JPS59204122A - 人の悪性腫瘍細胞増殖抑制剤の製造方法 - Google Patents

人の悪性腫瘍細胞増殖抑制剤の製造方法

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JPS59204122A
JPS59204122A JP58078300A JP7830083A JPS59204122A JP S59204122 A JPS59204122 A JP S59204122A JP 58078300 A JP58078300 A JP 58078300A JP 7830083 A JP7830083 A JP 7830083A JP S59204122 A JPS59204122 A JP S59204122A
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Tomoyuki Tajima
知行 田島
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Koken Co Ltd
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    • A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A61K35/13—Tumour cells, irrespective of tissue of origin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
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    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 この発明は、人を含む動物の悪性腫瘍細胞の増殖抑制剤
の製造方法に関する。
この発明は、例えば、まず成長用培地において培養した
動物の悪性腫瘍細胞を、抽出用培地に移した後、同培地
において培養し、次に同培地から前記悪性腫瘍細胞を除
去し、その培地を分子量５００で分画する限外濾過膜で
限外濾過し、分子量５００以上の分画の物質を採取して
動物の悪性腫瘍細胞の増殖抑制剤を製造することにある
。
特願昭５７−１４３３４０号中に記載のように、動物の
悪性腫瘍細胞を培養後、同胛瘍細胞を除いて抽出して得
られた物質は、正常細胞に対しても多少の増殖抑制が認
められるが、悪性腫瘍細胞に対して著しい増殖抑制力が
ある。抽出用培地において３０℃〜３７℃で培養し、次
に悪性腫瘍細胞を除去し、次いでその培地を例えばアミ
コン社製ＵＭＯ５，またはＹＡＯ５などの分子量５００
で分画する限定濾過膜で限定濾過を行い、分子量５００
以上の分画と５００未満の分画とに分【ノ、その各々の
分画について培養癌細胞の増殖抑制効果を調べると、分
子量５００以上の分画により採取した物質は、５００未
満の濾過液と比べ、より君しい増殖抑制力があり、希釈
してもなお高率の増殖抑制力を示し、分子量５００未満
のものより、有効成分が濃縮されていることが解かる。
また、この製造方法により得られた悪性腫瘍細胞増殖抑
制剤は、在来の抗腫瘍剤のような副作用がほとんどない
と考えられる。
次に、この発明の実施例について述べる。
（１）実験材料とした細胞 ヒト腎細胞癌由来株化細胞ＨＲＣ （２）抽出培養用培地 無血清のＢａ５ａｌ　　Ｍｅｄｉｕ＋ｎＥａｇｌｅ（Ｂ
ＭＥ）ｄｉｐｌｏｉｄ用を使用した。
（３）培養方法 １５００ｍ２の低面積を持つ培養壜に５０ｍ＋１のＢＭ
Ｅと共に２Ｘ１０７個以上のヒト腎細胞由来株化細胞１
−Ｉ　ＲＣを加え、−週間培養する。その後、例えばア
ミコン社製のＵＭＯ５、またはＹＡＯ５等の分子量５０
０で分画する限外濾過膜で限外濾過を行い、分子量５０
０以上の分画と５００未満の分画とに分（ブ、各々の物
質を採取する。
次に、この発明の効果を確認するための実験について述
べる。
（１）悪性腫瘍細胞増殖抑制剤の検定法１５１１１１１
１径のプラスチックシャーレにヒト腎細胞由来株化細胞
ＨＲＣ１０４個を植え込み、通常のごとく、１０％牛血
清添加ＢＭＥにて２４週間培養する。次に、前記実施例
の方法で採取した分子ｆｆ１５００以上の分画の物質を
ｆｒ、ｌとし、５００未満の分画の物質をｆｒ。
２とし、これら各群の培地に新たに最初のＢＭＥと同量
のアミノ酸類、ビタミン類、グルコースを添加し、先の
２４週間培養した培地と、これらの採取した物質を含む
培地を培地交換し、６日間５％ＣＯ２，１００％湿度の
中、３７℃で培養を行い、ヒト腎細胞由来株化細胞ＨＲ
Ｃの増殖を調べた。
２）実験結果 表は、悪性腫瘍細胞の増殖阻止率を表わしたもので、加
えたヒト腎細胞由来株化細胞ＨＲＣから各々の生存数を
引いた数を増殖阻止数とし、分子量５００以上の分画よ
り得た物質を含むものの増殖阻止数とに対して５００未
満の分画より得た物質を含むものの増殖阻止数と限定濾
過膜にかけずに得たもの（Ｗ＋１０１０）の増殖阻止数
を百分比（％）にして算出した。また、２倍に希釈した
場合についても同様に増殖阻止率を算出した。
この結果、分子量５００以上の分画ｆｒ、　１に著しい
増殖抑制効果が見られ、希釈しても効率の増殖抑制効果
が見られ、伯の群より有効成分が濃縮されていることが
解り、しかも二つのロットに共通の結果が得られ、再坦
性が確認された。
（表）

Claims (1)

    【特許請求の範囲】
  1. 動物の悪性腫瘍細胞を培養し、次に培地から悪性腫瘍細
    胞を除去し、次いで該培地を分子１５００で分画する限
    外濾過膜で限定濾過し、分子量５００以上の分画の物質
    を採取することを特徴とする動物の悪性腫瘍細胞増殖抑
    制剤の製造方法。
JP58078300A 1983-05-06 1983-05-06 人の悪性腫瘍細胞増殖抑制剤の製造方法 Granted JPS59204122A (ja)

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US06/583,011 US4595657A (en) 1983-05-06 1984-02-23 Process for preparing an inhibiting agent against proliferation of animals malignant tumor cells
EP84303035A EP0125125A3 (en) 1983-05-06 1984-05-04 An agent for inhibiting the proliferation of malignant tumour cells and a process for the preparation thereof

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JPS59204122A true JPS59204122A (ja) 1984-11-19
JPH0472807B2 JPH0472807B2 (ja) 1992-11-19

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EP0125125A2 (en) 1984-11-14
US4595657A (en) 1986-06-17
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EP0125125A3 (en) 1986-10-08

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