JPWO2019148054A5

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Publication number: JPWO2019148054A5
Application number: JP2020540818A
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Publication date: 2022-02-09

Description

ある特定の態様では、キットは、デバイスを使用するための命令をさらに含む。ある特定の態様では、試料は、1つまたは複数の標的細胞を含む。ある特定の態様では、試料は、1つまたは複数の非細胞分析物を含む。ある特定の態様では、1つまたは複数の粒子は、0.2um～100umの直径を有する。ある特定の態様では、捕捉剤は、非細胞分析物に結合する。ある特定の態様では、試料の少なくとも一部は、第1のプレートおよび第2のプレートによって実質的に均一な厚さの層に圧縮される。ある特定の態様では、試料の少なくとも一部は、プレートに対して実質的に停滞している。ある特定の態様では、（i）1つまたは複数の標的細胞が、プレート間に単一層を有するように、かつ（ii）1つまたは複数の標的細胞間で実質的な重なりを有しないように、閉鎖構成における試料厚さが構成されている。ある特定の態様では、（i）粒子が、プレート間に単一層を有するように、かつ（ii）粒子間で実質的な重なりを有しないように構成された幾何学的形状（形状およびサイズ）を、1つまたは複数の粒子が有する。ある特定の態様では、（i）粒子が、プレート間に単一層を有するように、かつ（ii）粒子間で実質的な重なりを有しないように構成された密度を、1つまたは複数の粒子が有する。ある特定の態様では、デバイスは、第1のプレートと第2のプレートのうちの一方または両方に、スペーサをさらに含む。ある特定の態様では、存在する場合、競合アッセイにおける分析物に対する捕捉剤に結合するために、分析物と競合するための標識された競合検出剤を、デバイスはさらに含む。ある特定の態様では、デバイスは、非競合アッセイにおいて分析物の付加的な結合部位に特異的に結合する標識された検出剤をさらに含み、付加的な結合部位は、捕捉剤による結合部位とは異なる結合部位である。ある特定の態様では、デバイスは、試料が2つのプレート間にありかつプレートが閉鎖構成にある場合に、標的細胞および非細胞分析物を画像化するイメージャをさらに含む。
[本発明1001]
液体試料中の標的細胞および非細胞分析物をアッセイするためのデバイスであって、
第1のプレートと、第2のプレートと、複数のスペーサと、複数の粒子と、捕捉剤と、を含み、
(f）第1のプレートおよび第2のプレートが、開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成へと互いに相対的に移動可能であり；
(g）プレートの各々が、そのそれぞれの表面上に、1つまたは複数の標的細胞および非細胞分析物を含有するかまたは含有する疑いのある試料に接触するための試料接触領域を有し；
(h）スペーサが、均一な高さを有する柱の周期的なアレイを含み、第1のプレートに固定され；
(i）粒子が、0.2um～100umのサイズを有し、開放構成では、第1のプレートの試料接触領域においてランダムに分散され；
(j）捕捉剤が粒子に取り付けられ、ここで捕捉剤は、非細胞分析物に特異的に結合し、非細胞分析物は、標識された非細胞分析物を形成する光標識に結合することができ、
開放構成が、2つのプレートが分離され、試料が一方または両方のプレートに付着される構成であり、
閉鎖構成が、開放構成での試料付着の後に構成される構成であり、閉鎖構成では、適切な試料体積が、2つのプレートによって実質的に均一な厚さの層に圧縮され、プレートに対して実質的に停滞し、層の均一な厚さが、プレートによって限定されかつプレートおよびスペーサによって調節され、
試料の適切な試料体積が、非細胞分析物および標的細胞をアッセイするために分析され、
閉鎖構成において、1つまたは複数の標的細胞間、粒子間、および標的細胞と粒子との間で著しい重なりがないように、均一な厚さおよび粒子の幾何学的形状が構成されている、
デバイス。
[本発明1002]
液体試料中の標的細胞および非細胞分析物をアッセイするためのデバイスであって、
第1のプレートと、第2のプレートと、複数のスペーサと、複数の粒子と、捕捉剤と、を含み、
(f）第1のプレートおよび第2のプレートが、開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成へと互いに相対的に移動可能であり；
(g）プレートの各々が、そのそれぞれの表面上に、1つまたは複数の標的細胞および非細胞分析物を含有するかまたは含有する疑いのある試料に接触するための試料接触領域を有し；
(h）スペーサが、150um以下の均一な高さを有する柱のアレイを含み、第1のプレートに固定され；
(i）粒子が、0.2um～100umのサイズを有し、開放構成では、第1のプレートの試料接触領域においてランダムに分散され；
(j）捕捉剤が粒子に取り付けられ、ここで捕捉剤は、非細胞分析物に特異的に結合し、非細胞分析物は、標識された非細胞分析物を形成する光標識に結合することができ、
開放構成が、2つのプレートが分離され、試料が一方または両方のプレートに付着される構成であり、
閉鎖構成が、開放構成での試料付着の後に構成される構成であり、閉鎖構成では、試料の少なくとも一部が、2つのプレートによって実質的に均一な厚さの層に圧縮され、プレートに対して実質的に停滞し、
閉鎖構成において、1つまたは複数の標的細胞間、粒子間、および標的細胞と粒子との間で著しい重なりがないように、均一な厚さおよび粒子の幾何学的形状が構成され、層の均一な厚さが、プレートによって限定されかつプレートおよびスペーサによって調節され、
適切な試料体積が、試料の一部分または全体積であり、適切な試料体積が、非細胞分析物および標的細胞をアッセイするために分析され、適切な試料体積中の粒子数が、閉鎖構成では、少なくとも10個となるように構成されている、
デバイス。
[本発明1003]
液体試料中の標的細胞および非細胞分析物をアッセイするための装置であって、
第1のプレートと、第2のプレートと、複数のスペーサと、複数の粒子と、捕捉剤と、イメージャと、プロセッサと、を含み、
(h）第1のプレートおよび第2のプレートが、開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成へと互いに相対的に移動可能であり；
(i）プレートの各々が、そのそれぞれの表面上に、1つまたは複数の標的細胞および非細胞分析物を含有する試料に接触するための試料接触領域を有し；
(j）粒子が、0.2um～100umのサイズを有し、閉鎖構成では、試料中でランダムに分散され；
(k）スペーサが、150um以下の均一な高さを有する柱のアレイを含み、第1のプレートに固定され；
(l）捕捉剤が粒子に取り付けられ、ここで捕捉剤は、非細胞分析物に特異的に結合し、非細胞分析物は、標識された非細胞分析物を形成する光標識に結合することができ；
(m）イメージャが、適切な試料体積の少なくとも1つの画像を撮り；
(n）プロセッサが、
（i）少なくとも10個の粒子の画像を分析することによって非細胞分析物を検出し、
（ii）標的細胞分析物を検出する
ために、少なくとも1つの画像を処理するように構成されており、
開放構成が、2つのプレートが分離され、試料が一方または両方のプレートに付着される構成であり、
閉鎖構成が、開放構成での試料付着の後に構成される構成であり、閉鎖構成では、適切な試料体積が、2つのプレートによって実質的に均一な厚さの層に圧縮され、プレートに対して実質的に停滞し、層の均一な厚さが、プレートによって限定されかつプレートおよびスペーサによって調節され、
閉鎖構成において、1つまたは複数の標的細胞間、粒子間、および標的細胞と粒子との間で著しい重なりがないように、均一な厚さおよび粒子の幾何学的形状が構成され、
適切な試料体積が、試料の一部分または全体積であり、適切な試料体積中の粒子数が、閉鎖構成では、少なくとも10個となるように構成され、
プロセッサが、
（i）少なくとも10個の粒子の画像を分析することによって非細胞分析物を検出し、
（ii）標的細胞分析物を検出する
ために、少なくとも1つの画像を処理するように構成されている、
装置。
[本発明1004]
スペーサが、周期的なアレイである、先行する本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1005]
スペーサの均一な高さが、粒子直径の少なくとも約0.8倍である、先行する本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1006]
1つまたは複数のスペーサの均一な高さが、粒子直径の少なくとも約0.8倍～200umである、先行する本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1007]
試料の適切な試料体積の画像を取得するためのイメージャをさらに含む、いずれかのデバイス本発明のデバイス。
[本発明1008]
適切な試料体積が、試料の少なくとも一部のうちの一部分または全体積であり、
適切な試料体積中の粒子数が、閉鎖構成では、少なくとも10個となるように構成されている、
先行する本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1009]
画像を処理するためのプロセッサをさらに含む、先行する本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1010]
処理が、
（i）少なくとも10個の粒子のうちの1つまたは複数の画像を分析することによって非細胞分析物を検出する工程、および
（ii）標的細胞分析物を検出する工程
のうちの少なくとも1つを含む、先行する本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1011]
a．第1のプレートと；
b．その表面上に試料接触領域を有する第2のプレートと
（ここで第1のプレートおよび第2のプレートは、
i．1つまたは複数の標的細胞および非細胞分析物を含有する試料がその間に付着され得るように、第1のプレートおよび第2のプレートが少なくとも部分的に分離される開放構成、および
ii．第1のプレートが第2のプレートの上部に配置されることにより、第1のプレートと第2のプレートとの間の試料の少なくとも一部分を、均一な厚さを有する層に圧縮する閉鎖構成
へと、互いに相対的に移動可能である）；
c．柱の周期的なアレイを含む1つまたは複数のスペーサと
（ここで層の前記均一な厚さは、1つまたは複数のスペーサによって調節される）；
d．その表面に配置された1つまたは複数の捕捉剤を有する複数の粒子と
を含み、
閉鎖構成において、（i）1つまたは複数の標的細胞間、（ii）複数の粒子間、および（iii）1つまたは複数の標的細胞と複数の粒子との間に実質的に重なりがないように、第1のプレートおよび第2のプレートが、試料の少なくとも一部分を圧縮する、
デバイス。
[本発明1012]
1つまたは複数のスペーサが、第2のプレートの表面上に固定されている、本発明1011のデバイス。
[本発明1013]
複数の粒子が、0.2um～100umの直径を有する、本発明1011のデバイス。
[本発明1014]
第1のプレートおよび第2のプレートが開放構成にある場合、第2のプレートの試料接触領域において複数の粒子がランダムに分散される、本発明1011のデバイス。
[本発明1015]
捕捉剤が、光標識に付いた非細胞分析物を含む標識された標的分析物に、特異的に結合する、本発明1011のデバイス。
[本発明1016]
1つまたは複数のスペーサが、均一な高さを有する、本発明1011のデバイス。
[本発明1017]
1つまたは複数のスペーサの均一な高さが、粒子直径の少なくとも約0.8倍である、本発明1011のデバイス。
[本発明1018]
1つまたは複数のスペーサの均一な高さが、約200umより低い、本発明1011のデバイス。
[本発明1019]
1つまたは複数のスペーサの均一な高さが、粒子直径の少なくとも約0.8倍～200umである、本発明1011のデバイス。
[本発明1020]
試料の適切な体積の画像を取得するためのイメージャをさらに含む、本発明1011のデバイス。
[本発明1021]
適切な体積が、試料の少なくとも一部のうちの一部分または全体積であり、適切な体積中の粒子数が、閉鎖構成では、少なくとも10個となるように構成されている、本発明1011のデバイス。
[本発明1022]
画像を処理するためのプロセッサをさらに含む、本発明1011のデバイス。
[本発明1023]
処理することが、
（i）少なくとも10個の粒子のうちの1つまたは複数の画像を分析することによって非細胞分析物を検出する工程、および
（ii）標的細胞分析物を検出する工程
のうちの少なくとも1つを含む、本発明1011のデバイス。
[本発明1024]
液体試料中の細胞および非細胞分析物をアッセイするための方法であって、以下の工程を含む、方法：
(h）本発明1001のデバイスを有する工程と；
(i）1つまたは複数の標的細胞および非細胞分析物を含有するかまたは含有する疑いのある試料を有する工程と；
(j）非細胞分析物を結合し標識された非細胞分析物を形成することができる光標識を有する工程と；
(k）開放構成で、デバイスの試料接触領域について試料を付着させる工程と；
(l）工程（d）の後に、デバイスを閉鎖構成にする工程であって、それにより、試料の少なくとも一部分を、均一な厚さを有する層に圧縮する、工程と；
(m）光標識および標的細胞を画像化することができるイメージャを使用して、試料の適切な試料体積の少なくとも1つの画像を撮る工程と；
(n）（i）標的細胞および／または（ii）非細胞分析物の存在または量を検出するために少なくとも1つの画像を分析する工程と
を含む、方法。
[本発明1025]
液体試料中の細胞および非細胞分析物をアッセイするための方法であって、
(h）本発明1002のデバイスを有する工程と；
(i）1つまたは複数の標的細胞および非細胞分析物を含有するかまたは含有する疑いのある試料を有する工程と；
(j）非細胞分析物を結合し標識された非細胞分析物を形成することができる光標識を有する工程と；
(k）開放構成で、デバイスの試料接触領域について試料を付着させる工程と；
(l）工程（d）の後に、デバイスを閉鎖構成にする工程であって、それにより、試料の少なくとも一部分を、均一な厚さを有する層に圧縮する、工程と；
(m）光標識および標的細胞を画像化することができるイメージャを使用して、試料の適切な試料体積の少なくとも1つの画像を撮る工程と；
(n）プロセッサを使用して、（i）標的細胞および／または（ii）非細胞分析物の存在または量を検出するために少なくとも1つの画像を分析する工程と
を含み、
プロセッサが、
（i）少なくとも10個の粒子の画像を分析することによって非細胞分析物を検出し、
（ii）標的細胞分析物を検出する
ために、少なくとも1つの画像を処理するように構成されている、
方法。
[本発明1026]
非細胞分析物の検出において、少なくとも10個の粒子の画像を分析することが、デジタル方式の計数によるものであり、
デジタル方式の計数において、試料中の非細胞分析物の存在または量が、閾値を上回る光信号を有するビーズの数または割合から決定され、割合が、閾値を上回る光信号を有するビーズの数と、閾値を下回る光信号を有するビーズの数との比率である、
先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、または方法。
[本発明1027]
非細胞分析物の検出において、少なくとも10個の粒子の画像を分析することが、適切な試料領域におけるすべてのビーズからの光信号振幅から試料中の非細胞分析物の存在または量を決定するアナログ方式の計数によるものである、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、または方法。
[本発明1028]
2つ以上の画像をさらに含み、少なくとも1つの画像が暗視野画像であり、少なくとも1つが明視野画像である、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、または方法。
[本発明1029]
1つまたは複数の粒子が、
（i）プレート間に粒子の単一層を生成し、
（ii）プレート間の粒子間に実質的な重なりを生成しない
のに十分な幾何学的形状（形状およびサイズ）を有する、
先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1030]
1つまたは複数の粒子が、
（i）プレート間に粒子の単一層を生成し、
（ii）プレート間の粒子間に実質的な重なりを生成しない
のに十分な密度を有する、
先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1031]
1つまたは複数の粒子が、デバイス内に試料を付着させる前に試料と混合される、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1032]
1つまたは複数の粒子が、試料の付着の前に、第1のプレートと第2のプレートのうちの少なくとも1つに配置され、その後デバイスへの試料の付着の際に、試料と混合される、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1033]
1つまたは複数の粒子が、様々な形状を有する、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1034]
1つまたは複数の粒子が、0.05um～100umの範囲内の最大寸法を有する、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1035]
存在する場合、分析物に対する捕捉剤に結合するために、非細胞分析物と競合する標識された競合検出剤を提供する工程を含む競合アッセイを使用して、非細胞分析物が検出される、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1036]
非細胞分析物の別の結合部位に特異的に結合する標識された検出剤を提供する工程を含む非競合アッセイを使用して、非細胞分析物が検出され、
別の結合部位が、捕捉剤による結合部位とは異なる結合セットである、
先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1037]
画像のうちの1つが、トポロジー（すなわち、幾何学的形状）および共通領域における粒子の位置の情報を含む直接的な画像であり、他の画像が、画像の主要な信号として、標識された競合検出剤からの信号を含むように構成される信号画像である、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1038]
試料ホルダーが、開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成へと互いに相対的に移動可能な第1および第2のプレートを含む、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1039]
アッセイすることが、対象のウイルス感染症または細菌感染症を診断するためのものである、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1040]
携帯型電子機器を使用して、
（i）前記1つまたは複数の捕捉剤と会合した前記分析物の量に対応する1つまたは複数の第1の値と、
（ii）前記試料内の前記1つまたは複数の細胞の量に対応する1つまたは複数の第2の値と
を決定する工程をさらに含む、
先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1041]
前記複数の粒子が、前記第1のプレートおよび前記第2のプレートのうちの少なくとも1つに除去可能に結合されている、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1042]
前記複数の粒子が、ガラスビーズ、磁気ビーズ、ポリスチレンビーズ、プラスチックビーズ、ラテックス粒子、金属ビーズ、合金ビーズ、ならびに金属および誘電体を含むビーズからなる群より選択される、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1043]
前記光標識が、レポーター分子、蛍光性分子、色素分子、非選択性色素分子、およびレドックス反応性分子から選択される、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1044]
前記複数の粒子が、第1の複数の粒子および第2の複数の粒子を含み、
前記第1の複数の粒子が、そこに結合された1つまたは複数の第1の捕捉剤を含み、
前記第2の複数の粒子が、そこに結合された1つまたは複数の第2の捕捉剤を含む、
先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1045]
前記1つまたは複数の第1の捕捉剤が、前記分析物の第1のエピトープと会合することができ、前記1つまたは複数の第2の捕捉剤が、前記分析物の第2のエピトープと会合することができる、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1046]
前記第1の複数の粒子が、前記第1のプレートに沿って配置され、前記第2の複数の粒子が、前記第2のプレートに沿って配置されている、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1047]
前記第1の複数の粒子が、ガラスビーズ、磁気ビーズ、ポリスチレンビーズ、およびラテックス粒子からなる群より選択される、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1048]
前記第2の複数の粒子が、レポーター分子、蛍光性分子、色素分子、非選択性色素分子、およびレドックス反応性分子からなる群より選択される、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1049]
前記1つまたは複数の第1の捕捉剤と前記1つまたは複数の第2の捕捉剤のうちの少なくとも1つが、前記分析物に特異的と会合することができる、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1050]
前記デバイスが、前記スペース内の1つまたは複数のスペーサをさらに含み、前記第1のプレートまたは前記第2のプレートのうちの少なくとも1つに沿って配置されている、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1051]
前記1つまたは複数のスペーサが、前記第1のプレートと前記第2のプレートとの間の距離を決定する、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1052]
前記第1のプレートから前記第2のプレートへの方向に沿った前記1つまたは複数のスペーサの長さが、前記試料中の前記1つまたは複数の細胞の平均的な直径よりもおおよそ短いかまたはおおよそ等しい、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1053]
前記複数の粒子が、様々な形状を有している、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1054]
前記スペース内の前記1つまたは複数の細胞が、コンフルエントではない単一層として実質的に配置されている、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1055]
前記スペース内の前記1つまたは複数の細胞が、浮遊状態にある、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1056]
前記決定することが、前記スペース内の前記試料の前記少なくとも一部分を含む領域のうちの1つまたは複数の画像を取得することを含み、前記画像化された領域は、前記複数の粒子のうちの少なくとも1つを含む、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1057]
前記1つまたは複数の第1の値が、前記粒子によって放出されるエネルギーの強度に対応する、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1058]
前記試料を、前記1つまたは複数の細胞と会合することができる細胞用色素と接触させることをさらに含む、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1059]
前記1つまたは複数の第2の値が、前記細胞用色素によって放出されるエネルギーの強度に対応する、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1060]
前記1つまたは複数の第1の値と前記1つまたは複数の第2の値との間の関連性を決定するためにアルゴリズムを使用することをさらに含む、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1061]
前記1つまたは複数の第1の値と前記1つまたは複数の第2の値との間の前記関連性に基づいて、前記試料が取得された対象における感染症のレベルを分類する、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1062]
前記感染症が、ウイルス感染症、細菌感染症、またはこれらの組み合わせである、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1063]
前記1つまたは複数の細胞が、白血球（white blood cell）、白血球（leukocyte）、顆粒球、無顆粒球、骨髄系細胞、リンパ球系細胞、好中球、好酸球、好塩基球、リンパ球、T細胞、B細胞、ナチュラルキラー細胞、および単球からなる群より選択される、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1064]
前記分析物が、ポリペプチド、タンパク質、タグ付けされたタンパク質、融合タンパク質、抗体、小分子、ウイルス粒子、細菌、C反応性タンパク質、およびその任意のフラグメントからなる群より選択される、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1065]
前記試料の少なくとも一部分を、前記1つまたは複数の捕捉剤と会合することができる競合検出剤と接触させることをさらに含む、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1066]
前記競合検出剤が、前記分析物とともに前記1つまたは複数の捕捉剤に競合的に結合する、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1067]
前記試料の少なくとも一部分を、前記分析物と会合することができる補助的な検出剤と接触させることをさらに含む、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1068]
前記1つまたは複数の捕捉剤が、前記分析物の第1のエピトープと会合することができ、
前記補助的な検出剤が、前記分析物の第2のエピトープと会合することができる、
先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1069]
前記方法が、約10秒未満、約20秒未満、約30秒未満、約40秒未満、約50秒未満、約60秒未満、約120秒未満、約180秒未満、約240秒未満、約300秒未満、約400秒未満、約500秒未満、または約1000秒未満で実施される、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1070]
工程（d）～（f）が、任意の洗浄する工程の非存在下で行われる、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1071]
第1および第2のプレートが、手で一緒に押圧される、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1072]
非細胞分析物が、ポリペプチド、核酸、または代謝産物である、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1073]
試料が、羊水、房水、硝子体液、血液、全血、画分血液、血漿、血清、母乳、脳脊髄液、耳垢、乳糜、糜汁、内リンパ、外リンパ、糞便、胃酸、胃液、リンパ、粘液、鼻漏、痰、心膜液、腹膜液、胸膜液、膿、粘膜分泌物、唾液、皮脂、***、喀痰、汗、滑液、涙、嘔吐物、尿、および呼気凝縮物を含む、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1074]
結果に基づいて疾患を診断することをさらに含む、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1075]
疾患が、がん、炎症性疾患、または感染性疾患である、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1076]
方法が、複数の異なる非細胞分析物を検出する、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1077]
試料が、1つまたは複数の標的細胞を含む、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、および方法。
[本発明1078]
試料が、1つまたは複数の非細胞分析物を含む、先行する装置発明のいずれかの装置。
[本発明1079]
1つまたは複数の粒子が、0.2um～100umの直径を有する、先行する装置発明のいずれかの装置。
[本発明1080]
捕捉剤が、非細胞分析物に結合する、先行する装置発明のいずれかの装置。
[本発明1081]
試料の少なくとも一部が、第1のプレートおよび第2のプレートによって実質的に均一な厚さの層に圧縮される、先行する装置発明のいずれかの装置。
[本発明1082]
試料の少なくとも一部が、プレートに対して実質的に停滞している、先行する装置発明のいずれかの装置。
[本発明1083]
閉鎖構成における試料厚さが、
（i）1つまたは複数の標的細胞が、プレート間に単一層を有するように、かつ
（ii）1つまたは複数の標的細胞間で実質的な重なりを有しないように
構成されている、先行する装置発明のいずれかの装置。
[本発明1084]
1つまたは複数の粒子が、
（i）粒子が、プレート間に単一層を有するように、かつ
（ii）粒子間で実質的な重なりを有しないように
構成される幾何学的形状（形状およびサイズ）を有する、先行する装置発明のいずれかの装置。
[本発明1085]
1つまたは複数の粒子が、
（i）粒子が、プレート間に単一層を有するように、かつ
（ii）粒子間で実質的な重なりを有しないように
構成された密度を有する、先行する装置発明のいずれかの装置。
[本発明1086]
第1のプレートと第2のプレートのうちの一方または両方にスペーサをさらに含む、先行する装置発明のいずれかの装置。
[本発明1087]
存在する場合、競合アッセイにおける分析物に対する捕捉剤に結合するために、分析物と競合するための標識された競合検出剤をさらに含む、先行する装置発明のいずれかの装置。
[本発明1088]
非競合アッセイにおいて分析物の付加的な結合部位に特異的に結合する標識された検出剤をさらに含み、付加的な結合部位は、捕捉剤による結合部位とは異なる結合部位である、先行する装置発明のいずれかの装置。
[本発明1089]
試料が2つのプレート間にありかつプレートが閉鎖構成にある場合に、標的細胞および非細胞分析物を画像化するイメージャ
をさらに含む、先行する装置発明のいずれかの装置。
[本発明1090]
デバイスが、2つのプレートとスペーサとを含み、スペーサ間距離（SD）が、約120um（マイクロメートル）以下である、先行する本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1091]
デバイスが、2つのプレートとスペーサとを含み、スペーサ間距離（SD）が、約100um（マイクロメートル）以下である、先行する本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1092]
デバイスが、2つのプレートとスペーサとを含み、可撓性プレートの厚さ（h）およびヤング率（E）で割ったスペーサ間距離（ISD）の4乗（ISD^4／（hE））が、5×10^6um^3/GPa以下である、先行する本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1093]
デバイスが、2つのプレートとスペーサとを含み、可撓性プレートの厚さ（h）およびヤング率（E）で割ったスペーサ間距離（ISD）の4乗（ISD^4／（hE））が、5×10^5um3/GPa以下である、先行する本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1094]
デバイスが、2つのプレートとスペーサとを含み、スペーサが、柱形状、実質的に平坦な上面、予め決定された実質的に均一な高さ、および分析物のサイズよりも少なくとも約2倍大きい予め決定された一定のスペーサ間距離を有し、スペーサのヤング率にスペーサの充填率を乗じたものが2MPa以上であり、充填率が、スペーサ接触面積と総プレート面積との比率であり、各スペーサについて、スペーサの横方向寸法とその高さとの比率が、少なくとも1である、先行する本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1095]
デバイスが、2つのプレートとスペーサとを含み、スペーサが、柱形状、実質的に平坦な上面、予め決定された実質的に均一な高さ、および分析物のサイズよりも少なくとも約2倍大きい予め決定された一定のスペーサ間距離を有し、スペーサのヤング率にスペーサの充填率を乗じたものが2MPa以上であり、充填率が、スペーサ接触面積と総プレート面積との比率であり、各スペーサについて、スペーサの横方向寸法とその高さとの比率が、少なくとも1であり、可撓性プレートの厚さ（h）およびヤング率（E）で割ったスペーサ間距離（ISD）の4乗（ISD^4/（hE））が、5×10^6um^3/GPa以下である、先行する本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1096]
デバイスが、2つのプレートとスペーサとを含み、スペーサのスペーシング間距離とスペーサの平均幅との比率が2以上であり、スペーサの充填率をスペーサのヤング率で乗じると2MPa以上である、先行する本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1097]
分析物が、タンパク質、ペプチド、核酸、合成化合物、および無機化合物からなる群より選択される、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1098]
スペーサが、柱の形状を有し、柱の幅と高さとの比率が1以上である、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1099]
プレートの一方または両方に付着した試料が未知の量を有する、先行する本発明のいずれかの方法。
[本発明1100]
スペーサが柱形状を有し、柱が実質的に均一な断面を有する、先行する本発明のいずれかのデバイス、装置、システム、スマートフォンシステム、または方法。
In certain embodiments, the kit further comprises instructions for using the device. In certain embodiments, the sample comprises one or more target cells. In certain embodiments, the sample comprises one or more non-cell analytes. In certain embodiments, the one or more particles have a diameter of 0.2um-100um. In certain embodiments, the scavenger binds to a non-cellular analyte. In certain embodiments, at least a portion of the sample is compressed by a first plate and a second plate into a layer of substantially uniform thickness. In certain embodiments, at least a portion of the sample is substantially stagnant with respect to the plate. In certain embodiments, (i) one or more target cells have a single layer between the plates, and (ii) there is no substantial overlap between one or more target cells. , The sample thickness in the closed configuration is configured. In certain embodiments, the geometry (shape and size) is configured so that (i) the particles have a single layer between the plates and (ii) there is no substantial overlap between the particles. Have one or more particles. In certain embodiments, one or more particles have a density configured such that (i) the particles have a single layer between the plates and (ii) there is no substantial overlap between the particles. Has. In certain embodiments, the device further comprises a spacer in one or both of the first and second plates. In certain embodiments, the device further comprises a labeled competitive detector to compete with the analyte, if present, in order to bind to the scavenger to the analyte in the competitive assay. In certain embodiments, the device further comprises a labeled detection agent that specifically binds to the additional binding site of the analyte in a non-competitive assay, where the additional binding site is the binding site by the scavenger. Different binding sites. In certain embodiments, the device further comprises an imager that images the target cell and non-cell analyte when the sample is between two plates and the plates are in a closed configuration.
[Invention 1001]
A device for assaying target cells and non-cell analytes in liquid samples.
It contains a first plate, a second plate, a plurality of spacers, a plurality of particles, and a scavenger.
(f) The first and second plates can move relative to each other into different configurations, including open and closed configurations;
(g) Each of the plates has a sample contact area on its surface for contacting a sample containing or suspected of containing one or more target cells and non-cell analytes;
(h) The spacer contains a periodic array of columns of uniform height and is secured to the first plate;
(i) The particles have a size of 0.2um-100um and in the open configuration are randomly dispersed in the sample contact area of the first plate;
(j) The scavenger is attached to the particles, where the scavenger specifically binds to the non-cellular analyte, which binds to the photolabel that forms the labeled non-cellular analyte. Can be done
The open configuration is one in which the two plates are separated and the sample is attached to one or both plates.
The closed configuration is configured after sample attachment in the open configuration, in which the appropriate sample volume is compressed by the two plates into a layer of substantially uniform thickness with respect to the plates. Substantially stagnant, the uniform thickness of the layer is limited by the plate and regulated by the plate and spacer,
Appropriate sample volumes of the sample are analyzed to assay non-cell analytes and target cells.
In a closed configuration, uniform thickness and particle geometry are configured so that there is no significant overlap between one or more target cells, between particles, and between target cells and particles.
device.
[Invention 1002]
A device for assaying target cells and non-cell analytes in liquid samples.
It contains a first plate, a second plate, a plurality of spacers, a plurality of particles, and a scavenger.
(f) The first and second plates can move relative to each other into different configurations, including open and closed configurations;
(g) Each of the plates has a sample contact area on its surface for contacting a sample containing or suspected of containing one or more target cells and non-cell analytes;
(h) The spacer contains an array of columns with a uniform height of 150 um or less and is secured to the first plate;
(i) The particles have a size of 0.2um-100um and in the open configuration are randomly dispersed in the sample contact area of the first plate;
(j) The scavenger is attached to the particles, where the scavenger specifically binds to the non-cellular analyte, which binds to the photolabel that forms the labeled non-cellular analyte. Can be done
The open configuration is one in which the two plates are separated and the sample is attached to one or both plates.
The closed configuration is configured after sample attachment in the open configuration, in which at least a portion of the sample is compressed by the two plates into a layer of substantially uniform thickness with respect to the plates. Substantially stagnant,
In a closed configuration, uniform thickness and particle geometry are configured so that there is no significant overlap between one or more target cells, between particles, and between target cells and particles, and the layers are uniform. Thickness is limited by the plate and adjusted by the plate and spacer,
The appropriate sample volume is a partial or total volume of the sample, the appropriate sample volume is analyzed for assaying non-cell analytes and target cells, and the number of particles in the appropriate sample volume is in a closed configuration. It is configured to be at least 10 pieces,
device.
[Invention 1003]
A device for assaying target cells and non-cell analytes in liquid samples.
It contains a first plate, a second plate, a plurality of spacers, a plurality of particles, a scavenger, an imager, a processor, and the like.
(h) The first plate and the second plate can move relative to each other into different configurations, including open and closed configurations;
(i) Each of the plates has a sample contact area on its surface for contact with a sample containing one or more target cells and non-cell analytes;
(j) The particles have a size of 0.2um-100um and are randomly dispersed in the sample in a closed configuration;
(k) The spacer contains an array of columns with a uniform height of 150 um or less and is secured to the first plate;
(l) The scavenger is attached to the particles, where the scavenger specifically binds to the non-cellular analyte, which binds to the photolabel that forms the labeled non-cellular analyte. Can be;
(m) The imager takes at least one image of the appropriate sample volume;
(n) The processor
(I) Detect non-cell analytes by analyzing images of at least 10 particles,
(Ii) Detect target cell analytes
It is configured to process at least one image in order to
The open configuration is one in which the two plates are separated and the sample is attached to one or both plates.
The closed configuration is configured after sample attachment in the open configuration, in which the appropriate sample volume is compressed by the two plates into a layer of substantially uniform thickness with respect to the plates. Substantially stagnant, the uniform thickness of the layer is limited by the plate and regulated by the plate and spacer,
In a closed configuration, uniform thickness and particle geometry are configured so that there is no significant overlap between one or more target cells, between particles, and between target cells and particles.
The appropriate sample volume is a partial or total volume of the sample, and the number of particles in the appropriate sample volume is configured to be at least 10 in a closed configuration.
The processor,
(I) Detect non-cell analytes by analyzing images of at least 10 particles,
(Ii) Detect target cell analytes
Is configured to process at least one image,
Device.
[Invention 1004]
The device of any of the preceding inventions, wherein the spacer is a periodic array.
[Invention 1005]
The device of any of the preceding inventions, wherein the uniform height of the spacer is at least about 0.8 times the particle diameter.
[Invention 1006]
The device of any of the preceding inventions, wherein the uniform height of one or more spacers is at least about 0.8 times the particle diameter to 200 um.
[Invention 1007]
Any device of the invention, further comprising an imager for obtaining an image of the appropriate sample volume of the sample.
[Invention 1008]
A suitable sample volume is a portion or total volume of at least a portion of the sample.
The number of particles in an appropriate sample volume is configured to be at least 10 in a closed configuration.
Any device of the invention that precedes it.
[Invention 1009]
Any device of the preceding invention, further comprising a processor for processing an image.
[Invention 1010]
Processing is
(I) The step of detecting a non-cellular analyte by analyzing one or more images of at least 10 particles, and.
(Ii) Step of detecting target cell analyte
Any device of the preceding invention, including at least one of.
[Invention 1011]
a. With the first plate;
b. With a second plate having a sample contact area on its surface
(Here, the first plate and the second plate are
i. An open configuration in which the first and second plates are at least partially separated so that a sample containing one or more target cells and a non-cell analyte can adhere between them, and an open configuration.
ii. A closed configuration in which the first plate is placed on top of the second plate to compress at least a portion of the sample between the first plate and the second plate into a layer of uniform thickness.
Can move relative to each other);
c. With one or more spacers containing a periodic array of columns
(Here the uniform thickness of the layer is adjusted by one or more spacers);
d. With multiple particles with one or more scavengers placed on its surface
Including
In a closed configuration, there should be virtually no overlap between (i) one or more target cells, (ii) multiple particles, and (iii) one or more target cells and multiple particles. In addition, the first and second plates compress at least a portion of the sample.
device.
[Invention 1012]
The device of the present invention 1011 in which one or more spacers are secured on the surface of a second plate.
[Invention 1013]
The device of the present invention 1011 in which a plurality of particles have a diameter of 0.2um to 100um.
[Invention 1014]
The device of the present invention 1011 in which a plurality of particles are randomly dispersed in the sample contact region of the second plate when the first plate and the second plate are in an open configuration.
[Invention 1015]
The device of the invention 1011, wherein the scavenger specifically binds to a labeled target analyte, including a non-cellular analyte attached to a photolabel.
[Invention 1016]
The device of the present invention 1011 in which one or more spacers have a uniform height.
[Invention 1017]
The device of the present invention 1011, wherein the uniform height of one or more spacers is at least about 0.8 times the particle diameter.
[Invention 1018]
The device of the present invention 1011 in which the uniform height of one or more spacers is less than about 200 um.
[Invention 1019]
The device of the present invention 1011, wherein the uniform height of one or more spacers is at least about 0.8 times the particle diameter to 200 um.
[Invention 1020]
The device of the invention 1011 further comprising an imager for obtaining an image of the appropriate volume of a sample.
[Invention 1021]
The device of the invention 1011 is configured such that the appropriate volume is a portion or total volume of at least a portion of the sample and the number of particles in the appropriate volume is at least 10 in a closed configuration. ..
[Invention 1022]
The device of the invention 1011 further comprising a processor for processing images.
[Invention 1023]
Can be processed
(I) The step of detecting a non-cellular analyte by analyzing one or more images of at least 10 particles, and.
(Ii) Step of detecting target cell analyte
The device of the present invention 1011 comprising at least one of.
[Invention 1024]
A method for assaying cells and non-cell analytes in a liquid sample, comprising the following steps:
(h) With the process having the device of the present invention 1001;
(i) With a sample containing or suspected of containing one or more target cells and non-cell analytes;
(j) With a step having a photolabel capable of binding the non-cellular analyte to form a labeled non-cellular analyte;
(k) With the open configuration, the process of adhering the sample to the sample contact area of the device;
(l) A step of closing the device after step (d), thereby compressing at least a portion of the sample into a layer of uniform thickness;
(m) With the step of taking at least one image of the appropriate sample volume of the sample using an imager capable of imaging photolabels and target cells;
(N) (i) With the step of analyzing at least one image to detect the presence or amount of target cells and / or non-cell analytes.
Including, how.
[Invention 1025]
A method for assaying cells and non-cell analytes in liquid samples.
(h) With the process having the device of the present invention 1002;
(i) With a sample containing or suspected of containing one or more target cells and non-cell analytes;
(j) With a step having a photolabel capable of binding the non-cellular analyte to form a labeled non-cellular analyte;
(k) With the open configuration, the process of adhering the sample to the sample contact area of the device;
(l) A step of closing the device after step (d), thereby compressing at least a portion of the sample into a layer of uniform thickness;
(m) With the step of taking at least one image of the appropriate sample volume of the sample using an imager capable of imaging photolabels and target cells;
With the steps of (n) using a processor to analyze at least one image to (i) detect the presence or amount of target cells and / or non-cell analytes.
Including
The processor,
(I) Detect non-cell analytes by analyzing images of at least 10 particles,
(Ii) Detect target cell analytes
Is configured to process at least one image,
Method.
[Invention 1026]
Analyzing images of at least 10 particles in the detection of non-cell analytes is due to digital counting.
In digital counting, the presence or amount of non-cell analyte in the sample is determined from the number or proportion of beads that have an optical signal above the threshold, and the proportion is the number of beads that have an optical signal above the threshold. The ratio to the number of beads having an optical signal below the threshold,
Any device, device, or method of the invention that precedes it.
[Invention 1027]
In the detection of a non-cell analyte, analyzing the image of at least 10 particles is an analog that determines the presence or amount of the non-cell analyte in the sample from the optical signal amplitudes from all beads in the appropriate sample region. Any device, device, or method of the preceding invention, which is by method of counting.
[Invention 1028]
The device, apparatus, or method of any of the preceding inventions, further comprising two or more images, wherein at least one image is a darkfield image and at least one is a brightfield image.
[Invention 1029]
One or more particles,
(I) Create a single layer of particles between the plates,
(Ii) Do not create substantial overlap between particles between plates
Has sufficient geometry (shape and size),
The device, apparatus, and method of any of the preceding inventions.
[Invention 1030]
One or more particles,
(I) Create a single layer of particles between the plates,
(Ii) Do not create substantial overlap between particles between plates
Has sufficient density for
The device, apparatus, and method of any of the preceding inventions.
[Invention 1031]
The device, apparatus, and method of any of the preceding inventions, wherein one or more particles are mixed with the sample before adhering it into the device.
[Invention 1032]
One or more particles are placed on at least one of the first and second plates prior to sample attachment and then mixed with the sample upon sample attachment to the device. , Any device, device, and method of the invention that precedes.
[Invention 1033]
The device, apparatus, and method of any of the preceding inventions, wherein the one or more particles have various shapes.
[Invention 1034]
The device, apparatus, and method of any of the preceding inventions, wherein the one or more particles have a maximum dimension in the range of 0.05um to 100um.
[Invention 1035]
If present, the non-cell analyte is detected using a competitive assay that includes the step of providing a labeled competitive detector that competes with the non-cellular analyte to bind to the scavenger for the analyte. The device, apparatus, and method of any of the preceding inventions.
[Invention 1036]
A non-cell assay is detected using a non-competitive assay that comprises the step of providing a labeled detector that specifically binds to another binding site of the non-cell analyte.
Another binding site is a different set of binding than the scavenger binding site,
The device, apparatus, and method of any of the preceding inventions.
[Invention 1037]
One of the images is a direct image containing information on the topology (ie, geometry) and the position of the particles in a common area, and the other image is a competition labeled as the main signal of the image. A device, apparatus, and method of any of the preceding inventions, which is a signal image configured to include a signal from a detector.
[Invention 1038]
The device, apparatus, and method of any of the preceding inventions, wherein the sample holder comprises first and second plates that can move relative to each other into different configurations, including open and closed configurations.
[Invention 1039]
The device, apparatus, and method of any of the preceding inventions, wherein the assay is for diagnosing a viral or bacterial infection of interest.
[Invention 1040]
Using a portable electronic device,
(I) One or more first values corresponding to the amount of said analyte associated with the one or more scavengers.
(Ii) With one or more second values corresponding to the amount of said one or more cells in the sample
Including the process of determining
The device, apparatus, and method of any of the preceding inventions.
[Invention 1041]
The device, apparatus, and method of any of the preceding inventions, wherein the plurality of particles are removably bonded to at least one of the first plate and the second plate.
[Invention 1042]
Any of the preceding inventions, wherein the plurality of particles are selected from the group consisting of glass beads, magnetic beads, polystyrene beads, plastic beads, latex particles, metal beads, alloy beads, and beads containing metals and dielectrics. Devices, equipment, and methods.
[Invention 1043]
The device, apparatus, and method of any of the preceding inventions, wherein the photolabel is selected from a reporter molecule, a fluorescent molecule, a dye molecule, a non-selective dye molecule, and a redox reactive molecule.
[Invention 1044]
The plurality of particles include a first plurality of particles and a second plurality of particles.
The first plurality of particles comprises one or more first scavengers bound thereto.
The second plurality of particles comprises one or more second scavengers bound thereto.
The device, apparatus, and method of any of the preceding inventions.
[Invention 1045]
The one or more first scavengers can associate with the first epitope of the analyte and the one or more second scavengers with the second epitope of the analyte. Any device, device, and method of the preceding invention that can be met.
[Invention 1046]
Any of the preceding inventions, wherein the first plurality of particles are arranged along the first plate and the second plurality of particles are arranged along the second plate. Devices, devices, and methods.
[Invention 1047]
The device, apparatus, and method of any of the preceding inventions, wherein the first plurality of particles is selected from the group consisting of glass beads, magnetic beads, polystyrene beads, and latex particles.
[Invention 1048]
The device, apparatus, any of the preceding inventions, wherein the second plurality of particles is selected from the group consisting of a reporter molecule, a fluorescent molecule, a dye molecule, a non-selective dye molecule, and a redox-reactive molecule. And how.
[Invention 1049]
Any of the preceding inventions, wherein at least one of the one or more first scavengers and the one or more second scavengers can associate specifically with the analyte. Devices, equipment, and methods.
[Invention 1050]
Any of the preceding inventions, wherein the device further comprises one or more spacers in the space and is located along at least one of the first plate or the second plate. Devices, devices, and methods.
[Invention 1051]
The device, apparatus, and method of any of the preceding inventions, wherein the one or more spacers determine the distance between the first plate and the second plate.
[Invention 1052]
Is the length of the one or more spacers along the direction from the first plate to the second plate approximately shorter than the average diameter of the one or more cells in the sample? Or approximately equal, any of the preceding devices, devices, and methods of the invention.
[Invention 1053]
The device, apparatus, and method of any of the preceding inventions, wherein the plurality of particles have various shapes.
[Invention 1054]
The device, apparatus, and method of any of the preceding inventions, wherein the one or more cells in the space are substantially arranged as a single layer that is not confluent.
[Invention 1055]
The device, apparatus, and method of any of the preceding inventions, wherein the one or more cells in the space are in a suspended state.
[Invention 1056]
The determination comprises acquiring one or more images of the region comprising the at least a portion of the sample in the space, the imaged region being among the plurality of particles. Any device, device, and method of the preceding invention, including at least one.
[Invention 1057]
The device, apparatus, and method of any of the preceding inventions, wherein the one or more first values correspond to the intensity of the energy emitted by the particles.
[Invention 1058]
The device, apparatus, and method of any of the preceding inventions, further comprising contacting the sample with a cellular dye capable of associating with the one or more cells.
[Invention 1059]
The device, apparatus, and method of any of the preceding inventions, wherein the one or more second values correspond to the intensity of the energy released by the cellular dye.
[Invention 1060]
Any device of the preceding invention, further comprising using an algorithm to determine the association between the one or more first values and the one or more second values. , Equipment, and method.
[Invention 1061]
Prior to classifying the level of infection in a subject from which the sample was obtained, based on the association between the one or more first values and the one or more second values. Any device, device, and method of the invention.
[Invention 1062]
The device, apparatus, and method of any of the preceding inventions, wherein said infection is a viral infection, a bacterial infection, or a combination thereof.
[Invention 1063]
The one or more cells are leukocytes (white blood cells), leukocytes, granulocytes, agranocytes, myeloid cells, lymphocytes, neutrophils, eosinophils, basinocytes, lymphs. The device, apparatus, and method of any of the preceding inventions selected from the group consisting of lymphocytes, T cells, B cells, natural killer cells, and monospheres.
[Invention 1064]
The preceding book, wherein the analyte is selected from the group consisting of polypeptides, proteins, tagged proteins, fusion proteins, antibodies, small molecules, viral particles, bacteria, C-reactive proteins, and any fragment thereof. Devices, devices, and methods of the invention.
[Invention 1065]
The device, apparatus, and method of any of the preceding inventions, further comprising contacting at least a portion of the sample with a competitive detector capable of associating with the one or more scavengers.
[Invention 1066]
The device, apparatus, and method of any of the preceding inventions, wherein the competitive detector competitively binds to the one or more scavengers together with the analyte.
[Invention 1067]
The device, apparatus, and method of any of the preceding inventions, further comprising contacting at least a portion of the sample with an auxiliary detector capable of associating with the analyte.
[Invention 1068]
The one or more scavengers can associate with the first epitope of the analyte,
The auxiliary detector can associate with a second epitope of the analyte,
The device, apparatus, and method of any of the preceding inventions.
[Invention 1069]
The method is less than about 10 seconds, less than about 20 seconds, less than about 30 seconds, less than about 40 seconds, less than about 50 seconds, less than about 60 seconds, less than about 120 seconds, less than about 180 seconds, less than about 240 seconds, about. Any device, device, and method of the preceding invention performed in less than 300 seconds, less than about 400 seconds, less than about 500 seconds, or less than about 1000 seconds.
[Invention 1070]
The device, apparatus, and method of any of the preceding inventions, wherein steps (d)-(f) are performed in the absence of any cleaning step.
[Invention 1071]
The device, apparatus, and method of any of the preceding inventions, wherein the first and second plates are pressed together by hand.
[Invention 1072]
The device, apparatus, and method of any of the preceding inventions, wherein the non-cell analyte is a polypeptide, nucleic acid, or metabolite.
[Invention 1073]
Samples are sheep water, bunch water, vitreous body fluid, blood, whole blood, fractionated blood, plasma, serum, breast milk, cerebrospinal fluid, ear stain, sputum, sputum juice, internal lymph, external lymph, feces, gastric acid, gastric fluid, lymph. , Mucus, nasal leak, sputum, pericardial fluid, peritoneal fluid, pleural fluid, pus, mucosal secretions, saliva, sebum, semen, sputum, sweat, salivary fluid, tears, vomitus, urine, and breath condensate , Any device, device, and method of the invention that precedes.
[Invention 1074]
The device, apparatus, and method of any of the preceding inventions, further comprising diagnosing a disease based on the results.
[Invention 1075]
The device, device, and method of any of the preceding inventions, wherein the disease is cancer, inflammatory disease, or infectious disease.
[Invention 1076]
The device, apparatus, and method of any of the preceding inventions, wherein the method detects a plurality of different non-cell analytes.
[Invention 1077]
The device, apparatus, and method of any of the preceding inventions, wherein the sample comprises one or more target cells.
[Invention 1078]
The device of any of the preceding device inventions, wherein the sample comprises one or more non-cell analytes.
[Invention 1079]
The device of any of the preceding device inventions, in which one or more particles have a diameter of 0.2 um to 100 um.
[Invention 1080]
Any device of the preceding device invention in which the scavenger binds to a non-cell analyte.
[Invention 1081]
Any device of the preceding device invention in which at least a portion of the sample is compressed by a first plate and a second plate into a layer of substantially uniform thickness.
[Invention 1082]
Any device of the preceding device invention in which at least a portion of the sample is substantially stagnant with respect to the plate.
[Invention 1083]
The sample thickness in the closed configuration
(I) so that one or more target cells have a single layer between the plates and
(Ii) so that there is no substantial overlap between one or more target cells
Any device of the preceding device invention that is configured.
[Invention 1084]
One or more particles,
(I) The particles have a single layer between the plates and
(Ii) So that there is no substantial overlap between the particles
Any device of the preceding device invention having a geometric shape (shape and size) to be constructed.
[Invention 1085]
One or more particles,
(I) The particles have a single layer between the plates and
(Ii) So that there is no substantial overlap between the particles
Any device of the preceding device invention having a configured density.
[Invention 1086]
Any device of the preceding device invention, further comprising a spacer in one or both of the first plate and the second plate.
[Invention 1087]
Any device of the preceding device invention, further comprising a labeled competition detector to compete with the analyte, if present, to bind to the scavenger to the analyte in the competitive assay.
[Invention 1088]
A preceding device further comprising a labeled detection agent that specifically binds to the additional binding site of the analyte in a non-competitive assay, where the additional binding site is different from the binding site by the scavenger. Any device of the invention.
[Invention 1089]
An imager that images target cells and non-cell analytes when the sample is between two plates and the plates are in a closed configuration.
Any device of the preceding device invention, further comprising:
[Invention 1090]
One of the preceding devices of the invention, wherein the device comprises two plates and a spacer and the spacer-to-spacer distance (SD) is about 120 um (micrometers) or less.
[Invention 1091]
One of the preceding devices of the invention, wherein the device comprises two plates and a spacer and the interspacer distance (SD) is about 100 um (micrometers) or less.
[Invention 1092]
The device includes two plates and spacers, and the interspacer distance (ISD) squared (ISD ^ 4 / (hE)) divided by the thickness (h) and Young's modulus (E) of the flexible plate , 5 × 10 ^ 6um ^ 3 / GPa or less, any of the preceding devices of the invention.
[Invention 1093]
The device includes two plates and spacers, and the interspacer distance (ISD) squared (ISD ^ 4 / (hE)) divided by the thickness (h) and Young's modulus (E) of the flexible plate , 5 × 10 ^ 5um3 / GPa or less, any of the preceding devices of the invention.
[Invention 1094]
The device comprises two plates and spacers, in which the spacers are at least about twice as large as the column shape, substantially flat top surface, predetermined substantially uniform height, and size of the analyte. It has a fixed distance between spacers, and the Young's modulus of the spacer multiplied by the filling rate of the spacer is 2MPa or more, and the filling rate is the ratio of the spacer contact area to the total plate area, and each spacer. For any device of the preceding invention, wherein the ratio of the lateral dimension of the spacer to its height is at least 1.
[Invention 1095]
The device comprises two plates and spacers, in which the spacers are at least about twice as large as the column shape, substantially flat top surface, predetermined substantially uniform height, and size of the analyte. It has a fixed distance between spacers, and the Young's modulus of the spacer multiplied by the packing rate of the spacer is 2MPa or more, and the filling rate is the ratio of the spacer contact area to the total plate area, and each spacer. The ratio of the lateral dimension of the spacer to its height is at least 1 and the interspacer distance (ISD) divided by the thickness (h) and Young's modulus (E) of the flexible plate is the fourth power (ISD). ^ 4 / (hE)) is 5 × 10 ^ 6um ^ 3 / GPa or less, any of the preceding devices of the invention.
[Invention 1096]
The device contains two plates and a spacer, the ratio of the spacer spacing distance to the average width of the spacer is 2 or more, and the spacer filling factor multiplied by the Young's modulus of the spacer is 2 MPa or more. Any device of the invention.
[Invention 1097]
The device, apparatus, system, smartphone system, or method of any of the preceding inventions, wherein the analyte is selected from the group consisting of proteins, peptides, nucleic acids, synthetic compounds, and inorganic compounds.
[Invention 1098]
The device, device, system, smartphone system, or method of any of the preceding inventions, wherein the spacer has the shape of a pillar and the ratio of width to height of the pillar is 1 or greater.
[Invention 1099]
Any of the preceding methods of the invention, wherein the sample attached to one or both of the plates has an unknown amount.
[Invention 1100]
The device, device, system, smartphone system, or method of any of the preceding inventions, wherein the spacer has a column shape and the column has a substantially uniform cross section.

Claims

試料中の標的細胞および非細胞分析物をアッセイするためのデバイスであって、
第1のプレートと、第2のプレートと、複数のスペーサと、複数の粒子と、捕捉剤と、を含み、
（a）第1のプレートおよび第2のプレートが、開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成へと互いに相対的に移動可能であり；
（b）プレートの各々が、そのそれぞれの表面上に、1つまたは複数の標的細胞および非細胞分析物を含有するかまたは含有する疑いのある試料に接触するための試料接触領域を有し；
（c）スペーサが、150μm以下の均一な高さを有する柱のアレイを含み、第1のプレートに固定され；
（d）粒子が、スペーサの高さ以下である、0.2μm～100μmのサイズを有し、開放構成では、試料接触領域の一つにおいて分散され；
（e）捕捉剤が粒子に取り付けられ、ここで捕捉剤は、非細胞分析物に結合し、
開放構成では、2つのプレートが分離され、試料が一方または両方のプレートに付着され、
開放構成での試料付着の後に構成される閉鎖構成では、適切な試料体積が、2つのプレートによって実質的に均一な厚さの層に圧縮され、プレートに対して実質的に停滞し、層の均一な厚さが、プレートによって限定されかつプレートおよびスペーサによって調節され、
適切な試料体積とは、非細胞分析物および標的細胞が分析される、試料の部分であり、
閉鎖構成において、1つまたは複数の標的細胞間、粒子間、および標的細胞と粒子との間で著しい重なりがないように、スペーサの高さおよび粒子の幾何学的形状が構成されている、
デバイス。 A device for assaying target cells and non-cell analytes in a sample .
It contains a first plate, a second plate, a plurality of spacers, a plurality of particles, and a scavenger.
( A ) The first and second plates can move relative to each other into different configurations, including open and closed configurations;
( B ) Each of the plates has a sample contact area on its surface for contacting a sample containing or suspected of containing one or more target cells and non-cell analytes;
( C ) The spacer contains an array of columns with a uniform height of 150 μm or less and is secured to the first plate;
( D ) The particles have a size of 0.2 μm to 100 μm , which is less than or equal to the height of the spacer, and are dispersed in one of the sample contact areas in the open configuration;
( E ) The scavenger is attached to the particles, where the scavenger binds to the non-cellular analyte and
In the open configuration , the two plates are separated and the sample is attached to one or both plates .
In the closed configuration, which is configured after sample attachment in the open configuration, the appropriate sample volume is compressed by the two plates into a layer of substantially uniform thickness, which is substantially stagnant with respect to the plates. The uniform thickness of the layer is limited by the plate and adjusted by the plate and spacer,
A suitable sample volume is the portion of the sample from which the non-cell analyte and target cells are analyzed.
In a closed configuration, the height of the spacer and the geometry of the particles are configured so that there is no significant overlap between one or more target cells, between the particles, and between the target cells and the particles.
device.

（a）請求項1記載のデバイスを有する工程と、(A) The process having the device according to claim 1 and
（b）標的細胞および非細胞分析物を含有するかまたは含有する疑いのある試料を付着させる工程と、 (B) A step of attaching a sample containing or suspected of containing target cells and non-cell analytes, and
（c）工程（b）の後に、2つのプレートを、試料中の標識された検出剤とともに、閉鎖構成にする工程と、 (C) After step (b), the two plates are closed together with the labeled detector in the sample.
（d）プレートの閉鎖構成において、イメージャを使用して、標的細胞および試料中の標識された検出剤の1つまたは複数の画像を撮る工程と、 (D) In a closed plate configuration, the imager is used to image one or more of the labeled detectors in the target cells and the sample.
（e）試料中の標的細胞および非細胞分析物の存在または量を検出するために、1つまたは複数の画像を分析する工程と (E) A step of analyzing one or more images to detect the presence or amount of target cells and non-cell analytes in a sample.
を含む、試料中の標的細胞および非細胞分析物をアッセイするための方法であって、A method for assaying target cells and non-cell analytes in a sample, including.
捕捉剤もしくは検出剤、または、捕捉剤および検出剤の両方が、非細胞分析物に特異的に結合する、A scavenger or detector, or both a scavenger and a scavenger, specifically binds to a non-cellular analyte.
前記方法。The method.

試料中の標的細胞および非細胞分析物をアッセイするための装置であって、
請求項1記載のデバイスと、
適切な試料体積の少なくとも1つの画像を撮るイメージャと、
（i）粒子の画像を分析することによって非細胞分析物を検出し、
（ii）標的細胞分析物を検出する
ために、少なくとも1つの画像を処理するように構成されている、プロセッサと
を含む、前記装置。 A device for assaying target cells and non-cell analytes in a sample .
The device according to claim 1 and
With an imager that takes at least one image of the appropriate sample volume,
(I) Detect non-cellular analytes by analyzing images of particles ,
(Ii) With a processor configured to process at least one image to detect the target cell analyte.
The device including .

請求項1記載のデバイスと、The device according to claim 1 and
標識された検出剤と With a labeled detector
を含む、試料中の標的細胞および非細胞分析物をアッセイするためのキットであって、A kit for assaying target cells and non-cell analytes in a sample, including.
捕捉剤もしくは検出剤、または、捕捉剤および検出剤の両方が、非細胞分析物に特異的に結合する、A scavenger or detector, or both a scavenger and a scavenger, specifically binds to a non-cellular analyte.
前記キット。The kit.

スペーサがスケールマーカーである、請求項1記載のデバイス。The device of claim 1, wherein the spacer is a scale marker.

開放構成において、粒子が、スペーサが固定されたのと同じプレート上にある、請求項1記載のデバイス。The device of claim 1, wherein in the open configuration, the particles are on the same plate on which the spacers are fixed.

2つのスペーサ間の距離が、予め決定されている、請求項1記載のデバイス。The device of claim 1, wherein the distance between the two spacers is predetermined.

適切な試料体積が、試料の少なくとも一部のうちの一部分または全体積であり、
適切な試料体積中の粒子数が、閉鎖構成では、少なくとも10個となるように構成されている、
請求項1記載のデバイス。 A suitable sample volume is a portion or total volume of at least a portion of the sample.
The number of particles in an appropriate sample volume is configured to be at least 10 in a closed configuration.
The device according to claim 1 .

画像を処理するためのプロセッサをさらに含む、請求項3記載の装置。 The apparatus of claim 3 , further comprising a processor for processing the image.

画像を処理するためのプロセッサをさらに含み、前記処理が、
（i）少なくとも10個の粒子のうちの1つまたは複数の画像を分析することによって非細胞分析物を検出する工程、および
（ii）標的細胞分析物を検出する工程
のうちの少なくとも1つを含む、請求項3記載の装置。 It further comprises a processor for processing the image, said processing.
(I) At least one of the steps of detecting a non-cell analyte by analyzing one or more images of at least 10 particles, and (ii) the step of detecting a target cell analyte. The device of claim 3 , including.

1つまたは複数のスペーサが、第2のプレートの表面上に固定されている、請求項1記載のデバイス。 The device of claim 1 , wherein one or more spacers are secured on the surface of the second plate.

スペーサが、周期的なアレイである、請求項1記載のデバイス。The device of claim 1, wherein the spacer is a periodic array.

前記試料接触領域において複数の粒子がランダムに分散される、請求項1記載のデバイス。 The device according to claim 1 , wherein a plurality of particles are randomly dispersed in the sample contact region.

前記試料接触領域において複数の粒子が周期的に分散される、請求項1記載のデバイス。The device according to claim 1, wherein a plurality of particles are periodically dispersed in the sample contact region.

染色試薬をさらに含む、請求項1記載のデバイス。The device of claim 1, further comprising a stain reagent.

標識された検出剤をさらに含み、前記標識された検出剤が、試料接触領域の1つに乾燥コーティングされている、請求項1記載のデバイス。The device of claim 1, further comprising a labeled detection agent, wherein the labeled detection agent is dry coated on one of the sample contact areas.

標識された検出剤をさらに含み、捕捉剤および標識された検出剤が、競合アッセイ用であり、それぞれの捕捉剤が、特異的に、非細胞分析物または標識された検出剤のいずれかを捕捉するが両方は捕捉しない、請求項1記載のデバイス。Further comprising a labeled detector, the capture agent and the labeled detector are for competing assays, where each capture agent specifically captures either the non-cell analyte or the labeled detector. The device of claim 1, which does but does not capture both.

プレートの1つが可撓性であり、可撓性プレートの厚さに可撓性プレートのヤング率を乗じたものは、60～750GPa-μmの範囲であり、スペーサが周期的であり、かつ120μm以下の周期を有する、請求項1記載のデバイス。One of the plates is flexible, the thickness of the flexible plate multiplied by Young's modulus of the flexible plate ranges from 60 to 750 GPa-μm, the spacers are periodic and 120 μm. The device according to claim 1, which has the following period.

プレートの1つが可撓性であり、可撓性プレートの厚さに可撓性プレートのヤング率を乗じたものは、60～750GPa-μmの範囲であり、可撓性プレートの厚さ（h）および可撓性プレートのヤング率（E）で割ったスペーサ間距離（ISD）の4乗であるISDOne of the plates is flexible and the thickness of the flexible plate multiplied by Young's modulus of the flexible plate ranges from 60 to 750 GPa-μm and the thickness of the flexible plate (h). ) And the ISD, which is the fourth power of the interspacer distance (ISD) divided by Young's modulus (E) of the flexible plate. ^4Four ／（hE）は、10/ (HE) is 10 ⁶⁶ μmμm ³³ ／GPa以下である、請求項1記載のデバイス。The device according to claim 1, which is less than or equal to / GPa.

適切な試料体積中の粒子数が、閉鎖構成では、少なくとも10個となるように構成されている、請求項1に記載のデバイス。 The device of claim 1 , wherein the number of particles in an appropriate sample volume is configured to be at least 10 in a closed configuration.

プレートの1つが可撓性であり、スペーサは、200μm以下の中心間距離を有し、スペーサのヤング率にスペーサの充填率を乗じた値は、20MPa以上であり、充填率とは、スペーサの接触面積と、全プレート面積との比率であり、可撓性プレートの厚さ（h）および可撓性プレートのヤング率（E）で割ったスペーサ間距離（ISD）の4乗であるISDOne of the plates is flexible, the spacer has a center-to-center distance of 200 μm or less, and the Young's modulus of the spacer multiplied by the packing factor of the spacer is 20 MPa or more. ISD, which is the ratio of the contact area to the total plate area, and is the fourth power of the interspacer distance (ISD) divided by the thickness of the flexible plate (h) and the Young's modulus (E) of the flexible plate. ^4Four ／（hE）は、10/ (HE) is 10 ⁶⁶ μmμm ³³ ／GPa以下であり、可撓性プレートの厚さに可撓性プレートのヤング率を乗じたものは、60～750GPa-μmである、請求項1に記載のデバイス。The device according to claim 1, wherein the device which is less than / GPa and is obtained by multiplying the thickness of the flexible plate by the Young's modulus of the flexible plate is 60 to 750 GPa-μm.

可撓性プレートの厚さ（h）および可撓性プレートのヤング率（E）で割ったスペーサ間距離（ISD）の4乗であるISDISD, which is the fourth power of the interspacer distance (ISD) divided by the thickness (h) of the flexible plate and Young's modulus (E) of the flexible plate. ^4Four ／（hE）は、10/ (HE) is 10 ^5Five μmμm ³³ ／GPa以下であり、プレートの1つが可撓性であり、可撓性プレートの厚さに可撓性プレートのヤング率を乗じたものは、60～750GPa-μmの範囲である、請求項1記載のデバイス。1 / GPa or less, one of the plates is flexible, and the thickness of the flexible plate multiplied by Young's modulus of the flexible plate is in the range of 60-750 GPa-μm, claim 1. The device described.

液体試料中の細胞および非細胞分析物をアッセイするための方法であって、
(a）請求項1に記載のデバイスを有する工程と；
(b）1つまたは複数の標的細胞および非細胞分析物を含有するかまたは含有する疑いのある試料を有する工程と；
(c）非細胞分析物を結合し標識された非細胞分析物を形成することができる光標識を有する工程と；
(d）開放構成で、デバイスの試料接触領域について試料を付着させる工程と；
(e）工程（d）の後に、デバイスを閉鎖構成にする工程であって、それにより、試料の少なくとも一部分を、均一な厚さを有する層に圧縮する、工程と；
(f）光標識および標的細胞を画像化することができるイメージャを使用して、試料の適切な試料体積の少なくとも1つの画像を撮る工程と；
(g）（i）標的細胞および／または（ii）非細胞分析物の存在または量を検出するために少なくとも1つの画像を分析する工程と
を含む、方法。 A method for assaying cells and non-cell analytes in liquid samples .
( A ) The process having the device according to claim 1;
( B ) With a sample containing or suspected of containing one or more target cells and non-cell analytes;
( C ) With a step having a photolabel capable of binding the non-cellular analyte to form a labeled non-cellular analyte;
( D ) With the open configuration, the process of adhering the sample to the sample contact area of the device;
( E ) A step of closing the device after step (d), thereby compressing at least a portion of the sample into a layer of uniform thickness;
( F ) With the step of taking at least one image of the appropriate sample volume of the sample using an imager capable of imaging photolabels and target cells;
A method comprising ( g ) (i) analyzing at least one image to detect the presence or amount of target cells and / or non-cell analytes.

液体試料中の細胞および非細胞分析物をアッセイするための方法であって、
(a）請求項1に記載のデバイスを有する工程と；
(b）1つまたは複数の標的細胞および非細胞分析物を含有するかまたは含有する疑いのある試料を有する工程と；
(c）非細胞分析物を結合し標識された非細胞分析物を形成することができる光標識を有する工程と；
(d）開放構成で、デバイスの試料接触領域について試料を付着させる工程と；
(e）工程（d）の後に、デバイスを閉鎖構成にする工程であって、それにより、試料の少なくとも一部分を、均一な厚さを有する層に圧縮する、工程と；
(f）光標識および標的細胞を画像化することができるイメージャを使用して、試料の適切な試料体積の少なくとも1つの画像を撮る工程と；
(g）プロセッサを使用して、（i）標的細胞および／または（ii）非細胞分析物の存在または量を検出するために少なくとも1つの画像を分析する工程と
を含み、
プロセッサが、
（i）少なくとも10個の粒子の画像を分析することによって非細胞分析物を検出し、
（ii）標的細胞分析物を検出する
ために、少なくとも1つの画像を処理するように構成されている、
方法。 A method for assaying cells and non-cell analytes in liquid samples.
( A ) The process having the device according to claim 1 ;
( B ) With a sample containing or suspected of containing one or more target cells and non-cell analytes;
( C ) With a step having a photolabel capable of binding the non-cellular analyte to form a labeled non-cellular analyte;
( D ) With the open configuration, the process of adhering the sample to the sample contact area of the device;
( E ) A step of closing the device after step (d), thereby compressing at least a portion of the sample into a layer of uniform thickness;
( F ) With the step of taking at least one image of the appropriate sample volume of the sample using an imager capable of imaging photolabels and target cells;
It comprises the steps of ( g ) using a processor to analyze at least one image to detect (i) the presence or amount of target cells and / or non-cell analytes.
The processor,
(I) Detect non-cell analytes by analyzing images of at least 10 particles,
(Ii) configured to process at least one image to detect the target cell analyte,
Method.

非細胞分析物の検出において、少なくとも10個の粒子の画像を分析することが、デジタル方式の計数によるものであり、
デジタル方式の計数において、試料中の非細胞分析物の存在または量が、閾値を上回る光信号を有する粒子の数または割合から決定され、割合が、閾値を上回る光信号を有する粒子の数と、閾値を下回る光信号を有する粒子の数との比率である、
請求項1記載のデバイス。 Analyzing images of at least 10 particles in the detection of non-cell analytes is due to digital counting.
In digital counting, the presence or amount of non-cell analyte in a sample is determined from the number or proportion of particles having an optical signal above the threshold, and the proportion is determined by the number of particles having an optical signal above the threshold. The ratio to the number of particles having an optical signal below the threshold,
The device according to claim 1 .

非細胞分析物の検出において、少なくとも10個の粒子の画像を分析することが、適切な試料領域におけるすべての粒子からの光信号振幅から試料中の非細胞分析物の存在または量を決定するアナログ方式の計数によるものである、請求項1記載のデバイス。 In the detection of a non-cell analyte, analyzing the image of at least 10 particles is an analog that determines the presence or amount of the non-cell analyte in the sample from the optical signal amplitudes from all the particles in the appropriate sample region. The device of claim 1 , which is by method of counting .

試料層の共通領域／体積の2つ以上の画像をさらに含み、試料層の共通領域は、1つまたは複数の粒子のうちの少なくとも1つの粒子を含有する試料の領域である、請求項1に記載のデバイス。2. The common region of the sample layer further comprises two or more images of the common region / volume of the sample layer, wherein the common region of the sample layer is a region of the sample containing at least one particle of one or more particles. Described device.

少なくとも1つの画像が暗視野画像であり、少なくとも1つが明視野画像である、2つ以上の画像を画像化する、少なくとも1つのイメージャをさらに含む、請求項1記載のデバイス。 The device of claim 1 , further comprising at least one imager, wherein at least one image is a darkfield image and at least one is a brightfield image, imaging two or more images .

第1のプレートおよび／または第2のプレートのうちの1つまたは複数の表面上にコーティングされた試薬をさらに含む、請求項1に記載のデバイス。The device of claim 1, further comprising a reagent coated on one or more surfaces of a first plate and / or a second plate.

1つまたは複数の粒子が、
（i）プレート間に粒子の単一層を生成し、
（ii）プレート間の粒子間に実質的な重なりを生成しない
ように構成された密度を有する、
請求項1記載のデバイス。 One or more particles,
(I) Create a single layer of particles between the plates,
(Ii) Do not create substantial overlap between particles between plates
With a density configured to
The device according to claim 1 .

1つまたは複数の粒子が、デバイス内に試料を付着させる前に試料と混合される、請求項1記載のデバイス。 The device of claim 1 , wherein one or more particles are mixed with the sample before adhering the sample into the device .

1つまたは複数の粒子が、試料の付着の前に、第1のプレートと第2のプレートのうちの少なくとも1つに配置され、その後デバイスへの試料の付着の際に、試料と混合される、請求項1記載のデバイス。 One or more particles are placed on at least one of the first and second plates prior to sample attachment and then mixed with the sample upon sample attachment to the device. , The device according to claim 1 .

1つまたは複数の粒子が、様々な形状を有する、請求項1記載のデバイス。 The device of claim 1 , wherein the one or more particles have various shapes .

存在する場合、分析物に対する捕捉剤に結合するために、非細胞分析物と競合する標識された競合検出剤を提供する工程を含む競合アッセイを使用して、非細胞分析物が検出される、請求項1記載のデバイス。 If present, the non-cell analyte is detected using a competitive assay that includes the step of providing a labeled competitive detector that competes with the non-cellular analyte to bind to the scavenger for the analyte. The device according to claim 1 .

非細胞分析物の別の結合部位に特異的に結合する標識された検出剤を提供する工程を含む非競合アッセイを使用して、非細胞分析物が検出され、
別の結合部位が、捕捉剤による結合部位とは異なる結合セットである、
請求項1記載のデバイス。 A non-cell assay is detected using a non-competitive assay that comprises the step of providing a labeled detector that specifically binds to another binding site of the non-cell analyte.
Another binding site is a different set of binding than the scavenger binding site,
The device according to claim 1 .

画像のうちの1つが、トポロジーおよび共通領域における粒子の位置の情報を含む直接的な画像であり、他の画像が、画像の主要な信号として、標識された競合検出剤からの信号を含むように構成される信号画像である、請求項2記載の方法 One of the images is a direct image containing information on the topology and the position of the particles in the common area, and the other image contains the signal from the labeled competition detector as the main signal of the image. The method according to claim 2 , which is a signal image configured as described above.

携帯型電子機器を使用して、
（i）前記1つまたは複数の捕捉剤と会合した前記分析物の量に対応する1つまたは複数の第1の値と、
（ii）前記試料内の前記1つまたは複数の細胞の量に対応する1つまたは複数の第2の値と
を決定する工程をさらに含む、
請求項1記載のデバイス。 Using a portable electronic device,
(I) One or more first values corresponding to the amount of said analyte associated with the one or more scavengers.
(Ii) further comprising determining with one or more second values corresponding to the amount of said one or more cells in the sample.
The device according to claim 1 .

前記複数の粒子が、ガラス粒子、磁気粒子、ポリスチレン粒子、プラスチック粒子、ラテックス粒子、金属粒子、合金粒子、ならびに金属および誘電体を含む粒子からなる群より選択される、請求項1記載のデバイス。 The device according to claim 1 , wherein the plurality of particles are selected from the group consisting of glass particles , magnetic particles , polystyrene particles , plastic particles , latex particles, metal particles , alloy particles , and particles containing a metal and a dielectric. ..

前記複数の粒子が、第1の複数の粒子および第2の複数の粒子を含み、
前記第1の複数の粒子が、そこに結合された1つまたは複数の第1の捕捉剤を含み、
前記第2の複数の粒子が、そこに結合された1つまたは複数の第2の捕捉剤を含む、
請求項1記載のデバイス。 The plurality of particles include a first plurality of particles and a second plurality of particles.
The first plurality of particles comprises one or more first scavengers bound thereto.
The second plurality of particles comprises one or more second scavengers bound thereto.
The device according to claim 1 .

前記1つまたは複数の第1の捕捉剤が、前記分析物の第1のエピトープと会合することができ、前記1つまたは複数の第2の捕捉剤が、前記分析物の第2のエピトープと会合することができる、請求項1記載のデバイス。 The one or more first scavengers can associate with the first epitope of the analyte and the one or more second scavengers with the second epitope of the analyte. The device of claim 1 , which can be met .

前記第1の複数の粒子が、前記第1のプレートに沿って配置され、前記第2の複数の粒子が、前記第2のプレートに沿って配置されている、請求項1記載のデバイス。 The device according to claim 1 , wherein the first plurality of particles are arranged along the first plate, and the second plurality of particles are arranged along the second plate .

前記第1の複数の粒子が、ガラス粒子、磁気粒子、ポリスチレン粒子、およびラテックス粒子からなる群より選択される、請求項1記載のデバイス。 The device according to claim 1 , wherein the first plurality of particles are selected from the group consisting of glass particles , magnetic particles , polystyrene particles , and latex particles .

前記第2の複数の粒子が、レポーター分子、蛍光性分子、色素分子、非選択性色素分子、およびレドックス反応性分子からなる群より選択される、請求項1記載のデバイス。 The device according to claim 1 , wherein the second plurality of particles are selected from the group consisting of a reporter molecule, a fluorescent molecule, a dye molecule, a non-selective dye molecule, and a redox-reactive molecule .

前記第1のプレートから前記第2のプレートへの方向に沿った前記1つまたは複数のスペーサの長さは、最大約500マイクロメートル、最大約250マイクロメートル、最大約100マイクロメートル、最大約90マイクロメートル、最大約80マイクロメートル、最大約70マイクロメートル、最大約60マイクロメートル、最大約50マイクロメートル、最大約40マイクロメートル、最大約30マイクロメートル、最大約25マイクロメートル、最大約20マイクロメートル、最大約15マイクロメートル、最大約10マイクロメートル、最大約5マイクロメートル、最大約4マイクロメートル、最大約3マイクロメートル、最大約2マイクロメートル、最大約1マイクロメートル、最大約0.5マイクロメートル、または最大約0.1マイクロメートルである、請求項1に記載のデバイス。The length of the one or more spacers along the direction from the first plate to the second plate is up to about 500 micrometers, up to about 250 micrometers, up to about 100 micrometers, up to about 90. Micrometer, maximum about 80 micrometers, maximum about 70 micrometers, maximum about 60 micrometers, maximum about 50 micrometers, maximum about 40 micrometers, maximum about 30 micrometers, maximum about 25 micrometers, maximum about 20 micrometers , Up to about 15 micrometers, up to about 10 micrometers, up to about 5 micrometers, up to about 4 micrometers, up to about 3 micrometers, up to about 2 micrometers, up to about 1 micrometer, up to about 0.5 micrometer, or The device of claim 1, which is up to about 0.1 micrometer.

前記複数の粒子は、約100マイクロメートル、約90マイクロメートル、約80マイクロメートル、約70マイクロメートル、約60マイクロメートル、約50マイクロメートル、約40マイクロメートル、約30マイクロメートル、約25マイクロメートル、約20マイクロメートル、約15マイクロメートル、約10マイクロメートル、約5マイクロメートル、約4マイクロメートル、約3マイクロメートル、約2マイクロメートル、約1マイクロメートル、約0.5マイクロメートル、または約0.2マイクロメートルの最大寸法を有する、請求項1に記載のデバイス。The plurality of particles are about 100 micrometers, about 90 micrometers, about 80 micrometers, about 70 micrometers, about 60 micrometers, about 50 micrometers, about 40 micrometers, about 30 micrometers, about 25 micrometers. , About 20 micrometers, about 15 micrometers, about 10 micrometers, about 5 micrometers, about 4 micrometers, about 3 micrometers, about 2 micrometers, about 1 micron, about 0.5 micrometer, or about 0.2 micron The device of claim 1, having a maximum dimension of meters.

前記スペース内の前記1つまたは複数の細胞が、コンフルエントではない単一層として実質的に配置されている、請求項1記載のデバイス。 The device of claim 1 , wherein the one or more cells in the space are substantially arranged as a single layer that is not confluent .

前記決定することが、前記スペース内の前記試料の前記少なくとも一部分を含む領域のうちの1つまたは複数の画像を取得することを含み、前記画像化された領域は、前記複数の粒子のうちの少なくとも1つを含む、請求項1記載のデバイス。 The determination comprises acquiring one or more images of the region comprising the at least a portion of the sample in the space, the imaged region being among the plurality of particles. The device of claim 1 , comprising at least one .

前記1つまたは複数の第1の値が、前記粒子によって放出されるエネルギーの強度に対応する、請求項1記載のデバイス。 The device of claim 1 , wherein the one or more first values correspond to the intensity of the energy emitted by the particles .

前記試料を、前記1つまたは複数の細胞と会合することができる細胞用色素と接触させることをさらに含む、請求項1記載のデバイス。 The device of claim 1 , further comprising contacting the sample with a cellular dye capable of associating with the one or more cells .

前記1つまたは複数の第2の値が、前記細胞用色素によって放出されるエネルギーの強度に対応する、請求項1記載のデバイス。 The device of claim 1 , wherein the one or more second values correspond to the intensity of the energy released by the cellular dye .

前記1つまたは複数の第1の値と前記1つまたは複数の第2の値との間の関連性を決定するためにアルゴリズムを使用することをさらに含む、請求項1記載のデバイス。 The device of claim 1 , further comprising using an algorithm to determine the association between the one or more first values and the one or more second values .

前記1つまたは複数の第1の値と前記1つまたは複数の第2の値との間の前記関連性に基づいて、前記試料が取得された対象における感染症のレベルを分類する、請求項1記載のデバイス。 Claims to classify the level of infection in the subject from which the sample was obtained, based on the association between the one or more first values and the one or more second values. The device described in Item 1 .

前記感染症が、ウイルス感染症、細菌感染症、またはこれらの組み合わせである、請求項1記載のデバイス。 The device according to claim 1 , wherein the infectious disease is a viral infectious disease, a bacterial infectious disease, or a combination thereof .

前記1つまたは複数の細胞が、白血球（white blood cell）、白血球（leukocyte）、顆粒球、無顆粒球、骨髄系細胞、リンパ球系細胞、好中球、好酸球、好塩基球、リンパ球、T細胞、B細胞、ナチュラルキラー細胞、および単球からなる群より選択される、請求項2記載の方法。 The one or more cells are white blood cells, leukocytes, granulocytes, agranocytes, myeloid cells, lymphoid cells, neutrophils, eosinophils, basinocytes, lymphs. The method according to claim 2 , which is selected from the group consisting of spheres, T cells, B cells, natural killer cells, and monospheres.

前記分析物が、ポリペプチド、タンパク質、タグ付けされたタンパク質、融合タンパク質、抗体、小分子、ウイルス粒子、細菌、C反応性タンパク質、およびその任意のフラグメントからなる群より選択される、請求項2記載の方法。 Claimed, wherein the analyte is selected from the group consisting of polypeptides, proteins, tagged proteins, fusion proteins, antibodies, small molecules, viral particles, bacteria, C-reactive proteins, and any fragment thereof. 2 Method described.

前記試料の少なくとも一部分を、前記1つまたは複数の捕捉剤と会合することができる競合検出剤と接触させることをさらに含む、請求項1記載のデバイス。 The device of claim 1 , further comprising contacting at least a portion of the sample with a competitive detector capable of associating with the one or more scavengers .

前記1つまたは複数の捕捉剤が、前記分析物の第1のエピトープと会合することができ、
前記補助的な検出剤が、前記分析物の第2のエピトープと会合することができる、
請求項1記載のデバイス。 The one or more scavengers can associate with the first epitope of the analyte,
The auxiliary detector can associate with a second epitope of the analyte,
The device according to claim 1 .

前記方法が、約10秒未満、約20秒未満、約30秒未満、約40秒未満、約50秒未満、約60秒未満、または約120秒未満で実施される、請求項2記載の方法。 2. The method of claim 2 , wherein the method is performed in less than about 10 seconds, less than about 20 seconds, less than about 30 seconds, less than about 40 seconds, less than about 50 seconds, less than about 60 seconds, or less than about 120 seconds. Method .

工程（d）～（f）が、任意の洗浄する工程の非存在下で行われる、請求項2記載の方法。 The method according to claim 2 , wherein steps (d) to (f) are performed in the absence of any cleaning step.

第1および第2のプレートが、閉鎖構成において手で一緒に押圧される、請求項2記載の方法。 The method of claim 2 , wherein the first and second plates are pressed together by hand in a closed configuration .

非細胞分析物が、ポリペプチド、核酸、または代謝産物である、請求項2記載の方法。 The method of claim 2 , wherein the non-cell analyte is a polypeptide, nucleic acid, or metabolite.

試料が、羊水、房水、硝子体液、血液、全血、画分血液、血漿、血清、母乳、脳脊髄液、耳垢、乳糜、糜汁、内リンパ、外リンパ、糞便、胃酸、胃液、リンパ、粘液、鼻漏、痰、心膜液、腹膜液、胸膜液、膿、粘膜分泌物、唾液、皮脂、***、喀痰、汗、滑液、涙、嘔吐物、尿、および呼気凝縮物を含む、請求項2記載の方法。 Samples are sheep water, bunch water, vitreous body fluid, blood, whole blood, fractionated blood, plasma, serum, breast milk, cerebrospinal fluid, earlid, milk sputum, sputum juice, internal lymph, external lymph, feces, gastric acid, gastric fluid, lymph. , Mucus, nasal leak, sputum, pericardial fluid, peritoneal fluid, pleural fluid, pus, mucosal secretions, saliva, sebum, semen, sputum, sweat, lymph, tears, vomitus, urine, and breath condensate , The method according to claim 2 .

結果に基づいて疾患を診断することをさらに含む、請求項2記載の方法。 The method of claim 2 , further comprising diagnosing the disease based on the results.

がん、炎症性疾患、または感染性疾患である疾患を検出する、請求項2記載の方法。 The method of claim 2 , wherein the disease is a cancer , an inflammatory disease, or an infectious disease.

方法が、複数の異なる非細胞分析物を検出する、請求項2記載の方法。 2. The method of claim 2 , wherein the method detects a plurality of different non-cell analytes.

試料が、1つまたは複数の標的細胞を含む、請求項2記載の方法。 The method of claim 2 , wherein the sample comprises one or more target cells.

試料が、1つまたは複数の非細胞分析物を含む、請求項2記載の方法。 The method of claim 2 , wherein the sample comprises one or more non-cell analytes.

前記1つまたは複数の画像は、それぞれが異なる波長で画像化される2つの蛍光画像を含む、請求項2記載の方法。The method of claim 2, wherein the one or more images comprises two fluorescent images, each of which is imaged at a different wavelength.

前記1つまたは複数の画像は、それぞれがWBCの染色信号または抗CRP検出抗体からの信号のいずれかを観測するために異なる波長で画像化される、2つの蛍光画像を含む、請求項2記載の方法。2. The image according to claim 2, wherein the one or more images include two fluorescent images, each of which is imaged at a different wavelength for observing either a staining signal of WBC or a signal from an anti-CRP detection antibody. the method of.

イメージャが、試料の蛍光画像と明視野画像との両方を取得する、請求項2記載の方法。The method of claim 2, wherein the imager obtains both a fluorescent image and a brightfield image of the sample.

励起光が、2つのプレートの間に形成された導波路から部分的に、および2つのプレートの裏側から部分的に、広い斜め入射角で試料を照らすことを可能にする、蛍光照明光学系をさらに備える、請求項3記載の装置。Fluorescent illumination optics that allow the excitation light to illuminate the sample with a wide oblique angle of incidence, partly from the waveguide formed between the two plates and partly from the backside of the two plates. The device according to claim 3, further provided.

明視野照明および蛍光照明をさらに備える、請求項3記載の装置。The apparatus according to claim 3, further comprising bright-field illumination and fluorescent illumination.

画像のうちの1つが、トポロジーおよび共通領域内の粒子の位置の情報を含む、直接的な画像であり、他の画像が、画像の主要な信号として、標識された競合検出剤からの信号を含むように構成される信号画像である、請求項3記載の装置。One of the images is a direct image that contains information about the topology and the position of the particles in the common area, and the other image is the signal from the labeled competition detector as the main signal of the image. The device according to claim 3, which is a signal image configured to include.

機械学習アルゴリズムを格納する非一時的コンピュータ可読媒体をさらに備える、請求項1記載のデバイス。The device of claim 1, further comprising a non-temporary computer-readable medium for storing machine learning algorithms.

画像が機械学習を使用して分析される、請求項2記載の方法。The method of claim 2, wherein the image is analyzed using machine learning.

ディープラーニングとコンピュータビジョンとの組合せを使用して画像が分析される、請求項2記載の方法。The method of claim 2, wherein the image is analyzed using a combination of deep learning and computer vision.

非細胞分析物と結合することができる、標識された検出剤をさらに含む、請求項1記載のデバイス。The device of claim 1, further comprising a labeled detection agent capable of binding to a non-cell analyte.

洗浄工程を有しない、請求項2記載の方法。The method according to claim 2, which does not have a cleaning step.

前記分析は、細胞および非細胞分析物の量の分析を含み、それらの値を1つまたは複数の参照値に対して比較して、分析される試料が取得された対象が病態を有するかどうかを決定する、請求項2記載の方法。The analysis involves an analysis of the amount of cellular and non-cellular analytes, comparing those values to one or more reference values to determine if the subject from which the sample to be analyzed has a pathology. 2. The method of claim 2.

染色剤としてのアクリジンオレンジ、および捕捉剤としての抗体をさらに含む、請求項1記載のデバイス。The device of claim 1, further comprising acridine orange as a stain and an antibody as a scavenger.

非細胞分析物および標的細胞が、ヒト、獣医学、農業、食品、環境、薬物検査のための試料中にある、請求項2記載の方法。The method of claim 2, wherein the non-cell analyte and target cells are in a sample for human, veterinary, agricultural, food, environmental, drug testing.

試料が、結合組織、筋肉組織、神経組織、上皮組織、軟骨、がん性試料、または骨を含む、対象の組織試料である、請求項2記載の方法。The method of claim 2, wherein the sample is a tissue sample of interest, including connective tissue, muscle tissue, nerve tissue, epithelial tissue, cartilage, cancerous sample, or bone.

試料が全血であり、非細胞分析物がCRP（C反応性タンパク質）であり、標的細胞分析物がWBCおよびリンパ球である、請求項2記載の方法。The method of claim 2, wherein the sample is whole blood, the non-cell analyte is CRP (C-reactive protein), and the target cell analyte is WBC and lymphocytes.

粒子の直径が10μmである、請求項83記載の方法。38. The method of claim 83, wherein the particles have a diameter of 10 μm.

粒子の直径が10μmである、請求項2記載の方法。The method of claim 2, wherein the particles have a diameter of 10 μm.

粒子の直径が10μmであり、スペーサの高さが10μmである、請求項2記載の方法。The method of claim 2, wherein the particles have a diameter of 10 μm and the height of the spacer is 10 μm.

検出剤が、捕捉剤に特異的に結合し、捕捉剤との結合において非細胞分析物と競合する、請求項2記載の方法。The method of claim 2, wherein the detection agent specifically binds to the scavenger and competes with the non-cell analyte in binding to the scavenger.

捕捉剤および検出剤が非細胞分析物に結合してサンドイッチを形成する、請求項2記載の方法。The method of claim 2, wherein the scavenger and detector bind to the non-cellular analyte to form a sandwich.

携帯電話をさらに備える、請求項1記載の装置。The device according to claim 1, further comprising a mobile phone.

試料の明視野顕微鏡検査画像を捕捉するための明視野照明光学系と、試料の蛍光顕微鏡検査画像を捕捉するための蛍光照明光学系とをさらに備える、請求項3記載の装置。The apparatus according to claim 3, further comprising a bright-field illumination optical system for capturing a bright-field microscopic inspection image of a sample and a fluorescence illumination optical system for capturing a fluorescence microscopic inspection image of a sample.

閉鎖構成での試料厚さが最大20μmである、請求項2記載の方法。The method of claim 2, wherein the sample thickness in the closed configuration is up to 20 μm.