JPS60155120A - Manufacture of blood plasma medicine - Google Patents
Manufacture of blood plasma medicineInfo
- Publication number
- JPS60155120A JPS60155120A JP59208410A JP20841084A JPS60155120A JP S60155120 A JPS60155120 A JP S60155120A JP 59208410 A JP59208410 A JP 59208410A JP 20841084 A JP20841084 A JP 20841084A JP S60155120 A JPS60155120 A JP S60155120A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- factor
- factors
- glycine
- solution
- plasma
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 title description 32
- 239000003814 drug Substances 0.000 title description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title 1
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 34
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims description 19
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 19
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 claims description 18
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 14
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 14
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 14
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 claims description 12
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 claims description 12
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims description 11
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 10
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 claims description 10
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 claims description 10
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 claims description 9
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims description 8
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 claims description 8
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 8
- 108010039209 Blood Coagulation Factors Proteins 0.000 claims description 7
- 102000015081 Blood Coagulation Factors Human genes 0.000 claims description 7
- 239000003114 blood coagulation factor Substances 0.000 claims description 7
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 5
- 150000001447 alkali salts Chemical group 0.000 claims description 3
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 claims description 3
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 claims description 3
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 claims description 3
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 claims description 3
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 2
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 2
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 claims description 2
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 claims description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 claims description 2
- 239000004474 valine Substances 0.000 claims description 2
- UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N beta-alanine Chemical compound NCCC(O)=O UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- UOCLXMDMGBRAIB-UHFFFAOYSA-N 1,1,1-trichloroethane Chemical compound CC(Cl)(Cl)Cl UOCLXMDMGBRAIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- WYMDDFRYORANCC-UHFFFAOYSA-N 2-[[3-[bis(carboxymethyl)amino]-2-hydroxypropyl]-(carboxymethyl)amino]acetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CC(O)CN(CC(O)=O)CC(O)=O WYMDDFRYORANCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 102000004411 Antithrombin III Human genes 0.000 claims 1
- 108090000935 Antithrombin III Proteins 0.000 claims 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 claims 1
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 1
- 229940124277 aminobutyric acid Drugs 0.000 claims 1
- 229960005348 antithrombin iii Drugs 0.000 claims 1
- 229940000635 beta-alanine Drugs 0.000 claims 1
- 239000013522 chelant Substances 0.000 claims 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 claims 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 claims 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 claims 1
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 claims 1
- 235000015067 sauces Nutrition 0.000 claims 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 claims 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 34
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 21
- 108010014173 Factor X Proteins 0.000 description 20
- 108010094028 Prothrombin Proteins 0.000 description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 10
- 239000004019 antithrombin Substances 0.000 description 9
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 8
- 102100027378 Prothrombin Human genes 0.000 description 8
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 8
- 229940039716 prothrombin Drugs 0.000 description 8
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 7
- 206010053567 Coagulopathies Diseases 0.000 description 6
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 6
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 6
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 6
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 6
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 6
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 5
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 5
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 4
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 4
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 4
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 4
- 230000035602 clotting Effects 0.000 description 4
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 4
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 4
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 4
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 3
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 3
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 3
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 3
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M cobalt(2+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(1r,2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2 Chemical compound [Co+2].N#[C-].[N-]([C@@H]1[C@H](CC(N)=O)[C@@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP(O)(=O)O[C@H]3[C@H]([C@H](O[C@@H]3CO)N3C4=CC(C)=C(C)C=C4N=C3)O)\C2=C(C)/C([C@H](C\2(C)C)CCC(N)=O)=N/C/2=C\C([C@H]([C@@]/2(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C(C)/C2=N[C@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@@H]2CCC(N)=O AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M 0.000 description 3
- 238000009928 pasteurization Methods 0.000 description 3
- 230000003169 placental effect Effects 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- PGOHTUIFYSHAQG-LJSDBVFPSA-N (2S)-6-amino-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-4-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-1-[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-1-[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]propanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]acetyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-sulfanylpropanoyl]amino]-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-4-carboxybutanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]hexanoic acid Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](Cc1cnc[nH]1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O PGOHTUIFYSHAQG-LJSDBVFPSA-N 0.000 description 2
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- 108010000499 Thromboplastin Proteins 0.000 description 2
- 102000002262 Thromboplastin Human genes 0.000 description 2
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 2
- 150000001242 acetic acid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 208000015294 blood coagulation disease Diseases 0.000 description 2
- 150000003841 chloride salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 2
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 2
- OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N (+/-)-DABA Natural products NCCC(N)C(O)=O OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GHPYJLCQYMAXGG-WCCKRBBISA-N (2R)-2-amino-3-(2-boronoethylsulfanyl)propanoic acid hydrochloride Chemical compound Cl.N[C@@H](CSCCB(O)O)C(O)=O GHPYJLCQYMAXGG-WCCKRBBISA-N 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- -1 1-20 mmol/l of EiDTA Chemical compound 0.000 description 1
- ZSLUVFAKFWKJRC-IGMARMGPSA-N 232Th Chemical compound [232Th] ZSLUVFAKFWKJRC-IGMARMGPSA-N 0.000 description 1
- 229910002012 Aerosil® Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 208000000412 Avitaminosis Diseases 0.000 description 1
- 208000027205 Congenital disease Diseases 0.000 description 1
- 208000029767 Congenital, Hereditary, and Neonatal Diseases and Abnormalities Diseases 0.000 description 1
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical compound C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 208000004221 Multiple Trauma Diseases 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052776 Thorium Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000679125 Thoron Species 0.000 description 1
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 206010047627 Vitamin deficiencies Diseases 0.000 description 1
- MKBUQYWFFBCMFG-UHFFFAOYSA-N acetic acid propane-1,1-diamine Chemical compound CC(O)=O.CC(O)=O.CC(O)=O.CC(O)=O.CCC(N)N MKBUQYWFFBCMFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003916 acid precipitation Methods 0.000 description 1
- 208000037919 acquired disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 229940019700 blood coagulation factors Drugs 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 239000011362 coarse particle Substances 0.000 description 1
- 230000002016 colloidosmotic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- DCSRPHQBFSYJNN-UHFFFAOYSA-L disodium 4-[(2-arsonophenyl)diazenyl]-3-hydroxynaphthalene-2,7-disulfonate Chemical compound [Na+].[Na+].Oc1c(N=Nc2ccccc2[As](O)(O)=O)c2ccc(cc2cc1S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O DCSRPHQBFSYJNN-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N dl-hydroxyproline Natural products OC1C[NH2+]C(C([O-])=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 239000004023 fresh frozen plasma Substances 0.000 description 1
- 229960003692 gamma aminobutyric acid Drugs 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000009429 hemophilia B Diseases 0.000 description 1
- 229960002591 hydroxyproline Drugs 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 1
- MGFYIUFZLHCRTH-UHFFFAOYSA-N nitrilotriacetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CC(O)=O MGFYIUFZLHCRTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940127216 oral anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N trans-L-hydroxy-proline Natural products ON1CCCC1C(O)=O FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 1
- HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K trisodium citrate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940038773 trisodium citrate Drugs 0.000 description 1
- 238000005199 ultracentrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 238000010792 warming Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- E—FIXED CONSTRUCTIONS
- E21—EARTH OR ROCK DRILLING; MINING
- E21B—EARTH OR ROCK DRILLING; OBTAINING OIL, GAS, WATER, SOLUBLE OR MELTABLE MATERIALS OR A SLURRY OF MINERALS FROM WELLS
- E21B17/00—Drilling rods or pipes; Flexible drill strings; Kellies; Drill collars; Sucker rods; Cables; Casings; Tubings
- E21B17/02—Couplings; joints
- E21B17/04—Couplings; joints between rod or the like and bit or between rod and rod or the like
- E21B17/07—Telescoping joints for varying drill string lengths; Shock absorbers
-
- E—FIXED CONSTRUCTIONS
- E21—EARTH OR ROCK DRILLING; MINING
- E21B—EARTH OR ROCK DRILLING; OBTAINING OIL, GAS, WATER, SOLUBLE OR MELTABLE MATERIALS OR A SLURRY OF MINERALS FROM WELLS
- E21B10/00—Drill bits
- E21B10/36—Percussion drill bits
- E21B10/40—Percussion drill bits with leading portion
-
- E—FIXED CONSTRUCTIONS
- E21—EARTH OR ROCK DRILLING; MINING
- E21B—EARTH OR ROCK DRILLING; OBTAINING OIL, GAS, WATER, SOLUBLE OR MELTABLE MATERIALS OR A SLURRY OF MINERALS FROM WELLS
- E21B10/00—Drill bits
- E21B10/64—Drill bits characterised by the whole or part thereof being insertable into or removable from the borehole without withdrawing the drilling pipe
-
- E—FIXED CONSTRUCTIONS
- E21—EARTH OR ROCK DRILLING; MINING
- E21B—EARTH OR ROCK DRILLING; OBTAINING OIL, GAS, WATER, SOLUBLE OR MELTABLE MATERIALS OR A SLURRY OF MINERALS FROM WELLS
- E21B19/00—Handling rods, casings, tubes or the like outside the borehole, e.g. in the derrick; Apparatus for feeding the rods or cables
- E21B19/24—Guiding or centralising devices for drilling rods or pipes
-
- E—FIXED CONSTRUCTIONS
- E21—EARTH OR ROCK DRILLING; MINING
- E21B—EARTH OR ROCK DRILLING; OBTAINING OIL, GAS, WATER, SOLUBLE OR MELTABLE MATERIALS OR A SLURRY OF MINERALS FROM WELLS
- E21B7/00—Special methods or apparatus for drilling
- E21B7/28—Enlarging drilled holes, e.g. by counterboring
Landscapes
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Geology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Mining & Mineral Resources (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Environmental & Geological Engineering (AREA)
- Fluid Mechanics (AREA)
- General Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Geochemistry & Mineralogy (AREA)
- Mechanical Engineering (AREA)
- Apparatus For Disinfection Or Sterilisation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Earth Drilling (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。(57) [Summary] This bulletin contains application data before electronic filing, so abstract data is not recorded.
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は安定剤の存在下に加温することによる活性ウィ
ルスを実際上含まない血漿製剤またはかかるウィルスを
実際上含まない血液凝固第■、第■、第■および第X因
子の濃縮物の製法ならびにそれによシ調製されたこれら
因子の製剤に関する。かかる製剤は血液凝固障害の治療
に使用されうる。DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION The present invention relates to the preparation of plasma preparations substantially free of active virus or blood coagulation products substantially free of such viruses by warming in the presence of stabilizers. The present invention relates to a method for preparing concentrates of factor X and to formulations of these factors prepared thereby. Such formulations may be used in the treatment of blood coagulation disorders.
血液凝固は種々の生理学的および病理学的原因によシ惹
起される複雑な、段階的に推移する過程であり、そして
その経過は約20種類の促進性または抑制性因子に依存
している。これら血液凝固因子の減少または増大によ9
血液凝固障害が生じ、それらの幾らかは疾患として現わ
れる。Blood coagulation is a complex, stepwise process triggered by a variety of physiological and pathological causes, and its course is dependent on about 20 promotive or inhibitory factors. Due to a decrease or increase in these blood clotting factors9
Blood clotting disorders occur, some of which manifest as diseases.
第■、第■、第■および第X因子の濃縮物はこれら因子
の種々の先天的または後天的合成障害の治療に適当であ
る。これら因子の濃縮物を用いる患者の治療はこれまで
ウィルス感染そして特に肝炎感染の危険と結びついてい
た。Concentrates of Factors II, II, II and X are suitable for the treatment of various congenital or acquired disorders of synthesis of these factors. Treatment of patients with concentrates of these factors has hitherto been associated with the risk of viral infections and, in particular, hepatitis infections.
アルブミンはもしそれが水溶液中でそして安定剤の存在
下に60℃に加熱された場合は肝炎の危険がない( G
ellis, S.S.氏他のJ. Clin。Albumin poses no risk of hepatitis if it is heated to 60°C in aqueous solution and in the presence of stabilizers (G
ellis, S. S. J. et al. Clin.
Invest.第27巻第239頁+1948年》参照
》。Invest. See Vol. 27, p. 239 + 1948.
従って適当な安定剤の存在下に加熱された第■、■、■
およびX因子の濃縮物も同様に肝炎の危険がないと仮定
される。Therefore, No. 1, No. 2, No.
and concentrates of factor X are also assumed to be free of hepatitis risk.
西ドイツ特許公開公報29 16 711号にはアミノ
酸および単糖類または寡糖類または糖アルコールの添加
により水溶液中の他の凝固因子を熱に対して安定化させ
る方法が記載されている。DE 29 16 711 describes a method for stabilizing other coagulation factors in aqueous solutions against heat by adding amino acids and mono- or oligosaccharides or sugar alcohols.
しかしながらこの方法では第■、■、■およびX因子が
加熱に際して大部分不活性化されることを阻止できない
。それゆえ第■および第■因子がキレート形成剤によj
D (DE 30 45 857 A1)および第■お
よび第X因子がカルシウムによシCDB 50 45
153 AI)水溶液中において熱による不活性化から
保護されるという観察は一りの進歩であった。しかしな
がらこの両方法共に、所望されるように、1操作工程で
4種全部の因子の製剤を調製できない。何故ならビタミ
ンに欠乏の場合または経口による抗凝固剤を用いる治療
の下では4種全部の因子が減少しそしてそれゆえ同時に
置換されねばならないからである。However, this method cannot prevent most of factors ①, ②, ② and X from being inactivated upon heating. Therefore, factor ■ and factor
D (DE 30 45 857 A1) and factors II and
The observation that 153 AI) is protected from thermal inactivation in aqueous solution was an advance. However, both methods do not allow preparation of all four factors in one operational step, as desired. This is because in the case of vitamin deficiencies or under treatment with oral anticoagulants, all four factors are reduced and therefore have to be replaced simultaneously.
それゆえ、第■、■、■およびX因子を含有する水溶液
を熱による不活性化に対して安定化する方法を見出すと
いう課題があった。Therefore, the problem was to find a way to stabilize aqueous solutions containing factors ①, ②, ② and X against thermal inactivation.
今驚くべきことに、全4種の第■、■、■およびX因子
を含有する水溶液がカルシウムイオンおよびキレート形
成剤の添加により熱処理による不利な結果に対して保護
されうろことが見出された。第■および第■因子の活性
化を阻止するために場合によ9アンチトロンビン(AT
)IIIおよびヘパリンが添加されうる。従ってこれら
4種の因子を活性ウイルス含ます1操作工程で高純度お
よび高収量にて調製する前提条件が与えられた。It has now surprisingly been found that aqueous solutions containing all four factors 1, 2, 2 and X can be protected against the adverse effects of heat treatment by the addition of calcium ions and chelating agents. . Optionally 9-antithrombin (AT) to prevent activation of factor II and factor II.
) III and heparin can be added. Therefore, the prerequisites were given to prepare these four factors with high purity and high yield in one operational step containing active virus.
キレート形成剤は既に存在するクエン酸塩に付加して添
加される。The chelating agent is added in addition to the citrate already present.
たとえDg 3043857号によればキレート形成剤
が筒用および第■因子の保護に好都合であり、−力筒■
および第X因子に対する同じ目的にとってカルシウムイ
オンが使用され(DE 3045153 ”。For example, according to Dg 3043857, chelating agents are advantageous for the protection of factors and factor
and calcium ions are used for the same purpose for factor X (DE 3045153 ”).
号)、そしてキレート形成剤はカルシウムイオンとも複
合体を形成するとしてもカルシウムイオンおよびキレー
ト形成剤の混合−が加温による活性損失に対し第川、■
、■およびX因子すべてに所望される保護作用を及を讐
すことは驚くべきことである。それゆえキレート形成剤
またはカルシウムイオンが過剰に存在するか否かkより
、それぞれ2種類の相当する因子のみが熱による崩壊に
対し保護される筈で、4種類全部゛ではなかった。(No.), and even though the chelate-forming agent also forms a complex with calcium ions, the mixture of calcium ions and the chelate-forming agent is effective against loss of activity due to heating.
It is surprising that factors 1, 2 and X all fail to exert the desired protective effect. Therefore, depending on whether chelating agents or calcium ions are present in excess, only two corresponding factors each should be protected against thermal degradation, but not all four.
それゆえ本発明は水溶液を場合によりアミノ酸および/
または糖類または糖アルコールの存在下に加温すること
により実際上ウィルスを含まず且つ肝炎の危険のない血
液凝固第■、第■、第■および第X因子の製剤を調製す
るに当り、カルシウムイオンおよびキレート形成剤およ
び、場合ニよりアンチトロンビン■および/またはヘパ
リンの存在下に加温することを特徴とする方法に関する
。Therefore, the present invention provides an aqueous solution that optionally contains amino acids and/or amino acids.
or calcium ions in the preparation of preparations of blood coagulation factors Ⅰ, Ⅲ, ③ and and a method characterized by heating in the presence of a chelating agent and, optionally, antithrombin (2) and/or heparin.
かかる溶液はこれら因子を含有する溶液またはこれらを
含有する濃縮物ならびに血漿または血漿フラクションま
たは胎盤フ2クションでありうる。Such solutions can be solutions containing these factors or concentrates containing them as well as plasma or plasma fractions or placental fractions.
カルシウムイオンの至適浸度は1〜50ミリモル/を好
ましくは25〜50ミリモル/lであ1日
る。The optimum immersion rate of calcium ions is 1 to 50 mmol/l, preferably 25 to 50 mmol/l, per day.
適当なカルシウムイオン産生性の塩は例えば塩化物、酢
酸塩または硝酸塩ならびに、グル;ン酸またはラクトン
酸のよ、うな糖酸のすべての水溶性カルシウム塩である
。塩化物および酢酸塩の使用が好ましい。 ・・
適当なキレート形成剤は例えば、エチレンジ、アミン四
酢酸(BDTA) 、エチレングリコール、−ビ。Suitable calcium ion-producing salts are, for example, all water-soluble calcium salts of sugar acids, such as the chlorides, acetates or nitrates, as well as gluconic or lactonic acids. Preference is given to using chlorides and acetates. Suitable chelating agents are, for example, ethylenediaminetetraacetic acid (BDTA), ethylene glycol, -bi.
スー(2−アはノエテルエーテル]−四酢酸、::。Sue(2-a is noether ether)-tetraacetic acid, ::.
(E()TA)、ジアミノシクロヘキサン−四帥−(C
DTA)、ジアミ゛ノプロパンー四酢酸またはニトリロ
トリ酢酸および特にそれらの可溶性アルカリ塩である。(E()TA), diaminocyclohexane-4-(C
DTA), diaminopropane-tetraacetic acid or nitrilotriacetic acid and especially their soluble alkali salts.
6〜20個の炭素原子および1または2個の窒素原子を
有する脂肪族アザ−トリーまたは一テトラーカルボン酸
お、よびそ、れらの可、溶性アルカリ塩そして特にエチ
ンンジアミン四酢@ (肩、qまたはエチレングリー−
ルー、ビス−(2−アζノーエチベエーテル〕−四酢酸
(EGTA )、のす、トリウム、塩が使用され、る、
のが好ま、しい。、キレ、、−ト。Aliphatic azatri- or monotetracarboxylic acids having 6 to 20 carbon atoms and 1 or 2 nitrogen atoms and their possible, soluble alkali salts and especially ethynediaminetetraacetic acid @ ( shoulder, q or ethylene green
Ru, bis-(2-azeta-no-ethybeether)-tetraacetic acid (EGTA), thorium, salt are used.
I like it. , sharp,,-to.
形、成、剤の、至・、適、濃度a1.〜20ミリモル、
/、tそし −て好、まし、ぐ抹・5ミ1リモ、ル/1
である。 、、。Form, formation, agent, optimum concentration a1. ~20 mmol,
/, tsoshi -teko, mashi, gumak・5mi1rimo,ru/1
It is. ,,.
25ミリモルフt、、のカルシウ、、ムとトミリ汚1ル
/l Q ID’I!Aの混合、物が特に、、、適当で
あることが判明し、た。 、: ・、、。25 mmolpht,, Calciu,, mu and tomiri dirt 1 l/l Q ID'I! A mixture of A was found to be particularly suitable. , : ・,,.
、、アン、チト町、ンビン11I′i、1.−の1ク工
ン酸庫混合。, ,An, Tito Town, Nbin 11I′i, 1. - 1 liter of acid storage mixture.
血漿の活性(1単位(ロ))に、基、づき、0.0空〜
2U/dの・、濃度で、年月されそ1!て0,5〜20
U8P 7 U/−の濃度のヘパリンと、−緒、好まし
く、は2. USP −Uのへ・15.リン、ど、−緒
の・α2.U、のアンチ都ロンビン。Based on plasma activity (1 unit (b)), 0.0 empty ~
At a concentration of 2U/d, it's been 1 year! Te 0,5~20
Heparin at a concentration of U8P7 U/-, preferably 2. USP-U-15. Rin, do, -Ono・α2. Longbin, the anti-city of U.
厘が、使用される。Ling is used.
カルシ、クムイオン、およびキレート形成剤お半び場合
によシ、アイチト、、C!ンビン■−ヘバリン複合物、
の存在、下、、に、凝固因子の水溶ahつニイルら、お
よび特定の肝炎病原体の感染が今日の知誠水準によれば
実際上排除されるまで加熱されうる。Calcium, cum ions, and chelating agents, and in some cases, Aichito, C! Nbin ■ - hebarin complex,
In the presence of water soluble coagulation factors, and infection with certain hepatitis pathogens, it can be heated until it is virtually eliminated according to today's standards of wisdom.
このことは低温殺菌が吸着法および沈殿法と組み合わさ
れた場合に価値があり、その場合作用物質は上澄み液中
に残留しそして肝炎ウィルスは不溶の沈殿と一緒に分離
されうる。少なくとも10時間約60℃で水溶液中に保
持された製剤は特にヒトの組織液体から出発した場合は
実際上肝炎の危険がないとみなされ、そこでは第三世代
の試験によ井ば肝炎ウィルスは検出され得ない。This is of value when pasteurization is combined with adsorption and precipitation methods, in which case the active substance remains in the supernatant and the hepatitis virus can be separated out together with the insoluble precipitate. Preparations kept in aqueous solution at about 60°C for at least 10 hours are considered virtually free of hepatitis risk, especially when starting from human tissue fluids, in which third-generation tests have shown that the Ibaraki hepatitis virus Cannot be detected.
本発明の特に好ましい実施形態は、全4種の因子を含有
する溶液好ましくは血漿または血漿フラクションまたは
胎盤クラクションに0.2〜2 U/m/のアンチトロ
ンビン■、2〜20 UEIP−則一のヘパリン、25
〜50ミリモルフtのカルシウムイオン、1〜20ミリ
モル/lのEiDTA 、 グリシン、α−またLβ−
アラニン、リジン、ロイシン、バリン、アスパラギン、
セリン、ヒドロキシプロリン、プロリン、グルタミン、
α−1β−またはγ−アミノ酪酸、好ましくはグリシン
の少くとも1種類のアミノ酸1〜3モル/l、および溶
液1ooy当920〜6011の単糖類または寡糖類ま
たは糖アルコール、好ましくは1〜3モル/lのグリシ
ンおよび溶液10011当り20〜609の蔗糖を加え
、30〜100℃好ましくは60〜1゛叶0℃に加熱し
そして1分〜48時間好ましくは8〜12時間この温度
に保持することを特徴とし、その際最短時間と最高温度
が組み合わされ逆もまた然りである。A particularly preferred embodiment of the invention is a solution containing all four factors, preferably 0.2 to 2 U/m/m of antithrombin, 2 to 20 UEIP, in the plasma or plasma fraction or placental horn. heparin, 25
~50 mmol/l of calcium ions, 1-20 mmol/l of EiDTA, glycine, α- and Lβ-
Alanine, lysine, leucine, valine, asparagine,
serine, hydroxyproline, proline, glutamine,
1 to 3 mol/l of at least one amino acid, α-1β- or γ-aminobutyric acid, preferably glycine, and 920 to 6011 monosaccharides or oligosaccharides or sugar alcohols, preferably 1 to 3 mol per 1ooy of solution. /l glycine and 20-609 parts sucrose per 10011 solution, heated to 30-100°C, preferably 60-1°C and 0°C and kept at this temperature for 1 minute to 48 hours, preferably 8-12 hours. , where the shortest time and highest temperature are combined and vice versa.
pHは6シ8に保持される。この方法で実際上フィルス
を含まない第■、■、■およびX因子の製剤が得られる
。The pH is maintained at 6-8. In this way virtually fils-free formulations of Factors I, II, II and X are obtained.
カルシウム塩、アミノ酸または炭水化物の溶解度の如何
により、カルシウム塩、アミノ酸または炭水化物が所望
の温度で相当してよシ高い溶解度を有する場合は相当す
る0、3および3.0モル/lおよび61+/100&
なる濃度はより高い濃度に拡大されうる。温度処理は数
回の順次段階で実施されることもできる。Depending on the solubility of the calcium salt, amino acid or carbohydrate, the corresponding 0, 3 and 3.0 mol/l and 61+/100 & if the calcium salt, amino acid or carbohydrate has a correspondingly higher solubility at the desired temperature.
The concentration can be scaled up to higher concentrations. The temperature treatment can also be carried out in several sequential steps.
アンチトロンビン■、ヘパリン、塩化カルシウムおよび
EDTAとグリシンおよび蔗糖との好ましく用いられる
組み合せを用い加熱により肝炎の危険のない製剤が得ら
れる。By heating with antithrombin, heparin, calcium chloride and the preferably used combination of EDTA with glycine and sucrose, a preparation is obtained without the risk of hepatitis.
第■、■、■およびX因子を天然のそしズ活性な形態で
含有するウィルス不含の血漿を得るた゛めには血漿にキ
レート形成剤の混合物好ましく4−1EDTA濃II
5ミリモル/lおよび塩化カルシウム濃度25ミリモル
/!で存在するEDTAおよびカルシウムイオンの混合
物を加えそして蔗糖(60II/100.9 )−グリ
シン(2モル/1)混合物中で60℃に加温しそし゛て
この温度で10時間保持する。In order to obtain a virus-free plasma containing Factors 1, 2, 3 and
5 mmol/l and calcium chloride concentration 25 mmol/! A mixture of EDTA and calcium ions present at 100° C. is added and warmed to 60° C. in a sucrose (60II/100.9)-glycine (2 mol/1) mixture and kept at this temperature for 10 hours.
第■、■、■およびX因子の天然のそして活性な濃縮物
を得るためには、血漿フラクションまたは胎盤フラクシ
ョン、合目的々には安定化すべき因子が濃縮されたフラ
クションにキレート形成剤の混合物好ましくは5ミリモ
ル/lのTMAおよび25ミリモル/lの塩化カルシウ
ムなる濃度割合におけるEDTAおよびカルシウムイオ
ンの混合物を加える。好ましくは0.20/−のアンチ
トロンビン■および好ましくは2 USP −U/dの
ヘパリ/を添加したのち蔗糖(60g/100.9)−
グリシン(2モル/1)混合物中60℃に加温しそして
この温度で10時、間保持する。In order to obtain natural and active concentrates of factors 1, 2, 2 and Add a mixture of EDTA and calcium ions in a concentration ratio of 5 mmol/l TMA and 25 mmol/l calcium chloride. Preferably 0.20/- of antithrombin ■ and preferably 2 USP-U/d of hepari/, followed by sucrose (60 g/100.9)-
Warm to 60° C. in a glycine (2 mol/1) mixture and hold at this temperature for 10 hours.
かかるフラクションは例えば8oulier氏他のTh
rom’bosis Diath、 Haemorrh
、 8upp1.第35巻第61頁(1969年)記載
の方法により得られる。Such fractions are described, for example, by 8oulier et al.
rom'bosis Death, Haemorrh
, 8upp1. Obtained by the method described in Vol. 35, p. 61 (1969).
これにはα01モル/l (D EDTkで血液凝固阻
止した血液から得られる血漿を燐酸カルシウムに吸着さ
せそして遠心分離する。その際因子は定量的に吸着剤に
結合されそして0.2モル/lのクエン酸トリナトリウ
ムを用いて数回溶離することにより単離されうる。合一
した溶出液を一8℃〜+4℃でアルコール沈殿および酢
酸沈殿の組み合せによりさらに精製する。その場合因子
は同時に濃縮される。For this, α01 mol/l (D) Plasma obtained from blood anticoagulated with EDTk is adsorbed on calcium phosphate and centrifuged. The factor is quantitatively bound to the adsorbent and 0.2 mol/l The combined eluates are further purified by a combination of alcohol and acetic acid precipitation at -8°C to +4°C, in which case the factor is simultaneously concentrated. be done.
この濃縮物を適当な緩衝液好ましくはp)17.5を有
するそれぞれ0.06および0.02モル/lの食塩/
クエン酸ナトリウム中にとる。This concentrate is added to a suitable buffer, preferably p) 0.06 and 0.02 mol/l NaCl/L with p) 17.5, respectively.
Take in sodium citrate.
加熱された溶液からの凝固因子の回収および精製は30
〜45%飽和での硫酸アンモニウムを用いる沈殿、0.
4〜1.9/100−の燐酸カタシウムへの上澄み液の
吸着および溶離により達成されうる。Recovery and purification of coagulation factors from heated solutions
Precipitation with ammonium sulfate at ~45% saturation, 0.
This can be achieved by adsorption and elution of the supernatant on catasium phosphate of 4 to 1.9/100.
第■、■、■およびX因子を談′縮および精轡するため
の措置の監視は専門家にとって当該物質の測定法の知識
により周知である。これらの監視法を用い操作条件は生
成物の満足できる収量 よおよび満足できる純度の見地
から制御されうる。The monitoring of measures for reducing and elucidating factors ①, ②, ② and Using these monitoring methods, operating conditions can be controlled with a view to satisfactory yield and purity of product.
第■因子は例えばKoller、 F氏他のDtsch
。Factor Ⅰ is, for example, the Dtsch method of Koller, F. et al.
.
med、 Wschr、第81巻第516頁(1956
年)記載の方法により測定されうる。これには第■因子
欠乏血漿1部例えば0.1−および希釈した正常血漿1
部を混合する。この混合物を37℃で30秒間保持する
。次にカルシウム含有トロンボプラスチン例えば西ドイ
ツ特許第2356495号の記載に従い調製されたもの
2部を加え、そして凝血塊が出現するまでに経過する時
、間を測定する。定量的に測定するには第■因子を含有
する溶液から得られる凝固時間を正常血漿希釈系列を用
いて得られた検定曲線に基づき読みとる。med, Wschr, Vol. 81, p. 516 (1956
year) can be measured by the method described. This includes 1 part of factor II-deficient plasma, e.g. 1 part of diluted normal plasma.
Mix parts. This mixture is held at 37°C for 30 seconds. Two parts of calcium-containing thromboplastin, for example prepared as described in German Pat. No. 2,356,495, are then added and the time elapsed until a clot appears is determined. For quantitative measurement, the clotting time obtained from a solution containing factor (I) is read based on a calibration curve obtained using a normal plasma dilution series.
第■因子1単位鉱正常血漿1−の第[因子、活性に相当
する。Factor 1 corresponds to the activity of 1 unit of factor 1 in normal plasma.
第■因子は例えばKoller、 F氏他のActah
aemat、第6巻第1頁(1951年)記載の方法に
よシ測定されうる。これに紘第■因子、欠乏血漿1部例
えば0.1−および希釈した。正常・血漿1部を混合す
る。この混合物を67℃で30秒間保持する。次にカル
シウム含有・トロンポプラ、lXチン例えば西ドイツ特
許第2556493号の記載に従い調製され喪もの2部
゛を加え、そして凝血塊が出現するまでに経、遇する・
時間を測定する。一定量的に測定するには第■因子を含
有する溶液から得られる凝固時間を正常血漿希釈系列を
用いて得られた検定曲線に基づき読みとる。Factor Ⅰ is, for example, Actah of Koller, F. et al.
aemat, Vol. 6, p. 1 (1951). To this was diluted 1 part of Ko factor I, deficient plasma, for example 0.1-. Mix 1 part of normal plasma. This mixture is held at 67°C for 30 seconds. Next, two parts of a calcium-containing Trompoplar, lXtin, prepared as described in West German Patent No. 2,556,493, are added, and the mixture is allowed to stand until the appearance of clots.
Measure time. For constant quantitative measurement, the clotting time obtained from a solution containing factor (I) is read based on a calibration curve obtained using a normal plasma dilution series.
第■因子1単位は正常面*1−の第■因子活性に相当す
る。One unit of factor Ⅰ corresponds to the factor Ⅰ activity of the normal level*1-.
第X因子の測定は例えば下記の方法に従い遂行される。Measurement of factor X is carried out, for example, according to the following method.
例え、、、ばDB−A苧2316450号の記載に従い
調製された部分、トロン・ギブラスチン1.部、例えば
0.1d’i第1K因・・子欠乏血漿1・部および希釈
された正 ゛1常血漿1部と混合する。この混合物を3
7℃で6分1間保持する・。、予め、37℃に加温され
た0、025モルの・塩化カルシウム溶液1部を・、添
加したのち塩化カルシウム溶液、の、添加か、ら・凝血
塊や出、現8までに経過した時間を測定する。定量的に
測牟するには第X因子を含有すする溶液から得られ、、
る凝・置時間を、正、常血漿希釈系列を用いて得られた
検定1線に基、、づき読今どる。For example, the part prepared as described in DB-A 苧2316450, thoron giblastin 1. 1 part, for example, 0.1 d'i factor 1 K-deficient plasma and 1 part diluted normal plasma. Add this mixture to 3
Hold at 7°C for 6 minutes and 1 minute. After adding 1 part of 0.025 molar calcium chloride solution pre-warmed to 37°C, the time elapsed from the addition of the calcium chloride solution to the appearance of clots. Measure. For quantitative measurement, factor X can be obtained from a sipping solution containing
The clotting and incubation times are based on the assay line 1 obtained using a normal plasma dilution series.
第■、因子51国踪単位4(閘1!■)は正常血漿11
1!7!の・第■、因子・、活性に・相当、す・る。Number ■, factor 51 country missing unit 4 (lock 1! ■) is normal plasma 11
1!7! The second factor is equivalent to the activity of the factor.
・ 第X因子は例えばDuclcert氏他の、 BL
oo、dCoagulation、 )Iemorrh
age and Thrombosi、4゜’Toca
ntipql L、、M、、および、、ICaza14
、L、A、編、(1,964)記載の方法により測定
されうる。これには第X因子欠乏血漿1部例えば0.1
−および希釈した正常血漿1部を混合する。この混合物
を67℃で30秒間保持する。次にカルシウム含有トロ
ンボプラスチン例えば西ドイツ特許第2356493号
の記載に従い調製されたもの2部を加え、そして凝血腕
が出現するまでに経過する時間を測定する。定量的に測
定するには第X因子を含有する溶液から得られる凝固時
間を正常血漿希釈系列を用いて得られた検定曲線に基づ
き読みとる。第X因子1単位は正常血漿1−の第X因子
活性に相当する。- Factor X is described, for example, by Duclcert et al., BL
oo, dCoagulation, )Iemorrh
age and Thrombosi, 4゜'Toca
ntipql L, ,M, and ,ICaza14
, L.A., ed., (1,964). This includes 1 part of factor X-deficient plasma, e.g. 0.1
- and 1 part diluted normal plasma are mixed. This mixture is held at 67°C for 30 seconds. Two parts of calcium-containing thromboplastin, for example prepared as described in DE 23 56 493, are then added and the time elapsed until the clot arms appear is determined. For quantitative determination, the clotting time obtained from a solution containing factor X is read based on a calibration curve obtained using a normal plasma dilution series. One unit of factor X corresponds to one unit of factor X activity in normal plasma.
肝炎ウィルスを殺すには溶液にカルシウムイオン、ED
TA、グリシンおよび蔗糖および場合によリアンチトロ
ンビン■およびヘパリンを加えそして加熱する。Calcium ions, ED in solution to kill hepatitis virus
Add TA, glycine and sucrose and optionally lianthithrombin and heparin and heat.
蔗糖(60#/100ji)およびグリシン(2モル/
1)を添加しそして25ミリモル/lの塩化カルシウム
ならびに5ミリモル/lのEDTAの存在下にヒト血漿
を低温殺菌(60℃、10時間)したのち用いられた血
漿に基づき下記の活性が見出された。すなわち第X因子
80%、第X因子80%、第X因子86チおよび第X因
子80%。Sucrose (60#/100ji) and glycine (2mol/
1) and pasteurization (60°C, 10 hours) of human plasma in the presence of 25 mmol/l calcium chloride and 5 mmol/l EDTA, the following activity was found based on the plasma used: It was done. namely factor X 80%, factor X 80%, factor X 86chi and factor X 80%.
加熱に際して血漿フラクションまたは胎盤フラクション
中にそれぞれのプロトロンビン因子の活性を得るのに対
する種々の安定剤の影響を第1表に示す。蔗糖およびグ
リシン単独を用いる低温殺菌では第X因子の収量が悪い
。しかしながらこのことは非常に不利である。何故なら
プロトロンビン濃縮物は主にB型血友病の治療に用いら
れるからである。キレート形成剤を用いずに6.25ミ
リモル/lの濃度のカルシウムイオンを付々口的に使用
すると第■因子および第X因子の活性化を生じそして第
…因子と第X因子の収量も減少させる。かかる製剤は血
栓症の危険がちυうるので人間への使用には適さない。The influence of various stabilizers on obtaining the activity of the respective prothrombin factor in the plasma or placental fraction upon heating is shown in Table 1. Pasteurization using sucrose and glycine alone yields poor factor X yields. However, this is very disadvantageous. This is because prothrombin concentrate is mainly used for the treatment of hemophilia type B. Concomitant use of calcium ions at a concentration of 6.25 mmol/l without chelating agents resulted in activation of factors II and X and also decreased the yield of factors II and X. let Such formulations are not suitable for human use because of the risk of thrombosis.
カルシウムイオンを用いることなく蔗糖およびグリシン
と並んで5ミリモル/lの濃度の′BDTAを使用する
場合は第■因子と第■因子の収量が良好で第■および第
X因子の収量が悪い。アンチトロンビン■、ヘパリン、
蔗糖およびグリクン単独ではプロトロンビン因子は安定
化され得ない。When using 'BDTA at a concentration of 5 mmol/l along with sucrose and glycine without using calcium ions, the yields of Factors II and II are good and the yields of Factors II and X are poor. antithrombin■, heparin,
Sucrose and Glycun alone cannot stabilize prothrombin factor.
最良の結果は蔗糖およびグリシンを用いアンチトロンビ
ン■およびヘパリンを添加してカルシウムイオンとED
TAとを組み合せることにより得られる。これらの条件
下で全4種の因子についての収率は約80%の単位であ
りそして製剤はまた活性化された因子およびトロンビン
を含まない。The best results are obtained using sucrose and glycine, adding antithrombin and heparin, and combining calcium ions and ED.
It can be obtained by combining with TA. Under these conditions the yield for all four factors is about 80% units and the formulation is also free of activated factor and thrombin.
前記した方法が実施されうる水溶液中における凝固因子
の濃度は特に下記の範囲内にある。The concentration of the coagulation factor in the aqueous solution in which the method described above may be carried out lies in particular within the following ranges:
第■因子(F’l[) 0.3〜50U/−第■因子(
F■) 0.5〜50U/ml第■因子(FK) 0.
5〜+50U/−第X因子(FX) 0.4〜60U/
d特に好ましい範囲は第■、第■、第■および第X因子
に対してそれぞれ0.5〜25.0.5〜15.0.7
〜30および0.6〜30である。Factor ■(F'l[) 0.3~50U/-Factor ■(
F■) 0.5-50U/ml Factor ■ (FK) 0.
5~+50U/-Factor X (FX) 0.4~60U/
d Particularly preferred ranges are 0.5 to 25.0.5 to 15.0.7 for factors
~30 and 0.6-30.
濃縮物としては通常作用物質、すなわち本発明の場合凝
固因子を天然の出発物質より高濃度に含有している溶液
を指す。Concentrates usually refer to solutions containing active substances, ie coagulation factors in the present case, in a higher concentration than the natural starting material.
それ以上精製するには加熱された溶液を場合により遠心
分離することができる。不純物は硫酸アンモニウムを用
い30〜45チ飽和にて沈殿させることにより除去され
うる。For further purification, the heated solution can optionally be centrifuged. Impurities may be removed by precipitation with ammonium sulfate at 30-45% saturation.
次に上澄み液を溶液10〇−当po、04〜tO,Vの
燐酸カルシウムに吸着させ、負荷された吸着剤を洗い、
クエン酸塩緩衝液で溶離しそして溶出液を透析しうる。Next, the supernatant liquid was adsorbed on calcium phosphate of solution 100-10,04~tO,V, and the loaded adsorbent was washed.
Elution may be performed with citrate buffer and the eluate dialysed.
人間に使用するために生成物は滅菌濾過されうる。The product may be sterile filtered for human use.
本発明祉特に本方法により得られる、活性ウィルス不含
の第…、第■、第■および第X因子製剤に関する。The present invention particularly relates to active virus-free factor .
保存、安定性を高めるためには、製剤に蛋白質安定化物
質例えば蛋白質、アミノ酸または炭水化物を添加するこ
とが好都合である。終り、に、この処置にかけられ、た
、R剤紘凍結乾燥した形態で提供でき、その際例えばヘ
パリンのような抗凝固剤の添加が好ましくあシうる。In order to increase storage stability, it is advantageous to add protein stabilizing substances such as proteins, amino acids or carbohydrates to the formulation. Finally, the R agent which has been subjected to this treatment can be provided in lyophilized form, the addition of an anticoagulant such as, for example, heparin, being advantageous.
特に濃縮物の形態におせる本発明による生成物拡薬学的
投与に適した溶液中における凝血異常症治療用医薬で1
)、そして静脈から、好ましくは注入剤として因子欠乏
によシ惹起される出血の治療および予防に使用されうる
。A medicament for the treatment of coagulopathy in a solution suitable for pharmacological administration of the product according to the invention, especially in the form of a concentrate.
) and can be used intravenously, preferably as an infusion, for the treatment and prevention of bleeding caused by factor deficiency.
凍結乾燥された、凝固活性血漿や形態において低温殺菌
された生成物は例えば血液容量の充填、膠質浸透圧の保
持、大手術および災害後の血液損失ならびにショックの
種々の形態の治療および多重外傷の救急手当の場合にお
ける新鮮冷凍血漿の適応症をカバーするものである。Freeze-dried, coagulation-activated plasma or pasteurized products in the form can be used, for example, for filling blood volumes, maintaining colloid osmotic pressure, treating blood loss after major surgeries and disasters, and various forms of shock and multiple traumas. It covers the indications for fresh frozen plasma in emergency cases.
以下の実施例により本発明を説明する。The invention is illustrated by the following examples.
□
実施例 1
ヒトのクエン酸塩血W1000sdl攪拌下に25〜6
0℃に加温、しそしてKDTA186Nを含有しそして
2N NaOHでpH7,8に調整された溶液2〇−を
加え九。10分後に30℃に加温された溶液中に蔗糖1
00ONをゆっくりとかきまぜ入れた。□ Example 1 Human citrate blood W1000sdl 25-6 under stirring
Warm to 0°C and add 20- of a solution containing KDTA186N and adjusted to pH 7.8 with 2N NaOH. After 10 minutes, 1 sucrose was added to the solution heated to 30°C.
I slowly stirred in 00ON.
蔗糖が溶解したのち結晶性グリシンをゆっくり攪拌下に
加えた。これが完全に溶解したのち1モp CaCl2
溶液25−を加えそしてこの溶液を2N NlOHを用
いてpm(7,2に調整した。安定剤を用いてt7tに
増量した溶液を水浴上60℃に10時間加熱しそしてこ
れは加熱後でも透明であった。・□
安定剤の除去: 、・
低温殺菌した溶液を冷却後これを&、0およびt2μの
5artorius膜濾過器で濾過して清泄化した。・
次にこの溶液をクエン酸塩−NaC1−緩衝液(0,・
0.1!−ル/lのクエン、酸・ト、リナト・リウム、
pH7,5,α06モ々7tのNaCj )を用いて5
・tとなるまで希釈しそして限外濾過器で同時に濃縮し
ながら同じ組成の緩衝液5ノで6回透析しそして100
0−まで濃縮した。After the sucrose had dissolved, crystalline glycine was slowly added with stirring. After this is completely dissolved, 1 mop CaCl2
Solution 25- was added and the solution was adjusted to pm (7,2) using 2N NlOH. The solution, which had been made up to t7t using stabilizers, was heated to 60 °C on a water bath for 10 h and remained clear even after heating.・□ Removal of stabilizer: ・ After cooling the pasteurized solution, it was filtered through a 5 artorius membrane filter with &, 0 and t2 μ to clarify it.・
This solution was then mixed with citrate-NaC1-buffer (0,.
0.1! -L/l of citric acid, linato-lium,
5 using NaCj (pH 7.5, α06 momo 7t)
Diluted to t and dialyzed 6 times against 5 volumes of buffer of the same composition with simultaneous concentration in an ultrafilter and 100
Concentrated to 0-.
血漿出発量が1000mに達したのち透明な溶液f 5
artorius MtE 濾過器で滅菌済遇して清澄
化し、50dずつの容量に充填しそして凍結乾燥した。After the plasma starting volume reaches 1000 m, a clear solution f5
It was sterilized and clarified using an Artorius MtE filter, filled to a volume of 50 d and lyophilized.
507!の蒸留水で再構成した乾燥製品中において標準
的なヒトの血漿に基づき以下の活性が見出された。すな
わち第X因子80チ、第X因子80チ、第X因子83チ
および第X因子80チ。507! The following activities were found based on standard human plasma in the dried product reconstituted with distilled water: namely factor X 80chi, factor X 80chi, factor X 83chi and factor X 80chi.
実施例 2
1、DgAE −8ephadex’への吸着および溶
離によるプロトロンビン因子の単離
クエン酸塩血漿550ノに生理食塩溶液中に5ミリモル
/lのEDTAを含有しそしてpa 6に平衡化された
DEkH−8ephadex■人5 ’O(0,611
/l)を加えた。この懸濁液を15℃で6c・0分間攪
拌して吸着させた。吸着剤が沈降したのち上澄み液をサ
イホンで吸い上げそして吸着された因子を有するD]1
iAE−8ephadex”を5ミリモル/lのEDT
Aを含有する生理食塩溶液50tを用い混入蛋白質がな
くなるまで洗浄した。次に吸着剤を5ミリモル/lのE
DTAを含有するpH8の1モル/lのNaC17tと
攪拌し、吸着剤を遠心分離により除去しそして捨てた。Example 2 Isolation of prothrombin factor by adsorption and elution on DgAE-8ephadex' Citrated plasma 550 μm DEkH containing 5 mmol/l EDTA in saline solution and equilibrated to pa 6 -8ephadex■person 5'O(0,611
/l) was added. This suspension was stirred at 15° C. for 60 minutes to cause adsorption. After the adsorbent has settled, the supernatant liquid is siphoned and the adsorbed factor is D]1
iAE-8ephadex” with 5 mmol/l EDT
The plate was washed with 50 t of physiological saline solution containing A until all contaminating proteins were removed. Next, the adsorbent was added to 5 mmol/l of E
After stirring with 1 mol/l NaC17t pH 8 containing DTA, the adsorbent was removed by centrifugation and discarded.
2、低温殺菌
上澄み液にアンチトロンビンlll0.2U/−および
ヘパリン2U/−を加えた。次に固形グリシン1050
11を加えそして、これらが溶解したのちに、25ミリ
モル/lの最終濃度に相当する25.7&のCaCl2
・2H20’に加えたo’一定のpI−J@7.2に達
したのちこの溶液を30−57℃に加熱しそして10.
5Kfの蔗糖を加えた(最終濃度溶液100g当シ約6
01i)。この高粘度溶液のpH値をもう一度Z2に調
整したのち、この溶液を水浴中60℃に10時間加熱し
た。2. 0.2 U/- of antithrombin and 2 U/- of heparin were added to the pasteurized supernatant. Next, solid glycine 1050
11 and, after these have dissolved, 25.7 & CaCl2, corresponding to a final concentration of 25 mmol/l.
o' added to 2H20' After reaching a constant [email protected], heat the solution to 30-57°C and 10.
Added 5 Kf of sucrose (approx. 6 kg per 100 g of final concentration solution)
01i). After the pH value of this highly viscous solution was adjusted once again to Z2, the solution was heated to 60° C. in a water bath for 10 hours.
3、 硫酸アンモニウムを用いる沈殿による望ましから
ぬ蛋白質の除去
低温殺菌された溶液的142を室温まで冷却しそして5
0ミリモル/lの最終濃度に相当する634IのCaC
l2 ・2H20を含有する蒸留水31.5ノ中に加え
た。3. Removal of unwanted proteins by precipitation with ammonium sulfate. Cool the pasteurized solution 142 to room temperature and 5.
634I CaC corresponding to a final concentration of 0 mmol/l
The solution was added to 31.5 liters of distilled water containing 12.2H20.
このプロトロンビン因子の溶液中にpH75で飽和硫酸
アンモニウム溶液24.51を導入し、沈殿を遠心分離
しそして捨てた。A saturated ammonium sulfate solution at pH 75 was introduced into this solution of prothrombin factor, and the precipitate was centrifuged and discarded.
4、燐酸カルシウムへの吸着によるプロトロンビン因子
の高度精製
プロトロンビン因子を含有する上澄み液にpH76で固
形Ca5 (PO4) 27001を加えそして室温で
20〜30分間攪拌した。燐酸カルシウムを遠心分離に
よp敗得しそしてpH7,6を有する0、 5モル/
l o Na、ClおよびIJi’/1oo−oグリシ
ンの溶液20tで洗った。4. Highly Purified Prothrombin Factor by Adsorption on Calcium Phosphate Solid Ca5 (PO4) 27001 was added to the supernatant containing prothrombin factor at pH 76 and stirred at room temperature for 20-30 minutes. Calcium phosphate was extracted by centrifugation and had a pH of 7.6, 0.5 mol/
l o Washed with 20t of a solution of Na, Cl and IJi'/1oo-o glycine.
プロトロンビン因子は吸着剤から、0.2モル/lのク
エン酸トリナトリウム、0.15モル/lのNaCl、
11/ 100−のグリシン、0,6U/−のアンチ
トロンビン■および28U/−のヘパリンを含有する緩
衝液750tnt(pH約7.5 ) ’i用いそして
室温で攪拌(20分間)することにより溶離された。3
000gでの遠心分離により溶出液から粗い粒子を除去
した。Prothrombin factor was extracted from the adsorbent with 0.2 mol/l trisodium citrate, 0.15 mol/l NaCl,
Elution was carried out using 750 tons of buffer (pH approximately 7.5) containing 11/100-glycine, 0,6 U/- antithrombin and 28 U/- heparin and by stirring (20 min) at room temperature. It was done. 3
Coarse particles were removed from the eluate by centrifugation at 000g.
5、製剤化
上澄み液にα1511/100−のアエロジル(Aer
osil)を加えそして!+0000.pで超遠心分離
することによシ固形物を除去した。透明な上澄み液に液
体10〇−当り約0.69のヒトアルブミンを加え、p
H6,8に゛調整しそして生理食塩溶液50tで6時間
透析した。この溶液を第X因子80チ、第X因子50U
および第■因子25Uとなるよう調整し、滅菌濾過し、
5−量ずつ充填しそして凍結乾燥した。5. Add α1511/100-Aerozil (Aer
osil) and then! +0000. Solids were removed by ultracentrifugation at p.p. Approximately 0.69 human albumin per 100 mm of liquid was added to the clear supernatant liquid, and p
The solution was adjusted to H6.8 and dialyzed against 50 tons of physiological saline for 6 hours. Add this solution to 80% of factor X and 50U of factor
and factor ■, adjusted to 25U, sterilized and filtered,
Filled in 5-volume portions and lyophilized.
ゲゼルシャフト
第1頁の続き
@)Int、CI、’ 識別記号 庁内整理番号0発
明 者 ハンス・マルチイン・ ドイツ連邦共和国ラブ
ライス ヒエン4Continuation of Gesellschaft page 1 @) Int, CI,' Identification symbol Internal serial number 0
Written by: Hans Martin, Labreis, Federal Republic of Germany 4
Claims (1)
を含有する水・性液体を場合に′j′ジアミノ酸□およ
び/または糖類ま・たは糖□′1ア□ルコー)の存在下
に加温することによシ実□際上つ□イルスを含まず且つ
肝炎の危険のない・これら因子の製剤を調製するに*□
9、カルシウムイオンおよびキレート形成剤および場合
衰よりアン?)μ・ ンビン曹および/lたれへ”バリ
ンめ′存在下□に加温することを膚′徴とするカ法。 2) カルシウムイオンの潰・度・が□1〜′50□′
□#リモル/ l 、好ましく祉2′5〜50ミリモル
/j:であることを特徴とする特許 1項記載の方法一 ゛ □ 6》 キレート形成剤が6□〜20個の旋素慮手および
1ま逅は2個の窒素原生を有するカ旨肪族7r−}リー
またはーテトラーカルボン酸ま苑は士の苛:i性アルカ
リ塩であることを特徴′゛トする前記□特許請求の範囲
第1現記□載の方法。 4)キレート形成剤の濃産艇1〜20好ましくは5zリ
遍ル/tであることを特徴とする前記[!F請求の範囲
第1現記1の方法。 5》α2〜□□2麹のアンチトロンビンIII, 2〜
2 0 UI9P−ルーのヘパリン、25〜50定リモ
ル/lのカルシウムイオン、1〜20ミリモル/lのR
DTA,グリシン、α−tたはβ−アラニン、□リジン
、ロイシン、バリン、アスパラギ□ン、□セリシ、蔽ド
ロキレプロリン、プロリン、グルタミシ、α−、□β7
Fー1た゛はr′−アミノ酪酸、好ま″しくはグリシン
の少くとも1種一のアミノ酸1〜』モル/1,および溶
液100g当り20〜6011の単糖類または寡糖類ま
たは糖アルコール、好ましくは1〜3モル/lのグリシ
ンおよび溶液100g当920〜6011の蔗糖の存在
下に30〜100℃好ましくは60〜100℃の温度に
1分〜48時間好ましくは8〜12時間加温することを
特徴とする特許 の範囲第1項記載の方法。 6)水性液体がクエン酸塩血漿または血漿のまたは胎盤
のフラクションであることを特徴とする前記特許請求の
範囲第1項記載の方法。 7)水性液体が第■、第■、第■および第X因子の濃縮
物であることを特徴とする前記特許請求の範囲第1項記
載の方法。[Scope of Claims] 1) Water/liquid containing blood'coagulation factor ■, factor ■, factor 1■, and factor To prepare preparations of these factors that are practically virus-free and without the risk of hepatitis, it is possible to do so by heating in the presence of □'1 alcohol).
9. Calcium ions and chelating agents and their deterioration? 2) A method that detects skin symptoms by heating the soda and /l sauce to a temperature of □ in the presence of ``balin''. 2) The degree of crushing of calcium ions is □1~'50□'
□ #lmol/l, preferably 2'5 to 50 mmol/l: ゛ □ 6゛ □ 6》 A method in which the chelate forming agent has 6□ to 20 molecules and The above-mentioned □ patent claim is characterized in that the first encounter is an alkali salt of a carbon aliphatic 7r- or -tetracarboxylic acid having two nitrogen atoms. Scope 1 Current method described □. 4) The above-mentioned [! F.Claim 1: The method according to claim 1. 5》α2~□□2 Koji antithrombin III, 2~
20 UI9P-Rue heparin, 25-50 lmol/l calcium ions, 1-20 mmol/l R
DTA, glycine, α-t or β-alanine, □lysine, leucine, valine, asparagine, □sericine, drochyreproline, proline, glutamic acid, α-, □β7
F-1 is r'-aminobutyric acid, preferably glycine, at least one amino acid 1 to 1 mole/1, and 20 to 601 monosaccharides or oligosaccharides or sugar alcohols, preferably glycine, per 100 g of solution. In the presence of 1 to 3 mol/l of glycine and 920 to 6011 parts of sucrose per 100 g of solution, heating to a temperature of 30 to 100°C, preferably 60 to 100°C, for 1 minute to 48 hours, preferably 8 to 12 hours. 6) The method according to claim 1, characterized in that the aqueous liquid is citrated plasma or a fraction of plasma or placenta. 7) 2. A method according to claim 1, characterized in that the aqueous liquid is a concentrate of Factors I, II, II and X.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE19833336314 DE3336314C1 (en) | 1983-10-06 | 1983-10-06 | Drill cradle |
DE3336631.4 | 1983-10-08 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS60155120A true JPS60155120A (en) | 1985-08-15 |
JPH0530812B2 JPH0530812B2 (en) | 1993-05-11 |
Family
ID=6211117
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP59208410A Granted JPS60155120A (en) | 1983-10-06 | 1984-10-05 | Manufacture of blood plasma medicine |
Country Status (2)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS60155120A (en) |
DE (1) | DE3336314C1 (en) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2005034990A1 (en) * | 2003-10-09 | 2005-04-21 | Juridical Foundation The Chemo-Sero-Therapeutic Research Institute | Hemostatic composition containing antithrombin iii |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE3612762C2 (en) * | 1986-04-16 | 1994-06-23 | E & Pk Ingbuero | Telescopic drill |
EP2177711A1 (en) | 2008-10-14 | 2010-04-21 | BAUER Maschinen GmbH | Drill pipe stands and method of producing a drilled pipe |
-
1983
- 1983-10-06 DE DE19833336314 patent/DE3336314C1/en not_active Expired
-
1984
- 1984-10-05 JP JP59208410A patent/JPS60155120A/en active Granted
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2005034990A1 (en) * | 2003-10-09 | 2005-04-21 | Juridical Foundation The Chemo-Sero-Therapeutic Research Institute | Hemostatic composition containing antithrombin iii |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
DE3336314C1 (en) | 1984-08-16 |
JPH0530812B2 (en) | 1993-05-11 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CA1126652A (en) | Antithrombin preparation and process for the production thereof | |
US4405603A (en) | Method for rendering factors IX and X hepatitis-safe with calcium ions | |
US4160025A (en) | Method of producing a blood-coagulation-promoting preparation from human blood plasma | |
US5099003A (en) | Method of preparing a sterile plasma-protein solution containing fibrinogen and factor xiii | |
US4404187A (en) | Method for rendering factors II and VII hepatitis-safe with a chelating agent | |
US4960757A (en) | Pasteurized human fibrinogen (HF), a process for its preparation, and its use | |
JPS63243032A (en) | Method for heat-treating thrombin | |
JP2002275090A (en) | Stabilized protein preparation and method for preparing the same | |
DK156698B (en) | PROCEDURE FOR PASTEURIZATION OF A MATERIAL CONTAINING A THERMALLALLY SENSITIVE, THERAPEUTIC ACTIVITY PROTEIN SELECTED WITH ALFA-L-ANTITRYPSIN, ANTITHROMOBIN-III, PRAEKALLIKRINE, ANTIHAEMOFILE FACTOR | |
RU2000113224A (en) | METHOD FOR PRODUCING A HIGH DEGREE OF VIRUS-SAFE COMPONENTS FOR PRODUCING FIBRINE GLUE FROM A HUMAN PLASMA POOL | |
HRP931496A2 (en) | Process for the preparation of biological preparations not containing (active) viruses | |
US4379085A (en) | Heat stabilization of plasma proteins | |
US6346277B1 (en) | Process for the pasteurization of plasma or concentrates of blood coagulation factors II, VII, IX and X | |
JPH02264799A (en) | Pasteurized, purified von willebrand factor concentrate and its preparation | |
US4562072A (en) | Process for the pasteurization of antihemophilic cryoprecipitate (AHC) and antihemophilic cryoprecipitate prepared thereby | |
HU210026B (en) | Heparin-free composition for stabilizing blood plasma during pasteurization, and process for pasteurizing blood plasma | |
ES2237854T5 (en) | Procedure for preparation by filtration of a virally safe factor VIII solution | |
JPH0366292B2 (en) | ||
JP3143507B2 (en) | Method for preparing pasteurized iron-free human transferrin and its use | |
JPS61189228A (en) | Production of blood coagulation factor viii | |
JPS60155120A (en) | Manufacture of blood plasma medicine | |
CA1335369C (en) | Process for the purification and pasteurization of urokinase | |
JP3132828B2 (en) | Formulations for plasma stabilization during pasteurization | |
JPS6140392B2 (en) | ||
JPS58198292A (en) | Thermal stabilization of leucine aminopeptidase originating from human placenta |