JPS5944313A - 抗菌性組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、抗菌性組成物、特にヒトの皮膚上における有
害微生物の増殖を抑制するのに有効な組成物に関するも
のである。

ヒトの皮膚上には、プロピオニバクテリウム・アクネス
（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｃｕ＋＋　ａｃｎｅ
ｓ）、プロピオニバクテリウム・アビダム（Ｐｒｏｐｉ
ｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ａｖｉｄｕｍ）等のプロピ
オニバクテリウム属微生物が常在しており、これらの微
生物がなんらかの原因によって増殖すると、にきびの悪
化や皮膚の炎症が起こると考えられている。従来、この
ような皮膚の炎症を誘発する微生物の増殖防止には、テ
トラサイクリン、エリスロマイシン、クリンダマイシン
等の抗生物質が使用されているが、これらの抗生物質は
抗菌スペクトルか広すきるため、皮膚」二の有用微生物
まで殺してしまうという欠点を持つ。

そこで本発明者らは、皮膚上の有害微生物、特にプロピ
オニバクテリウム属細菌に対してなるべく選択的な作用
を示す抗菌物質を求めて、従来から抗菌活性ありと報告
されているものを含む種々の植物成分につきスクリーニ
ングを行なったのである。その結果、ヒトの皮膚と同し
ｐＨ５，ｔ）〜５．５の弱酸性領域において、単独で所
期の抗菌活性を示す物質は見いだされなかったが、ケル
セチンとルチン、ケルセチンとイソラムネチン−３−０
−ルチ７シド、またはこれら三者の混合物が、皮膚表面
のｐｌ−１領域において、プロピオニバクテリウム属菌
に対しすぐれた抗菌活性を示すことを知り、本発明を完
成する１こ至ったのである。

すなわち、本発明の抗菌性組成物は、ケルセチンを必須
の有効成分とし、ほかに、必須の補助成分として、ルチ
ンおよび／またはイソラムネチン−３−０−ルチ７シド
を含有するものである。

本発明の組成物を構成する上記３種類の化合物は、それ
ぞれ次のような分子構造を有するフラボメイドである。

■　ケルセチン ■　ルチン ■　イソラムネチン−３−０−ルチノシド従来ケルセチ
ンについては、弱アルカリ性ないし弱酸性において弱い
抗菌活性のあることが報告されているが、本発明者らが
確認したところでは、弱酸性におけるプロピオニバクテ
リウム属菌に対する活性はきわめて弱いものである。し
たがってケルセチンは、それ単独ではとうてい皮膚用薬
剤や化粧品のための抗菌剤とはなりえないものである。

またルチンおよびイソラムネチン−３−〇−ルチ７シド
は、弱アルカリ性では弱い抗菌活性を示すか、弱酸性で
は全く活性を示さない。

ところがこれらの３成分を上述のように組合せて用いる
ときは、弱酸性下で強力な抗菌作用を示すのであって、
このような協同作用は、個々の成分について公知もしく
は実験的に確認された特性からは、とうてい予測するこ
とのできないものであった。

本発明による抗菌性組成物の抗菌スペクトルは、弱酸性
条件下では皮膚の常在菌であるプロピオニバクテリウム
・アクネスおよびプロピオニバクテリウム・アビグムに
顕著であり、黄色ブドウ球菌に中程度の活性を示すが、
大腸菌および緑膿菌に対しては静菌的に働くだけである
。

本発明の抗菌性組成物の」二記活性は、ｐｉ−１約５．
０〜５．５の弱酸性において最もすぐれており、中性な
いし弱アルカリ性では活性が低下する。補助成分として
イソラムネチン−３−０−ルチノシドのみを含有するも
のの場合、ｐＨ約７．５以上になると、活性はほとんど
失われる。一方、補助成分としてルチンを含むものの場
合は、弱アルカリ性で弱（１活性を示すが、これはルチ
ンが単独で示す抗菌活性である。

本発明の組成物における各成分の量比は特に限定される
わけではなく、上述のような各成分の併用による協同作
用力ｆ現れる範囲であればよい。上記範囲はかなり広く
、例えば使用時のケルセチン濃度が０．４％（重量％、
以下間し）の場合、これに約０．４％以上のルチンまた
は／およびイソラムネチン−３−０−ルチノシドを共存
させると弱ν）協同作用が現れ、共存させる量が約２％
以」二になると協同作用は特に顕著となり、きわめて強
い抗菌活性を示すに至る。それ以上ルチンを増やしても
効果はあまり変らず、ルチンが約４％以上になると、活
性はかえって低下する。

イソラムネチン−３−０−ルチノシドの有効濃度もルチ
ンのそれとほぼ同様である。

したがって、ケルセチン濃度が０．４％の場合、ルチン
および／またはイソラムネチン−３−〇−ルチノシドの
好適濃度範囲は０．４〜４％であり、ケルセチンに対す
るルチンまたは／およびイソラムネチン−３−０−ルチ
ノシドの重量比（ルチンおよびイソラムネチン−３−０
−ルチノシドを併用する場合はそれらの合計量の重量比
）の好適値は約１〜１０になるが、この範囲に限定され
るものではない。

なおケルセチンの濃度は通常約０．２％以」二であるこ
とが必要であり、０．２％未満では、ルチンおよび／ま
たはイソラムネチン−３−０−ルナ／シトをいかに多量
に用いても十分な水準の抗菌活性は得られない。好まし
いケルセチンの濃度範囲は約０．２〜０，６％であり、
０．６％をこえる濃度にしても、活性の増加はほとんど
ない。

以上のような特性により、本発明の組成物の抗菌活性は
弱酸性であるヒトの皮膚に塗布してプロピオニバクテリ
ウム・アクネス等に対する持続的な抗菌作用を期待する
にきび治療剤、にきび肌用化粧水等の皮膚用薬剤、化粧
品等に利用するのに好適なものである。そして本発明の
抗菌性組成物は、ケルセチン、ルチンおよび／またはイ
ソラムネチン−３−０−ルチ７シドが他の薬剤もしくは
化粧品構成成分と配合されてなる皮膚用薬剤、化粧品等
の皮膚適用量であってもよく、また上記皮膚適用量に配
合するための、ケルセチン、ルチンおよび／またはイソ
ラムネチン−３−０−ルチノシドからなる抗菌剤であっ
てもよい。

抗菌剤としての本発明組成物を製造する方法は任意であ
って、ケルセチン、ルチンおよび／またはイソラムネチ
ン−３−〇−ルチノシドを、それらの一部または全部を
含有する植物体抽出物の形で、あるいは精製物の溶液の
形で、好適比率になるよう混合すればよい。最初がらケ
ルセチン、ルチンおよび／またはイソラムネチン−３−
０−ルチノシドを好適比率で含有する抽出物が得られる
場合は、それがそのまま、あるいはそれを適宜精製した
ものが、本発明の抗菌性組成物となり得ること、言うま
でもない。

本発明の組成物またはその原料となり得る抽出物を与え
る植物の例としては棟花（学名：　５ｏｐｌ＋ｏｒａ　
ｊａｐｏｎｉｃａ）があり、生薬として販売されている
このものの乾燥粉末は、ふつうケルセチンを０．７〜０
．８％、ルチンを１５〜２５％、イソラムネチン−３−
０−ルチノシドを約１％含有する。これを例えばエタノ
ールやアセトン等の極性溶媒で抽出し、得られる抽出物
をそのまま本発明の組成物として用いてもよいが、適宜
精製処理を施すことにより、棟花がら抽出された他の成
分に基づく着色やにおいがなく、抗菌活性も一層すぐれ
た本発明の抗菌性組成物を得ることができる。棟花抽出
物がらケルセチン、ルチンおよびイソラムネチン−３−
０−ルチノシドなど個々の有効成分を単離することはふ
つう必要でないが、単離精製法の一例を示すと、まず棟
花抽出物を、セ７アデンクスＬ　ｌ−１２０を用いるク
ロマトグラフィーにより、ケルセチン含有画分Ａとルチ
ンおよびイソラムネチン−３−０−ルナ／シトを含む画
分Ｂとに分ける。画分Ｂを水に懸濁させ、クロロホルム
−メタノール混合溶媒（９：］）により低極性物質を抽
出除去した後、水相中のルチンの一部を５０％メタノー
ルにて結晶化させ、残液をポリアミドトライカラムクロ
マトグラフィーにて分画してルチン含有画分Ｃとイソラ
ムネチン−３−０−ルチノシド含有画分りを得る。画分
りをシリカゾルクロマトグラフィーにより精製すると、
更に高純度のイソラムネチン−３−０−ルチンシド画分
を得ることかできる。

なお椀花抽出物におけるルチン／ケルセチンのｆｆｉ　
Ｒ比はふつう約２０以」−であって、さきに述べた本発
明の組成物におけるルチン／ケルセチンの好適比率５−
２０の上限ないしそれを越えた範囲にある。つまり、ケ
ルセチンに対してルチンが必要以上に多い状態であるか
ら、ルチン／ケルセチン比か約５以下とならない範囲で
、塊花抽出物にケルセチンを添加することによりルチン
の利用度を高めてもよい。このために用いるケルセチン
は別の原料から調製したものでもよいか、塊花抽出物ま
たはそれから単離したルチンをβ−グルフシダーゼで処
理してルチンを加水分解することにより生成させたケル
セチンであってもよい。あるいは、棟花抽出物をβ−グ
ルフシダーゼで処理し、その際、処理生成物におけるル
チン／ケルセチン比が約５〜２０になるように、ルチン
の一部分のみを加水分解して得られた生成物を本発明の
組成物として使用することもできる。

また、棟花中に約０．２％含まれているケンペロールー
３−〇−ルチノシドは、本発明の組成物におけるイソラ
ムネチン−３−０−ルチノシドと同じ役割をはたし得る
物質であることが確認されており、したがって、棟花を
原料として本発明の組成物を製造する場合は、この物質
を除去することなく利用することが望ましい。

以下実施例を示して本発明を説明する。

実施例　１ 棟花２８０ｇをミキサーにて粉砕した後、２．８ｆのエ
タノールにて３０分ずつ２回に分けて還流抽出し、抽出
液の濾液を減圧下に濃縮し乾固させて、抽出物９３ｇを
得た。この抽出物は、ケルセチンを２．４％、ルチンを
４７．１％、インラムネチン−３−０−ルチノシドを３
．０％、それぞれ含有するものであった。

実施例　２ 滅菌したＣＡＭフイヨン培地（塩酸またはカセイソーダ
で所定のｐ　Ｈに調節したちの；寒天濃度二基層用１．
５％、七層用０．７５％）を用意する。直径９ｃ＋ｎの
シャーレに基層用培地１６ｍ１をまき、この上に、菌液
（新たに稙えついで１８−２０時間前培養したもの）を
菌数にして１０７〜１０６個混入した上層用培地６ｍｌ
　（温度５０”Ｃ）をまいて固める。実施例］による塊
花抽出物のエタノール溶液（固形分濃度３３％）２５μ
ｍを直径８ｍ＋ｎのペーパーディスクにっけ、このディ
スクをドライヤーで乾かしのち」二記培地上にのせる。

ディスクをのせたまま１８〜２０時間、３７°Ｃにて培
養した後、ティスフ周辺の、菌の生育が阻止された円形
部分（以下阻止円という）の直径［ｍｍｌを測定する。

種々の菌について−１−記試験を１１なった結果を表１
に示す。

表　　１ 供試菌　　ｐＨ５，５ｐＨ６，８ｐＨ７，ＳＰ・アクネ
ス八ＴＣＣ１１８２８１８，５１１，０１８，５Ｐ・ア
クネ又へＴＣＣ／１１８２９　１５．０　　１０．０　
　１２．ＯＰ・アビダム八ＴＣＣ２５５７７１，８，０
１，２，５２０，５×　※ 大腸菌に−１，２１３，０９，５ＮＤ 黄色ブドウ球菌ＦＤＡ２０９Ｐ　　　１３．５　　　９
．５．　　　ＮＤ※ 緑膿菌Ａ　　　　９．０　８．７　　ＮＤ緑膿菌Ｂ　　
　　１０．’７　９．５　　ＮＤ（注）×：静菌的（阻
止円内にも菌が一部生存している）ＮＤ；テストせず 実施例　３ ケルセチン、ルチンおよびイソラムネチン−３−０−ル
チ７シドの各々のメタノール溶液を調製し、それらの１
〜３種類を実施例２の場合と同様にしてペーパーディス
クに付着させて抗菌活性を調べた。但し培地に接種した
菌はプロピオニバクテリウム・アビダムであり、培地ｐ
Ｈは５．５とした。阻止円の測定結果を表２に示す。

表　　２ ペーパーディスクイτ１−着物質□　阻止円直径（ＩＩ
ｌｍ）※ ケルセチン０．１ｍｇ　　　　　　　　　　　　　　１
０，０※ ケルセチン　０．２ｍＦｉ　　　　　　　　　　　　　
　１０，０※ ケルセチン　（１，４１１ＩＢ　　　　　　　　　　　
　　　　１０．０ルチン　２　、ＯｍｇＯ Ｉ−ｒ　２．Ｏｍｇ　　　　　　　　　　　　　　　　
　　Ｏケルセチン０．２ｍｇ＋ルチン０．５＋ｎｇ１３
　、０ケルセチン０．２ｍｇ＋ルチン１．０ｍｇ１４．
５ケルセチン０．２Ｂ＋ルチン２．Ｏ＋ｎＢ　　　　　
　　　　］　］５、０ケルセチン０．２ｍ５−ｔ−１−
ｒ　０．５ｍＢ　　　　　　　　　　］　］３、（１ケ
ルセチン０．２ｍｇ＋　Ｉ−ｒ　１．０＋Ｏｇ１−Ｌ３
ケルセチン０．２ｍｇ＋　Ｉ　−ｒ　２．軸ｇ　　　　
　　　　　　１４．０ケルセチン０．２ｍｇ＋ルチン］
、Ｏｍｇ＋１−ｒ０．１５ｍ８］−４，５ケルセチン０
．２ｍｇ＋ルチン１．Ｏｍｇ＋　Ｉ　−ｒ　Ｏ，３ｍＨ
］　］５．３ケルセチン０．２ｍｇ＋ルチン１．Ｏｍｇ
＋Ｉ　−ｒ　Ｏ，５ｍＨ］　］６３ケルセチン０．２ｍ
ｇ＋ルチン０．５ｍｇ＋　Ｉ　−ｒ　０．５ｍＢ　　］
　４　、２ケルセチン０．２ｍｇ＋ルチン１．Ｏｍｇ＋
　１−’ｒ　１．０ｍｇＩ　Ｇ　、　８（注）×：静菌
的 １−ｒ：イソラムネチンー３−０−ルナ／シト実施例　
４ 濃度８ｍｇ／＋ｎｌのケルセチン溶液、濃度４０ｍｇ／
ｍｌのルチン溶液および濃度２０ｍｇ／ｍｌのイソラム
ネチン−３−０−ルチ７シド溶液（いずれもメタノール
溶液）を試験液として用意する。

別に試験菌・プロピオニバクテリウム・アビダムをＣＡ
Ｍ培地に５ｏｆｔ　ａｇａｒとしてまき、この上に、上
記試験液のいずれか１種または３種類各２５μｍを付着
させて乾燥した直径８＋ｎｍのペーパーディスクを置く
。１８〜２０時間＠養後の阻止円の直径［齢］を測定す
る。

上記方法において、培地のｐｒ−＋を５．５〜８．０の
範囲で種々変更して得られた結果を下記の判定基準によ
ｌ）　Ｉ’ｌｌ定した。

阻止円の直径　［ｍｍ］　　　　　抗菌活性〇　　　　
　　　　　　　　　　　　　−０以上１２未満　　　　
　　士 １２以上１６未満　　　　　　十 １６以上２０未満　　　　　＋十 ２０以」二　　　　　　　　　　十十＋その結果を表３
に示す。

表　　３ ルチン　ケルセチン　　Ｌｒ　　３成分）昆用ｐＨ５，
ｆ）　　　　−±　　　　　　　　十十＋ｐｌ（５，５
±　　　　　　　　＋十 ｐＨ６，０−−−± ｐＨ６，５−−−± ｐｌ−１７，（、）　　　　　−−−−±ｐｌ−１’７
．５　　　　　±　　　　−−＋ｐＩ−１８，０＋　　
　　±　　　　　　　　　＋（注）Ｉ−ｒ：イソラムネ
チンー３−〇−ルチ／シト実施例　５ ケルセチン０．６ｇ、ルチン２．Ｏｇおよびイソラムネ
チン−３−０−ルチノシド０．４ｇを、エタノール７ｆ
、１ｍｌとＯ、Ｉ）　５１Ｖ４ａ−ヒドロキシ−１１−
酪酸緩衝液（ｐｌ（５，０）　３．０＋ｎｌの；■、合
液に均一に溶解させて、液状の１こトび治療剤を製造し
た。

手続補正書 昭和５７年１０月１２日 特許庁長官　若杉和夫　殿 １、事件の表示 昭和５７年特許願第１．５４５９８号 ２、発明の名称 抗菌性組成物 ３、補正をする者 事件との関係　　特許出願人 （６８８）株式会社ヤクルト本社 ４、代理人 〒１０７東京都港区北青山３−６−１８６、補正の対象 明細書の発明の詳細な説明の欄。

（１）第５頁第１４行の１かえって低下する。−１を１
かえって低下するが、約８％までは使用できる。」と訂
正する。

（２）１５頁第１９行の１４％」を「８％」と訂正する
。

（３）第６頁第２行の１１（月を「２ｏ」と訂正する。

（４）第８頁第１５行の［−５］を［１」と訂正する。

（５）第８頁第１８行の「５」を「１」と訂正する。

（６）第９頁第５行の１５」を１１」と訂正する。

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. （１）ケルセチンならびに必須の補助成分としてルチン
   および／またはイソラムネチン−３−０−ルチ７シドを
   含有することを特徴とする抗菌性組成物。
2. （２）組成物が皮膚用薬剤または化粧品である特許請求
   の範囲第１項記載の組成物。