JPWO2002051797A1 - 新規な機能性ペプチド核酸モノマーとその製法 - Google Patents
新規な機能性ペプチド核酸モノマーとその製法 Download PDFInfo
- Publication number
- JPWO2002051797A1 JPWO2002051797A1 JP2002552895A JP2002552895A JPWO2002051797A1 JP WO2002051797 A1 JPWO2002051797 A1 JP WO2002051797A1 JP 2002552895 A JP2002552895 A JP 2002552895A JP 2002552895 A JP2002552895 A JP 2002552895A JP WO2002051797 A1 JPWO2002051797 A1 JP WO2002051797A1
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- functional molecule
- functional
- pna
- active ester
- derivative
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 0 C*(C)c(cc1O2)ccc1C(C(C=CC(C)(C=C1)C(O*(C(CC3)O)C3=O)=O)=C1O)=C(C=C1)C2=CC1=* Chemical compound C*(C)c(cc1O2)ccc1C(C(C=CC(C)(C=C1)C(O*(C(CC3)O)C3=O)=O)=C1O)=C(C=C1)C2=CC1=* 0.000 description 1
- LZQSLXNZORCPAR-UHFFFAOYSA-N CC(C)(C)OC(NCCNCC(O)=O)=O Chemical compound CC(C)(C)OC(NCCNCC(O)=O)=O LZQSLXNZORCPAR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
- C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
- C07D487/04—Ortho-condensed systems
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C245/00—Compounds containing chains of at least two nitrogen atoms with at least one nitrogen-to-nitrogen multiple bond
- C07C245/02—Azo compounds, i.e. compounds having the free valencies of —N=N— groups attached to different atoms, e.g. diazohydroxides
- C07C245/06—Azo compounds, i.e. compounds having the free valencies of —N=N— groups attached to different atoms, e.g. diazohydroxides with nitrogen atoms of azo groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
- C07C245/08—Azo compounds, i.e. compounds having the free valencies of —N=N— groups attached to different atoms, e.g. diazohydroxides with nitrogen atoms of azo groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings with the two nitrogen atoms of azo groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings, e.g. azobenzene
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C271/00—Derivatives of carbamic acids, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atom not being part of nitro or nitroso groups
- C07C271/06—Esters of carbamic acids
- C07C271/08—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms
- C07C271/10—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
- C07C271/20—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms to carbon atoms of hydrocarbon radicals substituted by nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D311/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings
- C07D311/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D311/78—Ring systems having three or more relevant rings
- C07D311/80—Dibenzopyrans; Hydrogenated dibenzopyrans
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09B—ORGANIC DYES OR CLOSELY-RELATED COMPOUNDS FOR PRODUCING DYES, e.g. PIGMENTS; MORDANTS; LAKES
- C09B11/00—Diaryl- or thriarylmethane dyes
- C09B11/04—Diaryl- or thriarylmethane dyes derived from triarylmethanes, i.e. central C-atom is substituted by amino, cyano, alkyl
- C09B11/06—Hydroxy derivatives of triarylmethanes in which at least one OH group is bound to an aryl nucleus and their ethers or esters
- C09B11/08—Phthaleins; Phenolphthaleins; Fluorescein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09B—ORGANIC DYES OR CLOSELY-RELATED COMPOUNDS FOR PRODUCING DYES, e.g. PIGMENTS; MORDANTS; LAKES
- C09B11/00—Diaryl- or thriarylmethane dyes
- C09B11/04—Diaryl- or thriarylmethane dyes derived from triarylmethanes, i.e. central C-atom is substituted by amino, cyano, alkyl
- C09B11/10—Amino derivatives of triarylmethanes
- C09B11/24—Phthaleins containing amino groups ; Phthalanes; Fluoranes; Phthalides; Rhodamine dyes; Phthaleins having heterocyclic aryl rings; Lactone or lactame forms of triarylmethane dyes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09B—ORGANIC DYES OR CLOSELY-RELATED COMPOUNDS FOR PRODUCING DYES, e.g. PIGMENTS; MORDANTS; LAKES
- C09B69/00—Dyes not provided for by a single group of this subclass
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
下記一般式（Ｉ）（式中、Ａはであり、Ｂはであり、ＲはＨ、ＮＯ２、ＮＨ２、ＮＨＣｂｚ、Ｂｒ、Ｆ、ＣｌまたはＳＯ３Ｎａ２であり、ｎは１〜４の整数である）で表される化合物、および活性エステルとｔ−ブトキシカルボニルアミノエチルアミンまたはω−アミノ酸誘導体との反応を含むことを特徴とする、前記化合物の製造方法。
Description
技術分野
本発明は、新規な構造を有する機能性ペプチド核酸モノマーおよびその製造方法に関する。
背景技術
核酸は生物の遺伝情報を司るＤＮＡおよびＲＮＡである。これに対して、ペプチド核酸（ＰＮＡ）とは、核酸の糖リン酸骨格をＮ−（２−アミノエチル）グリシン骨格に変換した修飾核酸である（図１）。ＤＮＡ／ＲＮＡの糖リン酸骨格は中性条件で負電荷を帯びていて相補鎖間の静電的な反発があるが、ＰＮＡの背骨構造はもともと電荷を持たないので静電的な反発がない。そのためＰＮＡは従来の核酸と比較して、高い二重鎖形成能をもち、高い塩基配列認識能を持つ。さらにＰＮＡは生体内ヌクレアーゼ・プロテアーゼに対し非常に安定で分解されないので、アンチセンス分子として遺伝子治療に応用することが検討されている。
従来のＤＮＡを媒体にしていた技術をＰＮＡ化することにより、これまで克服できなかったＤＮＡの欠点を補うことが可能となった。例えば、遺伝情報の体系的な解析を高速に且つ大量に行うための「ＤＮＡマイクロアレイ技術」および塩基配列を特異的に認識したことを蛍光発光により検出できるプローブとして最近開発された「モレキュラービーコン」に応用することが可能である。これらはいずれも酵素耐性に乏しいＤＮＡを媒体とするため、これらの技術を用いるに際しては厳密なサンプリングが要求される。この要求を満たすことが、前記の技術を高度化する上での鍵となっている。
一方ＰＮＡは酵素に対し完全な耐性を持つので、ＤＮＡマイクロアレイ技術およびモレキュラービーコンにおいてＰＮＡをＤＮＡに代用することによって、前記技術の欠点が克服され、さらに長所が引き出されるものと期待されている。
ＤＮＡマイクロアレイ技術およびモレキュラービーコン以外にもＰＮＡ化することにより発展が期待される分野は数多いが、それらにおいてはＰＮＡの効率的な機能化、すなわちＰＮＡモノマーへの機能性分子の効率的な導入による新規なＰＮＡモノマーの設計が必要である。
ＰＮＡオリゴマーの合成方法には通常の固相ペプチド合成法を用いるので、ＰＮＡモノマーユニットをＰＮＡの背骨構造によって分類すると、Ｆｍｏｃ型ＰＮＡモノマーユニットとｔＢｏｃ型ＰＮＡモノマーユニットの２種類が含まれる（図２）。
Ｆｍｏｃ型ＰＮＡモノマーユニットの合成方法は既に確立されており、しかもそのオリゴマーの合成は一般的なＤＮＡ自動合成機によって可能であるため、下記のルート
によって、少量スケールでの合成が可能となっている。
当初ＰＮＡには下記のようなｔＢｏｃ型ＰＮＡモノマーユニット
が採用され、その後より効率のよい合成方法
が確立された。しかし、前述したように取り扱いが容易なＦｍｏｃ型が開発されたため、ｔＢｏｃ型の使用頻度は減少している。
しかし、グアニン・チミン・シトシン・アデニン４種類の核酸塩基以外の機能性分子を導入する際、例えば光機能性分子を導入する際には、導入する機能性分子がアルカリ条件に不安定な場合が多いので、アルカリ条件を使用しないｔＢｏｃ型ＰＮＡ背骨構造の有用性は高い。「ｔ−ブトキシカルボニルアミノエチルアミン及びアミノ酸誘導体の製造方法」に関しては、本発明者らが特願２０００−２６８６３８として既に特許出願中である。
これ以外にも、光機能性オリゴＰＮＡのモノマーユニットの合成例は過去に５例が知られている。これら全てが上記ルートを用いているが、その収率については記載がないか、または極めて低いものでしかない（Ｐｅｔｅｒ Ｅ．Ｎｉｅｌｓｅｎ，Ｇｅｒａｌｄ Ｈａａｉｍａｎ，Ａｎｎｅ Ｂ．Ｅｌｄｒｕｐ ＰＣＴ Ｉｎｔ．Ａｐｐｌ．（１９９８）ＷＯ ９８５２９５ Ａ１ １９９８１１２６，Ｔ．Ａ．Ｔｒａｎ，Ｒ．−Ｈ．Ｍａｔｔｅｒｎ，Ｂ．Ａ．Ｍｏｒｇａｎ（１９９９）Ｊ．Ｐｅｐｔ．Ｒｅｓ，５３，１３４−１４５，Ｊｅｓｐｅｒ Ｌｏｈｓｅ ｅｔ ａｌ．（１９９７）Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ．，８，５０３−５０９，Ｈａｎｓ−ｇｅｏｒｇ Ｂａｔｚ，Ｈｅｎｒｉｋ Ｆｒｙｄｅｎｌｕｎｄ Ｈａｎｓｅｎ，ｅｔ ａｌ．Ｐｃｔ Ｉｎｔ．Ａｐｐｌ．（１９９８）ＷＯ ９８３７２３２ Ａ２ １９９８０８２７，Ｂｒｕｃｅ Ａｒｍｉｔａｇｅ，Ｔｒｏｅｌｓ Ｋｏｃｈ，ｅｔ ａｌ．（１９９８）Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄ Ｒｅｓ．，２６，７１５−７２０，Ｈａｎｓ−ｇｅｏｒｇ Ｂａｔｚ，Ｈｅｎｒｉｋ Ｆｒｙｄｅｎｌｕｎｄ Ｈａｎｓｅｎ，ｅｔ ａｌ．）。また、用いられる化合物の構造がアルカリ性条件に比較的安定であることが特徴的であるため、アルカリ性条件に不安定な発色団が付くと、前記従来法と類似の方法、すなわち下記ルートＡ
では効率良く合成できないと予想される。
そのため、例えば光機能性ＰＮＡモノマーのような機能性ＰＮＡモノマーの開発とともに、ＰＮＡモノマーを効率的に機能化する技術の確立が強く望まれている。
発明の開示
したがって、本発明は、上記の問題を解消した新規な機能性ＰＮＡモノマーおよびその効率的な合成方法の提供を目的とする。
本発明者らは上記課題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、下記ルートＢ
に示すように、ＰＮＡ背骨構造にｔ−ブトキシカルボニルアミノエチルアミン誘導体６を用いて１のペンタフルオロフェニル基を含む活性エステル体５と縮合してほぼ定量的に光機能性ＰＮＡモノマー４を合成することに成功した。
さらに本発明者らは、下記ルートＣ
に示すように、ＰＮＡ背骨構造にω−アミノ酸誘導体８を用いて１のペンタフルオロフェニル基を含む活性エステル体７と縮合してほぼ定量的に光機能性ＰＮＡモノマー４を合成することにも成功した。
上記ルートＢおよびＣにより、本発明者らは、上記課題を解決することを見出し本発明を完成するに至った。
すなわち本発明は、下記一般式（Ｉ）
（式中、Ａは
であり、Ｂは
であり、ＲはＨ、ＮＯ２、ＮＨ２、ＮＨＣｂｚ、Ｂｒ、Ｆ、ＣｌまたはＳＯ３Ｎａ２であり、ｎは１〜４の整数である。ただし、Ａが
である場合、Ｂは
である）で表される化合物に関する。
また、本発明は、ｔ−ブトキシカルボニルアミノエチルアミンを機能性分子の誘導体と反応させ、機能性分子をＰＮＡモノマーに導入することよりなる機能性ＰＮＡモノマーの製造方法であって、該機能性分子の誘導体が活性エステルであることを特徴とする、前記製造方法に関する。
さらに、本発明は、活性エステルが、下記一般式（ＩＩ）
（式中、Ａは
であり、ＲはＨ、ＮＯ２、ＮＨ２、ＮＨＣｂｚ、Ｂｒ、Ｆ、ＣｌまたはＳＯ３Ｎａ２であり、ｎは１〜４の整数である）
で表される基を、エステル結合を形成するカルボニル炭素に有することを特徴とする、前記製造方法に関する。
また、本発明は、活性エステルが、ペンタフルオロフェノキシ基またはスクシンイミドオキシ基をカルボニル炭素に有することを特徴とする、前記製造方法に関する。
さらに、本発明は、活性エステルを製造する方法であって、機能性分子のカルボン酸誘導体と、ペンタフルオロフェノキシ基またはスクシンイミドオキシ基を有する化合物との反応を含むことを特徴とする、前記方法に関する。
また、本発明は、機能性分子のカルボン酸誘導体を製造する方法であって、機能性分子の誘導体と脂肪族カルボン酸との反応を含むことを特徴とする、前記方法に関する。
またさらに、本発明は、機能性分子から該機能性分子の誘導体を製造し、該機能性分子の誘導体から機能性分子のカルボン酸誘導体を製造し、該機能性分子のカルボン酸誘導体から活性エステルを製造し、該活性エステルから機能性ＰＮＡモノマーを製造することを含む、機能性分子から機能性ＰＮＡモノマーを製造する方法において、下記ａ）〜ｃ）：
ａ）前記機能性分子のカルボン酸誘導体の製造において、機能性分子の誘導体と脂肪族カルボン酸とを反応させること；
ｂ）前記活性エステルの製造において、機能性分子のカルボン酸誘導体とペンタフルオロフェノキシ基またはスクシンイミドオキシ基を有する化合物とを反応させること；および、
ｃ）前記機能性ＰＮＡモノマーの製造において、ｔ−ブトキシカルボニルアミノエチルアミンを、活性エステルである機能性分子の誘導体と反応させること；
の１または２以上を含むことを特徴とする、前記方法に関する。
さらにまた、本発明は、下記一般式（ＩＩＩ）
（式中、Ｒ１は水素原子または炭素数１〜５の直鎖若しくは分枝鎖状のアルキル基、ｍは１〜１１の整数を表す）
で表されるω−アミノ酸誘導体を機能性分子の誘導体と反応させ、機能性分子をＰＮＡモノマーに導入することよりなる機能性ＰＮＡモノマーの製造方法であって、該機能性分子の誘導体が活性エステルであることを特徴とする、前記製造方法に関する。
そして、本発明は、活性エステルが、下記一般式（ＩＩ）
（式中、Ａは
であり、ＲはＨ、ＮＯ２、ＮＨ２、ＮＨＣｂｚ、Ｂｒ、Ｆ、ＣｌまたはＳＯ３Ｎａ２であり、ｎは１〜４の整数である）
で表される基を、直接または脂肪鎖あるいはペプチド鎖を介して、エステル結合を形成するカルボニル基に有することを特徴とする、前記製造方法に関する。
そしてまた、本発明は、活性エステルが、ペンタフルオロフェノキシ基またはスクシンイミドオキシ基をカルボニル炭素に有することを特徴とする、前記製造方法に関する。
そしてさらに本発明は、機能性分子から活性エステルを製造し、該活性エステルから機能性ＰＮＡモノマーを製造すること含む、機能性分子から機能性ＰＮＡモノマーを製造する方法において、前記機能性分子からの活性エステルの製造が、ｍ−メチルレッドとスクシンイミドオキシ基を含む化合物とを反応させること、および／または前記活性エステルから機能性ＰＮＡモノマーの製造が、一般式（ＩＩＩ）で表されるベンジルオキシカルボニル−ω−アミノ酸誘導体を、活性エステルである機能性分子の誘導体と反応させ、機能性分子をＰＮＡモノマーに導入すること、を含むこと特徴とする、前記方法に関する。
ここで、本発明による方法と従来の方法とを比較することによって本発明の特徴を詳細に説明する。
ｔＢｏｃ型ＰＮＡモノマーユニット４の合成は通常下記のルートＡが用いられる。
即ち、１と２を脱水縮合して３を合成した後、３をアルカリ加水分解することにより４を得る方法である。グアニン・チミン・シトシン・アデニン４種類の核酸塩基を導入する場合もこの方法を用いる。これ以外の機能性分子（表１に挙げる既知化合物のこと）を導入する際にも、ルートＡが用いられている。ところが、一般に光機能性分子はアルカリ条件に不安定な場合が多いので、ルートＡを用いると収率良く４を得ることができない。そこで従来のＰＮＡ背骨構造２を用いて縮合するのではなく、２を先に加水分解した６を用いることにした。６は１と同様な遊離カルボン酸基を内包しており分子内脱水縮合反応が引き起こる可能性があるため、ＤＣＣなどの縮合剤による直接的な脱水縮合反応は利用できない。そこで１をペンタフルオロフェノールにて活性エステル体５に変換した後、６と反応させることにより６の遊離カルボン酸基と２級アミノ基が分子内縮合しないように工夫した（ルートＢ）。これにより４が定量的に得られるようになった。このように、光機能性分子を活性エステル化して６と反応させ４を合成する方法は前例がなく、今後の多種多様な光機能性ＰＮＡモノマーの合成に不可欠な手段であるといえる。
また、ルートＣに用いる、下記一般式（ＩＩＩ）
（式中、Ｒ１は水素原子または炭素数１〜５の直鎖若しくは分枝鎖状のアルキル基、ｍは１〜１１の整数を表す）
で表されるベンジルオキシカルボニル−ω−アミノ酸誘導体には予めリンカー（カルボキシルアミノ酸）が結合しているため、当該誘導体は汎用性に富んでおり、活性エステル体を当該誘導体と反応させることによって、１工程で目的とする機能性ＰＮＡモノマーユニットが得られる。しかも、ベンジルオキシカルボニル−ω−アミノ酸誘導体も、多くの市販品を用いることができる。したがって、当該ルートＣは、比較的高価な光機能性分子を対象とする場合に特に有効である。
一方、スルホン酸クロリド系および立体障害が大きいメチルレッド等の光機能性分子のＰＮＡモノマー化は、ルートＢによってより好適に行われる。
したがって、本発明のルートＢおよびルートＣによる合成法を適宜選択することによって、多種多様な機能性ＰＮＡモノマーを合成することができる。
本発明によれば、例えば、Ｎａｐｈｔｈａｌｉｍｉｄｅ型、Ｆｌａｖｉｎ型、Ｄａｂｃｙｌ型、Ｂｉｏｔｉｎ型、ＦＡＭ型、Ｒｈｏｄａｍｉｎｅ型、ＴＡＭＲＡ型、ＲＯＸ型、ＨＡＢＡ型、Ｐｙｒｅｎｅ型、Ｃｏｕｍａｒｉｎ型のような光機能性モノマーユニットが得られる。また、これら以外の光機能性モノマーユニットおよび光機能性モノマーユニット以外の機能性モノマーユニットを得ることも可能である。
発明を実施するための形態
光機能性モノマーユニットの合成に関しては、例えば化合物４ａの合成、
において従来は機能性分子のカルボン酸誘導体１ａとＰＮＡ背骨構造２ａを脱水縮合して３ａを合成したあとで、アルカリ加水分解して目的の４ａを得ていた（ルートＡ）。ところが１ａのフラビン骨格は酸には安定であるがアルカリ性条件で容易に分解し６，７−ｄｉｍｅｔｈｙｌｑｕｉｎｏｘａｌｉｎｅｄｉｏｎｅになってしまうので、例え３ａが合成できても４ａを効率よく得ることは不可能である。そこで１ａを活性エステル体５ａに変換して６ａと反応させたところ、４ａは８５％の収率でほぼ定量的に反応が進行するようになった（ルートＢ）。
また、化合物４ｂの合成
において、ナフタルイミド誘導体３ｂも該当する１ｂと２ｂから４４％の収率で得られたが、次のアルカリ加水分解により得られる４ｂはわずか４％であった（ルートＡ）。そこで１ｂを活性エステル体５ｂに変換して６ｂと反応させたところ、４ｂは７５％の収率で反応が進行するようになった（ルートＢ）。
カルボン酸誘導体である１ａおよび１ｂの製造には、脂肪族カルボン酸、好ましくは直鎖の脂肪族カルボン酸を用いる。
また、ＰＮＡのアミノ基末端に導入するモノマーの製造には、スクシンイミド基を有する活性エステルが好適に用いられる。
なお、ルートＣに用いる一般式（ＩＩＩ）のω−アミノ酸誘導体として、そのアミノ酸部分におけるカルボニル炭素上の炭素鎖の長さが炭素数１〜１１のものが用いられるが、一般にＰＮＡはＤＮＡとのハイブリッドを期待しているので、立体的にＤＮＡに類似している誘導化が望ましい。この点を考慮すると、カルボキシルアミノ酸をリンカーとして利用する場合、アミノ酸部分がＺ−グリシンであるものが最適である。
光機能性オリゴＰＮＡの合成方法としては、Ｆｍｏｃ法とｔＢｏｃ法が用いられる。Ｆｍｏｃ法はアルカリ性試薬による脱保護過程を含んでおり、光機能性オリゴＰＮＡの設計には不適切である。一方、ｔＢｏｃ法はその合成過程にアルカリ条件を使用しないので光機能性オリゴＰＮＡの合成方法として適している。したがって、本発明によるＰＮＡモノマーをｔＢｏｃ法に適用すれば、光機能性オリゴＰＮＡの合成が効率的に行えるようになる。
実施例
以下に実施例を用いて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明の範囲はこれに限られるものではない。
（実施例１）
２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニル２−（５，７，８−トリメチル−１，３−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−２，４−ジアザフェナジン−２−イル）アセテート（５ａ）の合成
４ａ（１００ｍｇ，３１８μｍｏｌ）とＰｆｐＯＨ（７０．２ｍｇ，３８１μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にＥＤＣ（７３．２ｍｇ，３８２μｍｏｌ）を０°Ｃで加え、この反応液を０°Ｃで１時間室温で１２時間撹拌した。この反応液を減圧濃縮し、残渣を水・クロロホルム系で分配抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮したあと、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（２．５％ ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３）により精製し５ａ（１３０ｍｇ，８５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ８．０７（ｓ，１Ｈ），７．４４（ｓ，１Ｈ），５．２１（ｓ，２Ｈ），４．１４（ｓ，３Ｈ），２．５５（ｓ，３Ｈ），２．４５（ｓ，３Ｈ）；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ＋，ＮＢＡ／ＣＨ２Ｃｌ２）Ｃ２１Ｈ１４Ｏ４Ｎ４Ｆ５［（Ｍ＋Ｈ）＋］の計算値は４８１．０９３４，実測値は４８１．０９５０；ＵＶ λｍａｘ（ＤＭＦ）３９０，４６０（ｎｍ）．
（実施例２）
２−（Ｎ−（２−（（ｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ）エチル））−２−（５，７，８−トリメチル−１，３−ジオキソ（２，５−ジヒドロ−２，４−ジアザフェナジン−２−イル）アセチルアミノ）酢酸（４ａ）の合成
５ａ（１００ｍｇ，２０８μｍｏｌ）と６ａ（４５．４ｍｇ，２０８μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にジイソプロピルエチルアミン（３６．３μＬ，２０８μｍｏｌ）を加え、室温で１５時間撹拌した。これを減圧濃縮し残渣をシリカゲルカラムクロマト法（１０−５０％ ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３）により精製し４ａ（１３０ｍｇ，８５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．９４（ｓ）及び７．８６（ｓ）（１Ｈ），７．８０（ｓ）及び７．７５（ｓ）（１Ｈ），５．０３（ｓ）及び４．８８（ｓ）（２Ｈ），４．１７（ｓ）及び４．１３（ｓ）（３Ｈ），３．６４及び３．５２（２Ｈ），３．３８及び３．２６（２Ｈ），２．５８（ｓ）及び２．５６（ｓ）（３Ｈ），２．４６（ｓ）及び２．４４（ｓ）（３Ｈ），１．４６（ｓ）及び１．４１（ｓ）（９Ｈ）；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ＋，ＮＢＡ／ＣＨ２Ｃｌ２）Ｃ２４Ｈ３１Ｏ７Ｎ６［（Ｍ＋Ｈ）＋］の計算値は５１５．２２５２，実測値は５１５．２２７３；ＵＶ λｍａｘ（ＤＭＦ）３９０，４６０（ｎｍ）．
（実施例３）
Ｎ−（４−ジメチルアミノアゾベンゼン−２’−カルボニル）グリシン（１ｃ）の合成
メチルレッド（１．３５ｇ，５ｍｍｏｌ）とｔ−ブチルグリシン塩酸塩（８８０ｍｇ，５．２５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にトリエチルアミン（７３２μＬ，５．２５ｍｍｏｌ）を加えたあと、氷冷下ＤＣＣ（１．１３ｇ，５．５ｍｍｏｌ）を加え３０分、さらに室温で１５時間攪拌した。反応液を濾過し濾液を減圧濃縮して、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−１０％ アセトン／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製し、橙色針状晶として１ｃのｔ−ブチルエステル誘導体（１．０５ｇ，５５％）を得た。これ（７６５ｍｇ，２ｍｍｏｌ）に蟻酸（５０ｍＬ）を加え室温で２日攪拌し、減圧濃縮し蟻酸を除いたあと、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−５％ Ａｃｅｔｏｎｅ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製し、赤色針状晶として１ｃ（５４９ｍｇ，８４％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ９．９９（ｂｒｔ，１Ｈ），８．４０（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．８９（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），７．８４（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．５６（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．４９（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），６．７５（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），４．４２（ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ，２Ｈ），３．１０（ｓ，６Ｈ）；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｄ １６７．６１，１５３．３９，１５０．８６，１４３．３０，１３２．４９，１３１．４７，１２９．３８，１２７．６９，１２６．２８，１１６．２４，１１１．６３，４３．２０，４０．２４．
（実施例４）
２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニルＮ−（４−ジメチルアミノアゾベンゼン−２’−カルボニル）グリシネート（５ｃ）の合成
１ｃ（３２６ｍｇ，１ｍｍｏｌ）とＰｆｐＯＨ（２７６ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にＤＣＣ（３０８ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）を氷冷下加え、この反応液を室温で１５時間撹拌した。反応液を濾過し濾液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−５％ アセトン／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製し橙色粉末として５ｃ（４４９ｍｇ，９１％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １０．１４（ｂｒｔ，１Ｈ），８．３７（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．７８（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），７．７６（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．５７（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．５０（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），６．７４（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），４．６８（ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ，２Ｈ），３．０６（ｓ，６Ｈ）．
（実施例５）
２−（Ｎ−（２−（（ｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ）エチル）−２−（４−ジメチルアミノアゾベンゼン−２’−カルボニルアミノ）アセチルアミノ）酢酸（４ｃ）の合成
５ｃ（２４６ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ）と６（１０９ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（５ｍＬ）にジイソプロピルエチルアミン（８５μＬ，０．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で１５時間撹拌した。これを減圧濃縮し残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−３０％ ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製し４ｃ（２２５ｍｇ，７２％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ９．９９（ｓ）及び９．８５（ｓ）（１Ｈ），８．３−７．６（ｍ，４Ｈ），７．４−７．２（ｍ，２Ｈ），６．６７（ｓ）及び６．５９（ｓ）（２Ｈ），５．６２（ｓ）及び５．２７（ｓ）（１Ｈ），４．３５（ｓ）及び４．２０（ｓ）（２Ｈ），３．９９及び３．９０（２Ｈ），３．５（ｂｒｓ）及び３．３（ｂｒｓ）（２Ｈ），３．２（ｂｒｓ）及び３．０（ｂｒｓ）（２Ｈ），２．９９（ｓ）及び２．８７（ｓ）（６Ｈ），１．２５（ｂｒｓ，９Ｈ）．
１ｃから４ｃに至るルートは下記の通りであった。
（実施例６）
Ｎ−（４−ヒドロキシアゾベンゼン−２’−カルボニル）グリシン（１ｄ）の合成
ＨＡＢＡ（１．２１ｇ，５ｍｍｏｌ）とｔ−ブチルグリシン塩酸塩（８８０ｍｇ，５．２５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にトリエチルアミン（７３２μＬ，５．２５ｍｍｏｌ）を加えたあと、氷冷下ＤＣＣ（１．１３ｇ，５．５ｍｍｏｌ）を加え３０分、さらに室温で１５時間攪拌した。反応液を濾過し濾液を減圧濃縮して、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−５％ アセトン／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製し、橙色粉末として１ｄのｔ−ブチルエステル誘導体（１．７３ｇ，９７％）を得た。これ（１．０７ｇ，３ｍｍｏｌ）に蟻酸（５０ｍＬ）を加え室温で２日攪拌し、減圧濃縮し蟻酸を除いたあと、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−５％ アセトン／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製し、橙色粉末として１ｄ（０．８９ｇ，９９％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １０．４５（ｂｒｔ，１Ｈ），８．８８（ｂｒｔ，Ｊ＝５Ｈｚ，１Ｈ），７．９１（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），７．８５（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．７０（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．６０（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．５７（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），６．９４（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），４．０５（ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ，２Ｈ）；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １７１．１８，１６６．４４，１６１．５４，１４９．１３，１４５．３４，１３３．２０，１３１．０９，１３０．１８，１２９．６１，１２５．８６，１１６．００，１１５．８８，４１．６０．
（実施例７）
２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニルＮ−（４−ヒドロキシアゾベンゼン−２’−カルボニル）グリシネート（５ｄ）の合成
１ｄ（２９９ｍｇ，１ｍｍｏｌ）とＰｆｐＯＨ（２７６ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にＤＣＣ（３０８ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）を氷冷下加え、この反応液を室温で１５時間撹拌した。反応液を濾過し濾液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−５％ アセトン／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製し橙色粉末として５ｄ（４６ｍｇ，１０％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ９．６７（ｂｒｓ，１Ｈ），９．０２（ｂｒｔ，１Ｈ），７．８−７．７（ｍ，３Ｈ），７．６−７．５（ｍ，２Ｈ），７．２３（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，１Ｈ），６．８６（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），４．６７（ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ，２Ｈ）．
（実施例８）
２−（Ｎ−（２−（（ｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ）エチル）−２−（４−ヒドロキシアゾベンゼン−２’−カルボニルアミノ）アセチルアミノ）酢酸（４ｄ）の合成
５ｄ（３７ｍｇ，８０μｍｏｌ）と６（１８ｍｇ，８０μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（５ｍＬ）にジイソプロピルエチルアミン（１４μＬ，８０μｍｏｌ）を加え、室温で１５時間撹拌した。これを減圧濃縮し残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−３０％ ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製し４ｄ（１３ｍｇ，３３％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ９．７７（ｓ）及び９．５９（ｓ）（１Ｈ），８．２６（ｓ）及び８．１４（ｓ）（２Ｈ），７．９−７．６（ｍ，２Ｈ），７．６−７．３（ｍ，２Ｈ），７．０−６．６（ｍ，２Ｈ），５．３５（ｓ）及び５．０５（ｓ）（１Ｈ），４．４０（ｓ）及び４．２４（ｓ）（２Ｈ），３．９８（ｓ，２Ｈ），３．６−３．３（ｍ，２Ｈ），３．２１（ｓ）及び３．０２（ｓ）（２Ｈ），１．２８（ｓ）及び１．１８（ｓ）（９Ｈ）．
１ｄから４ｄに至るルートは下記の通りであった。
（実施例９）
ＦＡＭ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨの合成
Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（３０．３ｍｇ，０．１０ｍｍｏｌ）のｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ溶液（５ｍＬ）に５，６−ＦＡＭ Ｎ−ｈｙｄｒｏｘｙｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｅ ｅｓｔｅｒ（５０ｍｇ，０．１１ｍｍｏｌ）とｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（２５０μＬ，２．０ｍｍｏｌ）を順番に加え、室温で１５時間撹拌した。反応終了後減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（０−２５％ ＭｅＯＨ／ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ）に付し、黄色粉末としてＦＡＭ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（６９．８ｍｇ，１００％）を得た。ＦＡＢＭＳ ｍ／ｚ ６３４［（Ｍ＋Ｈ）＋］；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ＋）ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ３２Ｈ３２Ｏ１１Ｎ３［（Ｍ＋Ｈ）＋］６３４．１９５９，ｏｂｓｅｒｖｅｄ ６３４．２０３４．
（実施例１０）
ＴＡＭＲＡ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨの合成
Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（５．８ｍｇ，２１μｍｏｌ）のｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ溶液（５ｍＬ）に５，６−ＴＡＭＲＡ Ｎ−ｈｙｄｒｏｘｙｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｅ ｅｓｔｅｒ（５ｍｇ，９．５μｍｏｌ）とｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（２０μＬ，１４０μｍｏｌ）を順番に加え、室温で１５時間撹拌した。反応終了後減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（０−３０％ ＭｅＯＨ／ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ）に付し、赤紫色粉末としてＴＡＭＲＡ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（６ｍｇ，１００％）を得た。ＦＡＢＭＳ ｍ／ｚ ６８８［（Ｍ＋Ｈ）＋］；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ＋）ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ３６Ｈ４２Ｏ９Ｎ５［（Ｍ＋Ｈ）＋］６８８．２９０４，ｏｂｓｅｒｖｅｄ ６８８．２９９３．
（実施例１１）
ＲＯＸ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨの合成
Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（４．９ｍｇ，１８μｍｏｌ）のｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ溶液（５ｍＬ）に５，６−ＲＯＸ Ｎ−ｈｙｄｒｏｘｙｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｅ ｅｓｔｅｒ（５ｍｇ，８μｍｏｌ）とｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（２０μＬ，１４０μｍｏｌ）を順番に加え、室温で１５時間撹拌した。反応終了後減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（０−３０％ ＭｅＯＨ／ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ）に付し、紫色粉末としてＲＯＸ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（６ｍｇ，１００％）を得た。ＦＡＢＭＳ ｍ／ｚ ７９２［（Ｍ＋Ｈ）＋］；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ＋）ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ４４Ｈ５０Ｏ９Ｎ５［（Ｍ＋Ｈ）＋］７９２．３５３０，ｏｂｓｅｒｖｅｄ ７９２．３６１５．
（実施例１２）
２，３，４，５，６−Ｐｅｎｔａｆｌｕｏｒｏｐｈｅｎｙｌ Ｎ−（４−Ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ−２’−ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｇｌｙｃｉｎａｔｅ ｏ−ＭＲ−Ｇｌｙ−ＯＰｆｐの合成
ｏ−ＭＲ−Ｇｌｙ−ＯＨ（３２６ｍｇ，１ｍｍｏｌ）とＰｆｐＯＨ（２７６ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にＤＣＣ（３０８ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）を氷冷下加え、この反応液を室温で１５時間撹拌した。反応液を濾過し濾液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−５％ Ａｃｅｔｏｎｅ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製し橙色粉末としてｏ−ＭＲ−Ｇｌｙ−ＯＰｆｐ（４４９ｍｇ，９１％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １０．１４（ｂｒｔ，１Ｈ），８．３７（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．７８（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），７．７６（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．５７（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．５０（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），６．７４（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），４．６８（ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ，２Ｈ），３．０６（ｓ，６Ｈ）．
（実施例１３）
２−（Ｎ−（２−（（ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｏｘｙ）ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｅｔｈｙｌ）−２−（４−ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ−２’−ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ ｏ−ＭＲ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨの合成
ｏ−ＭＲ−Ｇｌｙ−ＯＰｆｐ（２４６ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ）とＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（１０９ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（５ｍＬ）にｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙｌｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（８５μＬ，０．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で１５時間撹拌した。これを減圧濃縮し残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−３０％ ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製しｏ−ＭＲ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（２２５ｍｇ，７２％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ９．９９（ｓ）ａｎｄ ９．８５（ｓ）（１Ｈ），８．３−７．６（ｍ）（４Ｈ），７．４−７．２（ｍ）（２Ｈ），６．６７（ｓ）ａｎｄ ６．５９（ｓ）（２Ｈ），５．６２（ｓ）ａｎｄ ５．２７（ｓ）（１Ｈ），４．３５（ｓ）ａｎｄ ４．２０（ｓ）（２Ｈ），３．９９ ａｎｄ ３．９０（２Ｈ），３．５（ｂｒｓ）ａｎｄ ３．３（ｂｒｓ）（２Ｈ），３．２（ｂｒｓ）ａｎｄ ３．０（ｂｒｓ）（２Ｈ），２．９９（ｓ）ａｎｄ ２．８７（ｓ）（６Ｈ），１．２５（ｂｒｓ，９Ｈ）．
（実施例１４）
２−（Ｎ−（２−（（ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｏｘｙ）ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｅｔｈｙｌ）−２−（４−ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ−４’−ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ Ｄａｂｃｙｌ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（ｐ−ＭＲ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ）の合成
Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（１００ｍｇ，０．３９ｍｍｏｌ）のｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ溶液（１０ｍＬ）にｄａｂｃｙｌ Ｎ−ｈｙｄｒｏｘｙｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｅ ｅｓｔｅｒ（１４５ｍｇ，０．４０ｍｍｏｌ）とｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（６００μＬ，４．５ｍｍｏｌ）を順番に加え、室温で１５時間撹拌した。反応終了後減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（０−４％ ＭｅＯＨ／ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ）に付し、赤褐色粉末としてＤａｂｃｙｌ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（１８４ｍｇ，９０％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ８．１８（ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，２Ｈ），７．９１（ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，２Ｈ），７．８８（ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，２Ｈ），６．７７（ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，２Ｈ），５．７６（ｓ）ａｎｄ ５．３０（ｓ）（２Ｈ），４．２２（ｂｒｓ）ａｎｄ ４．０５（ｂｒｓ）（２Ｈ），３．７３（ｂｒｓ）ａｎｄ ３．４９（ｂｒｓ）（２Ｈ），３．４７（ｂｒｓ）ａｎｄ ３．２９（ｂｒｓ）（２Ｈ），１．２６（ｓ，９Ｈ）；ＦＡＢＭＳ ｍ／ｚ ５２７［（Ｍ＋Ｈ＋］．
（実施例１５）
Ｎ−（４−Ｈｙｄｒｏｘｙａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ−２’−ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｇｌｙｃｉｎｅ ＨＡＢＡ−Ｇｌｙ−ＯＨの合成
ＨＡＢＡ（１．２１ｇ，５ｍｍｏｌ）とｔ−ブチルグリシン塩酸塩（８８０ｍｇ，５．２５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にトリエチルアミン（７３２μＬ，５．２５ｍｍｏｌ）を加えたあと、氷冷下ＤＣＣ（１．１３ｇ，５．５ｍｍｏｌ）を加え３０分、さらに室温で１５時間攪拌した。反応液を濾過し濾液を減圧濃縮して、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−５％ Ａｃｅｔｏｎｅ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製し、橙色粉末としてＨＡＢＡ−Ｇｌｙ−ＯＨのｔ−ブチルエステル誘導体（１．７３ｇ，９７％）を得た。これ（１．０７ｇ，３ｍｍｏｌ）に蟻酸（５０ｍＬ）を加え室温で２日攪拌し、減圧濃縮し蟻酸を除いたあと、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−５％ Ａｃｅｔｏｎｅ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製し、橙色粉末としてＨＡＢＡ−Ｇｌｙ−ＯＨ（０．８９ｇ，９９％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １０．４５（ｂｒｔ，１Ｈ），８．８８（ｂｒｔ，Ｊ＝５Ｈｚ，１Ｈ），７．９１（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），７．８５（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．７０（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．６０（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．５７（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），６．９４（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），４．０５（ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ，２Ｈ）；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １７１．１８，１６６．４４，１６１．５４，１４９．１３，１４５．３４，１３３．２０，１３１．０９，１３０．１８，１２９．６１，１２５．８６，１１６．００，１１５．８８，４１．６０．
（実施例１６）
２，３，４，５，６−Ｐｅｎｔａｆｌｕｏｒｏｐｈｅｎｙｌ Ｎ−（４−Ｈｙｄｒｏｘｙａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ−２’−ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｇｌｙｃｉｎａｔｅ ＨＡＢＡ−Ｇｌｙ−ＯＰｆｐの合成
ＨＡＢＡ−Ｇｌｙ−ＯＨ（２９９ｍｇ，１ｍｍｏｌ）とＰｆｐＯＨ（２７６ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にＤＣＣ（３０８ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）を氷冷下加え、この反応液を室温で１５時間撹拌した。反応液を濾過し濾液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−５％ Ａｃｅｔｏｎｅ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製し橙色粉末としてＨＡＢＡ−Ｇｌｙ−ＯＰｆｐ（４６ｍｇ，１０％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ９．６７（ｂｒｓ，１Ｈ），９．０２（ｂｒｔ，１Ｈ），７．８−７．７（ｍ，３Ｈ），７．６−７．５（ｍ，２Ｈ），７．２３（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，１Ｈ），６．８６（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），４．６７（ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ，２Ｈ）．
（実施例１７）
２−（Ｎ−（２−（（ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｏｘｙ）ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｅｔｈｙｌ）−２−（４−ｈｙｄｒｏｘｙａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ−２’−ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ ＨＡＢＡ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨの合成
ＨＡＢＡ−Ｇｌｙ−ＯＰｆｐ（３７ｍｇ，８０μｍｏｌ）とＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（１８ｍｇ，８０μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（５ｍＬ）にｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙｌｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（１４ｍＬ，８０μｍｏｌ）を加え、室温で１５時間撹拌した。これを減圧濃縮し残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−３０％ ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製しＨＡＢＡ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（１３ｍｇ，３３％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ９．７７（ｓ）ａｎｄ ９．５９（ｓ）（１Ｈ），８．２６（ｓ）ａｎｄ ８．１４（ｓ）（２Ｈ），７．９−７．６（ｍ，２Ｈ），７．６−７．３（ｍ，２Ｈ），７．０−６．６（ｍ，２Ｈ），５．３５（ｓ）ａｎｄ ５．０５（ｓ）（１Ｈ），４．４０（ｓ）ａｎｄ ４．２４（ｓ）（２Ｈ），３．９８（ｓ，２Ｈ），３．６−３．３（ｍ，２Ｈ），３．２１（ｓ）ａｎｄ ３．０２（ｓ）（２Ｈ），１．２８（ｓ）ａｎｄ １．１８（ｓ）（９Ｈ）．
（実施例１８）
２，３，４，５，６−Ｐｅｎｔａｆｌｕｏｒｏｐｈｅｎｙｌ ２−（５，７，８−ｔｒｉｍｅｔｈｙｌ−１，３−ｄｉｏｘｏ−２，５−ｄｉｈｙｄｒｏ−２，４−ｄｉａｚａｐｈｅｎａｚｉｎ−２−ｙｌ）ａｃｅｔａｔｅ Ｆｌａｖｉｎ−ＯＰｆｐの合成
Ｆｌａｖｉｎ（１００ｍｇ，３１８μｍｏｌ）とＰｆｐＯＨ（７０．２ｍｇ，３８１μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にＥＤＣ（７３．２ｍｇ，３８２μｍｏｌ）を０°Ｃで加え、この反応液を０°Ｃで１時間室温で１２時間撹拌した。この反応液を減圧濃縮し、残渣を水・クロロホルム系で分配抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮したあと、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（２．５％ ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３）により精製しＦｌａｖｉｎ−ＯＰｆｐ（１３０ｍｇ，８５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ８．０７（ｓ，１Ｈ），７．４４（ｓ，１Ｈ），５．２１（ｓ，２Ｈ），４．１４（ｓ，３Ｈ），２．５５（ｓ，３Ｈ），２．４５（ｓ，３Ｈ）；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ＋，ＮＢＡ／ＣＨ２Ｃｌ２）ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２１Ｈ１４Ｏ４Ｎ４Ｆ５［（Ｍ＋Ｈ）＋］４８１．０９３４，ｏｂｓｅｒｖｅｄ ４８１．０９５０；ＵＶ λｍａｘ（ＤＭＦ）３９０，４６０（ｎｍ）．
（実施例１９）
２−（Ｎ−（２−（（ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｏｘｙ）ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｅｔｈｙｌ）−２−（５，７，８−ｔｒｉｍｅｔｈｙｌ−１，３−ｄｉｏｘｏ（２，５−ｄｉｈｙｄｒｏ−２，４−ｄｉ−ａｚａｐｈｅｎａｚｉｎ−２−ｙｌ）ａｃｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ Ｆｌａｖｉｎ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨの合成
Ｆｌａｖｉｎ−ＯＰｆｐ（１００ｍｇ，２０８μｍｏｌ）とＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（４５．４ｍｇ，２０８μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙｌｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（３６．３μＬ，２０８μｍｏｌ）を加え、室温で１５時間撹拌した。これを減圧濃縮し残渣をシリカゲルカラムクロマト法（１０−５０％ ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３）により精製しＦｌａｖｉｎ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（１３０ｍｇ，８５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．９４（ｓ）ａｎｄ ７．８６（ｓ）（１Ｈ），７．８０（ｓ）ａｎｄ ７．７５（ｓ）（１Ｈ），５．０３（ｓ）ａｎｄ ４．８８（ｓ）（２Ｈ），４．１７（ｓ）ａｎｄ ４．１３（ｓ）（３Ｈ），３．６４ ａｎｄ ３．５２（２Ｈ），３．３８ ａｎｄ ３．２６（２Ｈ），２．５８（ｓ）ａｎｄ ２．５６（ｓ）（３Ｈ），２．４６（ｓ）ａｎｄ ２．４４（ｓ）（３Ｈ），１．４６（ｓ）ａｎｄ １．４１（ｓ）（９Ｈ）；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ＋，ＮＢＡ／ＣＨ２Ｃｌ２）ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２４Ｈ３１Ｏ７Ｎ６［（Ｍ＋Ｈ）＋］５１５．２２５２，ｏｂｓｅｒｖｅｄ ５１５．２２７３；ＵＶ λｍａｘ（ＤＭＦ）３９０，４６０（ｎｍ）．
（実施例２０）
２’，３’，４’，５’，６’−Ｐｅｎｔａｆｌｕｏｒｏｐｈｅｎｙｌ １，３−Ｄｉｏｘｏ−１Ｈ−ｂｅｎｚ［ｄｅ］ｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ−２（３Ｈ）−ａｃｅｔａｔｅ ＮＩ−ＯＰｆｐの合成
ＮＩ−ＯＨ（１９２ｍｇ，０．７５ｍｍｏｌ）とＰｆｐＯＨ（１５２ｍｇ，０．８３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（５ｍＬ）にＤＣＣ（１５５ｍｇ，０．７５ｍｍｏｌ）を氷冷下加え、この反応液を室温で１５時間撹拌した。反応液を濾過し濾液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（ＣＨ２Ｃｌ２）により精製し赤色粉末としてＮＩ−ＯＰｆｐ（２７７ｍｇ，８７％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ８．６４（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈ），８．２５（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈ），７．７８（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈ），５．２９（ｓ，２Ｈ）．
（実施例２１）
２−（Ｎ−（２−（（ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｏｘｙ）ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｅｔｈｙｌ）−２−（１，３−ｄｉｏｘｏ−１Ｈ−ｂｅｎｚ［ｄｅ］ｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ−２（３Ｈ））ａｃｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ ＮＩ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨの合成
ＮＩ−ＯＰｆｐ（２１１ｍｇ，０．５０ｍｍｏｌ）とＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（１２０ｍｇ，０．５５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙｌｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（８７μＬ，０．５０ｍｍｏｌ）を加え、室温で１５時間撹拌した。これを減圧濃縮し残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−２０％ ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３）により精製しＮＩ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（１３０ｍｇ，８５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ８．４７（ｍ，４Ｈ），７．８６（ｄｄ，Ｊ＝８．３，７．３Ｈｚ，２Ｈ），４．７３（ｓ，２Ｈ）；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｄ １６７．８４，１６３．５９，１３４．２０，１３１．４４，１３１．３９，１２８．１１，１２６．７８，１２２．００，６１．５９，４１．４４，１４．２９；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ＋，ＮＢＡ／ＣＨ２Ｃｌ２）ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｆｏｒ（Ｃ１６Ｈ１３ＮＯ４）Ｈ＋ ２８４．２９３３，ｏｂｓｅｒｖｅｄ ４５６．１７６７；ＵＶ λｍａｘ（ＤＭＦ）３３３ｎｍ．
（実施例２２）
２’，３’，４’，５’，６’−Ｐｅｎｔａｆｌｕｏｒｏｐｈｅｎｙｌ １，３−Ｄｉｏｘｏ−５−ｎｉｔｒｏ−１Ｈ−ｂｅｎｚ［ｄｅ］ｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ−２（３Ｈ）−ａｃｅｔａｔｅ ＮＩ（ＮＯ２）−ＯＰｆｐの合成
ＮＩ（ＮＯ２）−ＯＨ（１００ｍｇ，３１８μｍｏｌ）とＰｆｐＯＨ（７０．２ｍｇ，３８１μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にＥＤＣ（７３．２ｍｇ，３８２μｍｏｌ）を０°Ｃで加え、この反応液を０°Ｃで１時間室温で１２時間撹拌した。この反応液を減圧濃縮し、残渣を水・クロロホルム系で分配抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮したあと、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（２．５％ ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３）により精製しＮＩ（ＮＯ２）−ＯＰｆｐ（１３０ｍｇ，８５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ８．０７（ｓ，１Ｈ），７．４４（ｓ，１Ｈ），５．２１（ｓ，２Ｈ），４．１４（ｓ，３Ｈ），２．５５（ｓ，３Ｈ），２．４５（ｓ，３Ｈ）；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ＋，ＮＢＡ／ＣＨ２Ｃｌ２）ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２１Ｈ１４Ｏ４Ｎ４Ｆ５［（Ｍ＋Ｈ）＋］４８１．０９３４，ｏｂｓｅｒｖｅｄ ４８１．０９５０；ＵＶ λｍａｘ（ＤＭＦ）３９０，４６０（ｎｍ）．
（実施例２３）
２−（Ｎ−（２−（（ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｏｘｙ）ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｅｔｈｙｌ）−２−（１，３−ｄｉｏｘｏ−５−ｎｉｔｒｏ−１Ｈ−ｂｅｎｚ［ｄｅ］ｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ−２（３Ｈ））ａｃｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ ＮＩ（ＮＯ２）−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨの合成
ＮＩ（ＮＯ２）−ＯＰｆｐ（１００ｍｇ，２０８μｍｏｌ）とＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（４５．４ｍｇ，２０８μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙｌｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（３６．３μＬ，２０８μｍｏｌ）を加え、室温で１５時間撹拌した。これを減圧濃縮し残渣をシリカゲルカラムクロマト法（１０−５０％ ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３）により精製しＮＩ（ＮＯ２）−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（１３０ｍｇ，８５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．９４（ｓ）ａｎｄ ７．８６（ｓ）（１Ｈ），７．８０（ｓ）ａｎｄ ７．７５（ｓ）（１Ｈ），５．０３（ｓ）ａｎｄ ４．８８（ｓ）（２Ｈ），４．１７（ｓ）ａｎｄ ４．１３（ｓ）（３Ｈ），３．６４ ａｎｄ ３．５２（２Ｈ），３．３８ ａｎｄ ３．２６（２Ｈ），２．５８（ｓ）ａｎｄ ２．５６（ｓ）（３Ｈ），２．４６（ｓ）ａｎｄ ２．４４（ｓ）（３Ｈ），１．４６（ｓ）ａｎｄ １．４１（ｓ）（９Ｈ）；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ＋，ＮＢＡ／ＣＨ２Ｃｌ２）ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２４Ｈ３１Ｏ７Ｎ６［（Ｍ＋Ｈ）＋］５１５．２２５２，ｏｂｓｅｒｖｅｄ ５１５．２２７３；ＵＶ λｍａｘ（ＤＭＦ）３９０，４６０（ｎｍ）．
（実施例２４）
５−Ａｃｅｔｙｌａｍｉｎｏ−１，３−ｄｉｏｘｏ−１Ｈ−ｂｅｎｚ［ｄｅ］ｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ−２（３Ｈ）−ａｃｅｔｉｃ Ａｃｉｄ ＮＩ（ＮＨＡｃ）−ＯＨの合成
ＮＩ（ＮＨ２）−ＯＨ（１００ｍｇ，０．３７ｍｍｏｌ）をｐｙｒｉｄｉｎｅ（３ｍＬ）とＡｃ２Ｏ（３ｍＬ）に溶かし、室温で１５時間撹拌した。減圧濃縮したあとｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅで洗い、ろ過・乾燥させＮＩ（ＮＨＡｃ）−ＯＨ（１０３．２ｍｇ，８９％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ８．７９（ｓ，１Ｈ），８．６１（ｓ，１Ｈ），８．４０（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），８．３７（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．８２（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），４．７１（ｓ，２Ｈ），２．１６（ｓ，３Ｈ）．
（実施例２５）
２’，３’，４’，５’，６’−Ｐｅｎｔａｆｌｕｏｒｏｐｈｅｎｙｌ ５−Ａｃｅｔｙｌａｍｉｎｏ−１，３−ｄｉｏｘｏ−１Ｈ−ｂｅｎｚ［ｄｅ］ｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ−２（３Ｈ）−ａｃｅｔａｔｅ ＮＩ（ＮＨＡｃ）−ＯＰｆｐの合成
ＮＩ（ＮＨＡｃ）−ＯＨ（９７ｍｇ，０．３１ｍｍｏｌ）とＰｆｐＯＨ（６３ｍｇ，０．３４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（５ｍＬ）にＤＣＣ（７１ｍｇ，０．３４ｍｍｏｌ）を０°Ｃで加え、この反応液を０°Ｃで１時間室温で１５時間撹拌した。この反応液をろ過後減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−２０％ ａｃｅｔｏｎｅ／ＣＨＣｌ３）により精製しＮＩ（ＮＨＡｃ）−ＯＰｆｐ（１４０ｍｇ，９５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ８．９６（ｓ，１Ｈ），８．５３（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），８．３２（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ），８．２０（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．８２（ｂｒｓ，１Ｈ），７．７４（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），５．２７（ｓ，２Ｈ），２．２８（ｓ，３Ｈ）．
（実施例２６）
２−（Ｎ−（２−（（ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｏｘｙ）ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｅｔｈｙｌ）−２−（５−ａｃｅｔｙｌａｍｉｎｏ−１，３−ｄｉｏｘｏ−１Ｈ−ｂｅｎｚ［ｄｅ］ｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ−２（３Ｈ））ａｃｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ ＮＩ（ＮＨＡｃ）−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨの合成
ＮＩ（ＮＨＡｃ）−ＯＰｆｐ（１４０ｍｇ，０．２９ｍｍｏｌ）とＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（６７ｍｇ，０．３０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（５ｍＬ）にｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙｌｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（５４μＬ，０．３０ｍｍｏｌ）を加え、室温で１５時間撹拌した。これを減圧濃縮し残渣をシリカゲルカラムクロマト法（２−２０％ ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３）により精製しＮＩ（ＮＨＡｃ）−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（１１７ｍｇ，８５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ８．４−７．３（ｍ，５Ｈ），５．０５（ｂｒｓ）ａｎｄ ４．９０（ｂｒｓ）（２Ｈ），３．７６（ｂｒｓ）ａｎｄ ３．５４（ｂｒｓ）（２Ｈ），３．６４（ｓ）ａｎｄ ３．４９（ｓ）（２Ｈ），３．５４（ｂｒｓ）ａｎｄ ３．４１（ｂｒｓ）（２Ｈ），２．１５（ｓ）ａｎｄ ２．０４（ｓ）（３Ｈ），１．４８（ｓ）ａｎｄ １．４５（ｓ）（９Ｈ）
（実施例２７）
Ｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｙｌ Ｎ−４−Ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ−３’−ｃａｒｂｏｎａｔｅ ｍ−ＭＲ−ＯＳｕの合成
ｍ−Ｍｅｔｈｙｌ Ｒｅｄ（ｍ−ＭＲ−ＯＨ；１１０ｍｇ，０．４１ｍｍｏｌ）とＮ−ｈｙｄｒｏｘｙｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｅ（６０ｍｇ，０．５２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（７ｍＬ）にＤＣＣ（１００ｍｇ，０．５０ｍｍｏｌ）を０°Ｃで加え、この反応液を３０分したあと室温で１５時間撹拌した。この反応液をろ過し、減圧蒸留して、残渣をカラムクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２）に付して、橙色粉末としてｍ−ＭＲ−Ｏｓｕ（１２４ｍｇ；８２％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ８．５９（ｓ，１Ｈ），８．１３（ｔ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，２Ｈ），７．９０（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，２Ｈ），７．６１（ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），６．７７（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，２Ｈ），３．１１（ｓ，６Ｈ），２．９３（ｂｒｓ，４Ｈ）．
（実施例２８）
２−（Ｎ−（２−（（ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｏｘｙ）ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｅｔｈｙｌ）−２−（４−ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ−３’−ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ ｍ−ＭＲ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨの合成
Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（５０ｍｇ，０．１８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にｍ−ＭＲ−ＯＳｕ（７３ｍｇ，０．２０ｍｍｏｌ）とｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（３５０μＬ，２．７ｍｍｏｌ）を順番に加え、室温で１５時間撹拌した。反応終了後減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（０−１０％ ＭｅＯＨ／ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ）に付し、橙色粉末としてｍ−ＭＲ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（９５ｍｇ，１００％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ８．２６（ｓ，１Ｈ），７．９２（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），７．８３（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，２Ｈ），７．６２（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），６．８８（ｂｒｔ）ａｎｄ ６．７４（ｂｒｔ）（１Ｈ），６．８５（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，２Ｈ），４．２２（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，２Ｈ），３．９９（ｓ）ａｎｄ ３．８９（ｓ）（２Ｈ），３．４４（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ），３．４−３．２５（ｂｒｓ，４Ｈ），３．０７（ｓ，６Ｈ），１．３９（ｓ）ａｎｄ １．３７（ｓ）（９Ｈ）．
（実施例２９）
２−（Ｎ−（２−（（ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｏｘｙ）ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｅｔｈｙｌ）−Ｎ’−（（１−ｐｙｒｅｎｙｌ−ｎ−ｂｕｔｙｌ）ｇｌｙｃｙｌ））ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ Ｐｙｒｅｎｅ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨの合成
Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（２５ｍｇ，０．０９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（５ｍＬ）にＰｙｒｅｎｅ−ＯＳｕ（３９ｍｇ，０．１０ｍｍｏｌ）とｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（１３８μＬ，１．０ｍｍｏｌ）を順番に加え、室温で１５時間撹拌した。反応終了後減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（０−１０％ ＭｅＯＨ／ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ）に付し、淡黄色粉末としてＰｙｒｅｎｅ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（３０ｍｇ，６１％）を得た。ＨＲＭＳ（ＦＡＢ＋）ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ３１Ｈ３５Ｏ６Ｎ３Ｎａ［（Ｍ＋Ｎａ）＋］５６８．２５２６，ｏｂｓｅｒｖｅｄ ５６８．２４２９．
（実施例３０）
２−（Ｎ−（２−（（ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｏｘｙ）ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｅｔｈｙｌ）−２−（７−ｄｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｏｃｏｕｍａｒｉｎ−３−ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｇｌｙｃｙｌ）ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ Ｃｏｕｍａｒｉｎ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨの合成
Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（１２．７ｍｇ，０．０４６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（５ｍＬ）にｃｏｕｍａｒｉｎ−ＯＳｕ（１５ｍｇ，０．０４２ｍｍｏｌ）とｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（５５．５μＬ，０．４ｍｍｏｌ）を順番に加え、室温で１５時間撹拌した。反応終了後減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（０−２０％ ＭｅＯＨ／ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ）に付し、黄色粉末としてＣｏｕｍａｒｉｎ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（２３ｍｇ，１００％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ８．６８（ｓ）ａｎｄ ８．６６（ｓ）（１Ｈ），７．７０ ａｎｄ ７．６９（ｅａｃｈ ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ）（１Ｈ），６．８９（ｂｒｔ）ａｎｄ ６．７５（ｂｒｔ）（１Ｈ），６．８０（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，１Ｈ），６．６２（ｓ，１Ｈ），４．２５（ｂｒｄ）ａｎｄ ４．０７（ｂｒｄ）（２Ｈ），４．１３（ｍ，１Ｈ），３．９８（ｓ）ａｎｄ ３．８９（ｓ）（２Ｈ），３．４８（ｑ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，４Ｈ），３．３５（ｍ，２Ｈ），３．１３（ｂｒｑ）ａｎｄ ３．０７（ｂｒｑ）（２Ｈ），１．３７（ｓ）ａｎｄ １．３６（ｓ）（９Ｈ），１．１４（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ）．
産業上の利用可能性
本発明による新規な機能性ＰＮＡモノマーは、遺伝子治療などに用いられるＰＮＡの構築に用いることができる。また、本発明によれば、機能性ＰＮＡモノマーの、互いに相補的な２つの合成ルートＢ及びＣによって、機能性分子のＰＮＡへの効率的な導入が可能になる。したがって、本発明は、Ｂｏｃ型モノマーユニットあるいはベンジルオキシカルボニル−ω−アミノ酸誘導体を用いた、機能性ＰＮＡモノマーユニットの工業的合成等の産業において利用することができる。
【図面の簡単な説明】
図１は、ＤＮＡとＰＮＡの構造および荷電の状況の違いを表す図である。
図２は、２種類のＰＮＡモノマーユニットの構造を表す図である。
本発明は、新規な構造を有する機能性ペプチド核酸モノマーおよびその製造方法に関する。
背景技術
核酸は生物の遺伝情報を司るＤＮＡおよびＲＮＡである。これに対して、ペプチド核酸（ＰＮＡ）とは、核酸の糖リン酸骨格をＮ−（２−アミノエチル）グリシン骨格に変換した修飾核酸である（図１）。ＤＮＡ／ＲＮＡの糖リン酸骨格は中性条件で負電荷を帯びていて相補鎖間の静電的な反発があるが、ＰＮＡの背骨構造はもともと電荷を持たないので静電的な反発がない。そのためＰＮＡは従来の核酸と比較して、高い二重鎖形成能をもち、高い塩基配列認識能を持つ。さらにＰＮＡは生体内ヌクレアーゼ・プロテアーゼに対し非常に安定で分解されないので、アンチセンス分子として遺伝子治療に応用することが検討されている。
従来のＤＮＡを媒体にしていた技術をＰＮＡ化することにより、これまで克服できなかったＤＮＡの欠点を補うことが可能となった。例えば、遺伝情報の体系的な解析を高速に且つ大量に行うための「ＤＮＡマイクロアレイ技術」および塩基配列を特異的に認識したことを蛍光発光により検出できるプローブとして最近開発された「モレキュラービーコン」に応用することが可能である。これらはいずれも酵素耐性に乏しいＤＮＡを媒体とするため、これらの技術を用いるに際しては厳密なサンプリングが要求される。この要求を満たすことが、前記の技術を高度化する上での鍵となっている。
一方ＰＮＡは酵素に対し完全な耐性を持つので、ＤＮＡマイクロアレイ技術およびモレキュラービーコンにおいてＰＮＡをＤＮＡに代用することによって、前記技術の欠点が克服され、さらに長所が引き出されるものと期待されている。
ＤＮＡマイクロアレイ技術およびモレキュラービーコン以外にもＰＮＡ化することにより発展が期待される分野は数多いが、それらにおいてはＰＮＡの効率的な機能化、すなわちＰＮＡモノマーへの機能性分子の効率的な導入による新規なＰＮＡモノマーの設計が必要である。
ＰＮＡオリゴマーの合成方法には通常の固相ペプチド合成法を用いるので、ＰＮＡモノマーユニットをＰＮＡの背骨構造によって分類すると、Ｆｍｏｃ型ＰＮＡモノマーユニットとｔＢｏｃ型ＰＮＡモノマーユニットの２種類が含まれる（図２）。
Ｆｍｏｃ型ＰＮＡモノマーユニットの合成方法は既に確立されており、しかもそのオリゴマーの合成は一般的なＤＮＡ自動合成機によって可能であるため、下記のルート
当初ＰＮＡには下記のようなｔＢｏｃ型ＰＮＡモノマーユニット
しかし、グアニン・チミン・シトシン・アデニン４種類の核酸塩基以外の機能性分子を導入する際、例えば光機能性分子を導入する際には、導入する機能性分子がアルカリ条件に不安定な場合が多いので、アルカリ条件を使用しないｔＢｏｃ型ＰＮＡ背骨構造の有用性は高い。「ｔ−ブトキシカルボニルアミノエチルアミン及びアミノ酸誘導体の製造方法」に関しては、本発明者らが特願２０００−２６８６３８として既に特許出願中である。
これ以外にも、光機能性オリゴＰＮＡのモノマーユニットの合成例は過去に５例が知られている。これら全てが上記ルートを用いているが、その収率については記載がないか、または極めて低いものでしかない（Ｐｅｔｅｒ Ｅ．Ｎｉｅｌｓｅｎ，Ｇｅｒａｌｄ Ｈａａｉｍａｎ，Ａｎｎｅ Ｂ．Ｅｌｄｒｕｐ ＰＣＴ Ｉｎｔ．Ａｐｐｌ．（１９９８）ＷＯ ９８５２９５ Ａ１ １９９８１１２６，Ｔ．Ａ．Ｔｒａｎ，Ｒ．−Ｈ．Ｍａｔｔｅｒｎ，Ｂ．Ａ．Ｍｏｒｇａｎ（１９９９）Ｊ．Ｐｅｐｔ．Ｒｅｓ，５３，１３４−１４５，Ｊｅｓｐｅｒ Ｌｏｈｓｅ ｅｔ ａｌ．（１９９７）Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ．，８，５０３−５０９，Ｈａｎｓ−ｇｅｏｒｇ Ｂａｔｚ，Ｈｅｎｒｉｋ Ｆｒｙｄｅｎｌｕｎｄ Ｈａｎｓｅｎ，ｅｔ ａｌ．Ｐｃｔ Ｉｎｔ．Ａｐｐｌ．（１９９８）ＷＯ ９８３７２３２ Ａ２ １９９８０８２７，Ｂｒｕｃｅ Ａｒｍｉｔａｇｅ，Ｔｒｏｅｌｓ Ｋｏｃｈ，ｅｔ ａｌ．（１９９８）Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄ Ｒｅｓ．，２６，７１５−７２０，Ｈａｎｓ−ｇｅｏｒｇ Ｂａｔｚ，Ｈｅｎｒｉｋ Ｆｒｙｄｅｎｌｕｎｄ Ｈａｎｓｅｎ，ｅｔ ａｌ．）。また、用いられる化合物の構造がアルカリ性条件に比較的安定であることが特徴的であるため、アルカリ性条件に不安定な発色団が付くと、前記従来法と類似の方法、すなわち下記ルートＡ
そのため、例えば光機能性ＰＮＡモノマーのような機能性ＰＮＡモノマーの開発とともに、ＰＮＡモノマーを効率的に機能化する技術の確立が強く望まれている。
発明の開示
したがって、本発明は、上記の問題を解消した新規な機能性ＰＮＡモノマーおよびその効率的な合成方法の提供を目的とする。
本発明者らは上記課題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、下記ルートＢ
さらに本発明者らは、下記ルートＣ
上記ルートＢおよびＣにより、本発明者らは、上記課題を解決することを見出し本発明を完成するに至った。
すなわち本発明は、下記一般式（Ｉ）
また、本発明は、ｔ−ブトキシカルボニルアミノエチルアミンを機能性分子の誘導体と反応させ、機能性分子をＰＮＡモノマーに導入することよりなる機能性ＰＮＡモノマーの製造方法であって、該機能性分子の誘導体が活性エステルであることを特徴とする、前記製造方法に関する。
さらに、本発明は、活性エステルが、下記一般式（ＩＩ）
で表される基を、エステル結合を形成するカルボニル炭素に有することを特徴とする、前記製造方法に関する。
また、本発明は、活性エステルが、ペンタフルオロフェノキシ基またはスクシンイミドオキシ基をカルボニル炭素に有することを特徴とする、前記製造方法に関する。
さらに、本発明は、活性エステルを製造する方法であって、機能性分子のカルボン酸誘導体と、ペンタフルオロフェノキシ基またはスクシンイミドオキシ基を有する化合物との反応を含むことを特徴とする、前記方法に関する。
また、本発明は、機能性分子のカルボン酸誘導体を製造する方法であって、機能性分子の誘導体と脂肪族カルボン酸との反応を含むことを特徴とする、前記方法に関する。
またさらに、本発明は、機能性分子から該機能性分子の誘導体を製造し、該機能性分子の誘導体から機能性分子のカルボン酸誘導体を製造し、該機能性分子のカルボン酸誘導体から活性エステルを製造し、該活性エステルから機能性ＰＮＡモノマーを製造することを含む、機能性分子から機能性ＰＮＡモノマーを製造する方法において、下記ａ）〜ｃ）：
ａ）前記機能性分子のカルボン酸誘導体の製造において、機能性分子の誘導体と脂肪族カルボン酸とを反応させること；
ｂ）前記活性エステルの製造において、機能性分子のカルボン酸誘導体とペンタフルオロフェノキシ基またはスクシンイミドオキシ基を有する化合物とを反応させること；および、
ｃ）前記機能性ＰＮＡモノマーの製造において、ｔ−ブトキシカルボニルアミノエチルアミンを、活性エステルである機能性分子の誘導体と反応させること；
の１または２以上を含むことを特徴とする、前記方法に関する。
さらにまた、本発明は、下記一般式（ＩＩＩ）
で表されるω−アミノ酸誘導体を機能性分子の誘導体と反応させ、機能性分子をＰＮＡモノマーに導入することよりなる機能性ＰＮＡモノマーの製造方法であって、該機能性分子の誘導体が活性エステルであることを特徴とする、前記製造方法に関する。
そして、本発明は、活性エステルが、下記一般式（ＩＩ）
で表される基を、直接または脂肪鎖あるいはペプチド鎖を介して、エステル結合を形成するカルボニル基に有することを特徴とする、前記製造方法に関する。
そしてまた、本発明は、活性エステルが、ペンタフルオロフェノキシ基またはスクシンイミドオキシ基をカルボニル炭素に有することを特徴とする、前記製造方法に関する。
そしてさらに本発明は、機能性分子から活性エステルを製造し、該活性エステルから機能性ＰＮＡモノマーを製造すること含む、機能性分子から機能性ＰＮＡモノマーを製造する方法において、前記機能性分子からの活性エステルの製造が、ｍ−メチルレッドとスクシンイミドオキシ基を含む化合物とを反応させること、および／または前記活性エステルから機能性ＰＮＡモノマーの製造が、一般式（ＩＩＩ）で表されるベンジルオキシカルボニル−ω−アミノ酸誘導体を、活性エステルである機能性分子の誘導体と反応させ、機能性分子をＰＮＡモノマーに導入すること、を含むこと特徴とする、前記方法に関する。
ここで、本発明による方法と従来の方法とを比較することによって本発明の特徴を詳細に説明する。
ｔＢｏｃ型ＰＮＡモノマーユニット４の合成は通常下記のルートＡが用いられる。
また、ルートＣに用いる、下記一般式（ＩＩＩ）
で表されるベンジルオキシカルボニル−ω−アミノ酸誘導体には予めリンカー（カルボキシルアミノ酸）が結合しているため、当該誘導体は汎用性に富んでおり、活性エステル体を当該誘導体と反応させることによって、１工程で目的とする機能性ＰＮＡモノマーユニットが得られる。しかも、ベンジルオキシカルボニル−ω−アミノ酸誘導体も、多くの市販品を用いることができる。したがって、当該ルートＣは、比較的高価な光機能性分子を対象とする場合に特に有効である。
一方、スルホン酸クロリド系および立体障害が大きいメチルレッド等の光機能性分子のＰＮＡモノマー化は、ルートＢによってより好適に行われる。
したがって、本発明のルートＢおよびルートＣによる合成法を適宜選択することによって、多種多様な機能性ＰＮＡモノマーを合成することができる。
本発明によれば、例えば、Ｎａｐｈｔｈａｌｉｍｉｄｅ型、Ｆｌａｖｉｎ型、Ｄａｂｃｙｌ型、Ｂｉｏｔｉｎ型、ＦＡＭ型、Ｒｈｏｄａｍｉｎｅ型、ＴＡＭＲＡ型、ＲＯＸ型、ＨＡＢＡ型、Ｐｙｒｅｎｅ型、Ｃｏｕｍａｒｉｎ型のような光機能性モノマーユニットが得られる。また、これら以外の光機能性モノマーユニットおよび光機能性モノマーユニット以外の機能性モノマーユニットを得ることも可能である。
発明を実施するための形態
光機能性モノマーユニットの合成に関しては、例えば化合物４ａの合成、
また、化合物４ｂの合成
カルボン酸誘導体である１ａおよび１ｂの製造には、脂肪族カルボン酸、好ましくは直鎖の脂肪族カルボン酸を用いる。
また、ＰＮＡのアミノ基末端に導入するモノマーの製造には、スクシンイミド基を有する活性エステルが好適に用いられる。
なお、ルートＣに用いる一般式（ＩＩＩ）のω−アミノ酸誘導体として、そのアミノ酸部分におけるカルボニル炭素上の炭素鎖の長さが炭素数１〜１１のものが用いられるが、一般にＰＮＡはＤＮＡとのハイブリッドを期待しているので、立体的にＤＮＡに類似している誘導化が望ましい。この点を考慮すると、カルボキシルアミノ酸をリンカーとして利用する場合、アミノ酸部分がＺ−グリシンであるものが最適である。
光機能性オリゴＰＮＡの合成方法としては、Ｆｍｏｃ法とｔＢｏｃ法が用いられる。Ｆｍｏｃ法はアルカリ性試薬による脱保護過程を含んでおり、光機能性オリゴＰＮＡの設計には不適切である。一方、ｔＢｏｃ法はその合成過程にアルカリ条件を使用しないので光機能性オリゴＰＮＡの合成方法として適している。したがって、本発明によるＰＮＡモノマーをｔＢｏｃ法に適用すれば、光機能性オリゴＰＮＡの合成が効率的に行えるようになる。
実施例
以下に実施例を用いて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明の範囲はこれに限られるものではない。
（実施例１）
２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニル２−（５，７，８−トリメチル−１，３−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−２，４−ジアザフェナジン−２−イル）アセテート（５ａ）の合成
４ａ（１００ｍｇ，３１８μｍｏｌ）とＰｆｐＯＨ（７０．２ｍｇ，３８１μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にＥＤＣ（７３．２ｍｇ，３８２μｍｏｌ）を０°Ｃで加え、この反応液を０°Ｃで１時間室温で１２時間撹拌した。この反応液を減圧濃縮し、残渣を水・クロロホルム系で分配抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮したあと、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（２．５％ ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３）により精製し５ａ（１３０ｍｇ，８５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ８．０７（ｓ，１Ｈ），７．４４（ｓ，１Ｈ），５．２１（ｓ，２Ｈ），４．１４（ｓ，３Ｈ），２．５５（ｓ，３Ｈ），２．４５（ｓ，３Ｈ）；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ＋，ＮＢＡ／ＣＨ２Ｃｌ２）Ｃ２１Ｈ１４Ｏ４Ｎ４Ｆ５［（Ｍ＋Ｈ）＋］の計算値は４８１．０９３４，実測値は４８１．０９５０；ＵＶ λｍａｘ（ＤＭＦ）３９０，４６０（ｎｍ）．
（実施例２）
２−（Ｎ−（２−（（ｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ）エチル））−２−（５，７，８−トリメチル−１，３−ジオキソ（２，５−ジヒドロ−２，４−ジアザフェナジン−２−イル）アセチルアミノ）酢酸（４ａ）の合成
５ａ（１００ｍｇ，２０８μｍｏｌ）と６ａ（４５．４ｍｇ，２０８μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にジイソプロピルエチルアミン（３６．３μＬ，２０８μｍｏｌ）を加え、室温で１５時間撹拌した。これを減圧濃縮し残渣をシリカゲルカラムクロマト法（１０−５０％ ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３）により精製し４ａ（１３０ｍｇ，８５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．９４（ｓ）及び７．８６（ｓ）（１Ｈ），７．８０（ｓ）及び７．７５（ｓ）（１Ｈ），５．０３（ｓ）及び４．８８（ｓ）（２Ｈ），４．１７（ｓ）及び４．１３（ｓ）（３Ｈ），３．６４及び３．５２（２Ｈ），３．３８及び３．２６（２Ｈ），２．５８（ｓ）及び２．５６（ｓ）（３Ｈ），２．４６（ｓ）及び２．４４（ｓ）（３Ｈ），１．４６（ｓ）及び１．４１（ｓ）（９Ｈ）；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ＋，ＮＢＡ／ＣＨ２Ｃｌ２）Ｃ２４Ｈ３１Ｏ７Ｎ６［（Ｍ＋Ｈ）＋］の計算値は５１５．２２５２，実測値は５１５．２２７３；ＵＶ λｍａｘ（ＤＭＦ）３９０，４６０（ｎｍ）．
（実施例３）
Ｎ−（４−ジメチルアミノアゾベンゼン−２’−カルボニル）グリシン（１ｃ）の合成
メチルレッド（１．３５ｇ，５ｍｍｏｌ）とｔ−ブチルグリシン塩酸塩（８８０ｍｇ，５．２５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にトリエチルアミン（７３２μＬ，５．２５ｍｍｏｌ）を加えたあと、氷冷下ＤＣＣ（１．１３ｇ，５．５ｍｍｏｌ）を加え３０分、さらに室温で１５時間攪拌した。反応液を濾過し濾液を減圧濃縮して、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−１０％ アセトン／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製し、橙色針状晶として１ｃのｔ−ブチルエステル誘導体（１．０５ｇ，５５％）を得た。これ（７６５ｍｇ，２ｍｍｏｌ）に蟻酸（５０ｍＬ）を加え室温で２日攪拌し、減圧濃縮し蟻酸を除いたあと、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−５％ Ａｃｅｔｏｎｅ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製し、赤色針状晶として１ｃ（５４９ｍｇ，８４％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ９．９９（ｂｒｔ，１Ｈ），８．４０（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．８９（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），７．８４（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．５６（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．４９（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），６．７５（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），４．４２（ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ，２Ｈ），３．１０（ｓ，６Ｈ）；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｄ １６７．６１，１５３．３９，１５０．８６，１４３．３０，１３２．４９，１３１．４７，１２９．３８，１２７．６９，１２６．２８，１１６．２４，１１１．６３，４３．２０，４０．２４．
（実施例４）
２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニルＮ−（４−ジメチルアミノアゾベンゼン−２’−カルボニル）グリシネート（５ｃ）の合成
１ｃ（３２６ｍｇ，１ｍｍｏｌ）とＰｆｐＯＨ（２７６ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にＤＣＣ（３０８ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）を氷冷下加え、この反応液を室温で１５時間撹拌した。反応液を濾過し濾液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−５％ アセトン／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製し橙色粉末として５ｃ（４４９ｍｇ，９１％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １０．１４（ｂｒｔ，１Ｈ），８．３７（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．７８（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），７．７６（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．５７（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．５０（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），６．７４（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），４．６８（ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ，２Ｈ），３．０６（ｓ，６Ｈ）．
（実施例５）
２−（Ｎ−（２−（（ｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ）エチル）−２−（４−ジメチルアミノアゾベンゼン−２’−カルボニルアミノ）アセチルアミノ）酢酸（４ｃ）の合成
５ｃ（２４６ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ）と６（１０９ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（５ｍＬ）にジイソプロピルエチルアミン（８５μＬ，０．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で１５時間撹拌した。これを減圧濃縮し残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−３０％ ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製し４ｃ（２２５ｍｇ，７２％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ９．９９（ｓ）及び９．８５（ｓ）（１Ｈ），８．３−７．６（ｍ，４Ｈ），７．４−７．２（ｍ，２Ｈ），６．６７（ｓ）及び６．５９（ｓ）（２Ｈ），５．６２（ｓ）及び５．２７（ｓ）（１Ｈ），４．３５（ｓ）及び４．２０（ｓ）（２Ｈ），３．９９及び３．９０（２Ｈ），３．５（ｂｒｓ）及び３．３（ｂｒｓ）（２Ｈ），３．２（ｂｒｓ）及び３．０（ｂｒｓ）（２Ｈ），２．９９（ｓ）及び２．８７（ｓ）（６Ｈ），１．２５（ｂｒｓ，９Ｈ）．
１ｃから４ｃに至るルートは下記の通りであった。
Ｎ−（４−ヒドロキシアゾベンゼン−２’−カルボニル）グリシン（１ｄ）の合成
ＨＡＢＡ（１．２１ｇ，５ｍｍｏｌ）とｔ−ブチルグリシン塩酸塩（８８０ｍｇ，５．２５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にトリエチルアミン（７３２μＬ，５．２５ｍｍｏｌ）を加えたあと、氷冷下ＤＣＣ（１．１３ｇ，５．５ｍｍｏｌ）を加え３０分、さらに室温で１５時間攪拌した。反応液を濾過し濾液を減圧濃縮して、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−５％ アセトン／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製し、橙色粉末として１ｄのｔ−ブチルエステル誘導体（１．７３ｇ，９７％）を得た。これ（１．０７ｇ，３ｍｍｏｌ）に蟻酸（５０ｍＬ）を加え室温で２日攪拌し、減圧濃縮し蟻酸を除いたあと、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−５％ アセトン／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製し、橙色粉末として１ｄ（０．８９ｇ，９９％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １０．４５（ｂｒｔ，１Ｈ），８．８８（ｂｒｔ，Ｊ＝５Ｈｚ，１Ｈ），７．９１（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），７．８５（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．７０（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．６０（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．５７（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），６．９４（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），４．０５（ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ，２Ｈ）；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １７１．１８，１６６．４４，１６１．５４，１４９．１３，１４５．３４，１３３．２０，１３１．０９，１３０．１８，１２９．６１，１２５．８６，１１６．００，１１５．８８，４１．６０．
（実施例７）
２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニルＮ−（４−ヒドロキシアゾベンゼン−２’−カルボニル）グリシネート（５ｄ）の合成
１ｄ（２９９ｍｇ，１ｍｍｏｌ）とＰｆｐＯＨ（２７６ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にＤＣＣ（３０８ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）を氷冷下加え、この反応液を室温で１５時間撹拌した。反応液を濾過し濾液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−５％ アセトン／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製し橙色粉末として５ｄ（４６ｍｇ，１０％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ９．６７（ｂｒｓ，１Ｈ），９．０２（ｂｒｔ，１Ｈ），７．８−７．７（ｍ，３Ｈ），７．６−７．５（ｍ，２Ｈ），７．２３（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，１Ｈ），６．８６（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），４．６７（ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ，２Ｈ）．
（実施例８）
２−（Ｎ−（２−（（ｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ）エチル）−２−（４−ヒドロキシアゾベンゼン−２’−カルボニルアミノ）アセチルアミノ）酢酸（４ｄ）の合成
５ｄ（３７ｍｇ，８０μｍｏｌ）と６（１８ｍｇ，８０μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（５ｍＬ）にジイソプロピルエチルアミン（１４μＬ，８０μｍｏｌ）を加え、室温で１５時間撹拌した。これを減圧濃縮し残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−３０％ ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製し４ｄ（１３ｍｇ，３３％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ９．７７（ｓ）及び９．５９（ｓ）（１Ｈ），８．２６（ｓ）及び８．１４（ｓ）（２Ｈ），７．９−７．６（ｍ，２Ｈ），７．６−７．３（ｍ，２Ｈ），７．０−６．６（ｍ，２Ｈ），５．３５（ｓ）及び５．０５（ｓ）（１Ｈ），４．４０（ｓ）及び４．２４（ｓ）（２Ｈ），３．９８（ｓ，２Ｈ），３．６−３．３（ｍ，２Ｈ），３．２１（ｓ）及び３．０２（ｓ）（２Ｈ），１．２８（ｓ）及び１．１８（ｓ）（９Ｈ）．
１ｄから４ｄに至るルートは下記の通りであった。
ＦＡＭ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨの合成
Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（３０．３ｍｇ，０．１０ｍｍｏｌ）のｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ溶液（５ｍＬ）に５，６−ＦＡＭ Ｎ−ｈｙｄｒｏｘｙｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｅ ｅｓｔｅｒ（５０ｍｇ，０．１１ｍｍｏｌ）とｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（２５０μＬ，２．０ｍｍｏｌ）を順番に加え、室温で１５時間撹拌した。反応終了後減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（０−２５％ ＭｅＯＨ／ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ）に付し、黄色粉末としてＦＡＭ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（６９．８ｍｇ，１００％）を得た。ＦＡＢＭＳ ｍ／ｚ ６３４［（Ｍ＋Ｈ）＋］；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ＋）ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ３２Ｈ３２Ｏ１１Ｎ３［（Ｍ＋Ｈ）＋］６３４．１９５９，ｏｂｓｅｒｖｅｄ ６３４．２０３４．
（実施例１０）
ＴＡＭＲＡ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨの合成
Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（５．８ｍｇ，２１μｍｏｌ）のｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ溶液（５ｍＬ）に５，６−ＴＡＭＲＡ Ｎ−ｈｙｄｒｏｘｙｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｅ ｅｓｔｅｒ（５ｍｇ，９．５μｍｏｌ）とｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（２０μＬ，１４０μｍｏｌ）を順番に加え、室温で１５時間撹拌した。反応終了後減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（０−３０％ ＭｅＯＨ／ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ）に付し、赤紫色粉末としてＴＡＭＲＡ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（６ｍｇ，１００％）を得た。ＦＡＢＭＳ ｍ／ｚ ６８８［（Ｍ＋Ｈ）＋］；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ＋）ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ３６Ｈ４２Ｏ９Ｎ５［（Ｍ＋Ｈ）＋］６８８．２９０４，ｏｂｓｅｒｖｅｄ ６８８．２９９３．
（実施例１１）
ＲＯＸ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨの合成
Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（４．９ｍｇ，１８μｍｏｌ）のｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ溶液（５ｍＬ）に５，６−ＲＯＸ Ｎ−ｈｙｄｒｏｘｙｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｅ ｅｓｔｅｒ（５ｍｇ，８μｍｏｌ）とｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（２０μＬ，１４０μｍｏｌ）を順番に加え、室温で１５時間撹拌した。反応終了後減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（０−３０％ ＭｅＯＨ／ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ）に付し、紫色粉末としてＲＯＸ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（６ｍｇ，１００％）を得た。ＦＡＢＭＳ ｍ／ｚ ７９２［（Ｍ＋Ｈ）＋］；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ＋）ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ４４Ｈ５０Ｏ９Ｎ５［（Ｍ＋Ｈ）＋］７９２．３５３０，ｏｂｓｅｒｖｅｄ ７９２．３６１５．
（実施例１２）
２，３，４，５，６−Ｐｅｎｔａｆｌｕｏｒｏｐｈｅｎｙｌ Ｎ−（４−Ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ−２’−ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｇｌｙｃｉｎａｔｅ ｏ−ＭＲ−Ｇｌｙ−ＯＰｆｐの合成
ｏ−ＭＲ−Ｇｌｙ−ＯＨ（３２６ｍｇ，１ｍｍｏｌ）とＰｆｐＯＨ（２７６ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にＤＣＣ（３０８ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）を氷冷下加え、この反応液を室温で１５時間撹拌した。反応液を濾過し濾液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−５％ Ａｃｅｔｏｎｅ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製し橙色粉末としてｏ−ＭＲ−Ｇｌｙ−ＯＰｆｐ（４４９ｍｇ，９１％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １０．１４（ｂｒｔ，１Ｈ），８．３７（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．７８（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），７．７６（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．５７（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．５０（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），６．７４（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），４．６８（ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ，２Ｈ），３．０６（ｓ，６Ｈ）．
（実施例１３）
２−（Ｎ−（２−（（ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｏｘｙ）ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｅｔｈｙｌ）−２−（４−ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ−２’−ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ ｏ−ＭＲ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨの合成
ｏ−ＭＲ−Ｇｌｙ−ＯＰｆｐ（２４６ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ）とＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（１０９ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（５ｍＬ）にｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙｌｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（８５μＬ，０．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で１５時間撹拌した。これを減圧濃縮し残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−３０％ ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製しｏ−ＭＲ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（２２５ｍｇ，７２％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ９．９９（ｓ）ａｎｄ ９．８５（ｓ）（１Ｈ），８．３−７．６（ｍ）（４Ｈ），７．４−７．２（ｍ）（２Ｈ），６．６７（ｓ）ａｎｄ ６．５９（ｓ）（２Ｈ），５．６２（ｓ）ａｎｄ ５．２７（ｓ）（１Ｈ），４．３５（ｓ）ａｎｄ ４．２０（ｓ）（２Ｈ），３．９９ ａｎｄ ３．９０（２Ｈ），３．５（ｂｒｓ）ａｎｄ ３．３（ｂｒｓ）（２Ｈ），３．２（ｂｒｓ）ａｎｄ ３．０（ｂｒｓ）（２Ｈ），２．９９（ｓ）ａｎｄ ２．８７（ｓ）（６Ｈ），１．２５（ｂｒｓ，９Ｈ）．
（実施例１４）
２−（Ｎ−（２−（（ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｏｘｙ）ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｅｔｈｙｌ）−２−（４−ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ−４’−ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ Ｄａｂｃｙｌ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（ｐ−ＭＲ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ）の合成
Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（１００ｍｇ，０．３９ｍｍｏｌ）のｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ溶液（１０ｍＬ）にｄａｂｃｙｌ Ｎ−ｈｙｄｒｏｘｙｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｅ ｅｓｔｅｒ（１４５ｍｇ，０．４０ｍｍｏｌ）とｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（６００μＬ，４．５ｍｍｏｌ）を順番に加え、室温で１５時間撹拌した。反応終了後減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（０−４％ ＭｅＯＨ／ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ）に付し、赤褐色粉末としてＤａｂｃｙｌ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（１８４ｍｇ，９０％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ８．１８（ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，２Ｈ），７．９１（ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，２Ｈ），７．８８（ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，２Ｈ），６．７７（ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，２Ｈ），５．７６（ｓ）ａｎｄ ５．３０（ｓ）（２Ｈ），４．２２（ｂｒｓ）ａｎｄ ４．０５（ｂｒｓ）（２Ｈ），３．７３（ｂｒｓ）ａｎｄ ３．４９（ｂｒｓ）（２Ｈ），３．４７（ｂｒｓ）ａｎｄ ３．２９（ｂｒｓ）（２Ｈ），１．２６（ｓ，９Ｈ）；ＦＡＢＭＳ ｍ／ｚ ５２７［（Ｍ＋Ｈ＋］．
（実施例１５）
Ｎ−（４−Ｈｙｄｒｏｘｙａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ−２’−ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｇｌｙｃｉｎｅ ＨＡＢＡ−Ｇｌｙ−ＯＨの合成
ＨＡＢＡ（１．２１ｇ，５ｍｍｏｌ）とｔ−ブチルグリシン塩酸塩（８８０ｍｇ，５．２５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にトリエチルアミン（７３２μＬ，５．２５ｍｍｏｌ）を加えたあと、氷冷下ＤＣＣ（１．１３ｇ，５．５ｍｍｏｌ）を加え３０分、さらに室温で１５時間攪拌した。反応液を濾過し濾液を減圧濃縮して、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−５％ Ａｃｅｔｏｎｅ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製し、橙色粉末としてＨＡＢＡ−Ｇｌｙ−ＯＨのｔ−ブチルエステル誘導体（１．７３ｇ，９７％）を得た。これ（１．０７ｇ，３ｍｍｏｌ）に蟻酸（５０ｍＬ）を加え室温で２日攪拌し、減圧濃縮し蟻酸を除いたあと、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−５％ Ａｃｅｔｏｎｅ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製し、橙色粉末としてＨＡＢＡ−Ｇｌｙ−ＯＨ（０．８９ｇ，９９％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １０．４５（ｂｒｔ，１Ｈ），８．８８（ｂｒｔ，Ｊ＝５Ｈｚ，１Ｈ），７．９１（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），７．８５（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．７０（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．６０（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．５７（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），６．９４（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），４．０５（ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ，２Ｈ）；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １７１．１８，１６６．４４，１６１．５４，１４９．１３，１４５．３４，１３３．２０，１３１．０９，１３０．１８，１２９．６１，１２５．８６，１１６．００，１１５．８８，４１．６０．
（実施例１６）
２，３，４，５，６−Ｐｅｎｔａｆｌｕｏｒｏｐｈｅｎｙｌ Ｎ−（４−Ｈｙｄｒｏｘｙａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ−２’−ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｇｌｙｃｉｎａｔｅ ＨＡＢＡ−Ｇｌｙ−ＯＰｆｐの合成
ＨＡＢＡ−Ｇｌｙ−ＯＨ（２９９ｍｇ，１ｍｍｏｌ）とＰｆｐＯＨ（２７６ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にＤＣＣ（３０８ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）を氷冷下加え、この反応液を室温で１５時間撹拌した。反応液を濾過し濾液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−５％ Ａｃｅｔｏｎｅ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製し橙色粉末としてＨＡＢＡ−Ｇｌｙ−ＯＰｆｐ（４６ｍｇ，１０％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ９．６７（ｂｒｓ，１Ｈ），９．０２（ｂｒｔ，１Ｈ），７．８−７．７（ｍ，３Ｈ），７．６−７．５（ｍ，２Ｈ），７．２３（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，１Ｈ），６．８６（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），４．６７（ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ，２Ｈ）．
（実施例１７）
２−（Ｎ−（２−（（ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｏｘｙ）ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｅｔｈｙｌ）−２−（４−ｈｙｄｒｏｘｙａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ−２’−ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ ＨＡＢＡ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨの合成
ＨＡＢＡ−Ｇｌｙ−ＯＰｆｐ（３７ｍｇ，８０μｍｏｌ）とＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（１８ｍｇ，８０μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（５ｍＬ）にｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙｌｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（１４ｍＬ，８０μｍｏｌ）を加え、室温で１５時間撹拌した。これを減圧濃縮し残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−３０％ ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製しＨＡＢＡ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（１３ｍｇ，３３％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ９．７７（ｓ）ａｎｄ ９．５９（ｓ）（１Ｈ），８．２６（ｓ）ａｎｄ ８．１４（ｓ）（２Ｈ），７．９−７．６（ｍ，２Ｈ），７．６−７．３（ｍ，２Ｈ），７．０−６．６（ｍ，２Ｈ），５．３５（ｓ）ａｎｄ ５．０５（ｓ）（１Ｈ），４．４０（ｓ）ａｎｄ ４．２４（ｓ）（２Ｈ），３．９８（ｓ，２Ｈ），３．６−３．３（ｍ，２Ｈ），３．２１（ｓ）ａｎｄ ３．０２（ｓ）（２Ｈ），１．２８（ｓ）ａｎｄ １．１８（ｓ）（９Ｈ）．
（実施例１８）
２，３，４，５，６−Ｐｅｎｔａｆｌｕｏｒｏｐｈｅｎｙｌ ２−（５，７，８−ｔｒｉｍｅｔｈｙｌ−１，３−ｄｉｏｘｏ−２，５−ｄｉｈｙｄｒｏ−２，４−ｄｉａｚａｐｈｅｎａｚｉｎ−２−ｙｌ）ａｃｅｔａｔｅ Ｆｌａｖｉｎ−ＯＰｆｐの合成
Ｆｌａｖｉｎ（１００ｍｇ，３１８μｍｏｌ）とＰｆｐＯＨ（７０．２ｍｇ，３８１μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にＥＤＣ（７３．２ｍｇ，３８２μｍｏｌ）を０°Ｃで加え、この反応液を０°Ｃで１時間室温で１２時間撹拌した。この反応液を減圧濃縮し、残渣を水・クロロホルム系で分配抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮したあと、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（２．５％ ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３）により精製しＦｌａｖｉｎ−ＯＰｆｐ（１３０ｍｇ，８５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ８．０７（ｓ，１Ｈ），７．４４（ｓ，１Ｈ），５．２１（ｓ，２Ｈ），４．１４（ｓ，３Ｈ），２．５５（ｓ，３Ｈ），２．４５（ｓ，３Ｈ）；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ＋，ＮＢＡ／ＣＨ２Ｃｌ２）ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２１Ｈ１４Ｏ４Ｎ４Ｆ５［（Ｍ＋Ｈ）＋］４８１．０９３４，ｏｂｓｅｒｖｅｄ ４８１．０９５０；ＵＶ λｍａｘ（ＤＭＦ）３９０，４６０（ｎｍ）．
（実施例１９）
２−（Ｎ−（２−（（ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｏｘｙ）ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｅｔｈｙｌ）−２−（５，７，８−ｔｒｉｍｅｔｈｙｌ−１，３−ｄｉｏｘｏ（２，５−ｄｉｈｙｄｒｏ−２，４−ｄｉ−ａｚａｐｈｅｎａｚｉｎ−２−ｙｌ）ａｃｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ Ｆｌａｖｉｎ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨの合成
Ｆｌａｖｉｎ−ＯＰｆｐ（１００ｍｇ，２０８μｍｏｌ）とＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（４５．４ｍｇ，２０８μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙｌｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（３６．３μＬ，２０８μｍｏｌ）を加え、室温で１５時間撹拌した。これを減圧濃縮し残渣をシリカゲルカラムクロマト法（１０−５０％ ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３）により精製しＦｌａｖｉｎ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（１３０ｍｇ，８５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．９４（ｓ）ａｎｄ ７．８６（ｓ）（１Ｈ），７．８０（ｓ）ａｎｄ ７．７５（ｓ）（１Ｈ），５．０３（ｓ）ａｎｄ ４．８８（ｓ）（２Ｈ），４．１７（ｓ）ａｎｄ ４．１３（ｓ）（３Ｈ），３．６４ ａｎｄ ３．５２（２Ｈ），３．３８ ａｎｄ ３．２６（２Ｈ），２．５８（ｓ）ａｎｄ ２．５６（ｓ）（３Ｈ），２．４６（ｓ）ａｎｄ ２．４４（ｓ）（３Ｈ），１．４６（ｓ）ａｎｄ １．４１（ｓ）（９Ｈ）；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ＋，ＮＢＡ／ＣＨ２Ｃｌ２）ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２４Ｈ３１Ｏ７Ｎ６［（Ｍ＋Ｈ）＋］５１５．２２５２，ｏｂｓｅｒｖｅｄ ５１５．２２７３；ＵＶ λｍａｘ（ＤＭＦ）３９０，４６０（ｎｍ）．
（実施例２０）
２’，３’，４’，５’，６’−Ｐｅｎｔａｆｌｕｏｒｏｐｈｅｎｙｌ １，３−Ｄｉｏｘｏ−１Ｈ−ｂｅｎｚ［ｄｅ］ｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ−２（３Ｈ）−ａｃｅｔａｔｅ ＮＩ−ＯＰｆｐの合成
ＮＩ−ＯＨ（１９２ｍｇ，０．７５ｍｍｏｌ）とＰｆｐＯＨ（１５２ｍｇ，０．８３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（５ｍＬ）にＤＣＣ（１５５ｍｇ，０．７５ｍｍｏｌ）を氷冷下加え、この反応液を室温で１５時間撹拌した。反応液を濾過し濾液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（ＣＨ２Ｃｌ２）により精製し赤色粉末としてＮＩ−ＯＰｆｐ（２７７ｍｇ，８７％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ８．６４（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈ），８．２５（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈ），７．７８（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈ），５．２９（ｓ，２Ｈ）．
（実施例２１）
２−（Ｎ−（２−（（ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｏｘｙ）ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｅｔｈｙｌ）−２−（１，３−ｄｉｏｘｏ−１Ｈ−ｂｅｎｚ［ｄｅ］ｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ−２（３Ｈ））ａｃｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ ＮＩ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨの合成
ＮＩ−ＯＰｆｐ（２１１ｍｇ，０．５０ｍｍｏｌ）とＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（１２０ｍｇ，０．５５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙｌｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（８７μＬ，０．５０ｍｍｏｌ）を加え、室温で１５時間撹拌した。これを減圧濃縮し残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−２０％ ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３）により精製しＮＩ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（１３０ｍｇ，８５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ８．４７（ｍ，４Ｈ），７．８６（ｄｄ，Ｊ＝８．３，７．３Ｈｚ，２Ｈ），４．７３（ｓ，２Ｈ）；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｄ １６７．８４，１６３．５９，１３４．２０，１３１．４４，１３１．３９，１２８．１１，１２６．７８，１２２．００，６１．５９，４１．４４，１４．２９；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ＋，ＮＢＡ／ＣＨ２Ｃｌ２）ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｆｏｒ（Ｃ１６Ｈ１３ＮＯ４）Ｈ＋ ２８４．２９３３，ｏｂｓｅｒｖｅｄ ４５６．１７６７；ＵＶ λｍａｘ（ＤＭＦ）３３３ｎｍ．
（実施例２２）
２’，３’，４’，５’，６’−Ｐｅｎｔａｆｌｕｏｒｏｐｈｅｎｙｌ １，３−Ｄｉｏｘｏ−５−ｎｉｔｒｏ−１Ｈ−ｂｅｎｚ［ｄｅ］ｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ−２（３Ｈ）−ａｃｅｔａｔｅ ＮＩ（ＮＯ２）−ＯＰｆｐの合成
ＮＩ（ＮＯ２）−ＯＨ（１００ｍｇ，３１８μｍｏｌ）とＰｆｐＯＨ（７０．２ｍｇ，３８１μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にＥＤＣ（７３．２ｍｇ，３８２μｍｏｌ）を０°Ｃで加え、この反応液を０°Ｃで１時間室温で１２時間撹拌した。この反応液を減圧濃縮し、残渣を水・クロロホルム系で分配抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮したあと、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（２．５％ ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３）により精製しＮＩ（ＮＯ２）−ＯＰｆｐ（１３０ｍｇ，８５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ８．０７（ｓ，１Ｈ），７．４４（ｓ，１Ｈ），５．２１（ｓ，２Ｈ），４．１４（ｓ，３Ｈ），２．５５（ｓ，３Ｈ），２．４５（ｓ，３Ｈ）；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ＋，ＮＢＡ／ＣＨ２Ｃｌ２）ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２１Ｈ１４Ｏ４Ｎ４Ｆ５［（Ｍ＋Ｈ）＋］４８１．０９３４，ｏｂｓｅｒｖｅｄ ４８１．０９５０；ＵＶ λｍａｘ（ＤＭＦ）３９０，４６０（ｎｍ）．
（実施例２３）
２−（Ｎ−（２−（（ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｏｘｙ）ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｅｔｈｙｌ）−２−（１，３−ｄｉｏｘｏ−５−ｎｉｔｒｏ−１Ｈ−ｂｅｎｚ［ｄｅ］ｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ−２（３Ｈ））ａｃｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ ＮＩ（ＮＯ２）−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨの合成
ＮＩ（ＮＯ２）−ＯＰｆｐ（１００ｍｇ，２０８μｍｏｌ）とＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（４５．４ｍｇ，２０８μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙｌｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（３６．３μＬ，２０８μｍｏｌ）を加え、室温で１５時間撹拌した。これを減圧濃縮し残渣をシリカゲルカラムクロマト法（１０−５０％ ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３）により精製しＮＩ（ＮＯ２）−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（１３０ｍｇ，８５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．９４（ｓ）ａｎｄ ７．８６（ｓ）（１Ｈ），７．８０（ｓ）ａｎｄ ７．７５（ｓ）（１Ｈ），５．０３（ｓ）ａｎｄ ４．８８（ｓ）（２Ｈ），４．１７（ｓ）ａｎｄ ４．１３（ｓ）（３Ｈ），３．６４ ａｎｄ ３．５２（２Ｈ），３．３８ ａｎｄ ３．２６（２Ｈ），２．５８（ｓ）ａｎｄ ２．５６（ｓ）（３Ｈ），２．４６（ｓ）ａｎｄ ２．４４（ｓ）（３Ｈ），１．４６（ｓ）ａｎｄ １．４１（ｓ）（９Ｈ）；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ＋，ＮＢＡ／ＣＨ２Ｃｌ２）ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２４Ｈ３１Ｏ７Ｎ６［（Ｍ＋Ｈ）＋］５１５．２２５２，ｏｂｓｅｒｖｅｄ ５１５．２２７３；ＵＶ λｍａｘ（ＤＭＦ）３９０，４６０（ｎｍ）．
（実施例２４）
５−Ａｃｅｔｙｌａｍｉｎｏ−１，３−ｄｉｏｘｏ−１Ｈ−ｂｅｎｚ［ｄｅ］ｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ−２（３Ｈ）−ａｃｅｔｉｃ Ａｃｉｄ ＮＩ（ＮＨＡｃ）−ＯＨの合成
ＮＩ（ＮＨ２）−ＯＨ（１００ｍｇ，０．３７ｍｍｏｌ）をｐｙｒｉｄｉｎｅ（３ｍＬ）とＡｃ２Ｏ（３ｍＬ）に溶かし、室温で１５時間撹拌した。減圧濃縮したあとｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅで洗い、ろ過・乾燥させＮＩ（ＮＨＡｃ）−ＯＨ（１０３．２ｍｇ，８９％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ８．７９（ｓ，１Ｈ），８．６１（ｓ，１Ｈ），８．４０（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），８．３７（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．８２（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），４．７１（ｓ，２Ｈ），２．１６（ｓ，３Ｈ）．
（実施例２５）
２’，３’，４’，５’，６’−Ｐｅｎｔａｆｌｕｏｒｏｐｈｅｎｙｌ ５−Ａｃｅｔｙｌａｍｉｎｏ−１，３−ｄｉｏｘｏ−１Ｈ−ｂｅｎｚ［ｄｅ］ｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ−２（３Ｈ）−ａｃｅｔａｔｅ ＮＩ（ＮＨＡｃ）−ＯＰｆｐの合成
ＮＩ（ＮＨＡｃ）−ＯＨ（９７ｍｇ，０．３１ｍｍｏｌ）とＰｆｐＯＨ（６３ｍｇ，０．３４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（５ｍＬ）にＤＣＣ（７１ｍｇ，０．３４ｍｍｏｌ）を０°Ｃで加え、この反応液を０°Ｃで１時間室温で１５時間撹拌した。この反応液をろ過後減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−２０％ ａｃｅｔｏｎｅ／ＣＨＣｌ３）により精製しＮＩ（ＮＨＡｃ）−ＯＰｆｐ（１４０ｍｇ，９５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ８．９６（ｓ，１Ｈ），８．５３（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），８．３２（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ），８．２０（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．８２（ｂｒｓ，１Ｈ），７．７４（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），５．２７（ｓ，２Ｈ），２．２８（ｓ，３Ｈ）．
（実施例２６）
２−（Ｎ−（２−（（ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｏｘｙ）ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｅｔｈｙｌ）−２−（５−ａｃｅｔｙｌａｍｉｎｏ−１，３−ｄｉｏｘｏ−１Ｈ−ｂｅｎｚ［ｄｅ］ｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ−２（３Ｈ））ａｃｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ ＮＩ（ＮＨＡｃ）−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨの合成
ＮＩ（ＮＨＡｃ）−ＯＰｆｐ（１４０ｍｇ，０．２９ｍｍｏｌ）とＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（６７ｍｇ，０．３０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（５ｍＬ）にｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙｌｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（５４μＬ，０．３０ｍｍｏｌ）を加え、室温で１５時間撹拌した。これを減圧濃縮し残渣をシリカゲルカラムクロマト法（２−２０％ ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３）により精製しＮＩ（ＮＨＡｃ）−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（１１７ｍｇ，８５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ８．４−７．３（ｍ，５Ｈ），５．０５（ｂｒｓ）ａｎｄ ４．９０（ｂｒｓ）（２Ｈ），３．７６（ｂｒｓ）ａｎｄ ３．５４（ｂｒｓ）（２Ｈ），３．６４（ｓ）ａｎｄ ３．４９（ｓ）（２Ｈ），３．５４（ｂｒｓ）ａｎｄ ３．４１（ｂｒｓ）（２Ｈ），２．１５（ｓ）ａｎｄ ２．０４（ｓ）（３Ｈ），１．４８（ｓ）ａｎｄ １．４５（ｓ）（９Ｈ）
（実施例２７）
Ｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｙｌ Ｎ−４−Ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ−３’−ｃａｒｂｏｎａｔｅ ｍ−ＭＲ−ＯＳｕの合成
ｍ−Ｍｅｔｈｙｌ Ｒｅｄ（ｍ−ＭＲ−ＯＨ；１１０ｍｇ，０．４１ｍｍｏｌ）とＮ−ｈｙｄｒｏｘｙｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｅ（６０ｍｇ，０．５２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（７ｍＬ）にＤＣＣ（１００ｍｇ，０．５０ｍｍｏｌ）を０°Ｃで加え、この反応液を３０分したあと室温で１５時間撹拌した。この反応液をろ過し、減圧蒸留して、残渣をカラムクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２）に付して、橙色粉末としてｍ−ＭＲ−Ｏｓｕ（１２４ｍｇ；８２％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ８．５９（ｓ，１Ｈ），８．１３（ｔ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，２Ｈ），７．９０（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，２Ｈ），７．６１（ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），６．７７（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，２Ｈ），３．１１（ｓ，６Ｈ），２．９３（ｂｒｓ，４Ｈ）．
（実施例２８）
２−（Ｎ−（２−（（ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｏｘｙ）ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｅｔｈｙｌ）−２−（４−ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ−３’−ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ ｍ−ＭＲ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨの合成
Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（５０ｍｇ，０．１８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にｍ−ＭＲ−ＯＳｕ（７３ｍｇ，０．２０ｍｍｏｌ）とｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（３５０μＬ，２．７ｍｍｏｌ）を順番に加え、室温で１５時間撹拌した。反応終了後減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（０−１０％ ＭｅＯＨ／ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ）に付し、橙色粉末としてｍ−ＭＲ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（９５ｍｇ，１００％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ８．２６（ｓ，１Ｈ），７．９２（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），７．８３（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，２Ｈ），７．６２（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），６．８８（ｂｒｔ）ａｎｄ ６．７４（ｂｒｔ）（１Ｈ），６．８５（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，２Ｈ），４．２２（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，２Ｈ），３．９９（ｓ）ａｎｄ ３．８９（ｓ）（２Ｈ），３．４４（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ），３．４−３．２５（ｂｒｓ，４Ｈ），３．０７（ｓ，６Ｈ），１．３９（ｓ）ａｎｄ １．３７（ｓ）（９Ｈ）．
（実施例２９）
２−（Ｎ−（２−（（ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｏｘｙ）ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｅｔｈｙｌ）−Ｎ’−（（１−ｐｙｒｅｎｙｌ−ｎ−ｂｕｔｙｌ）ｇｌｙｃｙｌ））ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ Ｐｙｒｅｎｅ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨの合成
Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（２５ｍｇ，０．０９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（５ｍＬ）にＰｙｒｅｎｅ−ＯＳｕ（３９ｍｇ，０．１０ｍｍｏｌ）とｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（１３８μＬ，１．０ｍｍｏｌ）を順番に加え、室温で１５時間撹拌した。反応終了後減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（０−１０％ ＭｅＯＨ／ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ）に付し、淡黄色粉末としてＰｙｒｅｎｅ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（３０ｍｇ，６１％）を得た。ＨＲＭＳ（ＦＡＢ＋）ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ３１Ｈ３５Ｏ６Ｎ３Ｎａ［（Ｍ＋Ｎａ）＋］５６８．２５２６，ｏｂｓｅｒｖｅｄ ５６８．２４２９．
（実施例３０）
２−（Ｎ−（２−（（ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｏｘｙ）ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｅｔｈｙｌ）−２−（７−ｄｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｏｃｏｕｍａｒｉｎ−３−ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｇｌｙｃｙｌ）ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ Ｃｏｕｍａｒｉｎ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨの合成
Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（１２．７ｍｇ，０．０４６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（５ｍＬ）にｃｏｕｍａｒｉｎ−ＯＳｕ（１５ｍｇ，０．０４２ｍｍｏｌ）とｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（５５．５μＬ，０．４ｍｍｏｌ）を順番に加え、室温で１５時間撹拌した。反応終了後減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（０−２０％ ＭｅＯＨ／ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ）に付し、黄色粉末としてＣｏｕｍａｒｉｎ−Ｇｌｙ−ＢｏｃＰＮＡ−ＯＨ（２３ｍｇ，１００％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ８．６８（ｓ）ａｎｄ ８．６６（ｓ）（１Ｈ），７．７０ ａｎｄ ７．６９（ｅａｃｈ ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ）（１Ｈ），６．８９（ｂｒｔ）ａｎｄ ６．７５（ｂｒｔ）（１Ｈ），６．８０（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，１Ｈ），６．６２（ｓ，１Ｈ），４．２５（ｂｒｄ）ａｎｄ ４．０７（ｂｒｄ）（２Ｈ），４．１３（ｍ，１Ｈ），３．９８（ｓ）ａｎｄ ３．８９（ｓ）（２Ｈ），３．４８（ｑ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，４Ｈ），３．３５（ｍ，２Ｈ），３．１３（ｂｒｑ）ａｎｄ ３．０７（ｂｒｑ）（２Ｈ），１．３７（ｓ）ａｎｄ １．３６（ｓ）（９Ｈ），１．１４（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ）．
産業上の利用可能性
本発明による新規な機能性ＰＮＡモノマーは、遺伝子治療などに用いられるＰＮＡの構築に用いることができる。また、本発明によれば、機能性ＰＮＡモノマーの、互いに相補的な２つの合成ルートＢ及びＣによって、機能性分子のＰＮＡへの効率的な導入が可能になる。したがって、本発明は、Ｂｏｃ型モノマーユニットあるいはベンジルオキシカルボニル−ω−アミノ酸誘導体を用いた、機能性ＰＮＡモノマーユニットの工業的合成等の産業において利用することができる。
【図面の簡単な説明】
図１は、ＤＮＡとＰＮＡの構造および荷電の状況の違いを表す図である。
図２は、２種類のＰＮＡモノマーユニットの構造を表す図である。
Claims (11)
- 下記一般式（Ｉ）
（式中、Ａは
であり、Ｂは
であり、ＲはＨ、ＮＯ２、ＮＨ２、ＮＨＣｂｚ、Ｂｒ、Ｆ、ＣｌまたはＳＯ３Ｎａ２であり、ｎは１〜４の整数である。ただし、Ａが
である場合、Ｂは
である）で表される化合物。 - ｔ−ブトキシカルボニルアミノエチルアミンを機能性分子の誘導体と反応させ、機能性分子をＰＮＡモノマーに導入することよりなる機能性ＰＮＡモノマーの製造方法であって、該機能性分子の誘導体が活性エステルであることを特徴とする、前記製造方法。
- 活性エステルが、下記一般式（ＩＩ）
（式中、Ａは
であり、ＲはＨ、ＮＯ２、ＮＨ２、ＮＨＣｂｚ、Ｂｒ、Ｆ、ＣｌまたはＳＯ３Ｎａ２であり、ｎは１〜４の整数である）
で表される基を、エステル結合を形成するカルボニル炭素に有することを特徴とする、請求項２に記載の製造方法。 - 活性エステルが、ペンタフルオロフェノキシ基またはスクシンイミドオキシ基をカルボニル炭素に有することを特徴とする、請求項２または３に記載の製造方法。
- 請求項３に記載の活性エステルを製造する方法であって、機能性分子のカルボン酸誘導体と、ペンタフルオロフェノキシ基またはスクシンイミドオキシ基を有する化合物との反応を含むことを特徴とする、前記方法。
- 請求項５に記載の機能性分子のカルボン酸誘導体を製造する方法であって、機能性分子の誘導体と脂肪族カルボン酸との反応を含むことを特徴とする、前記方法。
- 機能性分子から該機能性分子の誘導体を製造し、該機能性分子の誘導体から機能性分子のカルボン酸誘導体を製造し、該機能性分子のカルボン酸誘導体から活性エステルを製造し、該活性エステルから機能性ＰＮＡモノマーを製造することを含む、機能性分子から機能性ＰＮＡモノマーを製造する方法において、下記ａ）〜ｃ）：
ａ）前記機能性分子のカルボン酸誘導体の製造において、機能性分子の誘導体と脂肪族カルボン酸とを反応させること；
ｂ）前記活性エステルの製造において、機能性分子のカルボン酸誘導体とペンタフルオロフェノキシ基またはスクシンイミドオキシ基を有する化合物とを反応させること；および、
ｃ）前記機能性ＰＮＡモノマーの製造において、ｔ−ブトキシカルボニルアミノエチルアミンを、活性エステルである機能性分子の誘導体と反応させること；
の１または２以上を含むことを特徴とする、前記方法。 - 一般式（ＩＩＩ）
（式中、Ｒ１は水素原子または炭素数１〜５の直鎖若しくは分枝鎖状のアルキル基、ｍは１〜１１の整数を表す）
で表されるω−アミノ酸誘導体を機能性分子の誘導体と反応させ、機能性分子をＰＮＡモノマーに導入することよりなる機能性ＰＮＡモノマーの製造方法であって、該機能性分子の誘導体が活性エステルであることを特徴とする、前記製造方法。 - 活性エステルが、下記一般式（ＩＩ）
（式中、Ａは
であり、ＲはＨ、ＮＯ２、ＮＨ２、ＮＨＣｂｚ、Ｂｒ、Ｆ、ＣｌまたはＳＯ３Ｎａ２であり、ｎは１〜４の整数である）
で表される基を、直接または脂肪鎖あるいはペプチド鎖を介して、エステル結合を形成するカルボニル基に有することを特徴とする、請求項８に記載の製造方法。 - 活性エステルが、ペンタフルオロフェノキシ基またはスクシンイミドオキシ基をカルボニル炭素に有することを特徴とする、請求項８または９に記載の製造方法。
- 機能性分子から活性エステルを製造し、該活性エステルから機能性ＰＮＡモノマーを製造すること含む、機能性分子から機能性ＰＮＡモノマーを製造する方法において、前記機能性分子からの活性エステルの製造が、ｍ−メチルレッドとスクシンイミドオキシ基を含む化合物とを反応させること、および／または前記活性エステルから機能性ＰＮＡモノマーの製造が、一般式（ＩＩＩ）
（式中、Ｒ１は水素原子または炭素数１〜５の直鎖若しくは分枝鎖状のアルキル基、ｍは１〜１１の整数を表す）
で表されるω−アミノ酸誘導体を、活性エステルである機能性分子の誘導体と反応させ、機能性分子をＰＮＡモノマーに導入すること、を含むこと特徴とする、前記方法。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2000394669 | 2000-12-26 | ||
| JP2000394669 | 2000-12-26 | ||
| PCT/JP2001/008120 WO2002051797A1 (fr) | 2000-12-26 | 2001-09-19 | Nouveau monomere d'acide nucleique peptidique fonctionnel et procede de production correspondant |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPWO2002051797A1 true JPWO2002051797A1 (ja) | 2004-09-02 |
Family
ID=18860261
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2002552895A Pending JPWO2002051797A1 (ja) | 2000-12-26 | 2001-09-19 | 新規な機能性ペプチド核酸モノマーとその製法 |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US7282575B2 (ja) |
| EP (1) | EP1357112A4 (ja) |
| JP (1) | JPWO2002051797A1 (ja) |
| WO (1) | WO2002051797A1 (ja) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP3765573B2 (ja) * | 2000-09-05 | 2006-04-12 | 株式会社クレディアジャパン | ＰＮＡモノマーユニット合成のためのｔ−ブトキシカルボニルアミノエチルアミン、アミノ酸誘導体およびその中間体並びにそれらの製造方法 |
| JP3837633B2 (ja) * | 2002-11-19 | 2006-10-25 | 株式会社クレディアジャパン | 新規な機能性ペプチド核酸およびその製法 |
| US9879222B2 (en) | 2007-12-14 | 2018-01-30 | Mofa Group Llc | Gender-specific separation of sperm cells and embryos |
| WO2011032034A2 (en) | 2009-09-10 | 2011-03-17 | University Of Idaho | Nucleobase-functionalized conformationally restricted nucleotides and oligonucleotides for targeting nucleic acids |
| AR088140A1 (es) * | 2011-07-19 | 2014-05-14 | Univ Idaho | Sonda y metodo para direccionar acidos nucleicos |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5714331A (en) | 1991-05-24 | 1998-02-03 | Buchardt, Deceased; Ole | Peptide nucleic acids having enhanced binding affinity, sequence specificity and solubility |
| US5766855A (en) | 1991-05-24 | 1998-06-16 | Buchardt, Deceased; Ole | Peptide nucleic acids having enhanced binding affinity and sequence specificity |
| US5719262A (en) | 1993-11-22 | 1998-02-17 | Buchardt, Deceased; Ole | Peptide nucleic acids having amino acid side chains |
| DK51092D0 (da) * | 1991-05-24 | 1992-04-15 | Ole Buchardt | Oligonucleotid-analoge betegnet pna, monomere synthoner og fremgangsmaade til fremstilling deraf samt anvendelser deraf |
| ATE279534T1 (de) * | 1997-02-24 | 2004-10-15 | Georgia Tech Res Inst | Verfahren zur bestimmung einer nukleinsäure |
| US6117973A (en) | 1997-02-24 | 2000-09-12 | Georgia Tech Research Corp. | PNA monomers with electron donor or acceptor |
| US6617422B1 (en) * | 1997-05-23 | 2003-09-09 | Peter Nielsen | Peptide nucleic acid monomers and oligomers |
| JP3765573B2 (ja) * | 2000-09-05 | 2006-04-12 | 株式会社クレディアジャパン | ＰＮＡモノマーユニット合成のためのｔ−ブトキシカルボニルアミノエチルアミン、アミノ酸誘導体およびその中間体並びにそれらの製造方法 |
| US6809190B2 (en) * | 2002-04-24 | 2004-10-26 | Credia Japan Co., Ltd. | Functional peptide nucleic acid and its production method |
-
2001
- 2001-09-19 US US10/250,592 patent/US7282575B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2001-09-19 JP JP2002552895A patent/JPWO2002051797A1/ja active Pending
- 2001-09-19 EP EP01970133A patent/EP1357112A4/en not_active Withdrawn
- 2001-09-19 WO PCT/JP2001/008120 patent/WO2002051797A1/ja active Application Filing
-
2007
- 2007-09-07 US US11/851,602 patent/US20080138817A1/en not_active Abandoned
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US20080138817A1 (en) | 2008-06-12 |
| US20040101839A1 (en) | 2004-05-27 |
| US7282575B2 (en) | 2007-10-16 |
| WO2002051797A1 (fr) | 2002-07-04 |
| EP1357112A4 (en) | 2005-08-17 |
| EP1357112A1 (en) | 2003-10-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP2597698B2 (ja) | オリゴヌクレオチド‐ポリアミド コンジュゲート | |
| JP2003527579A (ja) | ヌクレオチド類似体を有する非凝集性、非消光性オリゴマー及びその合成と使用方法 | |
| JPS638396A (ja) | ポリ標識化オリゴヌクレオチド誘導体 | |
| JP2000511205A (ja) | キラルなペプチド核酸とその製造方法 | |
| JP2001509784A (ja) | 非ヌクレオチド連結試薬 | |
| JP4012145B2 (ja) | ピロール−イミダゾールポリアミドの固相合成法 | |
| US5854409A (en) | Pro-thiol aryl azide labelling of nucleic acids | |
| JP5195757B2 (ja) | 核酸合成用ダイマーアミダイド及び核酸合成方法 | |
| US20080138817A1 (en) | Novel Functional Peptide Nucleic Acid Monomer and Process for Producing the Same | |
| AU2005225589A1 (en) | Labelling reagents, methods for the synthesis of such reagents and methods for the detection of biological molecules | |
| US6013434A (en) | Oligonucleotide-polyamide conjugates | |
| US6809190B2 (en) | Functional peptide nucleic acid and its production method | |
| US6388061B1 (en) | Monomeric building blocks for labeling peptide nucleic acids | |
| WO1993024511A1 (en) | Oligonucleotide-polyamide conjugates | |
| JP4000453B2 (ja) | 新規な機能性ペプチド核酸およびその製法 | |
| US7329515B2 (en) | Solid support for the synthesis of 3′-amino oligonucleotides | |
| Ikeda et al. | Efficient functional molecule incorporation method to functionalized peptide nucleic acid (PNA): use in synthesis of labeled PNA oligomers | |
| EP0863150A1 (en) | A method for the preparation of nucleic acid binding compound | |
| JP3837633B2 (ja) | 新規な機能性ペプチド核酸およびその製法 | |
| EP0644890B1 (en) | Oligonucleotide-polyamide conjugates | |
| JP2007275071A (ja) | 新規な機能性ペプチド核酸およびその製法 | |
| US20040249152A1 (en) | Method for the production of cna | |
| JP2006158400A (ja) | Ｐｎａオリゴマー誘導体化合物 | |
| EP1085020A1 (en) | Synthesis of modified diaminopurines and their incorporation into oligomers | |
| JPH10231290A (ja) | 核酸結合化合物の調製方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20040428 |
|
| A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711 Effective date: 20050307 |
|
| A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20050307 |
|
| RD02 | Notification of acceptance of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7422 Effective date: 20050307 |
|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20050414 |
|
| RD03 | Notification of appointment of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7423 Effective date: 20060201 |
|
| RD05 | Notification of revocation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7425 Effective date: 20060201 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20080423 |
|
| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20080813 |