JPS63211284A - バージニアマイシンm↓1発酵類似体 - Google Patents
バージニアマイシンm↓1発酵類似体Info
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
本発明の目的は、コレシストキニン(CCK)あるいは
ガストリンの拮抗剤であるバージニアマイシンM、及び
その類似体を提供することにある。
ガストリンの拮抗剤であるバージニアマイシンM、及び
その類似体を提供することにある。
本発明の他の目的は抗生物質活性をもつ、バージニアマ
イシンM1の新規類似体を提供することにある。本発明
の更に他の目的はバージニアマイシンM1及び構造式■
、■、■なる類似体を調製する醗酵方法を提供すること
にある。本発明の更に他の目的は構造式I、■、■なる
化合物の化学的合成方法を提供することにある。本発明
の更に他の目的はバージニアマイシンM+及びそれらの
類似体からなる薬剤組成物を提供することにある。
イシンM1の新規類似体を提供することにある。本発明
の更に他の目的はバージニアマイシンM1及び構造式■
、■、■なる類似体を調製する醗酵方法を提供すること
にある。本発明の更に他の目的は構造式I、■、■なる
化合物の化学的合成方法を提供することにある。本発明
の更に他の目的はバージニアマイシンM+及びそれらの
類似体からなる薬剤組成物を提供することにある。
本発明の更に他の目的はバージニアマイシンM+、それ
らの類似体あるいは抗生物質、鎮痛剤、抗潰瘍性剤、抗
腫瘍剤、及び胃腸、中枢神経、そして食欲調節系疾患に
対する治療的物質となる構成物の投与方法を提供するこ
とにある。本発明のこれら及び他の目的は以下の記載に
より明白である。
らの類似体あるいは抗生物質、鎮痛剤、抗潰瘍性剤、抗
腫瘍剤、及び胃腸、中枢神経、そして食欲調節系疾患に
対する治療的物質となる構成物の投与方法を提供するこ
とにある。本発明のこれら及び他の目的は以下の記載に
より明白である。
以下の構造式をもつバージニアマイシンM+以下に記載
しである構造式Iから■をもつバージニアマイシンM1
の類似体 バージニアマイシンM+及びi似体1から■はコレシス
トキニンあるいはガストリンの拮抗剤である。
しである構造式Iから■をもつバージニアマイシンM1
の類似体 バージニアマイシンM+及びi似体1から■はコレシス
トキニンあるいはガストリンの拮抗剤である。
動物、特に人体に対してコレシストキニン拮抗剤は鎮痛
剤として、あるいは胃腸、中枢神経及び食欲調節系疾患
に対する治療及び予防薬として有効である。ガストリン
拮抗剤は人体に対してガストリンリセプターのブロック
という点で有効であり、また潰瘍、腫瘍及び、その他の
胃腸内疾患に対する治療用物質としても作用する。構造
式■から■なる化合物は抗生物質でもあることから人体
用も含め動物に対する抗菌物質として有効であり、動物
飼料の有効利用促進のための食品添加物としても有効で
ある。
剤として、あるいは胃腸、中枢神経及び食欲調節系疾患
に対する治療及び予防薬として有効である。ガストリン
拮抗剤は人体に対してガストリンリセプターのブロック
という点で有効であり、また潰瘍、腫瘍及び、その他の
胃腸内疾患に対する治療用物質としても作用する。構造
式■から■なる化合物は抗生物質でもあることから人体
用も含め動物に対する抗菌物質として有効であり、動物
飼料の有効利用促進のための食品添加物としても有効で
ある。
コレシストキニン(CCK)及びガストリン(G)は胃
腸内Mi織あるいは中枢神経系中より検出される調節ペ
プチドである。〔マント(Mutt)、ガストロインテ
スティナルホルモンズ(Gastro−intesti
nal Hormones ) %グラス(Glass
) )著レイベン(Raven )プレス(Pres
s ) 、エヌ、ワイ、 (N、Y、)第169頁(
1980))。
腸内Mi織あるいは中枢神経系中より検出される調節ペ
プチドである。〔マント(Mutt)、ガストロインテ
スティナルホルモンズ(Gastro−intesti
nal Hormones ) %グラス(Glass
) )著レイベン(Raven )プレス(Pres
s ) 、エヌ、ワイ、 (N、Y、)第169頁(
1980))。
CCKペプチドはある中脳神経細胞中でドーパミンと共
存しており、神経伝達物質としての役割はもちろんの事
、脳内におけるドーパミン作用性の機能をも担なってい
る〔プランジ(Prange)等、アン(Ann、)
、レプツ(Repts、) 、メト(Med、)ケム(
Chen+) 、第17@:第31頁(1982))。
存しており、神経伝達物質としての役割はもちろんの事
、脳内におけるドーパミン作用性の機能をも担なってい
る〔プランジ(Prange)等、アン(Ann、)
、レプツ(Repts、) 、メト(Med、)ケム(
Chen+) 、第17@:第31頁(1982))。
胃腸内CCK及びガストリンは哺乳動物の胃粘膜の壁及
び胃底腺主細胞において作用し、酸及びペプシノーゲン
の分泌に刺激を与える〔チュー(Chew)及びハーゼ
イ (Hersey) 、アム(八m)、ジェイ (J
、) 、フィシオル(Physiol、) 、第242
巻:G504 (1982))。
び胃底腺主細胞において作用し、酸及びペプシノーゲン
の分泌に刺激を与える〔チュー(Chew)及びハーゼ
イ (Hersey) 、アム(八m)、ジェイ (J
、) 、フィシオル(Physiol、) 、第242
巻:G504 (1982))。
コレシストキニンは生理的飽満ホルモンとしても知られ
ており食欲調節としての役割をも担っている〔スミス(
Smith ) 、イーティング アンドイッツ ディ
スオーダーズ(Eating and ItsDiso
rders ) 、スタンカード(Stunkard)
、及びステラ−(Steller ) 、共著、レイ
ベン(Raven )プレス(Press ) 、エヌ
、ワイ、 (N、Y、) 、第67頁(1984))
。
ており食欲調節としての役割をも担っている〔スミス(
Smith ) 、イーティング アンドイッツ ディ
スオーダーズ(Eating and ItsDiso
rders ) 、スタンカード(Stunkard)
、及びステラ−(Steller ) 、共著、レイ
ベン(Raven )プレス(Press ) 、エヌ
、ワイ、 (N、Y、) 、第67頁(1984))
。
CCKのその他の効果としては腸の運動性、胆のう内胆
汁の濃度、膵消化酵素の分泌等に対する刺激、あるいは
空腹感の抑制などがあげられる。
汁の濃度、膵消化酵素の分泌等に対する刺激、あるいは
空腹感の抑制などがあげられる。
腸内CCKはアミノ酸39あるいは33個よりなり33
個のアミノ酸配列のC−末端部は同定されている。
個のアミノ酸配列のC−末端部は同定されている。
生物学的活性は生体系本来のペプチドにおいてはC−末
端の7個のペプチドにより制御されている、C−末端の
8個のペプチドもCCK−33と同様の効果をもち、し
かも約10倍以上の能力があるとされている〔ジエンセ
ン(Jensen)等、ブロク(Proc、 ) 、ナ
トル(Natl、 ) 、アカド(Acad)、サイ
(Sci、) 、ニーニスエイ (U、S、A、) 、
第77巻、第2079頁(1980))。
端の7個のペプチドにより制御されている、C−末端の
8個のペプチドもCCK−33と同様の効果をもち、し
かも約10倍以上の能力があるとされている〔ジエンセ
ン(Jensen)等、ブロク(Proc、 ) 、ナ
トル(Natl、 ) 、アカド(Acad)、サイ
(Sci、) 、ニーニスエイ (U、S、A、) 、
第77巻、第2079頁(1980))。
ガストリンもまた当然種々の構造をもつとされている。
34個のアミノ酸、17個のアミノ酸、あるいは13個
のアミノ酸より構成されており、そのうち、チロシンは
硫酸塩になっているものや、そうでないものもある。1
7および13個よりなるアミノ酸構造体は、それぞれ3
4個よりなるアミノ酸のC−末端断片であろう。そして
、それぞれが胃酸分泌刺激の面で種々の効力をもってい
る。ガストリン−17はガストリン−34に対して5倍
以上、ガストリン−13に対して2.5倍以上の能力を
もっている〔ウオルシュ(Walsh )およびグロス
マン(Grossman) 、ニューイングル(New
Engl、 ) 、ジェイ(J、) 、メト(Med、
) 、第292巻、;第1324頁(1975))。
のアミノ酸より構成されており、そのうち、チロシンは
硫酸塩になっているものや、そうでないものもある。1
7および13個よりなるアミノ酸構造体は、それぞれ3
4個よりなるアミノ酸のC−末端断片であろう。そして
、それぞれが胃酸分泌刺激の面で種々の効力をもってい
る。ガストリン−17はガストリン−34に対して5倍
以上、ガストリン−13に対して2.5倍以上の能力を
もっている〔ウオルシュ(Walsh )およびグロス
マン(Grossman) 、ニューイングル(New
Engl、 ) 、ジェイ(J、) 、メト(Med、
) 、第292巻、;第1324頁(1975))。
ガストリンとCCKはそのC−末端部において、共通の
5個のペプチドアミド配列をもっている(Gly−Tr
p−Met−八5p−Phe−NHt ) 。
5個のペプチドアミド配列をもっている(Gly−Tr
p−Met−八5p−Phe−NHt ) 。
ガストリン及びCCK拮抗剤はそれぞれガストリン及び
CCKによってもたらされる疾患の治療面において有効
である。CCK拮抗剤は動物、特に人体において、胃腸
、中枢神経、及び食欲調節系のCCK関連疾患に対して
、予防あるいは治療という面において好結果が得られて
いる。
CCKによってもたらされる疾患の治療面において有効
である。CCK拮抗剤は動物、特に人体において、胃腸
、中枢神経、及び食欲調節系のCCK関連疾患に対して
、予防あるいは治療という面において好結果が得られて
いる。
またCCK拮抗剤は鎮痛剤による無痛感覚状態の増強や
その持続時間の延長に有効であり、それによって痛みに
対する処置においても多用されるものである〔ファリス
(Paris )等、サイエンス(Science )
、第226巻、第1215頁(1984) ]。
その持続時間の延長に有効であり、それによって痛みに
対する処置においても多用されるものである〔ファリス
(Paris )等、サイエンス(Science )
、第226巻、第1215頁(1984) ]。
ガストリン拮抗剤はガストリン活性を減少させるところ
にその治療的価値があるので、人体あるいは動物の胃腸
系統のガストリン関連疾患、例えば潰瘍、ゾリンジャー
・エリソン症候群、胃前庭G細胞過形成あるいはその他
の同様な症状に対して治療及び予防面で有効に使用され
ている。CCK及びガストリンはある種の腫瘍に対して
属性効果をもっている〔オオヤマ(Ohyama) 、
ホソカイド− ジェイ (Ilokkaido J)
、メト(Med、) 、サイ(Sci、) 、第60巻
:第206頁(1985))のでCCK及びガストリン
の拮抗剤はこれら腫瘍の治療においても有効である。
にその治療的価値があるので、人体あるいは動物の胃腸
系統のガストリン関連疾患、例えば潰瘍、ゾリンジャー
・エリソン症候群、胃前庭G細胞過形成あるいはその他
の同様な症状に対して治療及び予防面で有効に使用され
ている。CCK及びガストリンはある種の腫瘍に対して
属性効果をもっている〔オオヤマ(Ohyama) 、
ホソカイド− ジェイ (Ilokkaido J)
、メト(Med、) 、サイ(Sci、) 、第60巻
:第206頁(1985))のでCCK及びガストリン
の拮抗剤はこれら腫瘍の治療においても有効である。
バージニアマイシン科の抗生物質は家禽、豚、牛の発育
促進用の飼料添加物として使用されている。抗生物質と
発育促進との関係はまだよくわかっていないが、その効
果の程度は腸内細菌叢の抑制に少なからずあるのではな
いかとされている〔コッチート(Coccito )
、ミクロ(Micro、)、レビ(Rev、) 、第4
3巻:第145頁(1979)バージニアマイシンM、
及びその関連抗生物質は一般的にダラム陽性菌に対して
特異性をもち細胞の増殖を阻止する。バージニアマイシ
ン系抗生物質は、それらが複合構造、つまりM及びSコ
ンポーネントをあわせもつときに最も効力を示す〔コソ
チート(Coccito ) 、ミクロ(Micro、
)、レビ(Rev、) 、第43巻:第145頁(19
79))発育促進用としてのこれら抗生物質の多面的利
用性は、毒性が低いこと、動物組織中へ蓄積されない、
抗生物質に対する耐性菌の出現がない、及び便中にすみ
やかに排出されるという点に関連している。
促進用の飼料添加物として使用されている。抗生物質と
発育促進との関係はまだよくわかっていないが、その効
果の程度は腸内細菌叢の抑制に少なからずあるのではな
いかとされている〔コッチート(Coccito )
、ミクロ(Micro、)、レビ(Rev、) 、第4
3巻:第145頁(1979)バージニアマイシンM、
及びその関連抗生物質は一般的にダラム陽性菌に対して
特異性をもち細胞の増殖を阻止する。バージニアマイシ
ン系抗生物質は、それらが複合構造、つまりM及びSコ
ンポーネントをあわせもつときに最も効力を示す〔コソ
チート(Coccito ) 、ミクロ(Micro、
)、レビ(Rev、) 、第43巻:第145頁(19
79))発育促進用としてのこれら抗生物質の多面的利
用性は、毒性が低いこと、動物組織中へ蓄積されない、
抗生物質に対する耐性菌の出現がない、及び便中にすみ
やかに排出されるという点に関連している。
バージニアマイシンM1及び構造式I、III、■なる
化合物は制御された好気的醗酵法によりストレプトマイ
セスオリバセウス株から生産される。
化合物は制御された好気的醗酵法によりストレプトマイ
セスオリバセウス株から生産される。
バージニアマイシンM、及び構造式■、■、■な°る化
合物の醗酵製造に関する本発明では、ストレプトマイセ
スの特異的な種や株に対する使用が限定はされていない
と理解される。パージニアマイ〕、 シンM、及び構造
式■、■、■なる化合物あるいはその他の関連類似体を
生産する限りにおいては、ストレプトマイセス属に含ま
れる、明細中に記載されている培養による産生あるいは
誘導による他の自然的、人工的変異株あるいは、その他
の変異種、変異株の使用というものが、本発明の範囲内
であるということを特に要求し、その目的とする。
ところである。
合物の醗酵製造に関する本発明では、ストレプトマイセ
スの特異的な種や株に対する使用が限定はされていない
と理解される。パージニアマイ〕、 シンM、及び構造
式■、■、■なる化合物あるいはその他の関連類似体を
生産する限りにおいては、ストレプトマイセス属に含ま
れる、明細中に記載されている培養による産生あるいは
誘導による他の自然的、人工的変異株あるいは、その他
の変異種、変異株の使用というものが、本発明の範囲内
であるということを特に要求し、その目的とする。
ところである。
このストレプトマイセス株の変異種、変異株の人工的作
成には一般的な物理的方法あるいは化学的変異誘発物質
を使用する。例えば、記載されている培養菌への紫外線
照射、あるいはニトロソグアニジンまたはその類似物質
などによる処置である。またプラスミドを細菌や真菌あ
るいはその他同様の細胞中へ取り込ませるという最近の
組み換え DNA技術使用の有効性も証明されている。
成には一般的な物理的方法あるいは化学的変異誘発物質
を使用する。例えば、記載されている培養菌への紫外線
照射、あるいはニトロソグアニジンまたはその類似物質
などによる処置である。またプラスミドを細菌や真菌あ
るいはその他同様の細胞中へ取り込ませるという最近の
組み換え DNA技術使用の有効性も証明されている。
バージニアマイシンM1及び構造式I、 I[I、IV
なる化合物は制御された好気的醗酵法により以下に記載
されている特定なストレプトマイセス種から生産される
。このストレプトマイセス種とは、特許作成の目的に対
する微生物の寄託に関する国際認可についてのブダペス
ト条約に基づいてアメリカン タイプ カルチャー コ
レクション(American Type Cu1tu
re Co11ection) 、12301バークロ
ーン(Parklawn) 、ドライブ(Drive
)、ロックビル(Rockville ) 、メリーラ
ンド(Meryland)20852ニーニスエイ(U
、S、A、) 、7月29日付、1986年に寄託され
たもので、AT CCNl53527と指定されたもの
である。
なる化合物は制御された好気的醗酵法により以下に記載
されている特定なストレプトマイセス種から生産される
。このストレプトマイセス種とは、特許作成の目的に対
する微生物の寄託に関する国際認可についてのブダペス
ト条約に基づいてアメリカン タイプ カルチャー コ
レクション(American Type Cu1tu
re Co11ection) 、12301バークロ
ーン(Parklawn) 、ドライブ(Drive
)、ロックビル(Rockville ) 、メリーラ
ンド(Meryland)20852ニーニスエイ(U
、S、A、) 、7月29日付、1986年に寄託され
たもので、AT CCNl53527と指定されたもの
である。
ストレプトマイセス種はインドのピンプリ地方などから
木の根に付着している土壌中より得られたもので発現形
態や培養性状については以下の表に示しである。
木の根に付着している土壌中より得られたもので発現形
態や培養性状については以下の表に示しである。
第1表
形態:胞子柄は不完全ならせん鎖状で15個以上の胞子
が連らなり形づくっている。胞子は球から楕円状で大き
さは約0.9μから0.9×1.2μである。
が連らなり形づくっている。胞子は球から楕円状で大き
さは約0.9μから0.9×1.2μである。
培養性状:イースト・麦芽寒天培地(ISP培地!Ik
L2) V:裏面−灰複色、周辺部灰色 A:白みおびた明灰色、周辺部暗灰色 Sez無 オートミル寒天培地(ISP培地11h3)■:裏面−
明灰黄複色、周辺部灰色 A:白みおびた明灰色、周辺部暗灰色 Sez無 スターチ・無機塩寒天培地(ISP培地患■:裏面−灰
黄複色、周辺部灰色 A:白みかかった明灰色、周辺部暗灰色SP:無 グリセリン・アスパラギン寒天培地(ISP培地11h
5) V:裏面−黄複色、周辺部灰色 A:白みかかった明灰色、周辺部門灰色SP:無 ペプトン−イースト−鉄寒天培地(ISP培地階6) ■=裏裏面−黄色 色:白みかかった薄灰色、周辺部中天色SP:無 メラニン:無 チロシン寒天培地(ISP培地7) V二N面−黄複色、周辺部複色 A:白と灰の混合灰色、周辺部間灰色 SP:淡中複色 ツアペック・ドック寒天培地 V:裏面−灰黄複色 A:白みかかった明灰色 SP:淡中複色 ■==育菌糸(vegetative growth
) ; A =気中菌糸、SP=可溶性色素。
L2) V:裏面−灰複色、周辺部灰色 A:白みおびた明灰色、周辺部暗灰色 Sez無 オートミル寒天培地(ISP培地11h3)■:裏面−
明灰黄複色、周辺部灰色 A:白みおびた明灰色、周辺部暗灰色 Sez無 スターチ・無機塩寒天培地(ISP培地患■:裏面−灰
黄複色、周辺部灰色 A:白みかかった明灰色、周辺部暗灰色SP:無 グリセリン・アスパラギン寒天培地(ISP培地11h
5) V:裏面−黄複色、周辺部灰色 A:白みかかった明灰色、周辺部門灰色SP:無 ペプトン−イースト−鉄寒天培地(ISP培地階6) ■=裏裏面−黄色 色:白みかかった薄灰色、周辺部中天色SP:無 メラニン:無 チロシン寒天培地(ISP培地7) V二N面−黄複色、周辺部複色 A:白と灰の混合灰色、周辺部間灰色 SP:淡中複色 ツアペック・ドック寒天培地 V:裏面−灰黄複色 A:白みかかった明灰色 SP:淡中複色 ■==育菌糸(vegetative growth
) ; A =気中菌糸、SP=可溶性色素。
色調はカラーハーモニーマニュアル(Color ll
armonyManual) (1958、第4版、
コンチェイナーコーポレーション オブ アメリカ、シ
カゴ、イリノイ〕により色別判定した。
armonyManual) (1958、第4版、
コンチェイナーコーポレーション オブ アメリカ、シ
カゴ、イリノイ〕により色別判定した。
ATCC53527の糖質化性をプリドハム・ゴトリー
ブ基礎培地(ISP培地隘9)に以下の表に示しである
炭素源1%を追加して検討した。
ブ基礎培地(ISP培地隘9)に以下の表に示しである
炭素源1%を追加して検討した。
第■表
グルコース + マユトール +アラビノー
ス + マンノース +セルロース −
ラフィノース ±フラクトース + ラムノ
ース +イノシトール + シュクロース +
ラクトース + キシロース +マルトース
+ 〔+=発育良好;±=発育不良あるいは判別しにくいも
の、−=発育なし、(炭素源を含まない)ネガティブコ
ントロール対照〕 生育温度範囲及び酸素要求性についてイーストエキスデ
キストロース・食塩寒天培地を使用して検討した。
ス + マンノース +セルロース −
ラフィノース ±フラクトース + ラムノ
ース +イノシトール + シュクロース +
ラクトース + キシロース +マルトース
+ 〔+=発育良好;±=発育不良あるいは判別しにくいも
の、−=発育なし、(炭素源を含まない)ネガティブコ
ントロール対照〕 生育温度範囲及び酸素要求性についてイーストエキスデ
キストロース・食塩寒天培地を使用して検討した。
結果を以下の表に示す。
第■表
温度範囲(イーストエキス・デキストロース・食塩寒天
培地) 28℃ 発育菌糸及び胞子形成良好 37℃ 発育菌糸及び胞子形成良好 42℃ 生育なし 50℃ 生育なし 酸素要求性(イーストエキス・デキストロース・食塩寒
天培地の穿刺栄養) 好気性である 以上の判定は28℃、3週間培養後に行なう。
培地) 28℃ 発育菌糸及び胞子形成良好 37℃ 発育菌糸及び胞子形成良好 42℃ 生育なし 50℃ 生育なし 酸素要求性(イーストエキス・デキストロース・食塩寒
天培地の穿刺栄養) 好気性である 以上の判定は28℃、3週間培養後に行なう。
pHはすべての培地においてだいたい中性付近(6,8
〜7.2)とする。
〜7.2)とする。
当該菌体の培養性状をバーギーズ マニュアルオブ デ
ターミイナティブ バクテリオロジー(Berger’
s Manual of Determinative
Bacteriology)、第8版、1979、ウ
ィリアムズ アンド ウィルケンス(Williams
& Wilkens) 、ボルチモアー、エムデー(
MD) 、記載のストレプトマイセス種の培養説明書と
比較検討することにより、当該ストレプトマイセス種は
ストレプトマイセス オリバセウス株であると推定した
。
ターミイナティブ バクテリオロジー(Berger’
s Manual of Determinative
Bacteriology)、第8版、1979、ウ
ィリアムズ アンド ウィルケンス(Williams
& Wilkens) 、ボルチモアー、エムデー(
MD) 、記載のストレプトマイセス種の培養説明書と
比較検討することにより、当該ストレプトマイセス種は
ストレプトマイセス オリバセウス株であると推定した
。
醗酵は約20℃から約37℃の温度範囲内で行゛なった
が、28℃が好ましい温度であった。
が、28℃が好ましい温度であった。
一般的に同化性栄養培地の組成は広範囲に及んでいる。
必須栄養培地成分としては、炭素源及び窒素源があげら
れる。その他の必須成分としては、以下の無機塩類があ
る。たとえばナトリウム、カリウム、アンモニウム及び
カルシウムに対する塩素化物、窒素化物、硫酸化物、炭
酸化物そしてリン酸化物などである。更に栄養培地とし
て微量の以下の無機成分源を含むものもある。つまりマ
グネシウム、鉄、銅、マンガン、亜鉛、コバルト等であ
る。炭素源となる代表的なものは、糖、油、有機酸、デ
キストリン、スターチ、グリセロール等。
れる。その他の必須成分としては、以下の無機塩類があ
る。たとえばナトリウム、カリウム、アンモニウム及び
カルシウムに対する塩素化物、窒素化物、硫酸化物、炭
酸化物そしてリン酸化物などである。更に栄養培地とし
て微量の以下の無機成分源を含むものもある。つまりマ
グネシウム、鉄、銅、マンガン、亜鉛、コバルト等であ
る。炭素源となる代表的なものは、糖、油、有機酸、デ
キストリン、スターチ、グリセロール等。
窒素源となる代表的なものは、アミノ酸、野菜汁、及び
エキス(例えば、麦芽、大豆、綿花の種、イチジク、ト
マト、コーンなど)、動物の内臓、種々の加水分解物(
例えば、カゼイン、イースト、等)及びラード嶌あるい
は蒸留可溶化物などの工業的副産物などである。
エキス(例えば、麦芽、大豆、綿花の種、イチジク、ト
マト、コーンなど)、動物の内臓、種々の加水分解物(
例えば、カゼイン、イースト、等)及びラード嶌あるい
は蒸留可溶化物などの工業的副産物などである。
至適条件下の醗酵によるバージニアマイシンMI及び構
造式■、■、■なる化合物の最大生産量は、だいたい2
4時間から96時間の培養により得られるが、約48時
間から72時間の培養が一般的な培養時間とされている
。
造式■、■、■なる化合物の最大生産量は、だいたい2
4時間から96時間の培養により得られるが、約48時
間から72時間の培養が一般的な培養時間とされている
。
醗酵用の菌体としては、微生物の迅速な発育を目的とし
た培地における発育菌糸を使用するか、あるいは、凍結
菌体を直接醗酵装置に殖菌してしまうかである。
た培地における発育菌糸を使用するか、あるいは、凍結
菌体を直接醗酵装置に殖菌してしまうかである。
“シード”培地あるいは“プロダクション培地の用語は
公知の技術用語として使用されている。
公知の技術用語として使用されている。
一般的にシード用培地とは微生物の迅速な発育に使用さ
れるものであり、ここから一部を取り、大量醗酵用のプ
ロダクション用培地に性菌されるべきものである。
れるものであり、ここから一部を取り、大量醗酵用のプ
ロダクション用培地に性菌されるべきものである。
醗酵操作後、蓄積生産されたバージニアマイシンM1及
び構造式■、■、■なる化合物は、常法のクロマトグラ
フィーにより培養培地中より回収される。個々の化合物
は逆相高速クロマトグラフィーにより分離される。
び構造式■、■、■なる化合物は、常法のクロマトグラ
フィーにより培養培地中より回収される。個々の化合物
は逆相高速クロマトグラフィーにより分離される。
バージニアマイシンM、及び構造式■、■、■なる化合
物の全醗酵培地からの分離は、その全培地と、等容量の
水と混ざりにくい、微極性溶媒との混合により行なう。
物の全醗酵培地からの分離は、その全培地と、等容量の
水と混ざりにくい、微極性溶媒との混合により行なう。
その溶媒とは、クロロホルム、エチルアセテート、メチ
ルエチルケトン等であり、メチルエチルケトンが好まし
い。二重層を静置して有機層を補集する。有機層にはバ
ージニアマイシンM、及び構造式■、■、■なる化合物
が含まれている。
ルエチルケトン等であり、メチルエチルケトンが好まし
い。二重層を静置して有機層を補集する。有機層にはバ
ージニアマイシンM、及び構造式■、■、■なる化合物
が含まれている。
それらの化合物の醗酵用培地中からの分離は、それらの
特異的な生物学的活性を基準としている。
特異的な生物学的活性を基準としている。
更に、バージニアマイシンMlの化学的転換により生成
された化合物■及び、そこから導びかれる化合物■、■
などの産生物質についても同様にその生物学的活性につ
いてのアッセイを行なった。
された化合物■及び、そこから導びかれる化合物■、■
などの産生物質についても同様にその生物学的活性につ
いてのアッセイを行なった。
生物学的アッセイは補乳動物胃腺に対するガストリン結
合を測定することであり、動物としてはギエーニアピン
グが好ましく、また、哺乳動物脳(ギューニアビッグが
好ましい)、及び哺乳動物膵Va<ラットが好ましい)
等に対するCCK結合を測定する以上の様な方法よりな
る。
合を測定することであり、動物としてはギエーニアピン
グが好ましく、また、哺乳動物脳(ギューニアビッグが
好ましい)、及び哺乳動物膵Va<ラットが好ましい)
等に対するCCK結合を測定する以上の様な方法よりな
る。
培養培地より分離された活性有機層を減圧下、において
急速乾燥した。温度としては約30℃から約50℃であ
るが、40℃が好ましい、更に、ヘキサンの様な飽和炭
化水素とメタノールの様なアルコールとによる分配抽出
に供した。メタノール層を約30℃から約50℃の間に
おいて、減圧下で急速乾燥した。温度としては40℃が
好ましい、その後、ヘキサン中に対する約50%から約
75%のアセトンを移動相としたシリカゲルクロマトグ
ラフィーを行なった。そして、活性分画物を逆相高速液
体クロマトグラフィー(HP L C)により情製した
。バージニアマイシンM1の構造式■なる化合物への構
造転換は、バージニアマイシンM1の無水ピリジン溶液
に対して、約1モル等価の塩化メタンスルホニルを加え
る事により行なった。メシレーション反応は約25℃、
約20分で行ない、ピリジンは急速乾燥により除去した
。
急速乾燥した。温度としては約30℃から約50℃であ
るが、40℃が好ましい、更に、ヘキサンの様な飽和炭
化水素とメタノールの様なアルコールとによる分配抽出
に供した。メタノール層を約30℃から約50℃の間に
おいて、減圧下で急速乾燥した。温度としては40℃が
好ましい、その後、ヘキサン中に対する約50%から約
75%のアセトンを移動相としたシリカゲルクロマトグ
ラフィーを行なった。そして、活性分画物を逆相高速液
体クロマトグラフィー(HP L C)により情製した
。バージニアマイシンM1の構造式■なる化合物への構
造転換は、バージニアマイシンM1の無水ピリジン溶液
に対して、約1モル等価の塩化メタンスルホニルを加え
る事により行なった。メシレーション反応は約25℃、
約20分で行ない、ピリジンは急速乾燥により除去した
。
乾固物を約1%の食塩水とジクロロメタンとの間におけ
る分配抽出を行ない、有機層を乾燥し逆相HPLCによ
るクロマトグラフィーにかけた。
る分配抽出を行ない、有機層を乾燥し逆相HPLCによ
るクロマトグラフィーにかけた。
構造式■なる化合物を水素化はう素ナトリウム還元剤に
より還元反応を行ない構造式■、■なる化合物を得た。
より還元反応を行ない構造式■、■なる化合物を得た。
構造式■なる化合物のメタノール性溶液に対して若干過
剰量となる約10■/mllのNaBHa /メタノー
ル溶液を1モル等価量加えた。
剰量となる約10■/mllのNaBHa /メタノー
ル溶液を1モル等価量加えた。
精製は醗酵生産物の時と同様の操作がとられた。
バージニアマイシンM1構造式■、■、■、■なる化合
物の生物学的活性は、ガストリンレセプター結合、膵C
CKリセブター結合、脳CCK結合、及び微生物発育阻
止アッセイにより測定した。
物の生物学的活性は、ガストリンレセプター結合、膵C
CKリセブター結合、脳CCK結合、及び微生物発育阻
止アッセイにより測定した。
バージニアマイシンM8、構造式I、I[、■、■なる
化合物を人体も含めて、哺乳動物に投与するに際しては
、それぞれ単独でもよいがむしろ、薬学的許容キャリヤ
ーとの混合物または希釈したもの、あるいは薬学的構成
物質としたものが好ましく、標準薬理実施に従かうもの
である。投与経路には経口あるいは非経口がある。
化合物を人体も含めて、哺乳動物に投与するに際しては
、それぞれ単独でもよいがむしろ、薬学的許容キャリヤ
ーとの混合物または希釈したもの、あるいは薬学的構成
物質としたものが好ましく、標準薬理実施に従かうもの
である。投与経路には経口あるいは非経口がある。
非経口投与には、静脈注射、筋注、腹腔内注射皮下注射
及び局所投薬などがある。
及び局所投薬などがある。
CCKあるいはガストリン拮抗剤として、または抗生物
質として、経口投与する時には選定化合物を以下の例に
おける形で投与される。錠剤、カプセル、あるいは水溶
液、懸濁液などである。
質として、経口投与する時には選定化合物を以下の例に
おける形で投与される。錠剤、カプセル、あるいは水溶
液、懸濁液などである。
経口投与用の錠剤には、一般によく使用されるキャリヤ
ーとして、ラクトース、コーンスターチあるいは潤滑剤
としてステアリン酸マグネシウムなどが含まれている。
ーとして、ラクトース、コーンスターチあるいは潤滑剤
としてステアリン酸マグネシウムなどが含まれている。
経口投与用のカプセルには、有効な希釈剤としてラクト
ースや、乾燥コーンスターチが含まれている。
ースや、乾燥コーンスターチが含まれている。
経口投与用の水性懸濁液とした時には、活性成分は乳化
剤あるいは懸濁剤との調合が行なわれる。
剤あるいは懸濁剤との調合が行なわれる。
家畜に対する抗生物質として経口投与する時には、構造
式■、■、■、■なる化合物を動物用飼料に加えてやれ
ばよい。もし必要があれば、甘味剤や、あるいは芳香成
分を加えてやればよい。筋注、腹腔内、皮下、及び静脈
内注射として使用するためには、活性成分を滅菌溶液に
溶かし、pHに関して調整及びその溶液の緩衝作用に注
意すべきである。特に静注の際には、その溶質の総濃度
を等張的調製をすることによって制御する。
式■、■、■、■なる化合物を動物用飼料に加えてやれ
ばよい。もし必要があれば、甘味剤や、あるいは芳香成
分を加えてやればよい。筋注、腹腔内、皮下、及び静脈
内注射として使用するためには、活性成分を滅菌溶液に
溶かし、pHに関して調整及びその溶液の緩衝作用に注
意すべきである。特に静注の際には、その溶質の総濃度
を等張的調製をすることによって制御する。
バージニアマイシンMl、構造式■、■、■、■なる化
合物をCCKあるいはガストリンの拮抗剤あるいは抗生
物質として人体用に適用する時には、−日あたりの投薬
量はもっばら医師の処方により決定される。更に投薬量
は患者例々の年令、体重及び感受性に従がうものであり
、また、その患者の症状の度合にもよるであろう。しか
しながら、一般的な実例としては、効果的な一日あたり
の投薬量は約1■から約1500■の範囲にあるであろ
う。
合物をCCKあるいはガストリンの拮抗剤あるいは抗生
物質として人体用に適用する時には、−日あたりの投薬
量はもっばら医師の処方により決定される。更に投薬量
は患者例々の年令、体重及び感受性に従がうものであり
、また、その患者の症状の度合にもよるであろう。しか
しながら、一般的な実例としては、効果的な一日あたり
の投薬量は約1■から約1500■の範囲にあるであろ
う。
好ましい量としては、1回でもあるいは数回に分けても
よいが、10■から500■であろう。
よいが、10■から500■であろう。
これに反して、場合によっては、これら許容範囲を超え
て使用することも必要であろう。
て使用することも必要であろう。
構造式I、■、■、■なる化合物を家畜用の経口抗生物
質として使用する際には対応゛動物の種、年、体重によ
り一日の投与量を決定する。効果的投与量はその飼料容
量あたり約5から約200ppmがよいであろう。
質として使用する際には対応゛動物の種、年、体重によ
り一日の投与量を決定する。効果的投与量はその飼料容
量あたり約5から約200ppmがよいであろう。
バージニアマイシンM+ 、Jlt造式I、■、■、■
なる化合物はCCKあるいはガストリンレセプターにそ
れぞれ結合する。それによってバージニアマイシンM、
や4つの類僚化合物は食欲調節や胃腸内及び中枢神経系
のCCK−関連疾患に対する治療においモユニークな機
能を果たすものである。バージニアマイシンM、や4つ
の類似化合物のガストリン拮抗剤としてのユニークな作
用により、潰瘍、ゾリンジャー・エリソン症候群あるい
は胃前庭G細胞過形成などにみられるガストリン−関連
疾患の治療及び予防において利用されている。
なる化合物はCCKあるいはガストリンレセプターにそ
れぞれ結合する。それによってバージニアマイシンM、
や4つの類僚化合物は食欲調節や胃腸内及び中枢神経系
のCCK−関連疾患に対する治療においモユニークな機
能を果たすものである。バージニアマイシンM、や4つ
の類似化合物のガストリン拮抗剤としてのユニークな作
用により、潰瘍、ゾリンジャー・エリソン症候群あるい
は胃前庭G細胞過形成などにみられるガストリン−関連
疾患の治療及び予防において利用されている。
4つのi(U構造化合物も抗生物質因子としての機能を
もち微生物感染の際の治療に用いられる。
もち微生物感染の際の治療に用いられる。
以下の実施例は本発明を実例をあげて説明したものであ
るが、それに限定されるものではない。
るが、それに限定されるものではない。
爽旌拠上
朋
凍結乾燥されているストレプトマイセスATCC第53
527番の菌体を、無菌的条件下で54mβのシード用
培地を含む、250mj!用のパンフル付きエレンメイ
ヤーフラスコに入れる。
527番の菌体を、無菌的条件下で54mβのシード用
培地を含む、250mj!用のパンフル付きエレンメイ
ヤーフラスコに入れる。
シード用培地は以下の物質を含む。デキストロース、1
gm/l:可溶性澱粉、10 g/l ;ビーフェキス
、3g/j!;アルダミンpH,5g/j2;NZアミ
ン5 g / 1 ; MgSO4・7HzO,0,0
8g/l;リン酸緩衝?夜、2mj2 / l ; C
aC0z 、0.5μl10 尚、培地のptlは、7.0〜7.2.28℃、48時
間、220rpmの回転振盪培養とする。この48時間
の培養後、その一部10…2を無菌的に500m1の培
地が入っている2β用のバッフル付きエレンメイヤーフ
ラスコへ移入する。28℃、24時間、220rpmの
回転振盪培養を行なう。第2シード培養により得られた
500Illlの菌液を101のプロダクション用培地
の入った14g用の醗酵装置に注入する。プロダクショ
ン用培地は以下の物質を含む。
gm/l:可溶性澱粉、10 g/l ;ビーフェキス
、3g/j!;アルダミンpH,5g/j2;NZアミ
ン5 g / 1 ; MgSO4・7HzO,0,0
8g/l;リン酸緩衝?夜、2mj2 / l ; C
aC0z 、0.5μl10 尚、培地のptlは、7.0〜7.2.28℃、48時
間、220rpmの回転振盪培養とする。この48時間
の培養後、その一部10…2を無菌的に500m1の培
地が入っている2β用のバッフル付きエレンメイヤーフ
ラスコへ移入する。28℃、24時間、220rpmの
回転振盪培養を行なう。第2シード培養により得られた
500Illlの菌液を101のプロダクション用培地
の入った14g用の醗酵装置に注入する。プロダクショ
ン用培地は以下の物質を含む。
コーングルテンミール、5.0g/l;プリマトンH5
,2,5g/l:酵母エキス(ディフコ)、1.0g/
l:麦芽エキス、10.0g/Il;シュクロース、5
.0 g/ 1 :CaCO5,5,0g/ l ;
P −2000,2,0m l。pHは、7.2〜7.
4.28℃、64時間、毎分31の通気、400rpm
の攪拌培養を行なう。
,2,5g/l:酵母エキス(ディフコ)、1.0g/
l:麦芽エキス、10.0g/Il;シュクロース、5
.0 g/ 1 :CaCO5,5,0g/ l ;
P −2000,2,0m l。pHは、7.2〜7.
4.28℃、64時間、毎分31の通気、400rpm
の攪拌培養を行なう。
去11江1
バージニアマイシンM、及び構造式I、■、■なゑ北澄
潰9」」μΔ」壮口し一一一一一一一〜−−実施例1に
よる菌体培養液401総べてを、481のメチルエチル
ケトンで抽出。有機層は生物学的活性を示し、40℃に
おける減圧操作で瞬間的に乾燥する。乾燥物質は、11
のヘキサンと11のメタノールにより分配抽出し、ヘキ
サン層を除去する。活性物質を含むメタノール層は40
℃、減圧下で急速乾燥し、50gの乾固物とする。シリ
カゲル60 (4μl11)、500g使用、50%ア
セトン/ヘキサン溶媒系による迅速なりロマトグラフィ
ーを5回繰り返し、75%アセトン/ヘキサンによる展
開層から活性分画物として3gの乾燥物質を得る。次に
ゾルパックスC−8,2,12X25CIlOカラムに
よる。逆相高速流体クロマトグラフィーを室温で3回繰
り返し溶媒組成の一定なイソクラチック移動相として、
40%アセトニトリル/水系により15mj2/min
の流速で、バージニアマイシンM+、92■;構造式I
なる化合物、5.2■;構造式m、16.4 mg ;
構造式■、25、9 ovを得る。本醗酵法により分離
し゛たバージニアマイシンM1の生理化学的性状はキン
グストン(Kingstone )等による文献〔ジエ
イ(J、)、ケム(Chem、 ) 、ツク(Soc、
) 、第19巻;第1669頁(1966))、及び市
販利用されているバージニアマイシンの精製により得た
確認済みサンプルとの比較により電子イオン法質量スペ
クトル、’H−NMRデーター(M”=525)として
同定された。
潰9」」μΔ」壮口し一一一一一一一〜−−実施例1に
よる菌体培養液401総べてを、481のメチルエチル
ケトンで抽出。有機層は生物学的活性を示し、40℃に
おける減圧操作で瞬間的に乾燥する。乾燥物質は、11
のヘキサンと11のメタノールにより分配抽出し、ヘキ
サン層を除去する。活性物質を含むメタノール層は40
℃、減圧下で急速乾燥し、50gの乾固物とする。シリ
カゲル60 (4μl11)、500g使用、50%ア
セトン/ヘキサン溶媒系による迅速なりロマトグラフィ
ーを5回繰り返し、75%アセトン/ヘキサンによる展
開層から活性分画物として3gの乾燥物質を得る。次に
ゾルパックスC−8,2,12X25CIlOカラムに
よる。逆相高速流体クロマトグラフィーを室温で3回繰
り返し溶媒組成の一定なイソクラチック移動相として、
40%アセトニトリル/水系により15mj2/min
の流速で、バージニアマイシンM+、92■;構造式I
なる化合物、5.2■;構造式m、16.4 mg ;
構造式■、25、9 ovを得る。本醗酵法により分離
し゛たバージニアマイシンM1の生理化学的性状はキン
グストン(Kingstone )等による文献〔ジエ
イ(J、)、ケム(Chem、 ) 、ツク(Soc、
) 、第19巻;第1669頁(1966))、及び市
販利用されているバージニアマイシンの精製により得た
確認済みサンプルとの比較により電子イオン法質量スペ
クトル、’H−NMRデーター(M”=525)として
同定された。
さらに、1illLW済みサンプルと、バージニアマイ
シンM、についての生物学的/生化学的なテストが行な
われた。
シンM、についての生物学的/生化学的なテストが行な
われた。
両サンプルは同一のHPLC保持時間、UVスペクトル
(λmax−210,5nm;E%=535)を示した
。300MHz H’−H’同−核相関N M Nスペ
クトルが最初の性状として記録された。
(λmax−210,5nm;E%=535)を示した
。300MHz H’−H’同−核相関N M Nスペ
クトルが最初の性状として記録された。
構造式Iなる化合物は高分解能質量スペクトルデーター
により、分子式Cz IIHz s N 30 b
(計算値: 509.2526 : 実測値: 50
9.2528)であることが示された。300MH2H
’−NMRスペクトル、CDzCl z使用、第1図参
照、により、この化合物の精製、同定がより一層確かな
ものとなった。
により、分子式Cz IIHz s N 30 b
(計算値: 509.2526 : 実測値: 50
9.2528)であることが示された。300MH2H
’−NMRスペクトル、CDzCl z使用、第1図参
照、により、この化合物の精製、同定がより一層確かな
ものとなった。
CD2Cl 2使用のブロードバンドデカンブリングC
ICl5−Nスペクトルは以下の共鳴を示す。
ICl5−Nスペクトルは以下の共鳴を示す。
12.11; 18.82: 19.77; 2
0.34; 29.91;30.13; 36.7
7; 38,87; 42.26; 51.08
; 70.93;82.46: 123.77;
123.85; 125.78; 126.46
;127.11; 127.72; 129.20
; 132.85フ 132.93;135.20;
137゜13: 143.29; 143.5
8: 161.37:161.86; 167.1
3 ppm。
0.34; 29.91;30.13; 36.7
7; 38,87; 42.26; 51.08
; 70.93;82.46: 123.77;
123.85; 125.78; 126.46
;127.11; 127.72; 129.20
; 132.85フ 132.93;135.20;
137゜13: 143.29; 143.5
8: 161.37:161.86; 167.1
3 ppm。
メタノールによる紫外スペクトルは最大吸収212nn
+(E%=557)及び274.5nm (E%=76
4)を持ち、cuzc I!!溶液による赤外スペクト
ルは、3595; 3375; 1730; 16
70;1620cm−’において、それぞれ吸収バンド
が認められた。培養による本来の物質あるいは、その半
合成物質、実施例4について、質量スペクトル、H’−
NMRスペクトル、UVスペクトル、HPLC保持時間
での同定を行ない、以下の構造式を推定した。
+(E%=557)及び274.5nm (E%=76
4)を持ち、cuzc I!!溶液による赤外スペクト
ルは、3595; 3375; 1730; 16
70;1620cm−’において、それぞれ吸収バンド
が認められた。培養による本来の物質あるいは、その半
合成物質、実施例4について、質量スペクトル、H’−
NMRスペクトル、UVスペクトル、HPLC保持時間
での同定を行ない、以下の構造式を推定した。
O
構造式■なる化合物は高分解能質量スペクトルにより分
子式Cz s Hx z N 30 b (計算値:
507.2369;実測値=507.2369) 、3
00 MHz H’−NMRスペクトル、CD、C1t
、第3図参照、ブロードバンドデカップリング C1C
13−Nスペクトル、CO□C1,、の共鳴は以下の通
りである。
子式Cz s Hx z N 30 b (計算値:
507.2369;実測値=507.2369) 、3
00 MHz H’−NMRスペクトル、CD、C1t
、第3図参照、ブロードバンドデカップリング C1C
13−Nスペクトル、CO□C1,、の共鳴は以下の通
りである。
12.19; 18.78; 1960; 21
.37; 30.10;30.22; 37.60
: 40.65; 42.04; 52.33;
81.18;125.38; 126.56:
126.79; 127.25; 129,46
;131.85: 136.98; 142.91
; 143.20; 143.32;146゜19
; 160.28; 160.54: 167.
12:及び192.78ppm。
.37; 30.10;30.22; 37.60
: 40.65; 42.04; 52.33;
81.18;125.38; 126.56:
126.79; 127.25; 129,46
;131.85: 136.98; 142.91
; 143.20; 143.32;146゜19
; 160.28; 160.54: 167.
12:及び192.78ppm。
メタノールによる紫外スペクトルの最大吸収212nm
(E%=545.5)及び325nm(E%=417)
。CHzC1g溶液による赤外スペクトルの吸収バンド
3380; 1730; 1662;1625 a
m−’、培養による本来の物質あるいは半合成物質、実
施例3、質量スペクトル、H’−NMRスペクトル、U
vスペクトル、HPLC保持時間により、以下の構造式
を推定した。
(E%=545.5)及び325nm(E%=417)
。CHzC1g溶液による赤外スペクトルの吸収バンド
3380; 1730; 1662;1625 a
m−’、培養による本来の物質あるいは半合成物質、実
施例3、質量スペクトル、H’−NMRスペクトル、U
vスペクトル、HPLC保持時間により、以下の構造式
を推定した。
構造式■なる化合物、ビス−トリメチルシリル誘導構造
物、の高分解能質量スペクトルによる分子式はCz*H
xsNzOi+Tz (計算値: 653.3316゜
実測値: 653.3452)である。300MHzH
’−NMRスペクトル、co、cl、、第4図参照。メ
タノールによる紫外スペクトルはバージニアマイシンM
1のデーグーとほとんど同一であり、213nm(E%
=542)に最大吸収をもち以下の構造式を推定した。
物、の高分解能質量スペクトルによる分子式はCz*H
xsNzOi+Tz (計算値: 653.3316゜
実測値: 653.3452)である。300MHzH
’−NMRスペクトル、co、cl、、第4図参照。メ
タノールによる紫外スペクトルはバージニアマイシンM
1のデーグーとほとんど同一であり、213nm(E%
=542)に最大吸収をもち以下の構造式を推定した。
実施例2または市販されている物より得たバージニアマ
イシンMIを無水ピリジン溶液5Illl中でバージニ
アマイシンM、、199.36■に0.2+1/の塩化
メタンスルホニルを加える事により、構造式■なる化合
物へと構造転換した。メシレーション反応は室温、20
分で行なう。
イシンMIを無水ピリジン溶液5Illl中でバージニ
アマイシンM、、199.36■に0.2+1/の塩化
メタンスルホニルを加える事により、構造式■なる化合
物へと構造転換した。メシレーション反応は室温、20
分で行なう。
ピリジンなる溶媒の急速蒸発を減圧下、40℃で行ない
、乾固物を得る。1%食塩水、20ne!とジクロロメ
タン(2X 25m1)によるこの乾固物の分配抽出物
質を無水NazSO,で有機層を乾燥し、減圧下、40
℃における溶媒の迅速な除去によって245■の粗生産
物とした。高速液体クロマトグラフィーの分析から、こ
の生産物は、その主成分物質として、化合物■が大部分
を示し、バージニアマイシンM、の残存がなかった事を
示している。調製用逆相クロマトグラフィー、ゾルパッ
クスODSカラム使用にこの粗生産物をのせ、移動相と
して40%水性MeCNより15mA!/分の流速で、
精製化合物■を88.15■得た。
、乾固物を得る。1%食塩水、20ne!とジクロロメ
タン(2X 25m1)によるこの乾固物の分配抽出物
質を無水NazSO,で有機層を乾燥し、減圧下、40
℃における溶媒の迅速な除去によって245■の粗生産
物とした。高速液体クロマトグラフィーの分析から、こ
の生産物は、その主成分物質として、化合物■が大部分
を示し、バージニアマイシンM、の残存がなかった事を
示している。調製用逆相クロマトグラフィー、ゾルパッ
クスODSカラム使用にこの粗生産物をのせ、移動相と
して40%水性MeCNより15mA!/分の流速で、
精製化合物■を88.15■得た。
叉亙斑土
構造式■ び■なる化合物の合成
化合物■を構造式■あるいは■なる物質へと構造転換し
た。
た。
実施例1あるいは実施例3から得た化合物■を含むメタ
ノール性溶液(10n+42)に10rrg/Tl12
NaBHa /MeOH溶液Q、 5 m lを加え、
高速流体クロマトグラフィーの分析より反応はすみやか
に行こなわれ、生産物は化合物I及びそのエピマー、化
合物■を含んでいた。
ノール性溶液(10n+42)に10rrg/Tl12
NaBHa /MeOH溶液Q、 5 m lを加え、
高速流体クロマトグラフィーの分析より反応はすみやか
に行こなわれ、生産物は化合物I及びそのエピマー、化
合物■を含んでいた。
反応をさらに進めた後、その反応混合液にアセトン、0
.In+jl!を加え種々の過剰反応試薬を分解した。
.In+jl!を加え種々の過剰反応試薬を分解した。
1%食塩水、501I11とCl1tCj2z 、2x
50n+j!によるこの混合物の分配抽出物を無水Na
、SO4で有機層を乾燥し、減圧下、30℃における蒸
発により54.8■の産物を得た。調製用ゾルパックス
ODSカラム、2.12X25cm、イソクラチック移
動相として35%水成MeCNよりこの産物を精製、1
5mj!/分の流速、室温において、27.69■の化
合物I及び15.7■のエピマー、構造式■なる化合物
を得た。
50n+j!によるこの混合物の分配抽出物を無水Na
、SO4で有機層を乾燥し、減圧下、30℃における蒸
発により54.8■の産物を得た。調製用ゾルパックス
ODSカラム、2.12X25cm、イソクラチック移
動相として35%水成MeCNよりこの産物を精製、1
5mj!/分の流速、室温において、27.69■の化
合物I及び15.7■のエピマー、構造式■なる化合物
を得た。
構造式Iなる化合物の生理化学的性状は実施例2に記載
されている。構造式■なる化合物の高分解能質量スペク
トルデーターは、分子式がCzsHssN*Ob (
計算値: 509.2526 ; 実測値: 509
.2528)であることを示している。300MHz
H’ −NMRスペクトル、CDtCl z使用、第2
図参照によりこの化合物の精製、同定がより一層確かな
ものとなった。cDtclt使用のブロードバンドデカ
ップリングCICl5−Nスペクトルは以下の共鳴を示
す。
されている。構造式■なる化合物の高分解能質量スペク
トルデーターは、分子式がCzsHssN*Ob (
計算値: 509.2526 ; 実測値: 509
.2528)であることを示している。300MHz
H’ −NMRスペクトル、CDtCl z使用、第2
図参照によりこの化合物の精製、同定がより一層確かな
ものとなった。cDtclt使用のブロードバンドデカ
ップリングCICl5−Nスペクトルは以下の共鳴を示
す。
12.03; 18.83; 19.6’l 2
0.47; 30.07;35.95; 39.1
0; 42.06; 51.04; 69.88
; 81.75;124.39; 124.47;
125.52; 126.98; 127.5
1;127.57; 129.60; 129.6
2; 132.6b 135.19;137.19
; 143.22; 143.50; 161.
23; 161.90及び167.04 pp++1
゜ メタノールによる紫外スペクトルは最大吸収212nm
(E%=522)及び274.5nm(E%=701)
を持ち、CH,Cl 2溶液による赤外スペクトルは、
3600; 3375; 1730; 1670;
1625CIm−’において、それぞれ吸収バンドが認
められた。これらの性状から以下の構造式を推定した。
0.47; 30.07;35.95; 39.1
0; 42.06; 51.04; 69.88
; 81.75;124.39; 124.47;
125.52; 126.98; 127.5
1;127.57; 129.60; 129.6
2; 132.6b 135.19;137.19
; 143.22; 143.50; 161.
23; 161.90及び167.04 pp++1
゜ メタノールによる紫外スペクトルは最大吸収212nm
(E%=522)及び274.5nm(E%=701)
を持ち、CH,Cl 2溶液による赤外スペクトルは、
3600; 3375; 1730; 1670;
1625CIm−’において、それぞれ吸収バンドが認
められた。これらの性状から以下の構造式を推定した。
大施炭立
ギューニアピング胃腺におけるガストリンリセプター結
合 ギューニアビッグ胃粘膜腺をプライスマン(Prais
sman )等の方法により調製〔ジエイ(J、)、リ
セプター(Receptor) レス(Res、) 、
第3巻:第647頁(1983))。雄のハートレイギ
ューニアピッグ(体重250〜400 g)から摘出し
た胃をよく洗浄し、良く切れるハサミで)IEPEs緩
衝液中において細かく切りきざむ。HEPES緩衝液の
組成は以下の通りである。130mM NaC1,12
mM NatlCO3,3mM NaHzPO4,
3mM NatllPO4,31IIM にzll
PO4,2mM MgSO4,1mM CaCl
z、5mMグルコース及び4mM L−グルタミン、
25m M HE P E Sよりなり、pHは7.
4である。細かくされた組織は洗浄後0.1%コラゲナ
ーゼ、0.1%ウシ血清アルブミン(B S A)を含
むHE P E S緩衝液により振盪恒温槽中、37℃
40分間、95%0□と5%CO2のバブリングと伴に
インキュベーションする。この組織を5nlのガラスシ
リンジに2回通して胃腺を遊離した。
合 ギューニアビッグ胃粘膜腺をプライスマン(Prais
sman )等の方法により調製〔ジエイ(J、)、リ
セプター(Receptor) レス(Res、) 、
第3巻:第647頁(1983))。雄のハートレイギ
ューニアピッグ(体重250〜400 g)から摘出し
た胃をよく洗浄し、良く切れるハサミで)IEPEs緩
衝液中において細かく切りきざむ。HEPES緩衝液の
組成は以下の通りである。130mM NaC1,12
mM NatlCO3,3mM NaHzPO4,
3mM NatllPO4,31IIM にzll
PO4,2mM MgSO4,1mM CaCl
z、5mMグルコース及び4mM L−グルタミン、
25m M HE P E Sよりなり、pHは7.
4である。細かくされた組織は洗浄後0.1%コラゲナ
ーゼ、0.1%ウシ血清アルブミン(B S A)を含
むHE P E S緩衝液により振盪恒温槽中、37℃
40分間、95%0□と5%CO2のバブリングと伴に
インキュベーションする。この組織を5nlのガラスシ
リンジに2回通して胃腺を遊離した。
次に200メツシユナイロンを使用して、フィルトレー
ジョンし、得られた腺を270Xg、5分間の遠心にか
け、この遠心沈澱、サスペンションを2回繰り返して、
洗浄をする。洗浄後ギューニアビッグ胃腺を0.25■
/Illのバシトラシンを含む25IIllのHEPE
S緩衝液で再浮遊させる。結合試験を行なうために、1
4.2μlの50%MeOH/IIzO(&@結合)、
ガストリン(最終濃度1μ門、非特異的結合)、培地、
実施例2.3、4より得た被検化合物、以上のサンプル
プルをそれぞれ20μlの125)−ガストリンにュー
イングランドヌユークリアー(Nei+ Englan
d Nuclear )(NEN ) 、20.000
cpm 20μl)と供に95%0t15%CO!で充
満されている220μlの青線の入ったチューブ3本づ
つに分注し密閉する。
ジョンし、得られた腺を270Xg、5分間の遠心にか
け、この遠心沈澱、サスペンションを2回繰り返して、
洗浄をする。洗浄後ギューニアビッグ胃腺を0.25■
/Illのバシトラシンを含む25IIllのHEPE
S緩衝液で再浮遊させる。結合試験を行なうために、1
4.2μlの50%MeOH/IIzO(&@結合)、
ガストリン(最終濃度1μ門、非特異的結合)、培地、
実施例2.3、4より得た被検化合物、以上のサンプル
プルをそれぞれ20μlの125)−ガストリンにュー
イングランドヌユークリアー(Nei+ Englan
d Nuclear )(NEN ) 、20.000
cpm 20μl)と供に95%0t15%CO!で充
満されている220μlの青線の入ったチューブ3本づ
つに分注し密閉する。
反応混合液は、振盪恒温槽中、25℃、30分間のイン
キュページジン後ガラスGF/Bフィルター(ワットマ
ン)を使用して、減圧下でフィルトレージョンを得ない
、0.1%BSAフラクション■を含むHEPES緩衝
液4緩衝液4凹lみやかに洗浄を行なう。フィルター上
に吸着している放射活性物質、125 I−ガストリン
をベックマン5500ガンマ−カウンターで測定。ガス
トリン結合アッセイの結果を以下の表に示した。
キュページジン後ガラスGF/Bフィルター(ワットマ
ン)を使用して、減圧下でフィルトレージョンを得ない
、0.1%BSAフラクション■を含むHEPES緩衝
液4緩衝液4凹lみやかに洗浄を行なう。フィルター上
に吸着している放射活性物質、125 I−ガストリン
をベックマン5500ガンマ−カウンターで測定。ガス
トリン結合アッセイの結果を以下の表に示した。
第■表
ガストリンリセプター結合
化合物 rc、。(nM)バージニ
アマイシンM 、 710n
13 I[190 ■360 放射性@!J質標識CCK−8は”’ I−CCK −
8として、ニューイングランドヌユークリアー社より入
手。リセプター結合試験はイニス(lnnis )及び
シンダー(Snyder) (ブロク(Proc、
) 、ナトル(Natl、)、アカド(Acad、 )
、サイ(Sci、 ) 、。
アマイシンM 、 710n
13 I[190 ■360 放射性@!J質標識CCK−8は”’ I−CCK −
8として、ニューイングランドヌユークリアー社より入
手。リセプター結合試験はイニス(lnnis )及び
シンダー(Snyder) (ブロク(Proc、
) 、ナトル(Natl、)、アカド(Acad、 )
、サイ(Sci、 ) 、。
第77巻:第 6917頁(1980)〕の方法により
行なうか、以下の点において若干の改良を施こした。つ
まり ”J−CCKリセプター結合アッセイにはなんら
影響を与えない、プロテアーゼインヒビター、ぶつ化フ
ェニルメタンスルホニル(PMSF)及びO−フェナン
トロリンを加える事である。すべてのアッセイは、−サ
ンプルあたり、3点測定とした。膵すセブター膜は、プ
リンクマンポリトロンPTIO(ブリンクマン)を使用
し、pH7,7のトリス−塩酸(50mM) 30ml
中で1g新鮮ラット膵臓組織のホモジナイズより得た。
行なうか、以下の点において若干の改良を施こした。つ
まり ”J−CCKリセプター結合アッセイにはなんら
影響を与えない、プロテアーゼインヒビター、ぶつ化フ
ェニルメタンスルホニル(PMSF)及びO−フェナン
トロリンを加える事である。すべてのアッセイは、−サ
ンプルあたり、3点測定とした。膵すセブター膜は、プ
リンクマンポリトロンPTIO(ブリンクマン)を使用
し、pH7,7のトリス−塩酸(50mM) 30ml
中で1g新鮮ラット膵臓組織のホモジナイズより得た。
ホモジネートを2回洗浄し、4B、000Xg、4℃、
10分間の遠心により沈澱物として補集。
10分間の遠心により沈澱物として補集。
この膜性澱物を5mMジチオスレイトール、0.1mM
バシトラシン、5mM MgC1z ihO,0,2
%加熱処理BSA、1.2mM PMSF、0.5m
M O−フェナントロリンを含むアッセイ用緩衝液で
再遊淫する。濃度は100m1/1gの膵臓とする。
バシトラシン、5mM MgC1z ihO,0,2
%加熱処理BSA、1.2mM PMSF、0.5m
M O−フェナントロリンを含むアッセイ用緩衝液で
再遊淫する。濃度は100m1/1gの膵臓とする。
0.45m1の膜調製物の入ったチューブに、氷水中に
おいて25μlのアッセイ用緩衝液(総結合)、非標識
CCK26−33(非特異的結合)、培地、実施例2.
3.4より得た、被検化合物をそれぞれ、25 p l
(D ”’I−CCKト供に加え、ツレらのサンプルに
よる特異的CCK結合に対する阻止を判定した。
おいて25μlのアッセイ用緩衝液(総結合)、非標識
CCK26−33(非特異的結合)、培地、実施例2.
3.4より得た、被検化合物をそれぞれ、25 p l
(D ”’I−CCKト供に加え、ツレらのサンプルに
よる特異的CCK結合に対する阻止を判定した。
反応混合液は手足に混ぜ合わせた後37℃の恒温水槽中
で30分間ゆるやかに振盪する。更に1■/ll11の
ウシ血清アルブミンを含むpl+7.7、氷冷トリス緩
衝液4mlで希釈し、直ちにワットマンCF/Bフィル
ターによりフィルトレージョンする。フィルターを同一
緩衝液4tmlで3回洗浄後、フィルター上に吸着して
いる放射活性物質をベックマンガンマ5500カウンタ
ーで測定。それぞれのサンプルはもとのサンプルに2倍
量のアセトンを加え、1500g、10分間の遠心上清
を凍結乾燥しその乾燥物質をメタノール/水(l:1)
に入れてアッセイ用試料とした。膵CCK結合ア、ツセ
イの結果を以下の表に示した。
で30分間ゆるやかに振盪する。更に1■/ll11の
ウシ血清アルブミンを含むpl+7.7、氷冷トリス緩
衝液4mlで希釈し、直ちにワットマンCF/Bフィル
ターによりフィルトレージョンする。フィルターを同一
緩衝液4tmlで3回洗浄後、フィルター上に吸着して
いる放射活性物質をベックマンガンマ5500カウンタ
ーで測定。それぞれのサンプルはもとのサンプルに2倍
量のアセトンを加え、1500g、10分間の遠心上清
を凍結乾燥しその乾燥物質をメタノール/水(l:1)
に入れてアッセイ用試料とした。膵CCK結合ア、ツセ
イの結果を以下の表に示した。
第7表
膵CCKリセプター結合
化合物 IC5゜(nM)バージニ
アマイシンM + >100.0001、
>1(1,000n
>to、oo。
アマイシンM + >100.0001、
>1(1,000n
>to、oo。
m >10,00
0天】〔IL 脳コレシストキニンリセプター結合アッセイCCK−8
結合試験は膵すセプターアソセイ方法にサイト−(Sa
ito )等〔ジエイ (J、)、ニューロケム(Ne
urochem、) 、+第37巻:第483頁(19
81))が改良を加えた方法に従かった。
0天】〔IL 脳コレシストキニンリセプター結合アッセイCCK−8
結合試験は膵すセプターアソセイ方法にサイト−(Sa
ito )等〔ジエイ (J、)、ニューロケム(Ne
urochem、) 、+第37巻:第483頁(19
81))が改良を加えた方法に従かった。
雄のハートレイギューニアピングより摘出した脳(30
0〜500 g)を7.58g/j!)リズマ−7,4
(25℃においてpH7,4を示す〕を加えた氷冷50
1I+Mトリスー塩酸中に移す。脳皮質を切開し、リセ
プター源とする。新鮮ギューニアビッグ脳組織それぞれ
1gに対して、10m1lのトリス/トリズマ緩衝液、
pl+7.4でブリンクマンポリトロンPT−10によ
りホモシナイスした。このホモジネートを42.000
Xg、15分間の遠心により、ペレットとして、次に以
下の組成からなる結合アッセイ緩衝液200溶量により
再浮遊した。
0〜500 g)を7.58g/j!)リズマ−7,4
(25℃においてpH7,4を示す〕を加えた氷冷50
1I+Mトリスー塩酸中に移す。脳皮質を切開し、リセ
プター源とする。新鮮ギューニアビッグ脳組織それぞれ
1gに対して、10m1lのトリス/トリズマ緩衝液、
pl+7.4でブリンクマンポリトロンPT−10によ
りホモシナイスした。このホモジネートを42.000
Xg、15分間の遠心により、ペレットとして、次に以
下の組成からなる結合アッセイ緩衝液200溶量により
再浮遊した。
緩衝液:10mMN2−ヒドロキシ−エチル−ピペラジ
ン−N′−2−エタン−硫酸(IIHPEs)、25℃
においてpH7,7、mM MgC1z 、ln+Mエ
チレングリコール−ビス−(β−アミノ−エチル−エー
テル−N、N’−四酢酸(EGTA) 、0.4%BS
A及び0.25 rrg/rn lバシトラシン、p+
+e、sより成る。結合アッセイ方法のこの続きは実施
例6記載の膵すセプターアセツイ法でよいが、フィルト
レージョン前の反応混合液のインキュベーションは25
℃、2時間とし、またフィルターの洗浄にはHEPES
緩衝液を使用する。
ン−N′−2−エタン−硫酸(IIHPEs)、25℃
においてpH7,7、mM MgC1z 、ln+Mエ
チレングリコール−ビス−(β−アミノ−エチル−エー
テル−N、N’−四酢酸(EGTA) 、0.4%BS
A及び0.25 rrg/rn lバシトラシン、p+
+e、sより成る。結合アッセイ方法のこの続きは実施
例6記載の膵すセプターアセツイ法でよいが、フィルト
レージョン前の反応混合液のインキュベーションは25
℃、2時間とし、またフィルターの洗浄にはHEPES
緩衝液を使用する。
脳CCK結合アッセイの結果を以下の表に示した。
第■表
脳CCKリセプター結合
化合物 IC3゜(nM)バージニ
アマイシンM 、 571■7.8 ■6.I III 13.3■
270実施例8 抗生物質活性 構造式I、■、■なる化合物及びバージニアマイシンM
1は実施例2により調製されマツセン(Matsen)
及びバーリー(Barry ) (マニュアルオブ
クリニカル ミクロバイオロジー、レネソティ(Len
nette) 、スボルディング(Spaulding
)及びトルーアント(Truant) 、共著、アメリ
カン(American)ソサアイアティ(Socie
ty )フォーミクロバイオロジー(Microbio
logy) 、ワシントン、デー、シー0.第418頁
(1974))の報告による方法により、その抗生物質
活性をアッセイした。構造式I、■、■なる化合物及び
バージニアマイシンM、の段階希釈したものに対する最
小発育阻止濃度(M I C)を標準円形濾紙法により
判定した。被検化合物の濃度範囲は希釈サンプル溶液2
0μlでディスクあたり0.05μgから3.0ggで
ある。試験菌体のミクロコッカスルテウスをペトリー皿
の普通寒天培地の表面に塗抹する、そして更にその培地
の上にディスクをのせる。この栄養培地には0.2%イ
ーストエキス、1.5%寒天が更に追加されている。
アマイシンM 、 571■7.8 ■6.I III 13.3■
270実施例8 抗生物質活性 構造式I、■、■なる化合物及びバージニアマイシンM
1は実施例2により調製されマツセン(Matsen)
及びバーリー(Barry ) (マニュアルオブ
クリニカル ミクロバイオロジー、レネソティ(Len
nette) 、スボルディング(Spaulding
)及びトルーアント(Truant) 、共著、アメリ
カン(American)ソサアイアティ(Socie
ty )フォーミクロバイオロジー(Microbio
logy) 、ワシントン、デー、シー0.第418頁
(1974))の報告による方法により、その抗生物質
活性をアッセイした。構造式I、■、■なる化合物及び
バージニアマイシンM、の段階希釈したものに対する最
小発育阻止濃度(M I C)を標準円形濾紙法により
判定した。被検化合物の濃度範囲は希釈サンプル溶液2
0μlでディスクあたり0.05μgから3.0ggで
ある。試験菌体のミクロコッカスルテウスをペトリー皿
の普通寒天培地の表面に塗抹する、そして更にその培地
の上にディスクをのせる。この栄養培地には0.2%イ
ーストエキス、1.5%寒天が更に追加されている。
殖菌プレートは15時間、28℃で培養し、阻止範囲を
判定する。それぞれの化合物のMICをマツセン及びバ
ーリー(上述)記載の方法により決定する。その結果を
以下の表に示した。
判定する。それぞれの化合物のMICをマツセン及びバ
ーリー(上述)記載の方法により決定する。その結果を
以下の表に示した。
第4表
最小阻止濃度
化合物 MIC(μM)バージ
ニアマイシンM11.5 I 90.OI[1
250,、O rV 15.0
ニアマイシンM11.5 I 90.OI[1
250,、O rV 15.0
第1図は構造式■なる化合物のH′−核磁気共鳴(NM
R)スペクトルを示す図である。 第2図は構造式■なる化合物のHl−核磁気共鳴(N
M R)スペクトルを示す図である。 第3図は構造式■なる化合物のHl −核磁気共鳴(N
MR)スペクトルを示す図である。 第4図は構造式■なる化合物の計−核磁気共鳴(NMR
)スペクトルを示す図である。 出願 人 メルク エンド カムバニーインコーポ
レーテッド 手続補正書 昭和63年2月16日
R)スペクトルを示す図である。 第2図は構造式■なる化合物のHl−核磁気共鳴(N
M R)スペクトルを示す図である。 第3図は構造式■なる化合物のHl −核磁気共鳴(N
MR)スペクトルを示す図である。 第4図は構造式■なる化合物の計−核磁気共鳴(NMR
)スペクトルを示す図である。 出願 人 メルク エンド カムバニーインコーポ
レーテッド 手続補正書 昭和63年2月16日
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1、構造式 I なる化合物 ▲数式、化学式、表等があります▼。 2、構造式IIなる化合物 ▲数式、化学式、表等があります▼。 3、構造式IIIなる化合物 ▲数式、化学式、表等があります▼。 4、構造式IVなる化合物 ▲数式、化学式、表等があります▼。 5、同化性栄養培地によるストレプトマイセスオリバセ
ウス株の醗酵から産生された特許請求の範囲第1項、第
3項および第4項記載の化合物とバージニアマイシンM
_1の混合物。 6、ストレプトマイセスオリバセウス株がATCC53
527である特許請求の範囲第5項記載の混合物。 7、同化性液体栄養培地によるストレプトマイセスオリ
バセウス株の制御された好気的醗酵からなる特許請求の
範囲第1項、第3項および第4項記載の化合物及びバー
ジニアマイシンM_1の調製方法。 8、ストレプトマイセスオリバセウス株がATCC53
527である特許請求の範囲第7項記載の方法。 9、ストレプトマイセスオリバセウスATCC5352
7菌体の生物学的純粋培養。 10、塩化メタンスルホニル及びピリジン存在下でのバ
ージニアマイシンM_1の脱水反応よりなるバージニア
マイシンM_1から特許請求の範囲第3項記載の化合物
への構造転換方法。 11、特許請求の範囲第3項記載の化合物の還元反応よ
りなる、特許請求の範囲第3項記載の化合物から、特許
請求の範囲第1項、及び第2項記載の化合物への構造転
換方法。 12、哺乳動物における胃腸疾患、中枢神経系疾患、食
欲調節の治療に有効利用される、バージニアマイシンM
_1の薬学的有効量及び薬学的許容キャリアーを含む薬
学的組成物。 13、哺乳動物における胃腸疾患、中枢神経系疾患、食
欲調節の治療に有効利用される、特許請求の範囲第1項
記載の化合物の薬学的有効量及び薬学的許容キャリアー
を含む薬学的組成物。 14、哺乳動物における胃腸疾患、中枢神経系疾患、食
欲調節の治療に有効利用される、特許請求の範囲第2項
記載の化合物の薬学的有効量及び薬学的許容キャリアー
を含む薬学的組成物。 15、哺乳動物における胃腸疾患、中枢神経系疾患、食
欲調節の治療に有効利用される、特許請求の範囲第3項
記載の化合物の薬学的有効量及び薬学的許容キャリアー
を含む薬学的組成物。 16、哺乳動物における胃腸疾患、中枢神経系疾患、食
欲調節の治療に有効利用される特許請求の範囲第4項記
載の化合物の薬学有効量及び薬学的許容キャリアーを含
む薬学的組成物。 17、哺乳動物における胃腸疾患、中枢神経系疾患、食
欲調節に対するバージニアマイシンM_1の薬学的有効
量の投与よりなる、治療方法。 18、哺乳動物における胃腸疾患、中枢神経系疾患、食
欲調節に対する特許請求の範囲第1項記載の化合物の薬
学的有効量の投与よりなる治療方法。 19、哺乳動物における胃腸疾患、中枢神経系疾患、食
欲調節に対する特許請求の範囲第2項記載の化合物の薬
学的有効量の投与よりなる治療方法。 20、哺乳動物における胃腸疾患、中枢神経系疾患、食
欲調節に対する特許請求の範囲第3項記載の化合物の薬
学的有効量の投与よりなる治療方法。 21、哺乳動物における胃腸疾患、中枢神経系疾患、食
欲調節に対する特許請求の範囲第4項記載の化合物の薬
学的有効量の投与よりなる治療方法。 22、哺乳動物における細菌感染に際して特許請求の範
囲第1項記載の化合物の抗菌活性有効量の経口、非経口
投与よりなる治療方法。 23、哺乳動物における細菌感染に際して特許請求の範
囲第2項記載の化合物の抗菌活性有効量の経口、非経口
投与よりなる治療方法。 24、哺乳動物における細菌感染に際して特許請求の範
囲第3項記載の化合物の抗菌活性有効量の経口、非経口
投与よりなる治療方法。 25、哺乳動物における細菌感染に際して特許請求の範
囲第4項記載の化合物の抗菌活性有効量の経口、非経口
投与よりなる治療方法。
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US934,212 | 1986-11-21 | ||
US934,214 | 1986-11-21 | ||
US06/934,231 US4762923A (en) | 1986-11-21 | 1986-11-21 | Fermentation analogs of virginiamycin M1 |
US934,232 | 1986-11-21 | ||
US934,231 | 1986-11-21 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS63211284A true JPS63211284A (ja) | 1988-09-02 |
Family
ID=25465200
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP62293132A Pending JPS63211284A (ja) | 1986-11-21 | 1987-11-21 | バージニアマイシンm↓1発酵類似体 |
Country Status (2)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4762923A (ja) |
JP (1) | JPS63211284A (ja) |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5006466A (en) * | 1986-11-21 | 1991-04-09 | Merck & Co., Inc. | Fermentation analogs of virginiamycin M1 |
US5189050A (en) * | 1991-06-03 | 1993-02-23 | Merck & Co., Inc. | Fermentation analogs of virginiamycin m1 to treat panic and anxiety disorder |
US5242938A (en) * | 1992-08-27 | 1993-09-07 | Merck & Co., Inc. | Derivatives of virginiamycin M1 |
EP1261732B1 (en) * | 2000-02-29 | 2005-10-12 | Biocon Limited | Manufacture and purification of cyclosporin a |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US2990325A (en) * | 1955-11-16 | 1961-06-27 | Olin Mathieson | Antibiotics |
DE1061482B (de) * | 1958-04-29 | 1959-07-16 | R I T Rech Et Ind Therapeutiqu | Verfahren zur Reinigung des Antibiotikums 899 |
FR2549065B1 (fr) * | 1983-07-13 | 1985-10-25 | Rhone Poulenc Sante | Nouveaux derives de synergistines, leur preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent |
FR2576022B1 (fr) * | 1985-01-11 | 1987-09-11 | Rhone Poulenc Sante | Nouveaux derives de la pristinamycine ii b, leur preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent |
-
1986
- 1986-11-21 US US06/934,231 patent/US4762923A/en not_active Expired - Fee Related
-
1987
- 1987-11-21 JP JP62293132A patent/JPS63211284A/ja active Pending
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US4762923A (en) | 1988-08-09 |
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