JPS6040859B2 - 抗血栓性人工医療材料 - Google Patents
抗血栓性人工医療材料Info
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- JPS6040859B2 JPS6040859B2 JP52090673A JP9067377A JPS6040859B2 JP S6040859 B2 JPS6040859 B2 JP S6040859B2 JP 52090673 A JP52090673 A JP 52090673A JP 9067377 A JP9067377 A JP 9067377A JP S6040859 B2 JPS6040859 B2 JP S6040859B2
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- Japan
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- heparin
- solution
- antithrombin
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- artificial medical
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- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/005—Enzyme inhibitors
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/81—Carrier - bound or immobilized peptides or proteins and the preparation thereof, e.g. biological cell or cell fragment as carrier
- Y10S530/812—Peptides or proteins is immobilized on, or in, an organic carrier
- Y10S530/815—Carrier is a synthetic polymer
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- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は抗血栓性人工医療材料、特に血液の凝固を防ぎ
、血栓の発生を防止するために使用される人工医療材料
に関する。
、血栓の発生を防止するために使用される人工医療材料
に関する。
よく知られているように、血液の凝固は血液中のフイブ
リノゲンにトロンビンが作用してフイブリンが形成され
ることにより起る現象であるが、トロンビンのそのよう
な作用はへパリンによって阻害される。
リノゲンにトロンビンが作用してフイブリンが形成され
ることにより起る現象であるが、トロンビンのそのよう
な作用はへパリンによって阻害される。
従って、血液の凝固を阻止し「その流動性を保持する必
要のある、外科手術などの場合には、ヘパリンを大量に
投与することによって、その目的を達していた。しかし
ながら、そのようなへパリンの大量投与は、ときに内臓
出血の如く死につながる副作用を惹起するため、近時に
おいてはへパリンを適宜の水不溶性高分子化合物に固定
せしめてこれに血液を接触せしめることにより「へパリ
ンを血液中に混入しない状態に保持しつつこれに血液中
のトロンビンを補捉せしめて、血液の凝固を防ぐ方法が
提案されている。本発明者らはかねてから血液の凝固を
防ぎ」血栓の発生防止に有効な方法を求めて研究を進め
て来たが「ヘパリンとアンチトロンビンｍを同時に水不
溶性高分子化合物に固定化したものは、著しく高い抗凝
固作用を発揮する事実を知った。すなわち、ヘパリンの
固定化に際しアンチトロンピンｍを同時に固定化せしめ
るときはちへパリンのみ固定化したものや「アンチトロ
ンビン囚のみを固定化したものに比し遥かに優れた抗凝
固作用を発揮し「 しかも抗凝固物質の固定化量が少〈
ても充分な抗凝固効果が期待でき「官能基に乏しい担体
材料に対しても著しい抗凝固効果を賦与せしめることが
出来る事実を見出した。へパリンとアンチトロンビン虹
とが協同して抗凝固作用の発揮にあづかるものであるこ
とは公知である。
要のある、外科手術などの場合には、ヘパリンを大量に
投与することによって、その目的を達していた。しかし
ながら、そのようなへパリンの大量投与は、ときに内臓
出血の如く死につながる副作用を惹起するため、近時に
おいてはへパリンを適宜の水不溶性高分子化合物に固定
せしめてこれに血液を接触せしめることにより「へパリ
ンを血液中に混入しない状態に保持しつつこれに血液中
のトロンビンを補捉せしめて、血液の凝固を防ぐ方法が
提案されている。本発明者らはかねてから血液の凝固を
防ぎ」血栓の発生防止に有効な方法を求めて研究を進め
て来たが「ヘパリンとアンチトロンビンｍを同時に水不
溶性高分子化合物に固定化したものは、著しく高い抗凝
固作用を発揮する事実を知った。すなわち、ヘパリンの
固定化に際しアンチトロンピンｍを同時に固定化せしめ
るときはちへパリンのみ固定化したものや「アンチトロ
ンビン囚のみを固定化したものに比し遥かに優れた抗凝
固作用を発揮し「 しかも抗凝固物質の固定化量が少〈
ても充分な抗凝固効果が期待でき「官能基に乏しい担体
材料に対しても著しい抗凝固効果を賦与せしめることが
出来る事実を見出した。へパリンとアンチトロンビン虹
とが協同して抗凝固作用の発揮にあづかるものであるこ
とは公知である。
従って〜へパリンのみを固定化した場合であっても「こ
れに血液を接触させるときは「その中に存在するアンチ
トロンビン皿が当然に固定化されたへパリンと協同して
抗凝固作用を発揮するものと考えられていた。前記した
本発明者らの知見は、むしろこのような従来の考え方に
反するものであってし両者の共存状態を保ちつつ固定化
することによってト凝競作用を有効に発揮出来ることを
示している。本発明は、上記の知見に基づいて完成され
たものであって「その要旨はへパリンとアンチトロンビ
ン鞘を固定化したことを特徴とする抗血栓怪人工医療材
料に存する。
れに血液を接触させるときは「その中に存在するアンチ
トロンビン皿が当然に固定化されたへパリンと協同して
抗凝固作用を発揮するものと考えられていた。前記した
本発明者らの知見は、むしろこのような従来の考え方に
反するものであってし両者の共存状態を保ちつつ固定化
することによってト凝競作用を有効に発揮出来ることを
示している。本発明は、上記の知見に基づいて完成され
たものであって「その要旨はへパリンとアンチトロンビ
ン鞘を固定化したことを特徴とする抗血栓怪人工医療材
料に存する。
本発明の特徴はトヘパリンとアンチトロンビン凪を共存
状態で固定化させた点にありｔ固定化の具体的手法自体
には何らの特徴も存在しない。すなわち「それら抗凝固
物質の固定化は通常の蛋白質固定化技術を適用してこれ
を行うことができる〔（財）日本生化学会刊「生化学実
験講座５酵素研究法（下）」第の部固定化酵素（１９７
３王）およびそこに記載された引用文献参照）〕。酵素
の固定化法としては「一般にも担体結合法（共有結合法
、イオン結合法、物理的吸着法）〜架橋法、包括法など
各種の方法が知られているが、本発明の人工医療材料を
製造する場合、そのいつれの方法が採用されてもよい。
状態で固定化させた点にありｔ固定化の具体的手法自体
には何らの特徴も存在しない。すなわち「それら抗凝固
物質の固定化は通常の蛋白質固定化技術を適用してこれ
を行うことができる〔（財）日本生化学会刊「生化学実
験講座５酵素研究法（下）」第の部固定化酵素（１９７
３王）およびそこに記載された引用文献参照）〕。酵素
の固定化法としては「一般にも担体結合法（共有結合法
、イオン結合法、物理的吸着法）〜架橋法、包括法など
各種の方法が知られているが、本発明の人工医療材料を
製造する場合、そのいつれの方法が採用されてもよい。
たとえば、担体結合法を採用する場合、損体としてセル
ロース、デキストラントアガロース「ポリアクリルアミ
ド、ポリビニルアルコール「ポリヒドロキシエチルメタ
アクリレートなどが知られているが、その何れをも使用
することができ「人工医療材料の使用形態に応じて適宜
の物性を有する胆体を選択すればよい。前述の如くト本
発明に従ってへパリンとアンチトロンビン皿を共存状態
で固定化するときは、比較的少量でも充分な抗凝固作用
が認められるので、官能基の少し、担体でもこれを使用
することができ〜広範囲の種類損体から物性の良好なも
のが選択される。採用する固定化法に応じて雄体をその
使用前に活性化する必要がある場合がある。
ロース、デキストラントアガロース「ポリアクリルアミ
ド、ポリビニルアルコール「ポリヒドロキシエチルメタ
アクリレートなどが知られているが、その何れをも使用
することができ「人工医療材料の使用形態に応じて適宜
の物性を有する胆体を選択すればよい。前述の如くト本
発明に従ってへパリンとアンチトロンビン皿を共存状態
で固定化するときは、比較的少量でも充分な抗凝固作用
が認められるので、官能基の少し、担体でもこれを使用
することができ〜広範囲の種類損体から物性の良好なも
のが選択される。採用する固定化法に応じて雄体をその
使用前に活性化する必要がある場合がある。
これも常套の方法が種々知られているので、それらから
適宜に選択すればよい。たとえば臭化シアンを作用させ
る方法はその一例である。担体に固定化すべきへパリン
とアンチトロンビン瓜の量について特に制限はないが、
通常「担体１のこつきへパリン１〜５仇夕、アンチトロ
ンビン邸１〜５０の９を固定化させれば良好な抗凝固作
用を示す人工医療材料が得られる。へパリンとアンチト
ロンビソ虹の固定化割合についても時に制限はないが〜
一般には１：１〜１０三１（重量比）の範囲にあるのが
適当である。へパリンとアンチトロンビンｍの固定化は
これらを個別に逐次行ってもよいが、同時に行った方が
操作が簡便で勺有利である。本発明の人工医療材料はそ
の挺体の物性に応じて粉末、板状「管状など適宜の村形
に調製することができ、これに血液を接触させればトロ
ンビンなどが容易に捕捉されて、血液の凝固が阻止され
る。トロンビンを捕捉した人工医療材料は「 これをた
とえば酢酸水溶液で洗うことによってトロンビンを脱着
せしめることができ、その結果トロンビン捕捉機能が再
賦活される。
適宜に選択すればよい。たとえば臭化シアンを作用させ
る方法はその一例である。担体に固定化すべきへパリン
とアンチトロンビン瓜の量について特に制限はないが、
通常「担体１のこつきへパリン１〜５仇夕、アンチトロ
ンビン邸１〜５０の９を固定化させれば良好な抗凝固作
用を示す人工医療材料が得られる。へパリンとアンチト
ロンビソ虹の固定化割合についても時に制限はないが〜
一般には１：１〜１０三１（重量比）の範囲にあるのが
適当である。へパリンとアンチトロンビンｍの固定化は
これらを個別に逐次行ってもよいが、同時に行った方が
操作が簡便で勺有利である。本発明の人工医療材料はそ
の挺体の物性に応じて粉末、板状「管状など適宜の村形
に調製することができ、これに血液を接触させればトロ
ンビンなどが容易に捕捉されて、血液の凝固が阻止され
る。トロンビンを捕捉した人工医療材料は「 これをた
とえば酢酸水溶液で洗うことによってトロンビンを脱着
せしめることができ、その結果トロンビン捕捉機能が再
賦活される。
以下に実施例および参考例を挙げて本発明を更に具体的
に説明する。
に説明する。
実施例 １
風 ァガｏ−ス（セファｏ−ス蟹）４０の‘（乾燥重量
約１夕）を水１００のとに懸濁し、櫨枠下に５〜ＩＯＮ
ＮａＯＨ溶液を加えてｐＨｉｌ〜１２に保持する。
約１夕）を水１００のとに懸濁し、櫨枠下に５〜ＩＯＮ
ＮａＯＨ溶液を加えてｐＨｉｌ〜１２に保持する。
これにＢｒＣＮ溶液（４〜２４夕／８０〜４８０柵）を
添加しつつ上記のＮａＯＨ溶液を加えてｐＨの低下が認
められなくなるまでｐＨｉｌ〜１２に保持する。この間
氷を加えて液温を２０ｏＣ付近に保つ。反応は８〜１２
分間で終了する。反応終了後〜速やかにガラスフィル夕
を用いて炉過し〜冷水１そによって過剰のＢｒＣＮを洗
浄除去して活性化アガロースを得る。｛Ｂ｝ 活性化ア
ガロース５００の‘を０．１ＭＮａＨＣ０３溶液Ｓ■‘
に懸濁させ「 これにへパリン１００榊９およびアンチ
トロンビンｍ１２．歌９を０．ｉＭＮａＨＣ０３溶液１
０の‘もこ溶解させた溶液を加え、４℃において一夜擬
拝した。
添加しつつ上記のＮａＯＨ溶液を加えてｐＨの低下が認
められなくなるまでｐＨｉｌ〜１２に保持する。この間
氷を加えて液温を２０ｏＣ付近に保つ。反応は８〜１２
分間で終了する。反応終了後〜速やかにガラスフィル夕
を用いて炉過し〜冷水１そによって過剰のＢｒＣＮを洗
浄除去して活性化アガロースを得る。｛Ｂ｝ 活性化ア
ガロース５００の‘を０．１ＭＮａＨＣ０３溶液Ｓ■‘
に懸濁させ「 これにへパリン１００榊９およびアンチ
トロンビンｍ１２．歌９を０．ｉＭＮａＨＣ０３溶液１
０の‘もこ溶解させた溶液を加え、４℃において一夜擬
拝した。
活性化アガロースの余剰活性基をフロックするため、Ｉ
Ｍエタノールアミン溶液（ｐＨ８．０）１０の‘を加え
「 ４℃で１時間擬梓を行ってから、２ＭＮａＣＩ溶液
および０．１８ＭＮａＣＩ溶液で逐次洗浄し、へパリン
とアンチトロンビンｍ固定化材料（以下「１一ＡＴｍ一
日ＥＰ」と略す。）を得る。活性化アガロース２００妙
につきへパリン２０のｃとアンチトロンビンｍ５雌が固
定化されていた。上記と同様の方法により、活性化アガ
ロース２００の９につきへパリン２０の９を固定化させ
たへパリン固定化材料（以下「１−ＨＥＰ」と略す。
Ｍエタノールアミン溶液（ｐＨ８．０）１０の‘を加え
「 ４℃で１時間擬梓を行ってから、２ＭＮａＣＩ溶液
および０．１８ＭＮａＣＩ溶液で逐次洗浄し、へパリン
とアンチトロンビンｍ固定化材料（以下「１一ＡＴｍ一
日ＥＰ」と略す。）を得る。活性化アガロース２００妙
につきへパリン２０のｃとアンチトロンビンｍ５雌が固
定化されていた。上記と同様の方法により、活性化アガ
ロース２００の９につきへパリン２０の９を固定化させ
たへパリン固定化材料（以下「１−ＨＥＰ」と略す。
）および活性化アガロース２００の９につきアンチトロ
ンビン町５秘を固定化させたアンチトロンビンｍ固定化
材料（以下「１−ＡＴｍ」と略す。
ンビン町５秘を固定化させたアンチトロンビンｍ固定化
材料（以下「１−ＡＴｍ」と略す。
）を得た。ただし、アンチトロンビンｍはへパリンの保
護作用下で固定化されなければ抗凝固作用を起さないの
でト後者の材料の調製に際してはアンチトロンビンｍに
対し８培量のアセチル化へパリンを反応系中に共存せし
めることによりアンチトロンビンｍの活性を保護しつつ
それのみを活性化アガロースに固定化させた。さらに、
活性化アガロースにへパリンとアンチトロンピンｍを添
加しない点を除いては上記と同様に処理したものをコン
トロールとした。
護作用下で固定化されなければ抗凝固作用を起さないの
でト後者の材料の調製に際してはアンチトロンビンｍに
対し８培量のアセチル化へパリンを反応系中に共存せし
めることによりアンチトロンビンｍの活性を保護しつつ
それのみを活性化アガロースに固定化させた。さらに、
活性化アガロースにへパリンとアンチトロンピンｍを添
加しない点を除いては上記と同様に処理したものをコン
トロールとした。
｛Ｃ｝ クェン酸加血磯（血液と３．８％クエン酸ナト
リウム溶液の９：１（容量比）混合物を３００びｐｍ、
１５分の遠沈処理に付して得られた上燈液）０．２の‘
をガラス製小試験管にとり、３７００に加塩する。
リウム溶液の９：１（容量比）混合物を３００びｐｍ、
１５分の遠沈処理に付して得られた上燈液）０．２の‘
をガラス製小試験管にとり、３７００に加塩する。
これに一定量の固定化材料を加え、直ちに１ノ４０Ｍ塩
化カルシウム溶液０．２の上を添加し、３７０恒温槽中
で静かに振蜜し、血数が凝固するまでの時間を測定した
。結果を第１表に示す。第１表 上表の結果から、１−ＡＴｍ−ＨＥＰは軍−ＨＥＰや１
一ＡＴｍに比し血液凝固時間を著しく延長せしめるもの
であることが理鮫できる。
化カルシウム溶液０．２の上を添加し、３７０恒温槽中
で静かに振蜜し、血数が凝固するまでの時間を測定した
。結果を第１表に示す。第１表 上表の結果から、１−ＡＴｍ−ＨＥＰは軍−ＨＥＰや１
一ＡＴｍに比し血液凝固時間を著しく延長せしめるもの
であることが理鮫できる。
実施例 ２
偽 ポリヒドロキシェチルメタアクリレート（以下「Ｐ
ｏｌｙ一日ＥＭＡ」と略す。
ｏｌｙ一日ＥＭＡ」と略す。
）１００雌を水で洗い、０．１ＭＮａ２Ｃ０３溶液（ｐ
Ｈ１１．０）に一夜浸潰して膨潤させる。これを上記の
Ｎａ２Ｃ０３溶液に駆濁させへＩＮＮａＯＨ溶液を加え
てＰＨ１１。５〜１２．０に調整し〜全量２０羽とする
。
Ｈ１１．０）に一夜浸潰して膨潤させる。これを上記の
Ｎａ２Ｃ０３溶液に駆濁させへＩＮＮａＯＨ溶液を加え
てＰＨ１１。５〜１２．０に調整し〜全量２０羽とする
。
櫨梓下「 ＢｒＣＮ溶液（２０〜１０００の９ノ２０の
‘；ＩＮＮａＯＨ溶液でｐＨ１１４５〜１ＺＯに調製）
を加え、１０℃前後に保持しつつｔＰＨＩｌ．５〜１２
．０において３０分間反応を行う。反応終了後「ガラス
フィル夕を用いて炉遇し「０．１ＭＮａＨＣ０３溶液に
よって洗浄を繰り返し、活性化Ｐｏｌｙ一日ＥＭＡを得
る。
‘；ＩＮＮａＯＨ溶液でｐＨ１１４５〜１ＺＯに調製）
を加え、１０℃前後に保持しつつｔＰＨＩｌ．５〜１２
．０において３０分間反応を行う。反応終了後「ガラス
フィル夕を用いて炉遇し「０．１ＭＮａＨＣ０３溶液に
よって洗浄を繰り返し、活性化Ｐｏｌｙ一日ＥＭＡを得
る。
‘Ｂ｝ 活性化Ｐｏｌｙ一日ＥＭＡＩＯ物９を０．１Ｍ
ＮａＨＣ０３溶液２Ｍに懸濁させ「 これにへパリン２
０雌およびアンチトロンビン町２の９をＱＩＭＮａＣ０
３溶液３泌に溶解させた溶液を加え、４℃において一夜
額幹した。
ＮａＨＣ０３溶液２Ｍに懸濁させ「 これにへパリン２
０雌およびアンチトロンビン町２の９をＱＩＭＮａＣ０
３溶液３泌に溶解させた溶液を加え、４℃において一夜
額幹した。
活性化Ｐｏｉｙ−ＨＥＭＡの余剰活性基をブロックする
ため「ＩＭエタノールァミン溶液（ｐＨ８．０）１地を
加え、４℃でｉ時間穣洋を行ってから、２けＮａＣＩ溶
液および０．１８ ＭａｃＩ溶液で逐次洗浄し、ヘパリ
ンとアンチトロンビンｍ固定化材料（以下「１′−ＡＴ
ｍ−ＨＥＰ」と略す。）を得る。上記と同様の方法によ
り、活性化Ｐｏｌｙ−モ也ＭＡＩＯＯ柵につきへパリン
２の９を固定化させたへパリン固定化材料（以下「１′
一日ＥＰ」と略す。
ため「ＩＭエタノールァミン溶液（ｐＨ８．０）１地を
加え、４℃でｉ時間穣洋を行ってから、２けＮａＣＩ溶
液および０．１８ ＭａｃＩ溶液で逐次洗浄し、ヘパリ
ンとアンチトロンビンｍ固定化材料（以下「１′−ＡＴ
ｍ−ＨＥＰ」と略す。）を得る。上記と同様の方法によ
り、活性化Ｐｏｌｙ−モ也ＭＡＩＯＯ柵につきへパリン
２の９を固定化させたへパリン固定化材料（以下「１′
一日ＥＰ」と略す。
）および活性化Ｐｏｌｙ一日ＥＭＡＩＯＯ収につきアン
チトロンビンｍ２の９を固定化させたアンチトロンビン
ｍ固定化材料（以下「１〆−ＡＴ虹」と略す。）を得た
。ただし「アンチトロンビンｍはへパリンの保護作用化
で固定化されなければ抗凝固作用を起さないので、後者
の材料の調製に際してはアンチトロンビン虹に対し８倍
量のアセチル化へパリンを反応系中に共存せしめること
によりアンチトロンビンｍの活性を保護しつつそれのみ
を活性化Ｐｏｌｙ一日ＥＭＡに固定化させた。さらに、
活性化Ｐｏｌｙ一日ＥＭＡをへパリンとアンチトロンビ
ンｍを添加しない点を除いては上記と同様に処理し「
コントロールとした。
チトロンビンｍ２の９を固定化させたアンチトロンビン
ｍ固定化材料（以下「１〆−ＡＴ虹」と略す。）を得た
。ただし「アンチトロンビンｍはへパリンの保護作用化
で固定化されなければ抗凝固作用を起さないので、後者
の材料の調製に際してはアンチトロンビン虹に対し８倍
量のアセチル化へパリンを反応系中に共存せしめること
によりアンチトロンビンｍの活性を保護しつつそれのみ
を活性化Ｐｏｌｙ一日ＥＭＡに固定化させた。さらに、
活性化Ｐｏｌｙ一日ＥＭＡをへパリンとアンチトロンビ
ンｍを添加しない点を除いては上記と同様に処理し「
コントロールとした。
に｝ クェン酸加血数（血液と３．８％クエン酸ナトリ
ウム溶液の９：１（容量比）混合物を３００印ｐｍ、１
５分の透次処理に付して得られた上澄液）０．２の‘を
ガラス製上試験管にとり、３７００に加溢する。
ウム溶液の９：１（容量比）混合物を３００印ｐｍ、１
５分の透次処理に付して得られた上澄液）０．２の‘を
ガラス製上試験管にとり、３７００に加溢する。
これに１．２５Ｍを固定化材料を加え、直ちに１／４瓜
Ｍ塩化カルシウム溶液０．２の‘を添加し「３７℃恒
糧槽中で静かに猿濠し、血※が凝固するまでの時間を測
定した。結果を第２表に示す。第２表 上表の結果から、１′−ＡＴｍ−ＨＥＰは１′一日ＥＰ
や１′−ＡＴｍに比し血液凝固時間を著しく延長せしめ
るものであることが理解できる。
Ｍ塩化カルシウム溶液０．２の‘を添加し「３７℃恒
糧槽中で静かに猿濠し、血※が凝固するまでの時間を測
定した。結果を第２表に示す。第２表 上表の結果から、１′−ＡＴｍ−ＨＥＰは１′一日ＥＰ
や１′−ＡＴｍに比し血液凝固時間を著しく延長せしめ
るものであることが理解できる。
実施例 ３Ｐｏｌｙ一日ＥＭＡに代え、ポリビニルアル
コールを使用する以外は実施例２と同機に操作を行い、
へパリンとアンチトロンビンｍを固定化させたポリビニ
ルアルコールは、ヘパリンまたはアンチトロンビンｍの
みを固定化させたものに比し顕著な抗凝固作用を有する
ことが確認された。
コールを使用する以外は実施例２と同機に操作を行い、
へパリンとアンチトロンビンｍを固定化させたポリビニ
ルアルコールは、ヘパリンまたはアンチトロンビンｍの
みを固定化させたものに比し顕著な抗凝固作用を有する
ことが確認された。
実施例 ４
実施例１で調製した１−ＡＴ皿一日ＥＰ、１一ＡＴｍお
よび１−ＨＥＰ各１０ｍｇを０．１９ ＭＮａＣＩ溶液
０．２叫に懸濁する。
よび１−ＨＥＰ各１０ｍｇを０．１９ ＭＮａＣＩ溶液
０．２叫に懸濁する。
１−ＡＴ瓜−ＨＥＰ懸濁液に対しては０．１９のＮａＣ
Ｉ溶液０．１柵、１ｒＡＴｍ懸濁液に対してはへパリン
溶液（１６５単位／柵）０．１のと、１−１把Ｐ懸濁液
に対してはアンチトロンビンｍ溶液（１の９′地）０，
１机上を加え、これらにトロンビン溶液（その０４１の
上は凝固時間測定系において凝固時間１硯砂の活性を示
す。
Ｉ溶液０．１柵、１ｒＡＴｍ懸濁液に対してはへパリン
溶液（１６５単位／柵）０．１のと、１−１把Ｐ懸濁液
に対してはアンチトロンビンｍ溶液（１の９′地）０，
１机上を加え、これらにトロンビン溶液（その０４１の
上は凝固時間測定系において凝固時間１硯砂の活性を示
す。
）０．２机を添加し、３７０陣温槽中で３び分間振糧し
「反応を行う。残存トロンビンを含有する上燈液０４１
の‘をとり、２８００に加溢したアカシア液（１５％ア
カシア生理食塩水、１％塩化カルシウム生理食塩水、ィ
ミダゾール緩衝液および生理食塩水を２；１：１：５（
容量比）の割合で混合したもの。）０．２泌に加え、凝
梓後「２８００陣温槽中に３分間静瞳する。これに標準
フィブリノーゲン液（市販フィブリノーゲンを０．軍則
岬ａＣｉ溶液中に溶解しｔ ０４９ＭＮａ２ＨＰ０４溶
液でｐＨ？．２に調整し、０．１９ＭＮａＣＩ溶液で１
％溶液としたもの。）０．１の‘を加え、凝固時間を測
定することにより上燈液中の残存トロンピン活性を求め
た。なお、ヘパリンとアンチトロンビンｍを固定化して
いない活性化アガロースをコントロールとして使用し、
これを０．１ＭＮａＣＩ溶液０．物‘に懸濁したものに
アンチトロンビンｍ溶液（１奴′の‘）０．１の‘を添
加し、これに上記と同様の操作を施した。結果を第３表
に示す。第３表 上表の結果から、ヘパリンとアンチトロンビン頚の両者
を固定化した系は、そのいずれか一方のみを固定化し〜
他方を溶液状態で使用する系に比較して著しく強い抗凝
固作用を示すことが理解される。
「反応を行う。残存トロンビンを含有する上燈液０４１
の‘をとり、２８００に加溢したアカシア液（１５％ア
カシア生理食塩水、１％塩化カルシウム生理食塩水、ィ
ミダゾール緩衝液および生理食塩水を２；１：１：５（
容量比）の割合で混合したもの。）０．２泌に加え、凝
梓後「２８００陣温槽中に３分間静瞳する。これに標準
フィブリノーゲン液（市販フィブリノーゲンを０．軍則
岬ａＣｉ溶液中に溶解しｔ ０４９ＭＮａ２ＨＰ０４溶
液でｐＨ？．２に調整し、０．１９ＭＮａＣＩ溶液で１
％溶液としたもの。）０．１の‘を加え、凝固時間を測
定することにより上燈液中の残存トロンピン活性を求め
た。なお、ヘパリンとアンチトロンビンｍを固定化して
いない活性化アガロースをコントロールとして使用し、
これを０．１ＭＮａＣＩ溶液０．物‘に懸濁したものに
アンチトロンビンｍ溶液（１奴′の‘）０．１の‘を添
加し、これに上記と同様の操作を施した。結果を第３表
に示す。第３表 上表の結果から、ヘパリンとアンチトロンビン頚の両者
を固定化した系は、そのいずれか一方のみを固定化し〜
他方を溶液状態で使用する系に比較して著しく強い抗凝
固作用を示すことが理解される。
なお「上記において、ヘパリンとアンチトロンビンｍの
溶液を使用することなく固定化材料の抗凝固作用を比較
した場合、すなわち、１−ＡＴ瓜一日ＥＰ、１−ＡＴ皿
および１−ＨＥＰのそれぞれ−定量をトロンビン溶液に
加え、３７０で一定時間振溢し、その上燈液中の残存ト
ロンビン活性を凝固時間により比較したところ、コント
ロールにおける残存トロンビン活性を１００％とすると
、重−ＨＥＰを使用した場合に２０％の残存トロンピン
活性を示す条件下では、１−ＡＴｍの使用では残存トｏ
ンビン活性１０〜２０％、甚一ＡＴｍ−ＨＥＰの使用で
は残存トロンビン活性０．２〜０．７％を示す。
溶液を使用することなく固定化材料の抗凝固作用を比較
した場合、すなわち、１−ＡＴ瓜一日ＥＰ、１−ＡＴ皿
および１−ＨＥＰのそれぞれ−定量をトロンビン溶液に
加え、３７０で一定時間振溢し、その上燈液中の残存ト
ロンビン活性を凝固時間により比較したところ、コント
ロールにおける残存トロンビン活性を１００％とすると
、重−ＨＥＰを使用した場合に２０％の残存トロンピン
活性を示す条件下では、１−ＡＴｍの使用では残存トｏ
ンビン活性１０〜２０％、甚一ＡＴｍ−ＨＥＰの使用で
は残存トロンビン活性０．２〜０．７％を示す。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 水不溶性高分子化合物を担体として使用し、これに
ヘパリンとアンチトロンビンIIIをそれらが共存するよ
うに固定化して成る抗血栓性人工医療材料。 ２ 水不溶性高分子化合物がアガロースである第１項の
抗血栓性人工医療材料。 ３ 水不溶性高分子化合物がポリビニルアルコールであ
る第１項の抗血栓性人工医療材料。 ４ 水不溶性高分子化合物がポリヒドロキシエチルメタ
アクリレートである第１項の抗血栓性人工医療材料。 ５ 担体が活性化処理されたものである第１項の抗血栓
性人工医療材料。 ６ 担体が臭化シアンを使用して活性化処理されたもの
である第５項の抗血栓性人工医療材料。 ７ ヘパリンとアンチトロンビンIIIを１：１〜１０：
１（重量比）の割合で固定化する第１項の抗血栓性人工
医療材料。 ８ 担体１ｇに対しヘパリン１〜５０ｍｇとアンチトロ
ンビンIII１〜５０ｍｇを固定化させる第１項の抗血栓
性人工医療材料。
Priority Applications (7)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP52090673A JPS6040859B2 (ja) | 1977-07-27 | 1977-07-27 | 抗血栓性人工医療材料 |
| DE19782832536 DE2832536A1 (de) | 1977-07-27 | 1978-07-25 | Kuenstliches medizinisches material mit gerinnungshemmender wirkung |
| GB787831055A GB2001528B (en) | 1977-07-27 | 1978-07-25 | Artificial medical material with anticoagulative activity |
| US05/927,941 US4213962A (en) | 1977-07-27 | 1978-07-25 | Artificial medical material with anticoagulative activity |
| SE7808161A SE447628B (sv) | 1977-07-27 | 1978-07-26 | Medicinskt material med antikoagulerande aktivitet vilket utgores av berarmaterial varpa heparin och antitrombin iii er samimmobiliserade |
| CA308,217A CA1116087A (en) | 1977-07-27 | 1978-07-26 | Artificial medical material with anticoagulative activity |
| FR7822277A FR2398488A1 (fr) | 1977-07-27 | 1978-07-27 | Matiere artificielle a usage medical douee d'activite anticoagulante |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP52090673A JPS6040859B2 (ja) | 1977-07-27 | 1977-07-27 | 抗血栓性人工医療材料 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5424478A JPS5424478A (en) | 1979-02-23 |
| JPS6040859B2 true JPS6040859B2 (ja) | 1985-09-12 |
Family
ID=14005048
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP52090673A Expired JPS6040859B2 (ja) | 1977-07-27 | 1977-07-27 | 抗血栓性人工医療材料 |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4213962A (ja) |
| JP (1) | JPS6040859B2 (ja) |
| CA (1) | CA1116087A (ja) |
| DE (1) | DE2832536A1 (ja) |
| FR (1) | FR2398488A1 (ja) |
| GB (1) | GB2001528B (ja) |
| SE (1) | SE447628B (ja) |
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| FR2461719A2 (fr) * | 1979-07-20 | 1981-02-06 | Choay Sa | Composition mucopolysaccharidique ayant une activite regulatrice de la coagulation, medicament la contenant et procede pour l'obtenir |
| USRE35770E (en) * | 1978-11-06 | 1998-04-14 | Choay, S.A. | Oligosaccharides having anti-Xa activity and pharmaceutical compositions containing them |
| AT359646B (de) * | 1979-04-19 | 1980-11-25 | Immuno Ag | Verfahren zur herstellung von nebenwirkungs- freien plasmafraktionen |
| FR2472390A1 (fr) * | 1979-05-04 | 1981-07-03 | Merieux Inst | Procede de preparation de concentres de complexe prothrombinique hautement purifies, et concentres obtenus |
| US4826827A (en) * | 1979-10-05 | 1989-05-02 | Choay S.A. | Short chained oligosaccharides having biological properties, a process for making the same and the use thereof as drugs |
| IL61201A (en) * | 1979-10-05 | 1984-09-30 | Choay Sa | Oligosaccharides having no more than 8 saccharide moieties,their obtention from heparin and pharmaceutical compositions containing them |
| DE3170001D1 (en) * | 1980-09-30 | 1985-05-23 | Bayer Ag | Method for the production of an antithrombin-heparin complex and pharmaceutical compositions containing the complex |
| DE3329733A1 (de) * | 1983-08-17 | 1985-03-07 | Johannes Dr.med. 6500 Mainz Reinmüller | Kunststoff-implantat |
| US4689323A (en) * | 1983-09-26 | 1987-08-25 | Miles Laboratories, Inc. | Covalently bound heparin--antithrombin-III complex |
| US4859581A (en) * | 1986-03-10 | 1989-08-22 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Endoglycosidase assay |
| US5182317A (en) * | 1988-06-08 | 1993-01-26 | Cardiopulmonics, Inc. | Multifunctional thrombo-resistant coatings and methods of manufacture |
| US5262451A (en) * | 1988-06-08 | 1993-11-16 | Cardiopulmonics, Inc. | Multifunctional thrombo-resistant coatings and methods of manufacture |
| US5342693A (en) * | 1988-06-08 | 1994-08-30 | Cardiopulmonics, Inc. | Multifunctional thrombo-resistant coating and methods of manufacture |
| US7045585B2 (en) * | 1995-11-30 | 2006-05-16 | Hamilton Civic Hospital Research Development Inc. | Methods of coating a device using anti-thrombin heparin |
| US6562781B1 (en) | 1995-11-30 | 2003-05-13 | Hamilton Civic Hospitals Research Development Inc. | Glycosaminoglycan-antithrombin III/heparin cofactor II conjugates |
| US6491965B1 (en) | 1995-11-30 | 2002-12-10 | Hamilton Civic Hospitals Research Development, Inc. | Medical device comprising glycosaminoglycan-antithrombin III/heparin cofactor II conjugates |
| US6660301B1 (en) * | 1998-03-06 | 2003-12-09 | Biosphere Medical, Inc. | Injectable microspheres for dermal augmentation and tissue bulking |
| WO2001070289A2 (en) | 2000-03-20 | 2001-09-27 | Biosphere Medical, Inc. | Injectable and swellable microspheres for tissue bulking |
| DE102021112467B4 (de) | 2021-05-12 | 2023-03-02 | Technische Universität Hamburg | Synthetisches Thrombusmodell zum Erlernen der operativen Entfernung eines Blutgerinnsels im Rahmen einer Behandlungsnachstellung |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2148011C3 (de) * | 1970-10-05 | 1978-11-09 | Aminkemi Ab | Verfahren zum Herstellen nichtthrombogener Kunststoffoberflächen |
| JPS5515222B2 (ja) * | 1972-08-18 | 1980-04-22 | ||
| FR2294445A1 (fr) * | 1974-12-09 | 1976-07-09 | Rimbaud Marie | Tube a prelevement pour dosage de la glycemie |
| JPS5236779A (en) * | 1975-09-18 | 1977-03-22 | Showa Electric Wire & Cable Co Ltd | Electromagnetic shielding cable |
| US4048064A (en) * | 1976-04-23 | 1977-09-13 | Clark Iii William T | Biocompatible hemoperfusion system |
| US4073723A (en) * | 1976-11-15 | 1978-02-14 | Swank Roy L | Anti-coagulating and filtering blood |
-
1977
- 1977-07-27 JP JP52090673A patent/JPS6040859B2/ja not_active Expired
-
1978
- 1978-07-25 US US05/927,941 patent/US4213962A/en not_active Expired - Lifetime
- 1978-07-25 DE DE19782832536 patent/DE2832536A1/de active Granted
- 1978-07-25 GB GB787831055A patent/GB2001528B/en not_active Expired
- 1978-07-26 SE SE7808161A patent/SE447628B/sv not_active IP Right Cessation
- 1978-07-26 CA CA308,217A patent/CA1116087A/en not_active Expired
- 1978-07-27 FR FR7822277A patent/FR2398488A1/fr active Granted
Also Published As
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| FR2398488A1 (fr) | 1979-02-23 |
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| GB2001528B (en) | 1982-01-06 |
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