JPS59109171A - 酵母菌体の処理方法 - Google Patents
酵母菌体の処理方法Info
- Publication number
- JPS59109171A JPS59109171A JP21876882A JP21876882A JPS59109171A JP S59109171 A JPS59109171 A JP S59109171A JP 21876882 A JP21876882 A JP 21876882A JP 21876882 A JP21876882 A JP 21876882A JP S59109171 A JPS59109171 A JP S59109171A
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- JP
- Japan
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- low
- cell
- treatment
- aqueous solution
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
本発明り有用物質を縦積した酵母菌体の処理法及びその
処理法を応用した有用物質の回収法に関し、さらに詳し
くは、菌体内の細胞質中に存在する低分子化合物を選択
的に体外に排出せしめる酵母菌体の処理法及びかかる９
ｊｔ理によって体外に排出された低分子化合物から効率
よく有用物質を回収する方法に関する。
処理法を応用した有用物質の回収法に関し、さらに詳し
くは、菌体内の細胞質中に存在する低分子化合物を選択
的に体外に排出せしめる酵母菌体の処理法及びかかる９
ｊｔ理によって体外に排出された低分子化合物から効率
よく有用物質を回収する方法に関する。
酵母を用いる発酵法は従来から広く知られており、 １
９＋１えげグルタミン酸、リジンなどのごときアミノ酸
、ビタミンＢｔ、ビタミンＢｌｔなどのビタミン類、ヌ
クレオシド、ヌクレオチド、Ｄ Ｎ Ａ。
９＋１えげグルタミン酸、リジンなどのごときアミノ酸
、ビタミンＢｔ、ビタミンＢｌｔなどのビタミン類、ヌ
クレオシド、ヌクレオチド、Ｄ Ｎ Ａ。
ＲＮＡなどの核酸類、各種酵素などを生産する方法とし
て巾広く利用されている、 而して、かかる方法の場合、目的とする有用物質は概し
て菌体内に蓄積されるため、有用物質を回収するにあた
って細胞を破砕して有用物質を体外に分離する必要があ
り、その目的のためには一般に乳鉢、ホモジナイザー、
ミキサーなどで機械的に磨砕する方法、自己消化によυ
溶菌する方法、過塩素酸、イ流酸、蟻酸、ｒ酢酸、酢酸
エチル、アセトン、トルエンなどの薬剤でり１理する方
法、細ハｌｑ壁浴屏酵素で処理する方法などが適宜行わ
れでいる。
て巾広く利用されている、 而して、かかる方法の場合、目的とする有用物質は概し
て菌体内に蓄積されるため、有用物質を回収するにあた
って細胞を破砕して有用物質を体外に分離する必要があ
り、その目的のためには一般に乳鉢、ホモジナイザー、
ミキサーなどで機械的に磨砕する方法、自己消化によυ
溶菌する方法、過塩素酸、イ流酸、蟻酸、ｒ酢酸、酢酸
エチル、アセトン、トルエンなどの薬剤でり１理する方
法、細ハｌｑ壁浴屏酵素で処理する方法などが適宜行わ
れでいる。
しかし、これらの一般的な分離法では、処理によって細
１荊壁が破壊されるために目的とする不用物質ばかりで
なく菌体内ｅこ蓄積１〜た物質が全−Ｃ排出されること
になり、その後の分離精製操作がきわめて煩雑化すると
いう欠点があり、また薬剤を用いる場合には中和工程が
必要となったり有用物質の分解や毒性の原因となるとい
った問題がある。
１荊壁が破壊されるために目的とする不用物質ばかりで
なく菌体内ｅこ蓄積１〜た物質が全−Ｃ排出されること
になり、その後の分離精製操作がきわめて煩雑化すると
いう欠点があり、また薬剤を用いる場合には中和工程が
必要となったり有用物質の分解や毒性の原因となるとい
った問題がある。
而して、これらの問題点は、安全な物質を用いて菌体内
の有用物質のみを選択的に体外に分離することができれ
ば一挙に解決することができる。
の有用物質のみを選択的に体外に分離することができれ
ば一挙に解決することができる。
そこで、本発明者らはかかる課題を解決すべく鋭意検討
を進めた結果、二価鋼イオンの水浴液で酵母菌体を処理
する場合にｔま、細胞質中の特定な物質だけが選択的に
体外に排出されることを見い出し、本発明を完成するに
到った。
を進めた結果、二価鋼イオンの水浴液で酵母菌体を処理
する場合にｔま、細胞質中の特定な物質だけが選択的に
体外に排出されることを見い出し、本発明を完成するに
到った。
本発明の第一の］」的は、安全かつ囲単な操作で、ｖｌ
ｌＩ胞内の成分を分離することが可能な酵母菌体の処理
方法を提供することにあり、第二の目的は細胞質中に存
在する低分子化合物から目的とする有用物質を簡単な操
作で効率よく回収する方法を提供することにある。
ｌＩ胞内の成分を分離することが可能な酵母菌体の処理
方法を提供することにあり、第二の目的は細胞質中に存
在する低分子化合物から目的とする有用物質を簡単な操
作で効率よく回収する方法を提供することにある。
而して、不発ψ」の第一の目的は菌体内に有用物質を蓄
積した酵母菌体を二価銅イオンの水浴液と接触させ、細
ｍｏｔ液中の低分子化合物を体外に排出せしめることに
よって達成される。
積した酵母菌体を二価銅イオンの水浴液と接触させ、細
ｍｏｔ液中の低分子化合物を体外に排出せしめることに
よって達成される。
本発明において用いらり、る酵母菌体は、有用物質とし
てグルタミン酸、リジン、アスパラギン酸、グルタミン
、ホモセリン、ロイシン、メチオニン、トリプトファン
、スレオニンなどのごときアミノ酸類、ビタミンＢＩＴ
１ ビタミンＢｔ、ビタミンＢ８、ビタミンＦ’＋ｔ、
パントテン酸などのごときビタミン類、ヌクレオシド、
ヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、Ｉ）ＮＡ、ＲＮＡ
などのごとき核酸類、Ｓ−アデノシル−Ｌ−メチオニン
（以下、ＳＡＭと称する）、グルタチオンなどのごとき
生理活性物質、グロテアーゼ、ＤＮＡポリメラーゼなど
のごとき歩白冴などを適宜含有するものである。かかる
酵母菌体は製法によって格別制限されるものでｔよなく
、常法に従って培養されたものであれば適宜使用するこ
とができる。
てグルタミン酸、リジン、アスパラギン酸、グルタミン
、ホモセリン、ロイシン、メチオニン、トリプトファン
、スレオニンなどのごときアミノ酸類、ビタミンＢＩＴ
１ ビタミンＢｔ、ビタミンＢ８、ビタミンＦ’＋ｔ、
パントテン酸などのごときビタミン類、ヌクレオシド、
ヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、Ｉ）ＮＡ、ＲＮＡ
などのごとき核酸類、Ｓ−アデノシル−Ｌ−メチオニン
（以下、ＳＡＭと称する）、グルタチオンなどのごとき
生理活性物質、グロテアーゼ、ＤＮＡポリメラーゼなど
のごとき歩白冴などを適宜含有するものである。かかる
酵母菌体は製法によって格別制限されるものでｔよなく
、常法に従って培養されたものであれば適宜使用するこ
とができる。
用いられる閑の具体例としては、例えばサツカロマイセ
ス属、ピキア属、ハンゼヌラ属、シゾザツ力ロマイセス
属、サツカロマイコデス属、ハンゼニアスボラ極、トル
ログシス属、キャンデイダ属、ロドトルラ川、クルペロ
マイセス属などがあり、なかでもサツカロマイセス鵬、
ハンゼヌラ属、キャンデイダ属、クルベロマイセス属、
シゾサッ力ロマイセス楕に夙する酵母、とくにサツカロ
マイセス楓に属する酵母”が賞月される。しかし、酵母
以外の微生物、例えば大腸菌に本発明の処理を適用して
も所期の目的を達成することはできない。
ス属、ピキア属、ハンゼヌラ属、シゾザツ力ロマイセス
属、サツカロマイコデス属、ハンゼニアスボラ極、トル
ログシス属、キャンデイダ属、ロドトルラ川、クルペロ
マイセス属などがあり、なかでもサツカロマイセス鵬、
ハンゼヌラ属、キャンデイダ属、クルベロマイセス属、
シゾサッ力ロマイセス楕に夙する酵母、とくにサツカロ
マイセス楓に属する酵母”が賞月される。しかし、酵母
以外の微生物、例えば大腸菌に本発明の処理を適用して
も所期の目的を達成することはできない。
本発明にふいでｔま、培養液中の菌体を常法により集１
し、必要に応じて洗浄したのち、二価鋼イオン水溶液に
よる処理が行われる。かかる処理は菌体と餉イオン水溶
液を接触させるだけでよく、この処理によって細胞質中
に存在するアミノ酸類、低級ペプチド類、ビタシン類、
ヌクレオシド、ヌクレオチドなどのごとき数平均分子量
１．０００以下、とくに５００以下の低分子化合物は速
やかに体外に排出され、他方、ＤＮＡ、ＲＮＡ、蛋白質
、多楯類などの高分子化合物や、ＨＡＭ、アルギニンな
どのごとき液泡内に存在する物質は菌体内に残留する。
し、必要に応じて洗浄したのち、二価鋼イオン水溶液に
よる処理が行われる。かかる処理は菌体と餉イオン水溶
液を接触させるだけでよく、この処理によって細胞質中
に存在するアミノ酸類、低級ペプチド類、ビタシン類、
ヌクレオシド、ヌクレオチドなどのごとき数平均分子量
１．０００以下、とくに５００以下の低分子化合物は速
やかに体外に排出され、他方、ＤＮＡ、ＲＮＡ、蛋白質
、多楯類などの高分子化合物や、ＨＡＭ、アルギニンな
どのごとき液泡内に存在する物質は菌体内に残留する。
銅イオン処理に見られるかかる＋Ａ（ＪＪ、はきわめて
特異的なものであり、他の二価金属イオン、例えばＭｇ
＋＋、 ｃａ＋＋、 ｓｒ＋＋、 Ｂａ＋＋、 Ｍｎｎ
＋１ ｐ’Ｑ＋＋、００＋＋、Ｎ１＋＋、ｚｎ＋士、ｓ
ｎ＋＋、Ｐｂ＋＋、Ｈｇ＋＋を用いる場合には本発明の
効果を秦することができない。
特異的なものであり、他の二価金属イオン、例えばＭｇ
＋＋、 ｃａ＋＋、 ｓｒ＋＋、 Ｂａ＋＋、 Ｍｎｎ
＋１ ｐ’Ｑ＋＋、００＋＋、Ｎ１＋＋、ｚｎ＋士、ｓ
ｎ＋＋、Ｐｂ＋＋、Ｈｇ＋＋を用いる場合には本発明の
効果を秦することができない。
銅イオン水溶液による処理条件は目的に応じて適宜選択
すればよいが、通常は水または緩衝液中に菌体を懸濁さ
せたのち、銅イオン水浴液を加えて放＠、または攪拌す
ることによって行われる。このときのｐ ｎ ）よ通常
５〜７．５、好ましくは５．５〜７であり、懸濁液中の
菌体含ｔは湿菌重量基準で通常１〜５０重址チ、好まし
くは５〜５０重ｉ％であり、接触温度及び接触時間は通
常０〜ＳＯＣで１０分〜３時間、好ましく祉２０〜４０
Ｃで３０分〜２時間である。
すればよいが、通常は水または緩衝液中に菌体を懸濁さ
せたのち、銅イオン水浴液を加えて放＠、または攪拌す
ることによって行われる。このときのｐ ｎ ）よ通常
５〜７．５、好ましくは５．５〜７であり、懸濁液中の
菌体含ｔは湿菌重量基準で通常１〜５０重址チ、好まし
くは５〜５０重ｉ％であり、接触温度及び接触時間は通
常０〜ＳＯＣで１０分〜３時間、好ましく祉２０〜４０
Ｃで３０分〜２時間である。
用いられる銅イオンの供給源は水溶性の銅イオン化合物
であれはいずれでもよく、その具体例として、例えば塩
化第二銅、臭化第二銅、硫酸第二銅、酢酸第二銅などが
挙けられる。かかる銅イオンの添加量は、通常、懸濁液
中の銅イオン濃度で５／ｊＭ以上、好ましくは１０〜５
００μＭである。
であれはいずれでもよく、その具体例として、例えば塩
化第二銅、臭化第二銅、硫酸第二銅、酢酸第二銅などが
挙けられる。かかる銅イオンの添加量は、通常、懸濁液
中の銅イオン濃度で５／ｊＭ以上、好ましくは１０〜５
００μＭである。
本発明の第二の目的Ｆよ、細胞質中に有用な低分子化合
物を蓄積した酵母菌体を前記したごとく二価鋼イオンで
処理することによって該低分子化合物を菌体外に排出さ
せ、しかるのち排出物中から目的とする有用物質を回収
することによって達成される。
物を蓄積した酵母菌体を前記したごとく二価鋼イオンで
処理することによって該低分子化合物を菌体外に排出さ
せ、しかるのち排出物中から目的とする有用物質を回収
することによって達成される。
排出された低分子化合物中から有用物質を回収する方法
は常法にｖｔって行えばよく、例えばイオン又換クロマ
トグラフィー、ゲルｐ過、成気泳動、溶剤沈澱などの処
理が適宜使用される。
は常法にｖｔって行えばよく、例えばイオン又換クロマ
トグラフィー、ゲルｐ過、成気泳動、溶剤沈澱などの処
理が適宜使用される。
かかる本発明によれば、低濃度での銅イオン処理という
安全性の高い、かつ１ｍ年な操作によって菌体内の低分
子化合物とその伯の物質を効率よく分離することができ
、その結果として低分子化合物中にある有用物質の回収
をきわめて容易に行うことができる。また目的とする有
用物質が菌体内に残存する場合にも、夾雑物となる低分
子化合物が予め除去されているため分離精製をきわめて
効率的に行うことができる。
安全性の高い、かつ１ｍ年な操作によって菌体内の低分
子化合物とその伯の物質を効率よく分離することができ
、その結果として低分子化合物中にある有用物質の回収
をきわめて容易に行うことができる。また目的とする有
用物質が菌体内に残存する場合にも、夾雑物となる低分
子化合物が予め除去されているため分離精製をきわめて
効率的に行うことができる。
以下に実施例を挙げて本発明をさらに具体的に説明する
。なお、実施例及び比較例中の部は重量基準である。
。なお、実施例及び比較例中の部は重量基準である。
実施例１
ＹＦｉＰＤ培地（イーストエキストラクト１％、バクト
ベブトン２チ、グルコース２１で培養したサツカロマイ
セス・セレビシェ（ジａｃｃｈａｒｏ遭り木１−−Ｏ−
ｅ ｒ ｅ ｖ−１＊リーａｓ） Ｘ２１８０−１八を
培養して得た菌体１部（湿菌体）を１００μＭ の塩化
第二銅水溶液１００部に加えて懸濁させたのち、５０Ｇ
でゆつく９と攪拌した。所定時間後、水浴液中に存在す
るヌクレオチド類、アミノ酸類及び蛋白質の濃度を測定
し、それに基づいて乾燥菌体１７当りの割合を算出した
。結果を第１表に示す。
ベブトン２チ、グルコース２１で培養したサツカロマイ
セス・セレビシェ（ジａｃｃｈａｒｏ遭り木１−−Ｏ−
ｅ ｒ ｅ ｖ−１＊リーａｓ） Ｘ２１８０−１八を
培養して得た菌体１部（湿菌体）を１００μＭ の塩化
第二銅水溶液１００部に加えて懸濁させたのち、５０Ｇ
でゆつく９と攪拌した。所定時間後、水浴液中に存在す
るヌクレオチド類、アミノ酸類及び蛋白質の濃度を測定
し、それに基づいて乾燥菌体１７当りの割合を算出した
。結果を第１表に示す。
なお、ヌクレオチド類の定Ｊｕｔ−ｔ：紫外線（２６０
ｎｎりの吸光度及び高速液体クロマトグラフィーにより
、アミノ酸の定積はフルオレサミンによる螢光法により
、また蛋白質の定Ｍ、は「）−ソー法により行った。
ｎｎりの吸光度及び高速液体クロマトグラフィーにより
、アミノ酸の定積はフルオレサミンによる螢光法により
、また蛋白質の定Ｍ、は「）−ソー法により行った。
第１表の結果から、銅イオン水溶液と接触させることに
よってヌクレオチドやアミノ酸は速やかに抽出されるが
、蛋白質は冶ど抽出されないことがわかる。
よってヌクレオチドやアミノ酸は速やかに抽出されるが
、蛋白質は冶ど抽出されないことがわかる。
第１表
実施例２
鋼イオン水溶液の濃度または銅化合物の種類を変えるこ
と以外は実施例１と同様にして試験を行い、抽出された
ヌクレオチド類の量を測定した。
と以外は実施例１と同様にして試験を行い、抽出された
ヌクレオチド類の量を測定した。
結果を第２表に示す。
第２表
比較例１
塩化第二銅に代えて他の２価金楓化合物を用いること以
外は実施例１に準じて試験を行い、ヌクレオチド類の抽
出状況を調べた。なお、２６Ｑｎｍの吸光度はヌクレオ
チド類の存在を示すものである。結果を第５表に示す。
外は実施例１に準じて試験を行い、ヌクレオチド類の抽
出状況を調べた。なお、２６Ｑｎｍの吸光度はヌクレオ
チド類の存在を示すものである。結果を第５表に示す。
第 ３ 表
−１１−
この結果から、水銀イオンを用いる場合にややヌクレオ
チド類の抽出が認められるが、七の他の場合には殆ど抽
出されていないことがわかる。なお、塩化第二銅を用い
る試験例を第５表と同様の評価法で表示すると、０．１
０８（０分）、０９０１（５０分）、ｔ０６７（６０分
）となり、水銀イオンを用いる場合に比較してもきわめ
て優れた抽出効率を有することがわかる３、 実施例５ 実施例１で用いた菌体に代えて第４表に示すごとき菌体
を用いること以外は実施例１と同様にして試験を行い、
抽出されたヌクレオチド類及びアミノ酸の量を測定し、
乾燥函体１￥当りの割合を算出した。結果を第４表に示
す。
チド類の抽出が認められるが、七の他の場合には殆ど抽
出されていないことがわかる。なお、塩化第二銅を用い
る試験例を第５表と同様の評価法で表示すると、０．１
０８（０分）、０９０１（５０分）、ｔ０６７（６０分
）となり、水銀イオンを用いる場合に比較してもきわめ
て優れた抽出効率を有することがわかる３、 実施例５ 実施例１で用いた菌体に代えて第４表に示すごとき菌体
を用いること以外は実施例１と同様にして試験を行い、
抽出されたヌクレオチド類及びアミノ酸の量を測定し、
乾燥函体１￥当りの割合を算出した。結果を第４表に示
す。
１２−
１３一
実施例４
実権例１で用いた菌体５００部を５００部Ｍの塩化第二
銅水溶１１ｏ、ｏｏｏ部に懸濁し、５０Ｃで３０分間攪
拌した後、菌体を除去した。次いで回収した抽出液に含
まれるニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（ＭＡＤ
）の量をアルコールデヒドロゲナーゼを用いる酵素法
で定量したところ、０．２１２部であることがわかった
。
銅水溶１１ｏ、ｏｏｏ部に懸濁し、５０Ｃで３０分間攪
拌した後、菌体を除去した。次いで回収した抽出液に含
まれるニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（ＭＡＤ
）の量をアルコールデヒドロゲナーゼを用いる酵素法
で定量したところ、０．２１２部であることがわかった
。
この抽出液を＠酸型強酸性イオン変換樹脂（ダウエック
ス ｌＸ−８、ローム・アンド・バー４製）に通してＮ
ＡＤを吸着させたのち、流出液の２６０ｒＬｎ＋吸光度
が０．１以下になるまで水洗し、その後、蟻酸４Ｍと蟻
酸アンモニウム０．２Ｍの混合水溶液でＮＡＤを溶出し
た。かくして得られたＮ Ａ、 Ｄの溶出液を昇華及び
凍結乾燥により順次精製した結果、０．１７０部のＮＡ
Ｄが得られた。
ス ｌＸ−８、ローム・アンド・バー４製）に通してＮ
ＡＤを吸着させたのち、流出液の２６０ｒＬｎ＋吸光度
が０．１以下になるまで水洗し、その後、蟻酸４Ｍと蟻
酸アンモニウム０．２Ｍの混合水溶液でＮＡＤを溶出し
た。かくして得られたＮ Ａ、 Ｄの溶出液を昇華及び
凍結乾燥により順次精製した結果、０．１７０部のＮＡ
Ｄが得られた。
実施例５
実施例１と同様にして６０分間攪拌したのち、抽出液中
のＮＡＤを定量したところ、その抽出液は乾燥菌体１１
当り６２μｍｏ／てあった。 また０ Ｄ、ｇｏ物質中
のＮ Ａ ］）の相対純度は１５．４％であった。
のＮＡＤを定量したところ、その抽出液は乾燥菌体１１
当り６２μｍｏ／てあった。 また０ Ｄ、ｇｏ物質中
のＮ Ａ ］）の相対純度は１５．４％であった。
比較例２
実施例１でル１いた菌体１部を１５Ｎ過塩素酸１００部
にＭｌ＠ｔ、、室温で１時間振とり抽出を行ったのち、
炭酸水素カリウムで中和し、生成し之過塙素酸カリウム
の沈澱を除去した。次いで抽出液中のＮ Ａ Ｄを定敏
したところ、その量は乾燥菌体１ｙ−当り！５．０／４
ｍｏ／であり、ＯＤｔｅｏ物質中の相対純度ｖ、２２第
であった。
にＭｌ＠ｔ、、室温で１時間振とり抽出を行ったのち、
炭酸水素カリウムで中和し、生成し之過塙素酸カリウム
の沈澱を除去した。次いで抽出液中のＮ Ａ Ｄを定敏
したところ、その量は乾燥菌体１ｙ−当り！５．０／４
ｍｏ／であり、ＯＤｔｅｏ物質中の相対純度ｖ、２２第
であった。
参考例１
シュシンク（５ｃｈｌｅｎｋ、Ｆ、 ） らの培地〔
ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケミストリー（Ｊ
、Ｂｓ−ｏｌ、Ｃｈｅｍ、）第２２９巻、第１０３７
頁（１９５７年）参照〕でサツカロマイセス（Ｏａｃｃ
＋＋ａｒｏｍｙｃｏｓ−Ｕｅｒｅｙｌｓｉａｅ）工ＦＯ
２０４４を培養して得られたＳＡＭ含有菌体１０部（湿
敏）を蒸留水で２回洗浄したのち、ＰＨ６，４に調整し
たトリス（ヒドロキシメチル）アミノエタン−２−［Ｎ
−モルホリノ〕エクンスルホン酸緩衝液１００部（緩衝
液濃度１０ミリモーラ−）にＭ濁させた。
ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケミストリー（Ｊ
、Ｂｓ−ｏｌ、Ｃｈｅｍ、）第２２９巻、第１０３７
頁（１９５７年）参照〕でサツカロマイセス（Ｏａｃｃ
＋＋ａｒｏｍｙｃｏｓ−Ｕｅｒｅｙｌｓｉａｅ）工ＦＯ
２０４４を培養して得られたＳＡＭ含有菌体１０部（湿
敏）を蒸留水で２回洗浄したのち、ＰＨ６，４に調整し
たトリス（ヒドロキシメチル）アミノエタン−２−［Ｎ
−モルホリノ〕エクンスルホン酸緩衝液１００部（緩衝
液濃度１０ミリモーラ−）にＭ濁させた。
次いで塩化第二銅を１００７１Ｍになるように加えて５
０Ｕで１時間ゆるやかに攪拌し、低分子の夾雑物を菌体
外に排出したのち、集菌し、蒸留水で２回洗浄した。そ
の後、蒸留水５０部に懸濁させたのち、−２ＤＣで５時
間放置して凍結し、次いで２０ｔ、’の水で間接的に加
熱して融ｍ゛させ、得られた懸濁液から遠心分離で不溶
性物質を除き、上せみ液に含まれるＳＡＭの含有線及び
純度を測定り、 タトコロ、８ ＡＭ 含有量１．７０
Ｖ、 Ｂ Ａ、Ｍ相対純度９０．９矛であった。。
０Ｕで１時間ゆるやかに攪拌し、低分子の夾雑物を菌体
外に排出したのち、集菌し、蒸留水で２回洗浄した。そ
の後、蒸留水５０部に懸濁させたのち、−２ＤＣで５時
間放置して凍結し、次いで２０ｔ、’の水で間接的に加
熱して融ｍ゛させ、得られた懸濁液から遠心分離で不溶
性物質を除き、上せみ液に含まれるＳＡＭの含有線及び
純度を測定り、 タトコロ、８ ＡＭ 含有量１．７０
Ｖ、 Ｂ Ａ、Ｍ相対純度９０．９矛であった。。
なお、１３部Ｍの純度は試験液の一部をとり、二次元ペ
ーパー クロマトグラフィーで展開後、ＳＡ、 Ｍのス
ポットを検出し、紫外線検出器で試験液の１３ Ａ 、
Ｍ 濃度を検出し、試験液の０１）、、。の１ｌｌｌｌ
定から次式により算出した。
ーパー クロマトグラフィーで展開後、ＳＡ、 Ｍのス
ポットを検出し、紫外線検出器で試験液の１３ Ａ 、
Ｍ 濃度を検出し、試験液の０１）、、。の１ｌｌｌｌ
定から次式により算出した。
この参考例かられかるように、本発明の処理方法はＳＡ
Ｍのような菌体内に残留する物質の抽出法としても有用
である。
Ｍのような菌体内に残留する物質の抽出法としても有用
である。
特ｉ出願人 Ｈ本ゼオン株式会社
１７−一
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、ｍ体内に有用物質を蓄積した酵母菌体を二価鋼イオ
ンの水溶液と接触させ、細Ｉ泡質中の低分子化合物を体
外に排出せしめることを％徴とする酵母菌体の処理方法
。 ２、 菌体Ｖ」に有用物質を蓄積した酵母菌体を二価銅
イオンの水溶液と接触させ、細胞質中の低分子化合物を
体外に排出せしめたのち、該低分子化合物中の有用物質
を回収することを％徴とする酵母菌体の処理方法。
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP21876882A JPS59109171A (ja) | 1982-12-14 | 1982-12-14 | 酵母菌体の処理方法 |
| US06/560,119 US4599309A (en) | 1982-12-14 | 1983-12-12 | Post cultivation treatment of yeast cells to facilitate product recovery |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP21876882A JPS59109171A (ja) | 1982-12-14 | 1982-12-14 | 酵母菌体の処理方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS59109171A true JPS59109171A (ja) | 1984-06-23 |
| JPH0113357B2 JPH0113357B2 (ja) | 1989-03-06 |
Family
ID=16725087
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP21876882A Granted JPS59109171A (ja) | 1982-12-14 | 1982-12-14 | 酵母菌体の処理方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS59109171A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH04144677A (ja) * | 1990-10-08 | 1992-05-19 | Agency Of Ind Science & Technol | 酵母細胞内物質の抽出法 |
| WO2014162936A1 (ja) * | 2013-04-02 | 2014-10-09 | オリエンタル酵母工業株式会社 | 銅含有酵母抽出物及びその製造方法、並びに食品、及び野菜の緑色保持復元剤 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5243915A (en) * | 1975-10-06 | 1977-04-06 | Hitachi Ltd | Electric motor which has clearance in shaft dirction |
-
1982
- 1982-12-14 JP JP21876882A patent/JPS59109171A/ja active Granted
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5243915A (en) * | 1975-10-06 | 1977-04-06 | Hitachi Ltd | Electric motor which has clearance in shaft dirction |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH04144677A (ja) * | 1990-10-08 | 1992-05-19 | Agency Of Ind Science & Technol | 酵母細胞内物質の抽出法 |
| WO2014162936A1 (ja) * | 2013-04-02 | 2014-10-09 | オリエンタル酵母工業株式会社 | 銅含有酵母抽出物及びその製造方法、並びに食品、及び野菜の緑色保持復元剤 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0113357B2 (ja) | 1989-03-06 |
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