JPS6110770A - スプリツト法用注射器を用いるオンカラムガスクロマトグラフ法 - Google Patents
スプリツト法用注射器を用いるオンカラムガスクロマトグラフ法Info
- Publication number
- JPS6110770A JPS6110770A JP59129971A JP12997184A JPS6110770A JP S6110770 A JPS6110770 A JP S6110770A JP 59129971 A JP59129971 A JP 59129971A JP 12997184 A JP12997184 A JP 12997184A JP S6110770 A JPS6110770 A JP S6110770A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- capillary
- column
- sample
- tube
- metal
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
- G01N30/16—Injection
- G01N30/18—Injection using a septum or microsyringe
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
本発明はキャピラリーオンカラムガスクロマトグラムの
測定法に関する。更に詳しくはスプリット法キャビラリ
ーガスクｐマドグラム測定時の注射器と試料注入操作に
より、試料をオンカラム注入してクーマドグラムを得る
実用上極めて有用なガスクルマドグラムの測定法に関す
る。 キャピラリーオンカラムガスクルマドグラフ法は、従来
から最も広く行われてきたキャピラリースプリット法ガ
スクロマトグラフ法に対し、得られたデーグーの精度、
正確性においてすぐれている。しかしながらキャピラリ
ーオンカラム法を実施するには、外径０．２７ ｔａｘ
程度で且つ８０．以上の長さを付した注射器を使用する
ことに伴う、例えば注射器内への試料の吸いこみが不良
になりやすい、該注射針はそのままではセプタムゴムを
直接貫通できないので、試料導入部には特別な工夫が必
要′である。試料導入操作時に系外にキャリアーガスが
放出される等の欠点がある。本発明者はそれらの欠点を
さげたキャピラリーオンカラムガスクロマトグラムの測
定法を鋭意追究し本発明方法を考案するに至った。すな
わち本発明方法によると、試料の注入はスプリット法に
用いた注射器をもって、キャピラリーカラムの頭に接続
した原則として液相を塗っていない細管に試料をオンカ
ラム注入することにより行う。本発明方法の利点は、従
来のオンカラム法にともなう前記の諸欠点を克服できる
ばかりではなく、試料中の蒸発残渣の存在によるクロマ
トグラムへの影響を克服することができる。次に本発明
方法を考案するに至りた考え方についてのべる。 内径０．２５ｍ乃至０．３５ ｍｍのキャピラリーカラ
ムの頭にケイ酸質の内径０．３２ｍ乃至０．３５ｍの液
相な塗っていない所謂空力ラムを存在せしめ、その空力
ラムに外径０．２７ｍの針を付した注射器を用いてオン
カラム注入することは公知である。 この場合空力ラムに注入された試料は一度気化して液相
を塗ったキャピラリーカラムに到達すると、試料中の溶
媒は液相に吸収されるので一時的であるが液相の厚味が
増大し、はじめにそこに達した溶質の前進はきわめてお
そくなる。それで空力ラムにおける注入の終りの方の試
料は前に液相を塗りたキャピラリーカラムに到達してい
る試料に追いつき、その結果キャピラリーカラムの入口
における試料、の存在中すなわち試料帯はある程度せま
くなる。さらに試料帯の５しろ部分においては、キャリ
アーガス中に飽和になるまで溶媒は溶けこみ前進し、試
料帯の先ぎの所で液相に吸収されて液相膜の厚味を一時
的に増大させ、溶媒が去ったあとの溶質は前進してその
前の溶質と合体する。 これをくりかえして行う溶媒効果による濃縮により、恰
も試料を巾せまくキャピラリーカラムの頭に注入したよ
うになり、兄事なオンカラムガスクロマトグラムが画か
れるというのがオンカラム法の主要原理である。内径０
．２８ ＋ｍａ長さ５０．ｍの０ｖ−１塗布キヤピラリ
ーカラムの頭に内径０．３６簡の未処理ガラス製空力ラ
ムをつげ、その長さを１ｍから１０ｍの範囲にわたり種
々変化させ、試料注入量についても１０〜１００μｔの
間で変化させ、他の測定諸条件も一定になし、ｎ−パラ
フィンＣ２９とＣ３０の間の分離数（Ｔｒｓｎｚｈａｌ
Ｎｕｍｂｅｒ、 Ｃ２ｇとＣ３ｏの間にその中間的な
ピーク巾を有する三角形が何本人りうるかを示す数値）
を調べた所、試料の注入量が正常なピーク形状を示す限
り分離数は試料注入量によらず空力ラムの長さにより定
まり、長さが長くなる程、ひくい値になることが判明し
た。また試料の注入を短時間で行っても１分根かげて行
っても分離数は変らなかった。これらの事実から液相を
塗付したキャピラリーカラムにおいては溶媒効果はある
ものの、空力ラムが長いとその内壁についた試料がそれ
から脱着してキャピラリーカラムに到達するまでに時間
がかかり。 その間に溶質がキャピラリーカラム中を前進し、試料帯
の長が大きくなり、充分溶媒効果が発揮されないうちに
、溶媒は溶質を残して前進してしまい、その結果分離数
はさがるものと推定された。 また空力ラムの内壁を所謂Ｄ４（オクタメチルテトラサ
イクロシロキサン）処理による不活性化を行った所、未
処理空力ラム使用の場合に比゛ぺ分離数はさらに低下し
た。このことはｎ−パラフィンが空力ラム内壁上に存在
するシロキサンの極薄膜に溶解し、空力ラムを通過する
のに時間を要したためと思われた。そこで、オンカラム
法で良いクロマトグラムをうるには〔１〕試料中の溶質
の空力ラム中の移動な早＜Ｌ、（２）キャピラリーカラ
ム中の初期の試料帯の移動をおそくすればよく、空力う
人中で試料蒸気が乱流にならない限り、空力ラムのデッ
ドスペースにとられれる必要はないと思考するに至った
。それを具体的に実験して本発明方法を考案した。 本発明方法に用いるキャピラリーカラムは通常のスプリ
ット法もしくはオンカラム法に用いるカラムと特に変っ
た点はなく、内径０．２ ｍ乃至０，３５１１１１１が
普通である。キャピラリーカラムによる分離段数は理論
的にはその内径に反比例するので、分離段数を上げるた
めに、内径の小さな例へば０」謹乃至０．０５ｍｍのも
のを使用するとピークのうしろの裾はひろがる傾向にあ
るが、それらは許容される程度であることが多い。塗付
せる液相の膜厚は上記〔２〕を可及的実現するためには
０．３μｍ以上であることが好ましく、あまり厚くなる
と高沸点溶質の保持時間が過大になるので、その観点か
らは０．６μｍ以下が最も一般的な膜厚である。低沸点
試料の場合にはさらに膜厚な３μｍ位まで増すこともあ
る。液相膜は架橋して膜の形状安定性を増しておくこと
も通常のオンカラム法同様好ましいことである。キャピ
ラリーカラムの材質はガラス、熔融石英、低吸着性ステ
ンレス（例えば日本クロマト工業製ＲＡＳ）或いは対象
試料によっては未処理ステンレスであってもよい。しか
し空力ラムをキャピラリーカラムの頭に接続する、操作
の容易さからするとガラスは他の可撓性材料に比べ劣る
。その場合にはガラスキャピラリーカラムの末端に中間
補助キャピラリーとして適宜細の可撓性キャピラリーの
短いものを熱収縮テフロンパイプを用いる等の既知の方
法（Ｋ、Ｇｒｏｂ＋Ｊｒ、ａｎｄ Ｒ−Ｍ’ｕｌｌｅｒ
、Ｊ、Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ 、 ｅ２４４（ｉ９８
２）１８５． ）で接続し
測定法に関する。更に詳しくはスプリット法キャビラリ
ーガスクｐマドグラム測定時の注射器と試料注入操作に
より、試料をオンカラム注入してクーマドグラムを得る
実用上極めて有用なガスクルマドグラムの測定法に関す
る。 キャピラリーオンカラムガスクルマドグラフ法は、従来
から最も広く行われてきたキャピラリースプリット法ガ
スクロマトグラフ法に対し、得られたデーグーの精度、
正確性においてすぐれている。しかしながらキャピラリ
ーオンカラム法を実施するには、外径０．２７ ｔａｘ
程度で且つ８０．以上の長さを付した注射器を使用する
ことに伴う、例えば注射器内への試料の吸いこみが不良
になりやすい、該注射針はそのままではセプタムゴムを
直接貫通できないので、試料導入部には特別な工夫が必
要′である。試料導入操作時に系外にキャリアーガスが
放出される等の欠点がある。本発明者はそれらの欠点を
さげたキャピラリーオンカラムガスクロマトグラムの測
定法を鋭意追究し本発明方法を考案するに至った。すな
わち本発明方法によると、試料の注入はスプリット法に
用いた注射器をもって、キャピラリーカラムの頭に接続
した原則として液相を塗っていない細管に試料をオンカ
ラム注入することにより行う。本発明方法の利点は、従
来のオンカラム法にともなう前記の諸欠点を克服できる
ばかりではなく、試料中の蒸発残渣の存在によるクロマ
トグラムへの影響を克服することができる。次に本発明
方法を考案するに至りた考え方についてのべる。 内径０．２５ｍ乃至０．３５ ｍｍのキャピラリーカラ
ムの頭にケイ酸質の内径０．３２ｍ乃至０．３５ｍの液
相な塗っていない所謂空力ラムを存在せしめ、その空力
ラムに外径０．２７ｍの針を付した注射器を用いてオン
カラム注入することは公知である。 この場合空力ラムに注入された試料は一度気化して液相
を塗ったキャピラリーカラムに到達すると、試料中の溶
媒は液相に吸収されるので一時的であるが液相の厚味が
増大し、はじめにそこに達した溶質の前進はきわめてお
そくなる。それで空力ラムにおける注入の終りの方の試
料は前に液相を塗りたキャピラリーカラムに到達してい
る試料に追いつき、その結果キャピラリーカラムの入口
における試料、の存在中すなわち試料帯はある程度せま
くなる。さらに試料帯の５しろ部分においては、キャリ
アーガス中に飽和になるまで溶媒は溶けこみ前進し、試
料帯の先ぎの所で液相に吸収されて液相膜の厚味を一時
的に増大させ、溶媒が去ったあとの溶質は前進してその
前の溶質と合体する。 これをくりかえして行う溶媒効果による濃縮により、恰
も試料を巾せまくキャピラリーカラムの頭に注入したよ
うになり、兄事なオンカラムガスクロマトグラムが画か
れるというのがオンカラム法の主要原理である。内径０
．２８ ＋ｍａ長さ５０．ｍの０ｖ−１塗布キヤピラリ
ーカラムの頭に内径０．３６簡の未処理ガラス製空力ラ
ムをつげ、その長さを１ｍから１０ｍの範囲にわたり種
々変化させ、試料注入量についても１０〜１００μｔの
間で変化させ、他の測定諸条件も一定になし、ｎ−パラ
フィンＣ２９とＣ３０の間の分離数（Ｔｒｓｎｚｈａｌ
Ｎｕｍｂｅｒ、 Ｃ２ｇとＣ３ｏの間にその中間的な
ピーク巾を有する三角形が何本人りうるかを示す数値）
を調べた所、試料の注入量が正常なピーク形状を示す限
り分離数は試料注入量によらず空力ラムの長さにより定
まり、長さが長くなる程、ひくい値になることが判明し
た。また試料の注入を短時間で行っても１分根かげて行
っても分離数は変らなかった。これらの事実から液相を
塗付したキャピラリーカラムにおいては溶媒効果はある
ものの、空力ラムが長いとその内壁についた試料がそれ
から脱着してキャピラリーカラムに到達するまでに時間
がかかり。 その間に溶質がキャピラリーカラム中を前進し、試料帯
の長が大きくなり、充分溶媒効果が発揮されないうちに
、溶媒は溶質を残して前進してしまい、その結果分離数
はさがるものと推定された。 また空力ラムの内壁を所謂Ｄ４（オクタメチルテトラサ
イクロシロキサン）処理による不活性化を行った所、未
処理空力ラム使用の場合に比゛ぺ分離数はさらに低下し
た。このことはｎ−パラフィンが空力ラム内壁上に存在
するシロキサンの極薄膜に溶解し、空力ラムを通過する
のに時間を要したためと思われた。そこで、オンカラム
法で良いクロマトグラムをうるには〔１〕試料中の溶質
の空力ラム中の移動な早＜Ｌ、（２）キャピラリーカラ
ム中の初期の試料帯の移動をおそくすればよく、空力う
人中で試料蒸気が乱流にならない限り、空力ラムのデッ
ドスペースにとられれる必要はないと思考するに至った
。それを具体的に実験して本発明方法を考案した。 本発明方法に用いるキャピラリーカラムは通常のスプリ
ット法もしくはオンカラム法に用いるカラムと特に変っ
た点はなく、内径０．２ ｍ乃至０，３５１１１１１が
普通である。キャピラリーカラムによる分離段数は理論
的にはその内径に反比例するので、分離段数を上げるた
めに、内径の小さな例へば０」謹乃至０．０５ｍｍのも
のを使用するとピークのうしろの裾はひろがる傾向にあ
るが、それらは許容される程度であることが多い。塗付
せる液相の膜厚は上記〔２〕を可及的実現するためには
０．３μｍ以上であることが好ましく、あまり厚くなる
と高沸点溶質の保持時間が過大になるので、その観点か
らは０．６μｍ以下が最も一般的な膜厚である。低沸点
試料の場合にはさらに膜厚な３μｍ位まで増すこともあ
る。液相膜は架橋して膜の形状安定性を増しておくこと
も通常のオンカラム法同様好ましいことである。キャピ
ラリーカラムの材質はガラス、熔融石英、低吸着性ステ
ンレス（例えば日本クロマト工業製ＲＡＳ）或いは対象
試料によっては未処理ステンレスであってもよい。しか
し空力ラムをキャピラリーカラムの頭に接続する、操作
の容易さからするとガラスは他の可撓性材料に比べ劣る
。その場合にはガラスキャピラリーカラムの末端に中間
補助キャピラリーとして適宜細の可撓性キャピラリーの
短いものを熱収縮テフロンパイプを用いる等の既知の方
法（Ｋ、Ｇｒｏｂ＋Ｊｒ、ａｎｄ Ｒ−Ｍ’ｕｌｌｅｒ
、Ｊ、Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ 、 ｅ２４４（ｉ９８
２）１８５． ）で接続し
【おくとよい。この場合その
可撓性キャピラリーの短片の内壁上には液相はあっても
なくて（よい（以下キャピラリーカラムの頭とはガラス
キャピラリーカラムにおいては特にことわる場合の他、
中間補助キャピラリーが付しであるものの頭の意である
）。空力ラムは通常のスプリット法用注射器の針が挿入
できる内径を肴することを要する。スプリット法用注射
針の最も細いものの外径は０．４籠であるので、空力ラ
ムの内径は最小限０．５ ｍは必要である。しかし普通
には内径Ｉｍの空力ラムが針挿入の容易さから好まれる
。空力ラムの内径をそれ以上大きくして行っても何の利
点も見出せず、２日以上になるとそれに接続されるキャ
ピラリーの内径、キャリアーガスの線速度等の操作条件
にもよるがピークの裾の形状悪化が目立っときもあり、
また太くて扱いにくくなるので魅力はない。この空力ラ
ムは試料をオンカラム注入した直後に急速に１００乃至
３００℃程度に加熱して前。 記〔１〕を実現する。そのために空力ラムは通電加熱で
きる金属細管であることを要す。その長さは試料注入量
と空力ラムの内径によって左右されるが、５μを以下の
注入量であるならば１ｍ程度を目安とすることができる
。金属細管の内壁は不活性であることを要する。市販の
低吸着性ステンレスキャピラリー（例えば日本クロマト
工業製ＲＡＳ）の他にグラスライニングステンレスキャ
ピラリーもその内径を通常のガラスキャピラリーの失活
処理と同じように処理すれば可成り低吸着性になし使用
し５る場合もある。その曲げ加工はそれらの失活処理の
前に行っておくを要し、円形に巻くことは困難であるの
で、５０３程度以上の長さで使用することはむずかしい
。これらの他に内径０、５ ｙｅｎ以上の熔融石英キャ
ピラリーを内挿した金属細管を使用する方法もある（以
下金属細管とは特に明示する他、グラスライング及び熔
融石英キャピラリー内挿形のものも含む）。金属細管の
内壁に液相な存在せしめることは未処理活性内壁の活性
低下という点については利点はあるが、前記〔１〕の実
現については不利な方向である。そこでこのような場合
には液相の存在量をできるだけ少なくすると共にその昇
温加熱は特に急速に高くする必要がある。金属キャピラ
リーチューブ゛の形状は太さ一定であるのが普通である
。しかし注射針の挿入される部分のみ栓内径０．５．以
上になし、それ以降は適宜細くするということも考えら
れるが、それによる利点は特にない。 キャピラリーカラムの頭と金属細管の尾の接続は熱収縮
テアランパイプを用いる等の既知の方法、或いは金属キ
ャピラリーもしくは熔融石英キャピラリーの連結方法と
して知られている接続用具を用いて袋ナツト或いは押込
形ねじにより接続を行う。金属細管には保温の目的で、
試料注入点以降はキャピラリーカラムとの接続ケ所の所
まで、ガラス製エンバイヤーチューブをかぶせる。それ
から金属細管の頭を試料導入部属接続する。試料導入部
の構造はスプリット法の試料注入蒸発部の蒸発部がない
構造と同じであって、試料はセプタムゴムを貫通し、て
オンカラム注入される。キャピラリーカラムはガスクロ
マトグラフの加熱槽内に設置されその末端は検出器に接
続され、他の端はガラス製エンバイヤーチューブをかぶ
せた金属細管に接続されているが、金属細管は必ずしも
全部が加熱槽内にあるを要せず、頭から２０乃至６０ｃ
ｒｎ位は加熱槽の断熱壁を貫通させてその外部に出し、
適宜加熱槽とは全く別に設けた試料導入部と接続しても
よい。むしろこの方がコールドオンカラム注入法を実施
しやすい利点がある。 キャピラリーカラムの初期温度は通常のオンカラム法の
場合と同じく、試料中の溶媒の沸点±２０℃程度である
が、前記の〔２〕を強くしてピークの裾の形状をよくす
るには初期温度は沸点−２０’Ｃ位が良い。その時の金
属細管の初期温度は、コールドオンカラム法では注射針
が到達する点より以降の所は大略カラムの初期温度でよ
い。ホットオンカラム法では溶媒の沸点＋２０’Ｃ位圧
する。キャリアーガスの流速は全く通常のオンカラム法
もしくはスプリット法と同じく２０乃至６０ω／秒の線
速度になるようＫする。試料はセプタムゴムを通してス
プリット法の場合と全く同じようにオンカラム注入され
る。その直後金属細管は全体を急速に１００乃至３００
℃程度に昇温させて、前記の〔１〕が確実に行われるこ
とを計る。そして数分後その温度をさげてよい。この記
述かられかるように、試料中に蒸発残渣が存在し、それ
が金属細管の内壁上に付着していたとしても、急速加熱
をするので揮発成分は蒸発残渣から分離し、キャピラリ
ーカラムに短時間で送りこまれる。そして金属細管の内
径が０．５順以上であることは、蒸発残渣の蓄積に対し
ても、試料導入部のキャリアルガスの圧が異常ＩＣ高ま
ることがおぎにくく、本発明方法はまた蒸発残渣を含有
する試料のオンカラム法としても光来のオンカラム法に
比べすぐれた方法である。試料注入後のキャピラリーカ
ラムの温度は試料によりてはカラムの初期温度のまま保
持する恒温法でもよいが、普通は１乃至１０℃／分の速
度で昇温させる。昇温開始の時期は試料注入直後でもよ
いが、充分溶媒効果を発揮させるよう溶媒ピークがほぼ
終った時点とする方がよい。この点は従来のオンカラム
法ｋ特に変る点はない。 従来のオンカラム法から考えから、単に空力ラムの径を
大きくした場合には、空力ラムの内壁の表面積が大きく
なる他にその残存活性作用も大きくなり、前記〔１〕が
充分には行われない。その結果特に高沸点溶質、吸着さ
れやすい溶質に対してはピークの巾が拡るかもしくはピ
ーク裾が尾を引き、ピークが良好な姿にならない。また
溶質と親和性のある蒸発残渣を含む試料に対しても同じ
よ５な不都合が認められ、その上クーマドグラムの再現
性もよくない。試料注入直後に急速加熱することは前記
〔１〕の実現に必要なことである。この急速加熱は常温
から３００℃到達まで１０秒乃至３０秒以内であること
がのぞましい。それを実現できる方法であれば如何なる
方法でもよいのであるが、通電加熱が簡単な方法である
と思考されたので、本発明方法はそれに限定した。通電
にともなうガスクロマトグラフの他の部分との電気的絶
縁は簡単な知識で実施でき、また通電加熱の電源は一次
側、二次側が夫々独立であるトランスを使用するならば
、特に電気的に絶縁を工夫する必要はない。金属細管の
急速加熱区間の設定は該細管にと９つげる端子の位置に
よりかり自由に変えられ、且つ熱容量の小さいことも特
にコール下オンカラム実施、その直後に金属細管全長に
わたる昇温、冷却を容易に可能にしている。 本発明の理解を更に容易にするために下記の実施例によ
って本発明を具体的に説明する。 実施例１ 第１図は本発明方法を実施するのに便なるようになした
キャピラリーオンカラムガスクロマトグラフの構成を示
した図である。キャリアーガスは流量調節弁（１）、キ
ャリアーガス供給管（２）を経て、セプタムゴム（３）
を付した試料導入部（４）から金属細管（５）、キャピ
ラリーカラム（６）を通り検出器（７）に至る。金属細
管（５）Ｋはガラス繊維製エンバイヤチュ−ズ（８）が
かぶせてあり、それはキャピラリーカラム（６）を収め
た加熱槽（９）の断熱壁（ＬＯを貫通して該槽内に入り
、キャピラリーカラム（６）と接続部組１で接続されて
いる。また金属細管には通電加熱のためにトランスａ２
につらなるリード線０住４及び１自がつけられており、
リード線（１４、ｔＥｌは切換スウィッチ鉦ｅでその何
れかがえらべるよ５になり℃いる。 この実施例は次の諸条件で行われた。金属細管（５）は
ＲＡＳｌｏｏ（日本タロマト工業製、低吸着性ステンレ
ス細管内径１１！ｊ１１外径２ｍ）６０ａ＋＋であり、
キャピラリーカラム（６）は内径０．２５ ｒｒａｎ、
外径ｉ、 ｏ ｍｍ 、長さ１５ｍの市販ステンレスキ
ャピラリーに液相として５Ｅ−ｓｏ（ポリメチルシルキ
サン）をダイナミック法で塗付したものである。接続部
０は熱収縮テフロンパイプを用いた。キャリアーガス窒
素を流量調節弁（１）で調節して線速度を６０ｃｍ／秒
になし、加熱槽（９）の初期温度を６０℃になし、金属
細管（５）はリード線ｔａと（１４の間に電流を通じ７
０℃に調節した。試料はｎ−パラフィンＣ１２１Ｃ１４
１Ｃ１６９Ｃ１Ｂ及びＣ９をほぼ等景況合し、それをｎ
−へキサンで５万倍にうすめたものを用いた。この試料
３μｌ を針の外径ｏ、１５５ｍ＋を付した注射器を使
用してセプタムゴムを通じ金属細管（５）に注入し、直
ちに切換スウィッチ叡０をリード線（１４から１０に切
換、金属細管（５）を１５秒間で２５０℃に加熱し、溶
媒ピークがほば終った所で加熱槽（９）を４℃／分の割
で昇温させた。得られたクロマトグラフを第２図に示し
た。図においてピーｋ Ｂは溶媒に基づくピークであり
、ピーク（８，甑’） 、 ９０ 。 ｅａ及び（２）は夫々ＣＣＣＣ及びＣ２ｏによ１２１
１４’ １６１ １８るピークである。ピ
ークの裾の形状は第２図からみるように良好な状態であ
った。 実施例２ 第３図は本発明方法を実施し５るキャピラリーオンカラ
ムガスクロマトグラフの構成を示した図である。第３図
はガラスキャピラリーカラム（６）Ｋ中間補助キャピラ
リー（至）を接続部（財）をもりて連結したこと、金属
細管（５）が加熱槽（９）に収容されていること及びリ
ード線番ｊが中間補助キャピラリー（２）につげられて
いることをのぞけば、第１図と変らない。 この実施例は次の諸条件で行われた。金属細管（５）は
内径０．５ ｗａｓ、外径１．５ ｍ内壁グラスライニ
ングステンレス管であって、酸洗滌、−シリル化処理に
より吸着性を低下させたもので長さは１５傭である。キ
ャピラリーカラム（６）は内径０．１調、外径０、８
ｔａ 、長さ１５ｍ、０Ｖ−１を厚さ０．３−μｍ に
塗付したガラスキャピラリーカラムである。中間補助キ
ャピラリー（２）はＲＡＳ２５（日本クロマト工業製低
吸着性ステンレスキャピラリー、内径０．２５１１ＩＩ
＋１．外径０．６問）で長さは１０個である。その一端
はキャピラリーカラム（６）と熱収縮テフロンパイプを
もって連結されて接続部＠を、他端は両端が袋ナツトで
あるパイプ接続用具により金属細管（５）と接続され接
続部■を形成している。 キャリアーガス窒素の線速度を３０の７秒になし、加熱
槽（９）の初期温度を６０℃になし、金属細管（５）に
はリード線０と１！３の間にトランス會りから電流を流
せる用意をした。試料は２．６キシリジン、２，６キシ
レノール、ｎ−デカノール、ｎ−パラフィンＣ１３１Ｃ
１４及びＣ１７のはぼ等景況合物をｎ−へキサン溶媒で
約５万倍に５すめたものである。 この試料を外径０．４ ｍ、長さ】２５Ｉの針をつげた
注射器を用いてセプタムゴム（３）を通じて金属細管（
５）の内壁上試料導入部（４）の背後から１１３の所に
０゜３μを注入し、その直後リード線ｔｅｌと■の間に
電流を流し１０秒間で金属細管（５）の温度を２００℃
になした。試料注入してから３．５分後、溶媒ピークが
ほぼ出現し終ったので加熱槽（９）の温度を４℃／分の
割で上昇させ、金属細管（５）の加熱を中止した。 得られたクロマトグラムを第４図に示す、図中ピーク（
ハ）、翰、１．＠、＠、＠、ｃｍ、ｃ３ｎは夫々溶媒で
あるｎ−へキサン、溶質である２、６−キシリジン、２
．６−キシレノール、ｎ−デカノール、ｎ−パラフィン
Ｃ１３１Ｃ１４及びＣ１７に基づくピークである。 第４図においては各ピークの裾に尾引きが認められる。 ｎ−パラフィン類によるピーク（２９，３０゜３１）も
ｎ−デカノールによるピーク（至）と同じく尾引きをし
ていることから、これらの尾引きは金属細管（５）、キ
ャピラリーカラム（６）等の試料の流路中における化学
吸着に基づくものではなく、金属細管（５）とキャピラ
リーカラム（６）の接続部（１１、ｕ ）の所でおきて
いるであろう物理的な原因によるものと推定される。し
かし充分有用なり−マドグラムが得られた。 以上瞳側をあげて説明したように１本発明方法は通常使
用されているスプリット法用の注射器を使用して、スプ
リット法と同じくセプタムゴムを通して試料をオンカラ
ム注入し、クロマドグラムを５る方法を提供するもので
ある。上記瞳側の他に本発明の精神の範囲内で種々の変
更、改良が考えられるが、それらは何れも本発明に含ま
れるものである。
可撓性キャピラリーの短片の内壁上には液相はあっても
なくて（よい（以下キャピラリーカラムの頭とはガラス
キャピラリーカラムにおいては特にことわる場合の他、
中間補助キャピラリーが付しであるものの頭の意である
）。空力ラムは通常のスプリット法用注射器の針が挿入
できる内径を肴することを要する。スプリット法用注射
針の最も細いものの外径は０．４籠であるので、空力ラ
ムの内径は最小限０．５ ｍは必要である。しかし普通
には内径Ｉｍの空力ラムが針挿入の容易さから好まれる
。空力ラムの内径をそれ以上大きくして行っても何の利
点も見出せず、２日以上になるとそれに接続されるキャ
ピラリーの内径、キャリアーガスの線速度等の操作条件
にもよるがピークの裾の形状悪化が目立っときもあり、
また太くて扱いにくくなるので魅力はない。この空力ラ
ムは試料をオンカラム注入した直後に急速に１００乃至
３００℃程度に加熱して前。 記〔１〕を実現する。そのために空力ラムは通電加熱で
きる金属細管であることを要す。その長さは試料注入量
と空力ラムの内径によって左右されるが、５μを以下の
注入量であるならば１ｍ程度を目安とすることができる
。金属細管の内壁は不活性であることを要する。市販の
低吸着性ステンレスキャピラリー（例えば日本クロマト
工業製ＲＡＳ）の他にグラスライニングステンレスキャ
ピラリーもその内径を通常のガラスキャピラリーの失活
処理と同じように処理すれば可成り低吸着性になし使用
し５る場合もある。その曲げ加工はそれらの失活処理の
前に行っておくを要し、円形に巻くことは困難であるの
で、５０３程度以上の長さで使用することはむずかしい
。これらの他に内径０、５ ｙｅｎ以上の熔融石英キャ
ピラリーを内挿した金属細管を使用する方法もある（以
下金属細管とは特に明示する他、グラスライング及び熔
融石英キャピラリー内挿形のものも含む）。金属細管の
内壁に液相な存在せしめることは未処理活性内壁の活性
低下という点については利点はあるが、前記〔１〕の実
現については不利な方向である。そこでこのような場合
には液相の存在量をできるだけ少なくすると共にその昇
温加熱は特に急速に高くする必要がある。金属キャピラ
リーチューブ゛の形状は太さ一定であるのが普通である
。しかし注射針の挿入される部分のみ栓内径０．５．以
上になし、それ以降は適宜細くするということも考えら
れるが、それによる利点は特にない。 キャピラリーカラムの頭と金属細管の尾の接続は熱収縮
テアランパイプを用いる等の既知の方法、或いは金属キ
ャピラリーもしくは熔融石英キャピラリーの連結方法と
して知られている接続用具を用いて袋ナツト或いは押込
形ねじにより接続を行う。金属細管には保温の目的で、
試料注入点以降はキャピラリーカラムとの接続ケ所の所
まで、ガラス製エンバイヤーチューブをかぶせる。それ
から金属細管の頭を試料導入部属接続する。試料導入部
の構造はスプリット法の試料注入蒸発部の蒸発部がない
構造と同じであって、試料はセプタムゴムを貫通し、て
オンカラム注入される。キャピラリーカラムはガスクロ
マトグラフの加熱槽内に設置されその末端は検出器に接
続され、他の端はガラス製エンバイヤーチューブをかぶ
せた金属細管に接続されているが、金属細管は必ずしも
全部が加熱槽内にあるを要せず、頭から２０乃至６０ｃ
ｒｎ位は加熱槽の断熱壁を貫通させてその外部に出し、
適宜加熱槽とは全く別に設けた試料導入部と接続しても
よい。むしろこの方がコールドオンカラム注入法を実施
しやすい利点がある。 キャピラリーカラムの初期温度は通常のオンカラム法の
場合と同じく、試料中の溶媒の沸点±２０℃程度である
が、前記の〔２〕を強くしてピークの裾の形状をよくす
るには初期温度は沸点−２０’Ｃ位が良い。その時の金
属細管の初期温度は、コールドオンカラム法では注射針
が到達する点より以降の所は大略カラムの初期温度でよ
い。ホットオンカラム法では溶媒の沸点＋２０’Ｃ位圧
する。キャリアーガスの流速は全く通常のオンカラム法
もしくはスプリット法と同じく２０乃至６０ω／秒の線
速度になるようＫする。試料はセプタムゴムを通してス
プリット法の場合と全く同じようにオンカラム注入され
る。その直後金属細管は全体を急速に１００乃至３００
℃程度に昇温させて、前記の〔１〕が確実に行われるこ
とを計る。そして数分後その温度をさげてよい。この記
述かられかるように、試料中に蒸発残渣が存在し、それ
が金属細管の内壁上に付着していたとしても、急速加熱
をするので揮発成分は蒸発残渣から分離し、キャピラリ
ーカラムに短時間で送りこまれる。そして金属細管の内
径が０．５順以上であることは、蒸発残渣の蓄積に対し
ても、試料導入部のキャリアルガスの圧が異常ＩＣ高ま
ることがおぎにくく、本発明方法はまた蒸発残渣を含有
する試料のオンカラム法としても光来のオンカラム法に
比べすぐれた方法である。試料注入後のキャピラリーカ
ラムの温度は試料によりてはカラムの初期温度のまま保
持する恒温法でもよいが、普通は１乃至１０℃／分の速
度で昇温させる。昇温開始の時期は試料注入直後でもよ
いが、充分溶媒効果を発揮させるよう溶媒ピークがほぼ
終った時点とする方がよい。この点は従来のオンカラム
法ｋ特に変る点はない。 従来のオンカラム法から考えから、単に空力ラムの径を
大きくした場合には、空力ラムの内壁の表面積が大きく
なる他にその残存活性作用も大きくなり、前記〔１〕が
充分には行われない。その結果特に高沸点溶質、吸着さ
れやすい溶質に対してはピークの巾が拡るかもしくはピ
ーク裾が尾を引き、ピークが良好な姿にならない。また
溶質と親和性のある蒸発残渣を含む試料に対しても同じ
よ５な不都合が認められ、その上クーマドグラムの再現
性もよくない。試料注入直後に急速加熱することは前記
〔１〕の実現に必要なことである。この急速加熱は常温
から３００℃到達まで１０秒乃至３０秒以内であること
がのぞましい。それを実現できる方法であれば如何なる
方法でもよいのであるが、通電加熱が簡単な方法である
と思考されたので、本発明方法はそれに限定した。通電
にともなうガスクロマトグラフの他の部分との電気的絶
縁は簡単な知識で実施でき、また通電加熱の電源は一次
側、二次側が夫々独立であるトランスを使用するならば
、特に電気的に絶縁を工夫する必要はない。金属細管の
急速加熱区間の設定は該細管にと９つげる端子の位置に
よりかり自由に変えられ、且つ熱容量の小さいことも特
にコール下オンカラム実施、その直後に金属細管全長に
わたる昇温、冷却を容易に可能にしている。 本発明の理解を更に容易にするために下記の実施例によ
って本発明を具体的に説明する。 実施例１ 第１図は本発明方法を実施するのに便なるようになした
キャピラリーオンカラムガスクロマトグラフの構成を示
した図である。キャリアーガスは流量調節弁（１）、キ
ャリアーガス供給管（２）を経て、セプタムゴム（３）
を付した試料導入部（４）から金属細管（５）、キャピ
ラリーカラム（６）を通り検出器（７）に至る。金属細
管（５）Ｋはガラス繊維製エンバイヤチュ−ズ（８）が
かぶせてあり、それはキャピラリーカラム（６）を収め
た加熱槽（９）の断熱壁（ＬＯを貫通して該槽内に入り
、キャピラリーカラム（６）と接続部組１で接続されて
いる。また金属細管には通電加熱のためにトランスａ２
につらなるリード線０住４及び１自がつけられており、
リード線（１４、ｔＥｌは切換スウィッチ鉦ｅでその何
れかがえらべるよ５になり℃いる。 この実施例は次の諸条件で行われた。金属細管（５）は
ＲＡＳｌｏｏ（日本タロマト工業製、低吸着性ステンレ
ス細管内径１１！ｊ１１外径２ｍ）６０ａ＋＋であり、
キャピラリーカラム（６）は内径０．２５ ｒｒａｎ、
外径ｉ、 ｏ ｍｍ 、長さ１５ｍの市販ステンレスキ
ャピラリーに液相として５Ｅ−ｓｏ（ポリメチルシルキ
サン）をダイナミック法で塗付したものである。接続部
０は熱収縮テフロンパイプを用いた。キャリアーガス窒
素を流量調節弁（１）で調節して線速度を６０ｃｍ／秒
になし、加熱槽（９）の初期温度を６０℃になし、金属
細管（５）はリード線ｔａと（１４の間に電流を通じ７
０℃に調節した。試料はｎ−パラフィンＣ１２１Ｃ１４
１Ｃ１６９Ｃ１Ｂ及びＣ９をほぼ等景況合し、それをｎ
−へキサンで５万倍にうすめたものを用いた。この試料
３μｌ を針の外径ｏ、１５５ｍ＋を付した注射器を使
用してセプタムゴムを通じ金属細管（５）に注入し、直
ちに切換スウィッチ叡０をリード線（１４から１０に切
換、金属細管（５）を１５秒間で２５０℃に加熱し、溶
媒ピークがほば終った所で加熱槽（９）を４℃／分の割
で昇温させた。得られたクロマトグラフを第２図に示し
た。図においてピーｋ Ｂは溶媒に基づくピークであり
、ピーク（８，甑’） 、 ９０ 。 ｅａ及び（２）は夫々ＣＣＣＣ及びＣ２ｏによ１２１
１４’ １６１ １８るピークである。ピ
ークの裾の形状は第２図からみるように良好な状態であ
った。 実施例２ 第３図は本発明方法を実施し５るキャピラリーオンカラ
ムガスクロマトグラフの構成を示した図である。第３図
はガラスキャピラリーカラム（６）Ｋ中間補助キャピラ
リー（至）を接続部（財）をもりて連結したこと、金属
細管（５）が加熱槽（９）に収容されていること及びリ
ード線番ｊが中間補助キャピラリー（２）につげられて
いることをのぞけば、第１図と変らない。 この実施例は次の諸条件で行われた。金属細管（５）は
内径０．５ ｗａｓ、外径１．５ ｍ内壁グラスライニ
ングステンレス管であって、酸洗滌、−シリル化処理に
より吸着性を低下させたもので長さは１５傭である。キ
ャピラリーカラム（６）は内径０．１調、外径０、８
ｔａ 、長さ１５ｍ、０Ｖ−１を厚さ０．３−μｍ に
塗付したガラスキャピラリーカラムである。中間補助キ
ャピラリー（２）はＲＡＳ２５（日本クロマト工業製低
吸着性ステンレスキャピラリー、内径０．２５１１ＩＩ
＋１．外径０．６問）で長さは１０個である。その一端
はキャピラリーカラム（６）と熱収縮テフロンパイプを
もって連結されて接続部＠を、他端は両端が袋ナツトで
あるパイプ接続用具により金属細管（５）と接続され接
続部■を形成している。 キャリアーガス窒素の線速度を３０の７秒になし、加熱
槽（９）の初期温度を６０℃になし、金属細管（５）に
はリード線０と１！３の間にトランス會りから電流を流
せる用意をした。試料は２．６キシリジン、２，６キシ
レノール、ｎ−デカノール、ｎ−パラフィンＣ１３１Ｃ
１４及びＣ１７のはぼ等景況合物をｎ−へキサン溶媒で
約５万倍に５すめたものである。 この試料を外径０．４ ｍ、長さ】２５Ｉの針をつげた
注射器を用いてセプタムゴム（３）を通じて金属細管（
５）の内壁上試料導入部（４）の背後から１１３の所に
０゜３μを注入し、その直後リード線ｔｅｌと■の間に
電流を流し１０秒間で金属細管（５）の温度を２００℃
になした。試料注入してから３．５分後、溶媒ピークが
ほぼ出現し終ったので加熱槽（９）の温度を４℃／分の
割で上昇させ、金属細管（５）の加熱を中止した。 得られたクロマトグラムを第４図に示す、図中ピーク（
ハ）、翰、１．＠、＠、＠、ｃｍ、ｃ３ｎは夫々溶媒で
あるｎ−へキサン、溶質である２、６−キシリジン、２
．６−キシレノール、ｎ−デカノール、ｎ−パラフィン
Ｃ１３１Ｃ１４及びＣ１７に基づくピークである。 第４図においては各ピークの裾に尾引きが認められる。 ｎ−パラフィン類によるピーク（２９，３０゜３１）も
ｎ−デカノールによるピーク（至）と同じく尾引きをし
ていることから、これらの尾引きは金属細管（５）、キ
ャピラリーカラム（６）等の試料の流路中における化学
吸着に基づくものではなく、金属細管（５）とキャピラ
リーカラム（６）の接続部（１１、ｕ ）の所でおきて
いるであろう物理的な原因によるものと推定される。し
かし充分有用なり−マドグラムが得られた。 以上瞳側をあげて説明したように１本発明方法は通常使
用されているスプリット法用の注射器を使用して、スプ
リット法と同じくセプタムゴムを通して試料をオンカラ
ム注入し、クロマドグラムを５る方法を提供するもので
ある。上記瞳側の他に本発明の精神の範囲内で種々の変
更、改良が考えられるが、それらは何れも本発明に含ま
れるものである。
第１図及び第３図は本発明方法を実施するに便なるよう
に用意されたキャピラリーオンカラムガスクロマトグラ
フの構成図である。第２図及び第４図は本発明方法を実
施してえられたりｐマドグラムの例である。 １・・・流量調節弁、２・・・キャリアーガス供給管、
３・・・セプタムゴム、４・・・試料導入部、５°゛金
属細管、６・・・キャピラリーカラム、７・・・検出器
、８・・・エンパイヤチューブ、９・・・加熱槽、１σ
・・・断熱壁、１１．２４・・・接続部、１２・・・ト
ランス、１３ 、１４ 、１５・・・リード線、１６・
・・切換スウィッチ、１７ 、２５・・・溶媒によるピ
ーク、１８ 、１９ 、２０ 、２１ 、２２ 、２６
、２７ 、．２８ 、２９．３１・・・溶質によるピ
ーク。
に用意されたキャピラリーオンカラムガスクロマトグラ
フの構成図である。第２図及び第４図は本発明方法を実
施してえられたりｐマドグラムの例である。 １・・・流量調節弁、２・・・キャリアーガス供給管、
３・・・セプタムゴム、４・・・試料導入部、５°゛金
属細管、６・・・キャピラリーカラム、７・・・検出器
、８・・・エンパイヤチューブ、９・・・加熱槽、１σ
・・・断熱壁、１１．２４・・・接続部、１２・・・ト
ランス、１３ 、１４ 、１５・・・リード線、１６・
・・切換スウィッチ、１７ 、２５・・・溶媒によるピ
ーク、１８ 、１９ 、２０ 、２１ 、２２ 、２６
、２７ 、．２８ 、２９．３１・・・溶質によるピ
ーク。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、セプタムゴムを有する試料導入部に通電加熱可能な
内径０．５ｍｍ以上の金属細管をとりつけ、それに液相
を塗ったキャピラリーカラムを連結し、該カラムの他端
を検出器に至らしめるようになし、キャピラリーカラム
の初期温度を保持したのち外径０．４ｍｍ以上の針を付
した注射器を使用して、上記セプタムゴムを貫通して試
料を金属細管内にオンカラム注入し、その後該金属細管
を通電急速昇温させ要すればキャピラリーカラムを昇温
させることを特徴とするキャピラリーオンカラムガスク
ロマトグラムの測定方法。 ２、金属細管の内径が０．５ｍｍ以上２．０ｍｍ以下で
ある特許請求の範囲第１項記載のキャピラリーオンカラ
ムガスクロマトグラムの測定方法。 ３、注射針の外径が０．４ｍｍ以上０．７ｍｍである特
許請求の範囲第１項記載のキャピラリーオンカラムガス
クロマトグラムの測定方法。 ４、液相を塗ったキャピラリーカラムの内径が０．２ｍ
ｍ以上０．３５ｍｍ以下である特許請求の範囲第１項記
載のキャピラリーオンカラムガスクロマトグラムの測定
方法。 ５、金属細管の内壁上には液相が存在しない特許請求の
範囲第１項記載のキャピラリーオンカラムガスクロマト
グラムの測定方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59129971A JPS6110770A (ja) | 1984-06-26 | 1984-06-26 | スプリツト法用注射器を用いるオンカラムガスクロマトグラフ法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59129971A JPS6110770A (ja) | 1984-06-26 | 1984-06-26 | スプリツト法用注射器を用いるオンカラムガスクロマトグラフ法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6110770A true JPS6110770A (ja) | 1986-01-18 |
Family
ID=15022959
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59129971A Pending JPS6110770A (ja) | 1984-06-26 | 1984-06-26 | スプリツト法用注射器を用いるオンカラムガスクロマトグラフ法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6110770A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5189472A (en) * | 1989-06-16 | 1993-02-23 | Konica Corporation | Color image forming apparatus having a plurality of guide members facing a plurality of developing devices |
| JP2021042964A (ja) * | 2019-09-06 | 2021-03-18 | 株式会社島津製作所 | 分析システム、分析支援装置、分析方法および分析支援方法 |
-
1984
- 1984-06-26 JP JP59129971A patent/JPS6110770A/ja active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5189472A (en) * | 1989-06-16 | 1993-02-23 | Konica Corporation | Color image forming apparatus having a plurality of guide members facing a plurality of developing devices |
| JP2021042964A (ja) * | 2019-09-06 | 2021-03-18 | 株式会社島津製作所 | 分析システム、分析支援装置、分析方法および分析支援方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Grob Jr | Solvent effects in capillary gas chromatography | |
| Grob Jr et al. | On-column injection of large sample volumes usimg the retention gap technique in capillary gas-cromatography | |
| Lord et al. | Tapers and restrictors for capillary electrochromatography and capillary electrochromatography-mass spectrometry | |
| Chester et al. | Separation of sucrose polyesters by capillary supercritical-fluid chromatography/flame ionization detection with robot-pulled capillary restrictors | |
| Smith et al. | Rapid and efficient capillary column supercritical fluid chromatography with mass spectrometric detection | |
| Grob Jr et al. | Concurrent solvent evaporation for on‐line coupled HPLC‐HRGC | |
| US4477266A (en) | Solute focusing technique for on-column injection in capillary gas chromatography | |
| DE19810109C2 (de) | Gaschromatograph mit einem temperaturgesteuerten Injektor | |
| JPS6110770A (ja) | スプリツト法用注射器を用いるオンカラムガスクロマトグラフ法 | |
| Tsuda et al. | Open-tubular microcapillary liquid chromatography with 30–40 μm ID columns | |
| Traitler | Recent advances in capillary gas chromatography applied to lipid analysis | |
| Kong et al. | Static coating of capillary columns using mixed solvents | |
| JPS6110769A (ja) | 脱着可能な金属キヤピラリ−チユ−ブ部分を有するキヤピラリ−カラム | |
| Vreuls et al. | Polar solvents for the desorption of a liquid chromatographic precolumn coupled on‐line with a capillary gas chromatograph | |
| DE3448091C3 (ja) | ||
| Smith | Gas—liquid chromatography of cholesteryl esters on non-polar and polar capillary columns following on-column injection | |
| Shah et al. | Demonstration of an optimized flow cell SFC-FTIR interface | |
| Kresbach et al. | Direct electrically heated spray device for a moving belt liquid chromatography—mass spectrometry interface | |
| Gueant et al. | Purification of androgen-binding protein from rat testis using high-performance liquid chromatography and physicochemical properties of the iodinated molecule | |
| Hinshaw Jr et al. | Solute focusing technique for on‐column injection in capillary gas chromatography | |
| Sandra et al. | Experiments with cold on-column injection | |
| JPS60249054A (ja) | ガスクロマトグラムの測定方法及びその装置 | |
| Van Kamp et al. | One-step preparation of the polypeptide chains of α-crystallin | |
| Takayama et al. | Behavior of heavy solutes on a precolumn in on‐column gas chromatography | |
| Mowszowicz et al. | A simple and reliable technique for separating the androgen receptor from testosterone-binding globulin in human tissues |