JPS6399091A - Ｏ−α−グリコシドおよびその製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はヒトのＴ−抗原決尼子合成のためのＯ−α−グ
リコシドおよびその製法に関する。

５０年以上前にトムゼン（Ｔｈｏｍｓｏｎ　）注１）は
ヒトの赤血球細胞を試験管内でトランスフォーメーショ
ンさせて通常のＡＢＯ適合血清によって凝集するように
できることｆ：観察した。フリーデンライヒ（Ｆｒ１ｅ
ｄｅｎｒｅｉｃｈ　）２）は広範な研究の後トムセ゛ン
の吻′Ｘが、天然の抗原決定子を分解していわゆるＴレ
セプタ、すなわちヒト血清中に一般に産生ずる凝集素に
よって結合される構造体を遊離するｍ菌酵索である、と
結論し７ｔｏ現在ではこのトランスフォーメーションに
関係する酵素がフイラミニダーゼでるシ、これが特定の
シアログリコプロテイン３）からＮ−アセチル−α−Ｄ
−ノイラミニン酸残基（α−１９６６年この決定子の構
造がキム（Ｋｉｍ）およびウーレンデルック（Ｕｈｌｅ
ｎｂｒｕｃｋ）　’）によって糖蛋白質中でトレオニン
またはセリン残基とグリコシド結合したジサツカリドβ
ＤＧａｌ　（ｉ−＋３）＆ＤＧａｌｌＪＡｃであること
が示された。現在ではＴ−決定子が広範囲の糖蛋白質５
＃６）中に産生ずることが知られている。

この構造体が腫瘍を伴う抗原中に産生ずると研究者によ
ってＴ−抗原を動物およびヒト由来７〜１０）の腫瘍細
胞上に示すことができること；Ｔ−抗原に対する８時型
および遅延型過敏症反応ｔ−特定の形状のガン　　を有
する患者で示すことができること、かつ血清抗−Ｔ濃度
の変化が若干のガン１１〜１２）に関して診断学的に重
要であることが示された。

とれらの観察の全てが、明らかに重要な潜在的および顕
在的両方の臨床的関係を有している。しかし臨床的適用
の発展における１つの大きな困難は、本発明以前にはキ
ー成分のＴ−抗原が天然源から主として酵素処理された
ヒト赤血球膜１３）の困難な抽出によって入手し得たに
すぎないことであった。この方法は比較的少量の物質し
か得られず、この物質はその由来から精製および特性を
決定するのが本来困難である。

その上、たとえばＴ−抗原物質をヒトに注射する遅延型
過敏症テストのような適用については、ヒトの血液生成
物に由来する、かかる物質は肝炎を伝搬する危険を有す
るという付加的欠点がある。

■−抗原決定子の末端ジサツカリドを含有する化合物０
−β−〇−ガラクトピラノシル−（１→３）−０−（２
−７セトアミドー２−デオキシ−α−Ｄ−ガラクトピラ
ノシル）−Ｎ−トシル−Ｌ−セリンの合成が報告されて
いる１４）。

化合物を抗原形成支持分子に結合し得たかどうか、およ
び更に形成されたとして得られる結合体が人工で一抗原
として機能したかどうかを明らかにするのは容易ではな
い。実際にはアグリコン部分に存在する非天然性の、高
度に抗原性のＮ−）シル基がこの化合物からの抗原を免
疫化学的に天然のＴ−抗原とは似ていないものにすると
予想され友。

米国特許第４１３７４０１号明細１１（レミュー（Ｌｅ
ｍｉｅｕｘ　）　、バンドル（Ｂｕｎｄｌｅ　）および
ペーカ−（Ｅａｋｅｒ　））にはアルドース部分に０−
β−グリコシド結合した側鎖が記載されている。この側
鎖は構造式：　Ｏ−Ｒ−ＣＯＲ“　（ここでＲはＣ−原
子数３〜１７を有する脂肪族炭化水素部分であり、かつ
Ｒ＃はＨ，ＯＨ，ＮＨ，、ＮＨＮＨ２％　　Ｎ３または
低級アルコキシ基である）を有している。この側＠は炭
化水素抗原決定子を支持分子または固体の支持体に結合
して人工抗原および免疫吸着体を作ることができる。該
１１１ＩＩＪｔ−フルドース部分に結合することに関す
る文献に明示されている反応条件はβ−Ｄ−アノマーの
グリコシド結合を作るものであるのが優れていると認め
られる。α−Ｄ−アノマーの側鎖がＴ−抗原決定子では
望ましい。

米国特許第４１９５１７４号明細書（３月２５日、１９
８０年。レミュ−（Ｌｅｍｉｅｕｘ　）およびラトクリ
フ（Ｒａｔｃｌｉｆｆｅ　）には０−アシル化２−アジ
ド−２−デオキシグリコジルハライドの合成法が記載さ
れている。これらのハライドは０−アシル化−２−アジ
ド−２−デオキシグリコシドに変換することができる。

％に該特許には５．４．６−トリー〇−７セチルー２−
アシド−２−デオキシ−β−Ｄ−ガラクトピラノシルク
ロリドの合成およびこれをアグリコン側鎖を含有するア
ルコールと反応させて６，４゜６−トリーＯ−アセチル
ー２−アジド−２−デオキシ−α−Ｄ−ガラクトピラノ
シドを形成することが報告されている。

Ｔ−抗原物質を得る問題の解決策として、Ｔ−抗原決定
子の化学的合成およびこれによ夕人工で一抗原を大量に
製造する丸めの方法が望まれる。従って、本発明の目的
は、Ｔ−抗原決定子合成のための〇−α−グリコシドお
よびその製法を提供することである。

本発明による方法によれば３，４．６−ト！Ｊ−〇−ア
シルー２−アジドー２−デオキシ−α−Ｄ−ガ２クトピ
ラノシルプロミドと一般式：％式％） 〔式中ｎは３〜１９であシ、かつＰはアルコキシまたは
アリールオキシ保護基である〕のモノヒドロキシカルボ
キシレートとをＲ’４ＮＢｒ（ここでＲ′は低級アルキ
ル基である）の存在で好適な溶剤中で反応させる。次い
で反応生成物を任意の順序で還元およびＮ−アセチル化
してアジド基を７セトアミド基に変え、かつ脱０−アシ
ル化して構造式： を有する０−α−グリコシドを製造する。

本発明のもう１つのＩ！＃徴によれば、０−アシル化２
−アジド−２−デオキシ−β−Ｄ−ガ２クトピラノシル
クロリドと一般式： ％式％） 〔式中ｎは３〜１９であシ、かりＲはアルコキシまたは
アリールオキシ保ｄ基である〕のモノヒドロキシカルボ
キシレートとを促進剤シアン化水銀の存在で好適な溶剤
中で反応させることによＦ）　ｔｉｊｌ記の０−α−グ
リコシドを形成する。

次いで反応生成物を任意の順序で還元かつＮ−アセチル
化してアジドａｉをアセトアミド基に変え、かつ脱Ｏ−
アシル化して前記の〇−α−グリコシドを製造する。

Ｉの後構造式： を有するＴ−抗原決定へプテンを形成する。

次に本発明による化合物の構造式および名称を記載する
。付けられている番号は本明細畳における参照番号であ
る。

ｃＯ ３，４，６−トリー〇−アセチルー２−アジド−２−デ
オキシ−β−Ｄ−ガラクトピラノシルクロリド ３．４．６−トリー〇−アセテルー２−アジド−２−デ
オキシ−α−Ｄ−ガンクトビラノシルデロミド Ｒ○ ８−メトキシカルボニルオクチル−′２−アセトアミド
ー２−デオキシ−α−Ｄ−ガラクトピラノシド 下記の例１においては８−メトキシカルボニルオクタツ
ール結合側鎖をシアン化水銀の存在で好適な溶液中で５
．４．６−トリーｏ−７＋チル−２−アジド−２−デオ
キシ−β−Ｄ−ガラクトピラノシルクロリドにα−結合
させる。

例２では８−メトキシカルボニルオクタツールをハライ
ドイオン源：　Ｒ’４ＮＢｒ　（ここでＲ′は低級アル
キル基である）の存在で好適な浴剤中で３゜４．６−　
）ジ−０−アセチル−２−アジド−２−デオキシ−α−
Ｄ−ガラクトピラノシルゾロミドにα−結合させる。こ
ｎらの反応条件によって形成される０−α−グリコシド
をそれぞれ次いで還元かつＮ−アセチル化してアジド基
をアセトアミド基に変え、かつ脱０−アシル化して構造
式： を有するＯ−α−グリコシドを製造する。

脱０−アシル化工程は還元およびＮ−アセチル化工程に
先立って行なってもよい。

側鎖の８−メトキシカルボニルオクタツールについては
ｎは８であシ、かつＲはメトキシ基である。しかし脂肪
族鎖の鎖長を約３〜１９の間で変更することは側鎖を有
意に変えることにはならない。前記の０−α−グリコシ
ド生成物で轟初のＲ保腫基を支持体または担体への結合
を有利にするためにｆＩｔ換することができる。好適な
基はＮＨＮＨ，、Ｎ、およびＯＨを包含する。

例２で使用されるハライドイオン源Ｒ’４ＮＢｒはテト
ラエチルアンモニウムゾロミドである。エチル基９代わ
るものとしては低級アルキル、例えばエチル、プロピル
またはブチル基である。

例１および例２において各ガラクトピラノシルハライド
出発物質は６ｅ４ｔ６−０−ヒドロキシ位で０−アセチ
ル化される。他の保践基はアシル基、例えばプロピオニ
ルおよびベンシイＲ−スを溶かすことのできるものであ
る。Ｍ剤はまた生起する反応に対して実質的に不活性で
あるものが選択される。例１で使用される浴剤ハ無水ベ
ンゼン−ニトロメタンである。例２では俗剤はジクロル
メタンである。前記の性質を有する他の浴剤は癌業者に
は明らかであろう。

例　　１ シト（３） ベンゼン（２０ｍ）甲の５．４．５−トリーＯ−７セチ
ルー２−アジド−２−デオキ２−β−Ｄ−ガラクトビ２
ノシルクロリド（１４，０ｇンの溶液を８−メトキシカ
ルボニルオクタツール（８，４６１／　）、シアン化水
銀（１１，７７ｇ）、ドライエライト（４２＃　）およ
び無水ベンゼン／ニトロメタン（１：　１　ｖ／ｖ）（
２２５ｍｊ）の混合物に添加した。混合物を４５〜５０
°で７２時間攪拌し、この時点で固体をセライトパッド
（Ｃｅ１ｉｔｅ　ｐａｄ　）を介して濾過することによ
シ除去した。濾液を濃縮してシロップ状物にし、かつジ
クロルメタン（２００１１１１）中に溶かした。

得られる溶液を水（１００ｄｘ２）で洗い、乾燥し、濾
過し、かり績縮してシロップ状物（１７，８ｇ）にした
。この後ｆｆ製せずにこの物質を酢酸（５０ＴＩｌｌ）
に溶かし、かつ室温で１００ｐ８１で木炭上パラジウム
５％の存在で４時間水素化した。無水酢酸（２＃ｉｊ）
を添加し、かつ触媒を濾過によシ除去した。アジド基の
還元を塩基性浴液中で惰Ｃ化水素を用いてまたは金属亜
鉛を用いて達成してもよい。ば液をトルエンで希釈し、
かつ蒸発するとフオーム状物（１７ｇ）が得られ友。メ
タノール（３０−）中の接触量のナトリウムメトキシド
を用いてエステル交換して０−アセチル基を除去し、引
続きナトリウムイオンを酸樹脂で除去し、かつ蒸発して
フオーム状物＜　ｉ　ｏ、ｉ　ｇ）が得られた。熱水か
ら結晶させて純粋な８−メトキシカルボニルオクチル２
−アセトアミド−２−デオキシ−α−Ｄ−ガラクトピラ
ノシド（３）　（５，１ｇ）が総収率３５％で得られた
。融点＝１３８〜１４０°、λＨｎｍｒ　（ＤＩＯ）δ
：　４−９５　（ｄ　−Ｉ　ＨＩ　Ｊｌ、２＝　６−Ｏ
Ｈ２、）！−１）、２．１２　ＣＢ、３Ｈ，ＮＡＣ）；
”Ｃｎｍｒ（ＣＨ３０Ｄ）δ：　９　Ｂ、６　（Ｃ−１
）、６２．７（Ｃ−６）、５１．６（Ｃ−２）。

分析Ｃ１１１Ｈ３３酊１０１１−”７２Ｈ２０：計算値
　Ｃ５３，９８；　Ｈ８，５６；　Ｎ　３．５０　；実
測値　ｃ　５５．９８　；　Ｈ８，３１；　Ｎ　３．４
６゜シト 前記の結晶からの母液は約２０％の総収率のβ−Ｄ−７
ノマーとともに付加的址の化合物（３）を有することが
明らかになり窺。したがってこの物實をアセチル化して
シリカゲルカラムでクロマトグラフィー処理し、ヘキサ
ン／酢酸エチル／エタノール（６：４：１）で展開すせ
た。０−アセチル化したもののβ−アノマーを有すると
思われるフラクションをメタノール中のナトリウムメト
キシドを用いる常法で脱〇−アセチル化した。生成物は
メタノールジエチルエーテルから容易に晶出しに０ ０．９、メタノ−Ａ／　）　；　ＩＨｎｍｒ（ＣＤ３０
Ｄ）δ：　４．４０（ｄ＊　　Ｉ　Ｈｅ　Ｊｚｐ＝　７
−６　Ｈａ、Ｈ−，１）、２．０１（ｓ　、　５　Ｈ，
ＮＡＣ）；　１３Ｃｎｍｒ（ＣＤ３０Ｄ）δ：１［］２
．９（Ｃ−１）、６２．３　（Ｃ−６）、５４．２　Ｃ
Ｃ−２）。

分析　Ｃ□ｅＨｓａＮｘｏａ　： 計算値　Ｃ５５，２２；　Ｈ８，５０；　Ｎ　３．５８
実測値　Ｃ５５，４４；　Ｈ８，７３；　Ｎ　３．（５
２この化合物は３，４．６−トリー〇−アセチルー２−
アジド−２−デオキシ−α−Ｄ−ガラクトビ２ノシルデ
ロミド（２）を使用することによりより容易に製造され
る。

α−ゾロミド化合物（２）もα−グリコシド（６）の合
成に使用することができる。この例を次に記載する。

例　　２ α−プロミド（２）　（１７，２ｇ）を囲繞温度でジク
ロルメタン（７５１Ｍ）中の８−メトキシカルボニルオ
クタツール（１６，０ｇ）、テトラエチルアンモニウム
プロミド（９，６ｇ）および４Ａモレキユラーシープ（
６０，０９）の混合物とともに４日間攪拌した。その時
に混曾物を遠心分離して固体を除き、かつ上澄み液をジ
クロルメタン（４００Ｅｊ）で希釈し、かつ水（１００
１ｘ２）で洗った。乾燥および有機相の蒸発によりシロ
ップ状物（２７，２ｇ）が得られた。この浅漬を酢酸（
７５ｍＪ）および無水酢酸（２５１）中の金Ｉｆ４血鉛
（３０，ｔｌ　、！ｉ’　）で０．５時間処理し、アジ
ドを還元およびアミンをアセチル化して粗製の速断され
たα−Ｄ−ガラクトサミニドが得られた。反応混合物を
ジクロルメタン（１００プ〕で希釈し、濾過し、かつ蒸
発して！！４渣を得、これをジクロルメタン（２０ＯＮ
）に＃Ｉかし、かつ順次水（５０）　、飽和重炭酸ナト
リウム（１００Ｅｊ）および水（１００Ｍ４２）で洗り
次。有機相を乾かし、かつ蒸発してシロップ状物が得ら
れ、これを脱Ｏ−アセチル化し、かつ例１のようにして
結晶化して８−メトキシカルボニルオクチル２−アセト
アミド−２−デオキシ−α−Ｄ−ガ２クトビラノシド（
３）　（５，５ｇ）が得られｔｏ 次の工程ではモノサツカリドの０−α−グリコシドを４
．６−０−ヒドロキシル位で選択的に速断して、唯一の
遊離のヒドロキシル基としてｃ−３ヒドロキシル基を有
する化合物が得られる。優れた逮断基龜アセタール、例
えばベンジリデンである。優れた側鎖を用いてこの工程
から８−メトキシカルボニルオクチル−２−アセトアミ
ド−４，６−０−ベンジリデン−２−ゾオキシーα−Ｄ
−ガラクトピラノシド（４）が得られる。

参考例 ８−メトキシカルボニルオクチル２−７セトアミドー４
．６−０−ベンジリデン−２−デオキシ−α−Ｄ−ガラ
クトビ２ノシド（４）化合物（３）　（５，０ｇ　）″
ｆｒ：α、α−ジメトキシトルｘン（８ｍ／）おｊびｐ
　−）’ルエンスルホン酸（０，１０ｇ）を含むＮ、Ｎ
−ジメチルホルムアミド（２０＋１１７）に溶かした。

混合物を５時間５０°に加熱し、この時点でトリエチル
アミン（ｏ、ｓ、ｍｚ　）を添加し、かつＭ液を真空下
に乾燥して無定形のガラス状物（５，２９）が得られ、
これをペンタン（５０ａｄＸ２）で抽出した。固体を酢
酸エチル／ペンタンから結晶化して表題化合物（４，５
ｇ）が得られた。融点１４５〜ルＡ　　）　　；　　ｌ
Ｈｎｍｒ　（ＣＤＣ）３ンδ＝５．７　４　　（ｄ、　
　　Ｉ　　Ｈ。

Ｊｌ、２＝ｍ３．５Ｈ２１Ｈ−１）、２．０２（８，３
Ｈ９ＣＨ３九　１３Ｃｎｍｒ　（ＣＤＣｚ３）δ−１０
１，２（ＣＨＰｈ　　）。

９８．６　（Ｃ−１バ６２．９　（Ｃ’　−６）、５０
．５　（Ｃ’　−２）。

分析　０２５Ｈ３７Ｎ１０８　： 計算値　Ｃ６２，６１；　Ｈ７，７８；　Ｎ　２．９　
またモノサツカリドを促進剤の存在で好適な醇剤中で２
．３，４．＋５−テトラ−０−アシル−αロキシル基と
の間にβ−Ｄ−アンマーのクリコシド結合を形成する。

引続き２つの糖ノの〇−保岐基を除去して構造式： ％式％） 〔式中ｎは３〜１９であシ、かつＲはアルコキシｌたは
アリールオキシ基である〕を有するＴ−抗原決定ハブテ
ンが得られる。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、構造式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中ｎは３〜１９であり、かつＲはアルコキシ、アリ
   −ルオキシ、ＮＨＮＨ＿２、ＯＨまたはＮ＿３基である
   〕を有するＯ−α−グリコシド。 ２、８−メトキシカルボニルオクチル−２−アセトアミ
   ド−２−デオキシ−α−Ｄ−ガラクトピラノシドである
   、特許請求の範囲第１項記載のＯ−α−グリコシド。 ６、構造式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中ｎは３〜１９であり、かつＲはアルコキシまたは
   アリールオキシである〕を有するＯ−α−グリコシドを
   製造するための方法において、 （ａ）３，４，６−トリ−Ｏ−アシル−２−アジド−２
   −デオキシ−α−Ｄ−ガラクトピ ラノシルブロミドと一般式： ＨＯ（ＣＨ＿２）＿ｎＣＯＲ 〔式中ｎおよびＲはアルコキシまたはアリ ールオキシである〕のモノヒドロキシカル ボキシレートとを化合物：Ｒ′＿４ＮＢｒ 〔式中Ｒ′は低級アルキル基である〕の存在で好適な溶
   剤中で反応させ、かつ （ｂ）任意の順序でアジド基を還元およびＮ−アセチル
   化してアセトアミド基にし、かつ Ｏ−アシル基を除去することを特徴とする、Ｏ−α−グ
   リコシドの製法。 ４、工程（ａ）のモノヒドロキシカルボキシレートが８
   −メトキシカルボニルオクタノールである、特許請求の
   範囲第３項記載の方法。 ５、工程（ａ）のガラクトピラノシルブロミドが３，４
   ，６−トリ−Ｏ−アセチル−２−アジド−２−デオキシ
   −α−Ｄ−ガラクトピラノシルブロミドである、特許請
   求の範囲第３項記載の方法。 ６、工程（ａ）の化合物：Ｒ′＿４ＮＢｒがテトラエチ
   ルアンモニウムブロミドである、特許請求の範囲第３項
   から第５項までのいずれか１項記載の方法。 ７、工程（ａ）の化合物：Ｒ′＿４ＮＢｒがテトラエチ
   ルアンモニウムブロミドである、特許請求の範囲第３項
   から第５項までのいずれか１項記載の方法。 ８、構造式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中ｎは３〜１９であり、かつＲはアルコキシまたは
   アリールオキシ基である〕のＯ−α−グリコシドを製造
   するための方法において、 （ａ）３，４，６−トリ−Ｏ−アシル−２−アジド−２
   −デオキシ−β−Ｄ−ガラクトピラノシルクロリドと一
   般式：ＨＯ（ＣＨ＿２）＿ｎＣＯＲ〔式中ｎおよびＲは
   前記のものを表わす〕のモノヒドロキシカルボキシレー
   トとをシアン化水銀の存在で好適な溶剤中で反応させ、
   かつ （ｂ）任意の順序でアジド基を還元かつＮ−アセチル化
   してアセトアミド基にし、かつＯ−アシル基を除去する
   ことを特徴とする、Ｏ−α−グリコシドの製法。 ９、工程（ａ）のモノヒドロキシカルボキシレートが８
   −メトキシカルボニルオクタノールである、特許請求の
   範囲第８項記載の方法。 １０、工程（ａ）のガラクトピラノシルクロリドは３，
   ４，５−トリ−Ｏ−アセチル−２−アジド−２−デオキ
   シ−β−Ｄ−ガラクトピラノシルクロリドである、特許
   請求の範囲第８項記載の方法。