JPS63264597A - ペプチドまたはその誘導体の安定化方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明はペプチドまたはその誘導体の安定化方法に関す
る。

〔従来の技術］ コラーゲンまたはその変性物であるゼラチン、ケラチン
、絹フィブロイン、カゼイン、真珠コンキオリン、大豆
蛋白等の蛋白質を酸、アルカリまたは蛋白加水分解酵素
により加水分解することによって得られるペプチドは、
毛髪用化粧品や皮膚用化粧品等に幅広く用いられている
。そして、これらのペプチドのＮ＝（３−）リメチルア
ン″モニオー２−ヒドロキシプロピル）化物等のペプチ
ドの第４級アンモニウム誘導体も、その原料であるペプ
チド同様に、毛髪用化粧品、皮膚用化粧品等に幅広く用
いられている（例えば、特開昭６０−２４３０１０号公
報）。しかし、これらペプチドやその誘導体は、長期保
存安定性に問題があり、それ自身または各種化粧品に添
加された状態で長期間保存した場合に着色または着臭が
進行することがある。

この原因は、主としてペプチドの活性アミノ基に起因す
るものと考えられ、着色は活性アミン基とカルボニル基
との反応（メイラード反応または褐変反応）によって生
し、着臭は活性アミノ基を有するアミノ酸の分解によっ
て生ずると考えられている。また、ペプチドの誘導体に
おいても活性アミノ基がわずかでも残存している場合に
は長期の保存によって同様に着色、着臭の傾向が見られ
る。

そのため、従来はペプチドまたはその誘導体単独につい
ては乾燥粉末状として保存し、水溶液として保存する場
合には極力長期の保存を避けるようにしていたが、吸湿
性が強いものについては、粉末状として保存することに
も限界があった。また、各種化粧品に添加する場合には
、色素や香料を添加して外見的に着色、着臭を抑えるか
、あるいはペプチドまたはその誘導体の添加量を少なく
する等の方法がとられていた。

〔発明が解決しようとする問題点〕

本発明は、上記のように、従来はペプチドやその誘導体
の長期保存安定性が低いために、保存期間に限界があっ
たり、化粧品に添加する場合には添加量を少なくせざる
を得なかったという事情に鑑み、ペプチドまたはその誘
導体の長期保存安定性を抜本的に向上させる方法を提供
することを目的とする。

〔問題点を解決するための手段］ 本発明は、化粧品に添加されるペプチドまたはその誘導
体の活性アミノ基を無水マレイン酸、無水コハク酸、無
水フタル酸等の二塩基有機酸無水物でアシル化して封鎖
することにより、ペプチドまたはその誘導体を安定化さ
せ、それらの長期保存安定性を向上させたものである。

ペプチドまたはその誘導体の原料であるペプチドは、コ
ラーゲンまたはその変性物であるゼラチン、ケラチ、ン
、絹フィブロイン、カゼイン、真珠コンキオリン、大豆
蛋白等の蛋白質を酸、アルカリまたは蛋白加水分解酵素
によって加水分解することにより得られるものであって
、その平均分子量が２００〜５０００の範囲であるもの
が化粧品原料として有効である。このようなペプチドは
毛髪と同様の化学構造を有し、そのアミノ基やカルボキ
シル基、さらにはそれらペプチドを構成する各種アミノ
酸の側鎖の作用により毛髪に吸着して、毛髪を保護し、
また損傷した毛髪を再生する作用を有し、かつ保湿性、
ｐＨ１１衝作用等を有することから、毛髪用化粧品、皮
膚用化粧品に幅広く用いられる。

また、ペプチドのＮ−（３−トリメチルアンモニオ−２
−ヒドロキシプロピル）化物等のペプチドから得られる
誘導体は、第４級アンモニウム基の導入により毛髪への
吸着性がさらに向上し、また柔軟化作用も有するため、
特に毛髪用化粧品にを効である。

しかし、これらのペプチドおよびペプチド誘導体は、前
記のように、長期保存安定性に問題を有しており、その
ため、有用性が認識されながらも、その応用範囲や添加
量が制限されることがあった。

そのため、本発明者らは、これらペプチドまたはその誘
導体の長期保存安定性を向上させるための方法について
種々検討を重ねた結果、これらペプチドまたはその誘導
体の反応性に富んだ活性アミノ基を無水マレイン酸、無
水コハク酸、無水フタル酸等の二塩基有機酸無水物でア
シル化して封鎖することにより安定化させ、それらの長
期保存安定性を著しく向上させたのである。

本発明によるペプチドまたはその誘導体の活性アミノ基
の封鎖は、ペプチドまたはその誘導体中に含まれる活性
アミノ基の全部を封鎖してもよいが、ペプチドまたはそ
の誘導体中に含まれるアミノ基のうちの特に反応性の高
い一部のアミン基を封鎖することによっても達成するこ
とができる。

従って、ペプチドまたはその誘導体のアミノ基に基づく
効果を完全に損なうことなく目的を達成することができ
る。具体的には、ペプチドの場合には全アミノ基の５〜
５０％程度を封鎖し、その誘導体の場合には残存するア
ミノ基の１０〜１００％程度を封鎖することにより、目
的に応じて長期保存安定性を向上させることができる。

このようにして活性アミノ基が封鎖されたペプチドまた
はその誘導体は、保存にあたり温度、ＰＨ等に関して通
常採用される条件下では極めて安定である。

活性アミノ基のアシル化物の封鎖には二塩基有機酸無水
物が用いられるが、該二塩基有８０酸無水物としては、
反応性と水溶解性等の関係から、無水マレイン酸、無水
コハク酸、無水フタル酸等が好ましく、価格面を考慮に
入れると無水マレイン酸を用いるのが最も好ましい。

活性アミノ基の封鎖を目的とするアシル化は、ペプチド
またはその誘導体の濃度５〜６０％水溶液をｐＨ８〜１
１、温度３０〜６０°Ｃで撹拌しながら、ペプチドの場
合には全アミノ基の５〜５０％、その誘導体の場合には
残存するアミノ基の１０〜１００％に相当する無水マレ
イン酸、無水コハク酸、無水フタル酸等の二塩基有機酸
無水物を少量ずつ添加して溶解させながら反応させ、反
応中のＰＨの低下に応じて水酸化ナトリウム、水酸化カ
リウム、水酸化リチウム等のアルカリ剤の水？８液を添
加してｐＨ８〜１１に維持するのが好ましい。反応は無
水マレイン酸、無水コハク酸、無水フタル酸等の二塩基
有機酸無水物の所要量を全量添加し、反応系に溶解させ
たのち、１〜６時間で終了するのが好ましい、なお、反
応条件によっては、加水分解によりマレイン酸、コハク
酸、フタル酸等の酸類が生成するため活性アミノ基を充
分に封鎖することができない場合も発生するので、必要
に応じて、反応に用いる無水マレイン酸、無水コハク酸
、無水フタル酸等の二塩基有機酸無水物を増量してもよ
い。副生成物として一部生成するマレイン酸、コハク酸
、フタル酸等の酸類および塩化ナトリウム等の塩類は、
イオン交換樹脂、イオン交換膜、限外濾過、電気透析等
の手段によって除去することができる。

なお、微量の活性アミノ基の封鎖には、特に上記の反応
条件を考慮することなく、微量の無水マレイン酸、無水
コハク酸または無水フタル酸を添加することのみで目的
を達することもできる。

このような例としては、例えばペプチドの誘導体のよう
に、全液中の活性アミノ基濃度が少なく、アシル化に際
して添加される無水マレイン酸、無水コハク酸または無
水フタル酸の量が極めて少ないために、たとえアシル化
に消費されない過剰の無水マレイン酸、無水コハク酸ま
たは無水フタル酸が存在していても、それらの量が非常
に少ないため、ｐＨ等の液性がほとんど変わらない場合
が挙げられる。

このようにして活性アミノ基が封鎖されたペプチドまた
はその誘導体は、保存にあたり通常採用されるｐＨ３〜
１０、温度Ｏ〜５０°Ｃの条件下ではその長期保存安定
性が著しく向上する。そして、活性アミノ基の封鎖をし
て安定化させたペプチドを用いてその誘導体とした場合
も、優れた長期保存安定性が維持される。

本発明により安定化されるペプチドまたはその誘導体の
原料であるペプチドとしては、毛髪用化粧品、皮膚用化
粧品等の化粧品への応用性から、平均分子量で２００〜
５０００のものが好用される。これはペプチドの平均分
子量が２００未満ではペプチドが毛髪に充分に吸着せず
、そのため、毛髪の保護作用や損傷した毛髪の修復作用
が充分に発揮されず、かつ吸湿性が強すぎてヘタツクた
めに皮膚に好ましい感触を与えず、またペプチドの平均
分平置が５０００を超えると毛ρへの吸着量が低下し、
毛髪の保護作用や損傷した毛髪の修復作用が充分に発渾
されず、毛髪や皮膚上に残存すると硬い皮膜を形成して
不快な感触を与え、かつ水溶性が低下してゲル状になっ
て使用しにくくなるからである。

そして、ペプチドの誘導体としては、特に毛髪用化粧品
に好適であるという観点から、下記の一般式（１） （式中、Ｒ＋、　Ｒｚ、Ｒ３のうち、少なくとも１個は
メチル、エチルまたはベンジル基のいずれかで、残余は
炭素数１〜２０のアルキル基であり、Ｒ４は水素または
水酸基であり、Ｒ３はペプチドに含まれる種々のアミノ
酸の側鎖であり、ｎは２〜５０である）で示されるペプ
チドの第４級アンモニウム誘導体が好用される。

このような一般式（Ｉ）で示されるペプチドの誘導体は
、例えば、ペプチドと、下記の一般式（式中、Ｒ１、Ｒ
２、Ｒ１、Ｒ４は前記のとおりであり、χとＹはＣ１，
、Ｂｒ、１などのハロゲン原子を示す）で示される■３
−ハロゲンー２−ヒドロキシプロピルトリアルキルアン
モニウム塩、■３−ハロゲンプロピルトリアルキルアン
モニウム塩、■グリシジルトリアルキルアンモニウム塩
のいずれかとを反応させることによって得られる。

そして、■としては、３−クロロ−２−ヒドロキシプロ
ピルトリメチルアンモニウムクロライド、３−ブロモ−
２−ヒドロキシプロピルトリメチルアンモニウムクロラ
イド、３−クロロ−２−ヒドロキシプロピルトリエチル
アンモニウムクロライド、ステアリル（３−クロロ−２
−ヒドロキシプロピル）ジメチルアンモニウムクロライ
ド、ジステアリル〔３−クロロ−２−ヒドロキシプロピ
ルコメチルアンモニウムクロライド、セチル（３−クロ
ロ−２−ヒドロキシプロピル）ジベンジルアンモニウム
クロライド、セチル（３−クロロ−２−ヒドロキシプロ
ピル）ジメチルアンモニウムクロライド、３−クロロ−
２−ヒドロキシプロピルトリメチルアンモニウムブロマ
イド、３−ブロモ−２−ヒドロキシプロピルトリメチル
アンモニウムブロマイド、３−クロロ−２−ヒドロキシ
プロピルトリメチルアンモニウムブロマイド、ステアリ
ル（３−クロロ−２−ヒドロキシプロピル）ジメチルア
ンモニウムブロマイド、ジステアリル（３−クロロ−２
−ヒドロキシプロピル）メチルアンモニウムブロマイド
、セチル（３−クロロ−２−ヒドロキシプロピル）ジベ
ンジルアンモニウムブロマイド、セチル（３−クロロ−
２−ヒドロキシプロピル）ジメチルアンモニウムブロマ
イド、３−クロロ−２−ヒドロキシプロピルトリメチル
アンモニウムアイオダイド、３−ブロモー２−ヒドロキ
シプロピルトリメチルアンモニウムアイオダイド、３−
クロロ−２−ヒドロキシプロピルトリエチルアンモニウ
ムアイオダイド、ステアリル（３−クロロ−２−ヒドロ
キシプロピル）ジメチルアンモニウムアイオダイド、ジ
ステアリル（３−クロロ−２−ヒドロキシプロピル）メ
チルアンモニウムアイオダイド、セチル（３−り四ロー
２−ヒドロキシプロピル）ジベンジルアンモニウムアイ
オダイド、セチル（３−クロロ−２−ヒドロキソプロピ
ル）ジメチルアンモニウムアイオダイドなどがあげられ
る。

■とじては、３−クロロプロピルトリメチルアンモニウ
ムクロライド、３−クロロプロピルトリエチルアンモニ
ウムクロライド、３−ブロモプロピルトリメチルアンモ
ニウムクロライド、ステアリル（３−クロロプロピル）
ジベンジルアンモニウムクロライド、セチル（３−クロ
ロプロピル）ジメチルアンモニウムクロライド、３−ク
ロロプロピルトリメチルアンモニウムブロマイド、３−
クロロプロピルトリエチルアンモニウムブロマイド、３
−ブロモプロピルトリメチルアンモニウムフロマイト、
ステアリル（３−クロロプロピル）ジベンジルアンモニ
ウムブロマイド、セチル（３−クロロプロビル）ジメチ
ルアンモニウムブロマイド、３−クロロプロピルトリメ
チルアンモニウムアイオダイド、３−クロロプロピルト
リエチルアンモニウムアイオダイド、３−ブロモプロピ
ルトリメチルアンモニウムアイオダイド、ステアリル（
３−クロロプロピル）ジベンジルアンモニウムアイオダ
イド、セチル（３−クロロプロピル）ジメチルアンモニ
ウムアイオダイドなどがあげられる。

■とじては、グリシジルトリメチルアンモニウムクロラ
イド、グリシジルトリエチルアンモニウムクロライド、
ステアリルグリシジルジメチルアンモニウムクロライド
、セチルジベンジルグリシジルアンモニウムブロマイド
、グリシジルトリメチルアンモニウムブロマイド、グリ
シジルトリエチルアンモニウムブロマイド、ステアリル
グリシジルジメチルアンモニウムブロマイド、セチルジ
ベンジルグリシジルアンモニウムブロマイド、グリシジ
ルトリメチルアンモニウムアイオダイド、グリシジルト
リエチルアンモニウムアイオダイド、ステアリルグリシ
ジルジメチルアンモニウムアイオダイド、セチルジベン
ジルグリシジルアンモニウムアイオダイドなどがあげら
れる。

上記一般式（１）におけるｎの値２〜５ｏは、ペプチド
の平均分子量２００〜５０００にほぼ対応している。

〔実施例〕

実施例１ ゼラチンを水酸化ナトリウムで加水分解することによっ
て得られたコラーゲンペプチド（平均分子１１７００）
の濃度３５％水溶液１．００ｋｇ　（全アミノ基をアミ
ノ態チッ素として７０５ミリモルを含む）を撹拌しなが
ら５０°Ｃに加温し、２０％水酸化ナトリウム水溶液を
滴下してｐＨ９，５に調整した。これに無水マレイン酸
１３．８ｇ　　（全アミノ基の２０％当Ｎ）を３０分間
かけて少量ずつ加え、その間２０％水酸化ナトリウム水
溶液を適宜滴下して反応液のｐＨを９．５に調整した。

さらに３時間同じ条件を継続することにより、反応を終
了した０反応生成物のアミノ態チッ素を測定したところ
、アミノ態チッ素の総量は５６８ミリモルであり、全ア
ミノ基のうちの１９．４％の活性アミノ基がアシル化さ
れ封鎖されていた。次に、反応液に塩酸を加えｐＨ６，
５に中和した後、減圧濃縮することにより、濃度３５％
の安定化されたコラーゲンペプチド水溶液を得た。

このようにして得られたコラーゲンペプチドの保存安定
性は後記第１表に示すとおりである。

実施例２ 実施例１における無水マレイン酸１３．８ｇに代えて無
水コハク酸１４．１ｇ　　（全アミノ基の２０％当量）
を用いたほかは実施例１と同様にして濃度３５％の安定
化されたコラーゲンペプチド水溶液を得た。

得られたコラーゲンペプチドのアミノ態チッ素を測定し
たところ、全アミン基のうちの１９．４％の活性アミノ
基がアシル化され封鎖されていた。得られたコラーゲン
ペプチドの保存安定性は後記第１表に示すとおりである
。

実施例３ 実施例１における無水マレイン酸１３．８　ｇに代えて
無水フタル酸２０．８ｇ　　（全アミノ基の２０％当量
）を用いたほかは実施例１と同様にして濃度３０％の安
定化されたコラーゲンペプチド水溶液を得た。

得られたコラーゲンペプチドのアミノ態チッ素を測定し
たところ、全アミノ基のうちの１８．９％の活性アミノ
基がアシル化され封鎖されていた。

上記実施例１〜３により安定化されたコラーゲンペプチ
ドの長期保存安定性を以下の方法により比較した。

容１１００ｒｒ＋ｊ！の透明ガラスビンに各試料を５０
ｍ１ずつ充填して密封したものをそれぞれ４本用意し、
その内３本ずつを５０°Ｃの恒温器に入れて３カ月間保
存し、１力月毎に着色と着臭の進行状況を調査した。臭
の比較には各試料を一２０°Ｃで凍結保存したものを解
凍して標準品として用い、標準品を０とし、０〜３の４
段階評価を行い、５名で評価して、その平均値を採用し
た。結果を第１表に示す。また、色の比較にはガードナ
ー法を採用した。標準品の色はガードナー法では８であ
り、数値が８より大きいほど色が濃いことを示す。

第　　　　　１　　　　　表 第１表に示すように、実施例１〜３によって安定化され
たコラーゲンペプチドは、安定化していないコラーゲン
ペプチドに比べて、保存に伴う着色、着臭が少なく、優
れた長期保存安定性を有していた。

実施例４ 羊毛を塩酸で加水分解することによって得られたケラチ
ンペプチド（平均分子ｉ　８００）の濃度４０％水溶液
１．００ｋｇ　（全アミノ基をアミノ態チソ素として４
６５ミリモルを含む）を撹拌しなから６０°Ｃに加温し
、２０％水酸化ナトリウム水溶液を滴下してｐＨ１０に
調整した。これに無水マレイン酸１３．７　ｇ（全アミ
ノ基の３０％当量）を１時間かけて少量ずつ加え、その
間２０％水酸化ナトリウム水溶液を適宜滴下して反応液
のｐＨを１０に調整した。さらに１時間同じ条件を継続
することにより反応を終了した。反応生成物のアミノ態
チッ素を測定したところ、アミノ態チッ素の総量は３３
９ミリモルであり、全アミノ基のうちの２７．１％の活
性アミノ基がアシル化され封鎖されていた０次に反応液
に塩酸を加えてｐＨ７に中和したのち、電気透析により
副生成物のマレイン酸ナトリウムおよび塩化ナトリウム
を除去し、減圧濃縮することによって濃度３０％の安定
化されたケラチンペプチド水溶液を得た。

このようにして安定化されたケラチンペプチドと安定化
していないケラチンペプチドを用い、下記の処方により
シャンプー■〜■を調製し、前記実施例１〜３の場合と
同様の方法によって長期保存安定性を比較した。その結
果を第２表に示す。

なお、処方中の配合量は重量部によるものである。

シャンプー処方 リウム ヤシ脂肪酸ジエタ　　５．０　　５．０　　５．０ノー
ルアミト ンペプチド カチオン化セル口　　０．３　　０．３　　０．３−ス プロピレングリコ　　１．５　　１．５　　１．５−Ｊ
し 防　腐　剤　　　　　適量　　適量　　通量マ　　　　
　　　　　　　　。　　　　　部　　　　部総　　　　
量　　　　　　１００．０　　１００．０　　１００．
０第　　　　　２　　　　　表 第２表に示すように、実施例４により安定化されたケラ
チンペプチドを配合したシャンプー■は、保存に伴う着
色、着臭が少なく、長期保存安定性が優れていた。また
、シャンプー■のようにケラチンペプチドの配合濃度を
上げてもシャンプーの製品安定性を大きく損なうことが
なかった。

実施例５ 蛋白加水分解酵素としてハバインを用い、コラーゲンを
酵素加水分解することによって得られたコラーゲンペプ
チド（平均分子量２０００）の濃度３０％水溶液１．０
０ｋｇ　（全アミノ基をアミノ態チッ素として１３７ミ
リモルを含む）を撹拌しながら５０℃に加温し、２０％
水酸化ナトリウム水溶液を滴下してｐＨ１０，０に調整
したのち、濃度５０％のクロロ−２−ヒドロキシプロピ
ルトリメチルアンモニウムクロライド水溶′ａ、４６．
４　ｇ　　（コラーゲンペプチドの全アミノ態チッ素の
００ｇ当量）を３０分間かけて滴下し、その間２０％水
酸化ナトリウム水溶液を適宜滴下して反応液のｐＨを１
０．０に維持した０滴下終了後、ｐＨを１０．０に維持
しながら２時間撹拌を続けて、コラーゲンペプチドのＮ
−（３−トリメチルアンモニウム−２−ヒドロキシプロ
ピル）化誘導体を得た。このもののアミノ態チッ素を測
定したところ、全アミノ態チッ素の総量は２６ミリモル
であり、全アミノ態チッ素の８１％が反応していた。

次に５０゛ＣでｐＨ１０，０に保ち、撹拌しながら無水
マレイン酸３．０ｇ　　（全アミノ態チッ素の１．２当
量）を加えて１時間撹拌した０反応を終了後、アミノ態
チッ素を測定したところ、残存していた全アミノ基のう
ち９７％の活性アミノ基がアシル化され封鎖されていた
。イオン交換樹脂を用いてマレイン酸ナトリウムおよび
塩化ナトリウムを除去し、減圧濃縮することにより、濃
度３０％の安定化されたコラーゲンペプチドのＮ−（３
−）ジメチルアンモニオ−２−ヒドロキシプロピル）化
誘導体水溶液を得た。得られたコラーゲンペプチドのＮ
−（３−トリメチルアンモニオ−２−ヒドロキシプロピ
ル）化誘導体の保存安定性は後記第３表に示すとおりで
ある。

実施例６ 実施例５で行われた無水マレイン酸による残存活性アミ
ノ基のアシル化による封鎖を行わずに、イオン交換樹脂
を用いて中和・脱塩し、減圧濃縮することにより得られ
た濃度３０％のコラーゲンペプチドのＮ−（３−）ジメ
チルアンモニオ−２−ヒドロキシプロピル）化誘導体水
溶液に無水マレイン酸２．５ｇを加えて溶解することに
より、安定化されたコラーゲンペプチドのＮ−（３−ト
リメチルアンモニオ−２−ヒドロキシプロピル）化誘導
体水溶液を得た。７日後にアミノ態チッ素の測定を行っ
たところ、残存していた全アミノ基のうちの７３％の活
性アミノ基がアシル化され封鎖されていることが判明し
た。

上記実施例５〜６により安定化されたコラーゲンペプチ
ドのＮ−（３−トリフチルアンモニオ−２−ヒドロキシ
プロピル）化誘導体および安定化されていないコラーゲ
ンペプチドのＮ−（３−トリメチルアンモニオ−２−ヒ
ドロキシプロピル）化誘導体の長期保存安定性を前記実
施例１〜３の場合と同様の方法によって比較した。その
結果を第３表に示す、なお、標準品の色はいずれもガー
ドナーで８であった。

第　　　　　３　　　　　　表 第３表に示すように、実施例５および実施例６によって
安定化されたコラーゲンペプチド誘導体は、安定化され
ていないコラーゲンペプチド誘導体に比べて、保存に伴
う着色、着臭が少なく、優れた長期保存安定性を有して
いた。

実施例７ 絹フィブロインを水酸化ナトリウムで加水分解すること
によって得られたシルク（絹）ペプチド（平均分子量１
０００）の濃度２０％水溶液１．００ｋｇ　（全アミノ
基をアミノ態チッ素として２１０ミリモルを含む）を撹
拌しながら４０°Ｃに加温し、２０％水酸化ナトリウム
水溶液を滴下してｐＨ９，５に調整した。

これに無水マレイン酸２．１ｇ　　（全アミノ基の１０
％当量）を加えて１時間かけて少量ずつ加え、その間２
０％水酸化カリウム水溶液を適宜滴下して反応液のｐＨ
を９．５に調整した。さらに３時間同じ条件を継続する
ことにより反応を終了した。反応生成物のアミノ態チッ
素を測定したところ、全アミノ態チッ素の総量は１９３
ミリモルであり、全アミノ基のうち８％の活性アミノ基
がアシル化され封鎖されていた。

次に、反応液に塩酸を加えｐＨ７に中和したのち、電気
透析により、副生成物のマレイン酸ナトリウムおよび塩
化ナトリウムを除去し、減圧濃縮することによって濃度
２０％の安定化されたシルクペプチド水溶液を得た。

上記のようにして安定化されたシルクペプチドと安定化
されていないシルクペプチドの長期保存安定性を前記実
施例１〜３の場合と同様の方法によって比較した。その
結果を第４表に示す。なお、標準品の色はガードナーで
８であった。

第　　　　　　４　　　　　　表 第４表に示すように、実施例７により安定化されたシル
クペプチドは、安定化されていないシルクペプチドに比
べて、保存に伴う着色、着臭が少なく、優れた長期保存
安定性を有していた。

実施例８ 蛋白加水分解酵素としてトリプシンを用い、牛乳カゼイ
ンを酵素加水分解することによって得られたカゼインペ
プチド（平均分子１６００）の濃度２５％水溶液１．０
０ｋｇ　（全アミノ基をアミノ態チッ素として４０８ミ
リモル含む）を撹拌しなから５０°Ｃに加温し、２０％
水酸化ナトリウム水溶液を滴下してｐＨ８，５に調整し
た。これに無水マレイン酸４．０ｇ　（全アミノ基の１
０％当量）を加えて１０分間で少量ずつ加え、その間２
０％水酸化カリウム水溶液を滴下して反応液のｐＨ１１
に調整した。さらに１時間、５（１’ｃで撹拌すること
により反応を終了した。

反応生成物のアミノ態チッ素を測定したところ、全アミ
ノ態チッ素の総量は３７５ミリモルで、全アミノ基のう
ち７％の活性アミノ基がアシル化され封鎖されていた０
次に反応液にリンゴ酸を加えｐＨ６，５に中和し減圧濃
縮することによって濃度２５％の安定化されたカゼイン
ペプチド水溶液を得た。

上記のようにして安定化されたカゼインペプチドと安定
化されていないカゼインペプチド（Ｄ長ｆ’Ａ保存安定
性を前記実施例１〜３の場合と同様の方法によって比較
した。その結果を第５表に示す。

なお、標準品の色はガードナーで８であった。

第　　　　　５　　　　　表 第５表に示すように、実施例８によって安定化されたカ
ゼインペプチドは、安定化されていないカゼインペプチ
ドに比べて、保存に伴う着色、着臭が少なく、優れた保
存安定性を有していた。

〔発明の効果〕

以上説明したように、本発明によれば、ペプチドの活性
アミン基を無水マレイン酸、無水コハク酸、無水フタル
酸等の二塩基有機酸無水物でアシル化して封鎖すること
により、ペプチドまたはその誘導体の長期保存安定性を
向上させることができた。

Claims (5)

【特許請求の範囲】
1. （１）ペプチドの活性アミノ基を二塩基有機酸無水物で
   アシル化することにより封鎖することを特徴とするペプ
   チドまたはその誘導体の安定化方法。
2. （２）ペプチドまたはその誘導体の原料であるペプチド
   が、コラーゲン、ゼラチン、ケラチン、絹フィブロイン
   、カゼイン、真珠コンキオリンおよび大豆蛋白よりなる
   群から選ばれた蛋白質を酸、アルカリまたは蛋白加水分
   解酵素によって加水分解して得られたものである特許請
   求の範囲第１項記載のペプチドまたはその誘導体の安定
   化方法。
3. （３）ペプチドまたはその誘導体の原料であるペプチド
   の平均分子量が２００〜５０００である特許請求の範囲
   第１項記載のペプチドまたはその誘導体の安定化方法。
4. （４）ペプチドの誘導体が下記の一般式（ I ）▲数式
   、化学式、表等があります▼（ I ） （式中、Ｒ＿１、Ｒ＿２、Ｒ＿３のうち、少なくとも１
   個はメチル、エチルまたはベンジル基のいずれかで、残
   余は炭素数１〜２０のアルキル基であり、Ｒ＿４は水素
   または水酸基であり、Ｒ＿５はペプチドに含まれる種々
   のアミノ酸の側鎖であり、ｎは２〜５０である）で示さ
   れるペプチドの第４級アンモニウム誘導体である特許請
   求の範囲第１項記載のペプチドまたはその誘導体の安定
   化方法。
5. （５）二塩基有機酸無水物が無水マレイン酸、無水コハ
   ク酸または無水フタル酸である特許請求の範囲第１項記
   載のペプチドまたはその誘導体の安定化方法。