JPS62111687A - 不溶化ｌ−フエニルアラニンアンモニアリア−ゼ剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ｒ　週た壜な　Ｉ−θ）壬１１　出　Ａ軒　）本発明は
Ｌ−フェニルアラニンを製造するのに用いるＬ−フェニ
ルアラニンアンモニアリアーゼ剤に関する。

〔従来の技術〕

Ｌ−フ巴二ルアラニンアンモニアリ了−ゼ〔以下、ＰＡ
Ｌと略す）はトランス−桂皮酸とアンモニアよりＬ−フ
ェニルアラニンを台底する酵素であるＯ Ｉ’ＡＬは、たとえばスポロボロマイセス・ロゼウス（
Ｓｐｏｒｏｂｏｒｏｍｙｃｅｓ　ｒｏｓｅｕｓ　）　２
２７　（ＦＥＲＭＰ−３ｒｊ２　）、ロドトルラ・グラ
シリス（Ｉｌｈｏｄｏｔｏｒｕｌａｇｒａｃｉｌｉｓ）
　（ＩＦＯＯｊ　ｊ　９　）、　ｏ　トドにう＊−ｑリ
ーテ（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ　ｍａｒｉｎａ　）　（
ＩＦＯｏｚ７ｑ　］。

フザリウムφオキシスボルム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｏｘ
ｙｓｐｏｒｕｍ）（ＡＴＣＣ２０３り！］（英国特許第
７．グ♂９．４ｔ４Ｊ’号明細書、特開昭！６−コ６／
９２号公報等に記載］等の微生物により生産されること
が仰られている。

また、さらに本発明らは、先にクラド°スボリウム・ク
ラドスポリオイデス（Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ　ｃｌ
ａｄｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓ）Ｃ−ｒｏｔ乙（ＦＥＲＭ
Ｐ−２２０グ）（特願昭３９−／ｊり３♂７号明細書］
−ヒアロデンドロン、エスピー（Ｈｙａｌｏｄｅｎｄｒ
ｏｎ　ｓｐａ　）　ＭＣＩ　／９７ワ（ＦＥＲＭ　　Ｐ
−♂１０４ｔ）（特願昭６０−３３！コク号明細書）、
ホリオタ・ノ・イランデンシス（Ｐｈｏｌｉｏｔａｈｉ
ｇｈｌａｎｄｅｎｓｉａ　）ＭＣＩ２０３７　（ＦＥＲ
Ｍ　　Ｐ−ｔコ４ｔ２］Ｃ特願昭ｔＯ−／　／　ｊ♂コ
３号明細書】。

ヘペローマ・ヴイノソフイルム（Ｈｅｂｅｌｏｍａ　ｖ
ｉｎｏｓｏｐｈｙｌｌｕｍ）ＭＣＩ２ｏｉｒＣＦＥＲＭ
　Ｐ−♂２４ｔ３）Ｃ特願昭≦Ｏ−／／３？２３号明Ｎ
ｍ　’Ｍ　）　、コプリヌス・ステルコラリウス（Ｃｏ
ｐｒｉｎｕｓ　５ｔｅｒｃｏｒａｒｉｕｓ　Ｉ　Ｍ　Ｃ
ＩコＯＪｊ（ＦＥＲＭＰ−♂コ４ｔ（７）（特願昭乙θ
−１１３♂２３号明細蓄）などの微生物によって生産す
ることを見出した０ 〔発明が解決しようとする問題点〕 一般にこの種の酵素を利用して酵素反応を行う場合、酵
素を水に溶解した状態で使用すると、反応終了後、工業
的に反応生成物を取得するためには、酵素を変性除去等
なせざるを得ない０従って。

酵素が未だ活性を有していても、１回の反応毎にこれを
廃棄しなければならず、経済的に不利であるＯ 又、生菌体そのものを用いて酵素反応を行う場合は、菌
体を反応毎に反応液より、遠心分離、フィルタープレス
等により分離せざるを得ない。この場合、菌体分離に多
大の設備と時間を要し、経済的に不利である。しかも菌
体よりの不純物の漏出があり１反応液の精製の負担が太
き（なることが予想される。

この様な不経済性を回避するために、酵素を前もって不
溶化して固体触媒と同様に効率良く使用する方法が考え
られる。例えばＰＡＬ生産菌体を架橋不溶化する方法〔
米国特許第３，９６７、ｆｒθ号明細通〕及び包括固定
化する方法（特開昭タ３−９６３７♂号公報）が知られ
ている〇しかしながら、これらの方法で不溶化されたＰ
ＡＬは、必ずしも活性は高（な（、シかも不溶化におけ
る酵素収率も低（、取り扱い上も工業的に有利な方法と
は言い難い。

又、ＰＡＬの精製において、’ＤＥＡＥ−セファデック
スＩＣファルマシア・ファインケミカルス社裂）の如き
陰イオン交換体に吸着させる方法が知られているが、不
溶化ＰＡＬ剤としては’ＤＥＡＥ−セファデツクス′等
は１本発明者らの知見によれば、水溶液中で膨潤して厖
大な容積を占めるため、担体の単位容積あたりのＰＡＬ
吸着量が少ないばかりでなぐ、吸着させたＰＡＬの活性
も低く。

さらに、ＰＡＬと担体との結合力が弱いため、高濃度の
基質中では酵素の脱離が起るなどの欠点を有し、工業的
には到底採用し得ないと考えられる。

〔問題点を解決するための手段〕

本発明者らは、上記の如き欠点！克服し、工業的有利に
利用し得る不溶化ＰＡＬ剤につき鋭意研究した結果、陰
イオン交換体の中でも特定の物理的特性Ｖ有する樹脂な
担体とした不溶化ＰＡＬ剤は、従来の陰イオン交換体を
担体とした不溶化Ｐ　Ａ　Ｌ　ｆｉｆｌｌが酵素吸着量
、醪素活性あるいは酵素と担体との結合力などの点で非
実用的であるという知見に反して、担体単位体積あたり
の酵素吸着量〈て安定であり、ある場合には、担持前の
酵素活性より更に増大した活性が得られるという驚（べ
き現象を見出し１本発明に到達した。

即ち１本発明の目的は、吸着酵素量が多く、且つ、酵素
活性の高い不浴化ＰＡＬ剤を提供することに存し、この
目的は本発明に従って、／、ｏ７ｉ／）以上の比表面積
および半径／コＯＡ以上の細孔容積０．／耐／ｇ−以上
を有する多孔性陰イオン交換樹脂にＰＡＬを吸着担体さ
せた不浴化ＰＡＬ剤によって達成される。

次に１本発明の詳細な説明するに１本発明において上記
の多孔性陰イオン交換樹脂に吸着担持させる酵素である
ＰＡＬとしては−たとえば、スポロボロマイセス・ロゼ
ウス（Ｓｐｏｒｏｂｏｒｏｍ’１ｃｅｓ　ｒｏｓｅｕｓ
　）ココア　（ＦＥＲＭ　Ｐ−３♂ｊ２）、ロドトルラ
Φグラシリス（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ　ｇｒａｃｉｌ
ｉｓ　）　（ＩＦＯＯｓタデ）。

ロドトルラ１１マリーナ（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ　ｍ
ａｒｉｎａ　１（工ＦＯＯ♂７９）、フザリウム・オキ
シスポルム（Ｆｕａａｒｉｕｍ　ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ　
）　（ＡＴＣＣ２０３９！　）ｒｘｒｉａ−ｎ！／−ａ
Ａ−ｑ−＜ｔｔ、ｒ−Ｎａｎ＋％Ｉｔｌａｔ−＠Ｍ昭ｊ
１．−２／Ｓ／９７号公報等に記載）、及びクラ（特願
昭！９−／３９３Ｆ７号明細書］、ヒアロデンドロン・
エスピー（Ｈｙａｌｏｄｅｎｄｒｏｎ　８ｐ、　）ＭＣ
Ｉ／９７り（ＦＥＲＭ　　Ｐ−♂１０グ）（特願昭６０
−３３６２７号明細書）、ホリオターハイランデンシス
（Ｐｈｏｌｉｏｔａ　ｈｉｇｈｌａｎｄｅｎｓｉｓ　）
　ＭＣＩコ０３７（ＦＥＲＭ　　Ｐ−♂２グコ］（特願
昭４０−１１３７２３号明細書）、ヘベローマ・グイノ
ンフィルム（ＨＢｂｅｌｏｒｎａｖｉｎｏｓｏｌ）ｈｙ
ｌｌｕｍ　）　Ｍ　ＣＩ　２θ３．ｒ　（ＦＥＲＭ　Ｐ
　−♂コ４ｔ３）（特願昭７，０−／／３♂２３号明細
書］。

コグリヌス・ステルコラリウス（Ｃｏｐｒｉｎｕｓ　５
ｔｅｒｃｏｒａｒｉｕｓ　）ＭＣＩ２θｉｓ（ＦＥＲＭ
　　Ｐ−♂−Ｚθ）【特願昭６０−１１３７２３号明細
書）等が生産するＴ’ＡＬが挙げられる。

上記菌体内からＰＡＬを抽出するには、超音波処理、加
圧処理などの機械的方法または菌体の自己消化作用を利
用する方法Ｃ菌体自身が保有する細胞溶解酵素によって
菌体な溶解する）など公知の万広により行なうことがで
きる。−万一本発明において抽出されたＰＡＬを吸着担
持させるための担体としては−ｉ、ｏｍＩ／ｆ、より好
ましくは／　Ｏｍ　７９以上の比表面積および半径ｔ　
２０　ｉ’を以上の細孔容積が０．／ｍｌ／？以上、よ
り好ましくはｏ、３ｍｅ／ノ以上という物理的特注を有
する多孔性陰イオン交換樹脂であることが必要である。

ここで一本発明において使用される上記物理的特注な亙
する多孔性陰イオン交換樹脂についてＮ９明するに、従
来、一般に使用されているイオン交換樹脂は単にスチレ
ンとジビニルベンゼンなどの架橋性七ツマ−を共重合さ
せ１次いでこれにイオン交換基を導入することにより製
造されているが。

これらの樹脂も架橋性モノマーの量−即ち一架橋度を調
節することにより、若干の超微細孔（ミクロポアー］を
有しているのが普通である（ゲル状イオン交換樹脂）０ しかしながら１本発明で使用される多孔性イオン交換基
脂とは、上記のミクロポアー以外に数百〜数千Ａ８度の
孔径の多数の細孔（マクロボアー］を有する樹脂であり
、大きな内部表面積とポロシティ（多孔度）とを有する
点において通常のゲル状イオン交換樹脂と区別される。

そしてミクロポアーのみを■する通常の樹脂の比表面積
やポロシティ−を正確に測定することは。

その孔が微細に過ぎるため困難であるが１本発明者らの
細見によれば、下記の如き測定法によって乾燥状態で測
定した場合１通常の樹脂では比表面積が／　−Ｏｍ　／
　ｊ’以上、半径／コＯ久以上の細孔容積が０．７１７
ｇ−以上という値が得られることは有り得ない。

なお１本発明のＰＡＬ剤の製造に使用される多孔性陰イ
オン交換樹脂の物理的特性である比表面積および細孔容
積は、ＳＯ℃で１０時間数朋Ｈ？下で真空乾燥した多孔
性陰イオン交換樹脂を試料とし、そルぞれＢ、Ｅ、Ｔ法
および水銀圧入法により測定されろ。

本発明で使用する上記の多孔性陰イオン交換樹脂は公知
の各種方法により製造することができる。

一般にイオン交換樹脂の母体は、モノビニル単量体とポ
リビニル単量体を共重合させることにより製造され一モ
ノビニル単量体としては一スチレンの如き芳香族モノビ
ニル化合物が、またポリビニル単量体としてはジビニル
ベンゼンの如き芳香族ジビニル化合物が好適に使用され
ている。樹脂母体を多孔質にするには１例えば前記七ツ
マ−の重合系に、溶媒による抽出除去可能で、且つ、重
合反応に関与しない材料、例えば、ポリスチレンなどを
共存させながら重合反応を行ない１反応終了後、得られ
た樹脂を溶媒で処理してポリスチレンを抽出除去するこ
とにより行なうことができる。

多孔性樹脂の比表面積、半径ｌコＯＡ以上の細孔容積な
どに関する物理的特性は、樹脂の製造条件を種々選択す
ることにより大幅に変更することができる。物理的諸特
注と樹脂の製造条件との関係は一義的には定め難いが１
例えば、上記樹脂の製造方法において、樹脂母体原料と
してスチレンとジビニルベンゼンを便用するとき、ジビ
ニルベンゼンの量が多いほど一般に多孔性の程度が大と
なり、すなわち、比表面積、細孔容積あるいは細孔の半
径が大となる傾向があり、またーポリスチレン量を多（
すると細孔容積あるいは細孔径が大となる傾向がある。

陰イオン交換基の導入方性としては、樹脂母体ニクロル
メチル基を導入した後、トリメチルアミン−ジメチルエ
タノールアミン、エチレンジアミン、ジエチレントリア
ミン、トリエチレンテトラミン等の脂肪族アミンあるい
はピロリジン、モルホリン、ピペリジン等の環状アミン
等の各種アミンで処理する方法が適当であり一前記樹脂
母体の特注とこれらアミンの種類を選択することにより
。

酵素を吸着した際に好適な活性を発揮せしめる陰イオン
交換樹脂とすることができる。

このようにして得られた陰イオン交換樹脂の比表面積お
よび細孔容積の可能な上限値は厳密には特定し得ないが
、余り過大になると樹脂自体の機械的強度が十分でな（
なるので１通常、比表面積は約１０ｏ、ｚ／〕以下、半
径７２０１以上の細孔容積はユ、ｓｍｌ／ノ以下の範囲
で選択される。

樹脂母体の架橋度も余り高くなると酵素の吸着率も十分
でなく、さらに吸着した酵素の活性も減少する傾向がみ
られるので、前記樹脂の細孔特性や陰イオン交換基の随
順等の要因と組み合わせて適当な値を選択することが好
ましい。例えば、樹脂がスチレンとジビニルベンゼン等
の架橋性モノマーとの共重合で製造される場合、架橋性
モノマーの使用量は通常！Ｏモル係以下、好ましくは２
３モル％以下である。

なお、多孔性樹脂の基体としては一常法によって製造さ
れるポリ（メタコアクリル醒を生体とするアクリル系の
ものも好適に使用される。

本発明においては、上記の多孔性陰イオン交換樹脂とし
ては、通常２０−Ｑ’θ０メツシュ程度の粒径のものが
使用されるが１粒径が小さいほど活性発現率が若干向上
する傾向がみられる。

上記の多孔性陰イオン交換樹脂にＰＡＬを吸着サセるに
は、イオン交換樹脂処理において一般に知られた種々の
方法を採用することができ、最も簡便には、菌体から抽
出したＰＡＬの水浴液にイオン交換樹脂を浸漬し、必要
に応じて攪拌し、適当な吸着時間の経過後、樹脂を取り
出して水洗すればよい。

このとき＋　ＰＡＬ水ｍＷのｐＨ値は通常！、！〜／／
、Ｏの範囲内であり、吸着温度は０−　＋　０°Ｃ１吸
着に要する時間は／〜２０時間程度である〇担体である
上記の多孔性陰イオン交換樹脂は種々の塩形で用いるこ
とができ−例えば、上記の多孔性イオン交換樹脂を硫酸
、塩酸、水醗化ナトリウム、燐酸、酢酸などの水溶液で
処理して、それソｔ１．　Ｈ３Ｏ４−１１ｓｏ４’−、
ｃｔ−、ＯＨ−、ＨＰＯ，”−、ＰＯ４’″″。

ＣＩ（３ＣＯＯ−などの塩形とすることにより有効に担
体にＰＡＬを吸着させることができる。

なお１本発明におけるＰＡＬの上記多孔性陰イオン交換
樹脂への吸着およびＰＡＬの活性発現の作用機構の詳細
については未だ明らかではないが。

樹脂のマクロポア−における物理的吸着および陰イオン
交換基とＰＡＬとの何らかの化学的結合力が相乗的に関
与しているものと推察される。このことは、比表面積お
よび半径１ｒｏＡ以上の細孔容積の小さい通常のゲル状
イオン交換樹脂はＰＡＬをほとんど吸着せず、一方、比
表面積および半径／コθへ以上の細孔容積の値が大きい
多孔性樹脂でも、陰イオン交換基を導入していない樹脂
は同様にＰＡＬ吸着量が少なく、ＰＡＬの活性も低いこ
とからも推認される。

本発明において便用される多孔性陰イオン交換樹脂は水
、＠液中で膨潤して、乾燥状態よりもさらに巨大な網目
構造を形成すると考えられるが、乾燥状態において細孔
半径が大きく、その細孔容積が大きいものは、ＰＡＬ吸
着率および活性発現率が良好である。本発明において担
体として用いる樹脂は、多孔性陰イオン交換樹脂の中で
も特に、／２０に以上の孔径な有する細孔の容積がｏ、
ｉｍｌ　／　９−以上のもの、より好ましくは０．３屁
／を以上のものである。

かぐして得られた不浴化ＰＡＬ剤は高いＰＡＬ活性を保
持する。また１本発明の不浴化ＰＡＬ剤は長時間に亘る
使用にも活性の低下が少な（１反応中、酵累が担体から
溶離することもないので。

工業的有利に反応を行なうことが可能である。さらに一
本発明の不溶化ＰＡＬ剤の利点の一つは。

長期間使用袋、活性が低下したＰＡＬ剤は、これを塩化
ナトリウムあるいは塩化カリウムなどの水溶液で処理す
ることにより、ＰＡＬが容易に溶離するので簡単に再生
することができるということである。

再生後、ＰＡＬが溶離した樹脂は再び新しいＰＡＬを吸
着担持させることにより、活性の高い不溶化ＰＡＬ剤と
することができろ。

〔実施例〕

次に１本発明を実施例によってさらに詳細に説明するが
一本発明はその要旨を超えない限り１下記実施例によっ
て限定されるものではない。

実施例　１ 下記組成の層地！θｍＡの入った２　００　ｍｅ襞つき
三角フラスコを用いてクラドスポリウム・クラドスポリ
オイデスＣ−！０３乙（ＰＥＲＭ　　Ｐ−７７０グ）を
２６°Ｃでユ日間珊養した。

培地ニ ゲルコース　ｊｆ　　Ｌ−フェニルアラニン　ｊ？ペプ
トン　　　　タノ　　水　　１００酩酵母エキス　　　
ｊｆ　　　　（ｐＨｊ、７１コーンステイープリカー　
！？ 培養後、遠心分離により集菌した。一度一水洗後、２０
ｍＢの脱塩水を加え菌体な再懸濁後、超音波処理（：　
５ｏｎｉｆｔｅｒ”　Ｃｅ１ｌ　Ｄｉｓｒｕｐｔｏｒ　
　３　！；　０　（Ｂｒａｎｓｏｎ　５ｏｎｉｃ　Ｐｏ
ｗｅｗ　Ｃｏ、　、　ａ　５１ｍ１ｔｈ　Ｋ１１ｎｅ　
Ｃｏｍｐａｎｙ製）〕を行ない細胞を破壊した。次に遠
心分離により菌体残滓を除き、ＰＡＬ粗酵素抽出液を得
た。

このＰＡＬ粗酵粗酵素抽出液力性力定したところ。

０．６０ＴＪ／ｌｎｌであった。

次いで、この抽出液！ｍｌ　（すなわち総力性は３．０
ＴＪ）を採取し、これを下記第１表に示す物性ｊｆ有す
る１００〜２００メツシユのイオン交換樹脂／　ｍｌ　
（湿潤状態〕に添加し、３０℃で６時間振盪攪拌し、酵
素を樹脂に吸着させて、不浴化ＰＡＬ剤を得た。得られ
たＰＡＬ剤の酵素結合率及び酵素結合後の不溶化ＰＡＬ
剤の活性を同じく下記第１表に示す。

次に得られた不溶化ＰＡＬ剤をトランス−桂皮酸３０ｉ
Ｐ／Ａ、アンモニアグＭ（ｐＨ１０，９夕　）の反応原
料’ｌ（１１０ｍｂで２回洗浄後、！酎の反応原料液を
加え、３０℃で７２時間振盪攪拌し１反応させたところ
、／　４ｔ、７？／ＡのＬ−フェニルアラニンが生産さ
れていた。

次に、新しい反応原料液１０ｒｎｂで２回洗浄後。

再び新しい反応原料液ｊ　ｒｎｉを加え、同様に７０時
行ったところ＝ｉｉ、を時間でｉｒ、２？／１３のＬ−
フェニルアラニンが生産さｈていた。

なお、これらの酵素液活性、酵素結合率、酵素結合後の
不溶化ＰＡＬ剤の活性、及び反応における分析は以下の
方法により求めた。

■粗酵素液の活性力価 ２！ミリモル濃度のＬ−フェニルアラニンと２５ミリモ
ル濃度のトリス塩酸緩衝液（ＰＨ♂、♂）との含膏夜’
１．７！ｒｎｌに粗酵素液を０．２ｊｒｎｌを添加し、
３０℃でＩＯ分間反応させた。この反応混合液にＯ，Ｓ
モル濃度のＨＣｌ０＋を夕罰加えて反応を停止させた。

生成したトランス−桂皮酸は２７　ｊ　ｎｍの［ＪＶ吸
収により測定した０活件力価の単位はＵで表現するが、
／Ｕとは、上記条件でトランス−桂皮酸な７分間に／μ
モル生底する酵素敬とする。

■酵素結合率 担体な処理する前の粗酵素液の総力価（Ａ）を測定する
。処理後、担体なｆ別し、洗浄する。次いでＰ液および
洗浄液の総力価（Ｂ）を測定する。酵素結合率は矢の式
で定義する。

■不溶化ＰＡＬ剤の活性 トランス−桂皮酸３０　？／ｌｋ、アンモニアｑＭ（ｐ
Ｈ１０，１ｔ）を含有する反応原料ｉｌ　ｊ　ｍｅに不
溶化ＰＡＬ剤７ｍｌを添加し一３θ°Ｃで３時間反応さ
せた。そして活性は反応後、生成したＬ−フェニルの生
産遺で表した。なおＬ−フェニルアラニンの分析は高速
液体クロマトゲラフイーによった。

■反応におけるトランス−桂皮酸、Ｌ−フェニルアラニ
ンの分析 分析は高速液体クロマトグラフィーによった〇カラム：
　ウオターズラジアルバツクＣ／’浴離液：　メタノー
ル／水／リン酸＝≦００／グ００　／　／　ｊ溶出速度
：　２　ｍｌ　７分 検　出：Ｕｖコ／４ｔｎｍ 実施例２〜６及び比較例１〜５ 下記第１表に示す様に、樹脂の種類及びイオン型を替え
る以外は、実施例１に記載したと同様に吸着させて不溶
化ＰＡＬ剤を得た。

与られたＰＡＬ剤の酵素結合率、不溶化ＰＡＬ剤の活性
を下記第１表に示す。

実施例　７〜８ 菌株をロドトルラ・グラシリス（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌ
ａｇｒａｃｉｌｉｓ→現ロドスボリデイウム・トルロイ
デスＲｈｏｄｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ　ｔｏｒｕｌｏｉｄ
ｅｓ　）　Ｉ　Ｆ　ＯＯ！　！　９に代える以外は、実
施例１と同様に酵素液を得（ただし、この時の酵素液の
活性は０．１２ＴＪ／ｒｎ／；であった）、実施例１及
び３と同様に吸着させそ不溶化ＰＡＬ剤を得た。

得られたＰＡＬ剤の酵素結合率を第２表に示す〇実施例
　９ 菌株をヘペロマ・ヴイノンフイルム（Ｈｅｂｅｌｏｍａ
ｖｉｎｏｓｏｐｈｙｌｌｕｍ　）　ＭＣＩ　２０３７　
（ＦＥＲＭ　　Ｐ時の酵素液の活性は０　、　／　９　
Ｕ／ｍｌであった］。

吸着させ〔ただし、この時酵素液を♂、！ｍ６使用］不
溶化Ｉ’ＡＬ剤を得た。

得られたＰＡＬ剤の酵素結合率はｉｏｏ％、また不溶化
ＰＡＬ剤の活性はＬ−フェニルアラニンコ、！ｆｇ／Ｉ
Ａであった。

〔発明の効果〕

本発明に係る不溶化ＰＡＬ剤は、高活性で−かつ安定で
あり、Ｌ−フェニルアラニンの効率的な産生に宵月であ
る。

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. （１）１．０ｍ＾２／ｇ以上の比表面積および半径１２
   ０Å以上の細孔容積０．１ｍｌ／ｇ以上を有する多孔性
   陰イオン交換樹脂にＬ−フェニルアラニンアンモニアリ
   アーゼを吸着担持させた不溶化Ｌ−フェニルアラニンア
   ンモニアリアーゼ剤。
2. （２）多孔性陰イオン交換樹脂が１０．０ｍ＾２／ｇ以
   上の比表面積および半径１２０Å以上の細孔容積０．３
   ｍｌ／ｇ以上を有する特許請求の範囲第１項記載の不溶
   化Ｌ−フェニルアラニンアンモニアリアーゼ剤。
3. （３）Ｌ−フェニルアラニンアンモニアリアーゼが微生
   物由来のものである特許請求の範囲第１項又は第２項記
   載の不溶化Ｌ−フェニルアラニンアンモニアリアーゼ剤
   。