JPS63211284A

JPS63211284A - バージニアマイシンｍ↓１発酵類似体

Info

Publication number: JPS63211284A
Application number: JP62293132A
Authority: JP
Inventors: イウークエン　テー．ラム; レイモンド　エス．チヤング; オツトー　デー．ヘンセンズ; シエリル　デー．シユワルツ; デボラ　エル．ツインク; エツチ．ボイド　ウツドラフ
Original assignee: Merck and Co Inc
Current assignee: Merck and Co Inc
Priority date: 1986-11-21
Filing date: 1987-11-21
Publication date: 1988-09-02
Also published as: US4762923A

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】本発明の目的は、コレシストキニン（ＣＣＫ）あるいは
ガストリンの拮抗剤であるバージニアマイシンＭ、及び
その類似体を提供することにある。

本発明の他の目的は抗生物質活性をもつ、バージニアマ
イシンＭ１の新規類似体を提供することにある。本発明
の更に他の目的はバージニアマイシンＭ１及び構造式■
、■、■なる類似体を調製する醗酵方法を提供すること
にある。本発明の更に他の目的は構造式Ｉ、■、■なる
化合物の化学的合成方法を提供することにある。本発明
の更に他の目的はバージニアマイシンＭ＋及びそれらの
類似体からなる薬剤組成物を提供することにある。

本発明の更に他の目的はバージニアマイシンＭ＋、それ
らの類似体あるいは抗生物質、鎮痛剤、抗潰瘍性剤、抗
腫瘍剤、及び胃腸、中枢神経、そして食欲調節系疾患に
対する治療的物質となる構成物の投与方法を提供するこ
とにある。本発明のこれら及び他の目的は以下の記載に
より明白である。

以下の構造式をもつバージニアマイシンＭ＋以下に記載
しである構造式Ｉから■をもつバージニアマイシンＭ１
の類似体バージニアマイシンＭ＋及びｉ似体１から■はコレシス
トキニンあるいはガストリンの拮抗剤である。

動物、特に人体に対してコレシストキニン拮抗剤は鎮痛
剤として、あるいは胃腸、中枢神経及び食欲調節系疾患
に対する治療及び予防薬として有効である。ガストリン
拮抗剤は人体に対してガストリンリセプターのブロック
という点で有効であり、また潰瘍、腫瘍及び、その他の
胃腸内疾患に対する治療用物質としても作用する。構造
式■から■なる化合物は抗生物質でもあることから人体
用も含め動物に対する抗菌物質として有効であり、動物
飼料の有効利用促進のための食品添加物としても有効で
ある。

コレシストキニン（ＣＣＫ）及びガストリン（Ｇ）は胃
腸内Ｍｉ織あるいは中枢神経系中より検出される調節ペ
プチドである。〔マント（Ｍｕｔｔ）、ガストロインテ
スティナルホルモンズ（Ｇａｓｔｒｏ−ｉｎｔｅｓｔｉ
ｎａｌ　Ｈｏｒｍｏｎｅｓ　）　％グラス（Ｇｌａｓｓ
　）　）著レイベン（Ｒａｖｅｎ　）プレス（Ｐｒｅｓ
ｓ　）　、エヌ、ワイ、　　（Ｎ、Ｙ、）第１６９頁（
１９８０））。

ＣＣＫペプチドはある中脳神経細胞中でドーパミンと共
存しており、神経伝達物質としての役割はもちろんの事
、脳内におけるドーパミン作用性の機能をも担なってい
る〔プランジ（Ｐｒａｎｇｅ）等、アン（Ａｎｎ、）　
、レプツ（Ｒｅｐｔｓ、）　、メト（Ｍｅｄ、）ケム（
Ｃｈｅｎ＋）　、第１７＠：第３１頁（１９８２））。

胃腸内ＣＣＫ及びガストリンは哺乳動物の胃粘膜の壁及
び胃底腺主細胞において作用し、酸及びペプシノーゲン
の分泌に刺激を与える〔チュー（Ｃｈｅｗ）及びハーゼ
イ　（Ｈｅｒｓｅｙ）　、アム（八ｍ）、ジェイ　（Ｊ
、）　、フィシオル（Ｐｈｙｓｉｏｌ、）　、第２４２
巻：Ｇ５０４　（１９８２））。

コレシストキニンは生理的飽満ホルモンとしても知られ
ており食欲調節としての役割をも担っている〔スミス（
Ｓｍｉｔｈ　）　、イーティング　アンドイッツ　ディ
スオーダーズ（Ｅａｔｉｎｇ　ａｎｄ　ＩｔｓＤｉｓｏ
ｒｄｅｒｓ　）　、スタンカード（Ｓｔｕｎｋａｒｄ）
　、及びステラ−（Ｓｔｅｌｌｅｒ　）　、共著、レイ
ベン（Ｒａｖｅｎ　）プレス（Ｐｒｅｓｓ　）　、エヌ
、ワイ、　　（Ｎ、Ｙ、）　、第６７頁（１９８４））
。

ＣＣＫのその他の効果としては腸の運動性、胆のう内胆
汁の濃度、膵消化酵素の分泌等に対する刺激、あるいは
空腹感の抑制などがあげられる。

腸内ＣＣＫはアミノ酸３９あるいは３３個よりなり３３
個のアミノ酸配列のＣ−末端部は同定されている。

生物学的活性は生体系本来のペプチドにおいてはＣ−末
端の７個のペプチドにより制御されている、Ｃ−末端の
８個のペプチドもＣＣＫ−３３と同様の効果をもち、し
かも約１０倍以上の能力があるとされている〔ジエンセ
ン（Ｊｅｎｓｅｎ）等、ブロク（Ｐｒｏｃ、　）　、ナ
トル（Ｎａｔｌ、　）　、アカド（Ａｃａｄ）、サイ　
（Ｓｃｉ、）　、ニーニスエイ　（Ｕ、Ｓ、Ａ、）　、
第７７巻、第２０７９頁（１９８０））。

ガストリンもまた当然種々の構造をもつとされている。

３４個のアミノ酸、１７個のアミノ酸、あるいは１３個
のアミノ酸より構成されており、そのうち、チロシンは
硫酸塩になっているものや、そうでないものもある。１
７および１３個よりなるアミノ酸構造体は、それぞれ３
４個よりなるアミノ酸のＣ−末端断片であろう。そして
、それぞれが胃酸分泌刺激の面で種々の効力をもってい
る。ガストリン−１７はガストリン−３４に対して５倍
以上、ガストリン−１３に対して２．５倍以上の能力を
もっている〔ウオルシュ（Ｗａｌｓｈ　）およびグロス
マン（Ｇｒｏｓｓｍａｎ）　、ニューイングル（Ｎｅｗ
Ｅｎｇｌ、　）　、ジェイ（Ｊ、）　、メト（Ｍｅｄ、
）　、第２９２巻、；第１３２４頁（１９７５））。

ガストリンとＣＣＫはそのＣ−末端部において、共通の
５個のペプチドアミド配列をもっている（Ｇｌｙ−Ｔｒ
ｐ−Ｍｅｔ−八５ｐ−Ｐｈｅ−ＮＨｔ　　）　　。

ガストリン及びＣＣＫ拮抗剤はそれぞれガストリン及び
ＣＣＫによってもたらされる疾患の治療面において有効
である。ＣＣＫ拮抗剤は動物、特に人体において、胃腸
、中枢神経、及び食欲調節系のＣＣＫ関連疾患に対して
、予防あるいは治療という面において好結果が得られて
いる。

またＣＣＫ拮抗剤は鎮痛剤による無痛感覚状態の増強や
その持続時間の延長に有効であり、それによって痛みに
対する処置においても多用されるものである〔ファリス
（Ｐａｒｉｓ　）等、サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ　）
　、第２２６巻、第１２１５頁（１９８４）　］。

ガストリン拮抗剤はガストリン活性を減少させるところ
にその治療的価値があるので、人体あるいは動物の胃腸
系統のガストリン関連疾患、例えば潰瘍、ゾリンジャー
・エリソン症候群、胃前庭Ｇ細胞過形成あるいはその他
の同様な症状に対して治療及び予防面で有効に使用され
ている。ＣＣＫ及びガストリンはある種の腫瘍に対して
属性効果をもっている〔オオヤマ（Ｏｈｙａｍａ）　、
ホソカイド−　ジェイ　（Ｉｌｏｋｋａｉｄｏ　Ｊ）　
、メト（Ｍｅｄ、）　、サイ（Ｓｃｉ、）　、第６０巻
：第２０６頁（１９８５））のでＣＣＫ及びガストリン
の拮抗剤はこれら腫瘍の治療においても有効である。

バージニアマイシン科の抗生物質は家禽、豚、牛の発育
促進用の飼料添加物として使用されている。抗生物質と
発育促進との関係はまだよくわかっていないが、その効
果の程度は腸内細菌叢の抑制に少なからずあるのではな
いかとされている〔コッチート（Ｃｏｃｃｉｔｏ　）　
、ミクロ（Ｍｉｃｒｏ、）、レビ（Ｒｅｖ、）　、第４
３巻：第１４５頁（１９７９）バージニアマイシンＭ、
及びその関連抗生物質は一般的にダラム陽性菌に対して
特異性をもち細胞の増殖を阻止する。バージニアマイシ
ン系抗生物質は、それらが複合構造、つまりＭ及びＳコ
ンポーネントをあわせもつときに最も効力を示す〔コソ
チート（Ｃｏｃｃｉｔｏ　）　、ミクロ（Ｍｉｃｒｏ、
）、レビ（Ｒｅｖ、）　、第４３巻：第１４５頁（１９
７９））発育促進用としてのこれら抗生物質の多面的利
用性は、毒性が低いこと、動物組織中へ蓄積されない、
抗生物質に対する耐性菌の出現がない、及び便中にすみ
やかに排出されるという点に関連している。

バージニアマイシンＭ１及び構造式Ｉ、ＩＩＩ、■なる
化合物は制御された好気的醗酵法によりストレプトマイ
セスオリバセウス株から生産される。

バージニアマイシンＭ、及び構造式■、■、■な°る化
合物の醗酵製造に関する本発明では、ストレプトマイセ
スの特異的な種や株に対する使用が限定はされていない
と理解される。パージニアマイ〕、　シンＭ、及び構造
式■、■、■なる化合物あるいはその他の関連類似体を
生産する限りにおいては、ストレプトマイセス属に含ま
れる、明細中に記載されている培養による産生あるいは
誘導による他の自然的、人工的変異株あるいは、その他
の変異種、変異株の使用というものが、本発明の範囲内
であるということを特に要求し、その目的とする。　　
ところである。

このストレプトマイセス株の変異種、変異株の人工的作
成には一般的な物理的方法あるいは化学的変異誘発物質
を使用する。例えば、記載されている培養菌への紫外線
照射、あるいはニトロソグアニジンまたはその類似物質
などによる処置である。またプラスミドを細菌や真菌あ
るいはその他同様の細胞中へ取り込ませるという最近の
組み換え　ＤＮＡ技術使用の有効性も証明されている。

バージニアマイシンＭ１及び構造式Ｉ、　Ｉ［Ｉ、ＩＶ
なる化合物は制御された好気的醗酵法により以下に記載
されている特定なストレプトマイセス種から生産される
。このストレプトマイセス種とは、特許作成の目的に対
する微生物の寄託に関する国際認可についてのブダペス
ト条約に基づいてアメリカン　タイプ　カルチャー　コ
レクション（Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｔｙｐｅ　Ｃｕ１ｔｕ
ｒｅ　Ｃｏ１１ｅｃｔｉｏｎ）　、１２３０１バークロ
ーン（Ｐａｒｋｌａｗｎ）　、ドライブ（Ｄｒｉｖｅ　
）、ロックビル（Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ　）　、メリーラ
ンド（Ｍｅｒｙｌａｎｄ）２０８５２ニーニスエイ（Ｕ
、Ｓ、Ａ、）　、７月２９日付、１９８６年に寄託され
たもので、ＡＴ　ＣＣＮｌ５３５２７と指定されたもの
である。

ストレプトマイセス種はインドのピンプリ地方などから
木の根に付着している土壌中より得られたもので発現形
態や培養性状については以下の表に示しである。

第１表形態：胞子柄は不完全ならせん鎖状で１５個以上の胞子
が連らなり形づくっている。胞子は球から楕円状で大き
さは約０．９μから０．９×１．２μである。

培養性状：イースト・麦芽寒天培地（ＩＳＰ培地！Ｉｋ
Ｌ２）Ｖ：裏面−灰複色、周辺部灰色Ａ：白みおびた明灰色、周辺部暗灰色Ｓｅｚ無オートミル寒天培地（ＩＳＰ培地１１ｈ３）■：裏面−
明灰黄複色、周辺部灰色Ａ：白みおびた明灰色、周辺部暗灰色Ｓｅｚ無スターチ・無機塩寒天培地（ＩＳＰ培地患■：裏面−灰
黄複色、周辺部灰色Ａ：白みかかった明灰色、周辺部暗灰色ＳＰ：無グリセリン・アスパラギン寒天培地（ＩＳＰ培地１１ｈ
５）Ｖ：裏面−黄複色、周辺部灰色Ａ：白みかかった明灰色、周辺部門灰色ＳＰ：無ペプトン−イースト−鉄寒天培地（ＩＳＰ培地階６） ■＝裏裏面−黄色色：白みかかった薄灰色、周辺部中天色ＳＰ：無メラニン：無チロシン寒天培地（ＩＳＰ培地７）Ｖ二Ｎ面−黄複色、周辺部複色Ａ：白と灰の混合灰色、周辺部間灰色ＳＰ：淡中複色ツアペック・ドック寒天培地Ｖ：裏面−灰黄複色Ａ：白みかかった明灰色ＳＰ：淡中複色 ■＝＝育菌糸（ｖｅｇｅｔａｔｉｖｅ　ｇｒｏｗｔｈ　
）　　；　Ａ　＝気中菌糸、ＳＰ＝可溶性色素。

色調はカラーハーモニーマニュアル（Ｃｏｌｏｒ　ｌｌ
ａｒｍｏｎｙＭａｎｕａｌ）　　（１９５８、第４版、
コンチェイナーコーポレーション　オブ　アメリカ、シ
カゴ、イリノイ〕により色別判定した。

ＡＴＣＣ５３５２７の糖質化性をプリドハム・ゴトリー
ブ基礎培地（ＩＳＰ培地隘９）に以下の表に示しである
炭素源１％を追加して検討した。

第■表グルコース　　＋　　　　マユトール　　＋アラビノー
ス　＋　　　　マンノース　　＋セルロース　　−　　
　　ラフィノース　±フラクトース　＋　　　　ラムノ
ース　　＋イノシトール　＋　　　　シュクロース　＋
ラクトース　　＋　　　　キシロース　　＋マルトース
　　＋〔＋＝発育良好；±＝発育不良あるいは判別しにくいも
の、−＝発育なし、（炭素源を含まない）ネガティブコ
ントロール対照〕生育温度範囲及び酸素要求性についてイーストエキスデ
キストロース・食塩寒天培地を使用して検討した。

結果を以下の表に示す。

第■表温度範囲（イーストエキス・デキストロース・食塩寒天
培地）２８℃　　発育菌糸及び胞子形成良好３７℃　　発育菌糸及び胞子形成良好４２℃　　生育なし５０℃　　生育なし酸素要求性（イーストエキス・デキストロース・食塩寒
天培地の穿刺栄養）好気性である以上の判定は２８℃、３週間培養後に行なう。

ｐＨはすべての培地においてだいたい中性付近（６，８
〜７．２）とする。

当該菌体の培養性状をバーギーズ　マニュアルオブ　デ
ターミイナティブ　バクテリオロジー（Ｂｅｒｇｅｒ’
ｓ　Ｍａｎｕａｌ　ｏｆ　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｖｅ
　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ）、第８版、１９７９、ウ
ィリアムズ　アンド　ウィルケンス（Ｗｉｌｌｉａｍｓ
　＆　Ｗｉｌｋｅｎｓ）　、ボルチモアー、エムデー（
ＭＤ）　、記載のストレプトマイセス種の培養説明書と
比較検討することにより、当該ストレプトマイセス種は
ストレプトマイセス　オリバセウス株であると推定した
。

醗酵は約２０℃から約３７℃の温度範囲内で行゛なった
が、２８℃が好ましい温度であった。

一般的に同化性栄養培地の組成は広範囲に及んでいる。

必須栄養培地成分としては、炭素源及び窒素源があげら
れる。その他の必須成分としては、以下の無機塩類があ
る。たとえばナトリウム、カリウム、アンモニウム及び
カルシウムに対する塩素化物、窒素化物、硫酸化物、炭
酸化物そしてリン酸化物などである。更に栄養培地とし
て微量の以下の無機成分源を含むものもある。つまりマ
グネシウム、鉄、銅、マンガン、亜鉛、コバルト等であ
る。炭素源となる代表的なものは、糖、油、有機酸、デ
キストリン、スターチ、グリセロール等。

窒素源となる代表的なものは、アミノ酸、野菜汁、及び
エキス（例えば、麦芽、大豆、綿花の種、イチジク、ト
マト、コーンなど）、動物の内臓、種々の加水分解物（
例えば、カゼイン、イースト、等）及びラード嶌あるい
は蒸留可溶化物などの工業的副産物などである。

至適条件下の醗酵によるバージニアマイシンＭＩ及び構
造式■、■、■なる化合物の最大生産量は、だいたい２
４時間から９６時間の培養により得られるが、約４８時
間から７２時間の培養が一般的な培養時間とされている
。

醗酵用の菌体としては、微生物の迅速な発育を目的とし
た培地における発育菌糸を使用するか、あるいは、凍結
菌体を直接醗酵装置に殖菌してしまうかである。

“シード”培地あるいは“プロダクション培地の用語は
公知の技術用語として使用されている。

一般的にシード用培地とは微生物の迅速な発育に使用さ
れるものであり、ここから一部を取り、大量醗酵用のプ
ロダクション用培地に性菌されるべきものである。

醗酵操作後、蓄積生産されたバージニアマイシンＭ１及
び構造式■、■、■なる化合物は、常法のクロマトグラ
フィーにより培養培地中より回収される。個々の化合物
は逆相高速クロマトグラフィーにより分離される。

バージニアマイシンＭ、及び構造式■、■、■なる化合
物の全醗酵培地からの分離は、その全培地と、等容量の
水と混ざりにくい、微極性溶媒との混合により行なう。

その溶媒とは、クロロホルム、エチルアセテート、メチ
ルエチルケトン等であり、メチルエチルケトンが好まし
い。二重層を静置して有機層を補集する。有機層にはバ
ージニアマイシンＭ、及び構造式■、■、■なる化合物
が含まれている。

それらの化合物の醗酵用培地中からの分離は、それらの
特異的な生物学的活性を基準としている。

更に、バージニアマイシンＭｌの化学的転換により生成
された化合物■及び、そこから導びかれる化合物■、■
などの産生物質についても同様にその生物学的活性につ
いてのアッセイを行なった。

生物学的アッセイは補乳動物胃腺に対するガストリン結
合を測定することであり、動物としてはギエーニアピン
グが好ましく、また、哺乳動物脳（ギューニアビッグが
好ましい）、及び哺乳動物膵Ｖａ＜ラットが好ましい）
等に対するＣＣＫ結合を測定する以上の様な方法よりな
る。

培養培地より分離された活性有機層を減圧下、において
急速乾燥した。温度としては約３０℃から約５０℃であ
るが、４０℃が好ましい、更に、ヘキサンの様な飽和炭
化水素とメタノールの様なアルコールとによる分配抽出
に供した。メタノール層を約３０℃から約５０℃の間に
おいて、減圧下で急速乾燥した。温度としては４０℃が
好ましい、その後、ヘキサン中に対する約５０％から約
７５％のアセトンを移動相としたシリカゲルクロマトグ
ラフィーを行なった。そして、活性分画物を逆相高速液
体クロマトグラフィー（ＨＰ　Ｌ　Ｃ）により情製した
。バージニアマイシンＭ１の構造式■なる化合物への構
造転換は、バージニアマイシンＭ１の無水ピリジン溶液
に対して、約１モル等価の塩化メタンスルホニルを加え
る事により行なった。メシレーション反応は約２５℃、
約２０分で行ない、ピリジンは急速乾燥により除去した
。

乾固物を約１％の食塩水とジクロロメタンとの間におけ
る分配抽出を行ない、有機層を乾燥し逆相ＨＰＬＣによ
るクロマトグラフィーにかけた。

構造式■なる化合物を水素化はう素ナトリウム還元剤に
より還元反応を行ない構造式■、■なる化合物を得た。

構造式■なる化合物のメタノール性溶液に対して若干過
剰量となる約１０■／ｍｌｌのＮａＢＨａ　／メタノー
ル溶液を１モル等価量加えた。

精製は醗酵生産物の時と同様の操作がとられた。

バージニアマイシンＭ１構造式■、■、■、■なる化合
物の生物学的活性は、ガストリンレセプター結合、膵Ｃ
ＣＫリセブター結合、脳ＣＣＫ結合、及び微生物発育阻
止アッセイにより測定した。

バージニアマイシンＭ８、構造式Ｉ、Ｉ［、■、■なる
化合物を人体も含めて、哺乳動物に投与するに際しては
、それぞれ単独でもよいがむしろ、薬学的許容キャリヤ
ーとの混合物または希釈したもの、あるいは薬学的構成
物質としたものが好ましく、標準薬理実施に従かうもの
である。投与経路には経口あるいは非経口がある。

非経口投与には、静脈注射、筋注、腹腔内注射皮下注射
及び局所投薬などがある。

ＣＣＫあるいはガストリン拮抗剤として、または抗生物
質として、経口投与する時には選定化合物を以下の例に
おける形で投与される。錠剤、カプセル、あるいは水溶
液、懸濁液などである。

経口投与用の錠剤には、一般によく使用されるキャリヤ
ーとして、ラクトース、コーンスターチあるいは潤滑剤
としてステアリン酸マグネシウムなどが含まれている。

経口投与用のカプセルには、有効な希釈剤としてラクト
ースや、乾燥コーンスターチが含まれている。

経口投与用の水性懸濁液とした時には、活性成分は乳化
剤あるいは懸濁剤との調合が行なわれる。

家畜に対する抗生物質として経口投与する時には、構造
式■、■、■、■なる化合物を動物用飼料に加えてやれ
ばよい。もし必要があれば、甘味剤や、あるいは芳香成
分を加えてやればよい。筋注、腹腔内、皮下、及び静脈
内注射として使用するためには、活性成分を滅菌溶液に
溶かし、ｐＨに関して調整及びその溶液の緩衝作用に注
意すべきである。特に静注の際には、その溶質の総濃度
を等張的調製をすることによって制御する。

バージニアマイシンＭｌ、構造式■、■、■、■なる化
合物をＣＣＫあるいはガストリンの拮抗剤あるいは抗生
物質として人体用に適用する時には、−日あたりの投薬
量はもっばら医師の処方により決定される。更に投薬量
は患者例々の年令、体重及び感受性に従がうものであり
、また、その患者の症状の度合にもよるであろう。しか
しながら、一般的な実例としては、効果的な一日あたり
の投薬量は約１■から約１５００■の範囲にあるであろ
う。

好ましい量としては、１回でもあるいは数回に分けても
よいが、１０■から５００■であろう。

これに反して、場合によっては、これら許容範囲を超え
て使用することも必要であろう。

構造式Ｉ、■、■、■なる化合物を家畜用の経口抗生物
質として使用する際には対応゛動物の種、年、体重によ
り一日の投与量を決定する。効果的投与量はその飼料容
量あたり約５から約２００ｐｐｍがよいであろう。

バージニアマイシンＭ＋　、Ｊｌｔ造式Ｉ、■、■、■
なる化合物はＣＣＫあるいはガストリンレセプターにそ
れぞれ結合する。それによってバージニアマイシンＭ、
や４つの類僚化合物は食欲調節や胃腸内及び中枢神経系
のＣＣＫ−関連疾患に対する治療においモユニークな機
能を果たすものである。バージニアマイシンＭ、や４つ
の類似化合物のガストリン拮抗剤としてのユニークな作
用により、潰瘍、ゾリンジャー・エリソン症候群あるい
は胃前庭Ｇ細胞過形成などにみられるガストリン−関連
疾患の治療及び予防において利用されている。

４つのｉ（Ｕ構造化合物も抗生物質因子としての機能を
もち微生物感染の際の治療に用いられる。

以下の実施例は本発明を実例をあげて説明したものであ
るが、それに限定されるものではない。

爽旌拠上朋凍結乾燥されているストレプトマイセスＡＴＣＣ第５３
５２７番の菌体を、無菌的条件下で５４ｍβのシード用
培地を含む、２５０ｍｊ！用のパンフル付きエレンメイ
ヤーフラスコに入れる。

シード用培地は以下の物質を含む。デキストロース、１
ｇｍ／ｌ：可溶性澱粉、１０　ｇ／ｌ　；ビーフェキス
、３ｇ／ｊ！；アルダミンｐＨ，５ｇ／ｊ２；ＮＺアミ
ン５　ｇ　／　１　；　ＭｇＳＯ４・７ＨｚＯ，０，０
８ｇ／ｌ；リン酸緩衝？夜、２ｍｊ２　／　ｌ　；　Ｃ
ａＣ０ｚ　、０．５μｌ１０尚、培地のｐｔｌは、７．０〜７．２．２８℃、４８時
間、２２０ｒｐｍの回転振盪培養とする。この４８時間
の培養後、その一部１０…２を無菌的に５００ｍ１の培
地が入っている２β用のバッフル付きエレンメイヤーフ
ラスコへ移入する。２８℃、２４時間、２２０ｒｐｍの
回転振盪培養を行なう。第２シード培養により得られた
５００Ｉｌｌｌの菌液を１０１のプロダクション用培地
の入った１４ｇ用の醗酵装置に注入する。プロダクショ
ン用培地は以下の物質を含む。

コーングルテンミール、５．０ｇ／ｌ；プリマトンＨ５
，２，５ｇ／ｌ：酵母エキス（ディフコ）、１．０ｇ／
ｌ：麦芽エキス、１０．０ｇ／Ｉｌ；シュクロース、５
．０　ｇ／　１　：ＣａＣＯ５，５，０ｇ／　ｌ　；　
Ｐ　−２０００，２，０ｍ　ｌ。ｐＨは、７．２〜７．
４．２８℃、６４時間、毎分３１の通気、４００ｒｐｍ
の攪拌培養を行なう。

去１１江１バージニアマイシンＭ、及び構造式Ｉ、■、■なゑ北澄
潰９」」μΔ」壮口し一一一一一一一〜−−実施例１に
よる菌体培養液４０１総べてを、４８１のメチルエチル
ケトンで抽出。有機層は生物学的活性を示し、４０℃に
おける減圧操作で瞬間的に乾燥する。乾燥物質は、１１
のヘキサンと１１のメタノールにより分配抽出し、ヘキ
サン層を除去する。活性物質を含むメタノール層は４０
℃、減圧下で急速乾燥し、５０ｇの乾固物とする。シリ
カゲル６０　（４μｌ１１）、５００ｇ使用、５０％ア
セトン／ヘキサン溶媒系による迅速なりロマトグラフィ
ーを５回繰り返し、７５％アセトン／ヘキサンによる展
開層から活性分画物として３ｇの乾燥物質を得る。次に
ゾルパックスＣ−８，２，１２Ｘ２５ＣＩｌＯカラムに
よる。逆相高速流体クロマトグラフィーを室温で３回繰
り返し溶媒組成の一定なイソクラチック移動相として、
４０％アセトニトリル／水系により１５ｍｊ２／ｍｉｎ
の流速で、バージニアマイシンＭ＋、９２■；構造式Ｉ
なる化合物、５．２■；構造式ｍ、１６．４　ｍｇ　；
構造式■、２５、９　ｏｖを得る。本醗酵法により分離
し゛たバージニアマイシンＭ１の生理化学的性状はキン
グストン（Ｋｉｎｇｓｔｏｎｅ　）等による文献〔ジエ
イ（Ｊ、）、ケム（Ｃｈｅｍ、　）　、ツク（Ｓｏｃ、
）　、第１９巻；第１６６９頁（１９６６））、及び市
販利用されているバージニアマイシンの精製により得た
確認済みサンプルとの比較により電子イオン法質量スペ
クトル、’Ｈ−ＮＭＲデーター（Ｍ”＝５２５）として
同定された。

さらに、１ｉｌｌＬＷ済みサンプルと、バージニアマイ
シンＭ、についての生物学的／生化学的なテストが行な
われた。

両サンプルは同一のＨＰＬＣ保持時間、ＵＶスペクトル
（λｍａｘ−２１０，５ｎｍ；Ｅ％＝５３５）を示した
。３００ＭＨｚ　Ｈ’−Ｈ’同−核相関Ｎ　Ｍ　Ｎスペ
クトルが最初の性状として記録された。

構造式Ｉなる化合物は高分解能質量スペクトルデーター
により、分子式Ｃｚ　ＩＩＨｚ　ｓ　Ｎ　３０　ｂ　　
（計算値：　５０９．２５２６　：　　実測値：　５０
９．２５２８）であることが示された。３００ＭＨ２Ｈ
’−ＮＭＲスペクトル、ＣＤｚＣｌ　ｚ使用、第１図参
照、により、この化合物の精製、同定がより一層確かな
ものとなった。

ＣＤ２Ｃｌ　２使用のブロードバンドデカンブリングＣ
ＩＣｌ５−Ｎスペクトルは以下の共鳴を示す。

１２．１１；　　１８．８２：　　１９．７７；　　２
０．３４；　　２９．９１；３０．１３；　　３６．７
７；　　３８，８７；　　４２．２６；　　５１．０８
；　　７０．９３；８２．４６：　　１２３．７７；　
　１２３．８５；　　１２５．７８；　　１２６．４６
；１２７．１１；　　１２７．７２；　　１２９．２０
；　　１３２．８５フ　１３２．９３；１３５．２０；
　　１３７゜１３：　　１４３．２９；　　１４３．５
８：　　１６１．３７：１６１．８６；　　１６７．１
３　ｐｐｍ。

メタノールによる紫外スペクトルは最大吸収２１２ｎｎ
＋（Ｅ％＝５５７）及び２７４．５ｎｍ　（Ｅ％＝７６
４）を持ち、ｃｕｚｃ　Ｉ！！溶液による赤外スペクト
ルは、３５９５；　　３３７５；　　１７３０；　１６
７０；１６２０ｃｍ−’において、それぞれ吸収バンド
が認められた。培養による本来の物質あるいは、その半
合成物質、実施例４について、質量スペクトル、Ｈ’−
ＮＭＲスペクトル、ＵＶスペクトル、ＨＰＬＣ保持時間
での同定を行ない、以下の構造式を推定した。

Ｏ構造式■なる化合物は高分解能質量スペクトルにより分
子式Ｃｚ　ｓ　Ｈｘ　ｚ　Ｎ　３０　ｂ　（計算値：　
５０７．２３６９；実測値＝５０７．２３６９）　、３
００　ＭＨｚ　Ｈ’−ＮＭＲスペクトル、ＣＤ、Ｃ１ｔ
、第３図参照、ブロードバンドデカップリング　Ｃ１Ｃ
１３−Ｎスペクトル、ＣＯ□Ｃ１，、の共鳴は以下の通
りである。

１２．１９；　　１８．７８；　　１９６０；　　２１
．３７；　　３０．１０；３０．２２；　　３７．６０
：　　４０．６５；　　４２．０４；　　５２．３３；
　　８１．１８；１２５．３８；　　１２６．５６：　
　１２６．７９；　　１２７．２５；　　１２９，４６
；１３１．８５：　　１３６．９８；　　１４２．９１
；　　１４３．２０；　　１４３．３２；１４６゜１９
；　　１６０．２８；　　１６０．５４：　　１６７．
１２：及び１９２．７８ｐｐｍ。

メタノールによる紫外スペクトルの最大吸収２１２ｎｍ
（Ｅ％＝５４５．５）及び３２５ｎｍ（Ｅ％＝４１７）
。ＣＨｚＣ１ｇ溶液による赤外スペクトルの吸収バンド
３３８０；　　１７３０；　　１６６２；１６２５　ａ
ｍ−’、培養による本来の物質あるいは半合成物質、実
施例３、質量スペクトル、Ｈ’−ＮＭＲスペクトル、Ｕ
ｖスペクトル、ＨＰＬＣ保持時間により、以下の構造式
を推定した。

構造式■なる化合物、ビス−トリメチルシリル誘導構造
物、の高分解能質量スペクトルによる分子式はＣｚ＊Ｈ
ｘｓＮｚＯｉ＋Ｔｚ　（計算値：　６５３．３３１６゜
実測値：　６５３．３４５２）である。３００ＭＨｚＨ
’−ＮＭＲスペクトル、ｃｏ、ｃｌ、、第４図参照。メ
タノールによる紫外スペクトルはバージニアマイシンＭ
１のデーグーとほとんど同一であり、２１３ｎｍ（Ｅ％
＝５４２）に最大吸収をもち以下の構造式を推定した。

実施例２または市販されている物より得たバージニアマ
イシンＭＩを無水ピリジン溶液５Ｉｌｌｌ中でバージニ
アマイシンＭ、、１９９．３６■に０．２＋１／の塩化
メタンスルホニルを加える事により、構造式■なる化合
物へと構造転換した。メシレーション反応は室温、２０
分で行なう。

ピリジンなる溶媒の急速蒸発を減圧下、４０℃で行ない
、乾固物を得る。１％食塩水、２０ｎｅ！とジクロロメ
タン（２Ｘ　２５ｍ１）によるこの乾固物の分配抽出物
質を無水ＮａｚＳＯ，で有機層を乾燥し、減圧下、４０
℃における溶媒の迅速な除去によって２４５■の粗生産
物とした。高速液体クロマトグラフィーの分析から、こ
の生産物は、その主成分物質として、化合物■が大部分
を示し、バージニアマイシンＭ、の残存がなかった事を
示している。調製用逆相クロマトグラフィー、ゾルパッ
クスＯＤＳカラム使用にこの粗生産物をのせ、移動相と
して４０％水性ＭｅＣＮより１５ｍＡ！／分の流速で、
精製化合物■を８８．１５■得た。

叉亙斑土構造式■　び■なる化合物の合成化合物■を構造式■あるいは■なる物質へと構造転換し
た。

実施例１あるいは実施例３から得た化合物■を含むメタ
ノール性溶液（１０ｎ＋４２）に１０ｒｒｇ／Ｔｌ１２
ＮａＢＨａ　／ＭｅＯＨ溶液Ｑ、　５　ｍ　ｌを加え、
高速流体クロマトグラフィーの分析より反応はすみやか
に行こなわれ、生産物は化合物Ｉ及びそのエピマー、化
合物■を含んでいた。

反応をさらに進めた後、その反応混合液にアセトン、０
．Ｉｎ＋ｊｌ！を加え種々の過剰反応試薬を分解した。

１％食塩水、５０１Ｉ１１とＣｌ１ｔＣｊ２ｚ　、２ｘ
５０ｎ＋ｊ！によるこの混合物の分配抽出物を無水Ｎａ
、ＳＯ４で有機層を乾燥し、減圧下、３０℃における蒸
発により５４．８■の産物を得た。調製用ゾルパックス
ＯＤＳカラム、２．１２Ｘ２５ｃｍ、イソクラチック移
動相として３５％水成ＭｅＣＮよりこの産物を精製、１
５ｍｊ！／分の流速、室温において、２７．６９■の化
合物Ｉ及び１５．７■のエピマー、構造式■なる化合物
を得た。

構造式Ｉなる化合物の生理化学的性状は実施例２に記載
されている。構造式■なる化合物の高分解能質量スペク
トルデーターは、分子式がＣｚｓＨｓｓＮ＊Ｏｂ　　（
計算値：　５０９．２５２６　；　　実測値：　５０９
．２５２８）であることを示している。３００ＭＨｚ　
Ｈ’　−ＮＭＲスペクトル、ＣＤｔＣｌ　ｚ使用、第２
図参照によりこの化合物の精製、同定がより一層確かな
ものとなった。ｃＤｔｃｌｔ使用のブロードバンドデカ
ップリングＣＩＣｌ５−Ｎスペクトルは以下の共鳴を示
す。

１２．０３；　　１８．８３；　　１９．６’ｌ　　２
０．４７；　　３０．０７；３５．９５；　　３９．１
０；　　４２．０６；　　５１．０４；　　６９．８８
；　　８１．７５；１２４．３９；　　１２４．４７；
　　１２５．５２；　　１２６．９８；　　１２７．５
１；１２７．５７；　　１２９．６０；　　１２９．６
２；　　１３２．６ｂ　　１３５．１９；１３７．１９
；　　１４３．２２；　　１４３．５０；　　１６１．
２３；　　１６１．９０及び１６７．０４　ｐｐ＋＋１
゜メタノールによる紫外スペクトルは最大吸収２１２ｎｍ
（Ｅ％＝５２２）及び２７４．５ｎｍ（Ｅ％＝７０１）
を持ち、ＣＨ，Ｃｌ　２溶液による赤外スペクトルは、
３６００；　　３３７５；　　１７３０；　１６７０；
１６２５ＣＩｍ−’において、それぞれ吸収バンドが認
められた。これらの性状から以下の構造式を推定した。

〔構造式〕

大施炭立ギューニアピング胃腺におけるガストリンリセプター結
合ギューニアビッグ胃粘膜腺をプライスマン（Ｐｒａｉｓ
ｓｍａｎ　）等の方法により調製〔ジエイ（Ｊ、）、リ
セプター（Ｒｅｃｅｐｔｏｒ）　レス（Ｒｅｓ、）　、
第３巻：第６４７頁（１９８３））。雄のハートレイギ
ューニアピッグ（体重２５０〜４００　ｇ）から摘出し
た胃をよく洗浄し、良く切れるハサミで）ＩＥＰＥｓ緩
衝液中において細かく切りきざむ。ＨＥＰＥＳ緩衝液の
組成は以下の通りである。１３０ｍＭ　ＮａＣ１，１２
ｍＭ　　ＮａｔｌＣＯ３，３ｍＭ　　ＮａＨｚＰＯ４，
３ｍＭ　　ＮａｔｌｌＰＯ４，３１ＩＩＭ　　にｚｌｌ
ＰＯ４，２ｍＭ　　ＭｇＳＯ４，１ｍＭ　　ＣａＣｌ　
ｚ、５ｍＭグルコース及び４ｍＭ　　Ｌ−グルタミン、
２５ｍ　Ｍ　　ＨＥ　Ｐ　Ｅ　Ｓよりなり、ｐＨは７．
４である。細かくされた組織は洗浄後０．１％コラゲナ
ーゼ、０．１％ウシ血清アルブミン（Ｂ　Ｓ　Ａ）を含
むＨＥ　Ｐ　Ｅ　Ｓ緩衝液により振盪恒温槽中、３７℃
４０分間、９５％０□と５％ＣＯ２のバブリングと伴に
インキュベーションする。この組織を５ｎｌのガラスシ
リンジに２回通して胃腺を遊離した。

次に２００メツシユナイロンを使用して、フィルトレー
ジョンし、得られた腺を２７０Ｘｇ、５分間の遠心にか
け、この遠心沈澱、サスペンションを２回繰り返して、
洗浄をする。洗浄後ギューニアビッグ胃腺を０．２５■
／Ｉｌｌのバシトラシンを含む２５ＩＩｌｌのＨＥＰＥ
Ｓ緩衝液で再浮遊させる。結合試験を行なうために、１
４．２μｌの５０％ＭｅＯＨ／ＩＩｚＯ（＆＠結合）、
ガストリン（最終濃度１μ門、非特異的結合）、培地、
実施例２．３、４より得た被検化合物、以上のサンプル
プルをそれぞれ２０μｌの１２５）−ガストリンにュー
イングランドヌユークリアー（Ｎｅｉ＋　Ｅｎｇｌａｎ
ｄ　Ｎｕｃｌｅａｒ　）（ＮＥＮ　）　、２０．０００
ｃｐｍ　２０μｌ）と供に９５％０ｔ１５％ＣＯ！で充
満されている２２０μｌの青線の入ったチューブ３本づ
つに分注し密閉する。

反応混合液は、振盪恒温槽中、２５℃、３０分間のイン
キュページジン後ガラスＧＦ／Ｂフィルター（ワットマ
ン）を使用して、減圧下でフィルトレージョンを得ない
、０．１％ＢＳＡフラクション■を含むＨＥＰＥＳ緩衝
液４緩衝液４凹ｌみやかに洗浄を行なう。フィルター上
に吸着している放射活性物質、１２５　Ｉ−ガストリン
をベックマン５５００ガンマ−カウンターで測定。ガス
トリン結合アッセイの結果を以下の表に示した。

第■表ガストリンリセプター結合化合物　　　　　　　　　　ｒｃ、。（ｎＭ）バージニ
アマイシンＭ　、　　　　　　７１０ｎ　　　　　　　
　　　　　　　１３Ｉ［１９０ ■３６０放射性＠！Ｊ質標識ＣＣＫ−８は”’　Ｉ−ＣＣＫ　−
８として、ニューイングランドヌユークリアー社より入
手。リセプター結合試験はイニス（ｌｎｎｉｓ　）及び
シンダー（Ｓｎｙｄｅｒ）　　（ブロク（Ｐｒｏｃ、　
）　、ナトル（Ｎａｔｌ、）、アカド（Ａｃａｄ、　）
　、サイ（Ｓｃｉ、　）　、。

第７７巻：第　６９１７頁（１９８０）〕の方法により
行なうか、以下の点において若干の改良を施こした。つ
まり　”Ｊ−ＣＣＫリセプター結合アッセイにはなんら
影響を与えない、プロテアーゼインヒビター、ぶつ化フ
ェニルメタンスルホニル（ＰＭＳＦ）及びＯ−フェナン
トロリンを加える事である。すべてのアッセイは、−サ
ンプルあたり、３点測定とした。膵すセブター膜は、プ
リンクマンポリトロンＰＴＩＯ（ブリンクマン）を使用
し、ｐＨ７，７のトリス−塩酸（５０ｍＭ）　３０ｍｌ
中で１ｇ新鮮ラット膵臓組織のホモジナイズより得た。

ホモジネートを２回洗浄し、４Ｂ、０００Ｘｇ、４℃、
１０分間の遠心により沈澱物として補集。

この膜性澱物を５ｍＭジチオスレイトール、０．１ｍＭ
バシトラシン、５ｍＭ　ＭｇＣ１ｚ　　ｉｈＯ，０，２
％加熱処理ＢＳＡ、１．２ｍＭ　　ＰＭＳＦ、０．５ｍ
Ｍ　　Ｏ−フェナントロリンを含むアッセイ用緩衝液で
再遊淫する。濃度は１００ｍ１／１ｇの膵臓とする。

０．４５ｍ１の膜調製物の入ったチューブに、氷水中に
おいて２５μｌのアッセイ用緩衝液（総結合）、非標識
ＣＣＫ２６−３３（非特異的結合）、培地、実施例２．
３．４より得た、被検化合物をそれぞれ、２５　ｐ　ｌ
（Ｄ　”’Ｉ−ＣＣＫト供に加え、ツレらのサンプルに
よる特異的ＣＣＫ結合に対する阻止を判定した。

反応混合液は手足に混ぜ合わせた後３７℃の恒温水槽中
で３０分間ゆるやかに振盪する。更に１■／ｌｌ１１の
ウシ血清アルブミンを含むｐｌ＋７．７、氷冷トリス緩
衝液４ｍｌで希釈し、直ちにワットマンＣＦ／Ｂフィル
ターによりフィルトレージョンする。フィルターを同一
緩衝液４ｔｍｌで３回洗浄後、フィルター上に吸着して
いる放射活性物質をベックマンガンマ５５００カウンタ
ーで測定。それぞれのサンプルはもとのサンプルに２倍
量のアセトンを加え、１５００ｇ、１０分間の遠心上清
を凍結乾燥しその乾燥物質をメタノール／水（ｌ：１）
に入れてアッセイ用試料とした。膵ＣＣＫ結合ア、ツセ
イの結果を以下の表に示した。

第７表膵ＣＣＫリセプター結合化合物　　　　　　　　　　ＩＣ５゜（ｎＭ）バージニ
アマイシンＭ　＋　　　　＞１００．０００１、　　　
　　　　　　　　　　＞１（１，０００ｎ　　　　　　
　　　　　　　　　　　　＞ｔｏ、ｏｏ。

ｍ　　　　　　　　　　　　　　　　　　＞１０，００
０天】〔ＩＬ脳コレシストキニンリセプター結合アッセイＣＣＫ−８
結合試験は膵すセプターアソセイ方法にサイト−（Ｓａ
ｉｔｏ　）等〔ジエイ　（Ｊ、）、ニューロケム（Ｎｅ
ｕｒｏｃｈｅｍ、）　、＋第３７巻：第４８３頁（１９
８１））が改良を加えた方法に従かった。

雄のハートレイギューニアピングより摘出した脳（３０
０〜５００　ｇ）を７．５８ｇ／ｊ！）リズマ−７，４
（２５℃においてｐＨ７，４を示す〕を加えた氷冷５０
１Ｉ＋Ｍトリスー塩酸中に移す。脳皮質を切開し、リセ
プター源とする。新鮮ギューニアビッグ脳組織それぞれ
１ｇに対して、１０ｍ１ｌのトリス／トリズマ緩衝液、
ｐｌ＋７．４でブリンクマンポリトロンＰＴ−１０によ
りホモシナイスした。このホモジネートを４２．０００
Ｘｇ、１５分間の遠心により、ペレットとして、次に以
下の組成からなる結合アッセイ緩衝液２００溶量により
再浮遊した。

緩衝液：１０ｍＭＮ２−ヒドロキシ−エチル−ピペラジ
ン−Ｎ′−２−エタン−硫酸（ＩＩＨＰＥｓ）、２５℃
においてｐＨ７，７、ｍＭ　ＭｇＣ１ｚ　、ｌｎ＋Ｍエ
チレングリコール−ビス−（β−アミノ−エチル−エー
テル−Ｎ、Ｎ’−四酢酸（ＥＧＴＡ）　、０．４％ＢＳ
Ａ及び０．２５　ｒｒｇ／ｒｎ　ｌバシトラシン、ｐ＋
＋ｅ、ｓより成る。結合アッセイ方法のこの続きは実施
例６記載の膵すセプターアセツイ法でよいが、フィルト
レージョン前の反応混合液のインキュベーションは２５
℃、２時間とし、またフィルターの洗浄にはＨＥＰＥＳ
緩衝液を使用する。

脳ＣＣＫ結合アッセイの結果を以下の表に示した。

第■表脳ＣＣＫリセプター結合化合物　　　　　　　　　　ＩＣ３゜（ｎＭ）バージニ
アマイシンＭ　、　　　　　５７１■７．８ ■６．ＩＩＩＩ　　　　　　　　　　　　　　１３．３■　　　
　　　　　　　　　　　　　　　２７０実施例８抗生物質活性構造式Ｉ、■、■なる化合物及びバージニアマイシンＭ
１は実施例２により調製されマツセン（Ｍａｔｓｅｎ）
及びバーリー（Ｂａｒｒｙ　）　　（マニュアルオブ　
クリニカル　ミクロバイオロジー、レネソティ（Ｌｅｎ
ｎｅｔｔｅ）　、スボルディング（Ｓｐａｕｌｄｉｎｇ
）及びトルーアント（Ｔｒｕａｎｔ）　、共著、アメリ
カン（Ａｍｅｒｉｃａｎ）ソサアイアティ（Ｓｏｃｉｅ
ｔｙ　）フォーミクロバイオロジー（Ｍｉｃｒｏｂｉｏ
ｌｏｇｙ）　、ワシントン、デー、シー０．第４１８頁
（１９７４））の報告による方法により、その抗生物質
活性をアッセイした。構造式Ｉ、■、■なる化合物及び
バージニアマイシンＭ、の段階希釈したものに対する最
小発育阻止濃度（Ｍ　Ｉ　Ｃ）を標準円形濾紙法により
判定した。被検化合物の濃度範囲は希釈サンプル溶液２
０μｌでディスクあたり０．０５μｇから３．０ｇｇで
ある。試験菌体のミクロコッカスルテウスをペトリー皿
の普通寒天培地の表面に塗抹する、そして更にその培地
の上にディスクをのせる。この栄養培地には０．２％イ
ーストエキス、１．５％寒天が更に追加されている。

殖菌プレートは１５時間、２８℃で培養し、阻止範囲を
判定する。それぞれの化合物のＭＩＣをマツセン及びバ
ーリー（上述）記載の方法により決定する。その結果を
以下の表に示した。

第４表最小阻止濃度化合物　　　　　　　　　　　　ＭＩＣ（μＭ）バージ
ニアマイシンＭ１１．５Ｉ　　　　　　　　　　　　　　　　　９０．ＯＩ［１
２５０，、ＯｒＶ　　　　　　　　　　　　　　　　１５．０

【図面の簡単な説明】

第１図は構造式■なる化合物のＨ′−核磁気共鳴（ＮＭ
Ｒ）スペクトルを示す図である。第２図は構造式■なる化合物のＨｌ−核磁気共鳴（Ｎ　
Ｍ　Ｒ）スペクトルを示す図である。第３図は構造式■なる化合物のＨｌ　−核磁気共鳴（Ｎ
ＭＲ）スペクトルを示す図である。第４図は構造式■なる化合物の計−核磁気共鳴（ＮＭＲ
）スペクトルを示す図である。出願　　人　　メルク　エンド　カムバニーインコーポ
レーテッド手続補正書昭和６３年２月１６日

Claims

【特許請求の範囲】１、構造式 I なる化合物 ▲数式、化学式、表等があります▼。２、構造式IIなる化合物 ▲数式、化学式、表等があります▼。３、構造式IIIなる化合物 ▲数式、化学式、表等があります▼。４、構造式IVなる化合物 ▲数式、化学式、表等があります▼。５、同化性栄養培地によるストレプトマイセスオリバセ
ウス株の醗酵から産生された特許請求の範囲第１項、第
３項および第４項記載の化合物とバージニアマイシンＭ
＿１の混合物。６、ストレプトマイセスオリバセウス株がＡＴＣＣ５３
５２７である特許請求の範囲第５項記載の混合物。７、同化性液体栄養培地によるストレプトマイセスオリ
バセウス株の制御された好気的醗酵からなる特許請求の
範囲第１項、第３項および第４項記載の化合物及びバー
ジニアマイシンＭ＿１の調製方法。８、ストレプトマイセスオリバセウス株がＡＴＣＣ５３
５２７である特許請求の範囲第７項記載の方法。９、ストレプトマイセスオリバセウスＡＴＣＣ５３５２
７菌体の生物学的純粋培養。１０、塩化メタンスルホニル及びピリジン存在下でのバ
ージニアマイシンＭ＿１の脱水反応よりなるバージニア
マイシンＭ＿１から特許請求の範囲第３項記載の化合物
への構造転換方法。１１、特許請求の範囲第３項記載の化合物の還元反応よ
りなる、特許請求の範囲第３項記載の化合物から、特許
請求の範囲第１項、及び第２項記載の化合物への構造転
換方法。１２、哺乳動物における胃腸疾患、中枢神経系疾患、食
欲調節の治療に有効利用される、バージニアマイシンＭ
＿１の薬学的有効量及び薬学的許容キャリアーを含む薬
学的組成物。１３、哺乳動物における胃腸疾患、中枢神経系疾患、食
欲調節の治療に有効利用される、特許請求の範囲第１項
記載の化合物の薬学的有効量及び薬学的許容キャリアー
を含む薬学的組成物。１４、哺乳動物における胃腸疾患、中枢神経系疾患、食
欲調節の治療に有効利用される、特許請求の範囲第２項
記載の化合物の薬学的有効量及び薬学的許容キャリアー
を含む薬学的組成物。１５、哺乳動物における胃腸疾患、中枢神経系疾患、食
欲調節の治療に有効利用される、特許請求の範囲第３項
記載の化合物の薬学的有効量及び薬学的許容キャリアー
を含む薬学的組成物。１６、哺乳動物における胃腸疾患、中枢神経系疾患、食
欲調節の治療に有効利用される特許請求の範囲第４項記
載の化合物の薬学有効量及び薬学的許容キャリアーを含
む薬学的組成物。１７、哺乳動物における胃腸疾患、中枢神経系疾患、食
欲調節に対するバージニアマイシンＭ＿１の薬学的有効
量の投与よりなる、治療方法。１８、哺乳動物における胃腸疾患、中枢神経系疾患、食
欲調節に対する特許請求の範囲第１項記載の化合物の薬
学的有効量の投与よりなる治療方法。１９、哺乳動物における胃腸疾患、中枢神経系疾患、食
欲調節に対する特許請求の範囲第２項記載の化合物の薬
学的有効量の投与よりなる治療方法。２０、哺乳動物における胃腸疾患、中枢神経系疾患、食
欲調節に対する特許請求の範囲第３項記載の化合物の薬
学的有効量の投与よりなる治療方法。２１、哺乳動物における胃腸疾患、中枢神経系疾患、食
欲調節に対する特許請求の範囲第４項記載の化合物の薬
学的有効量の投与よりなる治療方法。２２、哺乳動物における細菌感染に際して特許請求の範
囲第１項記載の化合物の抗菌活性有効量の経口、非経口
投与よりなる治療方法。２３、哺乳動物における細菌感染に際して特許請求の範
囲第２項記載の化合物の抗菌活性有効量の経口、非経口
投与よりなる治療方法。２４、哺乳動物における細菌感染に際して特許請求の範
囲第３項記載の化合物の抗菌活性有効量の経口、非経口
投与よりなる治療方法。２５、哺乳動物における細菌感染に際して特許請求の範
囲第４項記載の化合物の抗菌活性有効量の経口、非経口
投与よりなる治療方法。