JPS5928495A - 汚染物質検出の方法及び装置 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 不発明による汚染’＋ｔｈ　ｘの検出のための方法及び
≠厘は食料品工業及び類似の工業分野の工場におけるイ
：双生物衛生検査のための、液体からの試ｌ＃＋探城に
も試料に葛１れている微生物の培養にも役立つ。

汚染物質の検出のためには製品の又は器具乃芋装置ｑ１
部分の病原ｌ負値の特性について報告できる≧４さ１な
方法か公知である。しかし原則とし℃検出はいくつかの
作業段階において行なわれる。

実験室における液体又は懸濁孜からの特定の容積の試料
の採取は、試料の対応の区分をもってノー切な固形及び
又は液体培養基土で培養を行ＩＬうため誠凶の器具（た
とえばベット）によって容器から行なわ才りる。この゛
容器はたとえば飲料用の瓶又は輸送用容器とすることか
でき、これに滅菌の条件下において実験室外で試料を満
たす。顕微屓）の像による試料判１′Ｌピは商度の汚染
の場合のみ０］能である。ハ「扱の°容器の個数及び壌
俟窒気との接触によって二次汚染の危険か存在している
。

たとえば臥科の保存性検査の保存性検査のためには険め
て僅かな個数においても汚染物質の恢出は樵要である。

この目的のためには大容積の試料を膜で戸別してこれを
固形の培養基上にもたら丁。

しかＬ　’＝養法にめっては、弱い病１余肉は固形培養
基上では液状培養基中よりＩ成長か遅いので満足な結果
は早くとも３日乃全４日間郷化させた后でないと４を認
できない。液状培養基とは公知のコツホの平版培養にも
めてはまる。

膜濾過で戸別された微生物の染色及び引続いてのそれら
の噛倣御下でのｉｔ敢及び特徴づけはよく装備された作
画Ｊ３ｒでのみ町１ヒであり対応の適格性を必要とする
。そのほか直接ｎ［砿では微生物の生、夕すの判別の０
」能性に限界かめる。

在米の方法の屯央な欠点はさらに、汚染度のほかにＩＴ
３」時に汚染（人生物の諸性性（ガス発生、醗酵活性、
酸生成、嫌気性情ｖＦＦの成長ンも測定１−ることかで
きないことにある。

食料品工業及び類似の工業分封において爪上である病原
酌については好気性粂件Ｆにガス及び酸を生じならびに
ｌｌ粗気性条件Ｆに成長する能力を１Ｆｊ１時に立ｃｉ
＋ｈ−４ることは績にめて爪髪でめる。

（ｌＥ来の方法姓−１絶ってはガス発生は定性的に検出
いｔＬイ）か、べいは別ｆ１＾１の培曽装置１（たとえ
ば小醗目ｆ狛ンを必−ψｌと１−る。在米の方法は実験
室ｒ１イ〔ｒｌに置ｒ；Ｊ　ａ　７また器具及び培養基
のイも備を負荷８せる。こ）しによって小暇、イ艶の作
業、方では負召［か大きくなイ〕０ 一亡のほか１・Ｘｑ−からは採血及び血液試料の隋后処
理のための力ｌ）二及びシステムが公知である。

***公１’ｉ［ｌ　’Ｆ）肝出ａ　第３５３６０６１号
及び第２Ｆ３３５１０１号によると思場の削りＩｌｌ’
＜に仲人された４１μ肯システムに試料Ｊ！：！搬川′
咎用と１−て僅立つ或いは生化学反応月］乃全用書用容
器とＬ″′Ｃ使用司能の可能に＾窒とした小試料管を接
４ｆするｔｉＪ能性かめる。***公開性ぎｆ出願第２４
１１６５１号によると採血システム内部に感圧性、ガス
不透過性障！γを通ってのカス発生か示してめり、ガス
分析装隨俵軟の可能性がめる。

***公開時ＷＦ出願第３０１２０５６号記載の敗血症診
断のための棋合採血培誉システムは液状及び固形培養基
上での同時培介が司Ｈしであり、血液は採取システムを
経て定線されて血液培養システムの典窒の又はカス充填
の容器内へ吸入されその際にｌ浅状培養４ｖｃも固形培
養基にも接種さｎる。

Ｐ）ｌによって左右される指示桑が成長と結合している
酸化す兄を可視とする。

褥化はシステムを斜めに置いて行なわれ、その際採取挿
管は１戚菌のプラスチック栓で閉じたままである。しか
しこのシステムは食料品工業の分野には応用不能である
。

不発明の目的は食料品工業及び曲連の分野の製品及び迫
真の微生物的調査のための方法及び装置でめって従来の
ｐ４決法の欠点がなく、これによつ℃′足絹的に汚染度
及び汚染物質の貞要な諸／ｌ’η性の１ｉ３Ｉ速ノ↓１
９合の検出が使い棄ての容器とし″′Ｃ使用する賜金に
もｊｊＪ能であるものを作り出すことにある。

本発明には、ｆ取生物学的検査をより確実に摺威し１０
」時に作業上の筐た時間的な負担を軽減する方法を商光
りならびに試料採取及び培養の必髪な伎龍丁べてを統合
して対応の液状及び又は同形培養４：を用いる１県に液
体中の汚染物質の乃至公知の方法に従って液体中にｉ％
？４　？婦させた微生物の検出が５１龍であるようにす
る装置纜をもたらりという峰へか根拠になっている。

本発明による方法はとくに細菌、酵母及び糸状四の検出
ＶＣ、；ｔ、Ｑ　しており、その場合液状試料は定電し
て減圧の及び又はｑｑ妹なガス充填（たとえばＣＯ，、
Ｎｔ）の腹合試料採取、培養容器内へ吸入され、その除
に液状培養基と混合される。

この装置の別個の区分には一つ又はいくつかの固形培養
基を入れ℃おくことができ、よって泥状培養基と混合さ
れた試料は同時に液状及び固形培養基（１個乃芋数イ［
＾１）に接独１−ることができる。

特矩の温良において容器を框直の敷設にして気生物の培
養を行ない、その成長は液状培養基の　濁により乃至固
形培養基上の泉落又田芝状成長によＱ′Ｏｔ藺できる 汚染微生物の酸生成能力はＰＨによって左右される（Ｆ
ｉ示４シス１ムとくにブロムクレゾール緑（３’、５’
、＋１’、５’、テトラブロムｍクレゾールスルホンフ
タレインノ又はブロムフェノール〃（テトラブロムフェ
ノールヌルホンフタレイン）の変色により０］祝とされ
る。本発明によりこの方法は餓生ｌ吻のカス生成を、容
器がｌ放の神官をＦ向にして適宜な架台に垂直の姿勢に
固定されてカス発生に璃切な容積の培養基微生物懸濁液
が容器から排斥され、これを校正ずみの、１−２しくは
滅菌の、滅菌綿栓で閉じた小管内で側矩するようにして
、検出することを％徴とする。

本発明によりこの方法はそのほか、汚染微生物の諸％性
たとえば病原鋺含南見、カス発生、醗酵活性又は酸生成
が同時に並イーｊＬ″′ｃ求められることをｌ特徴と−
（−る。よって使用された生産酵母の醗酵活性の試験も
本方法に従って実施できる。

別個の真青のためには小管状受器からなり培養層にｃ仮
状及び又は固形の培養基からなり試料を採取−３″る〇 本発明による装置、は試料採取培養装置ａの挿管が同時
に訓育すべき液体のための吸入枝管とし′１：またカス
発生の際に排斥寧れる培養基病原菌層ｉ　ｒｌｌ　Ｑの
ための〃ＩＬ出枝ちとしても形成してあり昭ましくは直
径が３１１ｎ未満であり、滅菌の栓をＭえ℃目盛つき６
１１１定容器内に突入して保持されることを’ＩＩ　徴
とする。そのほかこの県政は一つ又はいくつかの固）１
ソ培養基のための容器が液状培鉾基のための容器の外部
に望ましくは区分さ７’した容器として！（突の又はガ
ス充填の室のかたわらに配置道してめ９１Ｉ！ＩＪ形培
養基用の支持部が設ｖｊて・ろることを特徴とする。

本発明による方法及び装置の利点は本発明がガス元生性
及び酸生成性微生物を同時に検出することを０］能にす
ることにある。提案されている公知の方法と違って本方
法はそのことによつ″′Ｃ醗酵及び飲料工業／ｊらびに
劇似の工業分野において自利に応用される。

公知の装置に比べて別個のガス採棺装屓は必襞がない。

カス発生は培養基が試料採取枝管から逸出することによ
って示されるからである。

公知の方法とは違って醗酵活性し母の存在の場合に郷化
中に両層の真青のための試を［の採取ができる。

このシステムは汚染微生物の検出のみでなく生産酵母の
醗酵活性の確認のためにも適している。

１６Ｊ形培養基のための体は装置の外部Ｖこ配直しであ
る。固形培養基の対応の接槙の后ＶＣは培養基を立てて
郷化する。従って染洛生戚はただちに祝紹できる。この
装置の別のオロ点は在来の方法に比べて、請査丁べき培
養基を直接採取によりたとえば試料採取の目的で膜を穿
刺して採取−ｇ−るので、試料の汚染はほとんど起り舟
ないことにある。

本発明による方法及び装置を以下実測ｔすについて示し
ｉ兄明する。

（清涼飲料中の１１ζｌ酵性及び酸生成性有磯体の同時
検出の場合には汚染物質の調査に先立って一般に威生物
学的訓食の除に龍常行なわれるとおり飲料の脱炭酸を行
なわなくてはなら７．Ｃい。

調査区マ・＋に１ハシ、餡の指示楽溶峨を加え、その際
には採取培養システムの培・Ｍ基中に用いである指示薬
が用いられる。試料には成田の水酸化ナトリウム規定溶
成を加えて、付イ、Ｅしてめる酸が大幅に中和されて指
示薬の色の転換するに至る。

採取培案装置の吸入枝管を可食すべき試料に浸し培養基
容器に接紗する。容器内の負圧が作用して調査液体が１
廿養基中へ流入する。

１投柚ずみの装置は慎重に揺動させて試料と培養基とが
確実によく混合されるようにする。引続いて接１市ずみ
の装置を垂直の姿勢とし残液がある場合にはン岡をりυ
つた）＝に開放の吸べ枝盲ンＦに同けたまま、戚１：ｄ
の圃・１♀ン施こした仝の載−の伐止すみ訂凝容器上ｉ
ｌ？ｌ：１遅さ、その隙に枝ｄは綿栓を責かせる。

装置全体を架台に取付０Ｊて３０Ｃにおい又り１１化さ
ぜる。

採取培養システムとしては第３図に示した説の不発明の
装置が役立ら、これでは排出枝管か改変してあり、υ１
１出する培養＆９ｇｌ９．困助Ｓ濁故のための校正ずみ
目盛つき肘凰芥器取句の可能１午がある。毎日液状培養
基の　濁、試料採散培養装置Ｎから０１斥される培養基
病原菌懸濁液の容積及び指示薬色調の変化を検査する。

調査結果を第１図に示す。

レモネード原液中の醗酵性及び酸生成性南機体の同時検
出の場合、刺青に先立って原液を滅菌水で希釈し、上記
のＬかたと同様にし″Ｃ滅昆の指示薬を加え、ＰＨ値を
滅菌の水酸化ナトＩＪウム規定溶液により調整する。后
続の諸段階は上記のとおり行なわれる。病原菌負荷御ｊ
定にあたっては希釈倍数を考＃ｉ、″′ｆべきである。

調査結果を第２図に示す。

大腸固型の病原菌の俟出の場合は採取培養システムに特
殊な培養基たとえばゲンチアナ−胆汁ラリドース／行欣
を７１？）た丁。試料の準備ならびに自責−事べき散体
の充填及び眉続の病原菌の瞬化もＥ記と同様に行なわれ
る。

ヒストンにより又は系内の負圧により正確に定めた童７
ことえは１又は５−の試料を試料採取培養装置内へ吸入
する。試料の１トン化及び評価のノ５にガス発生はなし
で試料容積ｌ−又は５ゴにおいてｒ陰注大腸菌型到菌を
示″′ｆ結果となる。

汚染物賀検出用装置戊は公知のとおり破壊壊７を介して
折取口」龍のガラス元端２及び挿管３を備えた培養容器
からなる。この挿管３は同時に調査−すべき成体試料の
ための吸入枝管としてまたカス発生の除に排斥される培
養基病原菌１敞濁液のための鹿、出４支管としても形１
．＆　Ｌ　”Ｃある。望ましくは直径が３間未イ両であ
り培養層に成田の栓１３を超えて目盛つきｄ［蹴容器４
内に突入して保持される。

培養容器ｌ内には液状培養基５がありこの容器１外には
一つ又はいくつかの固形培養基６のためのカラス容器Ｉ
Ｏが配置１　してめる。この゛容器１０は望ましくは１
ス分Ｌ″′Ｃある′容器とし工具室の又はガス充填の室
９のかたわらにありかつ固形培養基６のための支持部Ｈ
が設けである。ｉｌ／ｐ化Ｂれた固形培養基６の病原菌
ル鞠査のため試料採取はカラス容器１１を破壊壌８のと
ころで開いた后にこＩＬから行なわれる。

【図面の簡単な説明】

第１図は清涼飲料中の病原菌のガス発生につい℃のグラ
フ 第２図はレモネード原欣中のプ内１京閑０ガス発生につ
いてのグラフ 第３因は本発明による装置でめつ℃さまさまな用途のも
の ａ）液状培養基用のヒストンつき開放容器システム ｂ）液状及び固形培養基用のヒストンつき開放容器シス
テム 第４図は１１】」じく 即成状培養基用の閉鎖容器システム ｂ）散状及び同形培養糸用閉鎖芥器システムを示−１０ １、・・・培養容器 ２、・・・折取可能のガラス尖端 ３、・・・挿管 ４、・・・目盛つき８１暇容Ｒ診 ５、・・・故状櫓養基 ６、・・・固ｊし培＃基 ７、・・・容器ｌ用の破壊譲 ８、・・・ガラス容器１に用の破壊嬢 ９、・・・真窒（カス充填）室 １０、・・・同形、ｌ＠養基６　Ｊｉｌのカラス容器■
、・・・支荷都 稔、…ピストン Ｂ、・・・滅菌の栓 イベ（オｉ７−＋丁、！−イう二　上角）−籐図面の浄
告−（内存に変更なし） 第　ｌｌ！！ １　　　２　　　３　　４　　υ 第　３５！１ ａ　　　　　　　　　　　　ｌ） ＃Ｅ　４　図 ａ　　　　　　　　　　　　　ｂ 第１頁の続き ０発　明　者　アルツール・クンッ ドイツ民主共和国８３０１ブルクハ ルツヴアルデヌンメル６０ ＠発　明　者　ブリギッチ・シュドローペルドイツ民主
共和国８０４６ドレスデ ン・ラテナー・シュトラーセ５９ 手続補正書 昭和５７年１２月１７日 特許庁長官　若杉　和夫　　殿 １、事件の表示 昭和５７年特願第　１３６７９９号 ２、発明の名称 汚染物質検出の方法及び装置 ３、補正をする者 事件との関係　特許出願人 住　所　　ドイツ民生共和国　６４２　ノイハウス　エ
ル　ヴエゲエ　ゾンネペルガー　シュトラーセ　７３名
　称　　フオルクスアイグナー　ベトリープ　ファルマ
グラスヴエルク　ノイハウス ４、代理人 住　所　　東京都中央区日本橋２−６−３　　斉藤特許
ビル６、補正の内容　別紙の通り。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １　食料品工業における汚染物質検出法であって、病原
   菌含有の液体又は調査の目的で公知の方法に従って病原
   菌を導入する液体を複合試料採取培養装置内において選
   ばれた城の培養基と混合するものにおいて、引続いての
   培養基病原菌）セ濁液の培養は試料採取培養装置の下方
   μ目数の排出枝管上方で行なわれ、培養中に調査微生物
   によるカス発生の場合は同価の１１１す定ａＪ能Ｍの培
   養基病原菌！懸濁液がＭＣ出しその際指示系含有の培養
   基の濁度及び色彩変化と関連して同時にアナログ数値を
   もって汚染微生物の病原菌含有量、ガス発生、酸酢活性
   及び酸生成についての定量的報告が行なわれることを特
   徴とする方法 ２　培９容器の別個の物分に一つ又はいくつかの固形培
   養基が４１加的にもたらしてあり、調査丁べき液体の導
   入店にこれら同形培養基上において調査病原園の東落菌
   芝状成表き行なわれ、培饗后に顕微鏡倹食及び又はその
   他の脚管ならびに微生物の繁殖のための試料を採取する
   ことを特徴とする／ｌ！肝請求の範囲第１ＪＪ４記載の
   方法 ３　培養容器、折取可能のガラス鋏光端、挿管及び破壊
   様ならびに液状及び固形培養基を倫えた複合試料採取培
   養装置からなる汚染物置検出装置において、挿管（３）
   は同時に、副食丁べき液体のための吸入枝抽′として４
   だガス発生の際に排　される培養基病原菌懸濁／汐のた
   めの排出宜としても形成しており、頃ましくは１貝径が
   ３門未鈎であり、滅丙の程ｄ４を超えて目盛つきｉｔ　
   ｄｉす容器（４）内に突入して保持してめることをｔＰ
   ｆ徴とする装置。 ４　液状培養基（５）のための培害容器（すの外部に一
   つ又はいくつかの固形培養基（６〕のための、−（まし
   くは区分さハた容器としてのカラス容器Ｑｌかに’Ｅの
   又はガス充填の室（９）のかたわらに配醸してあり筐だ
   固形培養基（６）用支持部αｐかｉ′化けであることを
   特徴とする特ｉｉ’ｆ　ｇ＃求の範囲第３墳Ｈｔ戦の装
   置唯