JPS60259945A - 細管式等速電気泳動分析用リ−デイング液 - Google Patents

細管式等速電気泳動分析用リ−デイング液

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JPS60259945A
JPS60259945A JP59115788A JP11578884A JPS60259945A JP S60259945 A JPS60259945 A JP S60259945A JP 59115788 A JP59115788 A JP 59115788A JP 11578884 A JP11578884 A JP 11578884A JP S60259945 A JPS60259945 A JP S60259945A
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leading liquid
leading
mobility
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JP59115788A
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Takashi Hine
隆 日根
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Shimadzu Corp
Shimazu Seisakusho KK
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Shimadzu Corp
Shimazu Seisakusho KK
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    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N27/00Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
    • G01N27/26Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
    • G01N27/416Systems
    • G01N27/447Systems using electrophoresis
    • G01N27/44704Details; Accessories
    • G01N27/44747Composition of gel or of carrier mixture

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  • Chemical & Material Sciences (AREA)
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  • Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 イ、技術の利用分野 本発明は、細管式等速電気泳動装置に適したリーディン
グ液に関する。
口、従来技術 細管式等速電気泳動分析は、分離分析の一種で、分析対
象イオンよりも高易動度の同符号イオンを含むリーディ
ングと分析対象イオンよりも低易動度の同符号イオンを
含むターミナル液をキャピラリーチューブ内に界面で接
しさせ、この界面に試料を注入してチューブの両端から
定電流を流すことにより、分析対象イオンをその易動度
の大きさの順に分離させるものである。
ところで、このようにして分離された試料成分は、隣接
する成分のイオン濃度の相違に基づいて相互間で拡散が
生じて分析精度に低下をきたすという問題があり、これ
を解消するため、微小量のモノイソオタティルフェノー
ル(C2H40) 9−鎖やヒドロキシメチルセルロー
ス(HEC)を増粘剤としてリーディング液に添加する
ことが行なわれている。これらの増粘剤は、酸性から中
性領域において機能し、分離されたイオンを明瞭な境界
を持たせつつ検出手段へ移送させ、分析精度の向上を図
ることができる。
しかしながらアルカリ領域では電気浸透流が大きくなり
、分離済みの成分がキャピラリチューブとの間でスリッ
プを起こし、成分相互の境界が不明瞭になって分析の精
度が低下するという問題を依然として抱えていた。
ハ、目的 本発明はこのような問題に鑑み、全ての水素イオン濃度
領域で電気浸透流を抑制することができる新規なリーデ
ィング液を提供することを目的とする。
二1発明の構成 すなわち本発明の特徴とするところは、電解液にヒドロ
キシ拳プロピル・メチルセルロースを微量添加した点に
ある。
ホ、実施例− そこで、以下に本発明の詳細を実施例に基づいて説明す
る。
[実施例1] (a) リーディング液 0.0IMの塩酸とアメジオールを混合したPH8,8
溶液に従来から使用されているヒドロキシ・メチルセル
ロース(HEC)を0.1%混入したもの。
(b)ターミナル液 0.01Mの6−アミノカプロン酸と水酸化バリウムを
混合したP H10,8のもの。
(C)キャピラリチューブ 内径1 mm、長さ40mmのチューブと内径0.5m
m 、長さ150mmのチューブを直列にしたもの。
(d)検出器 電位勾配検出器及び波長254nmの紫外吸光光度計 それぞれ濃度400PPにのアスパラギン酸、シスチン
、アスパラギン、チロシン、グリシン、トリプトファン
、アラニン、及びβ−アラニンを混合してなる低分子試
料を1w文注入し、泳動電流100pAにより分析した
ところ、第1図(A)に示したような結果を得た。
次に、O,OIMの塩酸、アメジオールを混合したPH
8,8の溶液に増粘剤としてヒドロキシ・プロピルメチ
ル・セルロース(HPMC)をO,+[入したものをリ
ーディング液に用い、上述の条件により分析したところ
同図(B)に示したように、従来のリーディング液に比
較して各成分の分画境界が非常に明瞭になった分析結果
を得ることができた。
[実施例2] (a) リーディング液 0.0045MのMESと0.01Mの7メジオールを
混合したP HLl−の溶液に、モノイソオクティルフ
ェノールを0.2%混入したもの。
(b)ターミナル液 0゜OIMの6−アミノカプロン酸、水酸化バリウム、
及び0.01Mの7メジオールを混合したPH10,8
のもの。
(c)キャピラリチューブ 内径1mm、長さ100mmのチューブと、内径0.5
mm長さ250mmのチューブを直列にしたもの。
(d)検出器 波長280nmの紫外吸光光度計 ヒトコントロール血清とアンフオラインを1対3の割合
で混合してなる高分子試料を1.8p文注入し、泳動電
流75.Aにより分析したところ、第2図(A)に示し
たような結果を得た。
次に0.0045MのMESと0.01Mの7メジオー
ルを混合したPH9,1の溶液に増粘剤としてヒドロキ
シ・プロピル・メチルセルロース(HPMC)を0.1
%混入したものを用い、上述した条件により分析を行な
ったところ、同図(B)に示したように立上りが鋭く、
しかも従来法において1つの山として検出されていたも
のが複数のピークに分離された波形として得ることがで
き、従来法に比較して分画の境界がシャープであること
が解った。
次に、ヒドロキシ・プロピルφメチルセルローフ、(H
PMC) の濃度ヲlLソt10.05% 、 0.1
% 。
0.2%、0.4%に変えて血清中のタンパクを分析し
たところ、第3図に示したようにヒドロキシ・プロピル
・メチルセルロースの濃度が0.05% 、 0.1%
0.2zの時には紫外吸光光度計からシャープな信号を
得ることができたが、0.4zになると紫外吸光光度計
からのピークが小さくかつ一体的となり、分離性能が低
下した。このことからヒドロキシ・プロピル・メチルセ
ルロースを0.01〜0.2zの範囲で添加すると、明
瞭な分画が得られることが解った。
さらに、酸性のりディング液にヒドロキシ・プロピル中
メチルセルロースを0.01〜0.2zの範囲で添加し
て分析を行なったところ、アルカリ性のリーディング液
の場合と同様に明瞭な試料分画を示すことを確認した。
なお、このヒドロキシ・プロピル・メチルセルロースは
、細管式等速電気泳動装置のみならず、フリーフロタイ
プの電気泳動装置に用いても電気浸透流を抑制して分画
を明瞭にする効果がある。
へ、効果 以上、説明したように本発明によれば、リーディング液
の増粘剤としてヒドロキシ・プロピル・メチルセルロー
スを用いたので、リーディング液の水素イオン潤度に拘
りなく、低分子から高分子に亘る試料を明瞭な分画をも
って分離分析する°ことができる。
【図面の簡単な説明】
第1図(A)、(B’)は、それぞれ従来のリーディン
グ液と本発明のリーディング液による低分子試料の分析
結果を示す波形図、第2図(A)(B)は、それぞれ従
来のリーディング液と本発明のリーディング液による高
分子試料の分析結果を示す波形図、第3図は、ヒドロキ
シ・プロピル・メチルセルロースの濃度を変えたときの
分析結果を示す波形図である。 出願人 株式会社 島津製作所 代理人 弁理士 西 川 慶 冶 同 木 村 勝 彦 $72 (A) (B) 第2図 (8)

Claims (1)

    【特許請求の範囲】
  1. 分析対象イオンよりも高い易動度の同符号イオンを含む
    電解液に微小量のヒドロキシ・プロピル・メチルセルロ
    ースを添加してなる細管式等速電気泳動分析用リーディ
    ング液。
JP59115788A 1984-06-05 1984-06-05 細管式等速電気泳動分析用リ−デイング液 Granted JPS60259945A (ja)

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JP59115788A JPS60259945A (ja) 1984-06-05 1984-06-05 細管式等速電気泳動分析用リ−デイング液

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JPS60259945A true JPS60259945A (ja) 1985-12-23
JPH0519657B2 JPH0519657B2 (ja) 1993-03-17

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US5096554A (en) * 1989-08-07 1992-03-17 Applied Biosystems, Inc. Nucleic acid fractionation by counter-migration capillary electrophoresis

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