JPS61115188A - 網状赤血球検査方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 この発明は、臨床検査分野における血液分析技術、詳し
くは、血液中に含まれている網状赤血球の数を検査する
方法に関するものである。

網状赤血球は、血液中に赤血球数の０．１１〜２．２％
程度含まれ、レチクロサイト（Ｒｅｔｉｃｕｌｏ　Ｃｙ
ｔｅ）とも呼ばれる幼若赤血球である。幼若赤血球は、
核を放出して赤血球に成長する前身であり、形態的にも
大型であることが６１１１Ｈされている。

網状赤血球の数は、これを調べることにより、急性内出
血、溶血性貧血、産生不良性貧血などの診断の裏付けに
有効に利用できる重要な臨床検査対象である。

従来の技術 従来法は、血液試料を超生体染色法で塗抹標本化して、
熟練検査技師が顕微鏡下で赤血球数１０００に対する網
状赤血球のパーセンテージを視算で求めていた。

なお、特開昭５９−１４２４６５号公報などに、自動化
計数器が開示されているが、これは、試験段階のもので
あり、未だ普及するまでに至っていない。

発明が解決しようとする問題点 上記従来法にはつぎのような問題がある。

■、視算による網状赤血球の検査方法では、前処理であ
る塗抹染色、顕微鏡下での判別計数に、細心の注意と高
度の技術とを必要とするとともに、長時間と多大な労力
とを必要とする。

■、視算によって網状赤血球の数を数えるため、誤差が
出やすく検査精度が低い。

発明の目的 この発明の目的は、上記の問題点の解決を図り、網状赤
血球の検査を高精度および迅速・容易に遂行することが
できる網状赤血球検査方法を提供することである。

問題点を解決するための手段 第１の発明 第１の発明が上記問題点を解決するために講した技術的
手段（発明の構成）は、つぎのとおりである。

すなわち、第１の発明の網状赤血球検査方法は、赤血球
粒度分布における度数最大値を与える粒度よりも大なる
粒度の実質的に全範囲にわたる領域の度数の積分値から
、前記粒度分布における度数最大値を与える粒度よりも
小なる粒度の実質的に全範囲にわたる領域の度数の積分
値を減算した値に比例する値を網状赤血球数とするもの
である。

網状赤血球数が前記両種分値の差に比例することは、後
述する実施例に係るシース方式の自動血液分析装置によ
る実験結果から得られた事実である。

すなわち、第１図に示すように、血球粒度分布の特性曲
線における度数最大値Ｄｍを与える粒度よりも大なる粒
度の実質的に全範囲にわたる領域（Ｘｌｌ〜ｘ、）にお
ける度数の積分値（面積）を８１とし、前記粒度分布の
特性曲線における度数最大値［）ｍを与える粒度よりも
小なる粒度の実質的に全範囲にわたる領域（Ｘ　Ｏ〜ｘ
＋ｔ）における度数の積分値（面積）を８２とすると、
ｓ、＞３２であり、網状赤組球数Ｒは、式 ％式％ となることが実験的に確認されたのである。

図中の破線ａは、度数最大値Ｄｍを通る縦軸を対称軸と
してこの軸の左側の特性曲線を折り返したものである。

したがって、領域（Ｘ＋＋〜ｘｏ’）における積分値（
面積）もＳ２となる。すなわち、図中、斜線を施した部
分の面積が網状赤血球数Ｒとなるのである。

作用 第１の発明の上記構成によれば、つぎの作用がある。

ｆａｔ　　顕微鏡下で視算する従来の場合に比べて、式
■に基づいた計算によって網状赤血球数Ｒを知ることが
できるため、赤血球粒度分布の特性曲線さえ正確に得ら
れれば、Ｐ線検査技師でなくとも迅速・容易に、かつ高
精度に網状赤血球数Ｒを検出することができる。

〜）また、顕微鏡下での視算による場合に比べて、検査
技師の疲労が著しく少なく、このことが検査上の誤認を
防止することに役立つ。

実施態様 この第１の発明の有効な実施Ｂ様として、自動唾液分析
装置をマイクロコンピュータなどに接続して、赤血球粒
度分布を測定する過程と、その測定結果に基づいて前記
減算Ｒ＝Ｓ、−３２を実行する過程とを連続的かつ自動
的に行うように構成することが挙げられる。

この実施態様によれば、演算が自動化されているため、
一層高精度かつ迅速な検査を遂行することができる。

第２の発明 つぎに、第２の発明の網状赤血球検査方法は、赤血球粒
度分布における度数最大値を与える粒度よりも大なる粒
度の実質的に全範囲にわたる領域の度数の積分値が、前
記粒度分布における度数最大値を与える粒度よりも小な
る粒度の実質的に全範囲にわたる領域の度数の積分値よ
りも小なる場合、あるいは血小板と赤血球の分離粒度レ
ベルでの度数最大値の所定％以上の場合に、赤血球数を
Ｎ、補正率をＨとして、網状赤血球Ｒ（％）を、弐 から求めるものである。

これは、０式の適用が困難な場合に対処するためのもの
で、一般血球計数時には、血小板数と赤血球数とはある
粒度レベルで分離して計数して問題ないが（第１図のＸ
６、第４図の破線）、網状赤血球数は少ないので、ｒｆ
ｉ密には前記レベルでの値が、例えば前記Ｄｍ（ｉの１
０％以上の場合は、０式を通用することが精度上できな
い場合も考えられる。

したがって、Ｄｍ値の例えば２０％（赤証球分布幅ＲＤ
Ｗ値を求めるときに使う値）以上を与える粒度レベル群
のピーク（ｘ７）から左側は常に標準正規分布を与える
と見て、前記２０％以下の赤血球数を推定算出するもの
である。

すなわち、第１図のＸ。を改めてｙ軸とすると、度数ｙ
は平均がμ、分散がσ２の正規分布式（ガウス分布式）
、 ・・・・・・・・・■ で、μ＝０．σ２！１ｔと置いたときの・・・・・・・
・・■ で表される。

ｘ＝０のときは、ｙの値の２０％の値 ｌ／（５ｆ「７）を与えるＸは、 ・・・・・・・・・■ より１ 、−±ｆコ〒７１１Ｔ吋１．７９４１ Ｘ軸の−１，７９４１からＯまでの面積をＳとすると、
−〇、４６３３ ・・・・・・・・・■ 一方、計＠装置で上記Ｓに相当する実計数値Ｃを求める
と、補正係数Ｈが、 Ｈ＝　０．４６３３／　Ｃ で与えられる実測の赤血球聡カウント数をＮとすると、
網状赤面ｆ：）′Ｒ（％）は、 となる。

作用 第２の発明の上記構成によれば、つぎの作用がある。

（Ｃ１赤血球粒度分布の特性曲線における度数最大値［
）ｍを与える粒度よりも大なる粒度の実質的に全範囲に
わたる領域（ｘ＋ｔ〜ｘ、）における度数の積分値（面
積）Ｓｌが、前記粒度分布の特性曲線における度数最大
値Ｄｍを与える粒度よりも小なる粒度の実質的に全範囲
にわたる領域（ｘ。

〜ｘｅ）における度数の積分値（面ｔりを８２よりも小
なる場合、あるいは血小板と赤血球の分離粒度レベル（
ｘｏ）での度数最大値の所定％以上の場合も、この条件
に左右されることなく、目的の網状赤血球数Ｒを、第１
の発明と同様に、顕微鏡下で視算する従来の場合に比べ
て、式■に基づいた計算によって網状赤血球数Ｒを知る
ことができるため、赤血球粒度分布の特性曲線さえ正確
に得られれば、熟練検査技師でなくとも迅速・容易に、
かつ高精度に網状赤血球数Ｒを検出することができる。

（ｄｉ　　また、顕微鏡下での視算による場合に比べて
、検査技師の疲労が著しく少なく、このことが検査上の
誤認を防止することに役立つ点も第１の発明と同様であ
る。

第２の発明の有効な実施態様として、前記第１の発明の
実施態様と同様のものをあげることができる。

実施例 第２図に上記両発明に係る方法の実施に使用する自動血
液分析装置の一例を示す、この装置は、東亜医用電子−
が商品名εシリーズとして発売している自動血液分析装
置に、上記各発明の実施化のための手段を付加したもの
である。

出願人の先の出願に係る特願昭５９−１１５３３１号公
報に詳記されているように、細孔に粒子と直流電流とを
流通させて、粒子検出を行う旧来の導電式の粒子検出装
置は、検出歪みのために真の容積に基づく粒子の粒度分
布が得られないという問題を仔していた。

しかし、上記のεシリーズの自動血液分子装置では、ノ
ース方式を採用しており、粒子を細孔の中心部にのみ流
通させる技術によって初めて高精度な粒度分布特性曲線
が得られるようになった。

以下、この自動血液分子装置の構成を説明する。

図において、ｌは希釈液、２はＨＧＢ　（ヘモグロビン
）注射筒、３はＨＧＢセル、４はＨＧ　Ｂ　？ｇ血剤ポ
ンプ、５はＨＧＢ溶血剤タンク、６は希釈液、７はＲＢ
Ｃ（赤血球）注射筒、８はＷＢＣ（白血球）注射筒、９
はＷＢＣ検出チャンバ、ｌＯはＷＢＣ溶師剤ポンプ、１
１はＷＢＣ溶血剤タンク、１２は全血吸引ポンプ、１３
は定量コック、１４はＲＢＣ／ＰＬＴ検出チャンバ、１
５はシース液、１６はＲＢＣ／ＰＬＴ検出器（シース定
量部）、１７はＲＢＣ／ＰＬＴプリアンプ、１８はＲＢ
Ｃ／ＰＬＴ−ＷＢＣｆｌｉ［部、１９は粒度分布解析部
（ＰＤＡ）、２０はマイクロコンビエータ、２１はＨＧ
Ｂ検出器、２２はＨＧＢ増幅部、２３はＷＢＣ検出器（
マノメータ定量部）、２４はＷＢＣプリアンプ、２５は
プリンタである。

つぎに動作を説明する。

（ｉ）２ｍｆｆｉの希釈液ｌをＨＧＢ圧射筒２を介して
ＨＣＢセル３に供給するとともに、全血吸引ポンプ１２
を経て定量コ７り１３で定量された６μｌの全血試料を
ＨＧＢセル３に供給し、さらにＨＧＢ溶血削タンク５か
ら１ｍ１のＨＣＢ溶血剤をＨＣＢセル３に供給し、以上
３者をＨＧ　Ｂセル３内において混合する。

（ｉｉ）ＨＧＢセル３内で混合された測定液のＨＧＢを
ＨＧＢ検出器２１で測定する。その測定信号はＨＧＢ増
幅部２２で増幅され、マイクロコンピュータ２０に伝送
される。

（ｉｉｉ　）一方、ＨＧＢ注射筒８を介して２ｍｌの希
釈液６をＷＢＣチャンバ９に供給するとともに、定量コ
ック１３からの１２μｌの全血試料をＷＢＣチャンバ９
に供給し、さらにＷ８Ｃ溶血タンク１１からＷＢＣ溶血
剤ポンプ１０を介して１ｍｌのＷＢＣ溶血剤をＷＢＣチ
ャンバ９に供給し、これら３者をＷＢＣチャンバ９内で
混合する。

（ｉｖ）ＷＢＣチャンバ９内で混合された測定液のＷＢ
ＣをＷＢＣ検出器２３で測定する。その測定信号はＷＢ
Ｃプリアンプ２４で増幅され、さらにＲＢＣ／ＰＬＴ−
ＷＢＣ増幅部１８に伝送される。

（ｖ）また、ＲＢＣ／ＰＬＴ検出チャンバ１４において
は、定量コック１３から供給された２、６７ｍ１の全血
試料と、ＨＧＢ注射筒７からの希釈液６とが混合される
。

（ｖｌ）その混合された測定液は、ＲＢＣ／ＰＬＴ検出
器１６に送給され、ここでシースＩｐｉ、１５に包まれ
た状態で流れながら、ＲＢＣ（赤血球、白血球、レチク
ロサイトを含む）とＰＬＴ（血小板）とが検出される。

（ｖｉ）　ＲＢ　Ｃ／　Ｐ　ＬＴ検出’Ｊｉｉ［６から
の信号は、ＲＢＣ／ＰＬＴプリアンプ１７で増幅され、
ＲＢＣ／ＰＬＴ−ＷＢＣ増幅部１８でさらに増幅された
のち、粒度分布解析部１９に送給される。ここで、解析
された血球粒度分布の信号がマイクロコンピュータ２０
に伝送される。

（ｖＩＩ＋）マイクロコンピュータ２０は、ＨＧ　Ｂ増
幅部２２からのＨＧＢ値の信号と、粒度分布解析部１９
からの捕球粒度分布信号とに基づいて所定の演算処理を
実行し、その演算結果としてのＲＢＣ。

ＨＧＢ、ＷＢＣ，ＰＬＴ、ＨＣＴ　（ヘマトクリット値
）、ＭＣＶ（平均赤血球容積）、ＭＣＨ（平均赤血球容
積素１ｉ）　、　ＭＣＨＣ（平均赤血球血色素濃度）の
値をプリンタ２５に出力して、プリンタ２５は、それら
の値および血球粒度分布のグラフを第３図に示すように
印字する。

なお、ＰＤＡ　（粒度分布解析部）は、２．５μｍ’変
量区間を１粒度レベルとしてメモリ番地を割り当て、各
粒度での一定体積の試料中の粒子度数を記憶している。

粒度レベルをｘ７として、その度数（計数値）をＡ。と
すると、網状赤血球数Ｒは、第１図で、Ｒ−ΣＡ１１−
　ΣＡ１１ である。

第４図（Ａ）　〜（Ｊ）は、横軸にｐｍ”＝ｆｌｌ＝１
０−＋ｓ　ｌを、縦軸に相対度数をとった血球粒度分布
図であり、斜線部が網状赤血球数Ｒを表す。

図中、記号ＲＢＣの下側の数値は、網状赤血球値（％）
を表す。

第５図は、上記自動血液分析装置において発明に係る方
法を遂行する上で重要なハイドロダイナミックフォカシ
ングの模式図である０図において、３１はオリフィス、
３２はノズル、３３は回収管、３４はフロントシース液
、３５はバックシース液である。

ノズル３２および回収管３３を流動する粒子を含んだ試
料溶液は、鞘状に流れるフロントシース液３４およびバ
ックシース液３５によって包まれ、オリフィス３１の中
心部を、流路断面の直径が約１０μｍに集束され、高速
度で流動する。

なお、説明が相前後するが、第３図に示された血球粒度
分布の特性曲線（鉄質血性のある場合にみられる）の場
合は、ピークがＡ、、Ａ、’と複数あるため、ここで開
示した発明の適用は困難である。

この実施例によれば、多項百血球計数器である自動血液
分析装置の利用により、従来と殆ど変わらないコストで
、網状赤血球数Ｒのスクリーニングを他の項目の検査と
同時に迅速に遂行することができる。また、ピークが複
数の場合など、視算で行う検体数を少数に絞ることがで
き、検査労力を軽減することができる。

発明の効果 第１の発明によれば、つぎの効果がある。

（ａ＋　　顕微鏡下で視算する従来の場合に比べて、式
■に基づいた計算によって網状赤組球数Ｒを知ることが
できるため、血球粒度分布の特性曲線さえ正確に得られ
れば、熟練検査技師でなくとも迅速・容易に、かつ高精
度に網状赤血球数Ｒを検出することができる。

（ｂｌ　　また、顕微鏡下での視算による場合に比べて
、検査技師の疲労が著しく少なく、このことが検査上の
誤認を防止することに役立つ。

第２の発明によれば、つぎの効果がある。

（Ｃ）　　血球粒度分布の特性曲線における度数最大値
Ｄｍを与える粒度よりも大なる粒度の実質的に全範囲に
わたる領域（ｘａ−ｘ）における度数の積分値（面積）
Ｓｌが、前記粒度分布の特性曲線における度数最大値Ｄ
ｍを与える粒度よりも小なる粒度の実質的に全範囲にわ
たる領域（ｘｏ〜ｘａ）における度数の積分値（面積）
を３２よりも小なる場合、あるいは血小板と赤血球の分
離粒度レベルでの度数最大値の所定％以上の場合も、こ
の条件に左右されることなく、目的の網状赤血球数Ｒを
、第１の発明と同様に、顕微鏡下で視算する従来の場合
に比べて、弐〇に基づいた計算によって網状赤血球数Ｒ
を知ることができるため、血球粒度分布の特性曲線さえ
正確に得られれば、熟練検査技師でなくとも迅速・容易
に、かつ高精度に網状赤血球数Ｒを検出することができ
る。

＋ｄ＋　　また、顕微鏡下での視算による場合に比べて
、検査技師の疲労が著しく少なく、このことが検査上の
誤認を防止することに役立つ点も第１の発明と同様であ
る。

【図面の簡単な説明】

第１図はこの発明の方法に使用する自動血液分析装置の
概略構成図、第２図は発明原理の説明図、第３図はプリ
ントアウトされた内容の表示図、第４図（Ａ）〜（Ｊ）
は実測されたデータの表示図、第５図は自動血液分析装
置の要部の断面図である。 第３図 第２図 第４図

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. （１）赤血球粒度分布における度数最大値を与える粒度
   よりも大なる粒度の実質的に全範囲にわたる領域の度数
   の積分値から、前記粒度分布における度数最大値を与え
   る粒度よりも小なる粒度の実質的に全範囲にわたる領域
   の度数の積分値を減算した値に比例する値を網状赤血球
   数とする網状赤血球検査方法。
2. （２）赤血球粒度分布を測定する過程と、その測定結果
   に基づいて前記減算を実行する過程とを連続的かつ自動
   的に行う特許請求の範囲第（１）項記載の網状赤血球検
   査方法。
3. （３）赤血球粒度分布における度数最大値を与える粒度
   よりも大なる粒度の実質的に全範囲にわたる領域の度数
   の積分値が、前記粒度分布における度数最大値を与える
   粒度よりも小なる粒度の実質的に全範囲にわたる領域の
   度数の積分値よりも小なる場合、あるいは血小板と赤血
   球の分離粒度レベルでの度数最大値の所定％以上の場合
   に、赤血球数をＮ、補正率をＨとして、網状赤血球Ｒ（
   ％）を、式 Ｒ＝１００×［１−（１／（Ｎ×Ｈ））］ から求める網状赤血球検査方法。
4. （４）赤血球粒度分布を測定する過程と、その測定結果
   に基づいて前記減算を実行する過程とを連続的かつ自動
   的に行う特許請求の範囲第（３）項記載の網状赤血球検
   査方法。