JPWO2020113182A5 - - Google Patents

Description

本明細書で引用されるすべての参考文献は、あたかも各々の個々の刊行物、特許または特許出願が、具体的かつ個別に示されて、すべての目的のために、それらの全体が参照により本明細書に援用されるのと同程度に、すべての目的のために、それらの全体が、参照により本明細書に援用される。刊行物の引用は、出願日前のその開示についてであり、本発明が、先行発明のためにそのような刊行物に先行する権利がないことを認めるものとして解釈されるべきではない。
本件出願は、以下の態様の発明を提供する。
（態様１）
ナチュラルキラー細胞を含む細胞集団を産生する方法であって、
（ａ）造血幹細胞または前駆細胞を、幹細胞動員剤およびトロンボポエチン（Ｔｐｏ）を含む第１の培地で培養して、第１の細胞集団を産生するステップと、
（ｂ）前記第１の細胞集団を、幹細胞動員剤およびインターロイキン－１５（ＩＬ－１５）を含みＴｐｏを欠く第２の培地で培養して、第２の細胞集団を産生するステップと、
（ｃ）前記第２の細胞集団を、ＩＬ－２およびＩＬ－１５を含み、幹細胞動員剤および低分子量ヘパリン（ＬＭＷＨ）の各々を欠く第３の培地で培養して、第３の細胞集団を産生するステップと、を含み、
前記第３の細胞集団が、ＣＤ５６＋、ＣＤ３－であるナチュラルキラー細胞を含み、前記ナチュラルキラー細胞の少なくとも８０％が生存可能である、方法。
（態様２）
前記第３の細胞集団が、ＣＤ９４＋またはＣＤ１６＋であるナチュラルキラー細胞を含む、態様１に記載の方法。
（態様３）
前記第３の細胞集団が、ＣＤ９４－またはＣＤ１６－であるナチュラルキラー細胞を含む、態様１に記載の方法。
（態様４）
前記第３の細胞集団が、ＣＤ９４＋およびＣＤ１６＋であるナチュラルキラー細胞を含む、態様１に記載の方法。
（態様５）
前記第３の細胞集団が、ＣＤ９４－およびＣＤ１６－であるナチュラルキラー細胞を含む、態様１に記載の方法。
（態様６）
ナチュラルキラー細胞を含む細胞集団を産生する方法であって、
（ａ）造血幹細胞または前駆細胞を、幹細胞動員剤およびトロンボポエチン（Ｔｐｏ）を含む第１の培地で培養して、第１の細胞集団を産生するステップと、
（ｂ）前記第１の細胞集団を、幹細胞動員剤およびインターロイキン－１５（ＩＬ－１５）を含みＴｐｏを欠く第２の培地で培養して、第２の細胞集団を産生するステップと、
（ｃ）前記第２の細胞集団を、ＩＬ－２およびＩＬ－１５を含みＬＭＷＨを欠く第３の培地で培養して、第３の細胞集団を産生するステップと、を含み、
前記第３の細胞集団が、ＣＤ５６＋、ＣＤ３－、およびＣＤ１１ａ＋であるナチュラルキラー細胞を含む、方法。
（態様７）
前記第３の培地が、幹細胞因子（ＳＣＦ）を欠く、態様６に記載の方法。
（態様８）
前記第３の培地が、ＬＭＷＨを欠く、態様７に記載の方法。
（態様９）
（ｄ）前記第３の細胞集団から、ＣＤ１１ａ＋細胞を単離して、第４の細胞集団を産生するさらなるステップを含み、
前記第４の細胞集団が、ＣＤ５６＋、ＣＤ３－、およびＣＤ１１ａ＋であるナチュラルキラー細胞を含む、態様７に記載の方法。
（態様１０）
前記ナチュラルキラー細胞が、パーフォリンおよびＥＯＭＥＳを発現する、態様６～９のいずれか一項に記載の方法。
（態様１１）
前記ナチュラルキラー細胞が、ＲＯＲγｔまたはＩＬ１Ｒ１のいずれも発現しない、態様６～１０のいずれか一項に記載の方法。
（態様１２）
ＩＬＣ３細胞を含む細胞集団を産生する方法であって、
（ａ）造血幹細胞または前駆細胞を、幹細胞動員剤およびトロンボポエチン（Ｔｐｏ）を含む第１の培地で培養して、第１の細胞集団を産生するステップと、
（ｂ）前記第１の細胞集団を、幹細胞動員剤およびインターロイキン－１５（ＩＬ－１５）を含みＴｐｏを欠く第２の培地で培養して、第２の細胞集団を産生するステップと、
（ｃ）前記第２の細胞集団を、ＩＬ－２およびＩＬ－１５を含みＬＭＷＨを欠く第３の培地で培養して、第３の細胞集団を産生するステップと、を含み、
前記第３の細胞集団が、ＣＤ５６＋、ＣＤ３－、およびＣＤ１１ａ－であるＩＬＣ３細胞を含む、方法。
（態様１３）
前記第３の培地が、幹細胞動員剤を含む、態様１２に記載の方法。
（態様１４）
前記第３の培地が、ＳＣＦを含む、態様１２に記載の方法。
（態様１５）
前記第３の培地が、幹細胞動員剤およびＳＣＦを含む、態様１２に記載の方法。
（態様１６）
ＩＬＣ３細胞を含む細胞集団を産生する方法であって、
（ａ）造血幹細胞または前駆細胞を、幹細胞動員剤およびトロンボポエチン（Ｔｐｏ）を含む第１の培地で培養して、第１の細胞集団を産生するステップと、
（ｂ）前記第１の細胞集団を、幹細胞動員剤およびインターロイキン－１５（ＩＬ－１５）を含みＴｐｏを欠く第２の培地で培養して、第２の細胞集団を産生するステップと、
（ｃ）前記第２の細胞集団を、ＩＬ－２およびＩＬ－１５を含み、幹細胞動員剤およびＬＭＷＨの各々を欠く第３の培地で培養して、第３の細胞集団を産生するステップと、
（ｄ）前記第３の細胞集団から、ＣＤ１１ａ－細胞を単離して、第４の細胞集団を産生するステップと、を含み、
前記第４の細胞集団が、ＣＤ５６＋、ＣＤ３－、およびＣＤ１１ａ－であるＩＬＣ３細胞を含む、方法。
（態様１７）
前記ＩＬＣ３細胞が、ＲＯＲγｔおよびＩＬ１Ｒ１を発現する、態様１２～１６のいずれか一項に記載の方法。
（態様１８）
前記ＩＬＣ３細胞が、パーフォリンまたはＥＯＭＥＳのいずれも発現しない、態様１２～１７のいずれか一項に記載の方法。
（態様１９）
前記第３の培地が、脱硫酸化グリコサミノグリカンを欠く、態様１～１８のいずれか一項に記載の方法。
（態様２０）
前記造血幹細胞または前駆細胞が、哺乳動物細胞である、態様１～１９のいずれか一項に記載の方法。
（態様２１）
前記造血幹細胞または前駆細胞が、ヒト細胞である、態様２０に記載の方法。
（態様２２）
前記造血幹細胞または前駆細胞が、霊長類細胞である、態様２０に記載の方法。
（態様２３）
前記造血幹細胞または前駆細胞が、イヌ細胞である、態様２０に記載の方法。
（態様２４）
前記造血幹細胞または前駆細胞が、げっ歯類細胞である、態様２０に記載の方法。
（態様２５）
前記造血幹細胞または前駆細胞が、ヒト、霊長類、イヌ、またはげっ歯類以外の哺乳類由来の細胞である、態様２０に記載の方法。
（態様２６）
前記造血幹細胞または前駆細胞が、ＣＤ３４＋造血幹細胞である、態様１～２５のいずれか一項に記載の方法。
（態様２７）
前記造血幹細胞または前駆細胞が、胎盤細胞である、態様１～２６のいずれか一項に記載の方法。
（態様２８）
前記胎盤細胞が、ヒト胎盤灌流液から得られるか、またはそれから得ることができる、態様２７に記載の方法。
（態様２９）
前記胎盤細胞が、ヒト胎盤灌流液から単離される有核細胞から得られるか、またはそれから得ることができる、態様２７に記載の方法。
（態様３０）
前記造血幹細胞または前駆細胞が、臍帯血から得られるか、またはそれから得ることができる、態様１～２６のいずれか一項に記載の方法。
（態様３１）
前記造血幹細胞または前駆細胞が、胎児肝細胞である、態様１～２６のいずれか一項に記載の方法。
（態様３２）
前記造血幹細胞または前駆細胞が、動員末梢血細胞である、態様１～２６のいずれか一項に記載の方法。
（態様３３）
前記造血幹細胞または前駆細胞が、骨髄細胞である、態様１～２６のいずれか一項に記載の方法。
（態様３４）
前記Ｔｐｏが、１ｎｇ／ｍＬ～５０ｎｇ／ｍＬの濃度で前記第１の培地に存在する、態様１～３３のいずれか一項に記載の方法。
（態様３５）
前記Ｔｐｏが、２０ｎｇ／ｍＬ～３０ｎｇ／ｍＬの濃度で前記第１の培地に存在する、態様３４に記載の方法。
（態様３６）
前記Ｔｐｏが、約２５ｎｇ／ｍＬの濃度で前記第１の培地に存在する、態様３４に記載の方法。
（態様３７）
前記ＩＬ－１５が、１ｎｇ／ｍＬ～５０ｎｇ／ｍＬの濃度で前記第２の培地に存在する、態様１～３６のいずれか一項に記載の方法。
（態様３８）
前記ＩＬ－１５が、１０ｎｇ／ｍＬ～３０ｎｇ／ｍＬの濃度で前記第２の培地に存在する、態様３７に記載の方法。
（態様３９）
前記ＩＬ－１５が、約２０ｎｇ／ｍＬの濃度で前記第２の培地に存在する、態様３７に記載の方法。
（態様４０）
前記ＩＬ－２が、１０Ｕ／ｍＬ～１０，０００Ｕ／ｍＬの濃度で前記第３の培地に存在し、前記ＩＬ－１５が、１ｎｇ／ｍＬ～５０ｎｇ／ｍＬの濃度で前記第３の培地に存在する、態様１～３９のいずれか一項に記載の方法。
（態様４１）
前記ＩＬ－２が、３００Ｕ／ｍＬ～３，０００Ｕ／ｍＬの濃度で前記第３の培地に存在し、前記ＩＬ－１５が、１０ｎｇ／ｍＬ～３０ｎｇ／ｍＬの濃度で前記第３の培地に存在する、態様１～３９のいずれか一項に記載の方法。
（態様４２）
前記ＩＬ－２が、約１，０００Ｕ／ｍＬの濃度で前記第３の培地に存在し、前記ＩＬ－１５が、約２０ｎｇ／ｍＬの濃度で前記第３の培地に存在する、態様１～３９のいずれか一項に記載の方法。
（態様４３）
前記Ｔｐｏ、ＩＬ－２、およびＩＬ－１５が、前記第１の培地、第２の培地、または第３の培地の未定義成分には含まれない、態様１～４２のいずれか一項に記載の方法。
（態様４４）
前記Ｔｐｏ、ＩＬ－２、およびＩＬ－１５が、血清には含まれない、態様１～４２のいずれか一項に記載の方法。
（態様４５）
前記幹細胞動員剤が、以下の構造を有する式（Ｉ）の化合物であり、
（化１）

その薬学的に許容される塩を含み、式中、
各
（化２）

は、独立して、単結合または二重結合を表し、
Ｒ ^Ｊ は、－ＮＲ ^ａ Ｒ ^ｂ 、－ＯＲ ^ｂ 、および＝Ｏからなる群から選択され、Ｒ ^Ｊ が＝Ｏである場合、ＧおよびＪを結合する
（化３）

は、単結合を表し、Ｇは、Ｎであり、Ｎは、Ｒ ^Ｇ で置換され、それ以外はＧおよびＪを結合する
（化４）

は、二重結合を表し、Ｇは、Ｎであり、
Ｒ ^ａ は、水素またはＣ _１ ～Ｃ _４ アルキルであり、
Ｒ ^ｂ は、Ｒ ^ｃ または－（Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル）－Ｒ ^ｃ であり、
Ｒ ^ｃ は、－ＯＨ、－Ｏ（Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル）、－Ｏ（Ｃ _１ ～Ｃ _４ ハロアルキル）、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ _２ 、非置換Ｃ _６～１０ アリール、置換Ｃ _６～１０ アリール、非置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）、ならびに置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）からなる群から選択され、置換として示されたＲ ^ｃ 部分は、１つ以上の置換基Ｅで置換され、各Ｅは、独立して、－ＯＨ、Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル、Ｃ _１ ～Ｃ _４ ハロアルキル、－Ｏ（Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル）、および－Ｏ（Ｃ _１ ～Ｃ _４ ハロアルキル）からなる群から選択され、
Ｒ ^Ｋ は、水素、非置換Ｃ _１～６ アルキル、置換Ｃ _１～６ アルキル、－ＮＨ（Ｃ _１～４ アルキル）、－Ｎ（Ｃ _１～４ アルキル） _２ 、非置換Ｃ _６～１０ アリール、置換Ｃ _６～１０ アリール、非置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）、ならびに置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）からなる群から選択され、置換として示されたＲ ^Ｋ 部分は、１つ以上の置換基Ｑで置換され、各Ｑは、独立して、－ＯＨ、Ｃ _１～４ アルキル、Ｃ _１～４ ハロアルキル、ハロ、シアノ、－Ｏ－（Ｃ _１～４ アルキル）、および－Ｏ－（Ｃ _１～４ ハロアルキル）からなる群から選択され、
Ｒ ^Ｇ は、水素、Ｃ _１～４ アルキル、および－（Ｃ _１～４ アルキル）－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ _２ からなる群から選択され、
Ｒ ^Ｙ およびＲ ^Ｚ は、各々独立して、不在であるか、もしくは水素、ハロ、Ｃ _１～６ アルキル、－ＯＨ、－Ｏ－（Ｃ _１～４ アルキル）、－ＮＨ（Ｃ _１～４ アルキル）、および－Ｎ（Ｃ _１～４ アルキル） _２ からなる群から選択されるか、
またはＲ ^Ｙ およびＲ ^Ｚ は、それらが結合している原子と一緒になって、一緒に連結されて、
（化５）

から選択される環を形成し、前記環は、任意選択的に、独立して、Ｃ _１～４ アルキル、Ｃ _１～４ ハロアルキル、ハロ、シアノ、－ＯＨ、－Ｏ－（Ｃ _１～４ アルキル）、－Ｎ（Ｃ _１～４ アルキル） _２ 、非置換Ｃ _６ ～Ｃ _１０ アリール、１～５個のハロ原子で置換されたＣ _６ ～Ｃ _１０ アリール、および－Ｏ－（Ｃ _１～４ ハロアルキル）から選択される１つ、２つ、または３つの基で置換され、Ｒ ^Ｙ およびＲ ^Ｚ が一緒に
（化６）

を形成する場合、Ｒ ^Ｊ は、－ＯＲ ^ｂ または＝Ｏであり、
Ｒ ^ｄ は、水素またはＣ _１ ～Ｃ _４ アルキルであり、
Ｒ ^ｍ は、Ｃ _１～４ アルキル、ハロ、およびシアノからなる群から選択され、
Ｊは、Ｃであり、
Ｘ、Ｙ、およびＺは、各々独立して、ＮまたはＣであり、任意の炭素原子の原子価は、必要に応じて、水素原子で満たされる、態様１～４４のいずれか一項に記載の方法。
（態様４６）
Ｒ ^ａ は、水素であり、
Ｒ ^ｂ は、－（Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル）－Ｒ ^ｃ であり、
Ｒ ^ｃ は、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ _２ 、非置換Ｃ _６～１０ アリール、置換Ｃ _６～１０ アリール、非置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）、ならびに置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）からなる群から選択され、置換として示されたＲ ^ｃ 部分は、１つ以上の置換基Ｅで置換され、各Ｅは、独立して、－ＯＨ、Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル、Ｃ _１ ～Ｃ _４ ハロアルキル、－Ｏ（Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル）、および－Ｏ（Ｃ _１ ～Ｃ _４ ハロアルキル）からなる群から選択され、
Ｒ ^Ｋ は、水素、非置換Ｃ _１～６ アルキル、－ＮＨ（Ｃ _１～４ アルキル）、－Ｎ（Ｃ _１～４ アルキル） _２ 、非置換Ｃ _６～１０ アリール、置換Ｃ _６～１０ アリール、非置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）、ならびに置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）からなる群から選択され、置換として示されたＲ ^Ｋ 部分は、１つ以上の置換基Ｑで置換され、各Ｑは、独立して、－ＯＨ、Ｃ _１～４ アルキル、Ｃ _１～４ ハロアルキル、ハロ、シアノ、－Ｏ－（Ｃ _１～４ アルキル）、および－Ｏ－（Ｃ _１～４ ハロアルキル）からなる群から選択され、
Ｒ ^Ｇ は、－（Ｃ _１～４ アルキル）－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ _２ であり、
Ｒ ^Ｙ およびＲ ^Ｚ は、各々独立して、不在であるか、もしくは水素、Ｃ _１～６ アルキル、および－ＮＨ（Ｃ _１～４ アルキル）からなる群から選択されるか、
またはＲ ^Ｙ およびＲ ^Ｚ は、それらが結合している原子と一緒になって、一緒に連結されて、
（化７）

から選択される環を形成し、前記環は、任意選択的に、独立して、Ｃ _１～４ アルキル、Ｃ _１～４ ハロアルキル、ハロ、シアノ、－ＯＨ、－Ｏ－（Ｃ _１～４ アルキル）、－Ｎ（Ｃ _１～４ アルキル） _２ 、非置換Ｃ _６ ～Ｃ _１０ アリール、１～５個のハロ原子で置換されたＣ _６ ～Ｃ _１０ アリール、および－Ｏ－（Ｃ _１～４ ハロアルキル）から選択される１つ、２つ、または３つの基で置換され、
Ｒ ^ｄ は、Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキルであり、
Ｒ ^ｍ は、シアノであり、
Ｘ、Ｙ、およびＺは、各々独立して、ＮまたはＣであり、任意の炭素原子の原子価は、必要に応じて、水素原子で満たされる、態様４５に記載の方法。
（態様４７）
Ｒ ^ａ は、水素であり、
Ｒ ^ｂ は、－ＣＨ _２ ＣＨ _２ －Ｒ ^ｃ であり、
Ｒ ^ｃ は、非置換フェニル、置換フェニル、インドリル、および－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ _２ からなる群から選択され、
Ｒ ^Ｋ は、水素、メチル、置換ピリジニル、非置換ベンゾチオフェニル、および－ＮＨ（Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル）からなる群から選択され、
Ｒ ^Ｇ は、－ＣＨ _２ ＣＨ _２ －Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ _２ であり、
Ｒ ^Ｙ は、－ＮＨ（Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル）であり、
Ｒ ^Ｚ は、不在であるか、もしくは水素であるか、
またはＲ ^Ｙ およびＲ ^Ｚ は、それらが結合している原子と一緒になって、一緒に連結されて、
（化８）

から選択される環を形成し、前記環は、任意選択的に、独立して、Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル、－Ｎ（Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル） _２ 、シアノ、非置換フェニル、および１～５個のハロ原子で置換されたフェニルから選択される１つ、２つ、または３つの基で置換され、
Ｒ ^ｄ は、Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキルであり、
Ｒ ^ｍ は、シアノであり、
Ｘは、ＮまたはＣＨである、態様４５に記載の方法。
（態様４８）
Ｒ ^ａ は、水素であり、
Ｒ ^ｂ は、－ＣＨ _２ ＣＨ _２ －Ｒ ^ｃ であり、
Ｒ ^ｃ は、非置換フェニル、置換フェニル、インドリル、および－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ _２ からなる群から選択され、前記置換フェニルは、１つの置換基Ｅで置換され、Ｅは、－ＯＨであり、
Ｒ ^Ｋ は、水素、メチル、置換ピリジニル、非置換ベンゾチオフェニル、および－ＮＨ（ｓｅｃ－ブチル）からなる群から選択され、前記置換ピリジニル部分は、１つの置換基Ｑで置換され、Ｑは、Ｃ _１～４ アルキル、ハロ、およびシアノからなる群から選択され、
Ｒ ^Ｇ は、－ＣＨ _２ ＣＨ _２ －Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ _２ であり、
Ｒ ^Ｙ は、－ＮＨ（イソプロピル）または－ＮＨ（ｓｅｃ－ブチル）であり、
Ｒ ^Ｚ は、不在であるか、もしくは水素であるか、
またはＲ ^Ｙ およびＲ ^Ｚ は、それらが結合している原子と一緒になって、一緒に連結されて、
（化９）

から選択される環を形成し、前記環は、任意選択的に、独立して、Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル、シアノ、非置換フェニル、および４－フルオロフェニルから選択される１つ、２つ、または３つの基で置換され、
Ｒ ^ｄ は、イソプロピルであり、
Ｒ ^ｍ は、シアノであり、
Ｘは、ＮまたはＣＨである、態様４５に記載の方法。
（態様４９）
前記式（Ｉ）の化合物が、式（Ｉ－Ａ）の構造を有し、
（化１０）

その薬学的に許容される塩を含み、式中、
Ｒ ^Ｊ は、－ＮＲ ^ａ Ｒ ^ｂ であり、
Ｒ ^ａ は、水素またはＣ _１ ～Ｃ _４ アルキルであり、
Ｒ ^ｂ は、Ｒ ^ｃ または－（Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル）－Ｒ ^ｃ であり、
Ｒ ^ｃ は、非置換Ｃ _６～１０ アリール、置換Ｃ _６～１０ アリール、非置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）、ならびに置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）からなる群から選択され、置換として示されたＲ ^ｃ 部分は、１つ以上の置換基Ｅで置換され、各Ｅは、独立して、－ＯＨ、Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル、Ｃ _１ ～Ｃ _４ ハロアルキル、－Ｏ（Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル）、および－Ｏ（Ｃ _１ ～Ｃ _４ ハロアルキル）からなる群から選択され、
Ｒ ^Ｋ は、水素、非置換Ｃ _１～６ アルキル、－ＮＨ（Ｃ _１～４ アルキル）、－Ｎ（Ｃ _１～４ アルキル） _２ 、非置換Ｃ _６～１０ アリール、置換Ｃ _６～１０ アリール、非置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）、ならびに置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）からなる群から選択され、置換として示されたＲ ^Ｋ 部分は、１つ以上の置換基Ｑで置換され、各Ｑは、独立して、－ＯＨ、Ｃ _１～４ アルキル、Ｃ _１～４ ハロアルキル、ハロ、シアノ、－Ｏ－（Ｃ _１～４ アルキル）、および－Ｏ－（Ｃ _１～４ ハロアルキル）からなる群から選択され、
ＹおよびＺは、各々、Ｃであり、
Ｘは、ＮまたはＣＨであり、
Ｗは、ＯまたはＳであり、
Ｒ ^ｅ は、水素またはＣ _１ ～Ｃ _４ アルキルである、態様４５に記載の方法。
（態様５０）
Ｒ ^ａ は、水素であり、
Ｒ ^ｂ は、－（Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル）－Ｒ ^ｃ であり、
Ｒ ^ｃ は、非置換Ｃ _６～１０ アリール、置換Ｃ _６～１０ アリール、非置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）、ならびに置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）からなる群から選択され、置換として示されたＲ ^ｃ 部分は、１つ以上の置換基Ｅで置換され、各Ｅは、独立して、－ＯＨ、Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル、Ｃ _１ ～Ｃ _４ ハロアルキル、－Ｏ（Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル）、および－Ｏ（Ｃ _１ ～Ｃ _４ ハロアルキル）からなる群から選択され、
Ｒ ^Ｋ は、非置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）、ならびに置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）からなる群から選択され、前記置換ヘテロアリールは、１つ以上の置換基Ｑで置換され、各Ｑは、独立して、－ＯＨ、Ｃ _１～４ アルキル、Ｃ _１～４ ハロアルキル、ハロ、シアノ、－Ｏ－（Ｃ _１～４ アルキル）、および－Ｏ－（Ｃ _１～４ ハロアルキル）からなる群から選択され、
Ｒ ^ｅ は、Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキルである、態様４９に記載の方法。
（態様５１）
Ｒ ^ａ は、水素であり、
Ｒ ^ｂ は、－（ＣＨ _２ －ＣＨ _２ ）－Ｒ ^ｃ であり、
Ｒ ^ｃ は、置換フェニルおよび非置換インドリルからなる群から選択され、前記置換フェニルは、１つの置換基Ｅで置換され、Ｅは、－ＯＨであり、
Ｒ ^Ｋ は、非置換ベンゾチオフェニルおよび置換ピリジニルからなる群から選択され、前記置換ピリジニルは、１つの置換基Ｑで置換され、Ｑは、Ｃ _１～４ アルキル、ハロ、およびシアノからなる群から選択され、
Ｒ ^ｅ は、イソプロピルである、態様４９に記載の方法。
（態様５２）
前記化合物が、
Ｎ－（２－（１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）－７－イソプロピル－２－（５－メチルピリジン－３－イル）チエノ［３，２－ｄ］ピリミジン－４－アミン、
５－（４－（（２－（１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）アミノ）－７－イソプロピルチエノ［３，２－ｄ］ピリミジン－２－イル）ニコチノニトリル、
Ｎ－（２－（１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）－２－（５－フルオロピリジン－３－イル）－７－イソプロピルチエノ［３，２－ｄ］ピリミジン－４－アミン、
４－（２－（（２－（ベンゾ［ｂ］チオフェン－３－イル）－７－イソプロピルチエノ［３，２－ｄ］ピリミジン－４－イル）アミノ）エチル）フェノール、
Ｎ－（２－（１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）－２－（５－フルオロピリジン－３－イル）フロ［３，２－ｄ］ピリミジン－４－アミン、
Ｎ－（２－（１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）－２－（５－メチルピリジン－３－イル）フロ［３，２－ｄ］ピリミジン－４－アミン、および
５－（４－（（２－（１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）アミノ）フロ［３，２－ｄ］ピリミジン－２－イル）ニコチノニトリルからなる群から選択されるか、またはその薬学的に許容される塩である、態様４９に記載の方法。
（態様５３）
前記式（Ｉ）の化合物が、式（Ｉ－Ｂ）の構造を有し、
（化１１）

その薬学的に許容される塩を含み、式中、
Ｒ ^ａ は、水素またはＣ _１ ～Ｃ _４ アルキルであり、
Ｒ ^ｂ は、Ｒ ^ｃ または－（Ｃ _１～４ アルキル）－Ｒ ^ｃ であり、
Ｒ ^ｃ は、－ＯＨ、－Ｏ（Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル）、－Ｏ（Ｃ _１ ～Ｃ _４ ハロアルキル）、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ _２ 、非置換Ｃ _６～１０ アリール、置換Ｃ _６～１０ アリール、非置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）、ならびに置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）からなる群から選択され、置換として示されたＲ ^ｃ 部分は、１つ以上の置換基Ｅで置換され、各Ｅは、独立して、－ＯＨ、Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル、Ｃ _１ ～Ｃ _４ ハロアルキル、－Ｏ（Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル）、および－Ｏ（Ｃ _１ ～Ｃ _４ ハロアルキル）からなる群から選択され、
Ｒ ^Ｋ は、水素、非置換Ｃ _１～６ アルキル、置換Ｃ _１～６ アルキル、－ＮＨ（Ｃ _１～４ アルキル）、－Ｎ（Ｃ _１～４ アルキル） _２ 、非置換Ｃ _６～１０ アリール、置換Ｃ _６～１０ アリール、非置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）、ならびに置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）からなる群から選択され、置換として示されたＲ ^Ｋ 部分は、１つ以上の置換基Ｑで置換され、各Ｑは、独立して、－ＯＨ、Ｃ _１～４ アルキル、Ｃ _１～４ ハロアルキル、ハロ、シアノ、－Ｏ－（Ｃ _１～４ アルキル）、および－Ｏ－（Ｃ _１～４ ハロアルキル）からなる群から選択され、
Ｒ ^Ｇ は、水素、Ｃ _１～４ アルキル、および－（Ｃ _１～４ アルキル）－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ _２ からなる群から選択され、
Ｒ ^ｆ は、水素、Ｃ _１～４ アルキル、非置換Ｃ _６ ～Ｃ _１０ アリール、および１～５個のハロ原子で置換されたＣ _６ ～Ｃ _１０ アリールからなる群から選択され、
Ｕは、ＮまたはＣＲ ^Ｕ であり、
Ｖは、ＳまたはＮＲ ^Ｖ であり、
Ｒ ^Ｕ は、水素、Ｃ _１～４ アルキル、ハロ、およびシアノからなる群から選択され、
Ｒ ^Ｖ は、水素またはＣ _１ ～Ｃ _４ アルキルであり、
ＵがＣＲ ^Ｕ であり、かつＶがＮＲ ^Ｖ である場合、Ｒ ^Ｕ は、Ｃ _１～４ アルキル、ハロ、およびシアノからなる群から選択され、
ＹおよびＺは、各々、Ｃであり、
Ｘは、ＮまたはＣＨである、態様４５に記載の方法。
（態様５４）
Ｒ ^ａ は、水素であり、
Ｒ ^ｂ は、－（Ｃ _１～４ アルキル）－Ｒ ^ｃ であり、
Ｒ ^ｃ は、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ _２ 、非置換Ｃ _６～１０ アリール、置換Ｃ _６～１０ アリール、非置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）、ならびに置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）からなる群から選択され、置換として示されたＲ ^ｃ 部分は、１つ以上の置換基Ｅで置換され、各Ｅは、独立して、－ＯＨ、Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル、Ｃ _１ ～Ｃ _４ ハロアルキル、－Ｏ（Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル）、および－Ｏ（Ｃ _１ ～Ｃ _４ ハロアルキル）からなる群から選択され、
Ｒ ^Ｋ は、非置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）、ならびに置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）からなる群から選択され、前記置換ヘテロアリールは、１つ以上の置換基Ｑで置換され、各Ｑは、独立して、－ＯＨ、Ｃ _１～４ アルキル、Ｃ _１～４ ハロアルキル、ハロ、シアノ、－Ｏ－（Ｃ _１～４ アルキル）、および－Ｏ－（Ｃ _１～４ ハロアルキル）からなる群から選択され、
Ｒ ^Ｇ は、Ｃ _１～４ アルキルまたは－（Ｃ _１～４ アルキル）－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ _２ であり、
Ｒ ^ｆ は、水素、非置換フェニル、および１～５個のハロ原子で置換されたフェニルからなる群から選択され、
ＹおよびＺは、各々、Ｃであり、
Ｘは、ＣＨである、態様５３に記載の方法。
（態様５５）
Ｒ ^ａ は、水素であり、
Ｒ ^ｂ は、－（ＣＨ _２ －ＣＨ _２ ）－Ｒ ^ｃ であり、
Ｒ ^ｃ は、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ _２ 、置換フェニルおよび非置換インドリルからなる群から選択され、前記置換フェニルは、１つの置換基Ｅで置換され、Ｅは、－ＯＨであり、
Ｒ ^Ｋ は、非置換ベンゾチオヘニルおよび置換ピリジニルからなる群から選択され、前記置換ピリジニルは、１つの置換基Ｑで置換され、Ｑは、Ｃ _１～４ アルキル、ハロ、およびシアノからなる群から選択され、
Ｒ ^Ｇ は、－（ＣＨ _２ ＣＨ _２ ）－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ _２ であり、
Ｒ ^ｆ は、水素、フェニル、およびフルオロフェニルからなる群から選択され、
ＹおよびＺは、各々、Ｃであり、
Ｘは、ＣＨである、態様５３に記載の方法。
（態様５６）
前記化合物が、
３－（（２－（ベンゾ［ｂ］チオフェン－３－イル）－９－イソプロピル－９Ｈ－プリン－６－イル）オキシ）プロパンアミド、
３－（２－（ベンゾ［ｂ］チオフェン－３－イル）－９－イソプロピル－６－オキソ－６，９－ジヒドロ－１ ^Ｈ －プリン－１－イル）プロパンアミド、
２－（ベンゾ［ｂ］チオフェン－３－イル）－４－（（４－ヒドロキシフェネチル）アミノ）－７－イソプロピル－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボニトリル、
Ｎ－（２－（１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）－２－メチル－６－フェニルチエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－アミン、および
Ｎ－（２－（１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－アミンからなる群から選択される化合物、またはその薬学的に許容される塩である、態様５３に記載の方法。
（態様５７）
前記式（Ｉ）の化合物が、式（Ｉ－Ｃ）の構造を有し、
（化１２）

その薬学的に許容される塩を含み、式中、
Ｒ ^Ｊ は、－ＮＲ ^ａ Ｒ ^ｂ であり、
Ｒ ^ａ は、水素またはＣ _１ ～Ｃ _４ アルキルであり、
Ｒ ^ｂ は、Ｒ ^ｃ または－（Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル）－Ｒ ^ｃ であり、
Ｒ ^ｃ は、非置換Ｃ _６～１０ アリール、置換Ｃ _６～１０ アリール、非置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）、ならびに置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）からなる群から選択され、置換として示されたＲ ^ｃ 部分は、１つ以上の置換基Ｅで置換され、各Ｅは、独立して、－ＯＨ、Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル、Ｃ _１ ～Ｃ _４ ハロアルキル、－Ｏ（Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル）、および－Ｏ（Ｃ _１ ～Ｃ _４ ハロアルキル）からなる群から選択され、
Ｒ ^Ｋ は、水素、非置換Ｃ _１～６ アルキル、－ＮＨ（Ｃ _１～４ アルキル）、－Ｎ（Ｃ _１～４ アルキル） _２ 、非置換Ｃ _６～１０ アリール、置換Ｃ _６～１０ アリール、非置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）、ならびに置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）からなる群から選択され、置換として示されたＲ ^Ｋ 部分は、１つ以上の置換基Ｑで置換され、各Ｑは、独立して、－ＯＨ、Ｃ _１～４ アルキル、Ｃ _１～４ ハロアルキル、ハロ、シアノ、－Ｏ－（Ｃ _１～４ アルキル）、および－Ｏ－（Ｃ _１～４ ハロアルキル）からなる群から選択され、
Ａは、ＮまたはＣＨであり、
Ｂは、ＮまたはＣＨであり、
Ｒ ^ｇ は、水素、Ｃ _１～４ アルキル、および－Ｎ（Ｃ _１～４ アルキル） _２ からなる群から選択され、
ＹおよびＺは、各々、Ｃであり、
Ｘは、ＮまたはＣＨである、態様４５に記載の方法。
（態様５８）
Ｒ ^ａ は、水素であり、
Ｒ ^ｂ は、－（Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル）－Ｒ ^ｃ であり、
Ｒ ^ｃ は、非置換Ｃ _６～１０ アリール、置換Ｃ _６～１０ アリール、非置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）、ならびに置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）からなる群から選択され、置換として示されたＲ ^ｃ 部分は、１つ以上の置換基Ｅで置換され、各Ｅは、独立して、－ＯＨ、Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル、Ｃ _１ ～Ｃ _４ ハロアルキル、－Ｏ（Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル）、および－Ｏ（Ｃ _１ ～Ｃ _４ ハロアルキル）からなる群から選択され、
Ｒ ^Ｋ は、－ＮＨ（Ｃ _１～４ アルキル）、非置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）、ならびに置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）からなる群から選択され、前記置換ヘテロアリールは、１つ以上の置換基Ｑで置換され、各Ｑは、独立して、－ＯＨ、Ｃ _１～４ アルキル、Ｃ _１～４ ハロアルキル、ハロ、シアノ、－Ｏ－（Ｃ _１～４ アルキル）、および－Ｏ－（Ｃ _１～４ ハロアルキル）からなる群から選択され、
Ｒ ^ｇ は、水素または－Ｎ（Ｃ _１～４ アルキル） _２ である、態様５７に記載の方法。
（態様５９）
Ｒ ^ａ は、水素であり、
Ｒ ^ｂ は、－（Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル）－Ｒ ^ｃ であり、
Ｒ ^ｃ は、置換フェニルおよび非置換インドリルからなる群から選択され、前記置換フェニルは、１つ以上の置換基Ｅで置換され、各Ｅは、独立して、－ＯＨ、Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル、Ｃ _１ ～Ｃ _４ ハロアルキル、－Ｏ（Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル）、および－Ｏ（Ｃ _１ ～Ｃ _４ ハロアルキル）からなる群から選択され、
Ｒ ^Ｋ は、－ＮＨ（Ｃ _１～４ アルキル）、非置換ベンゾチオフェニル、および置換ピリジニルからなる群から選択され、前記置換ピリジニルは、１つ以上の置換基Ｑで置換され、各Ｑは、独立して、－ＯＨ、Ｃ _１～４ アルキル、Ｃ _１～４ ハロアルキル、ハロ、シアノ、－Ｏ－（Ｃ _１～４ アルキル）、および－Ｏ－（Ｃ _１～４ ハロアルキル）からなる群から選択され、
Ｒ ^ｇ は、水素または－Ｎ（Ｃ _１～４ アルキル） _２ である、態様５７に記載の方法。
（態様６０）
Ｒ ^ａ は、水素であり、
Ｒ ^ｂ は、－（ＣＨ _２ ＣＨ _２ ）－Ｒ ^ｃ であり、
Ｒ ^ｃ は、置換フェニルおよび非置換インドリルからなる群から選択され、前記置換フェニルは、１つの置換基Ｅで置換され、Ｅは、－ＯＨであり、
Ｒ ^Ｋ は、－ＮＨ（ｓｅｃ－ブチル）、非置換ベンゾチオヘニル、および置換ピリジニルからなる群から選択され、前記置換ピリジニルは、１つ以上の置換基Ｑで置換され、各Ｑは、独立して、Ｃ _１～４ アルキル、ハロ、およびシアノからなる群から選択され、
Ｒ ^ｇ は、水素または－Ｎ（ＣＨ _３ ） _２ である、態様５７に記載の方法。
（態様６１）
前記化合物が、
４－（２－（（２－（ベンゾ［ｂ］チオフェン－３－イル）－８－（ジメチルアミノ）ピリミド［５，４－ｄ］ピリミジン－４－イル）アミノ）エチル）フェノール、
Ｎ－（２－（１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）－２－（５－フルオロピリジン－３－イル）キナゾリン－４－アミン、
５－（４－（（２－（１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）アミノ）キナゾリン－２－イル）ニコチノニトリル、および
Ｎ ^４ －（２－（１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）－Ｎ ^２ －（ｓｅｃ－ブチル）キナゾリン－２，４－ジアミンからなる群から選択される化合物、またはその薬学的に許容される塩である、態様５７に記載の方法。
（態様６２）
前記式（Ｉ）の化合物が、式（Ｉ－Ｄ）の構造を有し、
（化１３）

その薬学的に許容される塩を含み、式中、
Ｒ ^Ｊ は、－ＮＲ ^ａ Ｒ ^ｂ であり、
Ｒ ^ａ は、水素またはＣ _１ ～Ｃ _４ アルキルであり、
Ｒ ^ｂ は、Ｒ ^ｃ または－（Ｃ _１～４ アルキル）－Ｒ ^ｃ であり、
Ｒ ^ｃ は、非置換Ｃ _６～１０ アリール、置換Ｃ _６～１０ アリール、非置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）、ならびに置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）からなる群から選択され、置換として示されたＲ ^ｃ 部分は、１つ以上の置換基Ｅで置換され、各Ｅは、独立して、－ＯＨ、Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル、Ｃ _１ ～Ｃ _４ ハロアルキル、－Ｏ（Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル）、および－Ｏ（Ｃ _１ ～Ｃ _４ ハロアルキル）からなる群から選択され、
Ｒ ^Ｋ は、非置換Ｃ _６～１０ アリール、置換Ｃ _６～１０ アリール、非置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）、ならびに置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）からなる群から選択され、置換として示されたＲ ^Ｋ 部分は、１つ以上の置換基Ｑで置換され、各Ｑは、独立して、－ＯＨ、Ｃ _１～４ アルキル、Ｃ _１～４ ハロアルキル、ハロ、シアノ、－Ｏ－（Ｃ _１～４ アルキル）、および－Ｏ－（Ｃ _１～４ ハロアルキル）からなる群から選択され、
Ｒ ^ｈ は、水素またはＣ _１～４ アルキルであり、
Ｄは、ＮまたはＣＨであり、
Ｙは、Ｎであり、
Ｚは、Ｃであり、
Ｘは、ＮまたはＣＨである、態様４５に記載の方法。
（態様６３）
Ｒ ^ａ は、水素であり、
Ｒ ^ｂ は、－（Ｃ _１～４ アルキル）－Ｒ ^ｃ であり、
Ｒ ^ｃ は、非置換Ｃ _６～１０ アリール、置換Ｃ _６～１０ アリール、非置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）、ならびに置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）からなる群から選択され、置換として示されたＲ ^ｃ 部分は、１つ以上の置換基Ｅで置換され、各Ｅは、独立して、－ＯＨ、Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル、Ｃ _１ ～Ｃ _４ ハロアルキル、－Ｏ（Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル）、および－Ｏ（Ｃ _１ ～Ｃ _４ ハロアルキル）からなる群から選択され、
Ｒ ^Ｋ は、非置換Ｃ _６～１０ アリール、置換Ｃ _６～１０ アリール、非置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）、ならびに置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）からなる群から選択され、置換として示されたＲ ^Ｋ 部分は、１つ以上の置換基Ｑで置換され、各Ｑは、独立して、－ＯＨ、Ｃ _１～４ アルキル、Ｃ _１～４ ハロアルキル、ハロ、シアノ、－Ｏ－（Ｃ _１～４ アルキル）、および－Ｏ－（Ｃ _１～４ ハロアルキル）からなる群から選択され、
Ｒ ^ｈ は、水素またはＣ _１～４ アルキルである、態様６２に記載の方法。
（態様６４）
Ｒ ^ａ は、水素であり、
Ｒ ^ｂ は、－（Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル）－Ｒ ^ｃ であり、
Ｒ ^ｃ は、置換フェニルおよび非置換インドリルからなる群から選択され、前記置換フェニルは、１つ以上の置換基Ｅで置換され、各Ｅは、独立して、－ＯＨ、Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル、Ｃ _１ ～Ｃ _４ ハロアルキル、－Ｏ（Ｃ _１ ～Ｃ _４ アルキル）、および－Ｏ（Ｃ _１ ～Ｃ _４ ハロアルキル）からなる群から選択され、
Ｒ ^Ｋ は、非置換ベンゾチオフェニルであり、
Ｒ ^ｈ は、水素またはＣ _１～４ アルキルである、態様６２に記載の方法。
（態様６５）
Ｒ ^ａ は、水素であり、
Ｒ ^ｂ は、－（ＣＨ _２ －ＣＨ _２ ）－Ｒ ^ｃ であり、
Ｒ ^ｃ は、置換フェニルおよび非置換インドリルからなる群から選択され、前記置換フェニルは、１つの置換基Ｅで置換され、Ｅは、－ＯＨであり、
Ｒ ^Ｋ は、非置換ベンゾチオフェニルであり、
Ｒ ^ｈ は、水素またはＣ _１～４ アルキルである、態様６２に記載の方法。
（態様６６）
前記化合物が、
Ｎ－（２－（１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）－６－（ベンゾ［ｂ］チオフェン－３－イル）－３－イソプロピルイミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－アミン、および
４－（２－（（６－（ベンゾ［ｂ］チオフェン－３－イル）－３－イソプロピルイミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－イル）アミノ）エチル）フェノールからなる群から選択されるか、またはその薬学的に許容される塩である、態様６２に記載の方法。
（態様６７）
前記化合物が、
５－（２－（（２－（１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）アミノ）－６－（ｓｅｃ－ブチルアミノ）ピリミジン－４－イル）ニコチノニトリル、
４－（２－（（２－（ベンゾ［ｂ］チオフェン－３－イル）－６－（イソプロピルアミノ）ピリミジン－４－イル）アミノ）エチル）フェノール、
４－（２－（（２－（ベンゾ［ｂ］チオフェン－３－イル）－７－イソプロピル－６，７－ジヒドロ－５Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル）アミノ）エチル）フェノール、および
２－（ベンゾ［ｂ］チオフェン－３－イル）－４－（（４－ヒドロキシフェネチル）アミノ）－７－イソプロピル－５，７－ジヒドロ－６Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－６－オンからなる群から選択されるか、またはその薬学的に許容される塩である、態様６５に記載の方法。
（態様６８）
前記第１の培地が、ＬＭＷＨを含まない、態様１～６７のいずれか一項に記載の方法。
（態様６９）
前記第１の培地が、脱硫酸化グリコサミノグリカンを含まない、態様１～６８のいずれか一項に記載の方法。
（態様７０）
前記第１の培地が、Ｆｌｔ－３Ｌ、ＳＣＦ、ＩＬ－６、ＩＬ－７、Ｇ－ＣＳＦ、およびＧＭ－ＣＳＦの各々を含む、態様１～６９のいずれか一項に記載の方法。
（態様７１）
態様１～７０のいずれか一項に記載の方法によって産生されるナチュラルキラー細胞の集団。
（態様７２）
態様１～７０のいずれか一項に記載の方法によって産生されるＩＬＣ３細胞の集団。
（態様７３）
腫瘍細胞の増殖を抑制する方法であって、前記腫瘍細胞を、複数のナチュラルキラー細胞および／またはＩＬＣ３細胞と接触させることを含み、前記ナチュラルキラー細胞が、態様７０のいずれか一項に記載の方法によって産生される、方法。
（態様７４）
前記接触が、インビトロで行われる、態様７３に記載の方法。
（態様７５）
前記接触が、インビボで行われる、態様７４に記載の方法。
（態様７６）
前記腫瘍細胞が、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）細胞である、態様７３～７５のいずれか一項に記載の方法。
（態様７７）
前記腫瘍細胞が、乳癌細胞、頭頸部癌細胞、または肉腫細胞である、態様７３～７５のいずれか一項に記載の方法。
（態様７８）
前記腫瘍細胞が、原発性腺管癌細胞、白血病細胞、急性Ｔ細胞白血病細胞、慢性骨髄性リンパ腫（ＣＭＬ）細胞、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）細胞、肺癌細胞、結腸腺癌細胞、組織球性リンパ腫細胞、大腸癌細胞、大腸腺癌細胞、または網膜芽腫細胞である、態様７３～７５のいずれか一項に記載の方法。
（態様７９）
前記腫瘍細胞が、固形腫瘍細胞である、態様７３～７５のいずれか一項に記載の方法。
（態様８０）
前記腫瘍細胞が、肝臓腫瘍細胞である、態様７３～７５のいずれか一項に記載の方法。
（態様８１）
前記腫瘍細胞が、肺腫瘍細胞である、態様７３～７５のいずれか一項に記載の方法。
（態様８２）
前記腫瘍細胞が、膵腫瘍細胞である、態様７３～７５のいずれか一項に記載の方法。
（態様８３）
前記腫瘍細胞が、腎臓腫瘍細胞である、態様７３～７５のいずれか一項に記載の方法。
（態様８４）
前記腫瘍細胞が、多形神経膠芽腫（ＧＢＭ）細胞である、態様７３～７５のいずれか一項に記載の方法。
（態様８５）
前記ナチュラルキラー細胞が、前記接触または前記投与の前に凍結保存されている、態様７３～８４のいずれか一項に記載の方法。
（態様８６）
前記ナチュラルキラー細胞が、前記接触または前記投与の前に凍結保存されていない、態様７３～８４のいずれか一項に記載の方法。
（態様８７）
ＦＧＦＢＰ２、ＧＺＭＨ、ＣＣＬ３Ｌ３、ＧＺＭＭ、ＣＸＣＲ４、ＺＥＢ２、ＫＬＦ２、ＬＩＴＡＦ、ＲＯＲＡ、ＬＹＡＲ、ＣＮＯＴ１、ＩＦＮＧ、ＤＵＳＰ２、ＡＴＧ２Ａ、ＣＤ７、ＰＭＡＩＰ１、ＰＰＰ２Ｒ５Ｃ、ＮＲ４Ａ２、ＺＦＰ３６Ｌ２、ＰＩＫ３Ｒ１、ＫＬＲＦ１、ＳＮＨＧ９、ＭＴ２Ａ、ＲＧＳ２、ＣＨＤ１、ＤＵＳＰ１、ＥＭＬ４、ＺＦＰ３６、ＺＣ３Ｈ１２Ａ、ＤＮＡＪＢ６、ＳＢＤＳ、ＩＲＦ１、ＴＳＣ２２Ｄ３、ＴＳＰＹＬ２、ＰＮＲＣ１、ＩＳＣＡ１、ＪＵＮＢ、ＷＨＡＭＭ、ＲＩＣＴＯＲ、ＴＮＦＡＩＰ３、ＥＰＣ１、ＭＶＤ、ＣＬＫ１、ＡＲＬ４Ｃ、ＲＥＬ、ＫＭＴ２Ｅ、ＹＰＥＬ５、ＡＭＤ１、ＢＴＧ２、およびＩＤＳからなる群から選択される１つ以上のマーカーの発現であって、末梢血ナチュラルキラー細胞における前記マーカーの発現よりも低い発現、ならびに／またはＮＤＦＩＰ２、ＬＩＮＣ００９９６、ＭＡＬ、ＣＣＬ１、ＭＢ、ＳＰＩＮＫ２、Ｃ１５ｏｒｆ４８、ＣＡＭＫ１、ＫＬＲＣ１、ＴＮＦＳＦ１０、ＴＮＦＲＳＦ１８、ＩＬ３２、ＣＡＰＧ、ＡＣ０９２５８０．４、Ｓ１００Ａ１１、ＴＮＦＲＳＦ４、ＥＮＯ１、ＦＣＥＲ１Ｇ、ＣＣＮＤ２、ＫＲＴ８１、ＭＲＰＳ６、ＡＮＸＡ２、ＰＴＧＥＲ２、ＧＬＯ１、ＨＡＶＣＲ２、ＰＹＣＡＲＤ、ＬＡＴ２、ＳＬＣ１６Ａ３、ＣＯＴＬ１、ＰＫＭ、ＴＡＬＤＯ１、ＣＤ９６、ＮＣＲ３、ＫＲＴ８６、ＳＴＭＮ１、ＬＴＢ、ＡＲＰＣ１Ｂ、ＡＲＰＣ５、ＦＫＢＰ１Ａ、ＴＩＭＰ１、ＧＺＭＫ、ＣＤ５９、ＰＧＫ１、ＲＧＳ１０、ＥＶＬ、ＲＡＣ２、ＬＧＡＬＳ１、ＩＴＧＢ７、ＴＵＢＢ、ＰＧＡＭ１、ＰＲＦ１、ＧＺＭＢ、ＩＬ２ＲＢ、ＫＬＲＣ２、およびＫＬＲＢ１からなる群から選択される１つ以上のマーカーの発現であって、末梢血ナチュラルキラー細胞における前記マーカーの発現よりも高い発現、を特徴とするナチュラルキラー細胞。
（態様８８）
ＦＧＦＢＰ２、ＧＺＭＨ、ＣＣＬ３Ｌ３、ＧＺＭＭ、ＣＸＣＲ４、ＺＥＢ２、ＫＬＦ２、ＬＩＴＡＦ、ＲＯＲＡ、ＬＹＡＲ、ＣＮＯＴ１、ＩＦＮＧ、ＤＵＳＰ２、ＡＴＧ２Ａ、ＣＤ７、ＰＭＡＩＰ１、ＰＰＰ２Ｒ５Ｃ、ＮＲ４Ａ２、ＺＦＰ３６Ｌ２、ＰＩＫ３Ｒ１、ＫＬＲＦ１、ＳＮＨＧ９、ＭＴ２Ａ、ＲＧＳ２、ＣＨＤ１、ＤＵＳＰ１、ＥＭＬ４、ＺＦＰ３６、ＺＣ３Ｈ１２Ａ、ＤＮＡＪＢ６、ＳＢＤＳ、ＩＲＦ１、ＴＳＣ２２Ｄ３、ＴＳＰＹＬ２、ＰＮＲＣ１、ＩＳＣＡ１、ＪＵＮＢ、ＷＨＡＭＭ、ＲＩＣＴＯＲ、ＴＮＦＡＩＰ３、ＥＰＣ１、ＭＶＤ、ＣＬＫ１、ＡＲＬ４Ｃ、ＲＥＬ、ＫＭＴ２Ｅ、ＹＰＥＬ５、ＡＭＤ１、ＢＴＧ２、およびＩＤＳからなる群から選択される１つ以上のマーカーの発現であって、末梢血ナチュラルキラー細胞における前記マーカーの発現よりも低い発現、を特徴とする、態様８７に記載のナチュラルキラー細胞。
（態様８９）
ＦＧＦＢＰ２、ＧＺＭＨ、ＣＣＬ３Ｌ３、ＧＺＭＭ、ＣＸＣＲ４、ＺＥＢ２、ＫＬＦ２、ＬＩＴＡＦ、ＲＯＲＡ、ＬＹＡＲ、ＣＮＯＴ１、ＩＦＮＧ、ＤＵＳＰ２、ＡＴＧ２Ａ、ＣＤ７、ＰＭＡＩＰ１、ＰＰＰ２Ｒ５Ｃ、ＮＲ４Ａ２、ＺＦＰ３６Ｌ２、ＰＩＫ３Ｒ１、ＫＬＲＦ１、ＳＮＨＧ９、ＭＴ２Ａ、ＲＧＳ２、ＣＨＤ１、ＤＵＳＰ１、ＥＭＬ４、ＺＦＰ３６、ＺＣ３Ｈ１２Ａ、ＤＮＡＪＢ６、ＳＢＤＳ、ＩＲＦ１、ＴＳＣ２２Ｄ３、ＴＳＰＹＬ２、ＰＮＲＣ１、ＩＳＣＡ１、ＪＵＮＢ、ＷＨＡＭＭ、ＲＩＣＴＯＲ、ＴＮＦＡＩＰ３、ＥＰＣ１、ＭＶＤ、ＣＬＫ１、ＡＲＬ４Ｃ、ＲＥＬ、ＫＭＴ２Ｅ、ＹＰＥＬ５、ＡＭＤ１、ＢＴＧ２、およびＩＤＳからなる群から選択される２、３、４、５、６、７、８、９、１０個、またはそれ以上のマーカーの発現が、末梢血ナチュラルキラー細胞における前記マーカーの発現よりも低い、態様８７または態様８８に記載のナチュラルキラー細胞。
（態様９０）
ＮＤＦＩＰ２、ＬＩＮＣ００９９６、ＭＡＬ、ＣＣＬ１、ＭＢ、ＳＰＩＮＫ２、Ｃ１５ｏｒｆ４８、ＣＡＭＫ１、ＫＬＲＣ１、ＴＮＦＳＦ１０、ＴＮＦＲＳＦ１８、ＩＬ３２、ＣＡＰＧ、ＡＣ０９２５８０．４、Ｓ１００Ａ１１、ＴＮＦＲＳＦ４、ＥＮＯ１、ＦＣＥＲ１Ｇ、ＣＣＮＤ２、ＫＲＴ８１、ＭＲＰＳ６、ＡＮＸＡ２、ＰＴＧＥＲ２、ＧＬＯ１、ＨＡＶＣＲ２、ＰＹＣＡＲＤ、ＬＡＴ２、ＳＬＣ１６Ａ３、ＣＯＴＬ１、ＰＫＭ、ＴＡＬＤＯ１、ＣＤ９６、ＮＣＲ３、ＫＲＴ８６、ＳＴＭＮ１、ＬＴＢ、ＡＲＰＣ１Ｂ、ＡＲＰＣ５、ＦＫＢＰ１Ａ、ＴＩＭＰ１、ＧＺＭＫ、ＣＤ５９、ＰＧＫ１、ＲＧＳ１０、ＥＶＬ、ＲＡＣ２、ＬＧＡＬＳ１、ＩＴＧＢ７、ＴＵＢＢ、ＰＧＡＭ１、ＰＲＦ１、ＧＺＭＢ、ＩＬ２ＲＢ、ＫＬＲＣ２、およびＫＬＲＢ１からなる群から選択される１つ以上のマーカーの発現であって、末梢血ナチュラルキラー細胞における前記マーカーの発現よりも高い発現、を特徴とする、態様８７に記載のナチュラルキラー細胞。
（態様９１）
ＮＤＦＩＰ２、ＬＩＮＣ００９９６、ＭＡＬ、ＣＣＬ１、ＭＢ、ＳＰＩＮＫ２、Ｃ１５ｏｒｆ４８、ＣＡＭＫ１、ＫＬＲＣ１、ＴＮＦＳＦ１０、ＴＮＦＲＳＦ１８、ＩＬ３２、ＣＡＰＧ、ＡＣ０９２５８０．４、Ｓ１００Ａ１１、ＴＮＦＲＳＦ４、ＥＮＯ１、ＦＣＥＲ１Ｇ、ＣＣＮＤ２、ＫＲＴ８１、ＭＲＰＳ６、ＡＮＸＡ２、ＰＴＧＥＲ２、ＧＬＯ１、ＨＡＶＣＲ２、ＰＹＣＡＲＤ、ＬＡＴ２、ＳＬＣ１６Ａ３、ＣＯＴＬ１、ＰＫＭ、ＴＡＬＤＯ１、ＣＤ９６、ＮＣＲ３、ＫＲＴ８６、ＳＴＭＮ１、ＬＴＢ、ＡＲＰＣ１Ｂ、ＡＲＰＣ５、ＦＫＢＰ１Ａ、ＴＩＭＰ１、ＧＺＭＫ、ＣＤ５９、ＰＧＫ１、ＲＧＳ１０、ＥＶＬ、ＲＡＣ２、ＬＧＡＬＳ１、ＩＴＧＢ７、ＴＵＢＢ、ＰＧＡＭ１、ＰＲＦ１、ＧＺＭＢ、ＩＬ２ＲＢ、ＫＬＲＣ２、およびＫＬＲＢ１からなる群から選択される２、３、４、５、６、７、８、９、１０個、またはそれ以上のマーカーの発現が、末梢血ナチュラルキラー細胞における前記マーカーの発現よりも高い、態様８７～９０のいずれか一項に記載のナチュラルキラー細胞。
（態様９２）
前記ナチュラルキラー細胞が、造血幹細胞由来のナチュラルキラー細胞である、態様８７～９１のいずれか一項に記載のナチュラルキラー細胞。
（態様９３）
前記ナチュラルキラー細胞が、ＣＤ３４＋造血幹細胞由来のナチュラルキラー細胞である、態様８７～９２のいずれか一項に記載のナチュラルキラー細胞。
（態様９４）
前記造血幹細胞が、胎盤由来の造血幹細胞である、態様９２または態様９３に記載のナチュラルキラー細胞。
（態様９５）
前記ナチュラルキラー細胞が、態様１～７０のいずれか一項に記載の方法によって調製される、態様８７～９４のいずれか一項に記載のナチュラルキラー細胞。
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The present application provides inventions of the following aspects.
(Aspect 1)
A method of producing a cell population comprising natural killer cells, comprising:
(a) culturing hematopoietic stem or progenitor cells in a first medium comprising a stem cell mobilizing agent and thrombopoietin (Tpo) to produce a first cell population;
(b) culturing the first cell population in a second medium lacking Tpo containing a stem cell mobilizing agent and interleukin-15 (IL-15) to produce a second cell population;
(c) culturing the second cell population in a third medium comprising IL-2 and IL-15 and lacking each of a stem cell mobilizing agent and low molecular weight heparin (LMWH) to produce a third cell population; and
The method, wherein said third cell population comprises natural killer cells that are CD56+, CD3-, and wherein at least 80% of said natural killer cells are viable.
(Aspect 2)
2. The method of aspect 1, wherein said third cell population comprises natural killer cells that are CD94+ or CD16+.
(Aspect 3)
2. The method of embodiment 1, wherein said third cell population comprises natural killer cells that are CD94- or CD16-.
(Aspect 4)
2. The method of aspect 1, wherein said third cell population comprises natural killer cells that are CD94+ and CD16+.
(Aspect 5)
2. The method of embodiment 1, wherein said third cell population comprises natural killer cells that are CD94- and CD16-.
(Aspect 6)
A method of producing a cell population comprising natural killer cells, comprising:
(a) culturing hematopoietic stem or progenitor cells in a first medium comprising a stem cell mobilizing agent and thrombopoietin (Tpo) to produce a first cell population;
(b) culturing the first cell population in a second medium lacking Tpo containing a stem cell mobilizing agent and interleukin-15 (IL-15) to produce a second cell population;
(c) culturing the second cell population in a third medium containing IL-2 and IL-15 and lacking LMWH to produce a third cell population;
The method, wherein said third cell population comprises natural killer cells that are CD56+, CD3- and CD11a+.
(Aspect 7)
7. The method of aspect 6, wherein said third medium lacks stem cell factor (SCF).
(Aspect 8)
8. The method of aspect 7, wherein said third medium lacks LMWH.
(Aspect 9)
(d) isolating CD11a+ cells from said third cell population to produce a fourth cell population;
8. The method of aspect 7, wherein said fourth cell population comprises natural killer cells that are CD56+, CD3- and CD11a+.
(Mode 10)
10. The method of any one of aspects 6-9, wherein said natural killer cells express perforin and EOMES.
(Aspect 11)
11. The method of any one of aspects 6-10, wherein said natural killer cells do not express either RORγt or IL1R1.
(Aspect 12)
A method of producing a cell population comprising ILC3 cells, comprising:
(a) culturing hematopoietic stem or progenitor cells in a first medium comprising a stem cell mobilizing agent and thrombopoietin (Tpo) to produce a first cell population;
(b) culturing the first cell population in a second medium lacking Tpo containing a stem cell mobilizing agent and interleukin-15 (IL-15) to produce a second cell population;
(c) culturing the second cell population in a third medium containing IL-2 and IL-15 and lacking LMWH to produce a third cell population;
The method, wherein said third cell population comprises ILC3 cells that are CD56+, CD3- and CD11a-.
(Aspect 13)
13. The method of aspect 12, wherein said third medium comprises a stem cell mobilizing agent.
(Aspect 14)
13. The method of aspect 12, wherein said third medium comprises SCF.
(Aspect 15)
13. The method of aspect 12, wherein said third medium comprises a stem cell mobilizing agent and SCF.
(Aspect 16)
A method of producing a cell population comprising ILC3 cells, comprising:
(a) culturing hematopoietic stem or progenitor cells in a first medium comprising a stem cell mobilizing agent and thrombopoietin (Tpo) to produce a first cell population;
(b) culturing the first cell population in a second medium lacking Tpo containing a stem cell mobilizing agent and interleukin-15 (IL-15) to produce a second cell population;
(c) culturing said second cell population in a third medium comprising IL-2 and IL-15 and lacking each of a stem cell mobilizing agent and LMWH to produce a third cell population;
(d) isolating CD11a− cells from the third cell population to produce a fourth cell population;
The method, wherein said fourth cell population comprises ILC3 cells that are CD56+, CD3- and CD11a-.
(Aspect 17)
17. The method of any one of aspects 12-16, wherein said ILC3 cells express RORγt and IL1R1.
(Aspect 18)
18. The method of any one of aspects 12-17, wherein said ILC3 cells do not express either perforin or EOMES.
(Aspect 19)
19. The method of any one of aspects 1-18, wherein said third medium lacks desulfated glycosaminoglycans.
(Aspect 20)
20. The method of any one of aspects 1-19, wherein said hematopoietic stem or progenitor cells are mammalian cells.
(Aspect 21)
21. The method of aspect 20, wherein said hematopoietic stem or progenitor cells are human cells.
(Aspect 22)
21. The method of aspect 20, wherein said hematopoietic stem or progenitor cells are primate cells.
(Aspect 23)
21. The method of aspect 20, wherein said hematopoietic stem or progenitor cells are canine cells.
(Aspect 24)
21. The method of aspect 20, wherein said hematopoietic stem or progenitor cells are rodent cells.
(Aspect 25)
21. The method of aspect 20, wherein said hematopoietic stem or progenitor cells are cells from mammals other than humans, primates, dogs, or rodents.
(Aspect 26)
26. The method of any one of aspects 1-25, wherein said hematopoietic stem or progenitor cells are CD34+ hematopoietic stem cells.
(Aspect 27)
27. The method of any one of aspects 1-26, wherein said hematopoietic stem or progenitor cells are placental cells.
(Aspect 28)
28. The method of aspect 27, wherein said placental cells are obtained or obtainable from human placental perfusate.
(Aspect 29)
28. The method of aspect 27, wherein said placental cells are obtained or can be obtained from nucleated cells isolated from human placental perfusate.
(Aspect 30)
27. The method of any one of aspects 1-26, wherein said hematopoietic stem or progenitor cells are obtained or obtainable from cord blood.
(Aspect 31)
27. The method of any one of aspects 1-26, wherein said hematopoietic stem or progenitor cells are fetal liver cells.
(Aspect 32)
27. The method of any one of aspects 1-26, wherein said hematopoietic stem or progenitor cells are mobilized peripheral blood cells.
(Aspect 33)
27. The method of any one of aspects 1-26, wherein said hematopoietic stem or progenitor cells are myeloid cells.
(Aspect 34)
34. The method of any one of aspects 1-33, wherein said Tpo is present in said first medium at a concentration of 1 ng/mL to 50 ng/mL.
(Aspect 35)
35. The method of aspect 34, wherein said Tpo is present in said first medium at a concentration of 20 ng/mL to 30 ng/mL.
(Aspect 36)
35. The method of aspect 34, wherein said Tpo is present in said first medium at a concentration of about 25 ng/mL.
(Aspect 37)
37. The method of any one of aspects 1-36, wherein said IL-15 is present in said second medium at a concentration of 1 ng/mL to 50 ng/mL.
(Aspect 38)
38. The method of aspect 37, wherein said IL-15 is present in said second medium at a concentration of 10 ng/mL to 30 ng/mL.
(Aspect 39)
38. The method of aspect 37, wherein said IL-15 is present in said second medium at a concentration of about 20 ng/mL.
(Aspect 40)
said IL-2 is present in said third medium at a concentration of 10 U/mL to 10,000 U/mL and said IL-15 is present in said third medium at a concentration of 1 ng/mL to 50 ng/mL 40. The method of any one of aspects 1-39.
(Aspect 41)
The IL-2 is present in the third medium at a concentration of 300 U/mL to 3,000 U/mL and the IL-15 is present in the third medium at a concentration of 10 ng/mL to 30 ng/mL. 40. The method of any one of aspects 1-39.
(Aspect 42)
Embodiments 1-39, wherein said IL-2 is present in said third medium at a concentration of about 1,000 U/mL and said IL-15 is present in said third medium at a concentration of about 20 ng/mL The method according to any one of .
(Aspect 43)
43. Any one of aspects 1-42, wherein said Tpo, IL-2 and IL-15 are not included in undefined components of said first medium, second medium or third medium. the method of.
(Aspect 44)
43. The method of any one of aspects 1-42, wherein said Tpo, IL-2 and IL-15 are not contained in serum.
(Aspect 45)
The stem cell mobilizing agent is a compound of formula (I) having the structure
(Chem. 1)

including pharmaceutically acceptable salts thereof, wherein
each
(Chemical 2)

independently represents a single or double bond,
R. ^J. is -NR ^a R. ^b , -OR ^b , and =O, and R ^J. joins G and J if =O
(Chemical 3)

represents a single bond, G is N, N is R ^G. and otherwise joins G and J
(Chem. 4)

represents a double bond, G is N,
R. ^a is hydrogen or C ₁ ～C ₄ is an alkyl,
R. ^b is R ^c or -(C ₁ ～C ₄ alkyl)-R ^c and
R. ^c is —OH, —O(C ₁ ～C ₄ alkyl), —O(C ₁ ～C ₄ haloalkyl), —C(=O)NH ₂ , unsubstituted C _{6 to 10} aryl, substituted C _{6 to 10} aryl, unsubstituted 5- to 10-membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S), and substituted 5- to 10-membered heteroaryl (from O, N, and S having 1 to 4 atoms selected from the group consisting of R ^c The moiety is substituted with one or more substituents E, each E independently -OH, C ₁ ～C ₄ alkyl, C ₁ ～C ₄ haloalkyl, —O(C ₁ ～C ₄ alkyl), and —O(C ₁ ～C ₄ haloalkyl);
R. ^K. is hydrogen, unsubstituted C _{1 to 6} alkyl, substituted C _{1 to 6} Alkyl, —NH(C _{1 to 4} alkyl), -N(C _{1 to 4} alkyl) ₂ , unsubstituted C _{6 to 10} aryl, substituted C _{6 to 10} aryl, unsubstituted 5- to 10-membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S), and substituted 5- to 10-membered heteroaryl (from O, N, and S having 1 to 4 atoms selected from the group consisting of R ^K. The moiety is substituted with one or more substituents Q, each Q independently -OH, C _{1 to 4} alkyl, C _{1 to 4} haloalkyl, halo, cyano, —O—(C _{1 to 4} alkyl), and —O—(C _{1 to 4} haloalkyl);
R. ^G. is hydrogen, C _{1 to 4} alkyl, and -(C _{1 to 4} alkyl)-C(=O)NH ₂ is selected from the group consisting of
R. ^Y. and R ^Z. are each independently absent or hydrogen, halo, C _{1 to 6} alkyl, —OH, —O—(C _{1 to 4} alkyl), —NH(C _{1 to 4} alkyl), and —N(C _{1 to 4} alkyl) ₂ or is selected from the group consisting of
or R ^Y. and R ^Z. are linked together, together with the atoms to which they are bonded,
(Chem. 5)

forming a ring selected from, said ring optionally independently being C _{1 to 4} alkyl, C _{1 to 4} haloalkyl, halo, cyano, -OH, -O-(C _{1 to 4} alkyl), -N(C _{1 to 4} alkyl) ₂ , unsubstituted C ₆ ～C ₁₀ aryl, C substituted with 1-5 halo atoms ₆ ～C ₁₀ aryl, and —O—(C _{1 to 4} haloalkyl) substituted with 1, 2 or 3 groups selected from R ^Y. and R ^Z. are together
(Chemical 6)

When forming ^J. is -OR ^b or =O,
R. ^d is hydrogen or C ₁ ～C ₄ is an alkyl,
R. ^m is C _{1 to 4} selected from the group consisting of alkyl, halo, and cyano;
J is C;
45. According to any one of aspects 1-44, wherein X, Y, and Z are each independently N or C, and the valence of any carbon atom is optionally filled with a hydrogen atom. the method of.
(Aspect 46)
R. ^a is hydrogen and
R. ^b is -(C ₁ ～C ₄ alkyl)-R ^c and
R. ^c is -C(=O)NH ₂ , unsubstituted C _{6 to 10} aryl, substituted C _{6 to 10} aryl, unsubstituted 5- to 10-membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S), and substituted 5- to 10-membered heteroaryl (from O, N, and S having 1 to 4 atoms selected from the group consisting of R ^c The moiety is substituted with one or more substituents E, each E independently -OH, C ₁ ～C ₄ alkyl, C ₁ ～C ₄ haloalkyl, —O(C ₁ ～C ₄ alkyl), and —O(C ₁ ～C ₄ haloalkyl);
R. ^K. is hydrogen, unsubstituted C _{1 to 6} Alkyl, —NH(C _{1 to 4} alkyl), -N(C _{1 to 4} alkyl) ₂ , unsubstituted C _{6 to 10} aryl, substituted C _{6 to 10} aryl, unsubstituted 5- to 10-membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S), and substituted 5- to 10-membered heteroaryl (from O, N, and S having 1 to 4 atoms selected from the group consisting of R ^K. The moiety is substituted with one or more substituents Q, each Q independently -OH, C _{1 to 4} alkyl, C _{1 to 4} haloalkyl, halo, cyano, —O—(C _{1 to 4} alkyl), and —O—(C _{1 to 4} haloalkyl);
R. ^G. is -(C _{1 to 4} alkyl)-C(=O)NH ₂ and
R. ^Y. and R ^Z. are each independently absent or hydrogen, C _{1 to 6} alkyl, and —NH(C _{1 to 4} alkyl), or
or R ^Y. and R ^Z. are linked together, together with the atoms to which they are bonded,
(Chem. 7)

forming a ring selected from, said ring optionally independently being C _{1 to 4} alkyl, C _{1 to 4} haloalkyl, halo, cyano, -OH, -O-(C _{1 to 4} alkyl), -N(C _{1 to 4} alkyl) ₂ , unsubstituted C ₆ ～C ₁₀ aryl, C substituted with 1-5 halo atoms ₆ ～C ₁₀ aryl, and —O—(C _{1 to 4} haloalkyl) substituted with 1, 2 or 3 groups selected from
R. ^d is C ₁ ～C ₄ is an alkyl,
R. ^m is cyano and
46. A method according to aspect 45, wherein X, Y, and Z are each independently N or C, and any carbon atom valency is optionally filled with a hydrogen atom.
(Aspect 47)
R. ^a is hydrogen and
R. ^b is -CH ₂ CH ₂ -R ^c and
R. ^c is unsubstituted phenyl, substituted phenyl, indolyl, and -C(=O)NH ₂ is selected from the group consisting of
R. ^K. is hydrogen, methyl, substituted pyridinyl, unsubstituted benzothiophenyl, and —NH(C ₁ ～C ₄ alkyl),
R. ^G. is -CH ₂ CH ₂ -C(=O)NH ₂ and
R. ^Y. is -NH(C ₁ ～C ₄ alkyl),
R. ^Z. is absent or hydrogen,
or R ^Y. and R ^Z. are linked together, together with the atoms to which they are bonded,
(Chemical 8)

forming a ring selected from, said ring optionally independently being C ₁ ～C ₄ alkyl, -N(C ₁ ～C ₄ alkyl) ₂ , cyano, unsubstituted phenyl, and phenyl substituted with 1 to 5 halo atoms;
R. ^d is C ₁ ～C ₄ is an alkyl,
R. ^m is cyano and
46. A method according to aspect 45, wherein X is N or CH.
(Aspect 48)
R. ^a is hydrogen and
R. ^b is -CH ₂ CH ₂ -R ^c and
R. ^c is unsubstituted phenyl, substituted phenyl, indolyl, and -C(=O)NH ₂ wherein said substituted phenyl is substituted with one substituent E, E is -OH;
R. ^K. is selected from the group consisting of hydrogen, methyl, substituted pyridinyl, unsubstituted benzothiophenyl, and -NH(sec-butyl), wherein said substituted pyridinyl moiety is substituted with one substituent Q, Q is C _{1 to 4} selected from the group consisting of alkyl, halo, and cyano;
R. ^G. is -CH ₂ CH ₂ -C(=O)NH ₂ and
R. ^Y. is -NH (isopropyl) or -NH (sec-butyl),
R. ^Z. is absent or hydrogen,
or R ^Y. and R ^Z. are linked together, together with the atoms to which they are bonded,
(Chemical 9)

forming a ring selected from, said ring optionally independently being C ₁ ～C ₄ substituted with 1, 2 or 3 groups selected from alkyl, cyano, unsubstituted phenyl, and 4-fluorophenyl;
R. ^d is isopropyl and
R. ^m is cyano and
46. A method according to aspect 45, wherein X is N or CH.
(Aspect 49)
wherein the compound of formula (I) has the structure of formula (IA),
(Chem. 10)

including pharmaceutically acceptable salts thereof, wherein
R. ^J. is -NR ^a R. ^b and
R. ^a is hydrogen or C ₁ ～C ₄ is an alkyl,
R. ^b is R ^c or -(C ₁ ～C ₄ alkyl)-R ^c and
R. ^c is the unsubstituted C _{6 to 10} aryl, substituted C _{6 to 10} aryl, unsubstituted 5- to 10-membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S), and substituted 5- to 10-membered heteroaryl (from O, N, and S having 1 to 4 atoms selected from the group consisting of R ^c The moiety is substituted with one or more substituents E, each E independently -OH, C ₁ ～C ₄ alkyl, C ₁ ～C ₄ haloalkyl, —O(C ₁ ～C ₄ alkyl), and —O(C ₁ ～C ₄ haloalkyl);
R. ^K. is hydrogen, unsubstituted C _{1 to 6} Alkyl, —NH(C _{1 to 4} alkyl), -N(C _{1 to 4} alkyl) ₂ , unsubstituted C _{6 to 10} aryl, substituted C _{6 to 10} aryl, unsubstituted 5- to 10-membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S), and substituted 5- to 10-membered heteroaryl (from O, N, and S having 1 to 4 atoms selected from the group consisting of R ^K. The moiety is substituted with one or more substituents Q, each Q independently -OH, C _{1 to 4} alkyl, C _{1 to 4} haloalkyl, halo, cyano, —O—(C _{1 to 4} alkyl), and —O—(C _{1 to 4} haloalkyl);
Y and Z are each C;
X is N or CH;
W is O or S;
R. ^e is hydrogen or C ₁ ～C ₄ 46. The method of aspect 45, which is alkyl.
(Aspect 50)
R. ^a is hydrogen and
R. ^b is -(C ₁ ～C ₄ alkyl)-R ^c and
R. ^c is the unsubstituted C _{6 to 10} aryl, substituted C _{6 to 10} aryl, unsubstituted 5- to 10-membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S), and substituted 5- to 10-membered heteroaryl (from O, N, and S having 1 to 4 atoms selected from the group consisting of R ^c The moiety is substituted with one or more substituents E, each E independently -OH, C ₁ ～C ₄ alkyl, C ₁ ～C ₄ haloalkyl, —O(C ₁ ～C ₄ alkyl), and —O(C ₁ ～C ₄ haloalkyl);
R. ^K. is unsubstituted 5- to 10-membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S), and substituted 5- to 10-membered heteroaryl (from O, N, and S and said substituted heteroaryl is substituted with one or more substituents Q, each Q independently being -OH, C. _{1 to 4} alkyl, C _{1 to 4} haloalkyl, halo, cyano, —O—(C _{1 to 4} alkyl), and —O—(C _{1 to 4} haloalkyl);
R. ^e is C ₁ ～C ₄ 50. The method of aspect 49, which is alkyl.
(Aspect 51)
R. ^a is hydrogen and
R. ^b is -(CH ₂ -CH ₂ )-R ^c and
R. ^c is selected from the group consisting of substituted phenyl and unsubstituted indolyl, said substituted phenyl substituted with one substituent E, E is -OH;
R. ^K. is selected from the group consisting of unsubstituted benzothiophenyl and substituted pyridinyl, said substituted pyridinyl being substituted with one substituent Q, Q being C _{1 to 4} selected from the group consisting of alkyl, halo, and cyano;
R. ^e 50. The method of aspect 49, wherein is isopropyl.
(Aspect 52)
The compound is
N-(2-(1H-indol-3-yl)ethyl)-7-isopropyl-2-(5-methylpyridin-3-yl)thieno[3,2-d]pyrimidin-4-amine,
5-(4-((2-(1H-indol-3-yl)ethyl)amino)-7-isopropylthieno[3,2-d]pyrimidin-2-yl)nicotinonitrile,
N-(2-(1H-indol-3-yl)ethyl)-2-(5-fluoropyridin-3-yl)-7-isopropylthieno[3,2-d]pyrimidin-4-amine,
4-(2-((2-(benzo[b]thiophen-3-yl)-7-isopropylthieno[3,2-d]pyrimidin-4-yl)amino)ethyl)phenol,
N-(2-(1H-indol-3-yl)ethyl)-2-(5-fluoropyridin-3-yl)furo[3,2-d]pyrimidin-4-amine,
N-(2-(1H-indol-3-yl)ethyl)-2-(5-methylpyridin-3-yl)furo[3,2-d]pyrimidin-4-amine, and
5-(4-((2-(1H-indol-3-yl)ethyl)amino)furo[3,2-d]pyrimidin-2-yl)nicotinonitrile, or 50. A method according to aspect 49, which is a pharmaceutically acceptable salt.
(Aspect 53)
wherein the compound of formula (I) has the structure of formula (IB),
(Chem. 11)

including pharmaceutically acceptable salts thereof, wherein
R. ^a is hydrogen or C ₁ ～C ₄ is an alkyl,
R. ^b is R ^c or -(C _{1 to 4} alkyl)-R ^c and
R. ^c is -OH, -O(C ₁ ～C ₄ alkyl), —O(C ₁ ～C ₄ haloalkyl), —C(=O)NH ₂ , unsubstituted C _{6 to 10} aryl, substituted C _{6 to 10} aryl, unsubstituted 5- to 10-membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S), and substituted 5- to 10-membered heteroaryl (from O, N, and S having 1 to 4 atoms selected from the group consisting of R ^c The moiety is substituted with one or more substituents E, each E independently -OH, C ₁ ～C ₄ alkyl, C ₁ ～C ₄ haloalkyl, —O(C ₁ ～C ₄ alkyl), and —O(C ₁ ～C ₄ haloalkyl);
R. ^K. is hydrogen, unsubstituted C _{1 to 6} alkyl, substituted C _{1 to 6} Alkyl, —NH(C _{1 to 4} alkyl), -N(C _{1 to 4} alkyl) ₂ , unsubstituted C _{6 to 10} aryl, substituted C _{6 to 10} aryl, unsubstituted 5- to 10-membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S), and substituted 5- to 10-membered heteroaryl (from O, N, and S having 1 to 4 atoms selected from the group consisting of R ^K. The moiety is substituted with one or more substituents Q, each Q independently -OH, C _{1 to 4} alkyl, C _{1 to 4} haloalkyl, halo, cyano, —O—(C _{1 to 4} alkyl), and —O—(C _{1 to 4} haloalkyl);
R. ^G. is hydrogen, C _{1 to 4} alkyl, and -(C _{1 to 4} alkyl)-C(=O)NH ₂ is selected from the group consisting of
R. ^f is hydrogen, C _{1 to 4} alkyl, unsubstituted C ₆ ～C ₁₀ aryl, and C substituted with 1-5 halo atoms ₆ ～C ₁₀ is selected from the group consisting of aryl;
U is N or CR ^U and
V is S or NR ^V. and
R. ^U is hydrogen, C _{1 to 4} selected from the group consisting of alkyl, halo, and cyano;
R. ^V. is hydrogen or C ₁ ～C ₄ is an alkyl,
U is CR ^U and V is NR ^V. , then R ^U is C _{1 to 4} selected from the group consisting of alkyl, halo, and cyano;
Y and Z are each C;
46. A method according to aspect 45, wherein X is N or CH.
(Aspect 54)
R. ^a is hydrogen and
R. ^b is -(C _{1 to 4} alkyl)-R ^c and
R. ^c is -C(=O)NH ₂ , unsubstituted C _{6 to 10} aryl, substituted C _{6 to 10} aryl, unsubstituted 5- to 10-membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S), and substituted 5- to 10-membered heteroaryl (from O, N, and S having 1 to 4 atoms selected from the group consisting of R ^c The moiety is substituted with one or more substituents E, each E independently -OH, C ₁ ～C ₄ alkyl, C ₁ ～C ₄ haloalkyl, —O(C ₁ ～C ₄ alkyl), and —O(C ₁ ～C ₄ haloalkyl);
R. ^K. is unsubstituted 5- to 10-membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S), and substituted 5- to 10-membered heteroaryl (from O, N, and S and said substituted heteroaryl is substituted with one or more substituents Q, each Q independently being -OH, C. _{1 to 4} alkyl, C _{1 to 4} haloalkyl, halo, cyano, —O—(C _{1 to 4} alkyl), and —O—(C _{1 to 4} haloalkyl);
R. ^G. is C _{1 to 4} alkyl or -(C _{1 to 4} alkyl)-C(=O)NH ₂ and
R. ^f is selected from the group consisting of hydrogen, unsubstituted phenyl, and phenyl substituted with 1-5 halo atoms;
Y and Z are each C;
54. A method according to aspect 53, wherein X is CH.
(Aspect 55)
R. ^a is hydrogen and
R. ^b is -(CH ₂ -CH ₂ )-R ^c and
R. ^c is -C(=O)NH ₂ , substituted phenyl and unsubstituted indolyl, wherein said substituted phenyl is substituted with one substituent E, E is —OH;
R. ^K. is selected from the group consisting of unsubstituted benzothiohenyl and substituted pyridinyl, said substituted pyridinyl being substituted with one substituent Q, Q being C _{1 to 4} selected from the group consisting of alkyl, halo, and cyano;
R. ^G. is -(CH ₂ CH ₂ )-C(=O)NH ₂ and
R. ^f is selected from the group consisting of hydrogen, phenyl, and fluorophenyl;
Y and Z are each C;
54. A method according to aspect 53, wherein X is CH.
(Aspect 56)
The compound is
3-((2-(benzo[b]thiophen-3-yl)-9-isopropyl-9H-purin-6-yl)oxy)propanamide,
3-(2-(benzo[b]thiophen-3-yl)-9-isopropyl-6-oxo-6,9-dihydro-1 ^H. -purin-1-yl)propanamide,
2-(benzo[b]thiophen-3-yl)-4-((4-hydroxyphenethyl)amino)-7-isopropyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidine-5-carbonitrile,
N-(2-(1H-indol-3-yl)ethyl)-2-methyl-6-phenylthieno[2,3-d]pyrimidin-4-amine, and
A compound selected from the group consisting of N-(2-(1H-indol-3-yl)ethyl)-6-(4-fluorophenyl)thieno[2,3-d]pyrimidin-4-amine, or a pharmaceutical thereof 54. A method according to aspect 53, which is a chemically acceptable salt.
(Aspect 57)
wherein the compound of formula (I) has the structure of formula (IC),
(Chem. 12)

including pharmaceutically acceptable salts thereof, wherein
R. ^J. is -NR ^a R. ^b and
R. ^a is hydrogen or C ₁ ～C ₄ is an alkyl,
R. ^b is R ^c or -(C ₁ ～C ₄ alkyl)-R ^c and
R. ^c is the unsubstituted C _{6 to 10} aryl, substituted C _{6 to 10} aryl, unsubstituted 5- to 10-membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S), and substituted 5- to 10-membered heteroaryl (from O, N, and S having 1 to 4 atoms selected from the group consisting of R ^c The moiety is substituted with one or more substituents E, each E independently -OH, C ₁ ～C ₄ alkyl, C ₁ ～C ₄ haloalkyl, —O(C ₁ ～C ₄ alkyl), and —O(C ₁ ～C ₄ haloalkyl);
R. ^K. is hydrogen, unsubstituted C _{1 to 6} Alkyl, —NH(C _{1 to 4} alkyl), -N(C _{1 to 4} alkyl) ₂ , unsubstituted C _{6 to 10} aryl, substituted C _{6 to 10} aryl, unsubstituted 5- to 10-membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S), and substituted 5- to 10-membered heteroaryl (from O, N, and S having 1 to 4 atoms selected from the group consisting of R ^K. The moiety is substituted with one or more substituents Q, each Q independently -OH, C _{1 to 4} alkyl, C _{1 to 4} haloalkyl, halo, cyano, —O—(C _{1 to 4} alkyl), and —O—(C _{1 to 4} haloalkyl);
A is N or CH;
B is N or CH;
R. ^g is hydrogen, C _{1 to 4} alkyl, and —N(C _{1 to 4} alkyl) ₂ is selected from the group consisting of
Y and Z are each C;
46. A method according to aspect 45, wherein X is N or CH.
(Aspect 58)
R. ^a is hydrogen and
R. ^b is -(C ₁ ～C ₄ alkyl)-R ^c and
R. ^c is the unsubstituted C _{6 to 10} aryl, substituted C _{6 to 10} aryl, unsubstituted 5- to 10-membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S), and substituted 5- to 10-membered heteroaryl (from O, N, and S having 1 to 4 atoms selected from the group consisting of R ^c The moiety is substituted with one or more substituents E, each E independently -OH, C ₁ ～C ₄ alkyl, C ₁ ～C ₄ haloalkyl, —O(C ₁ ～C ₄ alkyl), and —O(C ₁ ～C ₄ haloalkyl);
R. ^K. is -NH(C _{1 to 4} alkyl), unsubstituted 5-10 membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S), and substituted 5-10 membered heteroaryl (O, N, and S and said substituted heteroaryl is substituted with one or more substituents Q, each Q independently being -OH , C _{1 to 4} alkyl, C _{1 to 4} haloalkyl, halo, cyano, —O—(C _{1 to 4} alkyl), and —O—(C _{1 to 4} haloalkyl);
R. ^g is hydrogen or -N(C _{1 to 4} alkyl) ₂ 58. The method of aspect 57, wherein
(Aspect 59)
R. ^a is hydrogen and
R. ^b is -(C ₁ ～C ₄ alkyl)-R ^c and
R. ^c is selected from the group consisting of substituted phenyl and unsubstituted indolyl, said substituted phenyl substituted with one or more substituents E, each E independently -OH, C ₁ ～C ₄ alkyl, C ₁ ～C ₄ haloalkyl, —O(C ₁ ～C ₄ alkyl), and —O(C ₁ ～C ₄ haloalkyl);
R. ^K. is -NH(C _{1 to 4} alkyl), unsubstituted benzothiophenyl, and substituted pyridinyl, said substituted pyridinyl being substituted with one or more substituents Q, each Q being independently —OH, C _{1 to 4} alkyl, C _{1 to 4} haloalkyl, halo, cyano, —O—(C _{1 to 4} alkyl), and —O—(C _{1 to 4} haloalkyl);
R. ^g is hydrogen or -N(C _{1 to 4} alkyl) ₂ 58. The method of aspect 57, wherein
(Aspect 60)
R. ^a is hydrogen and
R. ^b is -(CH ₂ CH ₂ )-R ^c and
R. ^c is selected from the group consisting of substituted phenyl and unsubstituted indolyl, said substituted phenyl substituted with one substituent E, E is -OH;
R. ^K. is selected from the group consisting of —NH(sec-butyl), unsubstituted benzothiohenyl, and substituted pyridinyl, wherein said substituted pyridinyl is substituted with one or more substituents Q, each Q independently being C _{1 to 4} selected from the group consisting of alkyl, halo, and cyano;
R. ^g is hydrogen or -N(CH ₃ ) ₂ 58. The method of aspect 57, wherein
(Aspect 61)
The compound is
4-(2-((2-(benzo[b]thiophen-3-yl)-8-(dimethylamino)pyrimido[5,4-d]pyrimidin-4-yl)amino)ethyl)phenol,
N-(2-(1H-indol-3-yl)ethyl)-2-(5-fluoropyridin-3-yl)quinazolin-4-amine,
5-(4-((2-(1H-indol-3-yl)ethyl)amino)quinazolin-2-yl)nicotinonitrile, and
N. ⁴ -(2-(1H-indol-3-yl)ethyl)-N ² -(sec-butyl)quinazoline-2,4-diamine, or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
(Aspect 62)
wherein the compound of formula (I) has the structure of formula (ID),
(Chem. 13)

including pharmaceutically acceptable salts thereof, wherein
R. ^J. is -NR ^a R. ^b and
R. ^a is hydrogen or C ₁ ～C ₄ is an alkyl,
R. ^b is R ^c or -(C _{1 to 4} alkyl)-R ^c and
R. ^c is the unsubstituted C _{6 to 10} aryl, substituted C _{6 to 10} aryl, unsubstituted 5- to 10-membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S), and substituted 5- to 10-membered heteroaryl (from O, N, and S having 1 to 4 atoms selected from the group consisting of R ^c The moiety is substituted with one or more substituents E, each E independently -OH, C ₁ ～C ₄ alkyl, C ₁ ～C ₄ haloalkyl, —O(C ₁ ～C ₄ alkyl), and —O(C ₁ ～C ₄ haloalkyl);
R. ^K. is the unsubstituted C _{6 to 10} aryl, substituted C _{6 to 10} aryl, unsubstituted 5- to 10-membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S), and substituted 5- to 10-membered heteroaryl (from O, N, and S having 1 to 4 atoms selected from the group consisting of R ^K. The moiety is substituted with one or more substituents Q, each Q independently -OH, C _{1 to 4} alkyl, C _{1 to 4} haloalkyl, halo, cyano, —O—(C _{1 to 4} alkyl), and —O—(C _{1 to 4} haloalkyl);
R. ^h is hydrogen or C _{1 to 4} is an alkyl,
D is N or CH;
Y is N;
Z is C;
46. A method according to aspect 45, wherein X is N or CH.
(Aspect 63)
R. ^a is hydrogen and
R. ^b is -(C _{1 to 4} alkyl)-R ^c and
R. ^c is the unsubstituted C _{6 to 10} aryl, substituted C _{6 to 10} aryl, unsubstituted 5- to 10-membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S), and substituted 5- to 10-membered heteroaryl (from O, N, and S having 1 to 4 atoms selected from the group consisting of R ^c The moiety is substituted with one or more substituents E, each E independently -OH, C ₁ ～C ₄ alkyl, C ₁ ～C ₄ haloalkyl, —O(C ₁ ～C ₄ alkyl), and —O(C ₁ ～C ₄ haloalkyl);
R. ^K. is the unsubstituted C _{6 to 10} aryl, substituted C _{6 to 10} aryl, unsubstituted 5- to 10-membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S), and substituted 5- to 10-membered heteroaryl (from O, N, and S having 1 to 4 atoms selected from the group consisting of R ^K. The moiety is substituted with one or more substituents Q, each Q independently -OH, C _{1 to 4} alkyl, C _{1 to 4} haloalkyl, halo, cyano, —O—(C _{1 to 4} alkyl), and —O—(C _{1 to 4} haloalkyl);
R. ^h is hydrogen or C _{1 to 4} 63. The method of aspect 62, which is alkyl.
(Aspect 64)
R. ^a is hydrogen and
R. ^b is -(C ₁ ～C ₄ alkyl)-R ^c and
R. ^c is selected from the group consisting of substituted phenyl and unsubstituted indolyl, said substituted phenyl substituted with one or more substituents E, each E independently being -OH, C ₁ ～C ₄ alkyl, C ₁ ～C ₄ haloalkyl, —O(C ₁ ～C ₄ alkyl), and —O(C ₁ ～C ₄ haloalkyl);
R. ^K. is an unsubstituted benzothiophenyl,
R. ^h is hydrogen or C _{1 to 4} 63. The method of aspect 62, which is alkyl.
(Aspect 65)
R. ^a is hydrogen and
R. ^b is -(CH ₂ -CH ₂ )-R ^c and
R. ^c is selected from the group consisting of substituted phenyl and unsubstituted indolyl, said substituted phenyl substituted with one substituent E, E is -OH;
R. ^K. is an unsubstituted benzothiophenyl,
R. ^h is hydrogen or C _{1 to 4} 63. The method of aspect 62, which is alkyl.
(Aspect 66)
The compound is
N-(2-(1H-indol-3-yl)ethyl)-6-(benzo[b]thiophen-3-yl)-3-isopropylimidazo[1,5-a]pyrazin-8-amine, and
4-(2-((6-(benzo[b]thiophen-3-yl)-3-isopropylimidazo[1,5-a]pyrazin-8-yl)amino)ethyl)phenol or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
(Aspect 67)
The compound is
5-(2-((2-(1H-indol-3-yl)ethyl)amino)-6-(sec-butylamino)pyrimidin-4-yl)nicotinonitrile,
4-(2-((2-(benzo[b]thiophen-3-yl)-6-(isopropylamino)pyrimidin-4-yl)amino)ethyl)phenol,
4-(2-((2-(benzo[b]thiophen-3-yl)-7-isopropyl-6,7-dihydro-5H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)amino)ethyl ) phenol, and
2-(benzo[b]thiophen-3-yl)-4-((4-hydroxyphenethyl)amino)-7-isopropyl-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidine-6- 66. A method according to aspect 65, which is selected from the group consisting of or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
(Aspect 68)
68. The method of any one of aspects 1-67, wherein said first medium is free of LMWH.
(Aspect 69)
69. The method of any one of aspects 1-68, wherein said first medium does not comprise desulfated glycosaminoglycans.
(Aspect 70)
70. The method of any one of aspects 1-69, wherein said first medium comprises each of Flt-3L, SCF, IL-6, IL-7, G-CSF, and GM-CSF.
(Aspect 71)
A population of natural killer cells produced by the method of any one of aspects 1-70.
(Aspect 72)
A population of ILC3 cells produced by the method of any one of aspects 1-70.
(Aspect 73)
71. A method of inhibiting tumor cell growth, comprising contacting said tumor cells with a plurality of natural killer cells and/or ILC3 cells, wherein said natural killer cells are any one of aspects 70. A method produced by a method.
(Aspect 74)
74. The method of aspect 73, wherein said contacting occurs in vitro.
(Aspect 75)
75. The method of aspect 74, wherein said contacting occurs in vivo.
(Aspect 76)
76. The method of any one of aspects 73-75, wherein said tumor cells are acute myelogenous leukemia (AML) cells.
(Aspect 77)
76. The method of any one of aspects 73-75, wherein the tumor cells are breast cancer cells, head and neck cancer cells, or sarcoma cells.
(Aspect 78)
said tumor cells are primary ductal carcinoma cells, leukemia cells, acute T-cell leukemia cells, chronic myelogenous lymphoma (CML) cells, chronic myelogenous leukemia (CML) cells, lung cancer cells, colon adenocarcinoma cells, histiocytic lymphoma 76. The method of any one of aspects 73-75, which is a cell, colon cancer cell, colon adenocarcinoma cell, or retinoblastoma cell.
(Aspect 79)
76. The method of any one of aspects 73-75, wherein said tumor cells are solid tumor cells.
(Aspect 80)
76. The method of any one of aspects 73-75, wherein said tumor cells are liver tumor cells.
(Aspect 81)
76. The method of any one of aspects 73-75, wherein said tumor cells are lung tumor cells.
(Aspect 82)
76. The method of any one of aspects 73-75, wherein said tumor cells are pancreatic tumor cells.
(Aspect 83)
76. The method of any one of aspects 73-75, wherein said tumor cells are renal tumor cells.
(Aspect 84)
76. The method of any one of aspects 73-75, wherein said tumor cells are glioblastoma multiforme (GBM) cells.
(Aspect 85)
85. The method of any one of aspects 73-84, wherein said natural killer cells are cryopreserved prior to said contacting or said administering.
(Aspect 86)
85. The method of any one of aspects 73-84, wherein said natural killer cells have not been cryopreserved prior to said contacting or said administering.
(Aspect 87)
FGFBP2, GZMH, CCL3L3, GZMM, CXCR4, ZEB2, KLF2, LITAF, RORA, LYAR, CNOT1, IFNG, DUSP2, ATG2A, CD7, PMAIP1, PPP2R5C, NR4A2, ZFP36L2, PIK3R1, KLRF1, SNHG9, MT2A, RGS 2, CHD1, DUSP1, EML4, ZFP36, ZC3H12A, DNAJB6, SBDS, IRF1, TSC22D3, TSPYL2, PNRC1, ISCA1, JUNB, WHAMM, RICTOR, TNFAIP3, EPC1, MVD, CLK1, ARL4C, REL, KMT2E, YPEL5, AMD1, BTG2, and IDS expression of one or more markers selected from the group consisting of lower expression than expression of said marker in peripheral blood natural killer cells and/or NDFIP2, LINC00996, MAL, CCL1, MB, SPINK2, C15orf48, CAMK1, KLRC1, TNFSF10, TNFRSF18, IL32, CAPG, AC092580.4, S100A11, TNFRSF4, ENO1, FCER1G, CCND2, KRT81, MRPS6, ANXA2, PTGER2, GLO1, HAVCR2, PYCARD, LAT2, SLC16A 3, COTL1, PKM, TALDO1, Composed of CD96, NCR3, KRT86, STMN1, LTB, ARPC1B, ARPC5, FKBP1A, TIMP1, GZMK, CD59, PGK1, RGS10, EVL, RAC2, LGALS1, ITGB7, TUBB, PGAM1, PRF1, GZMB, IL2RB, KLRC2, and KLRB1 A natural killer cell characterized by the expression of one or more markers selected from the group, the expression being higher than the expression of said marker in peripheral blood natural killer cells.
(Aspect 88)
FGFBP2, GZMH, CCL3L3, GZMM, CXCR4, ZEB2, KLF2, LITAF, RORA, LYAR, CNOT1, IFNG, DUSP2, ATG2A, CD7, PMAIP1, PPP2R5C, NR4A2, ZFP36L2, PIK3R1, KLRF1, SNHG9, MT2A, RGS 2, CHD1, DUSP1, EML4, ZFP36, ZC3H12A, DNAJB6, SBDS, IRF1, TSC22D3, TSPYL2, PNRC1, ISCA1, JUNB, WHAMM, RICTOR, TNFAIP3, EPC1, MVD, CLK1, ARL4C, REL, KMT2E, YPEL5, AMD1, BTG2, and IDS 88. The natural killer cell of aspect 87, characterized by expression of one or more markers selected from the group consisting of lower expression of said marker than expression of said marker in peripheral blood natural killer cells.
(Aspect 89)
FGFBP2, GZMH, CCL3L3, GZMM, CXCR4, ZEB2, KLF2, LITAF, RORA, LYAR, CNOT1, IFNG, DUSP2, ATG2A, CD7, PMAIP1, PPP2R5C, NR4A2, ZFP36L2, PIK3R1, KLRF1, SNHG9, MT2A, RGS 2, CHD1, DUSP1, EML4, ZFP36, ZC3H12A, DNAJB6, SBDS, IRF1, TSC22D3, TSPYL2, PNRC1, ISCA1, JUNB, WHAMM, RICTOR, TNFAIP3, EPC1, MVD, CLK1, ARL4C, REL, KMT2E, YPEL5, AMD1, BTG2, and IDS wherein the expression of 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, or more markers selected from the group consisting of is lower than the expression of said markers in peripheral blood natural killer cells. 87. A natural killer cell according to aspect 87 or aspect 88.
(Aspect 90)
NDFIP2, LINC00996, MAL, CCL1, MB, SPINK2, C15orf48, CAMK1, KLRC1, TNFSF10, TNFRSF18, IL32, CAPG, AC092580.4, S100A11, TNFRSF4, ENO1, FCER1G, CCND2, KRT81, MRPS 6, ANXA2, PTGER2, GLO1, HAVCR2, PYCARD, LAT2, SLC16A3, COTL1, PKM, TALDO1, CD96, NCR3, KRT86, STMN1, LTB, ARPC1B, ARPC5, FKBP1A, TIMP1, GZMK, CD59, PGK1, RGS10, EVL, RAC2, LGALS1, ITGB7, TU BB, characterized by the expression of one or more markers selected from the group consisting of PGAM1, PRF1, GZMB, IL2RB, KLRC2, and KLRB1, wherein the expression is higher than the expression of said markers in peripheral blood natural killer cells; 88. A natural killer cell according to aspect 87.
(Aspect 91)
NDFIP2, LINC00996, MAL, CCL1, MB, SPINK2, C15orf48, CAMK1, KLRC1, TNFSF10, TNFRSF18, IL32, CAPG, AC092580.4, S100A11, TNFRSF4, ENO1, FCER1G, CCND2, KRT81, MRPS 6, ANXA2, PTGER2, GLO1, HAVCR2, PYCARD, LAT2, SLC16A3, COTL1, PKM, TALDO1, CD96, NCR3, KRT86, STMN1, LTB, ARPC1B, ARPC5, FKBP1A, TIMP1, GZMK, CD59, PGK1, RGS10, EVL, RAC2, LGALS1, ITGB7, TU BB, Expression of 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, or more markers selected from the group consisting of PGAM1, PRF1, GZMB, IL2RB, KLRC2, and KLRB1 is associated with peripheral blood natural 91. A natural killer cell according to any one of aspects 87-90, wherein the expression of said marker in the killer cell is higher.
(Aspect 92)
The natural killer cell according to any one of aspects 87-91, wherein said natural killer cell is a hematopoietic stem cell-derived natural killer cell.
(Aspect 93)
93. The natural killer cell of any one of aspects 87-92, wherein said natural killer cell is a CD34+ hematopoietic stem cell-derived natural killer cell.
(Mode 94)
94. The natural killer cell of aspect 92 or aspect 93, wherein said hematopoietic stem cells are placenta-derived hematopoietic stem cells.
(Aspect 95)
95. The natural killer cell of any one of aspects 87-94, wherein said natural killer cell is prepared by the method of any one of aspects 1-70.

Claims (20)

ナチュラルキラー細胞を含む細胞集団を産生する方法であって、
（ａ）造血幹細胞または前駆細胞を、幹細胞動員剤およびトロンボポエチン（Ｔｐｏ）を含む第１の培地で培養して、第１の細胞集団を産生するステップ、
（ｂ）該第１の細胞集団を、幹細胞動員剤およびインターロイキン－１５（ＩＬ－１５）を含みＴｐｏを欠く第２の培地で培養して、第２の細胞集団を産生するステップ、ならびに、
（ｃ）該第２の細胞集団を、ＩＬ－２およびＩＬ－１５を含み、幹細胞動員剤および低分子量ヘパリン（ＬＭＷＨ）の各々を欠く第３の培地で培養して、第３の細胞集団を産生するステップ、を含み、
該第３の細胞集団が、ＣＤ５６^＋、ＣＤ３^－であるナチュラルキラー細胞を含み、該ナチュラルキラー細胞の少なくとも８０％が生存可能である、前記方法。 A method of producing a cell population comprising natural killer cells, comprising:
(a) culturing hematopoietic stem or progenitor cells in a first medium comprising a stem cell mobilizing agent and thrombopoietin (Tpo) to produce a first cell population;
(b) culturing the first cell population in a second medium lacking Tpo containing a stem cell mobilizing agent and interleukin-15 (IL-15) to produce a second cell population;
(c) culturing the second cell population in a third medium comprising IL-2 and IL-15 and lacking each of a stem cell mobilizing agent and low molecular weight heparin (LMWH) to produce a third cell population; a step of producing
The above method, wherein said third cell population comprises natural killer cells that are CD56 ⁺ , CD3 ⁻ , and at least 80% of said natural killer cells are viable. 前記造血幹細胞または前駆細胞が、ＣＤ３４^＋造血幹細胞である、請求項１に記載の方法。 2. The method of claim 1, wherein said hematopoietic stem or progenitor cells are CD34 ⁺ hematopoietic stem cells. 前記造血幹細胞または前駆細胞が、胎盤細胞である、請求項１または２に記載の方法。 3. The method of claim 1 or 2, wherein said hematopoietic stem or progenitor cells are placental cells. 前記Ｔｐｏが、１ｎｇ／ｍＬ～５０ｎｇ／ｍＬの濃度で前記第１の培地に存在する、請求項１～３のいずれか一項に記載の方法。 The method of any one of claims 1-3, wherein said Tpo is present in said first medium at a concentration of 1 ng/mL to 50 ng/mL. 前記ＩＬ－１５が、１ｎｇ／ｍＬ～５０ｎｇ／ｍＬの濃度で前記第２の培地に存在する、請求項１～４のいずれか一項に記載の方法。 5. The method of any one of claims 1-4, wherein said IL-15 is present in said second medium at a concentration of 1 ng/mL to 50 ng/mL. 前記ＩＬ－２が、１０Ｕ／ｍＬ～１０，０００Ｕ／ｍＬの濃度で前記第３の培地に存在し、前記ＩＬ－１５が、１ｎｇ／ｍＬ～５０ｎｇ／ｍＬの濃度で該第３の培地に存在する、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法。 said IL-2 is present in said third medium at a concentration of 10 U/mL to 10,000 U/mL and said IL-15 is present in said third medium at a concentration of 1 ng/mL to 50 ng/mL The method according to any one of claims 1 to 5, wherein 前記幹細胞動員剤が、以下の構造を有する式（Ｉ）の化合物であり、

その薬学的に許容される塩を含み、式中、
各

は、独立して、単結合または二重結合を表し、
Ｒ^Ｊは、－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－ＯＲ^ｂ、および＝Ｏからなる群から選択され、Ｒ^Ｊが＝Ｏである場合、ＧおよびＪを結合する

は、単結合を表し、Ｇは、Ｎであり、該Ｎは、Ｒ^Ｇで置換され、それ以外はＧおよびＪを結合する

は、二重結合を表し、Ｇは、Ｎであり、
Ｒ^ａは、水素またはＣ_１～Ｃ_４アルキルであり、
Ｒ^ｂは、Ｒ^ｃまたは－（Ｃ_１～Ｃ_４アルキル）－Ｒ^ｃであり、
Ｒ^ｃは、－ＯＨ、－Ｏ（Ｃ_１～Ｃ_４アルキル）、－Ｏ（Ｃ_１～Ｃ_４ハロアルキル）、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ_２、非置換Ｃ_６～１０アリール、置換Ｃ_６～１０アリール、非置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）、ならびに置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）からなる群から選択され、置換として示されたＲ^ｃ部分は、１つ以上の置換基Ｅで置換され、各Ｅは、独立して、－ＯＨ、Ｃ_１～Ｃ_４アルキル、Ｃ_１～Ｃ_４ハロアルキル、－Ｏ（Ｃ_１～Ｃ_４アルキル）、および－Ｏ（Ｃ_１～Ｃ_４ハロアルキル）からなる群から選択され、
Ｒ^Ｋは、水素、非置換Ｃ_１～６アルキル、置換Ｃ_１～６アルキル、－ＮＨ（Ｃ_１～４アルキル）、－Ｎ（Ｃ_１～４アルキル）_２、非置換Ｃ_６～１０アリール、置換Ｃ_６～１０アリール、非置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）、ならびに置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）からなる群から選択され、置換として示されたＲ^Ｋ部分は、１つ以上の置換基Ｑで置換され、各Ｑは、独立して、－ＯＨ、Ｃ_１～４アルキル、Ｃ_１～４ハロアルキル、ハロ、シアノ、－Ｏ－（Ｃ_１～４アルキル）、および－Ｏ－（Ｃ_１～４ハロアルキル）からなる群から選択され、
Ｒ^Ｇは、水素、Ｃ_１～４アルキル、および－（Ｃ_１～４アルキル）－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ_２からなる群から選択され、
Ｒ^ＹおよびＲ^Ｚは、各々独立して、不在であるか、もしくは水素、ハロ、Ｃ_１～６アルキル、－ＯＨ、－Ｏ－（Ｃ_１～４アルキル）、－ＮＨ（Ｃ_１～４アルキル）、および－Ｎ（Ｃ_１～４アルキル）_２からなる群から選択されるか、
またはＲ^ＹおよびＲ^Ｚは、それらが結合している原子と一緒になって、一緒に連結されて、

から選択される環を形成し、該環は、任意選択的に、独立して、Ｃ_１～４アルキル、Ｃ_１～４ハロアルキル、ハロ、シアノ、－ＯＨ、－Ｏ－（Ｃ_１～４アルキル）、－Ｎ（Ｃ_１～４アルキル）_２、非置換Ｃ_６～Ｃ_１０アリール、１～５個のハロ原子で置換されたＣ_６～Ｃ_１０アリール、および－Ｏ－（Ｃ_１～４ハロアルキル）から選択される１つ、２つ、または３つの基で置換され、Ｒ^ＹおよびＲ^Ｚが一緒に

を形成する場合、Ｒ^Ｊは、－ＯＲ^ｂまたは＝Ｏであり、
Ｒ^ｄは、水素またはＣ_１～Ｃ_４アルキルであり、
Ｒ^ｍは、Ｃ_１～４アルキル、ハロ、およびシアノからなる群から選択され、
Ｊは、Ｃであり、
Ｘ、Ｙ、およびＺは、各々独立して、ＮまたはＣであり、任意の炭素原子の原子価は、必要に応じて、水素原子で満たされる、請求項１～６のいずれか一項に記載の方法。 The stem cell mobilizing agent is a compound of formula (I) having the structure

including pharmaceutically acceptable salts thereof, wherein
each

independently represents a single or double bond,
R ^J is selected from the group consisting of -NR ^a R ^b , -OR ^b , and =O, and joins G and J when R ^J is =O

represents a single bond, G is N, said N is substituted with R ^G , otherwise joins G and J

represents a double bond, G is N,
R ^a is hydrogen or C ₁ -C ₄ alkyl,
R ^b is R ^c or —(C ₁ -C ₄ alkyl)—R ^c ,
R ^c is —OH, —O(C ₁ -C ₄ alkyl), —O(C ₁ -C ₄ haloalkyl), —C(═O)NH ₂ , unsubstituted C _6-10 aryl, substituted C _{6- 10} aryl, unsubstituted 5-10 membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S), and substituted 5-10 membered heteroaryl (O, N, and S having 1 to 4 atoms selected from the group consisting of) and indicated as substituted are substituted with one or more substituents ^E , each E independently is selected from the group consisting of —OH, C ₁ -C ₄ alkyl, C ₁ -C ₄ haloalkyl, —O(C ₁ -C ₄ alkyl), and —O(C ₁ -C ₄ haloalkyl);
R ^K is hydrogen, unsubstituted C _1-6 alkyl, substituted C _1-6 alkyl, —NH(C _1-4 alkyl), —N(C _1-4 alkyl) ₂ , unsubstituted C _6-10 aryl, substituted C _6-10 aryl, unsubstituted 5-10 membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S), and substituted 5-10 membered heteroaryl (O, N, and S) and indicated as substituted R ^K moieties are substituted with one or more substituents Q, each Q is independently the group consisting of —OH, C _1-4 alkyl, C _1-4 haloalkyl, halo, cyano, —O—(C _1-4 alkyl), and —O—(C _1-4 haloalkyl) is selected from
R ^G is selected from the group consisting of hydrogen, C _1-4 alkyl, and —(C _1-4 alkyl)—C(=O)NH ₂ ;
R ^Y and R ^Z are each independently absent or hydrogen, halo, C _1-6 alkyl, —OH, —O—(C _1-4 alkyl), —NH(C _1-4 alkyl ), and —N(C _1-4 alkyl) ₂ , or
or R ^Y and R ^Z , together with the atoms to which they are attached, linked together,

forming a ring selected from, optionally and independently, C _1-4 alkyl, C _1-4 haloalkyl, halo, cyano, —OH, —O—(C _1-4 alkyl ), —N(C _1-4 alkyl) ₂ , unsubstituted C ₆ -C ₁₀ aryl, C ₆ -C ₁₀ aryl substituted with 1-5 halo atoms, and —O—(C _1-4 haloalkyl ) and R ^Y and R ^Z together are substituted with 1, 2 or 3 groups selected from

R ^J is -OR ^b or =O when forming
R ^d is hydrogen or C ₁ -C ₄ alkyl;
R ^m is selected from the group consisting of C _1-4 alkyl, halo, and cyano;
J is C;
7. Any one of claims 1-6, wherein X, Y, and Z are each independently N or C, and any carbon atom valency is optionally filled with a hydrogen atom. described method. Ｒ^ａは、水素であり、
Ｒ^ｂは、－（Ｃ_１～Ｃ_４アルキル）－Ｒ^ｃであり、
Ｒ^ｃは、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ_２、非置換Ｃ_６～１０アリール、置換Ｃ_６～１０アリール、非置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）、ならびに置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）からなる群から選択され、置換として示されたＲ^ｃ部分は、１つ以上の置換基Ｅで置換され、各Ｅは、独立して、－ＯＨ、Ｃ_１～Ｃ_４アルキル、Ｃ_１～Ｃ_４ハロアルキル、－Ｏ（Ｃ_１～Ｃ_４アルキル）、および－Ｏ（Ｃ_１～Ｃ_４ハロアルキル）からなる群から選択され、
Ｒ^Ｋは、水素、非置換Ｃ_１～６アルキル、－ＮＨ（Ｃ_１～４アルキル）、－Ｎ（Ｃ_１～４アルキル）_２、非置換Ｃ_６～１０アリール、置換Ｃ_６～１０アリール、非置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）、ならびに置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）からなる群から選択され、置換として示されたＲ^Ｋ部分は、１つ以上の置換基Ｑで置換され、各Ｑは、独立して、－ＯＨ、Ｃ_１～４アルキル、Ｃ_１～４ハロアルキル、ハロ、シアノ、－Ｏ－（Ｃ_１～４アルキル）、および－Ｏ－（Ｃ_１～４ハロアルキル）からなる群から選択され、
Ｒ^Ｇは、－（Ｃ_１～４アルキル）－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ_２であり、
Ｒ^ＹおよびＲ^Ｚは、各々独立して、不在であるか、もしくは水素、Ｃ_１～６アルキル、および－ＮＨ（Ｃ_１～４アルキル）からなる群から選択されるか、
またはＲ^ＹおよびＲ^Ｚは、それらが結合している原子と一緒になって、一緒に連結されて、

から選択される環を形成し、該環は、任意選択的に、独立して、Ｃ_１～４アルキル、Ｃ_１～４ハロアルキル、ハロ、シアノ、－ＯＨ、－Ｏ－（Ｃ_１～４アルキル）、－Ｎ（Ｃ_１～４アルキル）_２、非置換Ｃ_６～Ｃ_１０アリール、１～５個のハロ原子で置換されたＣ_６～Ｃ_１０アリール、および－Ｏ－（Ｃ_１～４ハロアルキル）から選択される１つ、２つ、または３つの基で置換され、
Ｒ^ｄは、Ｃ_１～Ｃ_４アルキルであり、
Ｒ^ｍは、シアノであり、
Ｘ、Ｙ、およびＺは、各々独立して、ＮまたはＣであり、任意の炭素原子の原子価は、必要に応じて、水素原子で満たされる、請求項７に記載の方法。 R ^a is hydrogen;
R ^b is —(C ₁ -C ₄ alkyl)—R ^c ;
R ^c is selected from the group consisting of —C(=O)NH ₂ , unsubstituted C _6-10 aryl, substituted C _6-10 aryl, unsubstituted 5-10 membered heteroaryl (O, N, and S and substituted 5- to 10-membered heteroaryls (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S); The indicated R ^c moieties are substituted with one or more substituents E, each E independently —OH, C ₁ -C ₄ alkyl, C ₁ -C ₄ haloalkyl, —O(C ₁ - C ₄ alkyl), and —O(C ₁ -C ₄ haloalkyl);
R ^K is hydrogen, unsubstituted C _1-6 alkyl, —NH(C _1-4 alkyl), —N(C _1-4 alkyl) ₂ , unsubstituted C _6-10 aryl, substituted C _6-10 aryl, unsubstituted 5- to 10-membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S), and substituted 5- to 10-membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S); The R ^K moiety indicated as substituted is substituted with one or more substituents Q, each Q independently being - selected from the group consisting of OH, C _1-4 alkyl, C _1-4 haloalkyl, halo, cyano, —O—(C _1-4 alkyl), and —O—(C _1-4 haloalkyl);
R ^G is -(C _1-4 alkyl)-C(=O)NH ₂ ;
R ^Y and R ^Z are each independently absent or selected from the group consisting of hydrogen, C _1-6 alkyl, and —NH(C _1-4 alkyl);
or R ^Y and R ^Z , together with the atoms to which they are attached, linked together,

forming a ring selected from, optionally and independently, C _1-4 alkyl, C _1-4 haloalkyl, halo, cyano, —OH, —O—(C _1-4 alkyl ), —N(C _1-4 alkyl) ₂ , unsubstituted C ₆ -C ₁₀ aryl, C ₆ -C ₁₀ aryl substituted with 1-5 halo atoms, and —O—(C _1-4 haloalkyl ) substituted with 1, 2 or 3 groups selected from
R ^d is C ₁ -C ₄ alkyl;
R ^m is cyano;
8. The method of claim 7, wherein X, Y, and Z are each independently N or C, and any carbon atom valency is optionally filled with a hydrogen atom. Ｒ^ａは、水素であり、
Ｒ^ｂは、－ＣＨ_２ＣＨ_２－Ｒ^ｃであり、
Ｒ^ｃは、非置換フェニル、置換フェニル、インドリル、および－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ_２からなる群から選択され、
Ｒ^Ｋは、水素、メチル、置換ピリジニル、非置換ベンゾチオフェニル、および－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_４アルキル）からなる群から選択され、
Ｒ^Ｇは、－ＣＨ_２ＣＨ_２－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ_２であり、
Ｒ^Ｙは、－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_４アルキル）であり、
Ｒ^Ｚは、不在であるか、もしくは水素であるか、
またはＲ^ＹおよびＲ^Ｚは、それらが結合している原子と一緒になって、一緒に連結されて、

から選択される環を形成し、該環は、任意選択的に、独立して、Ｃ_１～Ｃ_４アルキル、－Ｎ（Ｃ_１～Ｃ_４アルキル）_２、シアノ、非置換フェニル、および１～５個のハロ原子で置換されたフェニルから選択される１つ、２つ、または３つの基で置換され、
Ｒ^ｄは、Ｃ_１～Ｃ_４アルキルであり、
Ｒ^ｍは、シアノであり、
Ｘは、ＮまたはＣＨである、請求項７に記載の方法。 R ^a is hydrogen;
R ^b is —CH ₂ CH ₂ —R ^c ;
R ^c is selected from the group consisting of unsubstituted phenyl, substituted phenyl, indolyl, and -C(=O) _NH2 ;
R ^K is selected from the group consisting of hydrogen, methyl, substituted pyridinyl, unsubstituted benzothiophenyl, and —NH(C ₁ -C ₄ alkyl);
R ^G is -CH ₂ CH ₂ -C(=O)NH ₂ ;
R ^Y is —NH(C ₁ -C ₄ alkyl);
R ^Z is absent or hydrogen;
or R ^Y and R ^Z , together with the atoms to which they are attached, linked together,

forming a ring selected from, optionally and independently, C ₁ -C ₄ alkyl, —N(C ₁ -C ₄ alkyl) ₂ , cyano, unsubstituted phenyl, and 1- substituted with 1, 2 or 3 groups selected from phenyl substituted with 5 halo atoms,
R ^d is C ₁ -C ₄ alkyl;
R ^m is cyano;
8. The method of claim 7, wherein X is N or CH. Ｒ^ａは、水素であり、
Ｒ^ｂは、－ＣＨ_２ＣＨ_２－Ｒ^ｃであり、
Ｒ^ｃは、非置換フェニル、置換フェニル、インドリル、および－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ_２からなる群から選択され、該置換フェニルは、１つの置換基Ｅで置換され、Ｅは、－ＯＨであり、
Ｒ^Ｋは、水素、メチル、置換ピリジニル、非置換ベンゾチオフェニル、および－ＮＨ（ｓｅｃ－ブチル）からなる群から選択され、該置換ピリジニル部分は、１つの置換基Ｑで置換され、Ｑは、Ｃ_１～４アルキル、ハロ、およびシアノからなる群から選択され、
Ｒ^Ｇは、－ＣＨ_２ＣＨ_２－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ_２であり、
Ｒ^Ｙは、－ＮＨ（イソプロピル）または－ＮＨ（ｓｅｃ－ブチル）であり、
Ｒ^Ｚは、不在であるか、もしくは水素であるか、
またはＲ^ＹおよびＲ^Ｚは、それらが結合している原子と一緒になって、一緒に連結されて、

から選択される環を形成し、該環は、任意選択的に、独立して、Ｃ_１～Ｃ_４アルキル、シアノ、非置換フェニル、および４－フルオロフェニルから選択される１つ、２つ、または３つの基で置換され、
Ｒ^ｄは、イソプロピルであり、
Ｒ^ｍは、シアノであり、
Ｘは、ＮまたはＣＨである、請求項７に記載の方法。 R ^a is hydrogen;
R ^b is —CH ₂ CH ₂ —R ^c ;
R ^c is selected from the group consisting of unsubstituted phenyl, substituted phenyl, indolyl, and —C(═O)NH ₂ , wherein the substituted phenyl is substituted with one substituent E, and E is —OH; ,
R ^K is selected from the group consisting of hydrogen, methyl, substituted pyridinyl, unsubstituted benzothiophenyl, and -NH(sec-butyl), wherein the substituted pyridinyl moiety is substituted with one substituent Q, Q is selected from the group consisting of C _1-4 alkyl, halo, and cyano;
R ^G is -CH ₂ CH ₂ -C(=O)NH ₂ ;
R ^Y is —NH (isopropyl) or —NH (sec-butyl);
R ^Z is absent or hydrogen;
or R ^Y and R ^Z , together with the atoms to which they are attached, linked together,

optionally, independently selected from C ₁ -C ₄ alkyl, cyano, unsubstituted phenyl, and 4-fluorophenyl, 1, 2, or substituted with three groups,
R ^d is isopropyl;
R ^m is cyano;
8. The method of claim 7, wherein X is N or CH. 前記式（Ｉ）の化合物が、式（Ｉ－Ａ）の構造を有し、

その薬学的に許容される塩を含み、式中、
Ｒ^Ｊは、－ＮＲ^ａＲ^ｂであり、
Ｒ^ａは、水素またはＣ_１～Ｃ_４アルキルであり、
Ｒ^ｂは、Ｒ^ｃまたは－（Ｃ_１～Ｃ_４アルキル）－Ｒ^ｃであり、
Ｒ^ｃは、非置換Ｃ_６～１０アリール、置換Ｃ_６～１０アリール、非置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）、ならびに置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）からなる群から選択され、置換として示されたＲ^ｃ部分は、１つ以上の置換基Ｅで置換され、各Ｅは、独立して、－ＯＨ、Ｃ_１～Ｃ_４アルキル、Ｃ_１～Ｃ_４ハロアルキル、－Ｏ（Ｃ_１～Ｃ_４アルキル）、および－Ｏ（Ｃ_１～Ｃ_４ハロアルキル）からなる群から選択され、
Ｒ^Ｋは、水素、非置換Ｃ_１～６アルキル、－ＮＨ（Ｃ_１～４アルキル）、－Ｎ（Ｃ_１～４アルキル）_２、非置換Ｃ_６～１０アリール、置換Ｃ_６～１０アリール、非置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）、ならびに置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）からなる群から選択され、置換として示されたＲ^Ｋ部分は、１つ以上の置換基Ｑで置換され、各Ｑは、独立して、－ＯＨ、Ｃ_１～４アルキル、Ｃ_１～４ハロアルキル、ハロ、シアノ、－Ｏ－（Ｃ_１～４アルキル）、および－Ｏ－（Ｃ_１～４ハロアルキル）からなる群から選択され、
ＹおよびＺは、各々、Ｃであり、
Ｘは、ＮまたはＣＨであり、
Ｗは、ＯまたはＳであり、
Ｒ^ｅは、水素またはＣ_１～Ｃ_４アルキルである、請求項７に記載の方法。 wherein the compound of formula (I) has the structure of formula (IA),

including pharmaceutically acceptable salts thereof, wherein
R ^J is —NR ^a R ^b ;
R ^a is hydrogen or C ₁ -C ₄ alkyl,
R ^b is R ^c or —(C ₁ -C ₄ alkyl)—R ^c ,
R ^c is unsubstituted C _6-10 aryl, substituted C _6-10 aryl, unsubstituted 5-10 membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S) , and substituted 5- to 10-membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S), wherein the R ^c moiety designated as substituted is 1 substituted with one or more substituents E, each E being independently —OH, C ₁ -C ₄ alkyl, C ₁ -C ₄ haloalkyl, —O(C ₁ -C ₄ alkyl), and —O( C ₁ -C ₄ haloalkyl),
R ^K is hydrogen, unsubstituted C _1-6 alkyl, —NH(C _1-4 alkyl), —N(C _1-4 alkyl) ₂ , unsubstituted C _6-10 aryl, substituted C _6-10 aryl, unsubstituted 5- to 10-membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S), and substituted 5- to 10-membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S); The R ^K moiety indicated as substituted is substituted with one or more substituents Q, each Q independently being - selected from the group consisting of OH, C _1-4 alkyl, C _1-4 haloalkyl, halo, cyano, —O—(C _1-4 alkyl), and —O—(C _1-4 haloalkyl);
Y and Z are each C;
X is N or CH;
W is O or S;
8. The method of claim 7, wherein R ^e is hydrogen or C ₁ -C ₄ alkyl. 前記式（Ｉ）の化合物が、式（Ｉ－Ｂ）の構造を有し、

その薬学的に許容される塩を含み、式中、
Ｒ^ａは、水素またはＣ_１～Ｃ_４アルキルであり、
Ｒ^ｂは、Ｒ^ｃまたは－（Ｃ_１～４アルキル）－Ｒ^ｃであり、
Ｒ^ｃは、－ＯＨ、－Ｏ（Ｃ_１～Ｃ_４アルキル）、－Ｏ（Ｃ_１～Ｃ_４ハロアルキル）、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ_２、非置換Ｃ_６～１０アリール、置換Ｃ_６～１０アリール、非置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）、ならびに置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）からなる群から選択され、置換として示されたＲ^ｃ部分は、１つ以上の置換基Ｅで置換され、各Ｅは、独立して、－ＯＨ、Ｃ_１～Ｃ_４アルキル、Ｃ_１～Ｃ_４ハロアルキル、－Ｏ（Ｃ_１～Ｃ_４アルキル）、および－Ｏ（Ｃ_１～Ｃ_４ハロアルキル）からなる群から選択され、
Ｒ^Ｋは、水素、非置換Ｃ_１～６アルキル、置換Ｃ_１～６アルキル、－ＮＨ（Ｃ_１～４アルキル）、－Ｎ（Ｃ_１～４アルキル）_２、非置換Ｃ_６～１０アリール、置換Ｃ_６～１０アリール、非置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）、ならびに置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）からなる群から選択され、置換として示されたＲ^Ｋ部分は、１つ以上の置換基Ｑで置換され、各Ｑは、独立して、－ＯＨ、Ｃ_１～４アルキル、Ｃ_１～４ハロアルキル、ハロ、シアノ、－Ｏ－（Ｃ_１～４アルキル）、および－Ｏ－（Ｃ_１～４ハロアルキル）からなる群から選択され、
Ｒ^Ｇは、水素、Ｃ_１～４アルキル、および－（Ｃ_１～４アルキル）－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ_２からなる群から選択され、
Ｒ^ｆは、水素、Ｃ_１～４アルキル、非置換Ｃ_６～Ｃ_１０アリール、および１～５個のハロ原子で置換されたＣ_６～Ｃ_１０アリールからなる群から選択され、
Ｕは、ＮまたはＣＲ^Ｕであり、
Ｖは、ＳまたはＮＲ^Ｖであり、
Ｒ^Ｕは、水素、Ｃ_１～４アルキル、ハロ、およびシアノからなる群から選択され、
Ｒ^Ｖは、水素またはＣ_１～Ｃ_４アルキルであり、
ＵがＣＲ^Ｕであり、かつＶがＮＲ^Ｖである場合、Ｒ^Ｕは、Ｃ_１～４アルキル、ハロ、およびシアノからなる群から選択され、
ＹおよびＺは、各々、Ｃであり、
Ｘは、ＮまたはＣＨである、請求項７に記載の方法。 wherein the compound of formula (I) has the structure of formula (IB),

including pharmaceutically acceptable salts thereof, wherein
R ^a is hydrogen or C ₁ -C ₄ alkyl,
R ^b is R ^c or —(C _1-4 alkyl)—R ^c ,
R ^c is —OH, —O(C ₁ -C ₄ alkyl), —O(C ₁ -C ₄ haloalkyl), —C(═O)NH ₂ , unsubstituted C _6-10 aryl, substituted C _{6- 10} aryl, unsubstituted 5-10 membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S), and substituted 5-10 membered heteroaryl (O, N, and S having 1 to 4 atoms selected from the group consisting of) and indicated as substituted are substituted with one or more substituents ^E , each E independently is selected from the group consisting of —OH, C ₁ -C ₄ alkyl, C ₁ -C ₄ haloalkyl, —O(C ₁ -C ₄ alkyl), and —O(C ₁ -C ₄ haloalkyl);
R ^K is hydrogen, unsubstituted C _1-6 alkyl, substituted C _1-6 alkyl, —NH(C _1-4 alkyl), —N(C _1-4 alkyl) ₂ , unsubstituted C _6-10 aryl, substituted C _6-10 aryl, unsubstituted 5-10 membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S), and substituted 5-10 membered heteroaryl (O, N, and S) and indicated as substituted R ^K moieties are substituted with one or more substituents Q, each Q is independently the group consisting of —OH, C _1-4 alkyl, C _1-4 haloalkyl, halo, cyano, —O—(C _1-4 alkyl), and —O—(C _1-4 haloalkyl) is selected from
R ^G is selected from the group consisting of hydrogen, C _1-4 alkyl, and —(C _1-4 alkyl)—C(=O)NH ₂ ;
R ^f is selected from the group consisting of hydrogen, C _1-4 alkyl, unsubstituted C ₆ -C ₁₀ aryl, and C ₆ -C ₁₀ aryl substituted with 1-5 halo atoms;
U is N or CR ^U ;
V is S or NR ^V ;
R ^U is selected from the group consisting of hydrogen, C _1-4 alkyl, halo, and cyano;
R ^V is hydrogen or C ₁ -C ₄ alkyl;
when U is CR ^U and V is NR ^V , R ^U is selected from the group consisting of C _1-4 alkyl, halo, and cyano;
Y and Z are each C;
8. The method of claim 7, wherein X is N or CH. 前記式（Ｉ）の化合物が、式（Ｉ－Ｃ）の構造を有し、

その薬学的に許容される塩を含み、式中、
Ｒ^Ｊは、－ＮＲ^ａＲ^ｂであり、
Ｒ^ａは、水素またはＣ_１～Ｃ_４アルキルであり、
Ｒ^ｂは、Ｒ^ｃまたは－（Ｃ_１～Ｃ_４アルキル）－Ｒ^ｃであり、
Ｒ^ｃは、非置換Ｃ_６～１０アリール、置換Ｃ_６～１０アリール、非置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）、ならびに置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）からなる群から選択され、置換として示されたＲ^ｃ部分は、１つ以上の置換基Ｅで置換され、各Ｅは、独立して、－ＯＨ、Ｃ_１～Ｃ_４アルキル、Ｃ_１～Ｃ_４ハロアルキル、－Ｏ（Ｃ_１～Ｃ_４アルキル）、および－Ｏ（Ｃ_１～Ｃ_４ハロアルキル）からなる群から選択され、
Ｒ^Ｋは、水素、非置換Ｃ_１～６アルキル、－ＮＨ（Ｃ_１～４アルキル）、－Ｎ（Ｃ_１～４アルキル）_２、非置換Ｃ_６～１０アリール、置換Ｃ_６～１０アリール、非置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）、ならびに置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）からなる群から選択され、置換として示されたＲ^Ｋ部分は、１つ以上の置換基Ｑで置換され、各Ｑは、独立して、－ＯＨ、Ｃ_１～４アルキル、Ｃ_１～４ハロアルキル、ハロ、シアノ、－Ｏ－（Ｃ_１～４アルキル）、および－Ｏ－（Ｃ_１～４ハロアルキル）からなる群から選択され、
Ａは、ＮまたはＣＨであり、
Ｂは、ＮまたはＣＨであり、
Ｒ^ｇは、水素、Ｃ_１～４アルキル、および－Ｎ（Ｃ_１～４アルキル）_２からなる群から選択され、
ＹおよびＺは、各々、Ｃであり、
Ｘは、ＮまたはＣＨである、請求項７に記載の方法。 wherein the compound of formula (I) has the structure of formula (IC),

including pharmaceutically acceptable salts thereof, wherein
R ^J is —NR ^a R ^b ;
R ^a is hydrogen or C ₁ -C ₄ alkyl,
R ^b is R ^c or —(C ₁ -C ₄ alkyl)—R ^c ,
R ^c is unsubstituted C _6-10 aryl, substituted C _6-10 aryl, unsubstituted 5-10 membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S) , and substituted 5- to 10-membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S), wherein the R ^c moiety designated as substituted is 1 substituted with one or more substituents E, each E being independently —OH, C ₁ -C ₄ alkyl, C ₁ -C ₄ haloalkyl, —O(C ₁ -C ₄ alkyl), and —O( C ₁ -C ₄ haloalkyl),
R ^K is hydrogen, unsubstituted C _1-6 alkyl, —NH(C _1-4 alkyl), —N(C _1-4 alkyl) ₂ , unsubstituted C _6-10 aryl, substituted C _6-10 aryl, unsubstituted 5- to 10-membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S), and substituted 5- to 10-membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S); The R ^K moiety indicated as substituted is substituted with one or more substituents Q, each Q independently being - selected from the group consisting of OH, C _1-4 alkyl, C _1-4 haloalkyl, halo, cyano, —O—(C _1-4 alkyl), and —O—(C _1-4 haloalkyl);
A is N or CH;
B is N or CH;
R ^g is selected from the group consisting of hydrogen, C _1-4 alkyl, and —N(C _1-4 alkyl) ₂ ;
Y and Z are each C;
8. The method of claim 7, wherein X is N or CH. 前記式（Ｉ）の化合物が、式（Ｉ－Ｄ）の構造を有し、

その薬学的に許容される塩を含み、式中、
Ｒ^Ｊは、－ＮＲ^ａＲ^ｂであり、
Ｒ^ａは、水素またはＣ_１～Ｃ_４アルキルであり、
Ｒ^ｂは、Ｒ^ｃまたは－（Ｃ_１～４アルキル）－Ｒ^ｃであり、
Ｒ^ｃは、非置換Ｃ_６～１０アリール、置換Ｃ_６～１０アリール、非置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）、ならびに置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）からなる群から選択され、置換として示されたＲ^ｃ部分は、１つ以上の置換基Ｅで置換され、各Ｅは、独立して、－ＯＨ、Ｃ_１～Ｃ_４アルキル、Ｃ_１～Ｃ_４ハロアルキル、－Ｏ（Ｃ_１～Ｃ_４アルキル）、および－Ｏ（Ｃ_１～Ｃ_４ハロアルキル）からなる群から選択され、
Ｒ^Ｋは、非置換Ｃ_６～１０アリール、置換Ｃ_６～１０アリール、非置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）、ならびに置換５～１０員ヘテロアリール（Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１～４個の原子を有する）からなる群から選択され、置換として示されたＲ^Ｋ部分は、１つ以上の置換基Ｑで置換され、各Ｑは、独立して、－ＯＨ、Ｃ_１～４アルキル、Ｃ_１～４ハロアルキル、ハロ、シアノ、－Ｏ－（Ｃ_１～４アルキル）、および－Ｏ－（Ｃ_１～４ハロアルキル）からなる群から選択され、
Ｒ^ｈは、水素またはＣ_１～４アルキルであり、
Ｄは、ＮまたはＣＨであり、
Ｙは、Ｎであり、
Ｚは、Ｃであり、
Ｘは、ＮまたはＣＨである、請求項７に記載の方法。 wherein the compound of formula (I) has the structure of formula (ID),

including pharmaceutically acceptable salts thereof, wherein
R ^J is —NR ^a R ^b ;
R ^a is hydrogen or C ₁ -C ₄ alkyl,
R ^b is R ^c or —(C _1-4 alkyl)—R ^c ,
R ^c is unsubstituted C _6-10 aryl, substituted C _6-10 aryl, unsubstituted 5-10 membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S) , and substituted 5- to 10-membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S), wherein the R ^c moiety designated as substituted is 1 substituted with one or more substituents E, each E being independently —OH, C ₁ -C ₄ alkyl, C ₁ -C ₄ haloalkyl, —O(C ₁ -C ₄ alkyl), and —O( C ₁ -C ₄ haloalkyl),
R ^K is unsubstituted C _6-10 aryl, substituted C _6-10 aryl, unsubstituted 5-10 membered heteroaryl (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S) , and substituted 5- to 10-membered heteroaryls (having 1-4 atoms selected from the group consisting of O, N, and S), wherein the R ^K moiety designated as substituted is 1 substituted with one or more substituents Q, each Q independently —OH, C _1-4 alkyl, C _1-4 haloalkyl, halo, cyano, —O—(C _1-4 alkyl), and — is selected from the group consisting of O—(C _1-4 haloalkyl);
R ^h is hydrogen or C _1-4 alkyl;
D is N or CH;
Y is N;
Z is C;
8. The method of claim 7, wherein X is N or CH. 前記化合物が、
５－（２－（（２－（１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）アミノ）－６－（ｓｅｃ－ブチルアミノ）ピリミジン－４－イル）ニコチノニトリル、
４－（２－（（２－（ベンゾ［ｂ］チオフェン－３－イル）－６－（イソプロピルアミノ）ピリミジン－４－イル）アミノ）エチル）フェノール、
４－（２－（（２－（ベンゾ［ｂ］チオフェン－３－イル）－７－イソプロピル－６，７－ジヒドロ－５Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル）アミノ）エチル）フェノール、および
２－（ベンゾ［ｂ］チオフェン－３－イル）－４－（（４－ヒドロキシフェネチル）アミノ）－７－イソプロピル－５，７－ジヒドロ－６Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－６－オンからなる群から選択されるか、またはその薬学的に許容される塩である、請求項７に記載の方法。 The compound is
5-(2-((2-(1H-indol-3-yl)ethyl)amino)-6-(sec-butylamino)pyrimidin-4-yl)nicotinonitrile,
4-(2-((2-(benzo[b]thiophen-3-yl)-6-(isopropylamino)pyrimidin-4-yl)amino)ethyl)phenol,
4-(2-((2-(benzo[b]thiophen-3-yl)-7-isopropyl-6,7-dihydro-5H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)amino)ethyl ) phenol, and 2-(benzo[b]thiophen-3-yl)-4-((4-hydroxyphenethyl)amino)-7-isopropyl-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[2,3-d] 8. The method of claim 7, wherein the pyrimidin-6-one is selected from the group consisting of pyrimidin-6-ones or a pharmaceutically acceptable salt thereof. 前記第１の培地が、Ｆｌｔ－３Ｌ、ＳＣＦ、ＩＬ－６、ＩＬ－７、Ｇ－ＣＳＦ、およびＧＭ－ＣＳＦの各々を含む、請求項１～１５のいずれか一項に記載の方法。 16. The method of any one of claims 1-15, wherein the first medium comprises each of Flt-3L, SCF, IL-6, IL-7, G-CSF, and GM-CSF. 請求項１～１６のいずれか一項に記載の方法によって産生されるナチュラルキラー細胞の集団。 A population of natural killer cells produced by the method of any one of claims 1-16. 腫瘍細胞の増殖を抑制する方法であって、該腫瘍細胞を、複数のナチュラルキラー細胞および／またはＩＬＣ３細胞と接触させることを含み、該ナチュラルキラー細胞が、請求項１～１６のいずれか一項に記載の方法によって産生される、前記方法。 17. A method of inhibiting tumor cell proliferation comprising contacting said tumor cells with a plurality of natural killer cells and/or ILC3 cells, wherein said natural killer cells are any one of claims 1-16. A method as produced by the method described in . 前記接触が、インビボで行われる、請求項１８に記載の方法。 19. The method of claim 18, wherein said contacting occurs in vivo. 前記ナチュラルキラー細胞が、前記接触または前記投与の前に凍結保存されている、請求項１８または１９に記載の方法。 20. The method of claim 18 or 19, wherein said natural killer cells are cryopreserved prior to said contacting or said administering.