JPWO2012121094A1 - アルブミン含有静注剤 - Google Patents

Abstract

このアルブミン含有静注剤の調製方法では、ルブミンを有効成分とする第１静注剤と、システイン又はその類縁化合物を含有する第２静注剤とを混合してなることを特徴とするアルブミン含有静注剤、並びに、アルブミンを有効成分とする第１静注剤と、システイン又はその類縁化合物を含有する第２静注剤とを混合した後、１０分間〜１時間、室温にてインキュベートする。

Description

本発明は、アルブミン含有静注剤、当該アルブミン含有静注剤を調製する方法、当該アルブミン含有静注剤が収容された医療用薬液バッグ、及び当該アルブミン含有静注剤を含むキットに関する。
本願は、２０１１年３月４日に、日本に出願された特願２０１１−０４７７７７号に基づき優先権を主張し、その内容をここに援用する。

腹水等の浮腫症状は肝硬変や肝細胞癌、細菌性腹膜炎、うっ血性心疾患、ネフローゼ症候群、腹腔内諸臓器の炎症性病変、腹膜炎によって出現する。特に肝硬変での浮腫の出現は非代償期に入った徴候であり、予後を左右する極めて重要な症状としても重視されている。

従来、浮腫に関連する臨床検査上の検査項目として血清アルブミン量が用いられている（例えば、非特許文献１参照。）。血清アルブミン値がおよそ２．５〜２．０ｇ／ｄｌ以下に低下するとコロイド浸透圧は低下し、腹水が発生すると考えられ、これを指標にして治療効果のモニタリングが行われていた。また、血清と腹水のアルブミン濃度差が１．１ｇ／ｄｌを上回れば漏出液、それ以下であれば滲出液との鑑別も腹水治療方法の選択に用いられていた。

アルブミンは生体内で最も多く存在するタンパク質である。アルブミンの生理機能としては、膠質浸透圧の維持、物質の輸送、アミノ酸の供給、ｐＨ緩衝作用、酸化還元緩衝作用等が知られている。近年、翻訳後修飾によるミクロヘテロジェニティーがアルブミンに存在することが明らかとなり、アルブミンの量ではなく質の違いと機能の違いとの関連性が議論されるようになってきた。

血清アルブミンは、Ｎ末端から３４番目に存在するシステイン残基のＳＨ基が遊離の状態の還元型アルブミンと、血中のシステインやグルタチオンなどとジスルフィド（Ｓ−Ｓ）結合した状態の酸化型アルブミンとの混合物として存在している。正常ヒト血清では還元型が約７５％、酸化型が約２５％の割合で存在するが、肝硬変患者（例えば、非特許文献２参照。）、慢性腎不全患者、糖尿病患者や麻酔又は手術時の患者では酸化型アルブミンの割合が増加していると報告されている（例えば、非特許文献３参照。）。

その他、酸化型／還元型アルブミン比はアルブミン量と比較して、浮腫との間に高い相関を示すこと、及び、肝硬変に伴う浮腫を患っている患者に還元型アルブミンを投与し酸化型アルブミン比率を積極的に減少させると、酸化型アルブミンを含有する通常のアルブミンを投与した場合よりも効果的に浮腫を改善し得ることが報告されている（例えば、特許文献１参照。）。すなわち、還元型アルブミンの含有割合の高いアルブミンを投与することにより、酸化型アルブミンの含有割合の高いアルブミンを投与するよりも、肝疾患による浮腫に対して、より高い治療効果が期待できる。そこで、特許文献１においては、還元剤を添加することにより、還元型アルブミンの含有割合を高めたアルブミン含有静注剤が開示されている。

国際公開第２００９／１２３１６２号パンフレット

福井博、「治療学」、２００７年、第４１巻、第４号、第４５〜４８ページ。 Watanabe, A.、ニュートリション（Nutrition）、２００４年、第２０巻、第３５１ページ。 恵良聖一、「臨床検査」２００４年、第４８巻、第５０１〜５１１ページ。

しかしながら、医薬品の場合、その製造工程を変更することは一般的に難しく、還元剤を添加したアルブミン静注剤を製造し、治療に用いることは困難である。

本発明は、既存のアルブミン含有静注剤中の還元型アルブミンの含有割合を、簡便に高めることにより、より治療効果の高いアルブミン含有静注剤を提供することを目的とする。

本発明者は、上記課題を解決すべく鋭意研究した結果、アルブミン含有静注剤を、還元能を有するシステイン等を含む静注剤と混合した状態で一定期間維持した後に投与することにより、当該アルブミン含有静注剤の還元型アルブミンの含有割合を高められ、より高い治療効果が期待できることを見出し、本発明を完成させた。

すなわち、本発明は、上記目的を達成するために、下記の構成のアルブミン含有静注剤、当該アルブミン含有静注剤を調製する方法、当該アルブミン含有静注剤が収容された医療用薬液バッグ、及び当該アルブミン含有静注剤を含むキットを提供する。
（１） アルブミンを有効成分とする第１静注剤と、システイン又はその類縁化合物を含有する第２静注剤とを混合してなることを特徴とするアルブミン含有静注剤。
（２） 前記第２静注剤由来のシステイン又はその類縁化合物が、前記第１静注剤由来のアルブミン１ｇ当たり０．５μｍｏｌ以上存在するように、両者を共存させた後に静注される前記（１）に記載のアルブミン含有静注剤。
（３） 前記第１静注剤由来のアルブミンが、前記第２静注剤由来のシステイン又はその類縁化合物と１０分間以上共存させた後に静注される前記（１）又は（２）に記載のアルブミン含有静注剤。
（４） 前記第１静注剤由来のアルブミンと前記第２静注剤由来のシステイン又はその類縁化合物との共存時間が、５時間以下である前記（３）に記載のアルブミン含有静注剤。
（５） 前記第１静注剤と前記第２静注剤とを混合した後に、静注用注入器に注入される前記（１）〜（４）のいずれか一つに記載のアルブミン含有静注剤。
（６） 前記第１静注剤及び前記第２静注剤を混合した後、前記静注用注入器に注入される前に、１０分間以上室温にてインキュベートされる前記（５）に記載のアルブミン含有静注剤。
（７） 前記第２静注剤中のシステイン又はその類縁化合物の濃度が、１ｍｇ／ｍｌ以上である前記（１）〜（６）のいずれか一つに記載のアルブミン含有静注剤。
（８） 浮腫の改善のために投与されることを特徴とする前記（１）〜（７）のいずれか一つに記載のアルブミン含有静注剤。
（９） 第１注入口からのびる第１流路と、
第２注入口からのびる第２流路と、
前記第１流路と前記第２流路とが合流する合流部と、
前記合流部からのび、かつ注出口を備える第３流路と、
を有する注入器を用い、
前記第１注入口からアルブミンを有効成分とする第１静注剤を注入し、前記第２注入口からシステイン又はその類縁化合物を含有する第２静注剤を注入し、前記第１静注剤と前記第２静注剤との混合液を、前記第３流路の前記合流部から１０分間以上かけて前記注出口までを到達させることにより調製されることを特徴とするアルブミン含有静注剤。
（１０） 前記第３流路を流れる液体中のシステイン又はその類縁化合物の濃度が、当該液体中のアルブミン濃度１ｇ／ｍｌ当たり０．５μｍｏｌ／ｍｌ以上である前記（９）に記載のアルブミン含有静注剤。
（１１） 前記第１静注剤中のアルブミン含有量が０．０１〜３０ｇ／ｍｌであり、前記第２静注剤中のシステイン又はその類縁化合物含有量が１ｍＭ〜５Ｍである前記（９）又は（１０）に記載のアルブミン含有静注剤。
（１２） 前記合流部又は第３流路に、貯留部が設けられている前記（９）〜（１１）のいずれか一つに記載のアルブミン含有静注剤。
（１３） 前記第１流路、前記第２流路、及び前記第３流路のうち、少なくとも一つの流路において、流量制御部が設けられている前記（９）〜（１２）のいずれか一つに記載のアルブミン含有静注剤。
（１４） 浮腫の改善のために投与されることを特徴とする前記（９）〜（１３）のいずれか一つに記載のアルブミン含有静注剤。
（１５） 第１注入口からのびる第１流路と、
第２注入口からのびる第２流路と、
前記第１流路と前記第２流路とが合流する合流部と、
前記合流部からのび、かつ注出口を備える第３流路と、
を有する注入器を用い、
前記第１注入口からアルブミンを有効成分とする第１静注剤を注入し、前記第２注入口からシステイン又はその類縁化合物を含有する第２静注剤を注入し、前記第１静注剤と前記第２静注剤との混合液を、前記第３流路の前記合流部から１０分間以上かけて前記注出口までを到達させることを特徴とするアルブミン含有静注剤の調製方法。
（１６） 前記第３流路を流れる液体中のシステイン又はその類縁化合物の濃度が、当該液体中のアルブミン濃度１ｇ／ｍｌ当たり０．５μｍｏｌ／ｍｌ以上である（１５）に記載のアルブミン含有静注剤の調製方法。
（１７） 前記第１静注剤中のアルブミン含有量が０．０１〜３０ｇ／ｍｌであり、前記第２静注剤中のシステイン又はその類縁化合物含有量が１ｍＭ〜５Ｍである（１５）又は（１６）に記載のアルブミン含有静注剤の調製方法。
（１８） 前記合流部又は第３流路に設けられた貯留部を用い、前記第１静注剤と前記第２静注剤とを一定時間貯留する（１５）〜（１７）のいずれか一つに記載のアルブミン含有静注剤の調製方法。
（１９） 前記第１流路、前記第２流路、及び前記第３流路のうち、少なくとも一つの流路に設けられた流量制御部を用い、流量制御を行う（１５）〜（１８）のいずれか一つに記載のアルブミン含有静注剤の調製方法。
（２０） 前記混合液を１０分間〜１時間、室温にてインキュベートする（１５）〜（１９）のいずれか一つに記載のアルブミン含有静注剤の調製方法。
（２１） 医療用薬液バックであって、
可撓性樹脂フィルムにより包囲されそれぞれ液体を密封し収容可能な第１室、第２室及び副室を有し、
前記第１室にはアルブミンを有効成分とする第１静注剤が収容されており、
前記第２室にはシステイン又はその類縁化合物を含有する第２静注剤が収容されており、
前記副室は、液体を外部へ注出できる注出口を備え、
前記第１室と前記副室との間に第１イージーピールシールが配置され、
前記第２室と前記副室との間に第２イージーピールシールが配置され、
前記第１イージーピールシールが、前記樹脂フィルムを介して前記第１室に収容された第１静注剤を外部から押圧することにより剥離され、前記第１室と前記副室とを連通させ、
前記第２イージーピールシールが、前記第２室内の前記第２静注剤又は前記副室内の液体を外部から押圧することにより剥離され、前記第２室と前記副室とを連通させることを特徴とする医療用薬液バッグ。
（２２） 少なくとも、アルブミンを有効成分とする第１静注剤と、システイン又はその類縁化合物を含有する第２静注剤と、注入器とを有し、
前記注入器は、
第１注入口からのびる第１流路と、
第２注入口からのびる第２流路と、
前記第１流路と前記第２流路とが合流する合流部と、
前記合流部からのび、かつ注出口を備える第３流路と、
を有することを特徴とするキット。

本発明のアルブミン含有静注剤の調製方法により、従来の製造工程を大きく変更することなく、還元型アルブミンの含有割合が高められたアルブミン含有静注剤を簡便に調製することができる。したがって、当該調製方法により得られた本発明のアルブミン含有静注剤は、従来のアルブミン含有静注剤と比較してより高い治療効果が期待できる。

本発明のアルブミン含有静注剤の調製に用いられる注入器の一態様を示した図である。 本発明のアルブミン含有静注剤の調製に用いられる注入器の一態様を示した図である。 本発明のアルブミン含有静注剤の調製に用いられる注入器の一態様を示した図である。 本発明のアルブミン含有静注剤の調製に用いられる注入器の一態様を示した図である。 本発明のアルブミン含有静注剤の調製に用いられる注入器の一態様を示した図である。 本発明のアルブミン含有静注剤の調製に用いられる注入器の一態様を示した図である。 実施例１において、各製剤の、ＳＮＭＣ混合前と、混合してから１５分経過後のＨＰＬＣのチャートを示した図である。 実施例１において、製剤Ａの、ＳＮＭＣ混合後０分、１５分、６０分、及び５４０分経過後のＨＰＬＣのチャートを示した図である。

以下、本発明のアルブミン含有静注剤、当該アルブミン含有静注剤を調製する方法、当該アルブミン含有静注剤が収容された医療用薬液バッグ、及び当該アルブミン含有静注剤を含むキットに関する一実施形態を説明する。

酸化型アルブミンとは、Ｎ末端から３４番目に存在するシステイン残基にアルブミン以外の生体内のチオール化合物（システインやグルタチオン等）がジスルフィド結合を介して結合したアルブミンをいう。還元型アルブミンとは、Ｎ末端から３４番目に存在するシステイン残基のＳＨ基が遊離状態にあるアルブミンをいう。

本実施形態のアルブミン含有静注剤は、アルブミンを有効成分とする第１静注剤と、システイン又はその類縁化合物を含有する第２静注剤とを混合してなることを特徴とする。投与される前に、還元能を有するシステイン又はその類縁化合物を含む静注剤と共存させることにより、総アルブミン（酸化型アルブミンと還元型アルブミンの総和）に占める還元型アルブミンの含有割合を、第１静注剤よりも高めることができる。

本実施形態において用いられる第１静注剤（以下、「本実施形態の第１静注剤」ということがある。）は、アルブミンを有効成分として含有する静注剤であればよい。例えば、アルブミンを含有する既存の静注剤をそのまま用いることができる。なお、静注剤は、動物の静脈に直接投与される薬剤であり、ヒトに投与されるものであってもよく、ヒト以外の哺乳動物(マウス、ラット、ハムスター、モルモット等のげっ歯類やウサギ等の実験動物;ブタ、ウシ、ヤギ、ウマ、ヒツジ、ミンク等の家畜;イヌ、ネコ等のペット;サル、アカゲザル、マーモセット、オランウータン、チンパンジーなどの霊長類等)に投与されるものであってもよい。

本実施形態の第１静注剤に含まれるアルブミンは、通常上記哺乳動物(好ましくはヒト)の血清アルブミンである。ヒト血清アルブミンとしては、配列番号１で表されるアミノ酸配列を含むポリペプチドを例示することができる。本実施形態のアルブミン含有静注剤に含まれるアルブミンは、血清から単離又は精製されたアルブミン又は遺伝子組み換え技術により製造された組み換え型アルブミンのいずれであってもよい。

本実施形態の第１静注剤に用いることのできるアルブミンとして、特開２００２−１２５５３号公報に開示された以下のアルブミンを挙げることができる。

［１］遺伝子操作により調製したヒト血清アルブミン産生宿主を培養してヒト血清アルブミンを発現させる際に、陰イオン交換体、疎水性担体及び活性炭からなる群より選ばれた少なくとも一つを添加した培養液中で当該宿主を培養することにより、ヒト血清アルブミンと着色成分とが結合する前に当該ヒト血清アルブミンと当該着色成分とを分離して発現させたヒト血清アルブミン。該ヒト血清アルブミンの着色抑制方法により得られる、遺伝子操作により発現されるヒト血清アルブミンは、着色成分が結合していない。該アルブミンを含有する組成物を本実施形態の第１静注剤として使用した場合、当該第１静注剤の着色度は、好ましくは、Ａ_{３５０ｎｍ}／Ａ_{２８０ｎｍ}の吸光度比で０．００３５〜０．０１６３であり、Ａ_{４０５ｎｍ}／Ａ_{２８０ｎｍ}の吸光度比で０．００１８〜０．０１７９である。

また、アルブミンと他のタンパク質との融合タンパク質も、本実施形態の第１静注剤に用いられるアルブミンに包含される。該融合タンパク質としては、特表２００７−５２２８０６号公報、特表２００４−５０６４０７号公報、特表２００３−５３０８３８号公報、特表２００３−５３０８３９号公報、特表２００３−５３０８４６号公報、特表２００３−５３０８４７号公報、特表２００３−５３０８５２号公報、及び特表２００３−５３１５９０号公報に開示された以下のアルブミン融合蛋白質を挙げることができる。

［２］−１
（ａ）治療用蛋白質:Ｘと、配列番号:１のアミノ酸配列を含むアルブミン;
（ｂ）治療用蛋白質:Ｘと、アルブミン活性を有する配列番号:１のアミノ酸配列の断片もしくは変異体;
（ｃ）治療用蛋白質:Ｘと、非融合状態の治療用蛋白質:Ｘの貯蔵寿命と比べて治療用蛋白質:Ｘの貯蔵寿命を延長し得るアルブミン活性をさらに有する、配列番号:１のアミノ酸配列の断片もしくは変異体;
（ｄ）治療用蛋白質:Ｘと、アルブミン活性を有し、さらに配列番号:１のアミノ酸１〜３８７のアミノ酸配列を含む、配列番号:１のアミノ酸配列の断片もしくは変異体;
（ｅ）治療用蛋白質:Ｘの生物活性を有する治療用蛋白質:Ｘの断片もしくは変異体と、配列番号:１のアミノ酸配列を含むアルブミン;
（ｆ）治療用蛋白質:Ｘ又はその断片もしくは変異体と、（ａ）〜（ｅ）のアルブミン又はその断片もしくは変異体（ここで、該治療用蛋白質:Ｘ又はその断片もしくは変異体は、アルブミンのＮ−末端又はアルブミンの断片もしくは変異体のＮ−末端に融合されている）;
（ｇ）治療用蛋白質:Ｘ又はその断片もしくは変異体と、（ａ）〜（ｅ）のアルブミン又はその断片もしくは変異体（ここで、該治療用蛋白質:Ｘ又はその断片もしくは変異体は、アルブミンのＣ−末端又はアルブミンの断片もしくは変異体のＣ−末端に融合されている）;
（ｈ）治療用蛋白質:Ｘ又はその断片もしくは変異体と、（ａ）〜（ｅ）のアルブミン又はその断片もしくは変異体（ここで、該治療用蛋白質:Ｘ又はその断片もしくは変異体は、アルブミンのＮ−末端及びＣ−末端又はアルブミンの断片もしくは変異体のＮ−末端及びＣ−末端に融合されている）;
（ｉ）第一の治療用蛋白質:Ｘ又はその断片もしくは変異体、及び第二の治療用蛋白質：Ｘ又はその断片もしくは変異体を含み、
第一の治療用蛋白質:Ｘ又はその断片もしくは変異体は、第二の治療用蛋白質:Ｘ又はその断片もしくは変異体と異なるものである、
治療用蛋白質:Ｘ又はその断片もしくは変異体と、（ａ）〜（ｅ）のアルブミン又はその断片もしくは変異体;
（ｊ）治療用蛋白質:Ｘ又はその断片もしくは変異体と、（ａ）〜（ｉ）のアルブミン又はその断片もしくは変異体（ここで、該治療用蛋白質: Ｘ又はその断片もしくは変異体はリンカーによりアルブミン又はアルブミンの断片もしくは変異体から分離されている）;及び
（ｋ）治療用蛋白質:Ｘ又はその断片もしくは変異体と、（ａ）〜（ｊ）のアルブミン又はその断片もしくは変異体（ここで、アルブミン融合蛋白質は、以下の式:
Ｒ１−Ｌ−Ｒ２；Ｒ２−Ｌ−Ｒ１;又はＲ１−Ｌ−Ｒ２−Ｌ−Ｒ１
を有し、さらに、Ｒ１は治療用蛋白質:Ｘ又はその断片もしくは変異体であり、Ｌはペプチドリンカーであり、及びＲ２は配列番号:１のアミノ酸配列を含むアルブミン又はアルブミンの断片もしくは変異体である）;
からなる群より選択されるメンバーを含む、アルブミン融合蛋白質(特表２００７−５２２８０６号公報)。

［２］−２
配列番号:１のアミノ酸配列又はその断片もしくは変異体を含むアルブミン又はその断片もしくは変異体に挿入された治療用蛋白質:Ｘ又はその断片もしくは変異体を含む、アルブミン融合蛋白質(特表２００７−５２２８０６号公報)。

［２］−３
（ａ）配列番号:１のアミノ酸５４〜６１；
（ｂ）配列番号:１のアミノ酸７６〜８９；
（ｃ）配列番号:１のアミノ酸９２〜１００；
（ｄ）配列番号:１のアミノ酸１７０〜１７６;
（ｅ）配列番号:１のアミノ酸２４７〜２５２；
（ｆ）配列番号:１のアミノ酸２６６〜２７７;
（ｇ）配列番号:１のアミノ酸２８０〜２８８;
（ｈ）配列番号:１のアミノ酸３６２〜３６８;
（ｉ）配列番号:１のアミノ酸４３９〜４４７;
（ｊ）配列番号:１のアミノ酸４６２〜４７５;
（ｋ）配列番号:１のアミノ酸４７８〜４８６；及び
（１）配列番号:１のアミノ酸５６０〜５６６：
からなる群より選択されるアミノ酸配列を含むアルブミン又はその断片もしくは変異体に挿入された治療用蛋白質: Ｘ又はその断片もしくは変異体を含む、アルブミン融合蛋白質(特表２００７−５２２８０６号公報)。

上記［２］−１〜[２]−３のアルブミン融合蛋白質は、グリコシル化されていなくてもよい。
上記［２］−１〜[２]−３のアルブミン融合蛋白質は、酵母（グリコシル化欠損の酵母;グリコシル化及びプロテアーゼ欠損の酵母等）において発現され得る。
該哺乳類細胞は、培養下の哺乳類細胞であり得る。
上記［２］−１〜［２］−３のアルブミン融合蛋白質は、分泌リーダー配列をさらに含み得る。

上記［２]−１〜[２]−３のアルブミン融合蛋白質において用いられる治療用蛋白質は、１又はそれ以上の治療活性及び／又は生物活性を有する蛋白質、ポリペプチド、抗体、ペプチド又はその断片もしくは変異体を言う。本実施形態に包含される治療用蛋白質は、蛋白質、ポリペプチド、ペプチド、抗体、及び生物製剤（ペプチド、蛋白質、及びポリペプチドなる用語は本明細書中、同義的に用いられる）を含むが、これらに限定されない。用語「治療用蛋白質」が抗体及びその断片及び変異体を含むことが特に熟慮される。故に、本実施形態の蛋白質は、治療用蛋白質の少なくとも１つの断片もしくは変異体及び／又は抗体の少なくとも１つの断片もしくは変異体を含んでもよい。さらに、用語「治療用蛋白質」は、治療用蛋白質の内在性又は天然に存在する対応物に言及してもよい。

「治療活性」を示すポリペプチド又は「治療上活性」のある蛋白質により、本明細書中に記載されている又は当該技術分野において知られている１又はそれ以上の治療用蛋白質のごとき治療用蛋白質に関連する１又はそれ以上の知られている生物活性及び／又は治療活性を有するポリペプチドが意味される。例えば、「治療用蛋白質」は、疾患、状態又は障害の処置、予防又は改善に有用な蛋白質であるが、これらに限定されない。非限定的な例として、「治療用蛋白質」は、特定の細胞型（正常な（例えばリンパ球）又は異常な（例えば癌細胞））に特異的に結合してもよく、それ故に、化合物（薬剤又は細胞傷害性剤）をその細胞型へ特異的にターゲッティングするために用いてもよい。

上記［２］−１〜[２]−３のアルブミン融合蛋白質において用いられる治療用蛋白質としては、ＧＬＰ−Ｉ、ＧＬＰ−２、ＰＡＣＡＰ−２７、ＰＡＣＡＰ−２８、ＶＩＰ、ＣＤ４Ｍ３３、セクレチン、グリセンチン、オキシントモジュリン、ＰＨＭ、ＩＦＮａ、ＩＦＮｐ、ＡＮＰ、ＢＮＰ、ＮＧＦ、ＢＤＮＦ、ＧＤＮＦ、ＩＦＮ−ベータ、ＩＦＮ−アルファ、ソマトスタチン、ＩＧＦ−１、ＩＬ−２可溶性受容体、ＩＬ−２受容体アンタゴニスト、ＣＴＬＬ−２、カルシトニン、成長ホルモン放出因子、副甲状腺ホルモン、ＧＭＣＳＦ、ＥＰＯ、ＧＣＳＦ、インシュリン、免疫グロブリン、血清コリンエステラーゼ、α-1アンチトリプシン、アプロチニン、前駆体形態及び活性形態にある凝固因子（フォン・ビルブラント因子、フィブリノーゲン、第II因子、第VII因子、活性第VIIA因子、第VIII因子、第IX因子、第X因子、第XIII因子、ｃ１インアクチベーター、アンチトロンビンIII、トロンビン、プロトロンビン、アポ−リポタンパク質、ｃ−反応性タンパク質及びプロテインＣなどが含まれるがこれらに限定されない）、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）、一本鎖抗体、自己分泌運動因子、分散因子、ラミニン、ヒルジン、アプラギン（ａｐｐｌａｇｇｉｎ）、単球走化性タンパク質（ＭＣＰ／ＭＣＡＦ）、マクロファージコロニー刺激因子（Ｍ−ＣＳＦ）、オステオポンチン、血小板第４因子、テネイシン、ビトロネクチン、ヒト絨毛性ゴナドトロピン、レプチン、酵素(例えば、ウロキナーゼ、Ｂグルコセレブロシダーゼ（Ｂ−ｇｌｕｃｏｃｅｒｅｂｒｏｓｉｄａｓｅ）等）、ＴＮＦ受容体、成長因子（例えば、ＥＧＦ、ＦＧＦ−１、ＦＧＦ−２、ＮＧＦ、ＰＤＧＦ、ＶＥＧＦ−１等）、インターロイキン（例えば、ＩＬ−１、ＩＬ−４、ＩＬ−８、ＩＬ−１０、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２等）、インターロイキン受容体（例えば、ＩＬ−４受容体等）、インターフェロン（例えば、インターフェロンガンマ、インターフェロンオメガ等）、トランスフォーミング成長因子（例えば、ＴＧＦ−ベータ、ＴＧＦ−ベータ−１、ＴＧＦ−ベータ−３）、腫瘍壊死因子（例えば、ＴＮＦ−アルファ）、ホルモン（例えば、ゴナドトロピン、ヒト黄体形成ホルモン、卵胞刺激ホルモン等）、ＤＮａｓｅ、デコリン、オステオプロテグリン、Ｔｉｅ−２、ｔ−ＰＡ等を挙げることができるが、これらに限定されない。治療用蛋白質は、モノマー又はタンデム融合物の態様で用いられ得る。

インターフェロンハイブリッドも治療用蛋白質として用いることができる。インターフェロンハイブリッドには、インターフェロンアルファ−インターフェロンアルファハイブリッド（本明細書中、アルファ−アルファハイブリッドと言う）が含まれる。一態様において、アルファ−アルファハイブリッドは、インターフェロンアルファＤに融合されたインターフェロンアルファＡからなる或いはそれを含み得る（Ａ／Ｄハイブリッド）。別の態様において、アルファ−アルファハイブリッドは、インターフェロンアルファＦに融合されたインターフェロンアルファＡからなる或いはそれを含む（Ａ／Ｆハイブリッド）。さらなる一態様において、アルファ−アルファハイブリッド部分は、インターフェロンアルファＢに融合されたインターフェロンアルファＡからなる或いはそれを含む（Ａ／Ｂハイブリッド）。これらのハイブリッドは米国特許第４，４１４，５１０号パンフレットにさらに記載されており該文献は出典明示によりその全てが本明細書の一部となる。

インターフェロンハイブリッドには、インターフェロンアルファ−インターフェロンベータハイブリッド（本明細書中、アルファ−ベータハイブリッドと言う）が含まれる。一態様において、アルファ−ベータハイブリッドは、インターフェロンベータ−１に融合されたインターフェロンアルファＤ（インターフェロンアルファ−１とも言う）からなる或いはそれを含む（アルファＤ／ベータ−１ハイブリッド）。これらのハイブリッドは米国特許第４，７５８，４２８号パンフレットにさらに記載されており、該文献は出典明示によりその全てが本明細書の一部となる。

さらなる治療用蛋白質としては、特表２００７−５２２８０６号公報、特表２００４−５０６４０７号公報、特表２００３−５３０８３８号公報、特表２００３−５３０８３９号公報、特表２００３−５３０８４６号公報、特表２００３−５３０８４７号公報、特表２００３−５３０８５２号公報、及び特表２００３−５３１５９０号公報の表１の「治療用蛋白質Ｘ」の欄（欄１）に開示される１又はそれ以上の治療用蛋白質又はペプチド又は断片又は可変体を含むが、これらに限定されない。

本実施形態の第１静注剤は、自体公知の方法により製造することができる。例えば、アルブミンを静脈注入が可能な水性溶媒に溶解することにより、本実施形態の第１静注剤として用いられるアルブミンを含有する静注剤を得ることができる。

アルブミンを溶解させる水性溶媒としては、滅菌水、生理食塩水、生理的な緩衝液等を挙げることができる。アルブミンと供に、医薬上許容される添加剤（例えば上述のビタミン類、電解質、微量元素、栄養素、安定化剤、酸化防止剤等）を溶解してもよい。

本実施形態の第１静注剤中のアルブミンの含有量は、特に限定はされないが、通常０．０１〜３０ｇ／ｍｌ（０．０１〜３０ｗ／ｖ％）であり、好ましくは、０．１〜２５ｇ／ｍｌである。アルブミン含有量が０．０１ｇ／ｍｌ未満であると、所望の予防又は治療効果（例えば、肝疾患に伴う浮腫に対する予防又は治療効果）が十分に得られない可能性がある。また、血清アルブミン含有量が３０ｇ／ｍｌを超えると、第１静注剤が、製剤として不安定化する可能性がある。

また、本実施形態の第１静注剤は、有効成分として、少なくともアルブミンを含有していればよく、本実施形態の効果を損なわない限り、その他の薬効成分を含有していてもよい。

本実施形態において用いられる第２静注剤（以下、「本実施形態の第２静注剤」ということがある。）は、酸化型アルブミンに対する還元能を有するシステイン又はその類縁化合物（以下、「システイン等」ということがある。）を含有する静注剤であればよい。なお、静注剤は、第１静注剤と同様、ヒトに投与されるものであってもよく、ヒト以外の哺乳動物に投与されるものであってもよい。

本実施形態の第２静注剤に含まれるシステインとしては、Ｌ−システイン、Ｄ−システイン、ＤＬ−システインが挙げられるが、好ましくはＬ−システインである。本実施形態の第２静注剤に含まれるシステインの類縁化合物としては、システインと構造が類似する化合物であって、酸化型アルブミンに対する還元能を備えている化合物であればよく、システインのチオール基以外の部位が、他の基に置換等された化合物等が挙げられる。具体的な化合物としては、Ｎ−アセチルシステイン等が挙げられる。なお、本実施形態の第２静注剤には、システイン等は、Ｌ−システイン塩酸塩等のような薬理学的に許容される塩として含まれていてもよい。

本実施形態の第２静注剤中のシステイン等の含有量は、第１静注剤中の酸化型アルブミンの少なくとも一部に対して還元能を発揮し得る量であれば、特に限定されるものではなく、第１静注剤中のアルブミン含有量や酸化型アルブミンの含有割合、第１静注剤と第２静注剤の混合割合や混合時間、混合の態様等を考慮して、適宜調整することができる。例えば、システイン等の含有量が、好ましくは１ｍＭ〜５Ｍ、より好ましくは５ｍＭ〜１．５Ｍである静注剤を、本実施形態の第２静注剤として用いることができる。

本実施形態の第２静注剤は、システイン等を主たる薬効成分として含有する静注剤であってもよく、システイン等以外にも薬効成分を含有する静注剤であってもよい。本実施形態の第２静注剤が含んでいてもよいシステイン等以外の薬効成分としては、一般的に静注投与される薬効成分であれば特に限定されるものではなく、投与される患者の状態や投与目的等に応じて適宜選択することができるが、肝疾患や浮腫等の治療や予防のために投与される薬効成分であることが好ましい。

本実施形態の第２静注剤は、システイン等、及び必要に応じてその他の薬効成分を、静脈注入が可能な水性溶媒に溶解することにより、製造することができる。システイン等を溶解させる水性溶媒としては、アルブミンを溶解させる水性溶媒と同様のものを挙げることができる。

また、本実施形態の第２静注剤は、システイン等を含有する既存の静注剤をそのまま用いることができる。当該静注剤としては、例えば、Ｌ−システインやその塩酸塩を含有する静注剤として、肝臓疾患用剤・アレルギー用薬である強力ネオミノファーゲンシー（登録商標）静注２０ｍＬ、強力ネオミノファーゲンシー（登録商標）静注５０ｍＬ、強力ネオミノファーゲンシー（登録商標）Ｐ２０ｍＬ（いずれもミノファーゲン製薬製）；アスコルビンさん注射液であるカラシミンＣ注射液２５％（鶴原製薬製）；代謝性製剤であるクリストファン（登録商標）注（日新製薬製）；肝不全用アミノ酸注射液であるモリヘパミン（登録商標）点滴静注（味の素製薬製）；小児ＴＰＮ用総合アミノ酸製剤であるプレアミン（登録商標）−Ｐ注射液等が挙げられる。また、Ｎ−アセチルシステインやその塩を含有する静注剤として、アセトアミノフェン中毒解毒剤であるアセチルシステイン内用液１７．６％「ショーワ」（昭和薬品化工製）；高カロリー輸液用糖・電解質・アミノ酸・総合ビタミン・微量元素液であるエルネオパ（登録商標）１号輸液、エルネオパ（登録商標）２号輸液（いずれも大塚製薬製）等が挙げられる。中でも、従来から肝疾患治療に用いられている強力ネオミノファーゲンシー（登録商標）静注２０ｍＬ、強力ネオミノファーゲンシー（登録商標）静注５０ｍＬ、強力ネオミノファーゲンシー（登録商標）Ｐ２０ｍＬ、又はモリヘパミン（登録商標）点滴静注が、本実施形態の第２静注剤として好ましく用いられる。

本実施形態において用いられる第１静注剤及び第２静注剤は、滅菌されていることが好ましい。滅菌の方法としては、通常の高圧蒸気滅菌法、低温加熱滅菌法、濾過滅菌法などを単独であるいは組み合わせて用いることができる。

本実施形態において用いられる第１静注剤及び第２静注剤は、ヒト体液のｐＨを考慮して、ｐＨは、５．０〜７．４、好ましくはｐＨ６．０〜７．４である。ｐＨ調整剤としては、塩酸、酢酸、クエン酸、リンゴ酸などの酸を使用してもよい。

本実施形態において用いられる第１静注剤及び第２静注剤には、必要量のビタミン、例えば、ビタミンＡ、Ｂ１、Ｂ２、Ｂ６、Ｃ、Ｄ、Ｅ、ニコチン酸、パントテン酸、ビオチン、葉酸などのビタミン類及びビタミン様化合物、ナトリウム、カリウム、カルシウム、クロル、リンなどの電解質、並びに鉄、亜鉛、マンガン、銅、ヨウ素、セレンなどの微量元素を添加することができる。

さらに、マルトース、フルクトース、キシリトールなどの糖、大豆油、綿実油、ゴマ油などの脂質、グリシン、バリン、ロイシン、イソロイシンなどのアミノ酸などを添加することができる。その他、亜硫酸水素ナトリウムなどの安定化剤など、又は人体に投与可能な他の物質を添加することができる。

第１静注剤と第２静注剤とを、動物に投与する前に混合することにより、本実施形態のアルブミン含有静注剤を調製することができる。第１静注剤と第２静注剤との混合比は、混合後に、第１静注剤中の酸化型アルブミンの少なくとも一部が、第２静注剤中のシステイン等により還元可能な状態であれば特に限定されるものではなく、第１静注剤中のアルブミン含有量や酸化型アルブミンの含有割合、第１静注剤と第２静注剤の態様等を考慮して、適宜調整することができる。

混合により第１静注剤と第２静注剤とを共存させた状態において、第２静注剤由来のシステイン等の量が、第１静注剤由来の酸化型アルブミンの量に対して十分量存在することにより、より効率よく、還元型アルブミンの含有割合を増大させることができる。例えば、第２静注剤由来のシステイン等が、第１静注剤由来のアルブミン１ｇ当たり０．５μｍｏｌ以上存在するように、第１静注剤と第２静注剤とを共存させることにより、混合前の第１静注剤よりも、総アルブミン含有量に対する還元型アルブミン含有量を高めることができる。より好ましくは、第２静注剤由来のシステイン等が、第１静注剤由来のアルブミン１ｇ当たり５μｍｏｌ以上、２００μｍｏｌ以下存在するように、第１静注剤と第２静注剤とを共存させる。

混合により第１静注剤と第２静注剤とを共存させる時間は、第１静注剤由来の酸化型アルブミンの少なくとも一部を還元させるために十分な時間であれば特に限定されるものではなく、第１静注剤と第２静注剤の混合割合等を考慮して適宜調整することができる。例えば、本実施形態のアルブミン含有静注剤は、第１静注剤由来のアルブミンを、十分量の第２静注剤由来のシステイン等（例えば、アルブミン１ｇ当たり０．５μｍｏｌ以上のシステイン等）と、好ましくは１０分間以上、より好ましくは１５分間以上、さらに好ましくは３０分間〜１時間共存させた後に、動物の静脈へ注入されることが好ましい。共存時間の上限は特に限定されるものではないが、共存時間は９時間以下であることが好ましく、５時間以下であることがより好ましく、２時間以下であることがさらに好ましい。

本実施形態のアルブミン含有静注剤は、静注剤として調製された第１静注剤と、同じく静注剤として静注された第２静注剤とを、動物の静脈へ注入前に混合することにより、調製されるものである。第１静注剤と第２静注剤との混合は、投与前１２時間以内に行われることが好ましく、９時間前に行われることがより好ましく、１時間前に行われることが更に好ましく、投与直前に行われることがよりさらに好ましい。

本実施形態のアルブミン含有静注剤は、末梢静脈内又は中心静脈内等へ経静脈内投与され、一般には、１日、成人１人当たり、約１００〜２０００ｍｌ、好ましくは約５００〜１０００ｍｌを目安として、これを１日当たり１〜２回に分けて、投与すべき患者の病態、栄養状態、年齢、体重等を考慮して、適宜、増減させて使用する。

本実施形態のアルブミン含有静注剤は、第１静注剤量の全量を、第２静注剤の全量と、一度の混合操作で混合してもよく、一部分ずつを徐々に混合させてもよい。なお、徐々に混合させる場合、混合条件は、実際に動物の静脈へ注入されるまでに、第１静注剤由来のアルブミンが、十分量の第２静注剤由来のシステイン等と十分な時間共存することができるように調整される。

例えば、第１静注剤の全量と第２静注剤の全量とを混合し、室温で１０分間以上、好ましくは１０分間〜１時間インキュベートした後に、得られた混合物（本実施形態のアルブミン含有静注剤）を静注用の注入器にセットして、動物に投与することができる。第１静注剤と第２静注剤の混合液をインキュベートする容器は特に限定されるものではないが、滅菌済みの第１静注剤と滅菌済みの第２静注剤とを、無菌的に混合しインキュベートすることが可能な容器であることが好ましい。第１静注剤と第２静注剤の混合は、例えば、静注用注入器への連結が可能な注出口を備える医療用薬液パックに、第１静注剤と第２静注剤とをそれぞれ投入し、当該医療用薬液パック中で両者を共存させて室温でインキュベートした後、当該医療用薬液パックを、注入器にセットすることができる。また、第１静注剤と第２静注剤のいずれか一方が予め収容されている薬液パックに、他方の静注剤を投入してインキュベートした後、当該医療用薬液パックを注入器にセットすることもできる。

また、第１静注剤と第２静注剤とをそれぞれ独立して収容可能であり、収容後に、第１静注剤の収容部（第１室）と第２静注剤の収容部（第２室）とを連通させることにより、第１静注剤と第２静注剤を混合することが可能な医療用薬液バックを用いることにより、本実施形態のアルブミン含有静注剤を調製することもできる。当該医療用薬液バックとしては、例えば、２枚の可撓性樹脂フィルムの周囲を融着してなり、抽出口を供え、第１静注剤を収容する第１室と、第２静注剤を収容する第２室とが、イージーピールシールや弱化部を有する可撓性樹脂フィルム等により構成された隔壁によって隔てられた医療用薬液バックが挙げられる。このような医療用薬液バックは、第１室や第２室を外部から押圧することにより、第１室と第２室との間の隔壁が容易に剥離や破断する結果、第１室と第２室が連通する。

このような医療用薬液バックは、第１室と第２室とを連通させた後、第１静注剤と第２静注剤とを十分に混合させるために、攪拌混合処理が行われても良い。例えば、第１室と第２室とを連通させた後の医療用薬液バックに対して、水浴型ソニケーター等を用いた超音波処理等を行うことができる。その他、医療用薬液バックに、予め、第１静注剤と第２静注剤とを混合するための攪拌子を備えていてもよい。例えば、イージーピールシールや弱化部を有する可撓性樹脂フィルム等により構成された隔壁によって第１室と第２室の少なくともずれか一方と隔てられた第３室に、攪拌子を封入しておく。第１室と第２室の連通時又は連通後に、第１静注剤と第２静注剤の混合液を外部から押圧することにより、第３室の隔壁が容易に剥離や破断し、攪拌子が当該混合液に投入される。この状態で医療用薬液バックを振ることにより、混合液中で攪拌子が移動する結果、混合液が十分に攪拌混合される。攪拌子は、一般的に溶液の混合に用いられるものを利用することができ、その形状、材質、大きさ等は、第１静注剤と第２静注剤の量や医療用薬液バックの材質等を考慮して適宜調製することができる。例えば、磁性攪拌子を用いることにより、マグネチックスターラー等の汎用されている攪拌用磁場発生装置を利用して、第１静注剤と第２静注剤とを攪拌混合することもできる。

その他、例えば、特開２０００−３１６９５１号公報に記載されているような、第１静注剤を収容する第１室と、第２静注剤を収容する第２室と、注出口を備える副室とを有し、第１室と第２室は互いに連通せず、副室は第１室と第２室の両方と連通可能な医療用薬液バックを用いることもできる。具体的には、可撓性樹脂フィルムにより包囲され、それぞれ液体を密封し収容可能な第１室、第２室及び副室を有する医療用薬液バックである。この医療用薬液バックでは、前記第１室には第１静注剤が収容されており、前記第２室には第２静注剤が収容されており、前記副室は、液体を外部へ注出できる注出口を備え、前記第１室と前記副室との間に第１イージーピールシールが配置され、前記第２室と前記副室との間に第２イージーピールシールが配置されている。前記第１室に収容された第１静注剤が、樹脂フィルムを介して当該第１静注剤を外部から押圧することにより前記第１イージーピールシールを剥離させて副室へ流入可能である。前記第２イージーピールシールは、前記第２室内の前記第２静注剤又は前記副室内の液体を外部から押圧することにより剥離され、前記第２室と前記副室とを連通させることができる。第１イージーピールシールを剥離することによって第１室に収容されていた第１静注剤を副室へ徐々に流入させ、さらに第２イージーピールシールを剥離することによって第２室に収容されていた第２静注剤を副室へ徐々に流入させることにより、副室で第１静注剤と第２静注剤とを徐々に共存させることができる。当該医療用薬液バッグの注出口を静注用注入器にセットすることにより、副室中の第１静注剤及び第２静注剤の混合液（本実施形態のアルブミン含有静注剤）を動物に投与することができる。この際、副室において、第１静注剤由来のアルブミン１ｇ当たり０．５μｍｏｌ以上存在しており、かつ、副室に流入した第１静注剤由来のアルブミンが、注出口から静注用注入器を経由して動物の静脈に注入されるまでの時間が１０分間〜１時間となるように、第１室に収容される第１静注剤中のアルブミンの含有量、第２室に収容される第２静注剤中のシステイン等の含有量、第１室から副室へ第１静注剤が流入する流入速度、及び第２室から副室へ第２静注剤が流入する流入速度等を適宜調整することが好ましい。なお、第１室や第２室から副室への流入速度は、例えば、第１イージーピールシールや第２イージーピールシールの幅等を調節することにより、調整することができる。

副室に、予め攪拌子を収容しておいた場合には、当該攪拌子を用いて攪拌することにより、副室へ流入した第１静注剤と第２静注剤とを十分に混合することもできる。攪拌子としては、前記のものと同様に、一般的に溶液の混合に用いられるものの中から適宜選択して用いることができる。例えば、磁性攪拌子を用いた場合には、副室の近傍に、磁場発生装置を近づけることにより、副室内の磁性攪拌子を振動させて第１静注剤と第２静注剤とを混合することができる。

これらの医療用薬液バックに、第１室に第１静注剤、第２室に第２静注剤を収容させたものを、本実施形態のアルブミン含有静注剤の調製用キットとすることができる。さらに、当該医療用薬液バックの表面に指示書、注意書きを印刷しておいてもよい。

これらの医療用薬液バックが備える注出口が、公知の静注用注入器の注入口に導通可能なコネクターとして機能するものであることにより、当該医療用薬液バック内で調製された第１静注剤及び第２静注剤の混合液を、動物の静脈へ注入することができる。当該注入口としては、静注用注入器の注入口に穿刺するための穿刺針や、静注用注入器の注入口に備えられた穿刺針によって穿刺可能なゴム栓等の、医療用薬液バック等で公知のコネクターを用いることができる。中でも、特段の滅菌操作を要することなく、公知の静注用注入器の注入口に無菌的に導通可能なものであることが好ましい。例えば、医療用薬液バックの注出口に備えられた穿刺針やゴム栓を予め無菌包装しておいた場合には、静注用注入器に導通させる直前に当該包装を開封することにより、当該医療用薬液バック中の第１静注剤と第２静注剤の混合液の無菌状態を維持したまま、静注用注入器に簡便に注入することができる。

また、本実施形態のアルブミン含有静注剤は、２以上の注入口と、静脈へ挿し込まれる１の注出口とを有し、異なる注入口から注入された２種類以上の静注剤の混合液が注出口から排出される静注用注入器を用いて調製することもできる。このような静注用注入器を用いた場合には、当該静注用注入器に注入された第１静注剤と第２静注剤は、注出口へと流れる間に互いに混合される。つまり、両者が混合された時点から、注出口から排出されるまでの時間が、第１静注剤由来のアルブミンが第２静注剤由来のシステイン又はその類縁化合物と共存する時間（第１静注剤由来の酸化型アルブミンが還元される反応時間）である。

具体的には、例えば、図１に示すような、第１注入口２からのびる第１流路３と、第２注入口４からのびる第２流路５と、前記第１流路３と前記第２流路５とが合流する合流部６と、前記合流部６からのび、かつ注出口８を備える第３流路７と、を有する注入器１Ａ（以下、「本実施形態の注入器」ということがある。）を用いることができる。第１注入口２に第１静注剤を含有する容器１２を接続させることにより第１注入口２から第１静注剤を注入し、第２注入口４に第２静注剤を含有する容器１３を接続させることにより第２注入口４から第２静注剤を注入すると、第１静注剤と第２静注剤は合流部６で合流し、両者の混合液（本実施形態のアルブミン含有静注剤）が、第３流路７を通って注出口８まで流れる。

なお、本実施形態の注入器の各構成部材は、静注用注入器（例えば、点滴用具等）において一般的に用いられているものを適宜組み合わせて使用することができる。例えば、第１〜３流路は、点滴用として汎用されている可撓性チューブを用いることができる。

本実施形態の注入器においては、第３流路７中において、第１静注剤由来のアルブミンと第２静注剤由来のシステイン等が共存した状態で存在する。したがって、還元型アルブミン含有量の含有割合をより十分に高めるために、第３流路を流れる液体中のシステイン等の濃度が、当該液体中のアルブミン濃度１ｇ／ｍｌ当たり０．５μｍｏｌ／ｍｌ以上となるように、第１静注剤中のアルブミン含有量、第２静注剤注のシステイン等の濃度、第１流路を流れる第１静注剤の流速、第２流路を流れる第２静注剤の流速等を適宜調整することが好ましい。

本実施形態の注入器においては、第１静注剤由来のアルブミンが、合流部６から注出口８まで到達するために要する時間が、１０分間以上、好ましくは１０分間〜１時間となるように、第１流路から合流部６へ流入する第１静注剤の流速、第２流路から合流部６へ流入する第２静注剤の流速、第３流路７を流れる液体の流速、第３流路７の流路長等を調整することが好ましい。

各流路には、当該流路を流れる液体の流速を調節するために、流量制御部を設置してもよい（具体的には、図２〜図４で示す流量制御部９ａ〜９ｃ等）。流量制御部としては、例えば、クランプにより適当な力で可撓性チューブを挟むことによって当該可撓性チューブの内径を変化させることにより、当該可撓性チューブ内を流れる液体の流量を調整するチューブ・クランプや、可撓性チューブを圧搾し、この圧搾部を可撓性チューブの前方へ一定速度で移動させることにより当該可撓性チューブ内を流れる液体の流量を調整する輸液ポンプ等の、公知の流量制御部を用いることができる。具体的には、特開２００２−２７６８３１号公報、特許第４２９８２３０号公報、特許第３１９８２８９号公報等に記載されているチューブ・クランプや、特許第４２３７８８４号公報に記載されているローラー・ポンプ等が挙げられる。なお、流量制御部は、第１流路、第２流路、及び第３流路のうち、一の流路においてのみ設置してもよく、二の流路において設置してもよく、三流路全てに設置してもよい。

さらに、本実施形態の注入器の各流路には、流速を確認するための液滴確認部を設けることができる（具体的には、図４で示す液滴確認部１１ａ〜１１ｃ等）。特に、流量制御部を設けている場合には、当該流量制御部の下流に液滴確認部を設けることにより、各流露を流れる液体の流速を所望の範囲により簡便に調整することができる。

また、本実施形態の注入器には、貯留部を設けてもよい。例えば、図２の注入器１Ｂに示すように、合流部６を兼ねる貯留部６ａとしてもよい。第１流路３から流入した第１静注剤と、第２流路５から流入した第２静注剤とが、貯留部６ａで一定時間共に貯留されることにより、より十分に混合された状態で、混合液を第３流路７へ流入させることができる。その他にも、図３の注入器１Ｃに示すように、第３流路７に貯留部１０を設けてもよい。貯留部に流入した液体が貯留部内に貯留された液体に滴下する際には、重力に基づく拡散混合力が生じる。このため、貯留部内では、流路よりも第１静注剤と第２静注剤とをより十分に混合させることができる。なお、図３に示すような注入器は、「アリメバッグ」（ニプロ製）のような既存の医療用輸液バックの注出口に、静脈注入用の針付チューブを差し込むことにより、製造することもできる。

特に、図２及び図３で示すように、貯留部６ａや貯留部１０の下流に、流量制御部９ｃを設置することにより、第１静注剤と第２静注剤とが、当該貯留部中で完全に混合させることができる。例えば、図４の注入器１Ｄに示すように、第１流路３に流量制御部９ａを、第２流路５に流量制御部９ｂを、貯留部１０の下流に流量制御部９ｃを設けた場合に、まず、流量制御部９ｃで流路を閉塞（つまり、流速を０ｍｉｎ／ｍｌに調節する。）させ、貯留部６ａに第１静注剤と第２静注剤をそれぞれ流入させ、混合液を貯留させる。一定量の混合液が溜まった後、流量制御部９ａ及び流量制御部９ｂで流路を閉塞させる。この状態で一定時間保持することにより、貯留部６ａ中で、第１静注剤と第２静注剤とを十分に混合することができる。その後、流量制御部９ｃを開通させて貯留部６ａ中の溶液を全て排出させた後、再度流量制御部９ｃを閉塞させ、流量制御部９ａ及び流量制御部９ｂを開通させる。貯留部６ａ内の溶液は、第１静注剤由来の酸化型アルブミンと第２静注剤由来のシステイン等は、互いに十分に混合された状態で排出されるため、残りの第３流路７を注出口８まで移動する間に、第１静注剤由来の酸化型アルブミンを還元型への変換反応を効率よく行うことができる。

また、貯留部６ａや貯留部１０には、攪拌手段を設けてもよい。このような攪拌手段としては、例えば、微細振動装置や超音波発生装置等が挙げられる。その他、貯留部を十分な硬度を備える材質で構成させ、かつ当該貯留部に磁性攪拌子を備えていてもよい。磁性攪拌子を含む貯留部に、適当な磁場を発生させることにより、磁性攪拌子の回転力により貯留部内の液体を十分に混合することができる。

その他、図５の注入器１Ｅに示すように、合流部６ｂを一方の流路（例えば、第１流路３）の先端が他方の流路（例えば、第２流路５）内に存在するように形成させることもできる。このような二重管構造により、内管から排出される溶液と外管を流れる溶液との接触面積が大きくなる結果、第１静注剤と第２静注剤とをより十分に混合させることができる。また、図６の注入器１Ｆに示すように、内管の先端に複数の吐出口を設けることによっても、合流部６ｃにおける第１静注剤と第２静注剤の接触効率を高めることができる。

さらに、本実施形態の注入器の各構成部材には、点滴に用いられる輸液セット等において一般的に設けられている各種部材を設置することもできる。例えば、注出口やその近傍に、疎水性フィルター等のエア除去装置を設けてもよい。

また、本実施形態の注入器と、第１静注剤と、第２静注剤とは、一のキット又は包装品とすることが好ましい。このようなキットや包装品は、その作成には特別の制限はなく、適宜常法によることができる。これらのキットや包装品には、服用方法を記載した指示書、服用を中止しなければならない症状、副作用時の対応が記載された注意書きを入れることが好ましい。その他、これらのキットや包装品には、本実施形態のアルブミン含有静注剤と同時に投与等される薬剤等も含めてもよい。

なお、本実施形態のアルブミン含有静注剤は、少なくとも、第１静注剤と第２静注剤とを含んでいればよい。例えば、本実施形態のアルブミン含有静注剤は、第２静注剤由来のシステイン等による、第１静注剤由来の酸化型アルブミンに対する還元作用を損なわない限り、その他の薬剤を含有していてもよい。

本実施形態のアルブミン含有静注剤中の還元型アルブミンや酸化型アルブミンの含有量は、当該技術分野において公知の定量方法の中から適宜選択して測定することができる。具体的な測定方法としては、例えば下記の方法が挙げられる。
（Ｉ）ブロムクレゾールグリーン（ＢＣＧ）とブロムクレゾールパープル（ＢＣＰ）を利用した色素結合法。ＢＣＰ法は、還元型アルブミンと酸化型アルブミンに対する反応性が異なるため、ＢＣＰ法とＢＣＧ法で求めたアルブミン定量値の差から、酸化型アルブミン比率を算出することが出来る。
（ＩＩ）エルマン試薬などの遊離ＳＨ基定量試薬を用いて、還元型アルブミン由来のＳＨ基を定量する方法（Sogami M, Int. Pept. Protein Res., 24(2), 96-103, 1984）。
（ＩＩＩ）高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を用いる方法（Sogami M., J. Chromatogr., 332, 19-27, 1985；特開昭６１−１５５３９７号公報；特公平２−４８６３号公報；Int. J. Peptide Protein Res. 24:96; 1984）。還元型アルブミンと酸化型アルブミンとを分離して検出し、分離したクロマトグラム上におけるピーク面積比から、酸化型アルブミン比率を求めることができる。
（ＩＶ）質量分析計を用いたアルブミンの分析方法（安川恵子, 臨床検査, 44(8), 907-910, 2000）。酸化型アルブミンは、付加した化合物（例えばシステイン）の質量分だけ、還元型アルブミンよりも重くなる。従って、十分な質量分解能を有する質量分析計で測定することにより、還元型アルブミンと酸化型アルブミンを分離して検出することが可能となる。
（Ｖ）試料溶液のｐＨを特定範囲（ｐＨ４〜９、好ましくは５．８〜６．２）に調整することにより改良された、ＨＰＬＣ又は質量分析を用いる方法（国際公開第２００７／０１３６７９号パンフレット）。試料溶液のｐＨを特定範囲に調整し、好ましくは試料を特定範囲の割合で希釈した希釈溶液とするかあるいはクロマトグラフィー手段や限外ろ過などにより低分子物質を除去することにより、試料溶液中の還元型アルブミンの酸化が著しく抑制され、極めて安定で精度の高いアルブミン測定が可能となる。

分析精度の安定性や高さを考慮すると、生体試料中の酸化型アルブミン比率は、上記の（ＩＩＩ）〜（Ｖ）のいずれかの方法により定量されることが好ましく、上記の（ＩＩＩ）の方法により定量されることがより好ましい。

本実施形態のアルブミン含有静注剤は、他のアルブミン含有静注剤と同様、様々な疾患の治療や予防のために用いることができる。中でも、肝疾患やそれに関連して発症する疾患の治療や予防のために用いることが好ましく、肝疾患に伴う浮腫の治療や予防のために用いることがより好ましい。なお、肝疾患としては、肝硬変、肝炎(ウイルス性肝炎(C型肝炎、B型肝炎等)、アルコール性肝炎、非アルコール性肝炎等)等を挙げることができる。また、浮腫とは、細胞間質に体液が過剰に貯留する状態(水分貯留)をいう。肝疾患に伴う浮腫は、主に腹水の症状として表出する。

次に実施例を示して本発明をさらに詳細に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。

［実施例１］
４種類の市販の静注用アルブミン製剤に、強力ネオミノファーゲンシー（登録商標）静注２０ｍＬ〔システイン塩酸塩２２．２９ｍｇ／２０ｍｌ（Ｌ−システインとして２０ｍｇ／２０ｍｌ）、グリチルリチン酸モノアンモニウム５３ｍｇ／２０ｍｌ（グリチルリチン酸として４０ｍｇ／２０ｍｌ）；株式会社ミノファーゲン製）（以下、ＳＮＭＣ）〕を混合して、各アルブミン製剤中の還元型アルブミンの含有割合の変化を調べた。静注用アルブミン製剤として、下記の４種類を用いた。
製剤Ａ：アルブミナー２５％（ＣＬＳベーリング製、Ｌｏｔ：ＯＦ２０９Ｂ）
製剤Ｂ：献血アルブミン２０“化血研”（アステラス製薬製、Ｌｏｔ：ＳＡ１０５８）
製剤Ｃ：献血アルブミン２５％（ベネシス製、Ｌｏｔ：Ｒ３１２ＰＸ）
製剤Ｄ：献血アルブミネート４．４％（日本製薬製、Ｌｏｔ：Ｎ２５８ＭＮ）

まず、各アルブミン製剤の還元型アルブミンと酸化型アルブミンの含有量を測定した。
その後、０．６２５ｇの各アルブミン製剤に対して、それぞれ、２００μＬのＳＮＭＣを添加して常温でインキュベートし、経時的に還元型アルブミンと酸化型アルブミンの含有量を測定した。

なお、各アルブミン製剤の還元型アルブミンと酸化型アルブミンの含有量は、ＨＰＬＣ法により測定した。具体的にはＨＰＬＣにより還元型アルブミンと酸化型アルブミンとを分離して検出し、分離したクロマトグラム上におけるピーク面積比から、還元型アルブミン比率を求めた。

表１に各製剤中の還元型アルブミン含有比率の測定値(平均値±標準偏差)を、混合後の経過時間ごとに示した。表１中、「−」は、測定を行わなかったことを示す。また、図７に、各アルブミン製剤の、ＳＮＭＣ混合前と、混合してから１５分経過後のＨＰＬＣのチャートを示す。図８に、製剤Ａの、ＳＮＭＣ混合後０分、１５分、６０分、及び５４０分経過後のＨＰＬＣのチャートを示す。図７及び８中、「Ｒｅｄ．」は還元型アルブミンのピークであり、「Ｏｘｉ．」は酸化型アルブミンのピークを示す。この結果、いずれの製剤においても、ＳＭＮＣ混合後に還元型アルブミン含有量が増大していた。また、増大傾向は、約１５分経過後にはピークに達しており、その後徐々に低下するようであった。ただ、製剤Ａの結果では、混合から９時間経過後であっても、ピーク時よりも低いものの、ＳＮＭＣ混合前よりも還元型アルブミン含有割合が高かった。
また、混合前（混合後経過時間０分）と混合から１５分経過後における製剤Ａ〜Ｄの還元型アルブミンの平均値を求めたところ、混合前は３６．４５±１．０３％であったのに対して、混合１５分後は７６．３±１．５％であった。
これらの結果から、アルブミンを含有する静注剤にシステイン等を含む静注剤を混合することにより、還元型アルブミン含有割合を飛躍的に高められること明らかである。

［実施例２］
０．６２５ｇの各アルブミン製剤に対して、それぞれ、１００μＬ若しくは５０μＬのＳＮＭＣを添加し、混合時間を１５分間とした以外は、実施例１と同様にして、製剤Ａ〜Ｄ中の還元型アルブミンと酸化型アルブミンの含有量を測定した。
表２及び３に、各製剤中の還元型アルブミン含有量の測定値(平均値±標準偏差)を示した。表２は、１００μＬのＳＮＭＣを添加した場合の結果であり、表３は５０μＬのＳＮＭＣを添加した場合の結果である。

全てのアルブミン製剤において、ＳＮＭＣの混合量が５０μＬであった場合よりも、２００μＬであった実施例１のほうが混合後１５分経過後の還元型アルブミンの含有割合は低かった。
さらに、アルブミン製剤Ａ及びＢにおいても、ＳＮＭＣの混合量が５０μＬよりも１００μＬのほうが、還元型アルブミンの含有割合は高かった。これらの結果から、アルブミン含有静注剤に添加するシステイン等の量が多いほど、還元型アルブミン含有割合の向上効果が高いこと、０．６２５ｇのアルブミンに対して、５０μｇのシステイン塩酸塩（システインで約０．５μｍｏｌ）を混合することにより、還元型アルブミン含有割合の向上効果が得られることが明らかである。

本発明のアルブミン含有静注剤は、従来のアルブミン含有静注剤よりも還元型アルブミンの含有割合が高く、このため、より高い治療効果が期待できることから、本発明のアルブミン含有静注剤は、肝疾患の予防又は治療、特に肝疾患に伴う浮腫の予防又は治療のための薬剤として好適に用いることができる。

１Ａ、１Ｂ、１Ｃ、１Ｄ、１Ｅ、１Ｆ…注入器
２…第１注入口
３…第１流路
４…第２注入口
５…第２流路
６、６ｂ、６ｃ…合流部
６ａ、１０…貯留部
７…第３流路
８…注出口
９ａ、９ｂ、９ｃ…流量制御部
１１ａ、１１ｂ、１１ｃ…液滴確認部
１２…第１静注剤を含有する容器
１３…第２静注剤を含有する容器

Claims (16)

1. アルブミンを有効成分とする第１静注剤と、システイン又はその類縁化合物を含有する第２静注剤とを混合してなることを特徴とするアルブミン含有静注剤。
2. 前記第２静注剤由来のシステイン又はその類縁化合物が、前記第１静注剤由来のアルブミン１ｇ当たり０．５μｍｏｌ以上存在するように、両者を共存させた後に静注される請求項１に記載のアルブミン含有静注剤。
3. 前記第１静注剤由来のアルブミンが、前記第２静注剤由来のシステイン又はその類縁化合物と１０分間以上共存させた後に静注される請求項１又は２に記載のアルブミン含有静注剤。
4. 前記第１静注剤由来のアルブミンと前記第２静注剤由来のシステイン又はその類縁化合物との共存時間が、５時間以下である請求項３に記載のアルブミン含有静注剤。
5. 前記第１静注剤と前記第２静注剤とを混合した後に、静注用注入器に注入される請求項１〜４のいずれか一項に記載のアルブミン含有静注剤。
6. 前記第１静注剤及び前記第２静注剤を混合した後、前記静注用注入器に注入される前に、１０分間以上室温にてインキュベートされる請求項５に記載のアルブミン含有静注剤。
7. 前記第２静注剤中のシステイン又はその類縁化合物の濃度が、１ｍｇ／ｍｌ以上である請求項１〜６のいずれか一項に記載のアルブミン含有静注剤。
8. 浮腫の改善のために投与される請求項１〜７のいずれか一項に記載のアルブミン含有静注剤。
9. 第１注入口からのびる第１流路と、
   第２注入口からのびる第２流路と、
   前記第１流路と前記第２流路とが合流する合流部と、
   前記合流部からのび、かつ注出口を備える第３流路と、
   を有する注入器を用い、
   前記第１注入口からアルブミンを有効成分とする第１静注剤を注入し、前記第２注入口からシステイン又はその類縁化合物を含有する第２静注剤を注入し、前記第１静注剤と前記第２静注剤との混合液を、前記第３流路の前記合流部から１０分間以上かけて前記注出口までを到達させることを特徴とするアルブミン含有静注剤の調製方法。
10. 前記第３流路を流れる液体中のシステイン又はその類縁化合物の濃度が、当該液体中のアルブミン濃度１ｇ／ｍｌ当たり０．５μｍｏｌ／ｍｌ以上である請求項９に記載のアルブミン含有静注剤の調製方法。
11. 前記第１静注剤中のアルブミン含有量が０．０１〜３０ｇ／ｍｌであり、前記第２静注剤中のシステイン又はその類縁化合物含有量が１ｍＭ〜５Ｍである請求項９又は１０に記載のアルブミン含有静注剤の調製方法。
12. 前記合流部又は第３流路に設けられた貯留部を用い、前記第１静注剤と前記第２静注剤とを一定時間貯留する請求項９〜１１のいずれか一項に記載のアルブミン含有静注剤の調製方法。
13. 前記第１流路、前記第２流路、及び前記第３流路のうち、少なくとも一つの流路に設けられた流量制御部を用い、流量制御を行う請求項９〜１２のいずれか一項に記載のアルブミン含有静注剤の調製方法。
14. 前記混合液を１０分間〜１時間、室温にてインキュベートする請求項９〜１３のいずれか一項に記載のアルブミン含有静注剤の調製方法。
15. 医療用薬液バックであって、
    可撓性樹脂フィルムにより包囲されそれぞれ液体を密封し収容可能な第１室、第２室及び副室を有し、
    前記第１室にはアルブミンを有効成分とする第１静注剤が収容されており、
    前記第２室にはシステイン又はその類縁化合物を含有する第２静注剤が収容されており、
    前記副室は、液体を外部へ注出できる注出口を備え、
    前記第１室と前記副室との間に第１イージーピールシールが配置され、
    前記第２室と前記副室との間に第２イージーピールシールが配置され、
    前記第１イージーピールシールが、前記樹脂フィルムを介して前記第１室に収容された第１静注剤を外部から押圧することにより剥離され、前記第１室と前記副室とを連通させ、
    前記第２イージーピールシールが、前記第２室内の前記第２静注剤又は前記副室内の液体を外部から押圧することにより剥離され、前記第２室と前記副室とを連通させることを特徴とする医療用薬液バッグ。
16. 少なくとも、アルブミンを有効成分とする第１静注剤と、システイン又はその類縁化合物を含有する第２静注剤と、注入器とを有し、
    前記注入器は、
    第１注入口からのびる第１流路と、
    第２注入口からのびる第２流路と、
    前記第１流路と前記第２流路とが合流する合流部と、
    前記合流部からのび、かつ注出口を備える第３流路と、
    を有することを特徴とするキット。

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