 티미딘에 대한 CEM T 임파구(예 : ATCC CCL 119)의 뉴클레오사이드 키나제 활성의 약 1/10 내지 약 1/4, 및 CEM세포의 아데노신 키나제 활성의 약 2/3를 나타내는 것으로 밝혀졌다. 또한, MDM세포의 아데노신 키나제 활이 기타 키나제 활성보다 약 10-배 이상 높다. 이러한 연구는 또한 완전한 CEM T 임파구중에서 AZT, 디데옥시시티딘(ddC) 및 2',3'-디데옥시(ddA)을 사용하는 뉴클레오시드 인산화 정도가 상당히 낮으며 또한 MDM서의 정도는 더욱 낮다고 밝혔다.

CEM 및 MDM 세포에 있어서 HIV의 p24(gag)항원의 합성을 억제하는 AZT, ddC 및 ddA의 능력을 또한 시험하였다. CEM 세포의 경우, 세 개의 화합물 모두의 결과가 최저 농도에서 최대 효과를 제공하는 ddC, 다음 AZT, 다음 ddA로 3-일간의 분석에서 미쯔야 등이 수득한 결과와 유사하다[참조 : Mitsuya et al. (1987)Nature, 325 : 773-778]. 유사한 3일간의 분석에서 동일 농도(0.1 내지 100μM)를 사용하여, MDM 세포로부터 p24(gag)의 생산을 억제시키는 화합물은 하나도 없다.

상기 결과는 AZT를 사용하는 임상시험에서 부분적으로 관찰한 것을 설명한다. 상기 결과는 부분적으로 AIDS 또는 AIDS-관련 합병증을 앓는 환자를 AZT로 치료하면 CD4(T4) 말초혈 세포수가 증가하고, 피부 지연 과민성이 회복되며, 기회성 감염 및 사망률이 감소하고 ; 상기 결과가 T세포상에서 AZT의 효과와 관련될 수 있음을 나타낸다.

그러나, AZT는 말초혈 세포로부터의 바이러스의 분리율에는 효과가 없다. 상기 결과는 지속적인 바이러스 복제 저장기를 나타내는 감염된 세포의 집단(subet)이 존재함을 나타내며, MDM세포를 사용한 상기 연구는 대식 세포가 적어도 생체내에 HIV보균 영역을 구성함을 나타낸다.

상술한 바와 같이, 2', 3'-디데옥시뉴클레오시드(ddA)은 시험관내에서 HIV의 감염성 및 세포병 효과를 억제한다[참조 : Mitusya et al. (1986)Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A, 83 : 1911-1915]. 그러나, ddA는 상기 화합물을 2',3'-디데옥시이노신(ddI)으로 전환시키는 아데노신 탈아미노효소(deaminase ; 또한 아데노신 아미노하이드롤라제, EC 3. 5. 4. 4]에 대한 공지된 기질이다[참조 : Frederiksen(1966) Arch. Biochem. Biophys., 113 : 383-388]. AIDS환자의 혈액 세포중 아데노신 탈아미노 효소의 농도는 정상인과 비교하여 상당히 높다. 따라서, 생체내에서, ddA는 내인성 아데노신 탈아미노효소의 작용에 기인하여, 2',3'-디데옥시이노신으로 신속하게 분해될 것으로 기대된다. 2',3'-디데옥시노신이 항-HIV 활성을 갖지만, AZT 또는 ddA보다 활성이 낮다[참조 : 상기 미쯔야, 1986].

몇몇 2-치환된 아데노신 유도체는 아데노신 탈아미노 효소에 의해 탈아미노화되지 않는 것으로 보고되었다. 예를 들어, 코딩톤[참조 : Coddington(1965)Biochem. Biophys Acta, 99 : 442-451]은 데옥시아데노신-1-N-옥시드, 뿐만 아니라 2-하이드록시-, 2-메틸-, 2-클로로-, 2-아세트아미도-, 및 2-메틸티오-아데노신이 아데노신 탈아미노효소에 대한 기질도 억제제도 아니라고 보고하였다. 몽고메리[참조 : Montgomery, in Nucleosides, Nucleotides, and Their Biolog ; cal Applications, Rideout et al. eds., Academic Press, New York, page 19(1983)]는 아데노신, 2-할로아데노신, 2-할로데옥시아데노신 및 2-플루오로아라비노아데노신에 대한 비교용 Km 및 Vmax 데이터의 표를 제공하는데, 이는 또한 상기와 같은 2-할로아데닌 유도체가 아데닌 자체보다 효소에 대해 좋지않은 기질임을 나타낸다. 스퇴클러 등[참조 : Stoeckler et al. (1982) Biochem. Pharm., 31 : 1723-1728]은 2'-데옥시-2'-아지도리보실 및 2'-데옥시-2'-아지도아라비노실아데신 유도체가 인간 적혈구 아데노신 탈아미노효소에 대한 기질이라고 보고한 반면, 다른 사람의 연구에는 2-플루오로아데노신이 아데노신 탈아미노효소에 의해 경미한 활성을 갖게 되는 것으로 나타나 있다.

2-클로로-2'-데옥시아데노신은 비-분열(정상) 인간 모세 혈액 임파구에 의해 인산화되어 5'-트리포스페이트로 전환된다. 상기 아데노신 유도체는 완전한 인간 세포 또는 세포 추출물에 의해 현저하게 이화되지 않으며, T 임파구에 의해 효율적으로 인산화된다[참조 : Carson et al.(1980) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A, 77 : 6865-6869].

상술한 바와 같이, 쥐의 복강내 대식세포 및 인간의 단핵세포에서 고농도의 아데노신 키나제가 발견되었다. 아데노신 키나제는 2'-데옥시아데노신 유도체를 인산화시킬 수 있지만, 데옥시시티딘 키나제보다 효율적이지는 못하다[참조 : Hershfield et al. (1982) J. Biol. Chem., 257 : 6380-6386].

AIDS 이외에, 병원성 유기체가 만성적으로 감염된 단핵세포/대식세포에 잔존하는 기타 감염성 질환은 샤가스병(Chagas disease) 및 기타 트리파노소마성질환(trypanosomal disease), 레이슈마니아증(Leishmaniasis), 미고박테리아 감염증, 전신성 및 국부성 진균 질환, 및 톡소플라스마병, 말라리아 및 뉴모시스티스와 같은 원충 감염증이 있다.

유사하게, 수많은 자기 면역 질환은 바이러스 감염증의 발병과 공통의 양태를 나타낸다. 자기 면역 질환을 매개하는 특히 메카니즘은 임파액 또는 액소성 성분을 포함할 수 있는 시스템을 증폭시킴으로써 증가할 수 있다.

자기면역 질환의 한 형태는 순환하는 자기항체가 세포 표면상에 존재하는 자기-항원과 반응하는 세포 독성 메카니즘과 관련된다. 세포독성 과정은 항체-의존 세포-매개 세포독성에서와 같이 보체(complement) 또는 세포에 의해 매개될 수 있다. 세포독성 메카니즘의 최종-결과는 통상적으로 세포 붕괴, 방출 또는 불 활성화이며, 이는 수많은 자기면역 혈액 질환의 메카니즘이다.

자기면역 질환의 두 번째 형태는 보체를 고정시킬 뿐만 아니라 염증을 개시시킬 수 있는 자기항체와 자기-항원의 면역 복합체를 형성시키는 것이다. 상기와 같은 복합체가 축적되는 기관은 염증을 일으키게 되고 궁극적으로는 붕괴된다. 핵산이 전신성 홍반성 낭창(SLE)에 있어서 상기 메카니즘에 대한 항원으로 작용하는 것은 공지되어 있다. 면역 복합체 침착은 수많은 자기면역 질환에 존재하는 사구체신염을 설명할 수 있도록 한다.

자기면역 질환에 대한 세 번째 베카니즘은 세포 또는 이의 가용성 산물이 항체 및 보체보다는 항원과 상호반응하여 매개되는 것이다. 상기 메카니즘은 지연된 과민증에 있어서 전통적으로 구체화되는데, 이는 시간-의존성인 반응으로 특성화되고, 염증 및 세포 침윤면에서 특히 조직학적 연쇄성(specific histologic sequence)을 갖고, 혈청에 의해서가 아니라 세포에 의해서만 전이될 수 있다.

세포독성의 주효체(effector)메카니즘은 항원과의 직접 세포 반응 또는 림포카인 및 모노카인(monokine)의 동화작용을 포함할 수 있다. 림포카인은 호중구 및 대식세포와 같은 염증 세포를 반응영역으로 비특이적으로 보충시켜 초기 반응을 주로 증폭시킨다. 상기 염증부위에서, 세포가 활성화되기 시작하고, 증식하면 더 많은 사이토킨을 분비하는 캐스케이드 효과(cascade effect)가 일어난다.

류마티스성 관절염은 주로 관절부위와 연류된 만성 재발성 전신성 염증 질환이다. 최근 연구에서는 바이러스, 아마 엡스타인-바르 바이러스(Epstein-Barr virus)가 상기 자기면역 질환에 관련될 수 있다고 제시하였다. 엡스타인-바르 바이러스는 B세포의 폴리클로날 자극자(polyclonal stimulator)이며, B세포에 의한 류마티스 인자의 생산을 자극할 수 있다. 류마티스성 관절염에서, 알파2-글로불린, 폴리클로날 하이퍼감마글로불리네미아(hypergammaglobulinemia), 및 하이포알부미네미아(hypoalbuminemia)가 증가된다. 류마티스성 맥관염에서는 면역글로불린의 한냉 침전물(cryoprecipitates)이 종종 나타난다.

류마티스성 인자가 류마티스성 관절염 뿐만 아니라 기타 자기면역 질환에 존재할 수 있다. 전신성 홍반선 낭창, 쇼그렌 증후군(Sjogren's syndrome), 공피증 및 다근염 환자에서도 류마티스성 인자가 존재하는 것을 밝혀졌다.

관절의 활액상 또는 중에 면역 복합체가 침착되면 류마티스성 관절염에서 활액막의 염증 반응이 시작되는 것으로 보인다. 침착된 복합체가 보체를 고정하고 활성화시킨 다음, 염증 세포의 인력을 자극한다. 더 깊은 층의 활액이 T 및 B임파구 둘다, 혈장 세포, 대식 세포 및 때때로 호중구에 의해 침윤된다. 침윤세포는 염증 반응의 몇몇 주효체 분자를 동화시키는데, 이는 관절액을 염증성 삼출액으로 변형시킨다. 임파구-방출 인자와 함께 면역 복합체는 관절간극, 활액 및 연골에서 섬유를 생성시키고 침착시키는 응괴경로(clotting pathway)를 활성화시킨다.

류마티스성 관절염과 같은 자기면역 질환의 증상을 경감시키기 위하여 다양한 치료방법이 사용되어 왔다. 이들중 많은 것들이 완화성 소염적 접근 방법에 관한 것이다. 살리실레이트, 구체적으로 아스피린을 일일 약 3.6 내지 5.4g의 투여량으로 통상 사용하고 있다. 고용량 아스피린 치료법과 관련하여 수 많은 부작용, 예를 들면 위장장애, 이명, 및 혈소판 접착성의 감소등이 나타난다. 비스테로이드성 소염제(예 : 페닐부타존, 인도메타신, 페노프로펜, 이부프로펜, 나프록센, 설린닥, 톨메닌, 및 메페남산), 말라리아 치료제(예 : 클로로퀸 및 하이드록시클로로퀸)를 또한 사용할 수 있지만 장기 사용시 심각한 부작용이 있다. 비경구적 골드 염, 페니실라민 킬 코르티코스테로으도아 같은 기타 치료제도 심각한 부작용이 있다.

최근, 상기 기술분야에 소염제로서 특정 데옥시리보시드의 용도가 기술되어 있다. 예를 들면, 라이드아웃 등(Rideout et al.)에게 허용된 미합중국 특허 제4,481,197호는 염증치료에 있어서, 비치환된 3-데아자-2'-데옥시아데노신의 용도에 관한 것이다. 라이드아웃등에게 허여된 미합중국 특허 제4,381,344호는 세균 포스포릴라제를 사용하여 데옥시리보시드를 합성하는 방법에 관한 것이다.

데옥시리보시드 유도체인 2-클로로-2'-데옥시아데노신(CdA)은 만성 임파구 백혈병 및 몇몇 세포 악성종양의 치료에 효과적인 약제인 것으로 밝혀졌다[참조 : Carson et al. (1984) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 81 : 2237-2236 ; Prio et al. (1988), Blood 72 : 1069-1073]. 만성 임파구 백혈병은 Leu-1표면 항원을 포함하는 B임파구의 악성종양이다.

Leu-1 B 세포는 B임파구의 정상적 풀(pool) 중 소량, 통상 20% 미만이다. Leu-1 B 세포는 전형적으로 단핵 세포(Mac-1 항원) 및 T-임파구(Leu-1 항원)상에서 발견되는 표면 마커(surface makers)를 발현시킨다. 안성 임파구 백혈병 환자중 대략 10%가 수반되는 자기면역성을 나타내고, 최근에는, Leu-1 B 세포가 자기면역 질환의 발병에 관련된 것으로 밝혀져 있다.

인간에 대한 제1기 연구에서 2-클로로-2'-데옥시아데노신의 투여량을 증가시켜 주입시키면[일일 체중 Kg당 0.1 내지 0.5mg(mg/kg/일)]약제의 혈장농도가 증가(10 내지 50nM)하는 것으로 밝혀졌다. 상기와 같은 주입은 상기 약제가 내성이 좋고 오심, 구토 또는 발열을 유발시키지 않음을 나타낸다. 용량 -제한 독성은 통상 약 0.2mg/kg/일 이상의 투여량 또는 약 20nM 이상의 혈장농도에서 일어나는 골수억제이다.

기타 연구[참조 : Montgomery et al. (1959) J. Am. Chem. Soc., 82 : 463-468]에서는 2-플루오로아데노신이 상당히 높은 정도의 세포독성을 나타낸다고 밝혔다. 장기 연구자들은 선암 755(Ad 755)를 이식한 C57흑색 마우스가 체중 Kg당 단지 약 1mg만을 허용할 수 있는 것으로 보고하였다. 2-플루오로아데노신은 상기 농도에서 Ad755뿐만 아니라 백혈병 L1210 및 에를리히 복수중 종양(Erlich ascites tumor)에 대해 불 활성인 것으로 밝혀졌다.

이후 기술하는 화학치료제는 유지중인 임파구 및 단핵세포에 대해 실질적인 활성을 나타낸다. 이들 약제는 또한 자기면역 질환의 치료에 유용하다.

[발명의 요약]

본 발명은, 미생물이 감염된 단핵세포에 존재하는 감염성 질환 치료용 화합물, 및 조성물 및 치료방법 뿐만 아니라, 염증 치료방법, 특히 단핵세포-매개 자기면역 질환의 결과로서의 염증 치료방법에 관한 것이다. 본 발명에서 사용하는 화합물은 치환체가 1, 2 및/또는 2'-위치에 존재하는 치환된 2'-데옥시-아데노신이다.

본 발명의 화합물은 일반식(I)에 상응한다.

상기식에서, Z는 0^-이거나 존재하지 않고, Y는 수소이거나, 생리학적 pH가에서 네트(net)이온 전하가 없고 가용성 아데닌 유도체를 제공하며 아데닌 잔기에 존재하여 아데노신 탈아미노 효소에 의한 아데닌 유도체의 탈아미노작용을 억제하는 1 내지 약 20개의 원자를 함유하는 치환체이며, X는 수소 또는 불소이고, 단, i) Z가 존재하지 않을 경우 X는 불소이며,

ii) Y가 존재하고 X가 불소인 경우에만 수소이다.

바람직한 Y 치환체는 할로겐, 저급 알킬, 하이드록실, 저급 알킬티오 및 저급 알카노일아미도 라디칼이다.

본 발명이 조성물은 약리학적으로 허용되는 담체중에 용해되거나 분산되어 있는 충분한 양의 일반식(I)화합물을 하나이상 함유하여 치료 유효량을 제공한다. 치료 양상에 따라서, 세포를 하기에 기술하는 바와 같이 약 0.5nM 내지 약 50μM, 더욱 바람직하게는 약 10nM 내지 약 10μM의 농도인 일반식(I)의 화합물과 접촉시킨다. 단핵세포-매개질환의 치료방법을 고려하면, 상기 방법에서는, 단핵세포를 활성 성분 또는 약제로서 일반식(Ⅱ)의 구조와 상응하는 구조를 갖는 치환된 아데닌 유도체가 용해되거나 분산되어 있는 약제학적으로 허용되는 담체를 함유하는 조성물과 단독으로 또는 항미생물제와 함께 접촉시킨다. 치환된 아데닌 유도체 및 존재할 경우, 항미생물제는 각각 접촉 기간에 걸쳐서 치료 유효 용량을 제공하기에 충분한 양으로 존재한다. 인간과 같은 포유동물에게 조성물을 투여하여 단핵세포를 생체내에서 접촉시킨다.

조성물을 단핵세포 제제와 혼합하여 시험관내에서 접촉시킨다.

일반식(Ⅱ)의 아데닌 유도체는 다음과 같다.

상기식에서, Z는 0^-이거나 존재하지 않고, Y는 수소이거나, 생리학적 pH가에서 네트(net)이온 전하가 없고 가용성 아데닌 유도체를 제공하며 아데닌 잔기에 존재하여 아데노신 탈아미노 효소에 의한 아데닌 유도체의 탈아미노작용을 억제하는 1 내지 약 20개의 원자를 함유하는 치환체이며,

X는 수소 또는 불소이고,

단, ii) Y는 Z가 존재할 경우에만 수소이다.

특히 바람직한 일반식(Ⅱ)의 화합물은, Z그룹이 분재하며, 2-위치에 할로그룹을 함유하는 화합물이다.

가장 바람직하게는 2-클로로-2'-데옥시아데노신 및 2-클로로-2'-데옥시-2'-아라플루오로아데노신이다.

본 발명의 치료방법은 단핵세포에 대해 사용하는 화합물의 특이적 세포독성의 결과로 혈중 감염된 단핵세포의 농도를 감소시킨다. 또한, 상기 일반식(Ⅱ)의 화합물과 함께 항미생물제를 사용할 경우, 항미생물제는 그 자체가 원qk인성인 미생물에 대개 직접 작용한다.

하나의 양태로, 미생물이 단핵세포에 존재하는 감염성 질환의 치료방법이 고려된다. 통상, 단핵세포는 만성적으로 감염된다. 상기와 같은 미생물 감염성 질환을 앓고 있는 포유류에게 상술한 조성물을 생체내 투여한다.

본 발명에서는 바이러스성 감염 질환에 대한 특정 치료 방법이 고려되는데, 이는 바이러스성 감염증에 걸린 포유류에게 치료 유효량의 일반식(Ⅱ)의 화합물을 단독으로 또는 다른 항바이러스 제제와 함께, 약리학적으로 허용되는 담체와 함께 또는 따로 투여하여 치료한다. 치료하기에 바람직한 질환은 세포가 붕괴되어 방출된 바이러스가 순환하기 전에 감염성 바이러스가 단핵세포에 존재하는 질환이다.

본 발명은 또한 염증, 특히 자기면역질환중 단핵세포가 억제되거나 사멸되어 일어나는 염증의 치료방법에 관한 것이다. 여기에서도, 상술한 바와 같은 일반식(Ⅱ)의 화합물을 함유하는 조성물을 사용한다.

상기 양태에서는, 염증에 걸린 온혈동물에게 치료 유효량을 제공하기에 충분한 양으로 본 발명의 일반식(Ⅱ)화합물을 함유하는 상술한 조성물의 양을 투여한다. 바람직한, 상기 양이 약 0.5nM 내지 약 50nM, 더욱 바람직하게는 약 1nM 내지 약 10nM의 동물의 혈장 농도를 제공하기에 충분하다. 상기 방법은 인간에 있어서 류마티스성 관절염을 치료하는데 특히 유용하다.

바람직하게, 본 발명에서 사용되는 약제는 2-할로-2'-데옥시아데노신(2-할로-2'-데옥시-9, 1'-베타-리보푸라노실아데닌) 또는 2-할로-2'-데옥시-2'-아라플루오로아데노신이며, 가장 바람직하게는 할로 그룹이 클로로이다.

본 발명에서 고려되는 또다른 양태는 질환 치료에 방법에 있어서 유효량의 본 발명의 활성 성분(약제)을 경구적으로 투여하는 것이다. 여기서는, X가 플루오로인 일반식(Ⅱ)의 화합물을 사용한다.

상술한 각 방법에서, 치환된 2'-데옥시아데노신 유도체를 치료 유효량으로 투여한다. 일반식(Ⅱ) 화합물의 효과는 시간 및 투여량 의존성이다. 따라서, 치료할 환자에에 투여하는 특정 투여량 및 인간과 같은 치료할 숙주 포유류의 증상에 대해 투여량 및 투여 기간을 조절할 수 있다. 따라서, 염증 질환을 치료할 경우, 손상된 단핵세포 기능을 회복시키기에 충분할 수 있고, 그러한 손상을 제공하기에 충분한 양은 치료 유효량의 척도이다. 치료할 질환 상태 또는 증상이 더욱 심각하거나 생명을 위협하는 경우, 치료는 더욱 적극적이며, 치료 유효량은 생체내 투여할 경우 존재하는 단핵 세포의 50% 이상을 사멸시키기에 충분한 양이지만 통상의 방법으로 측정하는 바와 같이 골수 기능을 실제적으로 손상시키는 양 미만이다. 일반식(Ⅱ) 화합물의 단색 세포 사멸양은 치료 유효 투여량의 또 다른 척도이며 단핵세포 사멸은 초기 투여후 7일후에 측정한다.

본 발명은 몇몇 장점을 제공한다.

하나의 장점은 본 발명의 방법중 하나를 사용하여 감염된 동물의 체내로부터 단핵세포-근원 병원균을 제거할 수 있다는 것이다.

본 발명의 다른 장점은 본 발명 방법중 하나를 사용하여 류마티스성 관절염과 같은 염증성 질환에 의해 유발된 염증을 거의 감소시킬 수 있다는 것이다.

본 발명이 다른 장점은 치료 방법을 경구투여에 의해 실시할 수 있다는 것이다.

본 발명의 또 다른 장점은 다음 기술로부터 당해분야의 숙련가에게 명백할 것이다.

본 발명은 단핵세포-매개 질환 치료용 화합물, 상기 화합물을 함유하는 조성물 및 본 발명의 조성물, 또는 기타 조성물을 사용하는 치료방법에 관한 것이다. 본 발명의 방법을 사용하는 이후에 기술되는 단색 세포감소증 및 단색 세포의 기능 억제는 전혀 기대치 못했던 것임을 이해해야 한다.

그러한 결과는, 모상 세포 백혈병 및 본 발명 방법과 유사한 방법이 유용한 질환을 갖는 환자를 치료한 최근의 우르바등[참조 : Urba et al. (1989) Blood, 73 : 38-46] 및 바쿨 등[참조 : Bakul et al. (1989) Cancer, 63 : 14-22]의 연구의 측면에서 특히 기대치 못했던 것이다. 상기 치료방법은 데옥시코포르마이신을 인터페론알파-2a과 함께, 또는 데옥시코포르마이신만을 각각 사용한다.

데옥시코포르마이신은 아데노신 탈아미노효소의 비가역적 억제제이며, 이를 사용하면 세포중에 아데노신 및 데옥시아데노신이 축적되는데, 본 발명에서 유용한 아데닌 유도체와 동일하게 많은 양이 세포중에 축적된다. 치료에 의해 관찰되는 임파구감소증 및 DNA 스트랜드 파열은 데옥시아데노신뉴클레오티의 축적에 의해 매개되는 것으로 믿어진다.

우르바 등은 CD₄및 CD₈마커를 함유하는 특정 임파구가 치료도중 감소한다고 보고하였다. 바쿨 등은 이의 환자로부터 세포의 절대수를 연구하여, 치료중 수가 일반적으로 감소한다고 보고하였다. 그러나, 두 그룹 모두 치료도중 단핵세포가 증가한다고 보고하였다.

따라서, 데옥시코포르마이신이 비가역적으로 아데노신 탈아미노효소를 억제하고 아데노신과 데옥시아데노신을 축적시키는 바와 같이, 본 발명의 방법을 사용하여 발생하는 결과와 유사한 결과를 수득하지만, 데옥시코포르마이신을 투여하면 치료도중 단핵세포 농도가 증가하는 반면, 본 발명의 방법을 사용하는 치료에서는 이후에 기술하는 바와 같이 적어도 단핵세포의 기능을 손상시키거나 단핵세포감소증(단핵세포 사멸)을 일으킨다. 유사한 초기 결과, 즉 본 명세서에 기술한 바와 같은 아데노신 및 데옥시아데노신 또는 이들 유도체의 축적으로부터 기인하는 단핵세포-특이활성에 이런 차이점은 정말 깜짝 놀랄만하며 기대치 못했던 것이다.

[A. 화합물]

본 발명에서 고려되는 화합물은 일반식(I)의 치환된-2'-데옥시아라비노푸라노실아데닌(치환된 아데닌)유도체이다.

상기식에서, Z는 0^-이거나 존재하지 않고, Y는 수소이거나, 생리학적 pH가에서 네트(net)이온 전하가 없고 가용성 아데닌 유도체를 제공하며 아데닌 잔기에 존재하여 아데노신 탈아미노 효소에 의한 아데닌 유도체의 탈아미노작용을 억제하는 1 내지 약 20개의 원자를 함유하는 라디칼이며, X는 수소 또는 불소이고;

단, i) Z가 존재하지 않을 경우 X는 불소이며,

ii) Y가 존재하고 X가 불소인 경우에만 수소이다.

바람직하게는, Y는 염소이다. 기타 Y치환체는 저급 알킬, 저급 알카노일아미도, 저급 알킬티오 및 하이드록시 라디칼으로 이루어진 그룹중에서 선택된다. 특히 바람직한 양태에서, Y가 염소인 경우, X는 불소이다.

일반식(I)의 화합물중에서, X가 플루오로인 것이 특히 경구 투여용으로 바람직하다.

일반식(I)의 화합물의 예는 하기의 아데닌의 아라비노푸라노실 유도체이다.

2-클로로-9,1'-베타-2'-데옥시-2'-플루오로-D-아라비노푸라노실아데닌;

2-브로모-9,1'-베타-2'-데옥시-2'-플루오로-D-아라비노푸라노실아데닌;

2-메틸-9,1'-베타-2'-데옥시-2'-플루오로-D-아라비노푸라노실아데닌;

2-플루오로-9,1'-베타-2'-데옥시-2'-플루오로-D-아라비노푸라노실아데닌;

2-하이드록시-9,1'-베타-2'-데옥시-2'-플루오로-D-아라비노푸라노실아데닌;

2-(N-아세트아미도)-9,1'-베타-2'-데옥시-2'-플루오로-D-아라비노푸라노실아데닌;

2-메틸티오-9,1'-베타-2'-데옥시-2'-플루오로-D-아라비노푸라노실아데닌;

2-클로로-9,1'-베타-2'-데옥시-2'-플루오로-D-아라비노푸라노실아데닌-1-N-옥사이드,

2-플루오로-9,1'-베타-2'-데옥시-2'-플루오로-D-아라비노푸라노실아데닌-1-N-옥사이드,

2-브로모-9,1'-베타-2'-데옥시-2'-플루오로-D-아라비노푸라노실아데닌-1-N-옥사이드,

2-메틸-9,1'-베타-2'-데옥시-2'-플루오로-D-아라비노푸라노실아데닌-1-N-옥사이드,

2-(N-아세트아미도)-9,1'-베타-2'-데옥시-2'-플루오로-D-아라비노푸라노실아데닌-1-N-옥사이드,

2-하이드록시-9,1'-베타-2'-데옥시-2'-플루오로-D-아라비노푸라노실아데닌-1-N-옥사이드,

2-메틸티오-9,1'-베타-2'-데옥시-2'-플루오로-D-아라비노푸라노실아데닌-1-N-옥사이드,

2-플루오로-9,1'-베타-D-2'-데옥시아데노신-1-옥사이드; 및

2-클로로-9,1'-베타-D-2'-데옥시아데노신-1-아라비노푸라노실아데닌-1-N-옥사이드,

다소 더 광범위한 아데닌 유도체 화합물이 본 발명의 방법에서 유용하다. 더 광범위한 그룹의 화합물은 일반식(Ⅱ)로 나타내어지는 구조를 지닌다:

상기식에서, Z는 0^-이거나 존재하지 않고, Y는 수소이거나, 생리학적 pH가에서 네트이온 전하가 없고 가용성 아데닌 유도체를 제공하며 아데닌 잔기에 존재하여 아데노신 탈아미노 효소에 의한 아데닌 유도체의 탈아미노 작용을 억제하는 1 내지 20개의 원자를 함유하는 치환체이며,

X는 수소 또는 불소이고,

단, Y는 Z가 존재할 경우에만 수소이다.

일반식(I)로 나타내어지는 화합물은 부가 화합물로서 일반식(Ⅱ)의 화합물중에 포함된다. 일반식(Ⅱ)에 포함되지만 일반식(I)에는 포함되진 않는 바람직한 부가 화합물은 하기와 같다:

2-클로로-9,1'-베타-D-2'-데옥시리보실아데닌(2-클로로데옥시아데노신);

2-브로모-9,1'-베타-D-2'-데옥시리보실아데닌;

2-메틸-9,1'-베타-D-2'-데옥시리보실아데닌;

2-플루오로-9,1'-베타-D-2'-데옥시리보실아데닌;

2-아세토아미도-9,1'-베타-D-2'-데옥시리보실아데닌; 및

2-메틸티오-9,1'-베타-D-2'-데옥시리보실아데닌.

두 일반식(I) 및 일반식(Ⅱ)의 화합물 X, Y 및 Z 치환체가 동일하게 될 수 있고, 일반식(I) 화합물이 일반식(Ⅱ)에 포함되는 한, 이들 일반식의 구성 부분이 상이함에도 불구하고, 하기의 논의가 두 일반식의 화합물에 적용되는 것으로 고려된다.

X가 수소인 경우 당환은 2'-데옥시리보실 또는 2'-데옥시아라비노푸라노실 라디칼임이 주목된다. 두 개의 명명법이 여기에 이용된다. 일반식(I) 또는 일반식(Ⅱ)에 의해 포함되는 화합물군이 논의되는 경우, 모든 화합물은 본원중 아라비노스의 유도체로서 고려된다. 그러나, X＝H인 아군의 특정 화합물이 논의되는 경우, 데옥시아데노신과 같은, 더욱 친밀한 데옥시리보스 명명법이 사용된다. 이들 화합물은 또한 여기서 아데닌 유도체로서 더욱 간단하게 언급된다.

상기 일반식 및 본 발명의 기타 모든 일반식에서, 특정한 결합에 관한 구조(Conformation)를 나타낼 필요가 없는 푸린 및 푸라노시딜 환에서 수소원자는 나타내지 않는다. 따라서, 7-위치 아데닌 수조는 나타내지 않는다.

일반식 화합물의 D이성질체는 고려할만한 이성질체임이 또한 이해된다. 또한 본 발명에서 사용된 표현 할로는 불소, 염소 및 브롬 유도체를 포함하고, 불안정하고 분해되는 요오드 유도체 및 방사성인 아스타틴은 포함되지 않음이 주목된다. 특정의 할로겔 유도체가 고려되는 경우, 이들 화합물은 특별하게 명명된다.

본 발명에서 사용된 것으로서, 네트이온 전하가 없는 치환체는 치환체 라디칼이 하전된 경우, 내부 쯔비터 이온성 전하쌍이 존재함으로 인해 생리학적 pH값에서 분자에 대한 네트 이온 전하가 존재하지 않는, 하전 및 하전되지 않은 라디칼을 모두 포함한다. N-옥사이드 화합물은 이러한 치환체의 예이다.

본 발명에서 사용된 것으로서 가요성 아데닌 유도체는 하기에서 논의되는 치료학적으로 유효한 용량에서 혈액과 같은 체액중에서 용해될 수 있고 가용성인 상태로 남아있는 아데닌 유도체이다.

본 발명에서 사용된 것으로서 아데닌 잔기에서 존재함으로써 아데노신 탈아미노 효소에 의해 아데닌 유도체의 탈아미노화 반응을 억제하는 치환체는 치환된 아데닌 유도체 1mmole 용액 100μl를 송아지 비장 아데노신 탈아미노 효소 25단위(1단위는 분당 아데노신 1μmole의 탈아미노화 반응을 촉매한다)와 함께 실온에서 3시간 동안 배양시킨 경우, Rf 값이 사용된 치환된 아데닌 유도체의 경우와 동일한 반응혼합물의 셀룰로오스-박층 크로마토그래피에서 단일 UV-흡수 스폿을 생성하는 것이다.

아데노신 탈아미노효소에 의한 화합의 물질대사작용을 하기 방법에 의해 조사할 수 있다. 10mM인산나트륨, pH 7.5중에 5-200μM농도의 각각의 뉴클레오시드를 0.01EU/ml 송아지 장 아데노신 탈아미노효소와 함께 18-20℃에서 배양한다. 265nm 및 250nm에서 광학 밀도의 변화를 분광광도계로 검측한다. Km 및 Vmax 값을 아데노신과 이노신간의 △E^M ₂₆₅을 이용하여, 린웨버-부르크(Lineweaver-Burke)방법으로 측정한다.

Vmax/Km비는 또한 효소에 의한 탈아미노화 반응의 상대적 효율의 척도를 제공한다. 2'-데옥시아데노신을 사용하여 수득한 비의 경우보다 작거나 약 1%인 Vmax/Km비를 제공하는 치환체는 또한 아데닌 잔기에서 존재함으로써 아데노신 탈아미노 효소에 의해 아데닌 유도체의 탈아미노화 반응을 억제하는 치환체이다.

본 발명에서 사용된 것으로서, 저급 알킬 라디칼은 C₁-C₆직쇄, 측쇄 및 사이클릭 알킬 그룹, 예를 들면, 메틸, 에틸, n-부틸, t-부틸, n-헥실, l-에틸부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실 등이다. 저급 알카노일아미도라디칼은 C₁-C₆라디칼, 예를 들면, 포름아미도, 아세틸아미도, 프로피온아미도, 헥사모일아미도 등을 포함한다. 저급 알킬티오 라디칼은 티오 라디칼에 연결된 상기에서 논의한 바와 같은 C₁-C₆직쇄, 측쇄 및 사이클릭 알킬 그룹이다.

일반식(I) 또는 일반식(Ⅱ)화합물의 약제학적으로 허용되는 염이 또한 이용된다. 여기서 사용된 것으로서, 용어 약리학적으로 허용되는 염은, 일반적으로 화합물을 적합한 유기 또는 무기산과 반응시켜 제조한 비-독성 산 부가염을 언급한다. 대표적인 염은 염화수소, 브롬화수소, 황산염, 인산염, 시트르산염, 아세트산염, 말레산염 등을 포함한다.

[B. 조성물]

약리학적으로 허용되는 담체 중에서 또는 이와 함께 용해되거나 분산될 수 있는 일반식(I)의 화합물이 본 발명의 조성물을 구성한다. 그러나, 일반식(I)의 화합물이 일반식(Ⅱ)에 포함되고, 일반식(Ⅱ)의 화합물을 함유하는 조성물이 본 발명의 방법에서 유용하기 때문에, 일반식(I)의 화합물을 함유하는 조성물이 하기에서 일반식(Ⅱ)화합물의 조성물 면에서 빈번하게 논의될 것이다.

일반식(Ⅱ)의 화합물 및 약리학적으로 허용되는 염은 단기간 및 장기간 치료에서 두 경우 모두에 유용하다. 예를 들면, 2-치환된-9,1'-베타-2'-데옥시-2'-플루오로-D-아라비노푸라노실아데닌은 온혈동물에 대해 내부적으로, 예를 들면, 비경구, 경구내 또는 좌약으로서 직장내 유효량으로 투여된다.

비록 일반식(Ⅱ)의 화합물 및 약리학적으로 허용되는 이의 염이 순수한 화학제로서 투여될 수 있기는 하지만, 약제학적 조성물로서 투여하는 것이 더 바람직하다. 어떠한 경우든지, 하기에서 논의되는 바와 같이 치료학적으로 유효한 투여량을 제공하기에 충분한 양으로 투여된다.

따라서, 본 발명 약리학적으로 허용되는 담체 또는 희석제중에서 용해되거나 분산될 수 일반식(I) 또는 일반식(Ⅱ)의 화합물(여기서, 바람직하게는 X는 불소이다) 또는 하기에서 활성 성분 또는 제제로서 언급되는, 약리학적으로 허용되는 이의 염을 치료학적으로 유용한 양으로 함유하는 약제학적 조성물을 이용한다.

약제학적 조성물은 활성 화합물 및 이의 담체와의 혼합물을 발생시키는, 약학 기술 분야에서 익히 공지된 특정의 방법에 의해 제조된다. 치료학적인 용도를 위해 본 발명에서 인용된 화합물은 통상의 약제학적 조성물의 형태로 투여될 수 있다. 이러한 조성물은 비경구 또는 경구 투여 또는 좌약으로서 적합하도록 제형화될 수 있다. 이들 조성물에서, 제제는 전형적으로 생리학적으로 허용되는 담체 중에 용해되거나 분산된다.

담체 또는 희석제는 활성화합물을 투여하는데 유용한 물질이며 조성물중의 기타 성분과 혼화성이며 대상환자에 대해 독성이 없는 의미에서 약리학적으로 허용되는이어야 한다. 따라서, 본 발명에서 사용된 것으로서, 용어 생리학적으로 허용되는 및 약리학적으로 허용되는은 상호 교환적으로 사용되며 포유류에 투여된 경우, 위장장애, 현기증과 같은, 알레르기성 또는 유사한 역반응을 일으키지 않는 분자단 또는 조성물을 언급한다. 생리학적으로 허용되는 담체는 투여헤 대해 바람직한 제조방법 및 의도하는 투여경로에 따라 광범위한 형태를 취할 수 있다.

유용한 조성물의 예로서, 일반식(Ⅱ)의 화합물의 화합물이 살균 현탁액 또는 용액, 또는 적합한 방부제를 함유하는 등장 제제와 같은 액체 조성물중에 이용될 수 있다. 주사용 수성 등장액 및 살균 염수 또는 글루코스 용액에 의해 구성되는 주사용 매질이 본 발명의 목적을 위해 특히 매우 적합하다. 이들 화합물이 투여를 위해 혼입될 수 있는 추가의 액체 형은 면실유, 참깨유, 코코넛유, 낙화생유 등과 같은 식용유와의 향미성 에멀전 및 엘릭시드(elixir) 및 유사한 약제학적 비히클을 포함한다.

제제는 또한 리포솜의 형태로 투여될 수도 있다. 당해 기술 분야에서 공지된 바와 같이, 리포솜은 일반적으로 인지질 또는 기타 지질 재료로부터 유도된다. 리포솜은 수성 매질중에 분산된 단일-또는 다중-층 수화 액상 결정으로 형성된다. 특정의 비-독성이며, 생리학적으로 허용되고, 리포솜을 형성할 수 있는 대사성 지질이 사용될 수 있다. 리포솜형의 본 발명의 조성물은 제제이외에 안정화제, 방수제, 부형제 등을 함유할 수 있다. 바람직한 지질은 천연 및 합성의 인지질 및 포스파티딜 콜린(레시틴)이다.

리포솜을 형성시키는 방법이 당해 기술분야에서 공지되어 있다.[참조 : Prescott, Ed., Methods in Cell Biology, Volume XIV, Academic Press, New York, N.Y.(1976), p. 33 et seq.].

일반식(Ⅱ)의 제제는 또한 바람직하게는 화합물의 단위 용량을 함유하는 정제(tablet) 또는 환제(pill)와 같은 조성물로서 사용될 수 있다. 이를 위해, 제제(활성 성분)를 옥수수 전분, 락토스, 슈크로스, 솔비톨, 활석, 스테아르산, 마그네슘 스테아레이트, 인산이칼슘, 검, 또는 비독성이며, 생리학적으로 허용되는 담체와 같은 유사한 물질의 통상의 정제화 성분과 혼합한다. 정제 또는 환제는 연장 또는 서방성을 제공하는 단위 투여형을 제공하기 위해 층으로 제형되거나 기타 방식으로 혼합될 수 있다.

여기서 기술되는 약제학적 제형은 상기의 담체 성분 이외에, 경우에 따라, 희석제, 완충제, 향미제, 결합제, 계면활성제, 농후화제, 윤활제, 방부제(산화방지제 포함)등과 제형을 대상 환자의 혈액에 대해 등장성이 되도록 하기 위해 포함되는 물질을 함유할 수있다.

정제 또는 환제는 또는 위장내에서 분해되는 것을 방지하고 활성 성분이 완전하게 십이지장내로 통과하거나 방출이 지연되도록 하기 위해 외피형으로 장내층에 제공될 수 있다. 이러한 장내층 또는 피복물을 위해, 중합체성산 또는 이러한 산과 셀락(Shellac), 셀락 및 세틸알콜, 셀룰로오스 아세테이트 프탈레이트 등과 같은 물질의 혼합물을 포함한 다양한 물질이 사용될 수 있다. 특히 적합한 장내 피복물은 피복물의 장내 특성에 기여하는 공지의 물질과 함께 스티렌-말레산 공중합체를 포함한다. 장용성 피복 정제의 제조방법의 본원중 참조로 인용된, 미합중국 특허 제4,079,125호에 기술되어 있다.

여기서 사용된 것으로서, 용어 단위용량은, 각각의 단위가 약제학적으로 허용되는 희석제와 결부되어 목적하는 치료학적 효과를 생성하도록 계산된 예정량의 제제를 함유하는 것으로서, 온혈동물에 투여하기 위해 단일 투여량으로서 적합한 물리적으로 분리된 단위를 언급한다. 본 발명에 따른 적합한 단위 투여형의 예는 정제, 캡슐제, 환제, 분말 패캣제(packets), 입제, 웨이퍼제(wafers), 카쉐(Cachets), 티스푼제(teaspoonfuls), 점적제(dropperfuls), 앰플제(ampules), 물약제(vials) 및 상기 특정형의 분리된 분복제 등이다.

화합물의 경구 투여는 특히 흥미있는 투여 방식이다. 그러나, 생활성인 뉴클레오시드 화합물의 경구 투여에 통상적으로 관련된 한가지 결점은, 위의 산성조건에서 이들의 잠재적인 분해이다. 즉, 글리코시드 결합은 산성 조건하에서 가수분해하는 경향이 있다.

그러나, 경구 투여가 바람직한 경우, 일반식(Ⅱ)화합물에서 아데닌 환의 2-위치 치환체를 2'-플루오로-치환된 아라비노푸라노시딜 환과 함께 이용할 수 있다.

아데닌의 2'-플루오로-2',3'-디데옥시리보스 및 2'-플루오로-2',3'-디데옥시아라비노스 유도체의 제조방법이 문헌[Marquez 등, (1987) Biochem. Pharm., 36 : 2719-2722]에 기록되어 있다. 상기 문헌의 발견은 두 유도체가 37℃하에 pH값 1에서 안정한 반면에, 디데옥시아데노신은 이들 조건하에서 35초의 반감기를 지님을 언급하고 있다.

아데닌 유도체가 아데노신 탈아미노효소의 기질이 되거나 될 수 없는 능력은 적어도 여기서 두 개의 환에서 치환체가 관련되는 한, 연결된 당환 부분의 치환체의 함수라기 보다는 분자의 아데닌 부분의 2-치환체 또는 이의 부재의 함수이다.

[C. 방법]

상기에서 주지된 바와 같이, 단핵세포-매개 질환의 치료 방법이 여기서 고려된다. 이 방법에서 광범위하게는, 단핵세포를 활성 성분으로서 상기 논의된 일반식(Ⅱ)에 상응하는 구조를 지닌 치환된 아데닌 유도체(치환된 2'-데옥시-아데노신)가 약리학적으로 허용되는 중에 담체 중에 용해되거나 분산된 조성물과 접촉시킨다. 일반식(Ⅱ)의 제제는 제2의 활성성분(제제)으로서 항미생물제와 함께, 또는 단독으로 존재할 수 있다. 치환된 아데닌 유도체, 및 존재하는 경우 항미생물제는 접촉하는 동안 치료학적으로 유효한 투여량을 제공하기에 충분한 양으로된 조성물로서 각각 존재한다.

단핵세포와 조성물 제제와의 접촉이 특히 고려된다. 그러나, 하기에서 설명되어 익히 공지된 체외 방법에 의해 수득될 수 있는 시험관내 접촉이 또한 고려된다.

여기서 사용된 용어 단핵세포-매개는 단핵세포 또는 대식세포와 같은 단핵 세포 계통의 세포군이 치료되어야 하는, 질환으로서 집합적으로 언급되는, 질환 또는 증상에 관련됨을 의미한다. 치료되어야 하는 질환에서 단핵세포 관련 정도는 그 질환의 함수이며 질환의 상이한 유형에 따라 차이가 있을 수 있다. 예를 들면, 미생물성(세균, 기생충, 바이러스등) 질환의 경우에서, 단핵세포는 미생물을 잠복시키며 이들을 통상의 약제를 사용한 치료로부터 보호할 수 있다. 관절염과 같은 염증성 질환의 경우에, 단핵세포 및/또는 대식세포가 염증부위에 축적되고 식균작용, 가수분해 효소 및 IL-6와 같은 사이토킨의 방출, IL-1과 같은 열-유도 단백질의 방출 및 염증 부위의 공동(wau-off)과 같은 하나 이상의 메카니즘을 통해 질환에 공헌한다.

만성적으로 감염된 단핵세포에 바이러스, 세균, 기생충등과 같은 미생물이 존재하는 감염성 질환을 치료하는 방법이 본 발명의 특정 양태로서 고려된다. 바이러스 감염, 및 특히 T-임파추향성 바이러스 감염 및 감염성 바이러스가 감염된 포유류의 단핵세포에 위치한 질환의 치료는 본 발명의 특별한 국면이다. 이러한 감염된 포유류는 바람직하게는 인간 환자이다.

따라서, 일반식(Ⅱ)화합물을 함유하는 조성물은 단독으로 항미생물제와의 배합물로서, 포유류에 각 약제의 치료학적으로 유용한 용량을 제공하기에 충분한 양으로 이러한 세균성 질환에 감염된 포유류에 투여된다. 항미생물제는 일반식(Ⅱ)화합물을 함유하는 조성물과 함께 또는 별도로 포유류에 투여된다. 조성물은 구성성분이 통상의 신체에 의해 제거될때까지 포유동물내에서 유지된다.

조성물중에서 존재하며 상기에서 기술한 바와 같은 방법으로 사용되는 일반식(Ⅱ)화합물의 양은 의료기술 분야에서 익히 공지된 바와 같이, 몇가지 변수의 함수이다. 이들 변수는 투여가 생체내인지 또는 시험관내인지의 여부, 시험관내인 경우에는, 존재하는 치료되어야 하는 세포군의 수, 치료되는 동물, 동물 또는 세포군에서 치료되어야 하는 질환, 및 또한 투여 방법을 포함한다. 예시적인 농도가 하기에서 생체내 및 시험관내 사용 모두에 대해 설명된다.

상기 변수와 상관없이 상기에서 논의된 것 및 하기에서 즉시 논의되는 바 미생물이 관련되는 것으로 공지된 질환(비-염증성 질환 또는 자동면역-관련 질환 이외의 질환)에서 치환된 2'-데옥시아데닌 유도체는 치료기간 동안 존재하는 단핵 세포의 약 50% 이상을 사멸시키기에 충분한 양으로 투여된다. 바람직하게는, 최초에 존재하는 단핵세포의 약 90 내지 100%가 사멸된다.

투여가 생체내인 경우, 투여되는 양은 통상의 방법에 의해 측정되는 바와 같이 실질적으로 골수 작용을 손상시키는 양 미만이다. 투여가 인간과 같은 동물에 대한 체외투여와 같이 시험관내인 경우(여기서, 2'-데옥시아데닌 유도체는 실질적으로 치료되는 동물의 체내에 들어가지 않는다). 제한 농도는 존재할 수 있는 기타 세포군에 대해 억제적으로 세포 독성이 아닌 정도이다.

약제를 투여하는 동안 최초에 존재하는 단핵세포의 약 50% 이상을 사멸시키기에 충분한 반면에 골수작용을 실질적으로 손상시키지 않는 양이 치료학적 용량을 제한하는 한가지 방법이다.

조성물중에 존재하는 일반식(Ⅱ)의 2'-데옥시아데닌 유도체 또는 약리학적으로 허용되는 이의 염에 대한 상기 양은 또한 생체내에 제공되는 경우, 치료할 숙주 포유류의 일일 체중 kg당 약 0.04 내지 약 0.20mg, 더욱 바람직하게는 약 0.05 내지 약 0.15mg/kg/일, 및 가장 바람직하게는 약 0.1mg/kg일을 제공하기에 충분한 양이다. 상기 양은 일반식(Ⅱ)의 화합물이 주입으로 투여되는 경우에 특히 유용한 치료학적으로 유용한 용량을 제한하는 또 다른 방법이다.

치료하는 동안 일반식(Ⅱ)의 화합물 또는 약리학적으로 허용되는 이의 염의 혈장 몰 농도는 바람직하게는 약 1 나노몰(nM) 내지 약 100nM, 특히는 약 5nM 내지 약 50nM, 및 더욱 바람직하게는 약 10nM 내지 약 20nM범위이다. 따라서, 치료되는 (투여대상)동물의 혈장에서 2'-데옥시아데닌 유도체의 몰농도는 또한 조성물중의 양이 계산되는 치료학적으로 유용한 용량의 또 따른 척도를 제공한다.

상기의 치료학적으로 유용한 투여량은 단일 투여의 결과일 필요는 없으며, 통상적으로 다수의 단위 용량의 투여결과이다. 이들 단위 용량은 또한 일일 분량 또는 일주일 분량을 포함할 수 있으며, 따라서, 치료학적으로 유효 용량은 치료(접촉)기간에 따라 측정된다.

경구투여는 이미 주지된 바와 같이, 2'-플루오로아데닌 유도체에 대한 바람직한 투여 방식이다. 약제의 목적하는 혈장농도를 수득하기 위해, 투여량 범위는 특정한 투여방식, 특정한 치료대상, 사용되는 특정한 화합물 등을 고려하여 사용될 수 있다.

예를 들면, 경구 투여의 경우, 일일 투여량은 체중 kg당 약 0.04 내지 약 0.20mg, 더욱 바람직하게는 약 0.05 내지 0.15mg/kg체중, 및 가장 바람직하게는 약 0.1mg/kg 체중일 수 있다. 일반적으로, 활성 치환된 아데닌 유도체의 투여량은 목적하는 혈장농도를 수득하고, 바람직하게는 유지하기 위해 비교적 넓은 범위에 걸쳐 변화할 수 있다.

아데닌 유도체의 단위 투여형은 이를 약 0.1mg 내지 약 15mg 함유할 수 있다. 바람직한 단위 투여형은 제제 약 0.1 내지 약 1mg을 함유하며 일일 2 내지 5회로 투여할 수 있다. 그러나, 상기 목적하는 혈장 농도를 유지하도록 정해진 속도에서 연속적인 주입이 또한 고려됨이 주지되어야 한다.

특정한 치료 지속 기간은 또한 질환의 중증도, 치료가 급성 치료를 위한 것인지 또는 예방을 위한 것인지의 여부 등을 고려하여 다양화할 수 있다. 전형적인 투여는 약 5일 내지 약 14일 동안 지속되며, 통상적으로는 7일이다. 투여(주기)는 또한 일개월 간격으로 반복될 수 있거나, 비경구 단위 투여량은 일주일 간격으로 투여될 수 있다. 경구 단위 투여량은 정량된 치료학적으로 유효한 투여량을 제공하기 위해 1일 내지 수일의 간격으로 투여될 수 있다. 따라서, 약 5 내지 약 14일 동안 또는 매주 또는 매일 간격으로 상기-논의된 투여량의 생체내 투여는 최초에 존재하는 단핵세포의 약 50% 이상을 사멸하기에 충분한 양을 제공한다.

이러한 치료방법은 이용된 일반식(Ⅱ) 화합물의 단색 세포에 대한 독성에 기인하여 혈액중 단핵세포 수준의 감소를 초래한다. 이 방법은 치료되는 포유동물의 혈류중에서 순환하고 있는 단핵세포의 수를 7일간의 치료기간 동안 치료하기 전에 존재하는 수의 약 90%로 감소시키며 순환하고 있는 단핵세포의 수준을 치료를 중단한지 약 2주후에 치료하기 전 수준으로 회복시키기 위해 사용될 수 있다. 이러한 연구의 예가 하기에서 설명한다.

본 발명의 조합 치료 방법론은 원인성 감염 제제 및 단핵세포군에 대한 치료제에 집중된다. 인체에서 이러한 치료(및 이러한 치료에서 현재 이용되는 괄호안의 치료제)의 제재를 받는 특정한 질환의 예는 하기와 같다.

샤가스병 (니푸르티목스)

레이슈마니아증 (스티보글루코네이트;

암포테리신 B;

펜타미딘 이세티오네이트)

톡소플라스마종 (피리메타민;

설폰아미드)

말라리아 (클로로퀸; 프리마퀸;

피리메타민, 메플로퀸)

뉴모시스티스 (트리메토프림-설포메톡시졸;

펜타미딘

이세티오네이트)

상기-주지된 괄호안의 치료제를 위한 치료학적 양 및 치료섭생은 익히 공지되어 있으며, 문헌[참조 : Physicians Desk Reference, 42ed, Medical Economics Corp., Oradell. N.J.(1988)]과 같은 통상의 출처로부터 쉽게 수득할 수 있다.

예시적인 양태에서, 레이슈마니아병으로 고통받는 환자를 본 발명의 방법으로 치료한다. 일반식(Ⅱ)의 화합물을 함유하는 조성물을 치료학적으로 유용한 용량으로 펜타미딘의 투여와 함께 환자에 투여한다. 특히 바람직한 양태에서, 약리학적으로 허용되는 담체중의 2-클로로-9, 1'-베타-2'-데옥시-2'-플루오로-D-아리비노푸라노실아데닌 0.15mg/kg/일을 함유하는 조성물을 환자에게 경구내로 투여하고 약 7일 동안, 근육내 주사에 의해 펜타미딘 4mg/kg/일을 투여한다.

단핵세포/대식세포가 관련될 것으로 여겨지는 원인이 불확실한 기타 질환은 유육종증, 만성 육아종성감염, 베그너(Wegner)육아종증, 파겟(Paget)질환, 죽상(동맥)경화증, 염증성 장질환, 및 육아성포도막염이다. 이들 질환은 현재 원칙적으로 프레드니손, 또는 에티드로네이트(파겟 질환) 또는 설파살라진(육아성포도막염)과 같은, 스테로이드를 사용하여 치료하고 있다.

바이러스 감염의 치료에서, 인간 환자 또는 마우스(mouse), 랫트(rat), 침팬지(chimpanzee)등과 같은 하급동물 및 개, 고양이, 소 양, 돼지등과 같은 가축에 대해 일반식(Ⅱ)의 화합물을 단독으로 또는 기타 항바이러스 치료제와의 배합물로서, 적용할 수 있는 하나 또는 두개의 약제의 치료학적으로 유용한 용량을 제공하기에 충분한 양으로 투여한다.

예시적인 치료 방법론에서, AIDS로 고통받는 환자를 아지도티미딘(AZT)디데옥시티딘(ddC), 인터페론, 아사이클로비르등 및, 2-클로로데옥시아데노신(CdA) 또는 2-메틸-9,1'-베타-2'-데옥시-2'-플루오로-D-아라비노-푸라노실아데닌과 같은 치환된-2'-데옥시아라비노푸라노실아데닌 유도체의 배합물을 사용하여 치료한다. AZT 배합 치료법은 최근에 AIDS의 치료에서 이용되고 있으며, 여기서 문헌[참조 : AIDS/HIV Experimental Treatment 약ectory, Vol 2[American Foundation for AIDS Research(1988)]에서 상술된 바와 같이, AZT의 감소된 투여량이 제2의 화학요법제의 감소된 투여량과 함께 투여된다. 예를 들면, 4주동안 AZT의 치료학적으로 유효한 투여량(4시간마다 경구로 약200mg)을, 약 5 내지 14일 동안 및 전형적으로는 약 7일 동안 CdA약 0.04 내지 약 0.20mg/kg 체중/일과 함께 환자에게 투여한다.

CdA(또는 일반식(Ⅱ)의 유사 화합물)의 투여는 단핵세포에 대한 화합물의 향상된 독성의 결과로서, 바이러스가 잠복된 혈액 단핵세포에서 극적인 감소를 일으킨다. AZT(또는 기타 항바이러스제)의 동시투여는 바이러스에 의해 침범당하는 세포에 진입하여 아마도 성장하는 DNA쇄내로 혼입되어 쇄를 종결시키고 이들 세포군내의 바이러스 복제 및 추가의 감염을 연속적으로 억제하여 바이러스를 사멸시킨다(또는 바이러스 복제를 억제한다)

본 발명의 배합 치료 방법론은 따라서 세포군을 침범하는 활성 바이러스 및 단핵세포 숙주세포군에 존재하는 잠복 바이러스 둘 모두에 대해 효과적이다. HIV를 치료하기 위한 추가의 치료제 및 투여에 대한 적합한 투여량을 상기의 문헌[AIDS/HIV Experimental Treatment 약ectory]에서 발견할 수 있다.

용어 염증은 연속적으로 홍반(redness), 열, 종창 및 통증을 수반하는 충혈의 반응 상태 및 이의 혈관으로부터의 삼출을 의미하며, 조직은 물리적 또는 화학적 상해 또는 세균 침범에 반응하게 된다. 이러한 염증 단핵 세포, 및 기타 식세포에 의해 매개된다.

단핵세포-매개 염증과 관련된 임상적 조건 및 소염제가 관련되는 질환은 예를 들면, 류마티스성 관절염 및 굴관절염을 포함한, 관절염, 수술후의 염증, 치염, 및 결막염과 같은 급성 및 만성 안염 질환을 포함한다.

본 발명의 방법에 대한 또다른 국면으로서 특히 자기 면역 질환시 발생하는 염증의 치료방법이 제공된다. 이 방법은 상기에서 기술된 조성물을 일반식(Ⅱ)화합물 또는 약리학적으로 허용되는 이의 염의 치료학적으로 유효한 용량을 제공하기에 충분한 양으로 투여함을 포함한다. 바람직하게는, 투여는 경구 경로로 수행되며 X는 플루로오이다.

비-자기면역-관련 질환에 대해 상기에서 기술된 시간 동안의 투여량이 또한 염증치료를 위해 사용될 수 있다. 그러나, 이러한 치료가 비록 효과적이기는 하지만, 상당히 적극적이며, 치료된 숙주동물을 불필요하게 면역 절충된 상태로 방치할 수 있다.

따라서, 덜 적극적인 치료섭생이 또한 고려된다. 이 경우, 상기-기술된 투여량, 예를 들면, 혈장농도가 다시 이용되지만, 단색 세포 작용을 손상시키도록 보다 단시간의 접촉시간이 이루어지지만, 상기-기술된 치료섭생의 결과에서와 같이 단핵 세포는 실질적으로 사멸되지 않는다. 여기서 단핵세포 작용의 손상은 72시간 동안 일반식(Ⅱ)화합물의 존재하에 배양된 단핵세포에 의해 인터루킨-6(IL-6)의 자발적인 분비에서 약 25% 이상의 감소로서 정의된다. 단핵 세포 손상의 유용한 분석이 하기에서 토의된다.

예시적인 치료 섭생에서, 일반식(Ⅱ)의 화합물은 약 0.04 내지 약 0.20mg/kg/일, 더욱 바람직하게는 약 0.05 내지 0.15mg/kg/일, 및 가장 바람직하게는 약 0.1mg/kg/일로 투여되어 혈장농도 약 1nM 내지 약 100nM, 및 더욱 바람직하게는 약 5nM 내지 약 20nM를 제공한다. 단일 투여는 수개월, 예를 들면, 약 3 내지 9개월 동안 일주일마다 반복한다.

이러한 투여는 진료실에서 인체의 경우 약 2 내지 4시간 지속하는 정맥주사를 사용하여 외래환자에 대해 수행될 수 있다. 그 자체로, 치료는 숙주 포유 동물; 즉, 인간 환자의 경우 통상적으로 입원을 요구하는 수일에 걸친 연속적인 주입보다 훨씬 덜 공격적이다.

면역 반응 억제가 바람직한 조건은 전신성 홍반성 낭창, 용혈성 빈혈, 궤양성대장염, 신증과 같은 자기면역 질환 및 장기 이식을 포함한 조직이식과 같은 외래 세포의 거부 예방을 포함한다.

[D. 화합물 합성]

Z가 부재인 본 발명의 유용한 화합물은 본문중 참조로 인용된, 문헌[참조 : Montgomery등, (1986) J. Med. Chem., 29 : 2389-2392]에 기술된 방법에 의해 또는 U.S.특허 제 4,082,911호, 또는 문헌[참조 : Herdewijn등(1987) J. Med. Chem. 30 : 2131-2137]에 기술된 방법에 의해, 적절하게 치환된 아데닌을 적절하게 치환된 당환과 직접 축합시켜 제조할 수 있다. 적절하게 치환된 아데닌은 하기에 기록된 문헌의 합성 또는 유사한 합성에 의해 제조할 수 있다. 또한, 라이트(Wright)등은 최근에 아세토니트릴 중의 나트륨 수소화물을 사용하여 적합한 2,6-디할로푸린을 3',5'-보호된-α-1-클로로리보스와 직접 반응시킨 다음 60℃에서 메탄올성 암모니아로 처리하여 수득한 3',5'-하이드록실의 보호기를 제거하고 최종적으로 생성된 아데노신의 6-마이코그룹을 형성시킴으로써 2-클로로 및 2-브로모-2'-데옥시아데노신을 제조하였다. 문헌[참조 : 라이트등(1987) J. Org. Chem. 52 : 4617-4618]. 또한 문헌[참조 : 후꾸가와(Fukukawa)등(1983) Chem. Pharm. Bull., 31(5) : 1582-1592]에 2'-데옥시-2'-아르할로-치환된 아데노신 유도체의 합성이 기록되어 있다.

본 발명의 2'-데옥시-2'-플루오로-아라비노푸라노실아데닌 화합물은 하기 실시예에서 기술된 바와 같이 제조된다. 합성은 본원중 참조로 인용된, 문헌[참조 : 마르크쯔(Marquez)등(1987) Biochem. Pharmocol., 36 : 2719-2722]에 기술된 것과 유사하며, 여기서, 6-클로로푸린을 3-0-아세틸-5-0-벤조일-2-데옥시-2-플루오로-D-아라비노푸라노실 브로마이드와 함께 축합시킨다. 작용기화된 할로슈가는 문헌[참조 : 레이히만(Reichman)등(1975) J. Carbohyd. Res., 42 : 233]에 기록된 방법에 따라 제조되며 보호그룹을 제거한 농축된 메탄올성 암모니아를 사용한 가암모니아 분해에 의해 2'-데옥시-2'-플루오로-아라비노푸라노실아데닌 화합물을 수득한다.

즉, Z가 존재하는 화합물의 아데노신-1-N-옥사이드 그룹은, 이들 물질 그 자체가, N-옥사이드 그룹의 존재가 합성하는 동안 수소 결합을 아마도 방해하기 때문에 증가하는 폴리뉴클레오티드 쇄내로 혼입되지 않을 것임으로 인해 특히 흥미롭다. 오히려, N-옥사이드 화합물은 증가하는 쇄로의 이의 혼입 및 쇄의 종결에 앞서 내재하는 환원효소에 의해 환원되는 것으로 간주된다.

그럼에도 불구하고, 네트 이온 전하가 없으나 내부 쯔비터이온성 전하쌍을 지닌, N-옥사이드 화합물은 세포막을 침투할 수 있다. 이들 화합물은 또한 상응하는 산화되지 않은 화합물에 비해 어느 정도 더 수용성이다.

이론에 제한 받음 없이, 그럼에도 불구하고, N-옥사이드 화합물은 세포로 도입되어 문헌[참조 : 린드버그(Lindberg)등 (1967) J. Biol. Chem., 242 : 350-356]에서의 인산화 반응과 같은 기록에 부합하여 인산화된다. 이러한 유도체의 푸울(pool)은 N-옥사이드작용이 감소되고 뉴클레오티드가 혼입되어 적합하게 증가하는 폴리뉴클레오티드쇄를 종결시킬때까지 세포내에서 유지된다.

1-N-옥사이드 화합물은 하기에서 논의되는 바와 같이, 약간 변형된 문헌[참조 : 클레노우(Klenow)등 (1961) Biochem. Biophys. Acta, 52 : 386-389]의 방법을 사용하여 제조한다.

본 발명은 하기 실시예에 의해 추가로 예시되지만, 이로써 본 발명의 범위가 제한되지는 않는다.

[실시예 1]

[생체내 CdA의 세포독성]

순환성 말초혈액 단핵세포, 임파구, 호중구 및 혈소판의 수준에 대한 2-클로로데옥시아데노신(CdA)의 투여효과는 다음과 같이 측정한다.

7명의 피부 T-세포임파종 환자에게 등장성 식염수중의 2-클로로데옥시아데노신을 함유하는 조성물을 일일당 0.1mg/체중kg의 투여량으로 정맥내에 연속 주입 한다. 혈액 샘플을 매일 취하고 투여하고나서 7일간 매일 생존 세포의 수를 센다.

세가지 세포 형태에서 수득한 결과의 평균치는 제1도에 예시되며, 이는 혈액 단핵세포에 대한 2-클로로데옥시아데노신의 독성이 증가되었음을 보여준다. 7일째 단핵세포를 CdA-함유 조성물에 접촉시키면 평균감소율은 80%이다. 처리한지 제5일째에 7명의 임파종 환자중 5명에게서 순환으로부터 단핵세포가 완전히 사라졌다.

혈소판과 헤모글로빈 농도는 제시된 일정기간 동안엔 일정하게 유지되었다. 알 수 있는 바와 같이, 순환성 호중구의 수는 거의 감소되지 않은 반면, 순환성 임파구의 수는 CdA의 주입이 끝날때까지 30% 정도 감소되었다. CdA투여를 중단한지 약 2주이내에, 단핵세포의 수는 투여하기 전의 수로 되돌아왔다.

따라서, 본 발명은 순환성 혈액 단핵 세포의 수를 감소시키는 방법을 제공한다. 유사하게는, 2-클로로데옥시아데노신을 자가용혈성 빈혈 환자에게 투여한 결과, 자가항체 형성이 상당히 저하되었고 동시에 용혈 현상이 감소됨을 밝혀내었다.

[실시예 2]

[시험관내 CdA의 세포독성]

정제된 인간 단핵세포, 임파구 및 인간 섬유아세포에 대한 2-클로로데옥시아데노신(CdA)의 비교 세포 독성은 다음과 같이 측정하였다.

널리 공지된 방법으로 정상의 피검자로부터 혈액 단핵세포 및 임파구를 분리해낸다. 96개 웰 평평한 바닥의 조직 배양 평판 ml당 5×105개 세포수의 밀도로 신선하게 유지하면서 세포를, 2mM L-글루타민, 50μM 2-머캅토에탄올 및 20% 자가성(autologous)혈장(완전 배지)으로 보충된 RPMI 1640 배지를 함유하고, 추가로 다양한 농도의 (0 내지 125nmole) CdA를 함유하는 조성물과 접촉시키면서 5% CO2-함유 공기중 37℃에서 5일간의 배양 기간 동안 배양한다. 인간 섬유아세포 세포주 GMO 1380은 NIGMS 휴먼 제네틱 뮤턴트 셀 레포지터리(NIGMS Human Genetic Mutant Cell Repostitory, Camben, NJ)로 수득하고, 이를 상기와 동일한 조건에서 배양한다. 이 세포주는 정상적 태아의 폐로부터의 것이다.

단핵세포 및 섬유아세포에 대한 독성은 문헌[참조 : Mosmann(1983)J. Immunal. Meth., 65 55-63]에 기술된 MTT 환원 검정법을 변형시켜 측정한다. 5일간 배양한 후, 3-(4, 5-디메틸티아졸-2-일)-2,5-디페닐 테트라졸륨 브로마이드(MTT) 0.2(40μl)을 각각의 웰에 혼합시키고 4시간 더 배양한다. 그 다음, 평판을 10분간 1000×g의 속도로 원심분리시키고, 상등액을 미세하게 빼낸 피펫으로 조심스럽게 교반시킨다.

산성화된 이소프로판올(100μl : 0.04N HCI사용)을 각각의 웰에 가한다. 평판을 밀봉하고, 광선으로부터 차단한 다음, 약 18시간 동안 -20℃에 놓아두어 청색 포르마잔 침전물을 완전히 용해시킨다.

630nm의 참조 파장을 사용하여, 570nm의 파장에서의 흡광도를 측정하는 다이나테크(Dynatech)미세판 분광광도계로 생존 세포수를 측정한다. 2000개 비활성화 단핵세포까지 검정할 수 있으며 570nm에서의 MTT 포름마잔의 흡광도는 약 2.4 내지 20×10³세포수 범위에 걸쳐 단핵세포수에 대하여 선형이다.

현탁액중에서 세포수 및 임파구에 대한 CdA의 독성은 표준 기술을 사용하는 에리트로신 B 염료 추출법으로 측정한다.

이러한 시험관내 세포독성 검정의 결과는 제2도에 나타나 있다. 세포독성은 CdA를 가하지 않은 배양 배지에서 5일후 생존 세포수와 비교하여 CdA에 노출된지 5일후에 잔존하는 생존 세포수의 백분율(대조군의 생존 세포%)로서 표현된다 20nM CdA에 노출된지 5일후에 배양된 단핵세포의 50%가 사멸된 반면, 동일한 CdA농도하에서의 섬유아세포의 성장에 대해서는 인지할만한 어떠한 독성도 관찰되지 않는다. 또한, CdA에 대한 단핵세포 민감성은 데옥시시티딘(100μM)의 존재로 인해 실질적으로 저하됨을 알 수 있다. 이러한 결과는 CdA의 세포 독성에 있어서 데옥시시티딘 키나제 활성과 관련있는 것으로 여겨진다.

이들 결과는 예상치 못했던 것으로 강조된다. CdA의 독성이 이의 포스포릴화 및 CdA-5'-트리포스페이트로의 전환에 의존한다는 사실을 밝혀내었다. CdA 뉴클레오타이드의 형성은 데옥시 시티딘 키나제 활성과 5'-뉴클레오티다제 활성 사이의 비의 함수이다. 인간 대식 세포는 낮은 데옥시시티딘 키나제 농도를 갖는 것으로 보고되었기 때문에 충분한 5'-뉴클레오티다제를 갖는 것으로 여겨지며, 단핵 세포/대식세포 계열의 세포는 CdA에 대해서 민감성을 나타내지 않는 것으로 기대된다. 특히, 시험관내 단핵세포에 대해 독성인 CdA의 농도는 현재 만성 임파양 악성 종양에 대한 CdA화학요법을 받고 있는 환자의 혈장내에서 측정된 CdA의 농도와 동일한 범위내이다.

더우기, 단핵세포/대식세포 계열의 세포가 염증 반응에 대해 상당 부분 책임이 있기 때문에, 이러한 연구 결과는 일반식(Ⅱ)의 화합물을 사용하여 순환성 혈액단핵세포의 수를 선택적으로 감소시킴으로써 염증을 경감시킬 수 있음을 지시해 준다.

[실시예 3]

[단핵세포에 대한 CdA의 시험관내 세포독성]

새로이 분리된 인간 단핵세포를 96개 웰 평평한 바닥의 조직 배양 평판내에서 105 세포수/웰의 농도로 배양한다. 초기 플레이팅 이후 초기를 약 12시간 동안 완전 배지(실시예 2)내에서 배양한다. 그 다음 세포를 다양한 농도의 CdA를 첨가함으로써 처리하여 단핵세포-함유 조성물 특이적 웰을 형성하고 평판을 전술한 바와 같이 배양한다.

처리된 단핵세포를 함유하는 웰중에 존재하는 생존세포의 백분율은 6일간 매일 측정한다. 이 결과는 제3도에 예시되어 있으며, 이는 CdA가 단핵세포에 대해 독성이며 50nM CdA로 처리한지 2일 이내에 세포의 생존성이 상당히 저하됨을 나타내 준다.

[실시예 4]

[CdA에 노출된 단핵세포의 DNA손상]

단핵세포를 전술한 바와 같이 플레이팅한 다음 다양한 농도의 CdA를 함유하는 조성물에 접촉시킨다.

CdA에 노출된 단핵세포의 DNA손상량은 낮은 세포수 측정에 도움을 주기 위해[참조 : Thierry et al.(1985) Radiation Res., 102 : 347-358]변형시킨, 문헌[참조 : irnboim and Jevcak(1981) Cancer Res., 41 : 1889-1892]에 기술된 알칼리 용액 중에서 DNA 풀어짐(unwinding)에 대한 형관성 검정법으로 측정한다.

15℃의 알칼리 용액에서 DNA의 풀림율은 DNA 스트랜드 파손 또는 알칼리-불안정 부위의 수에 비례한다. pH 12.8에 1시간 동안 노출된 샘플중의 잔사 듀플렉스(duplex) DNA의 에티듐 브로마이드 형광성을 알칼리에 노출되지 않은 DNA분취물의 형광성과 비교한다. 1시간 지난후 잔존하는 이본쇄 DNA의 %를 샘플중 DNA 손상의 측정치로 한다. 이러한 결과는 제4도에 예시된다.

DNA 파손은 10nM CdA에 노출된 2시간 이내에 인간 단핵세포에 나타났고, CdA 노출이 계속되는 동안 누적된다. DNA 손상 정도는 용량-의존성이다.

[실시예 5]

[인간 단핵세포에 있어서 CdA의 생화학적 효과]

HPLC(1μm)을 함유한 배양액중에서 배양후 인간 단핵세포의 세포내 NAD 함량을 측정한다. 문헌[참조 : Jacobson and Jacobson(1976) Arch. Biochem. Biophys. 175 : 627-634]에 기술된 알코올 데하이드로게나제 사이클링 검정법을 사용하여 NAD를 측정한다.

전술한 바와 같이 배양되고 접촉된 단핵세포를 배양 웰로부터 분리시키고 4℃에서 10분간 과염소산(0.5M)으로 처리한다. 혼합물을 정화시키고 pH7.5의 KOH함유 인산 칼륨 완충액(0.33M)로 중화시킨다. 문헌[참조 : Carson et al.(1980) Proc. Nat'l. Acad. Sci. USA, 77 : 6865-6869]의 방법을 수행하면서 pH3.6에서 KH2PO4(0.25M), KCI(0.5M) 및 아세토니트릴(2%)로 이루어진 이소크래틱 이동상(isocratic mobile phase)을 함유하는 왓트만(Whatman) SAX컬럼을 사용하여, 음이온 교환 HPLC에 의해 과염소산 추출물중에서 단핵세포 ATP를 정량한다.

폴리(ADP-리보오즈)함성시 NAD+ 소모는 진핵세포중 심각한 DNA손상의 공지된 결과이다. 단핵세포에 대한 CdA의 현저한 독성에 있어서 NAD 고갈(depletion)의 잠재적 역할을 측정하기 위하여, CdA(1μm)에 노출된 세포중 산화 NAD 및 ATP의 일시적 변화에 관해 연구한다.

제5도는 CdA에 노출된 단핵세포중 산화 NAD의 변화를 나타낸다. DNA완전성(이중 스트랜드(ds)-DNA)의 측정치와 달리, 노출시킨지 처음 4시간 동안에는 단핵세포 NAD함량이 비교적 일정하게 잔존하지만 (대조 NAD의 95% 이상), 그후 점차적으로 감소된다. NAD함량의 감소로 인해 ATP와 세포 생존성이 저하되며, 이러한 현상은 CdA에 노출시킨지 16시간 후에 처음으로 확실히 나타난다.

CdA노출이후 단핵세포 RNA합성에 관한 연구는 3H-우리딘의 통합을 측정함으로써 수행한다.

CdA(1μM)에 노출시킨 후 마지막 1시간동안에 단핵세포를 H-우리딘(20μCi/106세포수)에 노출시킨다. 셀로로오즈아테이트 여과기 상에 수집된 트리클로로아세트산 침전물중에 함유된 방사능을 액체 신틸레이션 계수법으로 측정한다. 제5도는 1μM CdA가 RNA합성을 점차적으로 감소시킴을 예시하는데, 이러한 것은 배양한지 처음 1시간 후에 검출가능하고, DNA손상이 나타나는 것과 부합한다.

[실시예 6]

[단핵세포 기능 검정]

시험관내 단핵세포 기능에 대한 치사 미만의 CdA농도의 효과에 관해서 또한 연구한다. 세포를 3일간 CdA(5 내지 20nM)에 접촉시켜 배양한 이후에, 식작용(phagocytosis)과 상등액 IL-6활성을 검정한다. 제6도는 변화되지 않은 세포 생존성에도 불구하고, 항체-피복된 적혈구 표적의 식작용은 10 및 20mM CdA에 의해 현저하게 억제됨을 나타낸다.

B 9.9 하이브리도마 세포의 증식을 향상시키는 투석된 배양 상등액의 능력은 IL-6 활성[참조 : Helle et al. (1988) Eur. J. Immunol., 18 : 1535-1540]의 측정치이다. 단기간의 시험관내 배양동안 단핵세포를 플라스틱 부착시키면 자발적으로 IL-6를 분리해낸다[참조 : Guerne et al. (1989) J. Clin. Invert., 83 : 585-592]. γIL- 6을 사용하는 생검정 표준 곡선에 측정된 바와 같이 3일간 자가성 혈장 20%중에서 배양된 단핵세포는 ml IL-6당 약 18U를 분비한다.

제6도는 또한 단핵 세포를 3일간 독성이하 농도의 CdA와 접촉시키면 IL-6의 배양 상등액내로 자발적 분비가 억제됨을 나타낸다. 그러나, CdA의 세포독성 농도에서, 상등액은 고농도의 IL-6을 함유하는데, 이는 아마도 세포용해 및 세포내 스토아로부터 모노킨(Monokine)의 방출에 기인된 것이다.

자가성 적혈구 표적을 사용하여 단핵세포 식작용을 검정하고, 아-응집 역가 또는 래비트 항-인간 적혈구1gG(Cappel, Malvern, PA)로 감작화한다. 단핵세포(2×105세포수/웰)를 미세 웰 평판중에서 72시간 동안 독성 미만 농도의 CdA에 노출시킨다. 완전 배지를 10% 태송아지 혈청을 함유하는 배지로 대체하고, 감작화된 적혈구의 현탁액(0.25% 패킹된 세포 용적)을 점착성 단핵세포 층에 가한다. 37℃에서 4시간 동안 배양한후, 문헌[참조 : Jungi(1985) J. Immunol. Meth., 82 : 141-153]의 분광광도계 측정법으로 식작용 정도를 정량한다. 이러한 검정은 단핵식세포(phagocytes)의 세포 융해물에 의한 디아미노벤지딘의 헤모글로빈-촉매된 과산화에 근거를 둔 것이다.

배양된 단핵세포에 의한 IL-6의 자발적 분비는 문헌[참조 : Guerne et al. (1989) J. Clin. Invert., 83 : 583-592]에 기술된 바의 하이브리도마 성장 인자 생검정법으로 측정한다. 이와 같은 검정에서는, B 9.9쥐의 하이브리도마 아클론이 증식은 IL-6의 존재에 의존한다. CdA존재하에 72시간까지 배양한 단핵세포로부터 수집한 상등액을 먼저 투석시켜 약제를 제거한 다음, IL-6 생검정으로부터 B. 9.9세포를 함유하는 웰내로 1 : 12 희석시킨다. 단핵세포 분리동안 리포롤리삭카라이드의 오염 자극 효과를 제거하기 위하여, 폴리마익신 B(12.5μg/ml)를 시약, 완충액, 및 이러한 연구용 세포를 제조하기 위해 사용된 접착 배지를 가한다.

[실시예 7]

[생체내 CdA의 세포독성]

류마티스성 관절염이 있는 3명의 환자를 대상으로 실시예 1에 기술된 바와 유사한 연구를 수행하였다. 이 연구에서 실시예 1에 기술된 바의 CdA를 함유하는 조성물을 환자에게 약 4 내지 6주간의 치료주기를 사용하여 3주기내에 5일동안 주입한다.

혈청-양성 류마티스성 관절염에 걸린 63세 여성인 환자 1에 대한 단핵세포 및 임파구 세포수에 대한 데이터는 제7도에 예시된다 호중구 및 혈소판 수를 또한 검정하면 100일간 연구기간 동안 실질적으로 일정하게 유지되었음을 알 수 있다. 환자 2와 3에 대해서 4가지 세포유형중 3가지의 경우 유사한 결과가 수득된다. 환자 3에서는 바이러스 증후군과 연관된 호중구 감소증이 일시적으로 나타나지만, 이는 비-스테로이드계 소염제 치료법을 중지한 후에는 치료되었다. 실시예 1에 기술된 바와 같이 세포수를 검정한다.

제7도로부터 알 수 있는 바와 같이, 단핵세포 각 CdA투여 주기동안 실제로 제로(0)까지 떨어진다. 각 주기에 대한 CdA 주입을 중단한지 약 10일 이내에 단핵세포 수는 대략 본래의 (처리-전)수로 되돌아왔다.

[실시예 8]

[2-클로로-9-1'-β-2'-데옥시-2'-플루오로-D-아라비노푸라노실 아데닌의 합성]

1', 3'-디-O-아세틸-5'-O-벤조일-2'-데옥시-2'-플루오로-β-D-아라비노즈(4.7g, 13.8mmol)을 0℃에서 1M HBr/CH2Cl2에 가한 다음 5℃에서 24시간 동안 유지시킨다. 음성 압력하에 회전증발시켜 용매를 제거하고, 무수 생성물을 무수 톨루엔중에 용해시킨다. 생성물을 감압하에 회전증발시켜 건조하여 3'-O-아세틸-5'-O-벤조일-2'-데옥시-2-플루오로-D-아라비노푸라노실브로마이드(ABFA)를 수득한다.

ABFA를 디클로로에탄 200ml중에 용해시킨다. 2,6-디클로로푸린(2.61g, 13.8mmol)을 ABFA용액에 가하고 혼합물을 환류 100℃에서 16시간 동안 가열한다. 그 다음 용액을 여과시키고 감압하에 건조 회전증발시킨다. 무수 분말을 CHCl3중에 용해시키고, 섬광 크로마토그래피(200g 실리카겔, 230 내지 400메쉬, 2 : 1 사이클로헥산-에틸 아세테이트 용출)하여 2,6-디클로로-9, 1'-(3'-O-아세틸-5'-O-벤조일-2'-데옥시-2'-플루오로-β-D-아라비노푸라노실)-9-푸린을 수득한다. 2,6-디클로로푸린의 이러한 2'-플루오로-아라비노푸라노실 유도체를 메탄올성 암모니아와 반응시켜 2-클로로-9-β-2'-데옥시-2'-플루오로-D-아라비노푸노실아데닌을 수득한다.

그후, 용매를 회전증발시켜 제거하고 생성된 잔사를 냉수(4℃)(20ml)중에 교반시켜 세척한다. 생성물을 여과시켜 수집한다. 주 생성물을 섬광 실리카 칼럼 크로마토그래피(EtOAc : 메틸 알코올 20 : 1)하여 정제하고, 회전증발시켜 백색 분말로 농축시킨 다음 NMR에 의해 2-클로로-9,1'-β-2'-데옥시-2'-플루오로-D-아라비노푸라노실아데닐로 동정한다.

문헌[참조 : Wright et al.(1987) J. Org. Chem., 52 : 4617-4618]에 기술된 바와 같이 ABFA(상기)를 수소화 나트륨/아세토니트릴중의 2,6-디클로로푸린과 반응시킨 다음, 상기 기술된 바와 같이 메탄올성 암모니아와 반응시켜 유사한 결과를 수득한다.

[실시예 9]

[2'-데옥시아데노신-1-N-옥사이드의 합성]

pH 5.5하 NH4HCO3 5ml중의 2'-데옥시아데노신(30μmole)을 0℃하에서 모노 퍼프탈산의 마그네슘염 120mmol과 지속적으로 혼합한다.

12시간 후, 혼합물을 동결건조시키고, 물 2ml중에 용해시킨 다음 다웩스(Dowex)AGIX-8(포르메이트형)의 20ml자리 크로마토그래피 칼럼의 상부에 적용한다.

1-N-옥사이드는 0.1M NH4HCO3로 용출시킨다.

[실시예 10]

[압착정제]

성 분 양, mg/정제

2-클로로-9,1'-β-2'-데옥시-2'-

플루오로-D-아라비노푸라노실

아데닌 1

2염기성 인산 칼슘 적당량

전분 USP 40

개질전분 10

마그네슘 스테아레이트 USP 1-5

[실시예 11]

[경질 캡슐제]

성 분 양, mg/칼슘제

2-메틸-9,1'-β-2'-데옥시-2'-

플루오로-D-아라비노푸라노실

아데닌 1

락토즈(분무건조된) 적당량

마그네슘 스테아레이트 USP 1-10

[실시예 12]

[경구 액체(시럽)]

성 분 양, %중량/용적

2-하이드록시-9,1'-β-2'-데옥시-2'-

플루오로-D-아라비노푸라노실

아데닌 0.5

액체 당 75.0

메틸 파라벤 USP 0.18

프로필 파라벤 USP 0.02

향미료 적당량

정제수(적량 가하여) 100.0

[실시예 13]

[정맥내 주사 용액 농축제]

성 분 양, %중량/용적

2-클로로-9,1'-β-2'-데옥시-2'-

아데노신-1-N-옥사이드 0.1

벤질 알코올 NF 0.9

정제수 100.0

[실시예 14]

[잔용성 피복된 아데닌 유도체]

표 1에는 본 발명에 따른 약제 조성물(조성물 A) 및 장용성 피복 조성물(조성물 B)의 성분이 예시된다.

[표 1]

조성물 A

성 분 중량%

2-클로로-9,1'-β-2'-데옥시아데노신 67.0

폴리비닐피롤리돈 1.3

개질 전분 5.0

중탄산나트륨(무수) 20.0

시트르산 6.7

100.0

조성물 B

성 분 중량%

클로로포름 66.4

메탄올(무수) 15.4

셀룰로오즈 아세테이트 프탈레이트 7.2

탈크 # 127 U.S.P. 7.3

FD C# 5 옐로우 1.0

디에틸 프탈레이트 2.7

100.0

조성물 A에 대해 열거된 성분을 약 9 내재 15분간 무수 이소프로필 알코올(조성물 Akg당 700ml)을 서서히 가하면서 함께 혼합시킨다. 그 다음 생성된 혼합물을 압축시켜 정제로 분절화한다. 이들 분절된 입자를 35℃하 오븐중에서 약 40 내재 48시간 동안 건조시킨다. 무수 과립을 14메쉬 스크린을 통하여 사이즈(size)한다. 스크린을 통과하는 분절을 정제기내에서 압축시켜 직경이 약 4.8mm이고 두께가 약 4mm인 정제를 생성한다.

그 다음 건조된 정제를 정제 kg당 조성물 B 약 0.45ℓ를 사용하는 팬내에서 pH민감성 장용성 피복조성물(조성물B)로 피복시켜 최종 정제의 약 5.5중량%인 균질한 피복물을 수들한다. 그 다음 습윤 피복된 정제를 건조시킨다.

전술한 설명 및 실시예는 예시하고자 함이며 본 발명을 제한하지는 않는다. 본 발명의 요지 및 범위 내에서의 다른 변형은 가능하며 당 분야의 전문가에게는 용이할 것이다.

[도면의 간단한 설명]

본 명세서의 한 부분을 형성하는 도면에 있어서 :

제1도는 7명의 피부 T-세포 임파종 환자의 모세 혈액중 3가지 세포 종류에 대한 2-클로로데옥시아데노신(CdA)의 세포 독성 연구 결과를 나타낸 것이다. 7일간 치료받는 각 환자에게 일일 0.2mg/kg의 투여량으로CdA(0.1mg/ml, 등장성 식염수중)을 연속적으로 정맥내 주입한다. 매일 혈액 샘플을 회수하고 세포수를 센 다음, 평균치를 기록한다. 그래프의 표시는 다음과 같다 : □＝단핵세포, ＋＝호중구(X10) 및 ◆=임파구, 세포농도(세로좌표)는 측정되는 치료일수(가로좌표)에 대해 표시한다.

제2도는 시험관내에서 배양한 경우의, 정상인의 단핵세포(□), 정상 태아폐로부터 인간 섬유 아세포 세포주, GM 01380(◇) 및 정상인의 임파구(◆)에 대한 2-클로로데옥시아데노신(CdA)의 용량-반응 세포 독성을 설명하는 그래프이다. 세포는 실시예 2에 기술한 바와 같이 시험관내에서 0 내지 125nM의, 다양한 농도의 CdA의 존재하에 5일 동안 배양한 다음, 생존 세포를 측정한다. 치료후 남아있는 생존 세포의 %(세포좌표)를 선형 스케일로, 사용된 CdA의 농도(가로좌표)에 대해 표시한다. 단핵세포(■)에 대한 CdA 독성에 대한 데옥시시티딘의 존재효과도 나타낸다.

제3도는 시험관내 인간 단핵세포에 대한 2-클로로데옥시아데노신(CdA) 세포 독성의 용량- 및 시간-의존성 그래프이다.

제4도는 시험관내 단핵세포중 DNA 스트랜드 파열을 유발시키는데 있어서, CdA에 대한 용량- 및 시간-의존성의 그래프이다.

제5도는 16시간에 걸쳐 CdA에 1μM에 노출시킴으로써 시험관내 인간 단핵세포에서 유발된 생화학적 효과의 그래프이다. 단핵세포 생존성(

), NAD함량(■), RNA 합성( ) 및 DNA 스트랜드 파열(ds-DNA ;

)에 대한 CdA노출 효과를 나타낸다.

제6도는 72시간 동안 단핵세포와 접촉시키는데 사용하는 비교적 저용량인 CdA의 효과를 나타내는 그래프이다. 인터루킨-6(IL-6 ; )의 단핵세포 방출 및 항체- 피복 적혈구(RBC ; ■)의 식작용을 배양한 단색 세포의 생존성(

)에서와 같이 관찰한다. 효과는 대조값의 %대 CdA의 nM농도로 나타낸다.

제7도는 CdA 치료를 받고 있는 류마티스성 관절염 환자의 단핵세포 및 임파구에 대한 CdA의 세포독성의 연구결과를 나타낸 그래프이다. 5일동안 일일 0.1mg/kg의 투여량으로 CdA(0.1mg/ml, 등장성 식염수중)를 연속적으로 정맥내 주입한다. 단핵세포수를 으로 나타내고 임파구 수를

으로 나타낸다. 3회 주기로 CdA를 주입하고, 치료섭생중 주입하는 날을 상기 그래프위에 5일간의 기간에 대해 □로 나타낸다.

Claims

하기 일반식의 치환된 아데닌 유도체

상기식에서, Z는 0^-이거나 Y는 수소이거나, 할로겐 저급알킬, 하이드록실, 저급 알킬티오 및 저급알카노일아미도 라디칼로 이루어진 그룹중에서 선택된 라디칼이며,

X는 수소 또는 불소이고,

단, Y는 X가 불소인 경우에만 수소이다.
제1항에 있어서, Y가 불소, 염소 및 브롬으로 이루어진 그룹중에서 선택된 할로겐인 아데닌 유도체.
제1항에 있어서, Y가 염소이고, X가 수소인 아데닌 유도체.
활성성분으로서 치료학적 유효량의 하기 일반식의 치환된 아데닌 유도체를 생리학적으로 허용되는 담체와 함께 포함하는, 미생물이 감염된 단핵세포중에 존재하는 감염성 질환 치료에 유용한 약제학적 조성물.

상기식에서, Z는 0^-이거나 존재하지 않고, Y는 수소이거나, 할로겐 저급알킬, 하이드록실, 저급 알킬티오 및 저급알카노일아미도 라디칼로 이루어진 그룹중에서 선택된 라디칼이며,

X는 수소 또는 불소이고,

단, Y는 Z가 존재할 경우에만 수소이다.
제4항에 있어서, Y가 불소, 염소 및 브롬으로 이루어진 그룹중에서 선택된 할로겐인 약제학적 조성물.
제5항에 있어서, X가 불소인 약제학적 조성물.
제4항에 있어서, Y가 염소이고, X가 수소이며, Z가 0^-인 약제학적 조성물.
제4항에 있어서, 경구투여용 약제학적 조성물.
제4항에 있어서, 치료학적 유효량의 항미생물제를 추가로 포함하는 약제학적 조성물.
제9항에 있어서, 항미생물제가 항바이러스제인 약제학적 조성물.
제41항에 있어서, 항바이러스가 아지도티미딘, 2,3'-디데옥시시티딘, 아사이크로비르 및 인터페론으로 이루어진 그룹중에서 선택되는 약제학적 조성물.
제9항에 있어서, 항미생물제가 니푸르티목스, 스티보글루코네이트, 암포테리신 B, 펜타미딘 이세티오네이트, 피라메타민, 설폰아미드, 클로로퀸, 프리마퀸, 메플로퀸, 트리메토프림설파베톡사졸, 프레드니손, 에티드로네이트 나트륨 및 설파살라진으로 이루어진 그룹중에서 선택되는 약제학적 조성물.
활성성분으로서 치료학적 유효량의 하기 일반식의 치환된 아데닌 유도체를 생리학적으로 허용되는 담체와 함께 포함하는, 류마티스성 관절염 치료에 유용한 약제학적 조성물.

상기식에서, Z는 0^-이거나 존재하지 않고, Y는 수소이거나, 할로겐 저급알킬, 하이드록실, 저급 알킬티오 및 저급알카노일아미도 라디칼로 이루어진 그룹중에서 선택된 라디칼이며,

X는 수소 또는 불소이고,

단, Y는 Z가 불소인 경우에만 수소이다.
제13항에 있어서, 아데닌 유도체가 2-클로로-2'-데옥시아데노신인 약제학적 조성물.
제13항에 있어서, 아데닌 유도체를 혈장 농도가 약 1nM 내지 약 100nM되기에 충분한 양으로 함유하는 약제학적 조성물.
제13항에 있어서, 생리학적으로 허용되는 희석제 중에 용해되거나 분산된 2-클로로-2'-데옥시-2'-플루오로-9,1'-베타-아데노신 1-옥사이드를 포함하는 약제학적 조성물.
제4항에 있어서, 후천성 면역 결핍증 치료용 약제학적 조성물.
제4항에 있어서, 아데닌 유도체가 2-클로로-2'-데옥시-2'-플루오로-9,1'-베타-아라비노푸라노실아데닌인 약제학적 조성물.
제4항에 있어서, 아데닌 유도체가 2-클로로-2'-데옥시-2'-플루오로-9,1'-베타-아데노신-1-옥사이드인 약제학적 조성물.
제4항에 있어서, 아데닌 유도체가 2-클로로-2'-데옥시-아데노신인 약제학적 조성물.
제4항에 있어서, 아데닌 유도체를 혈장 종도가 약 1nM 내지 약 100nM이 되기에 충분한 양으로 함유하는 약제학적 조성물.
제4항에 있어서, 생리학적으로 허용되는 희석제중에 용해되거나 분산된 2-클로로-2'-데옥시-2'-플루오로-9,1'-베타-아데노신-1-옥사이드를 포함하는 약제학적 조성물.
제4항에 있어서, Z가 0^-이고, X 및 Y는 제33항에서 정의한 바와 같되, 단 X가 불소인 경우에만 Y가 수소인 치환된 아데닌 유도체를 포함하는 약제학적 조성물.
제13항에 있어서, Y가 불소, 염소 및 브롬으로 이루어진 그룹중에서 선택된 할로겐인 약제학적 조성물.
제24항에 있어서, X가 불소인 약제학적 조성물.
제13항에 있어서, Y가 염소이고, X가 수소이며 Z가 0^-인 약제학적 조성물.
제13항에 있어서, 경구투여용 약제학적 조성물.
제13항에 있어서, 치료학적 유효량의 항미생물제를 추가로 포함하는 약제학적 조성물.
제28항에 있어서, 항미생물제가 항바이러스제인 약제학적 조성물.
제29항에 있어서, 항바이러스제가 아지도티미딘, 2,3'-디데옥시티딘, 아사이클로비르 및 인터페론으로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 약제학적 조성물.
제28항에 있어서, 항미생물제가 니프루티목스, 스티보글루코네이트, 암포테리신 B, 펜타미딘 이세티오네이트, 피리메타민, 설폰아미드, 클로로퀸, 프리마퀸, 메플로퀸, 트리메토프림설파메톡사졸, 프레드니손, 에티드로네이트 나트륨 및 설파살라진으로 이루어진 그룹중에서 선택되는 약제학적 조성물.
제13항에 있어서, 아데닌 유도체가 2-클로로-2'-데옥시-2'-플루오로-9,1'-베타-아라비노푸라노실아데닌인 약제학적 조성물.
제13항에 있어서, 아데닌 유도체가 2-클로로-2'-데옥시-2'-플루오로-9,1'-베타-아데노신-1-옥사이드인 약제학적 조성물.
제13항에 있어서, Z가 0^-이고, X 및 Y는 제44항에서 정의한 바와 같되, 단 X가 불소인 경우에만 Y가 수소인 치환된 아데닌 유도체를 포함하는 약제학적 조성물.
활성성분으로서 치료학적 유효량의 하기 일반식의 치환된 아데닌 유도체를 생리학적으로 허용되는 담체와 함께 포함되는 유육종증, 만성 육아종성간염, 베그네(Wegner)육아종증, 파겟(Paget)질환, 죽상(동맥)경화증, 염증성 장질환, 육아성포도막염, 골관절염, 수술후 염증, 치염 또는 급성 또는 만성 안염 치료에 유용한 약제학적 조성물.

상기식에서, Z는 0^-이거나 존재하지 않고, Y는 수소이거나, 할로겐 저급알킬, 하이드록실, 저급 알킬티오 및 저급알카노일아미도 라디칼로 이루어진 그룹중에서 선택된 라디칼이며,

X는 수소 또는 불소이고,

단, Y는 Z가 존재할 경우에만 수소이다.
제35항에 있어서, Y가 불소, 염소 및 브롬으로 이루어진 그룹중에서 선택된 할로겐인 약제학적 조성물.
제36항에 있어서, X가 불소인 약제학적 조성물.
제35항에 있어서, Y가 염소이고, X가 수소이며, Z가 0^-인 약제학적 조성물.
제35항에 있어서, 경구투여용 약제학적 조성물.
제35항에 있어서, 치료학적 유효량의 항미생물제를 추가로 포함하는 약제학적 조성물.
제34항에 있어서, 항미생물제가 항바이러스제인 약제학적 조성물.
제41항에 있어서, 항바이러스제가 아지도티미딘, 2,3'-디데옥시시티딘, 아사이크로비르 및 인터페론으로 이루어진 그룹중에서 선택되는 약제학적 조성물.
제40항에 있어서, 항미생물제가 니푸르티목스, 스티보그루코네이트, 암포테리신 B, 펜타미딘 이세티오네이트, 피리메타민, 설폰아미드, 클로로퀸, 크리마퀸, 메플로퀸, 트리메토림설파메토사졸, 프레드니손, 에티드로네이트 나트륨 및 설파살라진으로 이루어진 그룹중에서 선택되는 약제학적 조성물.
제35항에 있어서, 아데닌 유도체가 2-클로로-2'-데옥시-2'-플루오로-9,1'-베타-아라비노푸라노실아데닌인 약제학적 조성물.
제35항에 있어서, 아데닌 유도체가 2-클로로-2'-데옥시-2'-플루오로-9,1'-베타-아데노신-1-옥사이드인 약제학적 조성물.
제35항에 있어서, 아데닌 유도체가 2-클로로-2'-데옥시-2'-아데노신인 약제학적 조성물.
제35항에 있어서, 아데닌 유도체를 혈장 농도가 약 1nM 내지 100nM이 되기에 충분한 양으로 함유하는 약제학적 조성물.
제35항에 있어서, 생리학적으로 허용되는 희석제중에 용해되거나 분산된 2-클로로-2'-데옥시-2'-플루오로-9,1'-베타-아데노신-1-옥사이드를 포함하는 약제학적 조성물.
제35항에 있어서, Z가 0^-이고, X 및 Y는 제71항에서 정의한 바와 같되, 단 X가 불소인 경우에만 Y가 수소인 치환된 아데닌 유도체를 포함하는 약제학적 조성물.