JPWO2008123417A1 - 抗疲労剤 - Google Patents
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Abstract
Description
トゲドコロ(Dioscorea esculenta)を沖縄県の販売店より、約370kg購入した。約5mmにスライスしたものを60℃で21時間加熱することにより乾燥した。そのうち約7kgを遠赤外処理(120℃、7〜8分間)した後、粉砕して粉末6kgを得た。
雄性ICRマウスを日本SLC社から購入し、予備飼育の後6週齢より実験に用いた。実施例1で調製したトゲドコロ粉末を標準飼料CE−2(日本クレア社製)に1%(w/w)の割合で混ぜ合わせて試験食を作製した。試験食投与前に、あらかじめ一定時間以上泳ぐことが可能な個体を選別して均等に各群に振り分けた。その後、試験食を自由摂取させる試験群と標準飼料CE−2を自由摂取させる対照群のマウスの水泳運動時間を7日目、8日目、9日目に測定し、比較した。水泳運動時間は、マウスに体重の1%の重りを負荷して強制水泳を始めさせ、疲労して頭部が完全に5秒間水中に沈むまでの時間とした。各群23匹の平均値±標準誤差(分間)を表1に示した。その結果、試験食投与群では投与開始7日目から水泳時間の延長が認められた。一方、投与期間中の体重変化および摂餌量の変化に異常は認められず、安全に服用できることがわかった。
実施例1で調製したトゲドコロ乾燥粉末200gを2Lの70%(v/v)エタノールに撹拌しながら加え、スターラーを用いて25℃で24時間攪拌した後、ブフナーロート(ろ紙No.2 ワットマン社製)を用いて吸引ろ過した。ろ液はエバポレーターにて乾固し、70%(v/v)エタノール抽出物19.02gを得た。70%(v/v)エタノール抽出物を標準粉末飼料CE−2(日本クレア社製)に混ぜ、トゲドコロ乾燥粉末1%(w/w)混餌相当量とし、試験食とした。
雄性ICRマウスを日本SLC社から購入し、実施例2と同様に水泳時間を測定した。本実施例における試験群のマウスには水泳運動時間を測定する1週間前から実施例3で調製した試験食を自由摂取させた。投与開始7日目の結果を、各群10匹の平均値±標準誤差(分間)として表2に示した。その結果、70%(v/v)エタノール抽出物投与群に水泳時間の延長が見られた。一方、投与期間中の体重変化および摂餌量の変化に異常は認められず、安全に服用できることがわかった。
実施例3で調製したトゲドコロの70%(v/v)エタノール抽出物5.031gに、300mLのアセトンを加えて懸濁し、5600×gで20分間遠心分離した。上清はエバポレーターにて乾固し、トゲドコロのアセトン抽出物245mgを得た。アセトン抽出物を標準粉末飼料CE−2(日本クレア社製)に混ぜ、トゲドコロ乾燥粉末1%(w/w)混餌相当量とし、試験食とした。
雄性ICRマウスを日本SLC社から購入し、実施例2と同様に水泳時間を測定した。本実施例における試験群のマウスには、水泳運動時間を測定する1週間前から実施例5で調製した試験食を自由摂取させた。投与開始8日目の結果を、各群9匹の平均値±標準誤差(分間)として表3に示した。その結果、アセトン抽出物投与群に水泳時間の延長が見られた。一方、投与期間中の体重変化および摂餌量の変化に異常は認められず、安全に服用できることがわかった。
雄性ICRマウスを日本SLC社から購入し、実施例2と同様にトゲドコロ粉末を1%(w/w)の割合で標準食CE−2に混ぜた試験食を作製し投与を行い、7日目から9日目まで水泳実験を行った翌日、すなわち試験食投与開始10日目に、マウスに体重の1%(w/w)の重りを負荷して10分間強制水泳を行った後、採血した。血中クレアチンキナーゼ値は、ドライケム(富士フィルム社製)を用いて測定した。また、水泳運動を強制しない群を無処置群とした。各群の平均値±標準誤差(U/L)を表4に示した。対照群では、連日の水泳運動による疲労の蓄積によってクレアチンキナーゼ値が無処置群と比較して高値を示すのに対し、試験食投与群では無処置群と同程度の値を示した。
実施例5と同様にアセトン抽出物を調製した。これらを標準粉末飼料CE−2(日本クレア社製)に混ぜ、試験食とした。投与量は、それぞれトゲドコロ乾燥粉末3%(w/w)および10%(w/w)混餌相当量とした。雄性ICRマウスは日本SLC社から購入し、実施例2と同様に水泳時間を測定した。本実施例における試験群のマウス(2群)には、水泳運動時間を測定する1週間前から試験食(2種)をそれぞれ自由摂取させた。対照群には、標準粉末飼料CE−2を与えた。投与開始7日目から9日目の結果を、各群8匹から10匹の平均値±標準誤差(分間)として表5に示した。その結果、アセトン抽出物の投与量を増やすと水泳時間が延長された。一方、投与期間中の体重変化および摂餌量の変化に異常は認められず、安全に服用できることがわかった。
実施例5と同様にアセトン抽出物を調製した。これを所定の濃度になるように少量のエタノール(キシダ化学株式会社製)に溶解し、エタノール濃度が10%(v/v)となるようにオリーブ油(和光純薬工業株式会社製)を加えて均一な溶液を調製した。vehicleには10%(v/v)となるようにエタノールを加えたオリーブ油を用いた。雄性ICRマウスは日本SLC社から購入し、実施例2と同様に水泳時間を測定した。本実施例における試験群のマウス(2群)には、前記のように調製したサンプルを、初日、翌1日目、2日目、3日目および6日目、7日目、8日目、9日目に強制経口投与した。9日目の結果を、各群6匹から10匹の平均値±標準誤差(分間)として表6に示した。その結果、アセトン抽出物は強制経口投与すると、水泳時間が延長され、投与量を増やすとさらに水泳時間が延長された。一方、投与期間中の体重変化および摂餌量の変化に異常は認められず、安全に服用できることがわかった。
実施例1で調製したトゲドコロ乾燥粉末800gを8Lの60%(v/v)エタノールに撹拌しながら加え、スターラーを用いて25℃で24時間攪拌した後、ブフナーロート(ろ紙No.2 ワットマン社製)を用いて吸引ろ過した。ろ液はエバポレーターにて乾固し、60%(v/v)エタノール抽出物98.9gを得た。
雄性ICRマウスを日本SLC社から購入し、実施例2と同様に水泳時間を測定した。本実施例における試験群のマウスには水泳運動時間を測定する1週間前から実施例12で調製した60%(v/v)エタノール抽出物を1.5%(w/w)(トゲドコロ粉末10%(w/w)量相当)の割合で標準粉末飼料CE−2(日本クレア社製)に混ぜた試験食を自由摂取させた。投与開始7日目と8日目の結果を、それぞれ各群15匹あるいは各群13匹の平均値±標準誤差(分間)として表9に示した。その結果、60%(v/v)エタノール抽出物投与群に水泳時間の延長が見られた。一方、投与期間中の体重変化および摂餌量の変化に異常は認められず、安全に服用できることがわかった。
雄性ICRマウスを日本SLC社から購入し、実施例1で調製したトゲドコロ粉末を3%(w/w)の割合で標準食CE−2に混ぜた試験食を調製し投与を行った。7日目と8日目に疲労して頭部が完全に5秒間水中に沈むまで水泳運動を行い、9日目に5分間の水泳運動を行った直後に麻酔下で腹大静脈より採血し、乳酸測定装置ラクテート・プロ(アークレイ社製)を用いて血中乳酸値を測定した。また、水泳運動をしない群を無処置群とした。各群の平均値±標準誤差(mmol/L)を表10に示した。対照群では、血中乳酸値が高値を示すのに対し、トゲドコロ粉末投与群では対照群より低かった。
雄性ICRマウスを日本SLC社から購入し、実施例12で調製した60%(v/v)エタノール抽出物を0.5%(w/w)(粉末3%(w/w)相当)の割合で標準食CE−2に混ぜた試験食を調製し投与を行った。実施例14と同様に水泳運動を行い、9日目に5分間の水泳運動を行った直後に採血し、血中乳酸値を測定した。また、水泳運動をしない群を無処置群とした。各群の平均値±標準誤差(mmol/L)を表11に示した。対照群では、血中乳酸値が高値を示すのに対し、トゲドコロのエタノール抽出物投与群では対照群より低かった。
雄性BALB/cマウスを日本SLC社から購入し、予備飼育の後7週齢より実験に用いた。実施例1で調製したトゲドコロ粉末を標準飼料CE−2(日本クレア社製)に1%(w/w)の割合で混ぜ合わせて試験食を作製した。また、実施例12で調製した60%(v/v)エタノール抽出物を標準粉末試料CE−2に混ぜた試験食も用いた。試験食投与前に、あらかじめ一定時間以上泳ぐことが可能な個体を選別して均等に各群に振り分けた。その後、試験食を自由摂取させる試験群と標準飼料CE−2を自由摂取させる対照群を設定し、試験食投与開始3日目を1回目とし、週1回、疲労して頭部が完全に5秒間水中に沈むまで水泳運動をさせた。1〜5週目に疲労して頭部が完全に5秒間水中に沈むまでの時間を測定した。水泳運動は実施例2と同様に行った。各群11〜15匹の平均値±標準誤差(分間)を表16に示した。対照群に比べ、トゲドコロ粉末1%(w/w)を混ぜた試験食および60%(v/v)エタノール抽出物を混ぜた試験食投与群で水泳時間の延長が認められた。一方、投与期間中の摂餌量の変化に異常は認められず、安全に服用できることがわかった。
雄性BALB/cマウスを日本SLC社から購入し、予備飼育の後7週齢より実験に用いた。実施例20と同様の実験を行い、試験食投与8週目に疲労して頭部が完全に5秒間水中に沈むまで水泳運動を実施した翌日に、麻酔下で脱血致死させた。右後肢の腓腹筋とヒラメ筋を摘出し重量を測定した。また、精巣周辺の脂肪を摘出して重量を測定した。各群9〜15匹の平均を表17に示す。対照群と比べて、トゲドコロ粉末1%(w/w)と60%(v/v)エタノール抽出物投与群で筋肉量の増加が認められた。一方、脂肪量はトゲドコロ粉末1%(w/w)と60%(v/v)エタノール抽出物投与群で減少していた。
ジネンジョ(Dioscorea japonica)(京丹後産)1kgを皮付きのまま、厚さ2〜3mmのスライスにした。スライスしたものを60℃、5時間乾燥させた後、小型超高速粉砕機(大阪ケミカル社製)で粉砕し、214.39gのジネンジョ粉末を得た。
[対照例2]
雄性ICRマウスを日本SLC社から購入し、実施例2と同様に水泳時間を測定した。本実施例における試験群のマウスには水泳運動時間を測定する1週間前から対照例1で調製した試験食を自由摂取させた。投与開始7日目の結果を、各群9匹の平均値±標準誤差(分間)として表18に示した。その結果、ジネンジョを投与したマウスでは、水泳時間の延長は認められなかった。
Claims (12)
- トゲドコロもしくはトゲドコロ由来処理物を有効成分として含有する抗疲労剤、持久力増強剤、滋養強壮剤又は筋肉増強剤。
- トゲドコロ由来処理物が乾燥粉末、水、エタノール、含水エタノールもしくはアセトン抽出物、当該抽出物から得られる画分である請求項1記載の抗疲労剤、持久力増強剤、滋養強壮剤又は筋肉増強剤。
- 請求項1または2記載の抗疲労剤、持久力増強剤、滋養強壮剤又は筋肉増強剤を含有する食品または飼料。
- 請求項1または2記載の抗疲労剤、持久力増強剤、滋養強壮剤又は筋肉増強剤を含有する医薬。
- トゲドコロを水、エタノール、含水エタノールもしくはアセトンで抽出する工程を包含する、抽出物の製造方法。
- 含水エタノールが1〜85%(v/v)含水エタノールである請求項5記載の製造方法。
- 請求項5または6の方法で得られ得る抽出物。
- 請求項7記載の抽出物を含有する食品または飼料。
- 請求項7記載の抽出物を含有する医薬。
- トゲドコロもしくはトゲドコロ由来処理物を投与する工程を包含する疲労回復もしくは予防方法、持久力増強方法、滋養強壮方法又は筋肉増強方法。
- 疲労回復もしくは予防方法、持久力増強方法、滋養強壮方法又は筋肉増強方法への使用のためのトゲドコロもしくはトゲドコロ由来処理物。
- 製造において、疲労回復もしくは予防、持久力増強、滋養強壮又は筋肉増強のために用いられる旨の表示を行う工程を包含する、トゲドコロもしくはトゲドコロ由来処理物を含有する食品の製造方法。
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