JPS62169837A - 大孔質粒子の製造方法 - Google Patents
大孔質粒子の製造方法Info
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- JPS62169837A JPS62169837A JP61243321A JP24332186A JPS62169837A JP S62169837 A JPS62169837 A JP S62169837A JP 61243321 A JP61243321 A JP 61243321A JP 24332186 A JP24332186 A JP 24332186A JP S62169837 A JPS62169837 A JP S62169837A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
分子の分離は、当該分子と交互作用をする配位子が結合
しているマトリックスの助けによって大部分行なわれる
。これらの配位子はイオン状、疎水性または親和性配位
子でもよい。寸法、ゲル濾過によって分子を分離すると
きは、相互に異なる多孔度を有する電気的に中性なマト
リックスが使用される。これらのマトリックスは、良好
な流れ特性を与えるために通常回転楕円面の形状である
。
しているマトリックスの助けによって大部分行なわれる
。これらの配位子はイオン状、疎水性または親和性配位
子でもよい。寸法、ゲル濾過によって分子を分離すると
きは、相互に異なる多孔度を有する電気的に中性なマト
リックスが使用される。これらのマトリックスは、良好
な流れ特性を与えるために通常回転楕円面の形状である
。
分離系の流れ特性はまた、存在する粒子の寸法によって
も決まる；粒子が小さければ圧力低下もそれに応じて高
く、流速を遅らせることになる。分子が迅速に分離され
るように、高い流速が得られることは工業的用途には望
ましいことである。使用される粒子に関する他の重要な
パラメーターは、該粒子によって示される全比表面積で
ある。粒子の比表面積が大きければ、それに応じて分子
はマトリックス中に迅速に浸透することができ、そして
、配位子と相互作用をすることができる。この比表面積
は、粒子の寸法を減少させることによって増加させるこ
とができる。
も決まる；粒子が小さければ圧力低下もそれに応じて高
く、流速を遅らせることになる。分子が迅速に分離され
るように、高い流速が得られることは工業的用途には望
ましいことである。使用される粒子に関する他の重要な
パラメーターは、該粒子によって示される全比表面積で
ある。粒子の比表面積が大きければ、それに応じて分子
はマトリックス中に迅速に浸透することができ、そして
、配位子と相互作用をすることができる。この比表面積
は、粒子の寸法を減少させることによって増加させるこ
とができる。
この反対命題は、通常中間経路、すなわち、分離系統の
流れ特性または比表面積のいずれに関しても最適でない
比較的大きい粒子寸法を使用することによって解決され
ている。
流れ特性または比表面積のいずれに関しても最適でない
比較的大きい粒子寸法を使用することによって解決され
ている。
本発明者等は、粒子の高い速度が得られ、かつ非常に大
ぎい比表面積が得られる寸法を付与することができるよ
うに多数の空洞（ｃａｖｉｔｙ）を内蔵する粒子を製造
することによって前記の反対命題を克服した。提供され
る粒子の極めて大きい表面積は、分子の分離に加えて固
定依存性細胞（ａｎｃｈｏｒａｇｅ ｄｅｐｅｎｄｅｎ
ｔ ｃｅｌｌｓ ）の培養にも使用できる。この方法に
おいては、固定依存性細胞は栄養素中に懸濁されている
粒子の表面上、マイクロキャリヤー（ｍ１ｃｒｏｃａｒ
ｒｉｅｒ）上で生長できる。
ぎい比表面積が得られる寸法を付与することができるよ
うに多数の空洞（ｃａｖｉｔｙ）を内蔵する粒子を製造
することによって前記の反対命題を克服した。提供され
る粒子の極めて大きい表面積は、分子の分離に加えて固
定依存性細胞（ａｎｃｈｏｒａｇｅ ｄｅｐｅｎｄｅｎ
ｔ ｃｅｌｌｓ ）の培養にも使用できる。この方法に
おいては、固定依存性細胞は栄養素中に懸濁されている
粒子の表面上、マイクロキャリヤー（ｍ１ｃｒｏｃａｒ
ｒｉｅｒ）上で生長できる。
この粒子の内部も細胞培養法に使用できるため、利用で
きる表面積ははるかに大きく、培養工程の間細胞に対す
る機械的保護も与えられる。
きる表面積ははるかに大きく、培養工程の間細胞に対す
る機械的保護も与えられる。
これらの大孔質粒子は、空洞生成用化合物と、マトリッ
クス形成用化合物を混合することによって製造される。
クス形成用化合物を混合することによって製造される。
空洞生成用化合物は、固体、液体または気体でもよい。
次いで、得られた混合物を水不溶性分散媒中に分散させ
、その中に粒子を形成する。次いで、この系を冷ＩＩＩ
することによって、共有架橋結合によって、または、重
合によって水に不溶性にする。空洞生成用化合物を除去
後に、得られた大孔質粒子を誘導体にするか直接所期目
的に使用することができる。
、その中に粒子を形成する。次いで、この系を冷ＩＩＩ
することによって、共有架橋結合によって、または、重
合によって水に不溶性にする。空洞生成用化合物を除去
後に、得られた大孔質粒子を誘導体にするか直接所期目
的に使用することができる。
マトリックス形成用化合物は、蛋白質、多糖類または合
成ポリマーから選ばれる。使用できる化合物の例は： 蛋白質−ゼラチン、アルブミン 多糖類−デキストラン、アガロース 合成ポリマー−ポリアクリルアミド である。
成ポリマーから選ばれる。使用できる化合物の例は： 蛋白質−ゼラチン、アルブミン 多糖類−デキストラン、アガロース 合成ポリマー−ポリアクリルアミド である。
空洞生成用固体化合物の例は、炭酸カルシウムであり、
これは水不溶性分散媒中に混合物を分散させることによ
って粒子をｔＪ ｍし、マトリックスを水不溶性にした
後に、その系を酸で処理することによって除去できる。
これは水不溶性分散媒中に混合物を分散させることによ
って粒子をｔＪ ｍし、マトリックスを水不溶性にした
後に、その系を酸で処理することによって除去できる。
使用される空洞生成用化合物が液体のときは、乳化剤の
添加が必要である。水不溶性空洞生成用液体化合物を、
水不溶性乳化剤（ＨＬＢ−値が８９より大きいことを特
徴とする）と混合する。系をかく拌しながら水不溶性乳
化剤（８より低いＨＬＢ値を特徴とする）を９右する空
洞生成用化合物をマトリックスの水性溶液に連続的に添
加することによって、空洞生成用化合物の小滴が形成さ
れる：かく拌がはげしければそれに応じて小さい小滴が
形成される。空洞生成用化合物を、マトリックス物質の
水性溶液を飽和させるのに十分な間で添加したとき、そ
れ以上の添加はマトリックス溶液が空洞生成用化合物の
過剰ｍの小滴を形成するであろう。安定な分散体が１９
られるような乳化剤の選択によって、空洞生成用化合物
の小滴を含有するマトリックス物質の粒子が得られ、そ
の後、マトリックス物質を水に不溶性にする。次いで、
空洞生成用化合物を溶剤で洗浄除去する。大部分の有機
溶剤（水に不溶性の）は、植物油または鉱油と同様に空
洞生成用化合物として使用できる。
添加が必要である。水不溶性空洞生成用液体化合物を、
水不溶性乳化剤（ＨＬＢ−値が８９より大きいことを特
徴とする）と混合する。系をかく拌しながら水不溶性乳
化剤（８より低いＨＬＢ値を特徴とする）を９右する空
洞生成用化合物をマトリックスの水性溶液に連続的に添
加することによって、空洞生成用化合物の小滴が形成さ
れる：かく拌がはげしければそれに応じて小さい小滴が
形成される。空洞生成用化合物を、マトリックス物質の
水性溶液を飽和させるのに十分な間で添加したとき、そ
れ以上の添加はマトリックス溶液が空洞生成用化合物の
過剰ｍの小滴を形成するであろう。安定な分散体が１９
られるような乳化剤の選択によって、空洞生成用化合物
の小滴を含有するマトリックス物質の粒子が得られ、そ
の後、マトリックス物質を水に不溶性にする。次いで、
空洞生成用化合物を溶剤で洗浄除去する。大部分の有機
溶剤（水に不溶性の）は、植物油または鉱油と同様に空
洞生成用化合物として使用できる。
好適な乳化剤の例は、スパン（Ｓｔ）ａｎ） ８５、ア
ルラセル（＾ｒｌａｃｅｌ ） ８３ （水に不溶性）
およびツイーン（Ｔｗｅｅｎ ） ８０、トライトン（
ＴｒｉｔＯｎ） Ｘ−１００（水溶性）である。
ルラセル（＾ｒｌａｃｅｌ ） ８３ （水に不溶性）
およびツイーン（Ｔｗｅｅｎ ） ８０、トライトン（
ＴｒｉｔＯｎ） Ｘ−１００（水溶性）である。
使用される空洞生成用化合物が気体形態のときは、水溶
性乳化剤を含有するマトリックスの水性溶液中に高圧下
で前記の気体を吹込んで系内に安定な気泡を生成させる
。次いで、この混合物を水不溶性分散媒中に分散させて
粒子を生成させる。
性乳化剤を含有するマトリックスの水性溶液中に高圧下
で前記の気体を吹込んで系内に安定な気泡を生成させる
。次いで、この混合物を水不溶性分散媒中に分散させて
粒子を生成させる。
この分散媒には安定な分散体をＩＳ７るために水溶性乳
化剤も添加される。乳化剤および分散媒は粒子を水に不
溶性にした優に除去する。
化剤も添加される。乳化剤および分散媒は粒子を水に不
溶性にした優に除去する。
実施例１
熱ゲル化（空洞生成用液体化合物）
ゼラチンを水中で加熱して１０％（Ｗ／Ｖ）の濃度に溶
解させ、１００ｄのゲル化溶液に６３の乳化剤（ツイー
ン８０）を添加した。次いで、３０ｇの乳化剤（スパン
８５）を含有するトルエン５００！ｄをかく拌しながら
前記の溶液に添加した。所望の寸法のビーズが形成され
たとき、分散液をゼラチンの凝固温度より低い温度に冷
却した。上記の方法によってトルエンの小滴によって飽
和されたゼラチンのビーズが形成される。これらのトル
エンの小滴はビーズをエタノールおよびアセトンによる
洗浄によって除去でき、それによって、空洞で満された
ゼラチンビーズが生成する。
解させ、１００ｄのゲル化溶液に６３の乳化剤（ツイー
ン８０）を添加した。次いで、３０ｇの乳化剤（スパン
８５）を含有するトルエン５００！ｄをかく拌しながら
前記の溶液に添加した。所望の寸法のビーズが形成され
たとき、分散液をゼラチンの凝固温度より低い温度に冷
却した。上記の方法によってトルエンの小滴によって飽
和されたゼラチンのビーズが形成される。これらのトル
エンの小滴はビーズをエタノールおよびアセトンによる
洗浄によって除去でき、それによって、空洞で満された
ゼラチンビーズが生成する。
次いで、ゼラチンビーズを例えばグルタルアルデヒドで
架橋させて安定性をさらに増加させることができる。
架橋させて安定性をさらに増加させることができる。
実施例２
熱ゲル化（空洞生成用 令
５ｇの乳化剤（トライトンＸ−１００）を１０Ｃ）＋ｔ
ｅのゼラチン溶液（１０％Ｗ／Ｖ）に添加した。
ｅのゼラチン溶液（１０％Ｗ／Ｖ）に添加した。
次いで、空気を加圧下で前記溶液中に吹込み、その中に
多数の気泡を形成した。系をかく拌しながら前記の溶液
を、３０ｇの乳化剤（スパン８５）を含有する５００Ｉ
ｒｔｌのトルエン／クロロホルム（７３／２７、Ｗ／Ｖ
）中に分散させてビーズを形成した。所望寸法のビーズ
を生成させた後、分散液を冷却させてゼラチンを凝固さ
せた。エタノールおよびアセトンで洗浄することによっ
て有機溶剤を除去した。次いで、得られたビーズを例え
ばグルタルアルデヒドでさらに架橋させることもできる
。
多数の気泡を形成した。系をかく拌しながら前記の溶液
を、３０ｇの乳化剤（スパン８５）を含有する５００Ｉ
ｒｔｌのトルエン／クロロホルム（７３／２７、Ｗ／Ｖ
）中に分散させてビーズを形成した。所望寸法のビーズ
を生成させた後、分散液を冷却させてゼラチンを凝固さ
せた。エタノールおよびアセトンで洗浄することによっ
て有機溶剤を除去した。次いで、得られたビーズを例え
ばグルタルアルデヒドでさらに架橋させることもできる
。
実施例３
熱ゲル化（空洞生成用固体化合物）
１Ｃ１の炭酸カルシウムを１００ｄゼラチン溶液（１０
％Ｗ／Ｖ）に添加し、その後に実施例３のようにビーズ
を生成させた。ビーズを酸で処理して炭酸カルシウムを
溶解させ、それによってビーズ中に空洞を形成した。
％Ｗ／Ｖ）に添加し、その後に実施例３のようにビーズ
を生成させた。ビーズを酸で処理して炭酸カルシウムを
溶解させ、それによってビーズ中に空洞を形成した。
実施例４
１塗
アクリルアミド（１７９）およびビスアクリルアミド（
１，２ｇ）をトリス（Ｔｒｉｓ）−緩衝液（１００ｍ、
０．０５Ｍ、ｐｔ−１７）中に溶解させた。過流酸アン
モニウム（０，５９／ｍｆｌ。
１，２ｇ）をトリス（Ｔｒｉｓ）−緩衝液（１００ｍ、
０．０５Ｍ、ｐｔ−１７）中に溶解させた。過流酸アン
モニウム（０，５９／ｍｆｌ。
０．２５ａｅ）ｉよび乳化剤（トライトンＸ−１００，
６ｇ）を前記の七ツマー溶液に添加した。次いで、乳化
剤（スパン８５．３０ｇ）を含有する５００ｎｅのトル
エンをかく痒しながら系に添加した。次いで、ＴＥＭＥ
Ｄ （助媒体、１．３ｄ）をこの系に添加した。重合反
応の終了後にエタノールおよびアセトンで有機溶剤を洗
浄除去した。
６ｇ）を前記の七ツマー溶液に添加した。次いで、乳化
剤（スパン８５．３０ｇ）を含有する５００ｎｅのトル
エンをかく痒しながら系に添加した。次いで、ＴＥＭＥ
Ｄ （助媒体、１．３ｄ）をこの系に添加した。重合反
応の終了後にエタノールおよびアセトンで有機溶剤を洗
浄除去した。
実施例５
規１」は［周令
デキストランの水性溶液（１０％、ｗ／ｖ、１００成）
に、水酸化す］−リウム（０，７ｇ）および乳化剤（ツ
イーン８０．６ｇ）を添加した。乳化剤（スパン８５．
３０ｇ）およびエピクロロヒドリン（１，５ｇ）を溶解
させたトルエン（５００ｆｄ）を、かく拌しながら前記
の系に添加した。
に、水酸化す］−リウム（０，７ｇ）および乳化剤（ツ
イーン８０．６ｇ）を添加した。乳化剤（スパン８５．
３０ｇ）およびエピクロロヒドリン（１，５ｇ）を溶解
させたトルエン（５００ｆｄ）を、かく拌しながら前記
の系に添加した。
この系の温度を２時間で４０℃に上昇させ、次いで、１
２時間の間に７０℃に上昇させた。得られたビーズをエ
タノールおよびアセトンで洗浄してＦｉ機溶剤を除去し
た。使用するデキストランおよびエビクロロヒドリンの
渚を変化させることによって、形成されるビーズの性質
を変えることができる。
２時間の間に７０℃に上昇させた。得られたビーズをエ
タノールおよびアセトンで洗浄してＦｉ機溶剤を除去し
た。使用するデキストランおよびエビクロロヒドリンの
渚を変化させることによって、形成されるビーズの性質
を変えることができる。
実施例６
共右架槓結合
キトサンを蟻酸（５％、Ｗ／Ｖ）中に溶解させて３０ｑ
／１の濃度にした。１００Ｉｎｌの溶液を乳化剤（ツイ
ーン８０．６ｇ）と混合し、系をかく拌しながら乳化剤
〈スパン８０．３０ｇ＞を含有するトルエン（５００ｄ
）と混合した。所望の寸法のビーズが形成された後にこ
の系にホルムアルデヒド（２０ｄ）を添加した。得られ
たビーズを１時間経過復メタノールで洗浄した。
／１の濃度にした。１００Ｉｎｌの溶液を乳化剤（ツイ
ーン８０．６ｇ）と混合し、系をかく拌しながら乳化剤
〈スパン８０．３０ｇ＞を含有するトルエン（５００ｄ
）と混合した。所望の寸法のビーズが形成された後にこ
の系にホルムアルデヒド（２０ｄ）を添加した。得られ
たビーズを１時間経過復メタノールで洗浄した。
Claims (8)
- （１）多数の空洞を内蔵するポリマーマトリックスが配
合されていることを特徴とする大孔質粒子。 - （２）前記の粒子が、１０〜５００μの寸法を有し、前
記の空洞が１〜５０μの直径を有することを特徴とする
特許請求の範囲第１項に記載の粒子。 - （３）前記の粒子が約２００μの寸法を有し、そして、
前記の空洞が約１０〜２０μの直径を有することを特徴
とする特許請求の範囲第２項に記載の粒子。 - （４）前記のポリマーマトリックスが、蛋白質、多糖類
または合成ポリマーから成る特許請求の範囲第１〜第３
項の任意の１項に記載の粒子。 - （５）多数の空洞を内蔵するポリマーマトリックスが配
合されている大孔質粒子の製造方法において、（Ａ）マ
トリックス物質のための水性溶剤中に、ポリマーまたは
重合性モノマーから選ばれるマトリックス物質を溶解さ
せ； （Ｂ）水溶性乳化剤を添加し； （Ｃ）（ａ）系をかく拌しながら、分散媒中に溶解する
乳化剤を含有する水不溶性分散媒を添加することをによ
って、または、 （ｂ）前記の溶液中に高圧下で気体を吹込むことによっ
て、または、 （ｃ）空洞生成用固体化合物を添加することによって、
前記のマトリックス物質中に空洞を形成し、 （Ｄ）分散媒に可溶性の乳化剤を含有する前記の過剰の
水不溶性分散媒中に前記のマトリックス物質を分散させ
、該マトリックス物質の粒子を生成させ、 （Ｅ）冷却によって、共有架橋結合によって、または重
合によって、前記のマトリックス物質を水不溶性にし、
そして、 （Ｆ）存在する前記の分散媒および任意の空洞生成用固
体化合物を洗浄除去する ことを特徴とする前記の方法。 - （６）前記のマトリックス物質に負の基、正の基、疎水
性基または親和性配位子を結合させることを特徴とする
特許請求の範囲第５項によって製造された大孔質粒子の
改質。 - （７）前記のマトリックス物質を、蛋白質、多糖類また
は重合性モノマーから成る群から選ぶことを特徴とする
特許請求の範囲第５項または第６項に記載の方法。 - （８）多数の空洞を内蔵するポリマーマトリックスが配
合されている大孔質粒子の、ゲル濾過、疎水クロマトグ
ラフィ、アフィニティクロマトグラフィーにおけるイオ
ン交換剤として、または細胞培養方法におけるマイクロ
キャリヤーとしての使用。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SE8504764A SE464816B (sv) | 1985-10-15 | 1985-10-15 | Makroporoesa partiklar, foerfarande foer dess framstaellning och dess anvaendning |
| SE8504764-5 | 1985-10-15 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS62169837A true JPS62169837A (ja) | 1987-07-27 |
| JPH0830124B2 JPH0830124B2 (ja) | 1996-03-27 |
Family
ID=20361735
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP61243321A Expired - Lifetime JPH0830124B2 (ja) | 1985-10-15 | 1986-10-15 | 大孔質粒子の製造方法 |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US4935365A (ja) |
| EP (1) | EP0222718B1 (ja) |
| JP (1) | JPH0830124B2 (ja) |
| DE (1) | DE3689327T2 (ja) |
| SE (1) | SE464816B (ja) |
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