JPWO2021016585A5

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Publication number: JPWO2021016585A5
Application number: JP2022504107A
Authority: JP
Publication date: 2023-07-31

Claims

黒色腫関連抗原Ａ４（ＭＡＧＥ－Ａ４）特異的キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）であって:
（ａ）前記ＭＡＧＥ－Ａ４特異的キメラ抗原受容体が、配列番号３２のアミノ酸２８６～２９４またはその一部分と相互作用し、前記ＭＡＧＥ－Ａ４特異的ＣＡＲが、ＨＬＡが結合したＭＡＧＥ－Ａ４ポリペプチドに特異的に結合する；または
（ｂ）前記ＭＡＧＥ－Ａ４特異的キメラ抗原受容体が、配列番号３２のアミノ酸２３０～２３９またはその一部分と相互作用し、前記ＭＡＧＥ－Ａ４特異的ＣＡＲが、ＨＬＡが結合したＭＡＧＥ－Ａ４ポリペプチドに特異的に結合する、
前記ＭＡＧＥ－Ａ４特異的ＣＡＲ。
前記ＭＡＧＥ－Ａ４特異的ＣＡＲが、Ｎ末端からＣ末端へ：（ａ）抗ＭＡＧＥ－Ａ４抗原結合ドメインを含む細胞外リガンド結合ドメインと、（ｂ）ヒンジと、（ｃ）膜貫通ドメインと、（ｄ）共刺激ドメインおよびシグナル伝達ドメインを含む細胞質ドメインと、を含む、請求項１に記載のＭＡＧＥ－Ａ４特異的ＣＡＲ。
前記細胞外リガンド結合ドメインが、軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）および重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）を含む抗ＭＡＧＥ－Ａ４単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）ドメインを含み、場合により、前記抗ＭＡＧＥ－Ａ４ｓｃＦｖドメインは、前記ＬＣＶＲと前記ＨＣＶＲとの間に第１のリンカーを含み、場合により、前記細胞外リガンド結合ドメインと前記ヒンジとの間に第２のリンカーを含み；
場合により、前記第１のリンカーおよび前記第２のリンカーは、配列番号２３～２６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、場合により、前記第１のリンカーが、配列番号２５のアミノ酸配列を含み、前記第２のリンカーが配列番号２３のアミノ酸配列を含む、
請求項２に記載のＭＡＧＥ－Ａ４特異的ＣＡＲ。
（ａ）前記ヒンジ、前記膜貫通ドメイン、もしくはそれらの両方が、ＣＤ８αポリペプチド由来である；
（ｂ）前記共刺激ドメインが、４－１ＢＢ共刺激ドメインを含む；
（ｃ）前記ヒンジ、前記膜貫通ドメイン、もしくそれらの両方が、ＣＤ２８ポリペプチド由来である；
（ｄ）前記共刺激ドメインが、ＣＤ２８共刺激ドメインを含む；または
（ｅ）前記シグナル伝達ドメインが、ＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインを含む、
請求項２または３に記載のＭＡＧＥ－Ａ４特異的ＣＡＲ。
（ａ）前記ＬＣＶＲが、配列番号１０のアミノ酸配列を含むＬＣＶＲの相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む；
（ｂ）前記ＬＣＶＲが、配列番号３７のアミノ酸配列を含むＬＣＶＲの相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む；
（ｃ）前記ＬＣＶＲが、それぞれ、配列番号１２－１４－１６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１－ＬＣＤＲ２－ＬＣＤＲ３を含む；
（ｄ）前記ＨＣＶＲが、配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＣＶＲのＣＤＲを含む；
（ｅ）前記ＨＣＶＲが、それぞれ、配列番号４－６－８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１－ＨＣＤＲ２－ＨＣＤＲ３を含む；
（ｆ）前記ＬＣＶＲが、配列番号１０のアミノ酸配列、もしくは配列番号１０のアミノ酸配列に対して９５％～９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み；前記ＨＣＶＲが、配列番号２からなる群から選択されるアミノ酸配列、もしくは配列番号２からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して９５％～９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む；
（ｇ）前記ＬＣＶＲが、配列番号３７のアミノ酸配列、もしくは配列番号３７のアミノ酸配列に対して９５％～９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み；前記ＨＣＶＲが、配列番号２からなる群から選択されるアミノ酸配列、もしくは配列番号２のアミノ酸配列に対して９５％～９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む；
（ｈ）前記ＬＣＶＲが、配列番号１０のアミノ酸配列を含み、前記ＨＣＶＲが、配列番号２のアミノ酸配列を含む；または
（ｉ）前記ＬＣＶＲが、配列番号３７のアミノ酸配列を含み、前記ＨＣＶＲが、配列番号２のアミノ酸配列を含む、
請求項３または４に記載のＭＡＧＥ－Ａ４特異的ＣＡＲ。
（ａ）前記ＬＣＶＲが、配列番号５９のアミノ酸配列を含むＬＣＶＲの相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む；
（ｂ）前記ＬＣＶＲが、それぞれ、配列番号６１－６３－６５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１－ＬＣＤＲ２－ＬＣＤＲ３を含む；
（ｃ）前記ＨＣＶＲが、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＨＣＶＲの前記ＣＤＲを含む；
（ｄ）前記ＨＣＶＲが、それぞれ、配列番号５３－５５－５７のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１－ＨＣＤＲ２－ＨＣＤＲ３を含む；
（ｅ）前記ＬＣＶＲが、配列番号５９のアミノ酸配列、もしくは配列番号５９のアミノ酸配列に対して９５％～９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み；前記ＨＣＶＲが、配列番号５１のもの、もしくは配列番号５１のアミノ酸配列に対して９５％～９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む；または
（ｆ）前記ＬＣＶＲが、配列番号５９のアミノ酸配列を含み、前記ＨＣＶＲが、配列番号５１のアミノ酸配列を含む、
請求項３または４に記載のＭＡＧＥ－Ａ４特異的ＣＡＲ。
（ａ）前記ヒンジが、配列番号２７のアミノ酸配列を含む；
（ｂ）前記膜貫通ドメインが、配列番号２８のアミノ酸配列を含む；
（ｃ）前記４－１ＢＢ共刺激ドメインが、配列番号２９のアミノ酸配列を含む；
（ｄ）前記ヒンジが、配列番号４１のアミノ酸配列を含む；
（ｅ）前記膜貫通ドメインが、配列番号４３のアミノ酸配列を含む；
（ｆ）前記ＣＤ２８共刺激ドメインが、配列番号４５のアミノ酸配列を含む；または
（ｇ）前記ＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインが、配列番号３０のアミノ酸配列を含む、請求項２～６のいずれか一項に記載のＭＡＧＥ－Ａ４特異的ＣＡＲ。
（ａ）配列番号２２のアミノ酸配列、配列番号３９のアミノ酸配列、もしくは配列番号４７のアミノ酸配列を含む；もしくは
（ｂ）配列番号７１のアミノ酸配列、もしくは配列番号７３のアミノ酸配列を含む；および／または
（ｃ）前記ＨＬＡが、ＨＬＡ－Ａ２である、
請求項１に記載のＭＡＧＥ－Ａ４特異的ＣＡＲ。
請求項１～８のいずれか一項に記載のＭＡＧＥ－Ａ４特異的ＣＡＲをコードする単離された核酸分子であって、場合により、前記核酸分子は、配列番号２１のヌクレオチド配列、配列番号３８のヌクレオチド配列、配列番号４８のヌクレオチド配列、配列番号７０のヌクレオチド配列、もしくは配列番号７２のヌクレオチド配列を含む、前記核酸分子；または、前記核酸分子を含むベクターであって、場合により、前記ベクターは、ＤＮＡベクター、ＲＮＡベクター、プラスミド、レンチウイルスベクター、アデノウイルスベクター、もしくはレトロウイルスベクターである、前記ベクター；または、前記核酸分子もしくは前記ベクターを含む細胞であって、場合により、前記細胞は、ヒトＴ細胞である、前記細胞。
請求項１に記載のキメラ抗原受容体を含む、操作された細胞であって、場合により：
（ａ）前記操作された細胞は、免疫細胞である；
（ｂ）前記操作された細胞は、免疫細胞であり、前記免疫細胞は、免疫エフェクター細胞である；
（ｃ）前記免疫エフェクター細胞は、Ｔリンパ球である；
（ｄ）前記免疫エフェクター細胞は、Ｔリンパ球であり、前記Ｔリンパ球は、炎症性Ｔリンパ球、細胞傷害性Ｔリンパ球、調節性Ｔリンパ球、またはヘルパーＴリンパ球であり、場合により、ＣＤ８＋細胞傷害性Ｔリンパ球である、
前記操作された細胞。
Ｎ末端からＣ末端へ：（ａ）軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）および重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）を含む抗ＭＡＧＥ－Ａ４単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）ドメインを含む細胞外リガンド結合ドメインと、（ｂ）ヒンジと、（ｃ）膜貫通ドメインと、（ｄ）４－１ＢＢ共刺激ドメインまたはＣＤ２８共刺激ドメイン、およびＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインを含む細胞質ドメインと、を含むキメラ抗原受容体を含む、操作されたヒトＴ細胞であって、場合により：
（ａ）前記抗ＭＡＧＥ－Ａ４ｓｃＦｖは、配列番号３２の２８６～２９４位の１つ以上のアミノ酸残基に特異的に結合する；
（ｂ）前記ｓｃＦｖドメインは、配列番号２／１０のアミノ酸配列を含むＨＣＶＲ／ＬＣＶＲアミノ酸配列対を含む；
（ｃ）前記ｓｃＦｖドメインは、配列番号２／３７のアミノ酸配列を含むＨＣＶＲ／ＬＣＶＲアミノ酸配列対を含む；
（ｄ）前記抗ＭＡＧＥ－Ａ４ｓｃＦｖドメインは、配列番号３２の２３０～２３９位の１つ以上のアミノ酸残基に特異的に結合する；
（ｅ）前記ｓｃＦｖドメインは、配列番号５１／５９のアミノ酸配列を含むＨＣＶＲ／ＬＣＶＲアミノ酸配列対を含む；
（ｆ）前記ヒンジは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む；
（ｇ）前記膜貫通ドメインは、配列番号２８のアミノ酸配列を含む；
（ｈ）前記４－１ＢＢ共刺激ドメインは、配列番号２９のアミノ酸配列を含む；
（ｉ）前記ヒンジは、配列番号４１のアミノ酸配列を含む；
（ｊ）前記膜貫通ドメインは、配列番号４３のアミノ酸配列を含む；
（ｋ）前記ＣＤ２８共刺激ドメインは、配列番号４５のアミノ酸配列を含む；
（ｌ）前記ＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインは、配列番号３０のアミノ酸配列を含む；
（ｍ）前記キメラ抗原受容体が、配列番号２２のアミノ酸配列、配列番号３９のアミノ酸配列、配列番号４７のアミノ酸配列、配列番号７１のアミノ酸配列、もしくは配列番号７３のアミノ酸配列を含む、
前記操作されたヒトＴ細胞。
請求項１０に記載の操作された細胞または請求項１１に記載された操作されたヒトＴ細胞、および薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物。
（ｉ）請求項１～８のいずれか一項に記載のキメラ抗原受容体を含むＴリンパ球、または（ｉｉ）請求項１～８のいずれか一項に記載のキメラ抗原受容体を発現する遺伝子改変された細胞、を含む医薬組成物であって、前記医薬組成物は、以下の方法：
（ａ）対象においてＴリンパ球活性を増強する方法であって、前記Ｔリンパ球を前記対象に導入することを含む、前記方法；
（ｂ）がんに罹患している対象を治療するための方法であって、治療有効量の前記Ｔリンパ球を前記対象に導入することを含む、前記方法；
（ｃ）対象において標的細胞集団もしくは組織へのＴ細胞媒介性免疫応答を刺激するための方法であって、有効量の前記細胞を前記対象に投与することを含む、前記方法；または
（ｄ）対象において抗腫瘍免疫を提供する方法であって、有効量の前記細胞を前記対象に投与することを含む、前記方法、
において使用されるためのものであり、
場合により、前記対象は、ヒトであり；および／または、前記対象は、多発性骨髄腫、滑膜肉腫、食道がん、頭頸部がん、肺がん、膀胱がん、卵巣がん、子宮がん、胃がん、子宮頸がん、乳がん、もしくは黒色腫を有し、場合により、前記対象は、多発性骨髄腫を有する、
前記医薬組成物。
キメラ抗原受容体を発現するように細胞の集団を操作する方法であって、
（ａ）請求項１～８のいずれか一項に記載のキメラ抗原受容体をコードする核酸分子を、場合により対象から得られた免疫細胞の集団に導入することと、
（ｂ）前記核酸分子を発現する条件下で前記免疫細胞の集団を培養することと、
（ｃ）前記細胞の表面で前記キメラ抗原受容体を発現する前記免疫細胞を単離することと、
を含む、前記方法。
ＭＡＧＥ－Ａ４を発現するがんを治療する方法において使用するための、請求項１２に記載の医薬組成物であって、前記方法は、操作された細胞または操作されたヒトＴ細胞を対象に投与する工程を含み、場合により、前記ＭＡＧＥ－Ａ４を発現するがんは、多発性骨髄腫または黒色腫である、前記医薬組成物。
黒色腫関連抗原Ａ４（ＭＡＧＥ－Ａ４）ポリペプチドに特異的に結合する、単離された組換え抗体またはその抗原結合フラグメントであって、前記抗体が、以下の特徴：
（ａ）約１０^-9Ｍ未満のＥＣ５０で前記ＭＡＧＥ－Ａ４ポリペプチドに結合すること；
（ｂ）がんを有する動物において、前記動物への投与後の生存が、前記投与なしの相当
の動物と比較して、増加を示すこと；および／または
（ｃ）（ｉ）表１に記載のＨＣＶＲに対して少なくとも約９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）内に含まれる３つの重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、およびＨＣＤＲ３）、ならびに（ｉｉ）表１に記載のＬＣＶＲに対して少なくとも約９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）内に含まれる３つの軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、およびＬＣＤＲ３）を含むこと、
のうちの１つ以上を有し、
場合により：
（ｉ）前記ＭＡＧＥ－Ａ４ポリペプチドは、ＨＬＡ－Ａ２が結合したＭＡＧＥ－Ａ４ポリペプチドである；
（ｉｉ）前記単離された組換え抗体もしくはその抗原結合フラグメントは、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＶＲを含む；
（ｉｉｉ）前記単離された組換え抗体もしくはその抗原結合フラグメントは、配列番号１０のアミノ酸配列を有するＬＣＶＲを含む；
（ｉｖ）前記単離された組換え抗体もしくはその抗原結合フラグメントは、配列番号２／１０のＨＣＶＲ／ＬＣＶＲアミノ酸配列対を含む；
（ｖ）前記単離された組換え抗体もしくはその抗原結合フラグメントは、配列番号３７のアミノ酸配列を有するＬＣＶＲを含む；
（ｖｉ）前記単離された組換え抗体もしくはその抗原結合フラグメントは、配列番号２／３７のＨＣＶＲ／ＬＣＶＲアミノ酸配列対を含む；または
（ｖｉｉ）前記単離された組換え抗体もしくはその抗原結合フラグメントは：
（Ａ）配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１ドメイン、配列番号６のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２ドメイン、配列番号８のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３ドメイン、配列番号１２のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１ドメイン、アミノ酸１４を有するＬＣＤＲ２ドメイン、および配列番号１６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３ドメインを含む；もしくは
（Ｂ）配列番号５１のアミノ酸配列を有するＨＣＶＲ、および／もしくは配列番号５９のアミノ酸配列を有するＬＣＶＲを含む；もしくは
（Ｃ）配列番号５３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１ドメイン、配列番号５５のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２ドメイン、配列番号５７のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３ドメイン、配列番号６１のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１ドメイン、アミノ酸６３を有するＬＣＤＲ２ドメイン、および配列番号６５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３ドメインを含む；もしくは
（Ｄ）配列番号５１／５９のＨＣＶＲ／ＬＣＶＲアミノ酸配列対を含む；もしくは
（Ｅ）ＩｇＧ１抗体である；もしくは
（Ｆ）ＩｇＧ４抗体である；もしくは
（Ｇ）二重特異性抗体である、
前記単離された組換え抗体またはその抗原結合フラグメント。