JPS62114947A - Ｄ−ベ−タ−リジルメタンジアミンおよびその製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は新規抗生物質Ｄ−ベーターリジルメタンジアミ
ンに関し、またこの化合物を、ストレプトミセス属に属
する微生物の培＠Ｖｃ工って製造ブる方法に関する。

本発明者らは東京部品用区上大崎の微生物化学研究所構
内の土壌試料エリ分離された放線菌Ｍ　Ｄ７４３−ＧＦ
Ａ株を培養して、Ｄ−ペーターリソルメタンゾアミンを
生産、蓄積せしめ、その培養物から新規化合物、Ｄ−ペ
ーターリノルメタンジアミンを採取することができるこ
とを発見した。

Ｄ−ペーターリゾルメタンノアミンはダラム陽性菌に有
効な抗生物質であり、また免疫増強作用を有する。また
、Ｄ−ベーターリジルメタンノアミンの加水分解によっ
て得られるＤ−ペーターリノンは本発明者らによって発
明されたダラム陰性菌に有効な抗生物質デオキシネガマ
イシンを合成スる出発原料として有用である（特開昭５
２−５’？ｌ１２号、昭和５２年５月１６日公開）。

第一の本発明の要旨とするところは、新規化合物として
次式（１） Ｎ馬 で表わされるＤ−ベーターリシルメタンシアミンおよび
その酸付加塩にある。

この新規化合物の理化学的性状ならびに生物学的性状は
次のとおシであるＯ Ｄ−ベーターリシルメタンシアミンは強塩基性物質であ
り、その１７２炭酸塩として単離され九〇−ペーターリ
ノルメタンゾアミンは吸湿性の無色粉末で明確な融点を
測定できない。この１／２炭酸塩の比旋光度は〔α］Ｄ
＝　−７，４°（ｃｏ、ｓ、水）および〔α）、　＝−
２１，３°（ｃｏ、４６，０．０８Ｎ塩酸）を示し、元
素分析値はＣ４４，７５チ、Ｈ８，６３チ。

Ｎ　２６．５０　％　、　　０２０．６２　％で、Ｃ７
Ｈ１８Ｎ４０−Ｉ／２Ｈ２Ｃ０３の分子式（理論値：　
Ｃ４３，８’？　％、　Ｈ’？、３３　ｓ、　Ｎ２７．
３０％、　　０１９．４９チ）が推定され、質量分析（
ＳＩＭＳ）によってｍ　／　ｚ　ｌ　７５　（ＭＨ）　
　を示した。水浴液中のＤ−ベーターリジルメタンジア
ミンの紫外部吸収スはクトル曲線は特異吸収を示さない
。臭化カリウム錠で測定した赤外部吸収スペクトル曲線
は添付図面の第１図に示すごとくである。重水中（ｐＤ
６　）で測定した核磁気共鳴スペクトルの化学シフト（
δ、ｐｐｍ）は第１表に示すとおりである。

１　　　４．５６　ｓ　２Ｈ４６，６＋３　　　　　　
　　　　　　１７４．３１！４　　　２．７６　ｄｄ　
ＩＨ３７，４＋２．９０　ｄｄ　１）１ ５　　　３．７７　ｂｒ　ＩＨ４９，３ｄ７　　　　　
　　　　　　　２４．０　＋８３．０９　ｂｒ　２Ｈ４
０，２ｔ Ｄ−ベーターリシルメタンシアミンは水によく溶けるが
一般の有機溶媒に難溶または不溶である。

ニンヒドリン反応およびライドン−スミス反応閣性でア
ル。セルロース（アビセルＳＦ、　フナコシ薬品）の薄
層クロマトグラフィー（展開系二グロ・イノール・ピリ
シン・酢酸・水、＋５：１０：３：１２容）で、Ｒｆ　
Ｏ，３＆に単一スポットにニンヒドリン反応）を示した
・ 蟻酸・酢酸・水（１：３：３６容）を用いた高圧”ｒ紙
電気泳動（３・３００　Ｖ、　１５分）でアラニンの移
動度を１．０としたとき、Ｄ−ベーターリシルメタンシ
アミンの移動度は２．５０を示し念。

Ｄ−ベーターリシルメタンシアミンのピクリン酸塩は黄
色結晶で分解点１８＋−１ｇ３°Ｃを示し、元素分析値
ハＣ３４，７４＊、　　Ｈ３，２１％、　Ｎ　２１．４
０チ、　０４０．９５％で、Ｃ７Ｈ１８Ｎ４０・３Ｃ６
Ｈ３Ｎ５０．　　の理論値　（Ｃ３４，ｇｓ　　％　、
Ｈ３，１６ダ６．　　　Ｎ２１．＋３　　ラ６　。

０４０．８５チ）に合致した〇 本発明で得られたＤ−ベーターリシルメタンシアミン（
１／２炭酸塩）は、０．５％ペグトン寒天平根上で測定
した黄色ブドウ球菌（スミス株）、枯草菌（Ｂ−５５８
株およびＰＣＩ２１９株）に対する最小発育阻止濃度が
それぞれ５０ｍｃｇ／−であった。さらに、Ｄ−ベータ
ーリシルメタンシアミンを連日静脈注射されたマウスに
対して、ヒソゾ赤血球（ＳＲＢＣ）を抗原として投与し
、その数日后に牌臓を摘出して牌臓細胞について抗体産
生細胞数を測定したところ、対照試験に比べて抗体産生
細胞数が増加していることが見出され、Ｄ−ベーターリ
シルメタンシアミンは液性免疫増強作用を有することが
認められた。また、Ｄ−ベーターリジルメタンシアミン
を連日、腹腔内投与されたマウスに対して、抗原として
５ＲＢＣをマウスの足踏に投与し、５ＲＢＣに対する免
疫の成立後に再び５ＲＢＣを投与してから足踏の厚さの
増加、すなわち浮腫増加率を求める手法で遅延性過敏症
（Ｄｅｌａｙｅｄ　Ｔｙｐｅ　Ｈｙｐｅｒｓｅｎｓｉｔ
ｉｖｉｔｙ　）の応答を調べたところ、細胞性免疫増強
作用が認められた。

Ｄ−ベーターリシルメタンシアミンのマウス静脈内投与
による急性毒性試験で２５０■／ｋｇの投与量で死亡例
はなかった。

第一の本発明によるＤ−ベーターリシルメタンシアミン
は遊離塩基またはその水和物または炭（し塩として得る
ことができるが、通常の方法に工り薬学的に許容できる
酸を加えて他の任意の無毒性の酸付加塩とすることがで
きる。付加すべき酸としては、塩酸、臭化水素酸、硫酸
、燐酸、硝酸などの無機塩、酢酸、リンゴ酸、クエン酸
、アスコルビン酸、メタンスルホン酸、ピクリン酸など
の有機酸が用いられる。

第二の本発明の要旨とするところは、ストレプトミセス
属に属するＤ−ベーターリシルメタンジアミンの生産菌
を培養し、その培養物からＤ−ベーターリシルメタンジ
アミンを採取するＤ−ぺ一ターリゾルメタンノアミンの
製造法にある。

本発明の方法によれば、Ｄ−ベーターリシルメタンジア
ミンはそれぞれ純粋な状態で、あるいは粗製の状態で、
また溶液の状態で、あるいは固体の状態で採取される。

Ｄ−ベーターリシルメタンジアミン生産菌の一例は昭和
４８年２月、微生物化学研究所において、研究所構内の
土壌より分離された放線菌で、ＭＤ７４３−ＧＦ４の菌
株番号が付された菌株である。

ＭＤ７４３−（、ＦＡ株の菌学的性状は次に示すとおり
である０ １、形態 ＭＤ７４３−ＧＦ’４株は、顕微鏡下で分枝した基底菌
糸工９らせん状の気菌糸を形成し、輪生枝は、みとめら
れない。成熟した胞子鎖は、２０　（！ｒ、Ｊ以上の胞
子の連鎖をみとめ、胞子の大きさは０．６〜０．７　Ｘ
　１．４〜１．７ミクロン位で、胞子の表面は、平滑で
ある。

２、各１培地における生育状態 色の記載について〔〕内に示す標準は、コンテイナー・
コーポレーション・オプ・アメリカのカラー・バーそニ
ー６マニユアル（ＣｏｎｔａｉｎｅｒＣｏｒｐｏｒａｔ
ｉｏｎ　ｏｆ　ＡｍｅｒｉｃａのＣｏ１ｏｒ　ｈａｒｍ
ｏｎｙｍａｎｕａｌ　）　　を用いた。

（り　　　シュクロース・硝酸塩寒天培地（２７″ｃ培
養）無色の発育上に、明るい藁灰［４ｇｅ、　Ｒｏｓｅ
Ｂｅｉｇｅ　］の気菌糸をうつすらと着生し、溶解＋’
ＱＨＦＪ素はみとめられない。

（２）　グリセリン・硝酸塩寒天培地（２７°Ｃ培養）
うす黄Ｃ２ｇｃ、　Ｂａｍｂｏｏ　］　　〜にぶ黄〔３
ｐＣ１Ａｍｂｅｒ　〕の発育上に、白の気菌糸をうつす
らと着生し、溶解性色素は、黄色味をおびる。

（３）　　　グルコース・アスパラギン寒天培地（２７
℃培養）うす黄Ｃ２ｇｃ、　Ｂａｍｂｏｏ　）　　の発
育上に、明るい藁灰Ｃ４ｇｅ−Ｒｏｓｅ　Ｂｅｉｇｅ　
］　　の気菌糸を着生し、溶解性色素はみとめられない
。

（４）　　　イースト・麦芽寒天培地（ｌ５ｐ−培地２
．２７℃培ＩＩ）うす黄茶Ｃ３ｎｇ、　ＹｅｌｌｏｗＭ
ａｐｌｅ　〕ノ発育上に、明るい藁灰Ｃ３ｄｃ、　Ｎａ
ｔｕｒａｌ　〜５　ｆｅ、　Ａｓｈｅｓ　］の気菌糸を
着生し、溶解性色素はみとめられない。

＋５１　　＃　−トミール寒天培ｊｉｂ（ＩＳＰ−培地
３．　２７ｃ′ｃ培養）うす黄［３ｉｅ、　Ｇａｍｅｌ
　］の発育上に、明るい藁灰Ｃ５ｆｅ、　Ａｓｈｅｓ　
］の気菌糸を着生し、溶解性色素はみとめられない。

（６）　　スターチ・無機塩寒天培地（ｌ５Ｐ−培地４
，２７°Ｃ培養）無色〜うす茶Ｃ３１ｇ、　Ｌｔ　Ｂｒ
ｏｉ　）　　の発育上に、明るい藁灰［５ｆｅ、　Ａｓ
ｈｅｓ　］の気菌糸を着生し、溶解性色素はみとめられ
ない。

（７）　　グリセリン・アスパラギン寒天培地（ｌ５Ｐ
−培地５゜２７’Ｃ培養） うす茶Ｃ３１）ｇ、Ｇｏｌｄｅｎ　ＢｒｏＷｎ　］　　
の発育上に、白〜明るい藁灰Ｃ５ｆｅ、　Ａｓｈｅｓ　
〕の気菌糸を着生し、溶解性色素は、黄色味をおびる程
度である。

１７ン　チロシン寒天培地（ｌ５Ｐ−培地７．２７℃培
養）うす茶Ｃ，３ｎｇ、　Ｙｅｌｌｏｗ　Ｍａｐｌｅ　
］　　の発育上に、明るい灰Ｃ３ｄＣ，Ｎａｔｕｒａｌ
　］　〜明るい藁灰［：　５　ｆｅ。

Ａｓｈｅｓ　］の気菌糸を着生し、溶解性色素はほとん
どみとめられない。

（８）リンゴ酸石灰寒天培地（２ｎ培養）発育は、うす
黄Ｃ２ｅａ、　Ｌｔ　Ｗｈｅａｔ　］　、気菌糸はうつ
すらと白色を呈し、溶解性色素はみとめられない。

（９）　　栄養寒天培地（２７℃培養）発育はうす茶（
２ｐｉ、　Ｍ、１ｓＬａｒｄ　Ｂｒｏｗｎ　）で、気菌
糸は着生せず、溶解性色素もみとめられない。

αＧ　スターチ寒天培地（２７°Ｃ培養）うす黄（２ｇ
ｃ、　Ｂａｍｂｏｏ　］　　の発育上に、明ル（、−。

藁灰［：　３　ｄＣ，Ｎａｔｕｒａｌ　〜５　ｆｅ、　
Ａｓｈｅｓ　］の気菌糸を着生し、溶解性色素はみとめ
られない。

αυ　脱脂牛乳（３７°Ｃ培養） うす黄Ｃ２ｉｃ、　Ｉ（ｏｎｅｙ　Ｇｏｌｄ　］　　の
発育上に、茶入の気菌糸を着生し、溶解性色素はわずか
に茶色味をおびる程度である。

＋１３　　ゼラチン穿刺培養 単純ゼラチン培地（２０°Ｃ培養）では、うす黄茶Ｃ３
ｎｅ、　Ｔｏｐａｚ　］の発育上に、うつすらと白〜灰
色の気菌糸を着生し、溶解性色素は茶色味なおびる。グ
ルコース・はプトン・ゼラチン培地（２７°Ｃ培養）で
は、発育はうす黄茶（２ｉｃ。

Ｈｏｎｅｙ　Ｇｏｌｄ　）　　で、気菌糸は着生せず、
溶解性色素は暗い茶色を呈する。

ａ３　　セルロース（２７℃培養） 無色の発育上に茶入の気菌糸を着生し、溶解性色素はみ
とめられない。

３、生理的性質 ｆｉｌ　　生育温度範囲 イースト・スターチ寒天（イーストエキス（犬五栄養化
学Ｎ）０．２％、可溶性デンプン（小寒化学製）１．０
％、ひも寒天３．Ｏｓ、　ｐｆ（７，０）　ヲ用イ、２
０°Ｃ９２４°Ｃ９２７°Ｃ，３０’Ｃ，３７°Ｃ，５
００Ｃの各温度で試験の結果、５０’Ｃを除いて、その
いずれの温度でも発育したが、最適生育温度は、２４°
Ｃ〜２７°Ｃ付近であると思われる。

（２１ゼラチンの液化（１５％単純ゼラチン、２０’Ｃ
培養；グルコース・ベグトン・ゼラチン、２７０Ｃ培養
）単純ゼラチン培地では培養後１４日目頃から、グルコ
ース・ベグトン・ゼラチン培地の場合は、培養後１０日
目頃から、それぞれ液化が始まる。

その作用は共に中等度である。

（３）　　スターチの加水分解（スターチ・無機塩寒天
培地およびスターチ寒天培地、いずれも２７°Ｃ培養）
スターチ無機塩寒天培地では、培養後３日目頃から、ま
たスターチ寒天培地では、培養後７日目頃から、と本に
氷解性がみとめられ、その作用は強い方である。

◆ （４）脱脂牛乳の凝固・ベグトン化（１０％スキムミル
ク（Ｄｉｆｃｏ）、　　３７°Ｃ培養） 培養後９日目頃から弱いベグトン化が始まシ、１３日目
頃に完了する。その作用は強い方である。

凝固は、みとめられない。

（５）　　　メラニン様色素の生成（トリプトン・イー
スト・ゾロス、ｌ５Ｐ−培地１：ベプトン・イースト・
鉄寒天。

ｌ５Ｐ−培地６；チロシン寒天、ｌ５Ｐ−培地７゜いず
れも２７℃培養） いずれの培地でもメラニン様色素の生成が認められた。

その作用は、トリプトン・イースト・グロスでは中程度
、ベグトン・イースト・鉄寒天では強い方で、チロシン
寒天では弱い方である。

（６）　　炭素源の利用性（グリトノ・ム・コ９トリー
プ寒天培地。

ｒｓｐ−培地９．２７°Ｃ培養） グルコース、ラフィノースを利用して発ＷＬ、Ｌ−アラ
ビノース、　Ｄ−キシロース、　Ｄ−フラクトース、　
シュクロース、　イノシトール。

Ｌ−−ｙムノース、　Ｄ−マンニトールハ利用シナい。

（７）リンゴ酸石灰の溶解（リンゴ酸石灰寒天、２７°
Ｃ培養）リンゴ酸石灰の溶解がみとめられ、その作用は
中等度〜強い方である＠ （８）　　硝酸塩の還元反応（０，１％硝酸カリ含有ペ
プトン水。

ｌ５Ｐ−培地ｇ、２７″ｃ培養） 陽性である。

以上の性状を要約すると、ＭＤ７４３−ＧＦＡ株は、ス
トレプトミセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｇ　）　　属
に属し、細胞壁に含まれる２、６−ジアミノピメリン酸
は・　ＬＬ−型である＠又、胞子のうをみとめず、気菌
糸は、らせん形成を有し、輪生枝はみとめられない。ま
た胞子の表面は平滑である。種々の培地で無色〜うす黄
茶、あるいはうす茶の発育上に白〜明るい茶入の気菌糸
を着生し、溶解性色素はほとんど認められないか、わず
かに黄色味を呈する。メラニン様色素は陽性、蛋白分解
力は中等度、スターチの氷解性は強い方である。

これらの性状より、ＭＤ７４３−ＧＦＡ株に近縁の既知
菌穫を検索すると、次の種があげられる。

すなわち、ストレプトミセス・ナツシュピルエフ　シｘ
　（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｎａｓｈｖｉｌｌｅｎ
ｓｉｓ、文献Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｊｏｕｒｎ
ａｌ　ｏｆ　ＳｙｓｔｅｍａｔｉｃＢａ６ｔｅｒｉｏｌ
ｏｇｙ、　　１９巻、４５５頁、＋９６９：Ａｎｔｉｂ
ｉｏｔｉｃｓ　ａｎｄ　Ｃｈｏｍｏｔｈｅｒａｐｙ、　
ＩＩ巻、３１２貞。

＋９６１）、　　ストレプトミセス・ミサキエンシス（
Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｍ１ｓａｋｉｅｎａｉｓ。

文献Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏ
ｆ　ＳｙｓｔｅｍａｔｉｃＢａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ、
　１ｇ巻３４８頁、＋９６８）、およびストレプトミセ
ス・キサントシデイカス （５ｔｒｅｐｔｏｒｎｙｃｅｓ　ｘａｎｔｈｏｃｉｄｉ
ｃｕｓ、文献Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｊｏｕｒｎ
ａｌ　ｏｆ　ＳｙｓｔｅｍａｔｉｃＢａｃｔｅｒｉｏｌ
ｏｇｙ、　２２巻３７２頁、＋９７２）である。これら
３種のＩＳＰ菌株を入手し、ＭＤ７４３−０２４株と比
較検討した。その結果、ストレプトミセス・ミサキエン
シスは蛋白分解力が極めて弱く、糖の利用でＤ−キシロ
ース、　Ｄ−７ラクトース。

シュクロースを利用する点でＭＤ７４３−ＧＦＡ株と区
別される。他方、ストレプトミセス・キサントシデイカ
スとは、この株が蛋白分解力を示さないこと、糖の利用
能でＬ−アラビノース、　Ｄ−キシロース、　Ｄ−７ラ
クトース、　シュクロースを利用して発育するなど、Ｍ
Ｄ７４３−０２４株と大きな相異点を示した。残るスト
レプトミセス・ナツシュビルエンシスとｕ、ｉＪ実Ｈの
７．Ｍ績を次の第２表に示した。

第２表にみられるように、ＭＤ７４３−ＧＦＡ株トスト
レゾトミセス・ナツシュピルエンシスとは、Ｌ−アラビ
ノース、　Ｄ−キシロースの利用性を除いて、よく一致
している。

ＭＤ７４３−ＣＦ４株のＬ−アラビノースの利用につい
ては、くりかえしの実験で変動がみられ、わずかに利用
する場合もある。この点を考え合わせると両者の確実な
相異点は、Ｄ−キシロースの利用のみとも考えられる。

これらのことから、ＭＤ７４３−ＣＦ４株はストレプト
ミセス・ナッシュビ／Ｉ／　ｘ　ンシｘ　（Ｓｔｒｅｐ
ｔｏｍｙｃｅｓ　ｎａａｈｖｉｌｌｅｎｓｉｓ）に近縁
の種と考えられ、ストレプトミセス・ナツシュビルエン
シスＭＤ７４３−ｃｒ４と同定した。

なお、ＭＤ７４３−ＣＦ’４株を工業技術院微生物工業
技術研究所に昭和６０年９月７日、保管委託申請し、受
託番号は、微工研菌寄第８４４２号である。

放線菌は人工的に、また自然界で変異をおこしやすいが
、本発明にいうストレプトミセスーナッシュぎルエンシ
スはその変異菌のすべてを包含スる。本発明にいうＤ−
ベーターリシルメタンジアミン生産菌は、Ｄ−ベーター
リノルメタンジアミンを生産して上記のＭＤ７４３−Ｃ
Ｆ４株お工びその変異菌と明確に区別されない菌株を含
めて、ストレプトミセス属に属してＤ−ベーターリジル
メタンジアミンを生産する菌株のすべてを包含するＯ 本発明の方法では、Ｄ−ベーターリシルメタンジアミン
生産菌、特に前記のＭｌ）７４３−ＣＦ４株を通常の微
生物が利用しうる栄養源含有培地に接種して、培養し、
好ましくは好気的東件下に発育させることによって、主
に培養液中にＤ−べ一ターリジルメタンノアミンを生産
蓄積させ、さらに培養物、特に培養液から目的物を分離
する。

用いる培地中の栄養源としては、放線菌の栄養源として
用いられる公知のものが使用できる。例えば市販されて
いる大豆粉、落花生粉、綿実粉、乾燥酵母、はグトン、
肉エキス、カゼイン、コーン・スチーグ・リカー、硝酸
ソーダ、硫酸ア７千７などの窒素源、および市販されて
いるグルコ−・ス、　７ｆ　ｊ　クトール、６１、グリ
セリン、マルトース、デキストＩＪン、蔗糖、乳糖など
の炭水化物、あるいは大豆油、脂肪などの炭素源と、必
要に応じて食塩、炭酸カルシウム、硫酸マグネシウム、
塩化マンがン、硫酸アンモニウム、燐酸塩などの無機塩
類および各種のアミノ酸などを使用できる。

これらのものはＤ−ベーターリシルメタンジアミン生産
菌が利用し、Ｄ−ベーターリジルメタンジアミンの生産
に役立つものであれば良く、公知の放線菌の培養材料は
すべて使用できる。その大破生産には、液体通気攪拌培
養が好ましく、培養温度ばＤ−ベーターリシルメタンジ
アミン生産菌が発育し、Ｄ−ベーターリジルメタンジア
ミンを生産する範囲で適用しうるが、殊に好ましいのは
２５〜３０°（４’ある。培ｊはｅＡ、Ｄ−ペータ−リ
ノルメタンゾアミンが充分蓄積するまで継続され、通常
２〜７日間の培養が行なわれるＯＤ−ベーターリジルメ
タンジアミンの定盪は、試験菌としてパシルス・サブチ
リスＰＣＩ２１９株を使用して、抗生物質の定艙に用い
られる通常の円筒平根法に裏って行ない、本発明で得ら
れた精製Ｄ−ベーターリジルメタンシアミンを１００１
００Ｏ（単位）／ｑとして標準物質とした。

Ｄ−ペーターリゾルメタンノアミンおよびその塩は水に
よく溶け、Ｄ−ベーターリシルメタンジアミン生産菌の
培養物中に、主として液体部分中に存在する。液体中の
Ｄ−ベーターリジルメタンジアミンは実質的にゲタノー
ル、酢酸ブチル、クロロホルムなどの有機溶媒に抽出さ
れないので、これらの溶媒による処理は夾雑物の除去の
ために必要ならば利用できる＠培養液あるいは水溶液中
のＤ−ベーターリジルメタンジアミンは種々の吸着剤を
用いて吸着することにより採取することができる。吸着
剤として活性炭を使用した場合、吸着した抗生物質は弱
酸性水および弱酸性のメタノール水、グロ・！ノール水
、アセトン水などで溶出される。

また、Ｄ−ペーターリノルメタンゾアミ／はその塩基性
の性状にもとすいて、収率よく陽イオン交換樹脂に吸着
され適当な溶出剤で溶出される。

この吸着溶出法は大量の培−養液より採取するのに最も
適した方法である。陽イオン交換体としては、カルボン
酸を活性基とするアンノぐ−ライトＩＲＣ−５０，ＣＧ
−５０（ｅ＋−ム−７ン）−／％−ス社製）、レワチッ
トＧＮＰ（バイエル社製）、ＣＭ−セファデツクス（フ
ァルマシア社製）ナトノＨ型、　Ｎａ型、　ＮＨ４型な
どおよびそれらの混合型が用いられ、吸着した抗生物質
は酸性水、稀アンモニア水および無機塩の水溶液などに
よって収率工く溶出され、通常０．２−ＩＮ塩酸および
０．２Ｎ−ＩＮアンモニア水が使用される。Ｄ−ベータ
ーリシルメタンシアミンは実質的に陰イオン交換樹脂に
吸着しないので、その酸性溶液の中和や、酸性の夾雑物
を除去するのに好ましい材料である。

Ｄ−ベーターリシルメタンシアミンは上述の抽出法、分
離法を適宜組合せ、あるいは繰返すことによって純粋に
採取することができる。

以下に本発明を実施例を示して説明するが、Ｄ−ベータ
ーリシルメタンシアミンの性状が本発明によって明らか
にされたので、それらの性状にもとずきＤ−ベーターリ
シルメタンシアミンのＭＡ　ｍ法を種々考案することが
できる。従って、本発明は実施例に限定されるものでは
なく、実施例の修飾手段は勿論、本発明に工って明らか
にされたＤ−ペーターリゾルメタンノアミンの性状にも
とすいて公知の手段を施してＤ−ベーターリシルメタン
シアミンを生産、濃縮、抽出、精製する方法をすべて包
括する。

実施例１ 寒天斜面培地に培饗したストレプトミセス・ナツシュビ
ルエンシスＭＤ７４３−ＧＦＡ株（ｉＩ研菌寄第８４４
２号）を、ガラクトース２．０％、デキストリン２．０
％、ベグトン（バクトソイトン、ディフコ製）１．０１
　コーン・ステイープ・リカー（味の素製）０．５チ、
硫酸アンモニウム０．２チ、炭酸カルシウム０．２％を
含む液体培地（５ｏＯｙ三角フラスコ中１１０ｄ、）に
接種し、２８°Ｃで２日間回転振盪培養（毎分１８０回
転）して種培涼を得た。この種培養各２−を上記と同様
の培地（Ｉ　Ｉ　Ｏ＋ｔ／）に接種し、同様の条件で９
０本の三角フラスコを３日間培養し九〇 この培養液を集めｒ過して９０００−のｒ液（ｐＩ−１
６，０，８０ｍｃｇ／ｄ　）を得た。このｒ液をアン／
ぐ−ライトＩ　ＲＣ−５０（ＮＨ４型：Ｈ型、７：３）
５５０−を充填した塔に通過、Ｄ−ベーターリシルメタ
ンシアミンを吸着せしめ、水洗（１・＋００−）後、１
．２Ｎアンモニア水で溶出した。活性溶離液（１３７０
ｍ／）を集めて減圧濃縮乾燥し、粗粉末６３６＋ｎ９（
６４４ｍｃｇ／＋Ｗ）を得た。

この粗粉末をＩＱ＋＋ｙの水にとかし、アンノ々−ライ
トＣＧ　−５０（ＮＨ４型）６０−をつめた塔にかけて
吸着せしめ、水＋ｚｏ−（分画１−１８）、０．６Ｎア
ンモニア水３００ｍ（分画ｌ　９−６０　）で洗浄後、
１．２Ｎアンモニア水３０　ｏ−（分画６ｌ−１ｏｔ）
で溶出した。分画７７−９５を合して減圧濃縮乾固し、
さらに乾燥すると、Ｄ−ベーターリシルメタンシアミン
の７炭酸塩が無色の粉末状物質（吸湿性）として得られ
た。収量は３７０　Ｔｒｑ（１，０００ｍｃｇ　／　ｍ
ｙ　）で培養液エリの収率が５０．８チであった。この
物質の比旋光度〔α〕０−７．４°　（Ｃ０，５，水）
を示した。なお、この物質は吸湿すると無色おめ状にな
った。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明によるＤ−ベーターリシルメタンシアミ
ン炭酸塩の臭化カリウム錠中で測定した赤外部吸収スペ
クトル曲線を示す。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、次式（ I ） ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） で表わされるＤ−ベーターリジルメタンジアミンおよび
   その酸付加塩。 ２、ストレプトミセス属に属するＤ−ベーターリジルメ
   タンジアミンの生産菌を培養し、その培養物からＤ−ベ
   ーターリジルメタンジアミンを採取することを特徴とす
   るＤ−ベーターリジルメタンジアミンの製造法。