JPS61289899A - 光学活性２−ハロ−１−フエニルエタノ−ルおよびそのエステルの製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、一般式（１１，８）−１ （式中、Ｘはハロゲン原子、Ｒは炭素数１〜７の脂肪族
炭化水素を示す。） テ示される（Ｒ，８）−２−ハロー１−フェニルエタノ
ールの脂肪酸エステルに、不斉的に加水分解するエステ
ラーゼ活性を有する酵素を作用させ、一般式（８）−２ （式中、Ｘはハロゲン原子を示す） テ示すれるω）−２−ハローｌ−フェニルエタノールと
、一般式（綽−１ で示すれる（１１）−２−ハロー１−フェニルエタノー
ルの脂肪酸エステルに分割し、各々を分離採取すること
を特徴とする光学活性２−へローｌ−フェニルエタノー
ルおよびそのエステルの製造法に関するものである。

光学活性２−ハロー１−フェニルエタノールは、医薬品
、農薬、香料等の合成原料として汎用性のある有用な物
質である。また光学活性な２−へローｌ−フェニルエタ
ノールの脂肪酸エステルは化学的あるいは酵素的加水分
解により光学活性な２−八ローｌ−フェニルエタノール
にすることができ、合成に利用できる。

〔従来の技術〕

光学活性＠−２−八ロー１−フェニルエタノールの製法
に関して、α−ハロアセトフェノンを酵母により不斉還
元してうる方法が報告されている（　Ｈｅｒｍａｎ　ｚ
ｉｆｆｅｒ　ｅｔ、　ａｌ、　、ジ’ｖ−ｔｋ・オブ・
オルガニック・ケミストリー　　（、ｙ、　Ｏｒｇａｎ
ｉｃＯｈｅｍｉｓｔｒｙ）、４５．３３５２（１９８０
）、Ｍｉｃｈａｅｌ　８ｔｒａｌｏｗ　ｅｔ、　ａｌ、
　、　　ジャーナＪＬ／　−オブ・ケ廻カル・ソサイテ
ー、ケミカル・コミニュケーション（Ｊ、　（！ｈｅｍ
ｉｃａｌ　ｇｏｃｉｅｔｙ。

Ｏｈｅｍｉｃａｌ　□ｏｍｍｉｎｕｃａｔｉｏｎ　）　
４００（１９７５））が、大量の酵母を必要とし、生産
設備の点からも必ずしも有利な方法とは考え難い。

また、（Ｒ，８）−２−ハロー１−フェニルエタノール
の脂肪酸エステルにリゾプス・ニグリカンス’（ｌ１ｈ
ｉｚｏｐｕｓ　ｎｉｇｒｉｃａｎｓ　）を作用させ不斉
加水分解を行い、（ＩＩ）−２−ハロー１−フェニルエ
タノールを得る方法〔テトラヘドロン・レターズ（’ｌ
’ｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　１ｅｔｔｅｒｓ　）２２巻、
２７頁。

２５２７ページ〕が知られているが、（８）一体を加水
分解する酵素あるいは微生物は知られていなかった。

〔発明が解決しようとする問題点〕

そこで本発明者らは、より簡便な設備で経済的な生産法
について橋々検討を行った結果、（Ｒ，８）−２−ハロ
ー１−フェニルエタノールの１１１エステル（（Ｒ，８
’）　−１）を不斉的に加水分解する＃累の存在を見い
出し、本発明を完成させるに至った。

Ｃ問題点を解決するための手段〕 本発明の基質として用いられる、一般式（Ｒ，８）で表
わされる（Ｒ，８）−２−ハローｌ−フェニルの脂肪酸
エステルの置換基Ｘ、Ｒの組み自わせは次の様なものが
挙げられる。Ｘは例えば塩素または臭素等のハロゲン基
、Ｒは例えば０１〜Ｃ７の脂肪族炭化水素基が挙げられ
るが、この脂肪族炭化水素基の一部がハロゲン基または
水酸基に置換されていても差しつかえない。

原料の（Ｒ，５）−１は次の様にして得られる。

例えばα−クロロアセトフェノン１５．５部をメタノー
ル５０部に溶解し、冷却下攪拌しつつ水素化ホウ素ナト
リウム１．９部を徐々に添加する。その後３０分間（俊
拌しつづけたのち、ｌＮ−塩酸で中和し、メタノールを
減圧除去する。次に酢酸エチルで抽出し、残留シロップ
を威圧蒸留（１３５°Ｃ／３朋ｒ−ｒｐ　）　Ｌ／、（
ＴＬ、８）−２−クロロ−１−フェニルエタノール１１
．６部を得る（収率７５％）。

（Ｒ，８）−２−クロロ−１−フェニルエタノール４２
部、トリエチルアミン２８部を塩化メチレンに溶解し、
冷却下攪拌しつつ塩化アセチル２２部を１時間にわたり
滴下する。生成したトリエチルアミン塩酸塩を濾過によ
り除去したのち、塩化メチレン！−を飽和食塩水で洗浄
する。次に【■化メチレンを減圧除去したのち、減圧蒸
留（９３°Ｃ／２　Ｍｍ　Ｈダ）し、（１’Ｌ、５）−
２−りｏｏ−１−フェニルエタノールのアセチルエステ
ルを３９部７する（収率７３％）。同（兼に炭素数の異
なる酸クロライドを用いることにより０２〜Ｃ８のエス
テルが収率７０〜８５％で得られる。またα−クロロア
セトフェノンの代りにα−ブロムアセトフェノンを用い
ｉば（Ｒ，５）−２−ブロム−１−フェニルエタノール
の脂肪酸エステルが得られる。いずれも無色液状物質で
ある。

ラセミ体の（Ｒ，５）−１を不斉的に加水分解して（８
）−２および（１１）−１を生成させる立体選択性のあ
るエステラーゼ活性を有する酵素であれば、微生物由来
でも、動物臓器由来でもいずれでも用いることができる
。本発明に使用できる酵素として、例えばシュードモナ
ｘ　（Ｐ８ｅｕａｏｍＯｎａ８　）属、あるいはクロモ
バクテリウム （Ｃｂｒｏｍｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　）　ＪＡに属する
微生物より得られる酵素、更に詳しくはシュードモナス
・アｊｌ−ルギノーザ（、ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ａ
ｅｒｕｇｉｎｏｓａ　）あるいはクロモバクテリウム・
ビスコスム（Ｏｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｖｉｓ
ｃｏｓｕｍ　）から得られる酵素などが挙げられる。こ
れらの酵素の市販品としてリパーゼ［アマノＪＰ（大野
製薬■製）あるいはリパーゼ東洋（東洋醸造■製→など
があり利用できる。

不斉加水分解反応は、基ｆｆ（Ｒ，５）−１を０．１〜
５０％（Ｗ／Ｖ　）の範囲で水に懸濁し、適ｈ【の酵素
、例えば基質と酵素の重量比［１ないし５００　：　１
の割合で加え、温度１０〜４５°Ｃ１好ましくは２５〜
３５℃の範囲で攪拌しながら行なう。ｐＨは４．０〜８
．０の範囲であれば良いが、加水分解反応の進行に伴い
、反応液のｐＩ（が酸性側に傾くのでＮａｏｒｉ等の適
当なアルカリ水溶液等でｐＨを６．０〜７．５に保持す
るのが好ましい。不斉識別の厳格な酵素であれば、基質
の２分の１当獣のアルカリが消費された時点で加水分解
反応は停止し、反応が終了した事を知ることができる。

従って、この発明に利用しうる酵素の検索もこの方法に
よって行なう事ができる。また酵素は適当な水不溶性担
体、例えばイオン交換樹脂等に固定化して行なうことも
できる。

次に不斉加水分解反応ののち、反応液から（Ｓ）−２と
（旬−１を分離採取する方法としては、例えば酢酸エチ
ル、塩化メチレン等の有機溶剤で抽出し、減圧上溶剤除
去シリカゲルクロマトグラフィー、例えばワコーゲル（
３−３００にてトルエンで溶出すれば両者は容易に分離
できる。（８）−２および（１１）−１の光学純度は次
の様にして決定できる。（８）−２は表１の如き条件で
高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＯ）にて行なう。

また（綽−１はＣＤＣ１８中、シフト試薬としてＥｕ（
ｈｆｃ）８を用い、’Ｈ−ＮΔｆｉｔ分析によって行な
う。

〔発明の効果〕

本発明によれば、（）Ｌ、８）−２−八ロー１−フエニ
ルエタノールの脂肪酸エステルに、不斉的に加水分解す
るエステラーゼ活性を有する酵素を作用させることによ
り光学活性な２−へロー１−フェニルエタノールおよび
そのエステルを工業的に有利に製造することができる。

〔実施例〕

以下実施例により本発明を具体的に示すが、本発明は実
施例のみに限定されるものではない。

実施例１ ２−クロロ−１−フェニルエタノールのアセチルエステ
ル（（Ｒ，８）　−１、Ｘ＝Ｏ１，Ｒ＝ＯＨ８）ＩＦ、
リパーゼ「アマノ」Ｐあるいはリパーゼ東洋２００ダを
５０　ｍＭリン酸緩衝液（ｐ■＋　７．０　）１００ｖ
／に添加し、３４°Ｃにて攪拌下、ｌＮ−ＮａＯＨ水溶
液でｐＨを７゜０に保持しつつ２８時間反応させた。次
に塩化メチレン１５０ｇ／で３回抽出し、塩化メチレン
層を芒硝で脱水後、減圧上溶剤除去をし油状物質を得た
。これをワコーゲル０−３００　３Ｏｆを詰めたカラム
に負荷し、トルエンにて溶出した。（８）−２画分と（
綽−１画分をそれぞれ集め、減圧上溶剤を除去し、それ
ぞれ無色油状物質を得た。それらの分析直は表２の如く
であり、いずれも光学純度１００％ｅ、　ｅ、の（Ｓ）
−２−クロロ−１−フェニルエタノール（（８）−２）
、（Ｒ）−２−クロロ−１−フェニルエタノールのアセ
チルエステル（（Ｂ）−１）が得られた。

米　ＨＰＬＯ，ＮＭＲ分析による。

実施例２ ２−ブロム−１−フェニルエタノールのアセチルエステ
ル（（Ｉｔ、８　）−１，Ｘ＝Ｂｒ　、　Ｉｔ＝ＯＨ８
）ｌｆを用いて実施例１と同様に反応させ、表３の結果
を得た。

表３ 実施例３ ２−クロロ−１−フェニルエタノールの脂肪酸エステル
（（ｌｔ、ｓ　）　−１、Ｘ＝　（３１、Ｒ＝ｆ１２Ｈ
，、。

０ＢＴ（７ｓ　Ｃ４Ｈ９ＩＣ５Ｈ１１＃　ｆ１６ＨＩＢ
　、　０７１（１５）各々を１１１１、リパーゼ「アマ
ノＪＰ　　２００ｑを５０ｍＭリン酸緩衝液（Ｔ）Ｈ７
，０）　１００ｚｅに添υＩ＋シ、３４°Ｃにて攪拌下
、ｌＮ−ＮａＯＨ水溶液でｐＨを７．０に保持しつつ１
００時間反応させた。その後、実施例１と同様に処理し
、表４に示すように（団−２−クロロ−１−フェニルエ
タノール（（８）　−２）オＪ：ヒ（９）−２−クロロ
−１−フェニルエタノールの脂肪酸エステル〔（至）−
１〕を得た。

（以下余白） 表４ 実施例４ ２−ブロム−１−フェニルエタノールの脂肪酸エステル
（（Ｒ，８）　−１、Ｘ＝Ｂｒ、　Ｒ＝０２Ｈ，。

Ｃ３ｓＨ７ｅ　０４Ｈ９１Ｃ６Ｈ１１＊　ｃ６ｎ１８．
　ａ７ｉｒ１．　）各々ＩＦを実施例３と同様にリパー
ゼ「アマノ」Ｐ２Ｏ０ｑを用い反応させ、処理し表５に
示すように（８）−２−ブロム−１−フェニルエタノー
ル〔（Ｓ）−２１３Ｊ：び（１−２−ブロム−１−フェ
ニルエタノールの脂肪酸エステル（（１０−１）を得た
。

（以下余白） 表５ 手続補正書（介壺９ 昭和４０年７０月１日 １、事件の表示 昭和６０年　＃Ｗ　　＜Ｍ　　願第１３２５５５号３、
補正をする者 事件との関係　　　　特許出願人 住　所　　　大阪市北区中之島三丁目２番４号６、補正
により増加する発明の数 ７、補正の対象’Ｈ””！”　’奢１ｉＮＭ餠佃ン“ｉ
Ｌｇ４−７ｍ（１）明細書、５頁１７〜１８行目 「２７頁、２５２７ページ〕」をｒ（２７）。

２５２７　（１９８１）　）Ｊに訂正する。

（２）同６頁下から６〜５行 ｒ（Ｒ，５）−２−ハローｌ−フェニルの脂肪酸エステ
ルゴをｒ（＆５）−２−ハロー１−フェニルエタノール
の脂肪酸エステル」に訂正する。

（３）同１０頁３行目 ｒＣ−ａｏｏにてトルエンで溶出」を「Ｃ−３００に負
荷し、トルエンで溶出」に訂正する。

以−Ｌ

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. （１）一般式（Ｒ、Ｓ）−１ ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｘはハロゲン原子、Ｒは炭素数１ 〜７の脂肪族炭化水素を示す） で示される（Ｒ、Ｓ）−２−ハロ−１−フェニルエタノ
   ールの脂肪酸エステルに、不斉的に加水分解するエステ
   ラーゼ活性を有する酵素を作用させ、一般式（Ｓ）−２ ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｘはハロゲン原子を示す） で示される（Ｓ）−２−ハロ−１−フェニルエタノール
   と、一般式（Ｒ）−１ ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中のＸ、Ｒは前記と同じ） で示される（Ｒ）−２−ハロ−１−フェニルエタノール
   の脂肪酸エステルに分割し、各々を分離採取することを
   特徴とする光学活性２−ハロ−１−フェニルエタノール
   およびそのエステルの製造法。
2. （２）（Ｒ、Ｓ）−２−ハロ−１−フェニルエタノール
   の脂肪酸エステルを不斉的に加水分解する酵素が微生物
   によって生産されたものである特許請求の範囲第１項記
   載の製造法。
3. （３）（Ｒ、Ｓ）−２−ハロ−１−フェニルエタノール
   の脂肪酸エステルを不斉的に加水分解する酵素が、シュ
   ードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属またはアクロ
   モバクテリウム （Ａｃｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属に属する微生
   物によって生産されたものである特許請求の範囲第１項
   または第２項記載の製造法。