JPS62212326A - マレツク病２価生ワクチンとその製造方法 - Google Patents
マレツク病２価生ワクチンとその製造方法Info
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- JPS62212326A JPS62212326A JP61056494A JP5649486A JPS62212326A JP S62212326 A JPS62212326 A JP S62212326A JP 61056494 A JP61056494 A JP 61056494A JP 5649486 A JP5649486 A JP 5649486A JP S62212326 A JPS62212326 A JP S62212326A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
本発明はニワトリのマレック病予防用の生ワクチンおよ
びその製造方法に関し、より詳しくは、１本のアンプル
中に２種類の有効なワクチンウィルスが含まれていて、
簡便に使用できる２価のニワトリ・マレック病生ワクチ
ンおよびその製造方法に関する。
びその製造方法に関し、より詳しくは、１本のアンプル
中に２種類の有効なワクチンウィルスが含まれていて、
簡便に使用できる２価のニワトリ・マレック病生ワクチ
ンおよびその製造方法に関する。
（従来の技術）
マレック病（Ｍ口）は、ニワトリなどの家禽類に発生す
る、ウィルス伝染性の一種の悪性リンパ腫症であって、
若ヒナの下肢を主とする神経麻痺、けいれんなどの症状
を呈し、致死率の高いことから養鶏業にとって厄介な病
気である。
る、ウィルス伝染性の一種の悪性リンパ腫症であって、
若ヒナの下肢を主とする神経麻痺、けいれんなどの症状
を呈し、致死率の高いことから養鶏業にとって厄介な病
気である。
マレック病の原因ウィルスは、マレック病ウィルス（以
下、ＭＤＶと略記する）と呼ばれる発がん性のヘルペス
ウィルスの１４１であり、ニワトリの体内にごく普通に
存在し、持続感染している。
下、ＭＤＶと略記する）と呼ばれる発がん性のヘルペス
ウィルスの１４１であり、ニワトリの体内にごく普通に
存在し、持続感染している。
マレック病の予防対策として、従来より各種のワクチン
が提案されている。
が提案されている。
最も早く実用化されたのが、ＩＩＶＴと呼ばれる無毒な
七面鳥ヘルペスウィルスから調製したワタチンである。
七面鳥ヘルペスウィルスから調製したワタチンである。
ＩＩＶＴはＭＤＶそのものではないが、ＭＤＶとは抗原
として近縁関係にあるウィルスであり、これを接種する
とマレック病の予防に有効であるため、発がん性の強い
ＭＤＶの代わりにワクチンとして採用されたのである。
として近縁関係にあるウィルスであり、これを接種する
とマレック病の予防に有効であるため、発がん性の強い
ＭＤＶの代わりにワクチンとして採用されたのである。
特にＩＩＶＴ ＦＣ−１２６と呼ばれるウィルス株が、
細胞結合性（ｃｅｌｌ−ａｓｓｏｃｒａｔｅｄ）の凍結
ワクチンもしくは無細胞性（ＣＯ１１−ｆ ｒｅｅ）の
凍結乾燥ワクチンとして用いられている。この＋１ＶＴ
ワクチンは非常に有効であり、マレック病による経済的
損失は激減した。しかし、１９７８年以降、ＨＶＴワク
チンの免疫を打ち破るような非常に病原性の強いＭＤＶ
が出現し、一部マレック病ワクチンブレークとして問題
となっている。
細胞結合性（ｃｅｌｌ−ａｓｓｏｃｒａｔｅｄ）の凍結
ワクチンもしくは無細胞性（ＣＯ１１−ｆ ｒｅｅ）の
凍結乾燥ワクチンとして用いられている。この＋１ＶＴ
ワクチンは非常に有効であり、マレック病による経済的
損失は激減した。しかし、１９７８年以降、ＨＶＴワク
チンの免疫を打ち破るような非常に病原性の強いＭＤＶ
が出現し、一部マレック病ワクチンブレークとして問題
となっている。
ＭＤＶを弱毒化して利用したワクチンも種々のものがこ
れまでに提案されている０例えば、Ｃ１１−２およびＣ
ＶＩ ９８Ｂと呼ばれるウィルス株をワクチンとして利
用することが提案され、実用化されているが、これらは
発がん性が全くないことが確認されておらず〔低毒性（
ｌｏｗ ｖｉｒｕｌｅｎｔ） ＭＤＶ、血清タイプ１〕
、安全面Φ問題が解決されていない。
れまでに提案されている０例えば、Ｃ１１−２およびＣ
ＶＩ ９８Ｂと呼ばれるウィルス株をワクチンとして利
用することが提案され、実用化されているが、これらは
発がん性が全くないことが確認されておらず〔低毒性（
ｌｏｗ ｖｉｒｕｌｅｎｔ） ＭＤＶ、血清タイプ１〕
、安全面Φ問題が解決されていない。
米国特許第４，１６０．０２４号には、３８株と呼ばれ
る発がん性のないＭＤＶおよびそのクローンであるＭＤ
Ｖ ＳＢ−１株と、これらを利用したマレック病ワクチ
ンの製造方法が記載されている。このＭＤＶ ５８株お
よびＳＢ−１株を種ウィルスとするマレック病生ワクチ
ンは、無毒で発がん性のないＩＩＤＶであるために、弱
毒化されずに種ウィルスとして利用されており、従来の
弱毒化マレック病生ワクチン（例えば、ＣＶＩ９８８株
を用いたマレック病生ワクチン）とはこの点で違ってお
り、安全面に問題がないことから有利に使用できる。
る発がん性のないＭＤＶおよびそのクローンであるＭＤ
Ｖ ＳＢ−１株と、これらを利用したマレック病ワクチ
ンの製造方法が記載されている。このＭＤＶ ５８株お
よびＳＢ−１株を種ウィルスとするマレック病生ワクチ
ンは、無毒で発がん性のないＩＩＤＶであるために、弱
毒化されずに種ウィルスとして利用されており、従来の
弱毒化マレック病生ワクチン（例えば、ＣＶＩ９８８株
を用いたマレック病生ワクチン）とはこの点で違ってお
り、安全面に問題がないことから有利に使用できる。
以上のような状況から、現在、米国においては、マレッ
ク病ワクチンブレーク対策用として、ＰＣ−１２６株を
種ウィルスとするＩＩＶＴワクチンと、ＳＢ−１株を種
ウィルスとするＭＤＶワクチンとを、使用直前に１つの
溶解用液に溶かして使用する２価ワクチンが用いられて
いる。
ク病ワクチンブレーク対策用として、ＰＣ−１２６株を
種ウィルスとするＩＩＶＴワクチンと、ＳＢ−１株を種
ウィルスとするＭＤＶワクチンとを、使用直前に１つの
溶解用液に溶かして使用する２価ワクチンが用いられて
いる。
なお、上記ＭＤＶ ５８株および５１１−１株の詳細に
ついては前掲米国特許に説明されており、またこの米国
特許にはたとえばＩＩＶＴ ＦＣ−１２６株などの従来
の各種のＭＤＶについても詳しく説明されているので、
参照されたい。
ついては前掲米国特許に説明されており、またこの米国
特許にはたとえばＩＩＶＴ ＦＣ−１２６株などの従来
の各種のＭＤＶについても詳しく説明されているので、
参照されたい。
（発明が解決しようとする問題点）
現在、わが国においては、マレック病予防用のワクチン
として、上記のＨＶＴ ＰＣ−１２６株を種ウィルスと
するマレック病ワクチンが主に使用されているが、マレ
ック病ワクチンブレーク対策として、別種のワクチンを
さらに添加した２価ワクチンの開発が望まれている。前
述したように、米国においては既に２価マレフク病ワク
チンが開発され、実際に応用されているが、それは前述
のように、使用直前に１つの溶解用液に溶かして混合し
なければならない使用時混合タイプの２価ワクチンであ
る。
として、上記のＨＶＴ ＰＣ−１２６株を種ウィルスと
するマレック病ワクチンが主に使用されているが、マレ
ック病ワクチンブレーク対策として、別種のワクチンを
さらに添加した２価ワクチンの開発が望まれている。前
述したように、米国においては既に２価マレフク病ワク
チンが開発され、実際に応用されているが、それは前述
のように、使用直前に１つの溶解用液に溶かして混合し
なければならない使用時混合タイプの２価ワクチンであ
る。
このように使用時に混合するのでは、操作がその分だけ
煩雑になる上に、雑菌混入の機会の増大や、混合を忘れ
て片方のウィルスのみを接種したり、同種のウィルスの
２本のアンプルの内容物を混合することにより、一方の
ウイ、ルス株のみを接種するといった間違いを生じる可
能性もあり、好ましいことではない。
煩雑になる上に、雑菌混入の機会の増大や、混合を忘れ
て片方のウィルスのみを接種したり、同種のウィルスの
２本のアンプルの内容物を混合することにより、一方の
ウイ、ルス株のみを接種するといった間違いを生じる可
能性もあり、好ましいことではない。
したがって、かかる問題点から、１本のアンプルに上記
２種類のウィルス株を共存させた２価のワクチンが製造
されれば、マレック病の予防接種が簡便・確実になり、
非常に望ましい。
２種類のウィルス株を共存させた２価のワクチンが製造
されれば、マレック病の予防接種が簡便・確実になり、
非常に望ましい。
しかし、従来は、このような２価ワクチンは全く知られ
ていなかった。その理由としては、この両者のワクチン
の製造工程における問題も絡んでいると考えられる。す
なわち、このような−２価ワクチンを製造する場合には
、両方の種ウィルスを培養し、それぞれのウィルス力価
が最も高い時点でウィルスを採取し、混合するのである
が、？ｌＤＶが細胞結合性のワクチンであるため凍結保
存が必須であり、しかもそのためには、両方のウィルス
を同時に採取して、凍結保存することが必須条件となる
。しかし、それぞれのウィルス力価が最も高い時点で同
時にウィルスの採取を行うことができるように培養時期
を調整することが難しいため、このような１本のアンプ
ルに上記の２種類のウィルスを含む２価のマレック病ワ
クチンを製造することが試みられなかったか、あるいは
試みても成功しなかったものと考えられる。たとえば、
両方のウィルスの培養期間がかなり長く、しかも培養期
間の食い違いが大きく、同時に培養ウィルスを採取でき
るようにすることが面倒であった点も理由のひとつと思
われる。
ていなかった。その理由としては、この両者のワクチン
の製造工程における問題も絡んでいると考えられる。す
なわち、このような−２価ワクチンを製造する場合には
、両方の種ウィルスを培養し、それぞれのウィルス力価
が最も高い時点でウィルスを採取し、混合するのである
が、？ｌＤＶが細胞結合性のワクチンであるため凍結保
存が必須であり、しかもそのためには、両方のウィルス
を同時に採取して、凍結保存することが必須条件となる
。しかし、それぞれのウィルス力価が最も高い時点で同
時にウィルスの採取を行うことができるように培養時期
を調整することが難しいため、このような１本のアンプ
ルに上記の２種類のウィルスを含む２価のマレック病ワ
クチンを製造することが試みられなかったか、あるいは
試みても成功しなかったものと考えられる。たとえば、
両方のウィルスの培養期間がかなり長く、しかも培養期
間の食い違いが大きく、同時に培養ウィルスを採取でき
るようにすることが面倒であった点も理由のひとつと思
われる。
（問題点を解決するための手段）
本発明者は、鶏胚細胞により原種ウィルスを培養して種
ウィルスを調製し、この種ウィルスをやはり鶏胚細胞に
接種培養して製造する方法のうち、接種ウィルス量と培
養時間の関係を種々検討し、ＨＶＴとＳＢ−１の各単味
ワクチンについて、従来より短期間培養でウィルス製造
用原液の採取可能な製造方法を確立した。しかも、この
方法で、ＩＩＶＴ ＦＣ−１２６株はほぼＭＤＶ ５Ｂ
−１株の半分の培養期間でよく増殖することを見出すこ
とにより、同時に培養ウィルスの採取を行うように培養
開始時期を調整することが極めて容易となり、上記の２
価のマレック病ワクチンが容易に製造できることを知っ
た。
ウィルスを調製し、この種ウィルスをやはり鶏胚細胞に
接種培養して製造する方法のうち、接種ウィルス量と培
養時間の関係を種々検討し、ＨＶＴとＳＢ−１の各単味
ワクチンについて、従来より短期間培養でウィルス製造
用原液の採取可能な製造方法を確立した。しかも、この
方法で、ＩＩＶＴ ＦＣ−１２６株はほぼＭＤＶ ５Ｂ
−１株の半分の培養期間でよく増殖することを見出すこ
とにより、同時に培養ウィルスの採取を行うように培養
開始時期を調整することが極めて容易となり、上記の２
価のマレック病ワクチンが容易に製造できることを知っ
た。
それにより、１本のアンプルに上記２種類のウィルスを
一緒に凍結保存させてなるマレック病２価ワクチンの開
発に初めて成功し、本発明を完成した。
一緒に凍結保存させてなるマレック病２価ワクチンの開
発に初めて成功し、本発明を完成した。
ここに、本発明は、１本のアンプル中に、ニワトリのマ
レック病ワクチンとして有効なＨＶＴ ＦＣ−１２６株
とＭＤＶ ５Ｂ−１株とを共存させて凍結保存してなる
、２価のニワトリマレック病用生ワクチンである。
レック病ワクチンとして有効なＨＶＴ ＦＣ−１２６株
とＭＤＶ ５Ｂ−１株とを共存させて凍結保存してなる
、２価のニワトリマレック病用生ワクチンである。
また、別の態様によれば、本発明は、
（ａ）ニワトリのマレック病ワクチンとして有効な＋１
ＶＴ ＦＣ−１２６株およびＭＤＶ ＳＢ−１株の各原
種ウィルスを鶏胚細胞によりそれぞれ別個に培養して各
ウィルス株の種ウィルスを採取する第１段培養工程、（
ｂｌ得られたそれぞれの種ウィルスを鶏胚細胞により別
個に培養してそれぞれの培養ウィルスを含有する感染培
養細胞液を各ワクチン製造用原液として調製する第２段
培養工程、および ＴＯ）こうして調製されたそれぞれＩＩＶＴ ＰＣ−１
２６株およびＭＤＶ ５Ｂ−１株の培養ウィルスを含む
各原液を混合し、アンプルに分注・密封後、凍結保存す
る工程、 からなり、かつ前記工程（ａｌおよび工程（ｂ）を、Ｉ
ＩＶＴＰＣ−１２６株とＭＤＶ ５Ｂ−１株の前記第２
段培養が実質的に同時に完了するように行うことを特徴
とする、ニワトリのマレック病予防用２価生ワクチンの
製造方法も提供する。
ＶＴ ＦＣ−１２６株およびＭＤＶ ＳＢ−１株の各原
種ウィルスを鶏胚細胞によりそれぞれ別個に培養して各
ウィルス株の種ウィルスを採取する第１段培養工程、（
ｂｌ得られたそれぞれの種ウィルスを鶏胚細胞により別
個に培養してそれぞれの培養ウィルスを含有する感染培
養細胞液を各ワクチン製造用原液として調製する第２段
培養工程、および ＴＯ）こうして調製されたそれぞれＩＩＶＴ ＰＣ−１
２６株およびＭＤＶ ５Ｂ−１株の培養ウィルスを含む
各原液を混合し、アンプルに分注・密封後、凍結保存す
る工程、 からなり、かつ前記工程（ａｌおよび工程（ｂ）を、Ｉ
ＩＶＴＰＣ−１２６株とＭＤＶ ５Ｂ−１株の前記第２
段培養が実質的に同時に完了するように行うことを特徴
とする、ニワトリのマレック病予防用２価生ワクチンの
製造方法も提供する。
Σ記の培養時間、すなわちウィルス力価が最も高くなる
までの培養時間は、第１段培養が、ＨＶＴＦＣ−１２６
株については４０〜５０時間、特に４３〜４８時間、Ｍ
ＤＶ ＳＢ−１株ニツイては８５〜１００時間、特に９
０〜９４時間であるのが好ましく、第２段培養は、ＨＶ
Ｔ ＦＣ−１２６株については３８〜４８時間、特に４
０〜４５時間、ＭＤＶ ５Ｂ−１株については８５〜１
００時間、特に９０〜９４時間であるのが好ましい。培
養時間は、接種量、培養液濃度、培地種類などの培養条
件により変動するが、たとえば後述するような条件を採
用することによりこのような培養時間とすることができ
る。培養条件は、適当な培養時間となるように適宜変更
できる。
までの培養時間は、第１段培養が、ＨＶＴＦＣ−１２６
株については４０〜５０時間、特に４３〜４８時間、Ｍ
ＤＶ ＳＢ−１株ニツイては８５〜１００時間、特に９
０〜９４時間であるのが好ましく、第２段培養は、ＨＶ
Ｔ ＦＣ−１２６株については３８〜４８時間、特に４
０〜４５時間、ＭＤＶ ５Ｂ−１株については８５〜１
００時間、特に９０〜９４時間であるのが好ましい。培
養時間は、接種量、培養液濃度、培地種類などの培養条
件により変動するが、たとえば後述するような条件を採
用することによりこのような培養時間とすることができ
る。培養条件は、適当な培養時間となるように適宜変更
できる。
（作用）
以下、本発明を添付図面に示した実施態様に基づいて詳
しく説明する。ただし、添付図面の工程図は本発明の方
法の１具体例に過ぎず、本発明の範囲内において各種の
変更が可能であることは言うまでもない。
しく説明する。ただし、添付図面の工程図は本発明の方
法の１具体例に過ぎず、本発明の範囲内において各種の
変更が可能であることは言うまでもない。
本発明の方法では、ＩＩＶＴ ＦＣ−１２６株とＭＤＶ
５Ｂ−１株の両ウィルスとも、鶏胚細胞を利用して培
養するので、まず培養のための鶏胚細胞を用意する。Ｓ
ＰＦ受精卵を種卵として使用し、これを３７℃でＩＯ日
間培養して、胚を成育させる０本発明では、この１０日
間培養した卵から採取した鶏胚を培養の初代細胞として
利用する。鶏胚細胞は、約５％の牛胎児血清を含有する
ＭＥＭ （最小必須培地）で希釈して、１００ ｍｌ当
たり約３〜４ ＸＩＯ”個の鶏胚細胞を含む培養液とし
て接種に使用する。
５Ｂ−１株の両ウィルスとも、鶏胚細胞を利用して培
養するので、まず培養のための鶏胚細胞を用意する。Ｓ
ＰＦ受精卵を種卵として使用し、これを３７℃でＩＯ日
間培養して、胚を成育させる０本発明では、この１０日
間培養した卵から採取した鶏胚を培養の初代細胞として
利用する。鶏胚細胞は、約５％の牛胎児血清を含有する
ＭＥＭ （最小必須培地）で希釈して、１００ ｍｌ当
たり約３〜４ ＸＩＯ”個の鶏胚細胞を含む培養液とし
て接種に使用する。
Ｍ［ｌＶ ５Ｂ−１株の培養は、まず前記の鶏胚初代細
胞培養液にＭＤＶ ５Ｂ−１株の原種ウィルスを接種す
ることにより行う。この接種は、たとえば、上記培養液
１００ ｍｌに［１の原種ウィルス（約４〜８Ｘ１０’
ＰＦＵのウィルス量を含む）を添加することにより実施
される。
胞培養液にＭＤＶ ５Ｂ−１株の原種ウィルスを接種す
ることにより行う。この接種は、たとえば、上記培養液
１００ ｍｌに［１の原種ウィルス（約４〜８Ｘ１０’
ＰＦＵのウィルス量を含む）を添加することにより実施
される。
ＭＤＶ ５Ｂ−１株原種ウィルスを接種した鶏胚細胞は
、３７℃で８５〜１００時間、好ましくは９０〜９４時
間培養しく第１段培養）、得られた感染培養細胞液を問
Ｖ ５Ｂ−１株の種ウィルスとして利用する。この種ウ
ィルスを、上記のようにして調製しておいた別の鶏胚初
代細胞に接種する。この接種は、上記の原種ウィルスと
同様の条件でよく、すなわち、たとえば１ｍｌの種つ、
イルス（約４〜８×１０ＳＰＦｕノウイルス量を含む）
を、上記鶏胚細胞素行培養液１００ｗ１（約３〜４ Ｘ
ＩＯ”個の細胞を含む）に添加することにより行われる
０種ウィルスの培養も上記と同様に３７℃で８５〜１０
０時間、好ましくは９０〜９４時間行われ（第２段培養
）、得られた感染培養細胞液をワクチン製造用の原液と
する。
、３７℃で８５〜１００時間、好ましくは９０〜９４時
間培養しく第１段培養）、得られた感染培養細胞液を問
Ｖ ５Ｂ−１株の種ウィルスとして利用する。この種ウ
ィルスを、上記のようにして調製しておいた別の鶏胚初
代細胞に接種する。この接種は、上記の原種ウィルスと
同様の条件でよく、すなわち、たとえば１ｍｌの種つ、
イルス（約４〜８×１０ＳＰＦｕノウイルス量を含む）
を、上記鶏胚細胞素行培養液１００ｗ１（約３〜４ Ｘ
ＩＯ”個の細胞を含む）に添加することにより行われる
０種ウィルスの培養も上記と同様に３７℃で８５〜１０
０時間、好ましくは９０〜９４時間行われ（第２段培養
）、得られた感染培養細胞液をワクチン製造用の原液と
する。
したがって、本発明の方法により原種ウィルスから第１
段培養により種ウィルスを採取し、これを第２段培養し
て原液を得るという２段階の培養過程を経ることにより
、ＭＤＶ ＳＢ−１株の原種ウィルスの接種から原液の
採取までの培養期間は、各段階約４日間、合計で約８日
間となる。従来、ＭＤＶＳａ−を株の培養は、第１段の
種ウィルス採取までに既に２段階の培養を必要とし、全
体の培養期間は約１３日必要とされていたが、本発明者
は、上記条件で原種ウィルスからワクチン製造用原液採
取まで２段階の培養で済むことを知り、培養期間の短縮
を図った。
段培養により種ウィルスを採取し、これを第２段培養し
て原液を得るという２段階の培養過程を経ることにより
、ＭＤＶ ＳＢ−１株の原種ウィルスの接種から原液の
採取までの培養期間は、各段階約４日間、合計で約８日
間となる。従来、ＭＤＶＳａ−を株の培養は、第１段の
種ウィルス採取までに既に２段階の培養を必要とし、全
体の培養期間は約１３日必要とされていたが、本発明者
は、上記条件で原種ウィルスからワクチン製造用原液採
取まで２段階の培養で済むことを知り、培養期間の短縮
を図った。
＋１ＶＴ ＰＣ−１２６株ニツイても、上述したＭＤＶ
ＳＢ−１株と同様に種ウィルスを経由する２段階の培
養過程で培養を行い、培養条件も同様でよい、ただし、
培養期間は、ＩＩＶＴ ＦＣ−１２６株の原種ウィルス
の接種から種ウィルスの採取までの第１段培養が、４０
〜５０時間、好ましくは４３〜４８時間であり、種ウィ
ルスの接種からワクチン原液の採取までの第２段培養が
３８〜４８時間、好ましくは４０〜４５時間である。
ＳＢ−１株と同様に種ウィルスを経由する２段階の培
養過程で培養を行い、培養条件も同様でよい、ただし、
培養期間は、ＩＩＶＴ ＦＣ−１２６株の原種ウィルス
の接種から種ウィルスの採取までの第１段培養が、４０
〜５０時間、好ましくは４３〜４８時間であり、種ウィ
ルスの接種からワクチン原液の採取までの第２段培養が
３８〜４８時間、好ましくは４０〜４５時間である。
したがって、ＩＩＶＴ ＦＣ−１２６株の培養期間は各
段階約２日間、合計で約４日間となる。 ＩＩＶＴ Ｐ
Ｃ−１２６株の培養期間は従来は約７日必要とされてき
た。
段階約２日間、合計で約４日間となる。 ＩＩＶＴ Ｐ
Ｃ−１２６株の培養期間は従来は約７日必要とされてき
た。
その結果、上述した方法によれば、ＭＤＶ ＳＢ−１株
の第１段培養が終了し、種ウィルスを採取して接種する
前後にＩＩＶＴ ＦＣ−１２６株の第１段培養を開始す
れば、丁度この両者の２段階の培養が同時に終了し、両
者の感染培養細胞液をワクチン製造用原液として同時に
採取することができ、培養期間の管理が非常に容易であ
る。
の第１段培養が終了し、種ウィルスを採取して接種する
前後にＩＩＶＴ ＦＣ−１２６株の第１段培養を開始す
れば、丁度この両者の２段階の培養が同時に終了し、両
者の感染培養細胞液をワクチン製造用原液として同時に
採取することができ、培養期間の管理が非常に容易であ
る。
ＭＤＶ ＳＢ−１株とＩＩＶＴ ＦＣ−１２６株の感染
培養細胞原液を適当な割合、たとえば容量でＳＢ−１原
液ｌに対してＨＶＴ原液ｌの割合で混合し、凍結防止剤
を添加して最終バルクとする。これを、常法によりアン
プルに分注して、溶封し、凍結して液体窒素タンク内で
凍結保存する。
培養細胞原液を適当な割合、たとえば容量でＳＢ−１原
液ｌに対してＨＶＴ原液ｌの割合で混合し、凍結防止剤
を添加して最終バルクとする。これを、常法によりアン
プルに分注して、溶封し、凍結して液体窒素タンク内で
凍結保存する。
（発明の効果）
こうして製造された本発明の２価ワクチンは、１本（７
）７７ブ／Ｌ、ニＩＩＶＴ ＦＣ−１２６株とＭＤＶ
５Ｂ−１株の両方を含んだ、本発明により初めて提供さ
れる従来なかった種類のマレック病２価生ワクチンであ
る。
）７７ブ／Ｌ、ニＩＩＶＴ ＦＣ−１２６株とＭＤＶ
５Ｂ−１株の両方を含んだ、本発明により初めて提供さ
れる従来なかった種類のマレック病２価生ワクチンであ
る。
この２価ワクチンは、そのまま解凍して、溶解用液に溶
かすだけで家禽類のマレック病の予防接種に使用できる
。従来、養鶏業者は、ＭＤＶ ｓｏ−を株とＨＶＴ Ｆ
Ｃ−１２６株の両方を接種するには、これらのワクチン
のアンプルをそれぞれ用意し、その中味を１本の溶解用
液（２００ｍｌ）中に溶かして混合し、１別当たり０．
２ ｍｌ接種していたが、本発明の２価ワクチンは混合
操作を必要とせずにそのまま添付の溶解用液（２００ｍ
ｌ）に溶かして同様に１別当たり０．２ ｍｌ接種で使
用できるので、養鶏業者による使用が簡便となり、また
使用上の間違いもなくなり、実際の使用面での効果は大
きい。
かすだけで家禽類のマレック病の予防接種に使用できる
。従来、養鶏業者は、ＭＤＶ ｓｏ−を株とＨＶＴ Ｆ
Ｃ−１２６株の両方を接種するには、これらのワクチン
のアンプルをそれぞれ用意し、その中味を１本の溶解用
液（２００ｍｌ）中に溶かして混合し、１別当たり０．
２ ｍｌ接種していたが、本発明の２価ワクチンは混合
操作を必要とせずにそのまま添付の溶解用液（２００ｍ
ｌ）に溶かして同様に１別当たり０．２ ｍｌ接種で使
用できるので、養鶏業者による使用が簡便となり、また
使用上の間違いもなくなり、実際の使用面での効果は大
きい。
添付図面は、本発明によるニワトリのマレック病用２価
ワクチンの製造方法の１例を示す工程図である。
ワクチンの製造方法の１例を示す工程図である。
Claims (4)
- （１）１本のアンプル中に、ニワトリのマレック病ワク
チンとして有効な七面鳥ヘルペスウィルス（ＨＶＴ）Ｆ
Ｃ−１２６株とマレック病ウィルス（ＭＤＶ）ＳＢ−１
株とを共存させて凍結保存してなる、ニワトリのマレッ
ク病予防用２価生ワクチン。 - （２）（ａ）ニワトリのマレック病ワクチンとして有効
なＨＶＴ ＦＣ−１２６株およびＨＤＶ ＳＢ−１株の
各原種ウィルスを鶏胚細胞によりそれぞれ別個に培養し
て各ウィルス株の種ウィルスを採取する第１段培養工程
、（ｂ）得られたそれぞれの種ウィルスを鶏胚細胞によ
り別個に培養してそれぞれの培養ウィルスを含有する感
染培養細胞液を各ワクチン製造用原液として調製する第
２段培養工程、および （ｃ）こうして調製されたそれぞれＨＶＴ ＦＣ−１２
６株およびＭＤＶ ＳＢ−１株の培養ウィルスを含む各
原液を混合し、アンプルに分注・密封後、凍結保存する
工程、 からなり、かつ前記工程（ａ）および工程（ｂ）を、Ｈ
ＶＴＦＣ−１２６株とＭＤＶ ＳＢ−１株の前記第２段
培養が実質的に同時に完了するように行うことを特徴と
する、ニワトリのマレック病予防用２価生ワクチンの製
造方法。 - （３）前記第１段培養の培養時間が、ＨＶＴ ＦＣ−１
２６株については４０〜５０時間、ＭＤＶ ＳＢ−１株
については８５〜１００時間であり、前記第２段培養の
培養時間が、ＨＶＴ ＦＣ−１２６株については３８〜
４８時間、ＭＤＶ ＳＢ−１株については８５〜１００
時間である、特許請求の範囲第２項記載の方法。 - （４）前記第１段培養の培養時間が、ＨＶＴ ＦＣ−１
２６株については４３〜４８時間、ＭＤＶ ＳＢ−１株
については９０〜９４時間であり、前記第２段培養の培
養時間がＨＶＴ ＦＣ−１２６株については４０〜４５
時間、ＭＤＶ ＳＢ−１株については９０〜９４時間で
ある、特許請求の範囲第２項記載の方法。
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PCT/JP1987/000677 WO1989002278A1 (en) | 1987-09-14 | 1987-09-14 | Bivalent live vaccine for marek's disease and process for its preparation |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS62212326A true JPS62212326A (ja) | 1987-09-18 |
Family
ID=13902828
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP61056494A Pending JPS62212326A (ja) | 1987-09-14 | 1986-03-14 | マレツク病２価生ワクチンとその製造方法 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS62212326A (ja) |
| WO (1) | WO1989002278A1 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1989002278A1 (en) * | 1987-09-14 | 1989-03-23 | Ghen Corporation | Bivalent live vaccine for marek's disease and process for its preparation |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IL100386A (en) * | 1990-12-24 | 1995-07-31 | Akzo Nv | Suitable free vaccine against virus |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5031026A (ja) * | 1973-07-26 | 1975-03-27 | ||
| US4160024A (en) * | 1978-05-01 | 1979-07-03 | Cornell Research Foundation, Inc. | Marek's disease vaccine |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB1292803A (en) * | 1968-11-18 | 1972-10-11 | Nat Res Dev | Improvements relating to the production of antigens |
| NL7115348A (ja) * | 1970-11-25 | 1972-05-29 | ||
| JPS62212326A (ja) * | 1987-09-14 | 1987-09-18 | Gen Corp:Kk | マレツク病２価生ワクチンとその製造方法 |
-
1986
- 1986-03-14 JP JP61056494A patent/JPS62212326A/ja active Pending
-
1987
- 1987-09-14 WO PCT/JP1987/000677 patent/WO1989002278A1/ja unknown
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5031026A (ja) * | 1973-07-26 | 1975-03-27 | ||
| US4160024A (en) * | 1978-05-01 | 1979-07-03 | Cornell Research Foundation, Inc. | Marek's disease vaccine |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1989002278A1 (en) * | 1987-09-14 | 1989-03-23 | Ghen Corporation | Bivalent live vaccine for marek's disease and process for its preparation |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO1989002278A1 (en) | 1989-03-23 |
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