JPS59108723A - 安定なアレルゲン抽出物およびその製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、人間のアレルギー状態を診断し、処置するた
めに用いるアレルゲン物質に関する。更に詳細には本発
明は、アレルギー的に活性な成分をアレルギー状態の診
断及び処置に用いるのに適当な形で濃縮する改良された
方法で調製される植物及び動物源からの改良された抽出
物に関する。

本抽出物はその使用前及び使用中に非常に増大しだ貯蔵
安定性を示す。

種々のアレルゲン抽出物及びそれを調製、貯蔵及び使用
するだめの標準的な商業的方法を含む方法は、Ｒｅｍｉ
ｎｇｔｏｎ’ｓ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　　５
ｃｉ−ｅｎＣｅ、１３４４〜１３５２頁、Ｍａｃｋ、　
Ｅａｓｔｏｎ。

ｐｅｎｎｓｙｌｕａｎｉａ、第１５版（１９７５）　　
に記述されている。広範囲の天然の植物及び動物起源か
らのアレルゲン抽出物及び製造された製品が記述されて
いる。粉砕、脱脂、抽出、清澄、透析、濃縮、滅菌及び
凍結乾燥に関する詳細を含む抽出物の調製法がそとに記
述されている。

アレルゲン抽出物のアレルゲン成分を濃縮し且つ標準化
するだめの多くの努力が過去なされてきた。しばしば沈
殿法と組合せられる溶媒抽出法は米国特許第２．３１６
．３１１号、第３．１４８．１２２号、第３．２８１．
３２３号、第３．５９１．６７７号、第３．９５３．５
８８号、第３．９９５．０２３号、第４゜０２７、００
６号及び第２．３４−７．４３５号に記述されている。

イオン交換法は米国特許第２．９０１．３９８号に記述
されている。これらの方法の主な目的は、特別な抽出法
を用いて得られる不活性な成分から活性なアレルゲン成
分を分離することである。

多くの特許は、アレルゲン成分がホルムアルデヒド又は
他の反応性化学試薬との架橋による如くして化学的に改
変されているアレルゲン化合物の試製法を記述している
。予備的方法として、アレルゲン抽出物は化学反応を妨
害する低分子量成分から分離することができる。この目
的のだめの低分子量成分の除去は米国特許第４．２２６
．８５３号（透析）、第４．２３４．５６９号（超濾過
又はゲル瀘過）、第４．２５６．７３２号（透析）、及
び第４゜１６３．７７８号（透析及びカラムクロマトグ
ラフィー）に記述きれている。上記方法では、水性又は
エタノール性抽出物の溶液を処理して低分子量成分を除
去し、この生成物の水溶液に化学薬品を添加してアレル
ゲン蛋白質の化学的改変を行なう。

同様のことについては、Ｅ、ｐｕｔｔｏｎｅｎら、Ｉｎ
ｔ、　Ａｒｃｈ、Ａｌｌｅｒｇｙ　Ａｐｐｌ、　Ｉｍｍ
ｕｎ、、　６８゜１〜１２（１９８２）の’５ｔｕｄｉ
ｅｓ　ｏｎ　Ａｌｌｅ−ｒｇｅｎ　　ａｎｄ　Ａｌｌｅ
ｒｇｏｉｄ　ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓｆｏｒ　ｐｕｒ
ｉｆｉｅｄ　Ｔｉｍｏｔｌｌｙ　（ｐｈｌｅｕｍ　ｐｒ
ａ−ｔｅｎｓｅ）　ｐｏｌ１６ｎ　Ｅｘｔｒａｃｔｓ”
に記述されている。この文献には、ゲルカラムクロマト
グラフィーによる乾燥されたオオアワガエリの花粉抽出
物の分画が提示されている。この方法では、抽出物の試
料を５ｅｐｈａｄｅｘ　Ｇ　−７５のカラムで分画し、
活性々画分を集め、凍結乾燥する。次いでこの物質の１
部分をホルムアルデヒドと反応させてアレルゴイド生成
物を調製し、元の及び処置した画分の性質を比較する。

ｐｕｔｔｏｎｅｎ　　らの文献に記述をれている凍結乾
燥したオオアワガエリの花粉の中間物は本発明の抽出物
と完全に異なっている。活性画分を集めるだめの試料採
取では、多成分のアルミノが捨てられ、元の抽出物中に
存在するアレルゲンの相対的な割合が保持されない。そ
れ故に凍結乾燥した生成物は元のアレルゲン抽出物の組
成特徴を有する診断又は減感組成物と関係づけることが
できない。

この文献は超沖過を用いる植物抽出剤の分離、吸収剤で
の処理、或いは得られる生成物の貯蔵安定性を増大きせ
るだめの、１重量係以下への含水量の低下について記述
していない。

オオアワガエリの花粉抽出物の安定性の研究は、Ｍ、　
Ｃ，Ａ、ｎｄｅ　ｒ　ｓ　ｏｎ　ら、Ｊ、ＡＩＩｅｒｇ
ｙ　Ｃ１１ｎ。

Ｊｍｍｕｎｏｌ、　６９（１）、３〜１０（１９８２）
、”Ａｎｔｉｇｅｎｉｃ　ａｎｄ　Ａｌｌｅｒｇｅｎｉ
ｃ　ＣｈａｎｇｅＩ）ｕｒｉｎｇ　　Ｓｔｏｒａｇｅ　
　ｏｆ　　ａ　　ｐｏ’１ｌｅｎ　　ｐｘｉｒａｃｔ”
及びそれに引用≧れている文献に開示されている。

オオアワガエリの花粉抽出物の酵素活性が報告され、ア
レルゲン及び抗原蛋白質及び川水化物の熱による変性及
び酵素による分解を含む分解機構が推定きれている。砂
糖分解活性は５０チグリセロ〜ル溶液中で禁止されると
報告されている。

本発明の精製されたアレルゲン抽出物は、元の抽出物の
アレルゲン組成を有し、１重量％以下の含水量を有する
。これは再生した時に、２２°Ｃで１８日間程長く貯蔵
した後でも４００〜７００ｎｍの範囲において０．０１
０．Ｄ以下の吸光度の増加しか示さない透明で無色の溶
液を与える。この抽出物は好ましくは１，０００〜１０
０．０００ダルトンの範囲外の分子量を有する抽出され
た成分を含まない。

アレルゲン抽出物の貯蔵安定性を増大させるだめの本発
明の方法は、アレルゲン抽出物の脂肪を含丑ない溶液を
、１００．　ＯＯ，０ダルトン及び１，０００ダルトン
のフィルターを通過させ、１．　ＯＯＯ〜１００．　Ｏ
ＯＯダルトンの分子量を有する両分を得ることを含む。

このアレルゲン抽出物を清澄量のカーボン吸収剤及びゲ
ル重合体吸収剤と接触させて、長期間貯蔵した後でさえ
透明性を持続する抽出物を得る。次いでこの溶液を、ア
レルゲンの変性なしに１重量係以外の含水量まで乾燥す
る。

この生成物は水分を含まない粉末として及び再生した水
溶溶液として、後述する貯蔵安定性試験で測定される如
き改良てれた安定性を有する。本方法を用いれば、花粉
、カビ、黒糖及び動物部分、例えば表皮、小線要素、昆
虫及び昆虫の毒液を含む植物及び動物抽出物、そして食
品の群から選択をれるアレルゲン抽出物の安定性を増大
はせることができる。

本発明の生成物の１つの具体例は、本発明のアレルゲン
抽出物を、例えば吸収、吸着又は化学結合によって付オ
′ｆせしめて高感度と特異性を有する診断手段とするた
めの不溶性の担体を含んでなる。

本発明の目的は、植物及び動物起源から得られる抽出物
に由来する安定々、滅菌した、ウィルスを含才ないアレ
ルゲン生成物を提供することである。

本発明の更なる目的は、植物及び動物起源から得られる
滅菌したウィルスを含まない抽出物を製造し且つ安定化
きせるだめの有効な方法を提供することである。

本発明の更なる目的は、診断試剤として使用したときに
、本処理を受けていなめ抽出物よりも大きい感度と特異
性を有する安定化されたアレルゲン生成物を提供するこ
とである。

本発明の更彦る目的は、本発明の優秀な、安定化ブれた
、篩特異性のアレルゲン生成物を有する診断用担体を提
供することである。

患者がアレルギー反応を示すアレルゲンに相描するアレ
ルゲン抽出物での減感処置は、深刻なアレルギー状態を
処置するためにしばしば行なわれている。最も一般に取
り扱われているアレルギー反応は、木、牧草、雑草及び
庭園植物に起源する花粉；表皮及びその他の吸入物、例
えばホコリ、タバコ及び小線要素；カビ；黒糖；毘虫及
び昆虫の毒液；そして動物性及び植物性蛋白質、海産物
、卵、ミルクなどを含む食品に由来する。深刻なアレル
ギー状勅を処置するだめに一般に受は入れられている医
学的方法は１元のアレルギー状態の疑いのある原因から
得られた粗抽出物で試験し、そしてこの抽出物を減感投
薬量で患者に投与することを含む。一般に、抽出物は、
次の技術のいくつか又はすべてを含む一般的方法によっ
て非アレルゲン物ｆＪＪを除去するだめに′ＫｆＸ製さ
れる；粉砕、脱脂、抽出、清澄、透析、沿線及び滅菌。

これらの方法は比較的簡単であり、植物又は動物起源或
いは抽出工程に由来する他の成分と混じたアレルゲン物
質を与える。沈殿、クロマトグラフィー、超沖過及び溶
媒抽出による従来から提案されている分離法は、生成物
を改善することがないので採用しなかった１゜ 現在存在する十分強力なアレルゲン組成物の主々限界は
貯蔵安定性に欠けることである。化学的処理で安定性を
増加させる努力は一般に抗原性を減する。再生した抽出
物は普通、室温で７日間よりも短い期間貯蔵した後に色
が濃くなシ及び／又は濁りを生じ、明らかに化学的変性
を提示する。

濃色化又は濁りが肉眼で一つきりした万らば、それを捨
てなければならない。

本発明の方法は、抗原性が重要なほど減少していない抗
原生成物を製造するために現存している技術を用いるこ
とによシ容易に適用できる方法である。生成物はその抽
出物中に存在する代表的な抗原物質のすべてをその元の
割合で含有する。本発明の精製嘔れた生成物は、従来公
知の組成物より安定であり、容易に標準化でき、診断及
び減感処置に用いるための優れたアレルゲン生成物であ
る。

本方法は、脱脂した水性アレルゲン抽出物を最初に使用
し、１０００及び１００，０００ダルトンのフィルター
を用いる超濾過と吸収剤での処理とによってアレルゲン
抽出物を非アレルゲン成分から分離するととを含む。１
０００ダルトン以下及び１００．　ＯＯＯダルトン以上
の分子量の成分を捨てる。保留された画分はｉ、ｏ　ｏ
　ｏ〜１００，０００の分子量を有し、それより高い及
び低い分子量の成分を本質的に金子ない。この保留され
た画分を１垂量％以下の含水甲二寸で乾燥し、抗原生成
物とすることができる。本発明の超濾過法は元のアレル
ゲンのすべてを、元の全抽出物中に存在する割合で有す
る滅菌生成物を与える。この生成物は後述の貯蔵安定性
試験によって測定される如く、従来から公知の抽出物の
乾燥生成物よりも実質的に大きい貯蔵安定性を有する。

分解過程の機構は明確に理解され々い。いくつかのアレ
ルゲンだけで行なった研究が報告されており、これらの
研究においてでさえ不安定化の共通の原因は確立されて
いない。しかしいずれかの理論に限定されたくに］：な
いが、不安定性の重要な原因は糖及び蛋白質の間のＭａ
ｉｌｌａｒｄ反応によると７顕われる、これは蛋白質及
び糖蛋白質アレルゲンを直接分解するばかシでなく、抽
出物中に有毒な反応生成物を導入するであろう。

１０００ダルトンのフィルターを用いる超Ｆｉ過はＭａ
ｉｌｌａｒｄ　反応で変化するかも知れない糖、アミノ
酸及びペプチドを除去する。ｉｏｏ、ｏｏ。

ダルトンの超フィルターでの超濾過及び吸収剤での処理
は、ｉ　ｏ　ｏ、　ｏ　ｏ　ｏ以上の分子量を有する蛋
白質分解及び殿粉分解酵素を、抽出物のアレルゲン含有
物を乱すことなくバクテリヤ、ウィルス及び非アレルゲ
ン不純物と一緒に除去する。すなわち蛋白質分解又は炭
水化物分解酵素の量が減少する。従って殿粉を還元糖へ
転化する炭水化物分解活性及び蛋白質分解活性は低下し
よう。結果としてＭａｉｌｌａｒｄ反応は、生成する糖
が低量のために非常に減少するであろう１．そのだめに
元のアレルゲンの量が保持され、着色物及び有毒副生物
の生成が減せられ或いは皆無となる。

本発明の方法においては、アレルゲン抽出物を清泣量の
カーボン吸収剤及びゲル重合体吸収剤と接触式せて透明
で無色の抽出物とする。これは、その元の状態において
且つ乾燥と続く再生後において、室温で長期間貯蔵して
も４００〜７００ｎｍの範囲で０．０１０．Ｄ　　よシ
も小さい吸光度の増加しか示でないことによシ示される
ように非常に増大した安定性を示す。

適用される超濾過法は物質の分離に対して通常の方法で
あシ、技術的に公知である。アレルゲン抽出物を脱脂水
溶液として超フィルター中を通過させる。元の抽出物溶
液はＩ）Ｈに敏感であり、６〜８のｐＨ範囲以外ならば
低温でも短期間の貯蔵しか可能でない。安定化ｐＨは好
ましくは緩衝液で＃：持される。適当な緩衝液は燐酸塩
緩衝液（ＰＢＳ）、Ｃ０Ｃａ溶液などのような標準溶液
を含む。

溶解した固体の濃度は厳密でないが、５０重量％以下の
固体濃度が一般に使用でき、また２０重量％以下の濃度
が商業上は実際的である。好適な濃度は溶解した固体が
５重量製以下であシ、２重量係以下の濃度が最適である
。元の抽出物は温度に敏感であり、処理温度は０〜４０
℃の範囲であるべきである。超濾過は好ましくはアレル
ゲンを保持するだめに低温で行なわれる。凍結温度から
１０℃までの温度が有用であシ、２〜８℃の温度は好適
である。４℃又はそれ以下の温度は最適である。

用いる超濾過装置及びフイイビターは厳密でなく、一般
に商業的に使用されているものであってよい。

超濾過法及び装置は上述のＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ　Ｐ
ｈａ−ｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　５ｃｉｅｎｃｅｓ、　
３０３〜３０４及び１３９７頁に記述されている。ここ
にＭＩＬＬＩＰＯＲＥ　ＰＥＬＬＩＣＯＮ　ＣＡＳＳＥ
ＴＴＥＳ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ　ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏ
ｎ、Ｂｅｃｌｆｏｒｄ。

Ｍａ　ｓ　ｓ、）　；　ＡＭＩ　ＣＯＮ攪拌式槽、流動
路系、及び中空繊維系（Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ　Ｓｙｓ
ｔｅｍｓ　ｄｉｖｉｓｉｏｎ。

Ａｍ１ｃｏｎ　　Ｃ０ｒｐ、、Ｄａｎｖｅｒｓ、Ｍａｓ
ｓ、）ａｎｄＮＵＣＬＥＯＰＯＲＥ攪拌式槽及び中空繊
維系（Ｎｕｃｌｅｏｐｏｒｅ　Ｃｏｒｐ、　、　Ｐｌｅ
ａｓａｎｔｏｎ、　Ｃａ、）のような装置が使用できる
。適当な１０００ダルトン及び１００．０００ダルトン
のフィルターはＭＩＬＬＩＰＯＲＥフィルターＰＣＡＣ
００００５。

ＰＴＨＫ　００００５　、　ＰＳＶＰ　ＯＯ００５及び
ＰＴＨＫｏ　０００１　；　ＮＵＣＬＥＯＰＯＲＥフィ
ルターＡＩ。

ＣＩ、Ａ１００．Ｃ１００及びＦｌｏｏ及びＡＭＩＣＯ
ＮフィルターＹＭＺ及びＸＭｌｏｏＡを含む。

好適な超濾過法においては、脱脂水性抽出物を、アジド
保存剤なしに燐酸塩緩衝液（ＰＢＳ）、ｐＨ６〜８、の
ような緩衝した溶液として処理する。

この溶液を１００，０００ダルトンの膜を透過させる。

次いで溶液を１０００ダルトンの膜フィルターで処理し
、抽出溶液の容量が５０％だけ減ぜられるまで膜フィル
ターを透過した液体を捨てる。

次いでとの没縮物を水（最底温度で処理する場合）で晶
好１０は緩衝液例えばＰＢＳでその元の容量まで希釈し
、次いで液体の容量が５０係だけ減ぜられるまで超濾過
を繰返す。希釈及び１０００ダルトンでの超濾過の工程
を好ましくは少くとも更に２回繰返す。

このだめの超濾過法及び装置は、５ｅｐａｒａｔ　１ｏ
ｎＲＩＩｅｔｈｏｄｓ　　ｉｎ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔ
ｒｙ、　Ａｍ１ｃｏｎｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ第５５３
号；　Ｌａｂ　５０ｒ　Ｎｕｃ　Ｉｅｏ−ｐｏｒｅ　ｐ
ｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ、及びＭｉｌｌｉｐｏｒｅのＬａ
ｂｏｒａｔｏｒｙ　ｐｒｏｄｕｃｔｓ　ｃａｔａｌｏｇ
ｕｅに記述されている。

本発明の方法で使用されるアレルゲン抽出物の出発物質
は、減感及び診断過程で従来使用されてきた種類の植物
及び動物の、普通に入手しうる生の変性してない抽出物
であってよい。抽出工程は上述のＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’
ｓ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ５ｃｉｅｎｃｅ及び
上述の多くの特許に完全に記述てれている。そのアレル
ゲン抽出物の製造に関する部分は本明細書に参考文献と
して引用される。

アレルゲン抽出物のもとを、必要ならば最初に細かくし
て表面積を増大きせ且っ細胞膜を破って抽出を容易にす
る。殆んど水分を含まない物質は家庭用混合機で迅速に
粉砕することができる。多くの水分を含む％、Ｊ質はジ
ュース抽出機で又はそれよシ効率が低いが家庭用の食品
又は肉ひき機で粉々にし且つ抽出することができる。動
物の毛、羽、カポック、絹及び合成繊維のような物質は
切断具によって小片に切断しなければなら々い。

物質が油脂を含む場合、これは有機溶媒での抽出によシ
脱脂される。この工程は、水性抽出工程中の乳化を防ぎ
且つきれいな生成物溶液を得るために必要である。有用
外抽出溶媒は脂肪が選択的に可溶であるが、水溶性の成
分が一般に不溶であるものである。適当な溶媒はエーテ
ル、トルエン、キシレンなどを含む。脱脂において脱脂
された物質を有機溶媒部分と連続的に良く混合し、有機
相を他の物質から分離する。すべての花粉は脱脂しなけ
ればならない。物質の、刺激物（油、樹脂及びワックス
）を除去するための油出は多種の溶媒の使用を必要とす
るかも知れない。

抽出工程においては、活性アレルゲン物質を固体物質か
ら水性相で取り除く。活性アレルゲン画分け、それがア
ルカリ溶液に可溶であるから、一般にＩ）Ｈ約８の緩衝
食塩水溶液で抽出される。例えば抽出は、抽出すべき物
質を振とり又は他の振動手段により抽出溶媒中で１２〜
７２時間柔らかくすることＫよって行なうことができる
。１０°Ｃ程度の高い抽出温度が使用できるが、好適な
抽出温度は４℃以下である。緩衝された抽出液を用いる
ことの利点は、それが酸及びアルカリの両方を中和し、
抽出に最適なｐＨである８がらのｐＨ変化を抑制するこ
とでイ５る。またそれは最終生成物において刺激剤とな
りうる酸及びアルカリも中和する。

物質を抽出した後、活性成分を、含有する溶媒を、沖過
又は同様の工程によって不活性な物質から分離する。次
いでこの抽出物は本発明の超沖過法によって直接処理す
ることができる。

最も普通のアレルゲンの本質的にすべてに適当な原料の
アレルゲン抽出物は、本発明の方法において出発物質と
して使用しうる適当な量で市販されている。例えばその
ようなアレルゲン抽出物はＣｕｔｔｅｒ　Ｌａｂｏｒａ
ｔｏｒｉｅｓ、　Ｉｎｃ、の１部門のｎｏ］］１ｓｔｅ
ｒ−８ｔｉｅｒから市販されている生成物である。

本発明の好適な方法において、原料物質は実施例に開示
される抽出物のアレルゲン抽出物又ハ天然の起源、（花
粉１．鱗屑など）であってよい。

吸収剤での処理は、超濾過前、１００，０００ダルトン
のフィルターの透過後或いは１０００ダルトンでの超沖
過後のいずれかの工程段階で行なうことができる。好ま
しくは、吸収剤での処理は、少ない吸収剤で済むから超
沖過工程が完了した後に行なわれる。

吸収剤での処理において、アレルゲン抽出物の溶液を吸
収剤と良く接触させる。例えば、溶液は１つの吸収剤と
接触式せ、次いで他の吸収剤と接触させることができ或
いは１秤類より多い吸収剤と１段で接触させることがで
きる。この接触は、溶液をカラムに通すことによって、
或いは溶液を攪拌容器中で良く混合し、次いで溶液を吸
収剤よりＰ別することによって行ないうる。

吸収剤での処理は、好丑しくは安定化を達成するのに少
くとも十分な吸収剤、即ち増大した安定性の溶液を与え
る最小量の吸収剤を用いて行なわれる。メ））□、色で
透明な溶液を与えるのに十分な量は増大した安定性を達
成するのに十分であることが発見された。普通抽出溶ｏ
、４００容量轟シデキストラン吸収剤のよう々膨潤した
ゲル重合体１容邦、−また抽出溶液１−ｇＭり活性炭７
０９を用いる抽出物の処理で十分である。

吸収剤の処理は、超沖過工程に関して上述した低い方の
温度、好ましくは２〜８℃の温度及び７〜８のＩ）Ｈ範
囲内において要衝された溶液中で好適に行なわれる。吸
収剤との接触時間は吸収剤が微粉砕されているならば厳
密でなく、微粉砕され／こカーボン及び重合体ゲル吸収
剤粒子の場合３分間の接触時間で十分である。

適当なゲル重合体吸収剤は水性媒体中でカゴの構造を形
成する重合体である。多糖類吸収剤例えばデキストラン
、アガロース及びその誘導体は好適である。合成ゲル車
合体例えばポリアクリルアミド、ポリヒニルビロリドン
なども使用できる。

好適な多糖類の吸収剤はデキス）・ラン及びデキストラ
ン誘導体、例えばＳＥＰＨＡＤＥＸ（Ｐｈａｒｍａｃｉ
ａ）である。このゲル吸収剤は３００メツシユ以下まで
のいずれかの粒径を有することがでさ、５０〜］５０メ
ツシユの範囲の粒径が好適である。

適当なカーボン吸収剤は活性炭、大きい活性炭粒子、グ
ラファイトなどを含み、好ましくは微粉砕きれ且つ２０
０メツシユ以下の粒径を有する。

好適なカーボン吸収剤は２５０〜３５０メツシユの粒径
の活性炭である。

次いで生成物溶液を１％以下の含水ｆｉｘ１で乾燥する
。このｋｍはアレルゲンを保存するために湯殿を上げな
いで行なわねばならない。通常の真空乾燥又は凍結乾燥
法が適当であり、一般に凍結乾燥に使用される工程及び
装置が使用できる。好ましくけ抽出浴ｆ色を薬ビン中で
一３０℃又はそれ以下の温度で２時ｊ用仰結し、２０ト
ール又はそれ以下のに空を適用する。薬ビンの置いであ
る棚を徐々に２５℃まで暖める。物質が１％以下の含水
量になり、そして平衡（２時間後に認める程の重量揖失
がない）に達した時、凍結乾燥を完了する。

適当な装置は、例えば上述のＲｇｍｉｒｇｔｏｎ’ｓ円
］ａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　　５ｃｉｅｎｃｃＳ、１
４８３〜１４８５頁に記述でれている。この内容は本明
細、書に参考文献として引用される。

減感籾屑に使用しうる生成物に対しては、超沖過の液体
生成物を好ましくは密閉しうる薬ビン中に直接供給し、
生成Ｍ・・１を究極的に包装する薬ビン中で凍結乾燥す
るとよい。他に溶液をその捷＼凍結乾燥し、続いて標準
化された溶液を与えるために必要とはれる量を薬ビンに
入れることもできる。

次いで容器を密閉する。この時、内容物を真空下に保持
することが好ましい。

アレルゲンを診断に際して固体担体上で用いる場合には
１、予じめ成形した担体を精製した抽出物で或い（弓：
前述の乾燥工程からの再生アレルゲンで処理するとよい
。

診断用の担体は好捷しくけ固体で、水に不溶な表面を有
する。表面は広く変えることができる。

また表面は異なる形をしていてよく、異なる物理特性を
有していてよく、異なる化学組成のものであってよく、
組成物の混合物としての１種又はそれ以上の組成物或い
はそのコーティング又は積層物又はその組合せであって
よい。この表面は分析溶液中ではつきシした存在を保持
して媒体から区別しうる、普通の媒体から分離しうる基
剤又は基質として役立つ。表面は、その表面とは無関係
に溶液中を拡散することができないように試剤を表面に
結合して支持するのに役立つ。更に表面は、表向に結合
した物質と共役した化合物に対する支持体として、伺尤
層に対する基剤として、或いは共有又ｔＪ：非共有結合
に対する支持体として役立つ。

表面は効果的には流体でなく、表面がそれが浸漬される
液体媒体から区別しうるように明確であり、址だ化合物
を支持するためのはつきりした基剤又は基礎を提供する
。表面は電気的に荷電した又は荷電してない形で存在し
ていてよく、そのような電荷は特別な標識系の使用に対
しである利点を提供する場合に使用される。支持体の物
理的形態は、フィルム、ビーズ、容器、管、単−及び多
壁板及び細片などを含む使用に簡便女形で具現化しうる
。

固体支持体としては多秤類の化合物が使用でき、主に試
剤を表面に結合させること、そしてその結合及び使用に
含まれる反応を妨害しないことが考慮される。天然及び
合成の、多種類の有機及び無ワ）重合体が固体担体に対
する物質として使用しうる。このｊし合体の例は、ポリ
エチレン、ポリプロピレン、ポリブチレン、ポリ（４−
メチルブチレン）、フチルゴム及ヒ他の合成ゴム、シリ
コーンゴム及びシラスチック重合体、ポリエステル、ポ
リアミド、セルロース及びセルロース誘導体（例ｔ　ｆ
ｄ　酸２セルロース、ニトロソセルロースナト）、アク
リレート、メタクリレート、ビニル重合体（例えばポリ
酢酸ビニル、ポ’Ｊ−を化ビニル、ポリビニリデンクロ
ライド、ポリ弗化ビニルなど）、ポリスチレン及びスチ
レングラフト共１“合体、レーヨン、ナイロン、ポリビ
ニルブチレート、ポリホルムアルデヒド々どを含む。不
溶性支持体として使用１〜うる他の４？り質は、シリカ
ゲル、シリコンウニハス、ガラス、紙、不溶性蛋白質、
金属、メタロイド、酸化物、磁気材料、半導体材料、サ
ーメッ’ｐ　（ｃｅｒｍｅｔｓ）などを含む。更にゲル
を生成する物質、例えば蛋白質例えばゼラチン、リポ多
糖類、シリケート、アガロース、ポリアクリルアミド又
はデキストランのようないくつかの水性相を形成する重
合体、ポリアルキレングリコール（炭素数２〜３のアル
キレン）或いは表面活性剤、例えば両性化合物例えばリ
ン脂質、長鎖（炭素数１２〜２４）アルキルアンモニウ
ム塩などを含む。

表面は普通多官能性であシ、或いは試剤と表面の間に共
有結合を可能にするために多官能性化することができる
。表面上に存在する且つ架橋のために使用しうる官能基
ニ１゛、カルボン酸、アルデヒド、アミン基、シアン基
、エチレン性基、ヒドロキシル基、又に］゛メルカプト
基などを含む。秤々の。

化合物を枦々の表面に結合する方法幻コ十分公知であシ
、例えばＩｃｈｉｒｏ　Ｃｈｉｂａｔａ、　”■ｒｎ＋
ｎ、ｏｂｉｌｉ−ｚｅｄ　Ｅｎｚｙｍｅｓ　”　、）Ｊ
ａ１ｓｔ６ｄ　ｐｒｅｓｓ、　ＮｅｗＹｏｒｋ、　１９
７８乍、及びＡ、　Ｃｕａｔｒｅｃａｓａｓ、　Ｊ。

Ｂｉｏ、Ｃｈｅｍ、、２４５．３０５９（１９７０）に
おいて広く例示されている。

架橋基の長さは、結合する化合物の性質、架橋した化合
物と表面の間の距離の、架橋した化合物の＋′４：質に
及り１す影響、架橋する化合物の架橋能力などに依存し
て広く依存する。架橋基は１つの結合であってよく或い
は鎖の炭素数が約］２まで、普通高々１０才でである。

この架橋基は脂肪族、ＪＩＷ　”Ａ％族、芳香族、複素
渥（族又はこれらの組合せでを・つてよい。架橋基の原
子の全数ｄ、水素以外の原子、即ち炭素、オキソ又はオ
キソ、更にオキソカルボニル及び非オキソカルボニルと
しての酸素、アミン又はアミドとしての窒素、或いはチ
オ又はチオノとしての硫黄である原子が高々的２０．普
通庭々約１６でを）る。ここに基の例はメチレンカルボ
ニル、サクシニミジル、α−ハロアセチノへチオメチレ
ン、グリシル又はポリグリシル、ザクシンジオイノへマ
レジオイノへグルタルジアルキリ６．デン、メチレンフ
ェニルジアゾ、及びウレイドを含む。

本発明の好適な診断用担体は、吸収、吸着、イオン結合
、ファンデアワールス吸着力、静電結合又は他の非共有
結合、・或は共有結合によってアレルゲン抽出物が結合
した不透明な（好号しくけ黒色の）ポリスチレン又はス
チレン−（ビニル単量体）共重合体を含Ｘ７でなる。こ
の目的に特に有利な支持体は複数の井戸（穴、ｗｅ　］
　Ｉ　）を有するミクロ力価板又は細片を含んでなる。

この井戸の表面又はそこへのプラスチックカップ挿入物
（ｄアレルゲン抽出物支持体を構成することができる。

最も有利に打〕−、ミクロ力価板又は井戸挿入物は、井
戸に適用される励起光又はそれに応じて発生ずる螢光が
回りの井戸の内容物に達しない又は影響しないように光
に対して不透明である。この系を用いると、各井戸は他
の井戸と関係なく試験系として使用することができる。

例えば本発明のアレルゲン抽出物は、次の方法に従い、
非共有結合によシポリスチレンミクロカ価井戸又はその
ミクロ力価井戸に対するポリスチレン挿入カップに適用
することができる。このポリスチレン表面を洗浄液例え
ばメタノールで洗浄する。水性緩衝液で再生した抽出物
を井戸又は挿入カップ内に入れ、２時間室温に保温し、
次いで除去する。次いで井戸又は挿入カップを水性スク
ロース又はソルビトール溶液でゆすぎ、乾燥する。

例え（げポリエチレン又はポリスチレン表面をアレルゲ
ン抽出物でコーティングする１つの方法において、アレ
ルゲンはアジドを含有する緩衝された溶液で表面に適用
てれる。蛋白質約１〜約１００μｇ／ｍｌの濃度を有す
るアレルゲン抽出物の溶液を、約０．００５〜約０．０
２１Ｖ］Ｊリス−ＨＣＩ（２−アミノ−２−ヒドロキシ
メチル−１，３−プロパンジオール−Ｈ，ＣＩ）　　中
アレルゲン抽出物及び約０．０１〜約０．０５重ｔ％の
ナトリウムアジドから調製する。トリス−ＨＣｌは溶液
を約７．１〜約９．５のｐｎに緩衝する。次いでこの溶
液を重合体表面にコーティングし、室温に６〜７２時間
、好ましくは１２〜４８時間保温する。これらのコーテ
ィングした表面を、ｒｌＨ６，９〜８．１を有し且つナ
トリウムアジドを約０．０１〜約０．０５重Ｎ’％で含
有する約０．０　Ｏ５〜約０．０２　Ｍ　トリス−’ｌ
（Ｃ’ｌで洗浄する。Ｔ）Ｈ７，１に緩衝された０、０
２重量係のナトリウムアジドを含むトリス−ＨＣｌの０
．０１Ｍ溶液は保温及び洗浄の両媒体に対して好適であ
る。

管又は他の袋筒にコーティングし或いは固定するだめの
アレルゲン抽出物を調製するための更なる詳細−１、Ｃ
，％ｔ１．　Ｌｉｎｇ及びり、ＩＲ，０ｖｅｒｂｙ。

”：Ｒｒｅｖａｌｅｎｃｅ　　ｏｆ　ＥＪｅｐａｔｉｔ
ｉｓ　Ｊ３．Ａｎｔｉ−ｇｅｎ　ａｓ　Ｒｅｖｅａｌｅ
ｄ　ｂｙ　Ｄｉｒｅｃｔ　Ｒ，ａｄｉｏｉｍ−ｍｕｎｏ
ａｓｓａｙ　ｗｉｔｈ　　　ＩＡｎｔｉｂｏｄｙ　”　
。

Ｊｏｕｒｎａ］　　ｏｆ　　Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、１
０９（４）、１９７２年１０月に記述されている。コー
ティング法はコーティングされた管に関して記述してき
たけれど、このコーティング法を用いれば、コーティン
グされた挿入物、ビーズ或いは井戸を有する使用のため
の装置などを、挿入物をアレルゲン抽出物溶液中に浸し
、次いで上述の後続の操作に従うことにより製造するこ
とができる。

好ましくはアレルゲンを不溶性の基質に対して親和性を
有する水溶性蛋白質又は蛋白質様の重合体に共有結合き
せる。次いでアレルゲン−重合体生成物を、非共有結合
によシ、例えば吸収又は吸着によシネ溶性の基質に付着
させる。この方法は同一出願人の１９８２年１１月２６
日付けの関連特許願第４４４．６２２号に記述されてい
る。ここにこの全内容物は本明細書に参考文献として引
用てれる。

適当な水溶性の蛋白質は、牛（ＢＳＡ）、人間（Ｈ３Ａ
）、ウサギ（Ｒ８Ａ）、ヤギ（ＧＳＡ）、ヒツジ（ＳＳ
Ａ）、馬（ＨＯＳＡ）などの血清アルブミン；この動物
の血ｍγ−グロブリン；及び他の動物の蛋白質、例えば
オバルプミン、フィブリノゲン、トロンビン、トランス
フェリン、糖蛋白質などを含む。適当な水溶性アミノ酸
重合体は、ポリリシン、ポリグルタミン酸、ポリアラニ
ン、ポリヒスチジン、ポリメチオニン、ポリプロリンな
どを含む。アレルゲンは技術的に公知の方法に従い、水
溶性蛋白質又はアミノ酸重合体に、通常の結合剤で共有
結合せしめることができる。

好壇しくけ結合剤はカルボジイミド例えば１−エチル−
３−（３−Ｎ、Ｎ−ジメチルアミノプロピル）カルボジ
イミド地酸塩及びｌ−シクロへキシル−３−（２−モル
フォリノエチル）カルボジイミドメチル−ｐ−トルエン
スルホネートである。

他の適当な結合剤はエチレン性不飽和を有するアルデヒ
ド結合剤例えばアクロレイン、メタクロレイン又は２−
ブタナール或いは複数のアルデヒド基を有するアルデヒ
ド結合剤例えばグルタルアルデヒド、プロパンシアル又
はブタンシアルを含む。

他の結合剤は２官能性ＮＨ３−エステル例えばスペリン
酸ジサクシニミジル、酒石酸ジサクシニミジル、ビス−
［２−（サクシニミドオキシ力ルポニロキシ）エチル〕
スルホン、ジサクシニミシル（Ｎ、Ｎ’−ジアセチルホ
モシスティン）、ジチオビス（ザクシニミジルグロビオ
ネート）、エチレングリコールビス（サクシニミジルサ
クシネ−１）；ヘテロ２官能性試剤、例えばＮ　−５−
アジド−２−二トロベンゾイロキシサクシニミド、ｐ−
アジドフェナシルブロマイド、ｐ−アジドフェニルグリ
オキサール、４−フルオル−３−ニトロフェニルアジド
、Ｎ−ヒドロキシサクシニミジル−４−アシドベンゾエ
ート、ｍ−マレイミドベンゾイルＮ−ヒドロキシサクシ
ニミドエステ／ｌｚ、メチル−４−アジドベンゾイミデ
ート・ＨＣＩ、ｐ−二トロフェニル２−シアソー３　、
３　、３−４リフルオルプロビオネート、Ｎ−サクシニ
ミジル−６（４’−アジド−２′−二トロフェニルアミ
ノ）ヘキサノエート、サクシニミジル４−（Ｎ−マレイ
ミド−メチル）シクロヘキサン−１−カルボキシレート
、サクシニミジル４−（ｐ−マレイミドフェニル）ブチ
レート、Ｎ−サクシニミジル（４−アンドフェニルジチ
オ）プロピオネート、Ｎ−サクシニミジル３−（２−ピ
リジルジチオ）プロピオネート、Ｎ−（４−アジドフェ
ニルチオ）フタリミド；ホモ２官能性試剤例えば１，５
−ジノルオル−２，４−ジニトロベンゼン、４．４’−
ジフルオＡ−３、３’−ジニトロジフェニルスルホン、
４．４’−ジイソチオシアノ−２，２′−ジスルホン酸
スチルベン、ｐ−フェニレンジイソチオシアネート、カ
ルボニルビス（Ｌ−メチオニンｐ−ニトロフェニルエス
テル）、４．４’−ジチオビスフェニルアジド、エリス
リトールビスカーボネート；及び２官能性イミドエステ
ル例えばジメチルアジビミデート・ＨＣＬジメチルスベ
リミデート、ジメチル３．３′−ジチオビスビスグロピ
オニミデート・２ＨＣ１，２−イミノチオラン・ＨＣＩ
を含む。アレルゲンの不溶性蛋白質への共有結合は、通
常の良く知られた反応に従い、例えば水溶液中、中性ｐ
Ｈ，１０℃以下の温度において上記試剤を用いることに
よ９１８時間又は夜通し行なうことができる。

他の方法では、最初に担体表面を不活性な蛋白質でコー
ティングする。この方法はポリエチレン又はポリスチレ
ン管に関して記述されるが、井戸、ビーズなどに対して
も同様に適当である。この方法に従えば、不活性々蛋白
質を反応性の底部分に結合させる。ここに、「不活性な
蛋白質」とは免疫化学反応に関与しない且つ生物学的物
ノに悪影響を及ｅ了畑ない蛋白質を意味する。使用でき
る蛋白ｆｆ′ｉけ当業者にとって十分公知である。それ
らはいずれかの蛋白質物質例えば種々の動物秤から得ら
れる血清アルブミン又幻、グロブリンを含み、或いは他
の均一な物質であってよ（へ。特に好５へ１なものに１
、容トロに入手しうる点で牛のγ−グロブリン及びゼラ
チンである。用いる蛋白質物質は実質的に連続な表面が
得られるように十分均一であるべきである。そのような
表面ｄ：上記蛋白介を用いて容易に得られる。次いでこ
の不活性な蛋白質にアレルゲン抽出物を結合させる。

更に１１−′に、プラスチック表面は、（ａ）吸収条件
下での吸収により表面を不活性な蛋白質でコーティング
し、（１））この不活性な蛋白質コーティングにアレル
ゲン抽出物を刺着させ、（Ｃ）結合した部分を安定化剤
で処理してアレルゲン抽出物を変性に対して安定化ζぜ
、及び（ｄ）アレルゲン抽出物を実質的に変性しない乾
燥茶注下に反応性部分を乾燥する、ことを含んでなる方
法で処理される。

最適な結果を与えるために必要とてれる不活性な蛋白質
のけめ［、不活性な蛋白質、表面及びアレルゲン抽出物
の性質に依存する。この量は当業者に（ｌ−１ｌＸ答易
に決定できる。典型市には、蛋白質の薄ｂフィルム（例
えば少くとも分子の一層の厚さ）だけが表面に結合され
る。一般にこれは生物学的に活性な物質が結合する均一
な表面を与えるのに十分な量である。

不活性な蛋白質は、噴霧、浸種又は好丑しくはコーティ
ング条件下に表面を不活性な蛋白質の水溶液、例えば水
性緩衝液中へ浸すことによって表面に容易に付着してコ
ーティングを形成する。この方法でイぼ白質が表面に吸
収される。水性燐酸塩緩衝液を用いることは有利である
。そのような緩衝剤はＵ、　Ｓ、　Ｐ、　Ｘ■に記述き
れており、一般に燐酸水素二カリウム及び燐酸二水素カ
リウムを用いて製造される。

不活性な蛋白質は蛋白質の変性に通じないような吸着条
件下にコーティングされる。このｐＨ及び温度条件は用
いる不活性な蛋白質に依存する。

吸着条件は通常のｐＨ１例えば約３〜１ｏ及び通常の温
度、例えば約２０〜３０’Ｃを含む。これより高い及び
低い温度、例えば５０℃程度の高温及び４℃程度の低温
も使用できるけれど、意味ある程の利点１ｓｌ−、ｔ＜
い。事実５０’Ｃ以上の温度では、蛋白質が一般に変性
してしまう。４°Ｃよシ低温では、蛋白質を適用するの
が困難である。例えば、牛のγ−グロブリンは一般に５
〜７（最適には６．４）のｐＨにおいて室温でコーティ
ングされる。

不活性な蛋白質の付着を容易にするために、付着に先立
って反応性の低い部分の表面を溶媒、表面活性剤、酸又
は塩基で処理することができる。

表面活性剤、有利にはドデシル硫酸ナトリウムを表面の
清浄と付湿のだめの洗剤として使用する。

重合体が表面にカルボキシル基を含′ｆＪＪ−ならば、
それを塩生成堪基、例えばＫＯＨで処理して壇の形に転
化し、このようにして電気的吸引性を高め且つ吸着を大
きくする負の電荷を表面に与えることがしばしば望まし
い。塩基も表面をきれいにするのに役立つ。他の観点に
おじては、表面上の電荷分布を適用する不活に１な蛋白
質の分布に凡そ等しくすることは有利である。これはコ
ーティングに先立って不活性な蛋白質を含むコーティン
グ溶液と凡そ同一のｐＨを有する水性緩衝剤溶液で表面
を洗浄するととＫよって達成づれる。

アレルゲン抽出物はいずれか適当な手段によって付清ぜ
しめうる。技術的に公知のそのような適当な手段ＣＩ、
吸着、共有結合、イオン結合及び封入を含む。アレルゲ
ン抽出物を不活性な蛋白質に共有結合芒せる方法は、本
明細書に参考文献として引用される米国！１４ト許第３
．５５３．３１０号及び第３、６３９．５５８号に記述
されている。不活１２：な蛋白質に共有結合させる好適
な方法は、最初に蛋白質をアルデヒド結合剤で処理し、
次いでアレルゲン抽出物を、不活性な蛋白質及びアレル
ゲン抽出物間にアルデヒドを介して共有結合を生成せし
める条件下で適用することを含んでなる。適当なアルデ
ヒド結合剤は一エチレン性不飽和又は複数のアルデヒド
基或いは双方を有するもの、例えばアクロレイン、メタ
クロレイン及び２−ブチナルである。ジアルデヒド例え
ばグルタルアルデヒド、プロパンシアル及びブクンジア
ルも使用することがこれらのアルデヒドの１つを不活性
な蛋白質の表面と接触σせた時、蛋白質は架橋によって
安定化きれ且つ重合し、アルデヒドの活性残基が表面に
固定される。これらの残基はカルボニル基であると思わ
れ、アレルゲン抽出物のアミン基に対して非常に反応性
があり、蛋白質粒子とアレルゲン抽出物の間に共有結合
を生成せしめる。

このアルデヒド又１はエチレン件不飽和による結合法は
、アレルゲンを１級アミン基を有する他の表面に共有結
合させるためにも使用することができる。例えばポリリ
シンでコーティングされたポリスチレン−ニゲルタルア
ルデヒド 結合させることができる。

アルデヒドの他に、他の結合残基、例えば次の反応性基
の２つ又はそれ以上を有する化合物も使用できる：アゾ
、スルホン酸又はニトロ基にょって活性化されたフルオ
ル基、・アジド、イミン或いは適当な共鳴構造に結合し
た反応性クロル基。これらの反応性基は不活性な■白質
並ひにそれに結合感せるアレルゲン抽出物を構成する物
ａ中の１級アミン、スルフィルヒドリル、カルボキシノ
ペヒドロキシル及びフェノール基と反応することができ
る。

そのような結合剤の代表的なものは、ビスジアゾベンザ
ジン、ジスルホン酸、テトラゾ−ｐ−フェニレンジアミ
ン、シフルオルジニトロベンゼン、シアルオルジニトロ
フェニルスルホン、カルボジイミド、トルエンジイソシ
アネ−１・、シアヌル酸クロライド、ジクロルトリアジ
ン、Ｎ−ｔ−ブチル−５−メチルインキサゾリウムバー
クロレートである。使用できるカルボジイミドはＮ　、
　Ｎ−ジシクロへキシルカルボジイミド、１−エチル−
３−（３−ジメチルアミンプロピル）カルボジイミド塩
酸地、及び１−シクロヘキシルー：３−（２−モルンオ
リニル（４）−エチルカルボジイミド）メトーｐートル
エンスルホネートテアル。

他に、アレルゲン抽出物は米国特お一第３，　５　５　
１。

５５５号に記述されている方法に従う吸着によって付着
させることができる。固体の支持体表面は、ポリエーテ
ルイソシアネートのコーティング（’Ｈ”ＹＰＯＬ　−
　２　０　０　０，　Ｗ．　Ｒ．　Ｇｒａｃｅ　＆　Ｃ
ｏ．　。

Ｌｅｘｉｎｇｔｏｎ，　！ＡａＳｓ．　）で付４−３れ
るようなイソシアネート結合を通してアレルゲンに結合
する物質でコーティングでれていてもよい。

試剤をガラス表面に結合させる方法は技術的に公知であ
り、例えば米国乳許館４，２８０，９９２号に記述され
ている。アレルゲン抽出物をガラスに結合するのに使用
てれる方法は厳密でない。くもりガラスが好適である。

′アレルゲン抽出物は物理的又は化学的方法でガラス表
面に結合させることができる。後者は、多士、マのアレ
ルゲン抽出物Ｊをガラスへしつ力・シと且つ永久的１そ
結＠−させたい場合に好適である。

物理的方法による結合は主に物理吸着（ファンデアワー
ルス吸着）によって達成訟れる。ＮＩＪちガラスをアレ
ルゲン抽出物の溶液中に浸し、物理的結合全形成きせる
のに適旨な期間、採湯し或いは放置するとよい。溶液は
一般に０．０１〜４００〃／１１好捷しくけ０．１〜１
．０．９／ｌの濃度を有するととができる。丑だ浸漬処
理は例えば０〜４５℃の温瓜におして１〜４８時間行な
われる。

適旨な化学的方法として、アレルゲン抽出物」はシラン
結合剤及び必要ならば架橋剤の助けを借りてガラス表面
、好ましくはくもりガラス表面に結合せしめられる。こ
の場合、分子内にガラスと反応する官能基及びアレルゲ
ン抽出物及び／又は架橋剤と反応する官能基の双方を有
するシラン結合剤が使用される。ガラスと反応する適当
な官能基の例は、ガラスのシラノール基と反応するもの
、例ｆはアルコギシシリル基（例えばメトキシ又はエト
キシ置換ンリル基）などを含む。アレルゲン抽出物及び
／又は架橋剤と反応する連層な官能基の例は、アミノ、
カルボキシル及び／又ｄ］チオール基と反応するもので
あシ、例えばカルボキシル、エポキシ、ハロアルキル（
９ｔＪＲ−はクロルエナル及びクロルプロピル）、アル
デヒド、１級及び２級アミノ、チオール、インシアネー
ト、カルボキシレート、イミノ及びニトリル（又はシア
ン）基などを含む。更に特にアミノ基と反応中る適渦な
官能基の例は、カルボキシル、エポキシ、ハロアルキル
及びアルデヒド基である。カルボキシル基と反応する適
当な官能基は例えば１級及び２級アミン及びエポキシ基
を含む。チオール基と反応する適当な官能基はチオール
、エポキシ、ハロアルキル及びアルデヒドシ）七などを
含む。

アレルゲン抽出物のガラスへの結合においては、シラン
結合剤を架橋剤の有無下に使用することができる。架橋
剤ｄニジラン結合剤のｆｆｉ　’Ｍ及び結合すべきアレ
ルゲン抽出物の種類に従って選択できる。

この場合、シラン結合剤をアレルゲン抽出物と架橋しう
るいずれかの架橋剤も使用しうる。そのような架橋剤と
しては、シラン結合剤のアミン、カルボキシル又はチオ
ール基を免疫学的に活性な物質のアミン、カルボキシル
又はチオール、ｌ：架橋させうる化合物、例えばチオー
ル基とチオール基間、或いはアミン基とチオール基間に
架橋を生成しうるものが挙げられる。アミノ基とアミノ
基間に架橋しうる適当な化合物の例は、脂肪族ジアルデ
ヒド（例えばグリオキサル、マロンアルデヒド、サクシ
ンアルデヒド、グルタルアルデヒド）及びジクロルトリ
アジン（例えば２−アミノ−４，６−ジクロル−ｓ−ト
リアジン）などである。チオール基とチオール基ＨｉＪ
の適当な架橋剤は例えばシマレイミド化合物（例えばＮ
、Ｎ’−０−フェニレンジマレイミド、Ｎ、Ｎ′−ｍ−
フェニレンジマレイミド）である。アミノ基とチオール
基間の適当な架Ｉｓ　剤ｉ、マレイミドカルボキシル−
Ｎ−ヒドロキシサクシニミドエステル（’ＥｆｉＵ工ば
ｍ−マレイミドベンゾイル−Ｎ−ヒドロキシサクシニミ
ドエステルへ及び４−（マレイミドメチル）シクロヘキ
サン−１−カルボキシル−Ｎ−ヒドロキシサクシニミド
エステル）である。

本発明の方法において、アレルゲン抽出物に対する固体
担体として有用な吸着剤は技術的に公知である。適当な
物質は以下の通シである：吸着剤及び吸収剤 非イオン性セルロース 例えばＷｈａ　ｔｍａｎ（Ｃ１ｉ　ｆ　ｔｏｎ、　Ｎｅ
ｗ　Ｊｅｒｓｅｙ。

Ｊ、　Ｓ、　ｐ、、　）型− ■ ＣＦ−１、長繊維粉末 ＣＦ−１１■、中繊維粉末 ＣＣ−３１■、微粒状粉末 ｃｃ−４□■、微粒状例オ 例えばＢｉｏ−Ｒａｄ（Ｒｉ　ｃｈｍｏｎｄ、　Ｃａ　
］　ｉ　ｆｏｒｎ　ｉ　ａ。

Ｕ、　！Ｅ、　Ａ、　）型− Ｃｅｌｌｅｘ■Ｎ’−１、粉末 Ｃｅ１１６ｘ■４１０、粉末 シリカゲル 例えばＷｈａｔｍａｎ型−３Ｇ８１、ローデツド・ペー
パー（Ｉｏａｃｌｅｄ　ｐａｐ６ｒ）　；又はｊ３ｉｏ
−Ｒａｄ型−１３ｉｏ−Ｓｉｌ■ＡＸは３ｉｏ−８ｉ１
■Ａ ヒドロキシルアパタイト（Ｂｉｏ−Ｒａｄ）アルミナ；
酸性、塩基性又は中性型（Ｂｉｏ−Ｒａｄ）アルミナＣ
−ガンマ・ゲル（Ｂｉｏ−Ｒａｄ）ヒドロキシグロビル
デキストラン 例えばＰｈａｒｍａｃｉａ（Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ、　
ＮｅｗＪｅｒｓｅｙ、　ＴＪ、　Ｓ、　Ａ、　）型−５
ｅｐｈａｄｅｘ■Ｈ２０ デキストう７　（ｐｈａｒｍａｃｉａ）デキストランサ
ルフェート（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）アルキルアガロース 例えばｐＨａｒｍａｃｉａ型−オクチル−５ｅｐｈａｒ
ｏｓｃ！＠Ｃｌ−４Ｂ又は７ｘ＝ｙｖ−８ｅｐｈａｒｏ
ｓｅ■１−４Ｂ 例えばＭｉｌｅｓ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ　Ｐｒｏｄｕｃｔ
ｓ（ｐｌｋｈａｒｔ、　Ｉｎｄａｎａ、　Ｔ−Ｊ、　Ｓ
、　Ａ、　）型−ω−アミノアルキルアガロース レクチン−アガロース（Ｍｉｌｅｓ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ
Ｐｒｏｄｕｃｔｓ） ポリ−ルーリシンアガロース（Ｍｉ　Ｉｅｓ　Ｒｅ５ｅ
ａｒｃｈｐｒ’ｏｄｕｃｔｓ） プラスチック、レリえばポリスチレン、ポリエチレン及
びポリプロピレン アニオン交換物質 ジエチルアミンエチル（ＣＥＡＥ）セルコース例えばＷ
ｈ　ａ　ｔｍ　ａ　ｎ型− ＤＥ−１■、フ・ツク状 ＤＥ−１□■、粉末 ■ ＤＥ＞２２　　、繊維質 ■ ＤＥ−２３、繊維質 ■ ＤＥ−３２、乾燥微粒状 ■ ＤＥ−５２、湿った微粒状 ＤＥ−８□■、紙 例えばＢｉｏ−Ｒａｄ型−〇ｅＩＩｅＸ■Ｄ、繊維質ジ
エチルアミノエチル（ＤＥＡＥ）アガロース■ 例えばＢｉｏ−Ｒａｄ型−ＤＥＡＥ　Ｂｉｏｇｅｌ　　
Ａジエチルアミノエチル（ＤＥＡＥ）デキストラン例え
ばｐｈａｒｍａｃｉａ型−Ｊ）ＥＡＥ　５ｅｐｈａｄｅ
ｘ■、ビーズ アミンへギシルー５ｅｐｈａｒｏｓｅ’Ｅ’４Ｂ（Ｐｈ
ａｒｍａｃｉａ）エクテロラセルロース 例えばＷｈａｔｒｒ＋ａｎ型− 。ニー□□■、粉オ ＥＴ−４１■、粉末（高純度） 。Ｔ−８□■、あ。

例えば１３ｉｏ−Ｒａｄ型−Ｃｅ　Ｉ　ｌ　ｅｘ■Ｅ、
ａ維質トリエヂルアミノエチル（ＴＥＡＥ　’）セルロ
ース例えばＢｉｏ−’Ｒａｄ型−Ｃｅｌｌｅｘ■ＴＸ繊
維質ジエチル−（２−ヒドロキシプロピル）−アミノ（
ＱＡＥ）セルロース 例えばＢｉ・−ＲａｄハにＣ・１１・・■ＱＡＥ、繊維
質ジエチル−（２−ヒドロキシプロピル）−アミノ（Ｑ
ＡＥ）デキストラン 例えばＰｈａｒｍａｃｉａ型−ＱＡＥ−Ｓｅｐｈａｄｅ
ｘ■ヘンソイル化シエナルアミノエチルセルロース例え
ば１３ｉｏ−Ｒａｄ型−Ｃｅｌｌｅｘ■ＢＤ、繊維質カ
チオン交換物質 セルロースホスフェート 例えばＮＶｈａｔｍａｎ型− ■ Ｐ−１、フロック状 ■ Ｉ’−１１、粉末 ■ Ｉ”４１　　、粉末（高純度） Ｐ−８１■、紙 カルホキジメチルセルロース 例えｉｑｒ　ｗｈ　ａ　ｔｍ　ａ　ｎ型−ＣＭ−１■、
フ・ツク状 ＣＭ−１，１■、粉末 。１，１−２２■、繊維質 、や−２３■１．３つイヶ 。Ｍ−３゜■、１１７燥よゎヶ ■ ＣＭ−５２、湿った微粒状 例えば１３ｉｏ−（（ａｄ型−〇ＣＩ　Ｉ　ｅｘ■ＣＭ
、繊維質がルポキシメチルデキストラン ｌえば１〕ｈａｒｍａｃｉａ型−ＣＭ−３ｅｐｈａｄｅ
ｘ■ホスホ１ノルセルロース 例えけＢｉｏ−Ｒａｄ型−Ｃｅ１１ｅｘ■Ｐ、繊維質カ
ルボキシメチルアガロース 例えばＢｉｏ−Ｒａｄ型−ＣＭ　ＢｉｏｇｅｐＡ例えば
Ｐｈａｒｍａｃｉａ型−ＣＨ−３ｅｐｈａｒｏｓｅ■４
Ｂスルホプロピルテキストラン 例えばｐｈａｒｍａｃｉａ型づＰ−Ｓｅｐｂａｄｅｘ■
アレルゲン抽出物を科々の粒径の重合体担体粒子に化学
的に結合させて製造される試剤は十分公知である。例え
ば米国特許第３．８８２．２２５号；第３．９５７．９
３１号；第３．８２５．５２５号；第３゜６２９、５５
８号；第３．５６５．９８７号；第３，５５３．３１０
号；第３．４０７．０７６号；第３．２３６．７３２号
；第３．０９６．２５０号；第４．０９２．１１４−号
；第＜、１４０，６　６　２−＠　　；　第一４．２　
１　０．７　２　３号；紀４．２２６．７４７号；第４
．２５９．３１３号；第３゜０８８、８７５号；第３．
７６６．０１３号；第３，６１９、３７１号；第３．８
０９．６１３号；第３．８５３．９８７号；第３．９６
３．４４１号；第３．５５１．５５５号；及びｒ；ｘ　
３．６４９．３４６号、及びオランダ国特許第７．２０
１．３０　ｓ号及び英国特許第１．、２５７．２６３号
。

アレルゲン抽出物を斤台体ビーズに共有結合てせたい場
合には、ビーズの生成後に、ビーズに結合させるアレル
ゲン抽出物上のアミン、アミド又に１、スルホンアミド
基と反応することのできる基、例工ばクロルベンジノヘ
クロルアセチル、クロルエチルカルボニル、クロルエチ
ルカルボニルヘ　アクリロイル、又はビニル−スルホニ
ル基を保持している単量体をビーズに対して使用するこ
とが好ＪＫである。

１だ表面の基は、反応性のビーズ表面基と及び。

アレルゲン抽出物と反応する２官能性結合基を通してア
レルゲン抽出物に結合させることができる。

ビーズＩ」：普通１種又はそれり、上の単量体を標準的
な方法で重合きせることによって製造される。

いずれかの割合で互いに及び／又は他の単量体と′重合
及び／又は共重合させて所望のビーズを生成することの
できる適幽なビニル単量体は、モノビニリデン炭素環式
単量体、例えばスチレン、α−メチルスチレン、ａｒ−
（ｔ−ブチル）スチレン、ａｒ−メチルスチレン、ａｒ
、ａｒ−ジメチルスチレン、ａｒ−クロルスチレン、ａ
ｒ−（ｔ−アミル）スチレン、ａｒ−ブロムスチレン、
ａｒ−フルオルスチレン、ａｒ−シアノスチレン、ａｒ
−メトキシスチレン、ａｒ−エチルスチレン、ａｒ−ヒ
ドロキシメチルスチレン、ａｒ−エトキシスチレン、ａ
ｒ−クロル−ａｒ−メチルスチレン、ａｒ、ａｒ−７ク
ロルスチレン、ａｒ、ａｒ−シアルオルステレン、ビニ
ルナフタレン、及び他のそのような、炭素数が高々２６
の乳化重合しうる単量体；重合して非フイルム形成重合
体を生成するα、β−エチレン性不飽和カルボン酸のエ
ステル、例えばメタクリル酸メチル、メタクリル酸クロ
ルエチル、メタクリル酸ｎ−ブチル、メタクリル酸エチ
ノペメタクリル酸イソブチル、メタクリル酸インプロピ
ル、メタクリル酸フェニル、クロルアクリル酸ブチル、
クロルアクリル酸シクロヘキシ／ｌｚ、　クロ１ルア、
クリル酸エチル、クロルアクリル酸メチル、クロルアク
リル酸イソプロピル、及び重合して硬い重合体を生成し
うる他のそのようなエステル；非重合性カルボン酸のα
、β−エチレン性不飽和ニーエチルベンゾエート、ビニ
ルトリメチルアセテ−１−、ビニルピバレート、ビニル
トリクロルアセテート及び不飽和残基が炭素数２〜１２
であシ且つ酸残基が炭素数２〜１２である他のそのよう
な単量体；α、β−エチレン性不飽和ニドＩＪル、例え
ば炭素数が高々１２のニトリル；他の重合しうるビニル
単量体例えば塩化ビニル、臭化ビニルなどを含む。

アレギー状態を成功裏に処置する鍵は、防ぐアレルゲン
の正確な同定及び減感投薬量を決定するだめの感染動物
の滴定である。一般には、抗原−特異的ＩｇＧの主たる
生産及び抑圧剤７９７７球の主たる生産及び／又は活性
化を誘発するのに十分な量で再生アレルゲン抽出物を注
射する。しかしながら、その月、は主たるアレルギー反
応及び過度な抗原−特異的ＩｇＥの生産を誘発するほど
十分であるべきで々い。抗原−特異的ＩｇＥが増加した
量で生産される程度捷で、ＩｇＥ及び抑制剤ＩｇＥの生
産はアレルギー反応を防ぐように均衡のとれた状態であ
ることが必須である。

減感投与の濃度及び針は、アレルギー反応のある対象に
特異的である多くの因子に依存する。それ故に、適西な
投薬量を決定するだめに患者を滴定することが必要であ
る。この操作を行なうには種々の標率的な技術が存在し
ている。伝統的々方法の例は、本明細書に参考文献とし
て引用される上述のＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ　円］ａｒ
ｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　　５ｃｉ−ｅｎｃｅ、　１３４
４〜１３５２頁に記述されている。

皮膚及び引かき試験は、患者の皮膚に乱刺し或い：　　
は皮膚を摩擦し、少量の濃縮された抗原を適用すること
によって行なわれる。陽性の反応は、適用地点における
咽喉炎様の朕れと赤色化によって示され、臨床学的には
「フィール・アンド・フレア」反応（″”Ｗｈｅａｌ　
　ａｎｄ　　ｆｌａｒｅ”ｒｅａｃｔｉｏｎ）として公
知である。この反応はアレルギ個体において普通１５〜
２０分以内に起こる。反応の寸法及び外観は感性の程度
の１つの尺度となる。皮脂内又は表皮内試験は、アレル
ゲン物質を皮膚層の間に注射し、反応を観察することに
よって行なわれる。

この試験は引かき試験よりも敏感である。貼付は試験（
ｐａｔｃｈ　　ｔｅｓｔ）は、アレルゲンを含浸させた
小さい四角のガーゼ又は吸い取シ紙を皮膚に直接適用し
てアレルギー的接触皮膚炎を誘導する診断法である。４
８時間後に観察を行なう。同時に選び出した皮崩域に種
々のアレルゲンを適用することにより、アレルギ一応答
を引き起こすものが同定でき、アレルギー反応に含まれ
るアレルゲンに対する焦点が狭くなる。的のきまったア
レルゲンを、連続して、即ち漸次増加せしめた投与量で
適用し、濃度−感度の関係を決定する。

試験管内法に対しては、固体担体例えば球状ビ−ズ、円
形紙又はミクロ力価板の井戸の表面に付着σせたアレル
ゲンを使用する。患者の血清をアレルゲンで標識した円
形紙又はビーズと混合した時、アレルゲンに対して特異
的親和性を有するＩｇＥは紙又はビーズ表面上でアレル
ゲンに結合する。すべての非特異的ＩｇＥは紙又はビー
ズを洗浄することによって除去される。次いで標識され
た抗ＩｇＥを添加することができ、通光な保温及び洗浄
後に標識の景を測定する。この標識の量は、患者の血清
中に存在するアレルゲン−特異的ＩｇＥの量に、従って
アレルゲン感性の程度に関連する。これらの系を適用す
るためには、特別々抗ＩｇＥ及びアレルゲンで標識され
た担体物質を用いること、また第２の保温工程で用いる
抗ＩｇＥを標識することが必要である。最も有効な試験
管内法は同一出願人による１９８３年１月３１日付の関
連特許願第４６２．５８５号、即ち発明者Ｊ（ｍａｎｕ
ｅｌ　　　Ｃａｌ　ｅｎｏｆｆ、　　Ｒｕｔｈ　　、（
＋Ｉ１．　　Ｊｏｎｅｓ。

Ｙｕｈ−ｇｅｎｇＴｓａｙ及びＪｏｈｎ　Ｒ，５ｃｏｔ
ｔ　による特許類、”Ｆｌｕｏｒｏｍｅｔｒｉｃ　Ａｓ
５ａｙ　ｏｆ　Ａｌｌ−ｃｒｇｉｃ　Ｒｅａｃｔｉｏｎ
ｓ　　ａｎｄ　Ｒｅａｇｅｎｔｓ　Ｔｈｅｒｅ−ｆｏｒ
”に記述されている。

患者の感性及びアレルギー反応の程度は広範囲に亘るか
ら、減感処置に対する投薬範囲は試験なしに正確に予想
することはできない。一般に本発明の抗原組成物は、標
準的外方法で適用される。

それらは注射によって皮膚内に、皮下に、筋肉内に適用
でき、或いは経口的に、吸入により、直腸的に又は他の
記められている手段によって投与しうる。抗原組成物は
抗原０．１〜１０．　ＯＯＯμｇの量で投与される。

有害アレルゲンの同定後、本発明の７・イボセンシタイ
ゼーション（ｈｙｐｏｃｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｒ＋）
）免疫治療法が使用される。この方法の正確な機作は十
分に理解されていない。方法は、試剤に対するＩｇＧ抗
体保護を発現σせ且つ特異的な抑制剤Ｔリンパ球活性を
増加させる試みで、本発明の組成物を、普通最高許容投
与量（主たるアレルギ一応答を引き起こびない量）まで
投与量を漸次増加きせつつ、種々の間隔で注射すること
を含む。必要なＩｇＧ及び抑圧剤Ｔ　’Ｊンパ球細胞全
細胞するだめの補足的注射は１〜４週間の間隔で必要と
される。普通補足的注射に必要とされる投与量は最初の
アレルギー反応の抑制に必要とされる最高投与量よりも
実質的に多い。

本発明の注射しうる組成物は、実質的に不純物を含−１
々い１種又はそれ以上のアレルゲンを、１種又はそれ以
上の物理的に許容しうる無響性の賦形剤と組合せて含有
する水性組成物である。注射用の処方物に対しては、ア
レルゲン物質の濃度は厳密でなく、注射当りに必要とさ
れる投与量で決定される。一般に注射組成物には１０〜
１００，０００μｇ／ｌのアレルゲン濃度が使用できる
。

本発明の組成物は水性処方物として使用される。

非経口的処方物における用途には、ある秤の水性賦形剤
が公的に認められている。しばしばそれらは抗原濃厚物
を投与の時に添加しうる血液等張賦形剤として使用され
る。アレルゲンの更なる滲透工作用は投与した時に不快
感を誘発するほど大きくてはならない。これらの賦形剤
は、塩化ナトリウム注射液、Ｒｉｎｇｅｒの注射液、Ｃ
ｏｃａの溶液、Ｅｖａｎの溶液、デキストロース注射液
、デキストロース及び塩化ナトリウム注射液及びラクテ
ート化したＲｉｎｇｅｒの注射液を含む。

注射しうる組成物は、微生物及び粒状汚染物、並びに発
熱性汚染物を含んではならず、またそれが懸濁した固体
を含有する程度まで容易に分散させて均一な濃度を有す
る注射混合物とすべきである。

添加される賦形剤は非経口組成物に対して一般に使用さ
れるものであってよい。一般にこれらは等銀塩、抗微生
物剤、緩衝剤及び抗酸化剤の範ちゅうに入る。

非経口液剤の毒性を調節するのに一般に使用される水溶
性で無毒性の塩のいずれかが使用され°る。

塩化ナトリウムは最も普通に使用される。他の適当な塩
は、その滲透圧濃度と一緒に、上述のｌＲｅ−ｍｉｎｇ
ｔｏｎ’ｓ　ｐｈａｒｍａｃ６ｕｔｉｃａｌ　　５ｃｉ
ｅｎｃｅｓ。

１４０５〜１４１２頁に表示されている。ここに、この
内容は本明細書に参考文献として引用される。

特に多数回投与容器に入れられた調製剤に対しては、バ
クテリヤ静止又は菌静止濃度での抗微生物剤を添加する
ことができる。それらは内容物の１部分を皮下注射用の
針で取シ出している間に、不注意にも調製剤中に導入さ
れた微生物の増殖を防止するために、使用期間に適当な
濃度で存在しなければならない。一般に認められている
化合物及びその濃度限界は’［Ｊｎｉｔｅｄ　５ｔａｔ
ｅｓ　Ｐｈａｒｍａ−ｃｏｐｅｉａ　（ＵＳＰ　）に記
述されている。適当な抗微生物剤は、る肖酸フェニル水
銀、チメロサル（、ｏ、ｏｉ重量係）、ベンズエトニウ
ムクロライド及びベンズアルコニウムクロライド（０，
０１重量％）、フェノール又はクレゾール（０，５重量
％）及びクロルブタノール（０，５重量％）を含む。上
述の濃度は非経口用組成物の濃度として述べられている
。

硝酸フェニル水銀は０．００２重量％の濃度でしばしば
使用されている。ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチル（０，
１８重量％　）　、及び組合わせにおいてｐ−ヒドロキ
シ安息香酸プロピル（０，０２重量％）、及びベンジル
アルコール（２重量％）も適当である。

主に認めうる１）Ｈ変化で起こる化学的劣化に対して溶
液を安定化させるためには、緩衝剤が使用される。用い
る緩衝剤系は、注射した時に体内の緩衝剤系を重大なほ
ど乱きないように、普通はできるだけ低い緩衝剤能力を
有すべきである。更に、緩衝剤の範囲及び緩衝剤の、抗
原の活性に及ばず影響も関係する。緩衝剤として最もし
ばしば使用される酸塩は、水溶性の塩、例えばクエン酸
、酢酸及び燐酸のナトリウム、カリウム及びアンモニウ
ム塩である。

長期間の貯蔵中の酸化による劣化からアレルゲンを保護
するためには、抗酸化剤が使用できる。

適当な抗酸化剤は亜硫酸水素す）　ＩＪウム（０，１重
量％）、アセトン亜硫酸水素ナトリウム、ナトリウムホ
ルムアルデヒドスルホキシレート、及びチオ尿素を含む
。エチレンジアミン四酢酸のナトリウム塩は、σもなけ
れば酸化反応の触媒となる金属イオンにギレートし、従
って時に抗酸化剤の活性を高める。

本発明の水性アレルゲン抽出物は安定であり、水（含水
量１係以下）及び不純物を含丑ない。それは賦形剤を含
捷なくてよく、或いは水で又は通常の非経口用溶液で再
生するときに本発明の方法で非経口的投与をするのに適
当な組成物を与える製薬学的に許容しうる無毒性の賦形
剤を含有していてよい。抗微生物剤及び抗酸化剤の量は
、存在する場合ＵＳＰで認められている各試剤に対する
濃度範囲内の最終濃度を非経口用液剤に与えるべきであ
る。抗微生物剤化合物及び抗酸化剤の活性はそれぞれ選
択した化合物に特異的であるが故に、一般的な全範囲を
言うことができないが、その範囲は特にＵＳＰで認めら
れた濃度を考えて、各薬剤に基づいて選択される。

一般に安定々アレルゲン抽出物はアレルゲン抽出物を０
．０１〜９９．９重量％で含有する。更にそれ←抗微生
物組成物をＯ〜２、好ましくは０．１〜０．５重量係で
、及び抗酸化剤をＯ〜５、好ましくＵ、０１〜２重量％
で随時含有していてよい。乾燥濃縮物を緩衝した血液等
張の非経口溶液と混合して最終の非経口用注射組成物と
する場合、無水濃厚物中に緩衝剤及び等銀塩を存在させ
ることは不必要である。しかしながら無水濃厚物を蒸留
水で再生する場合には、それは０．１〜５、好ましくは
０．５〜２重量係の緩衝剤化合物、例えば−塩基性燐酸
カリウム、二塩基性燐酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウ
ムなど、及び等張溶液とするのに十分な是の等張鳩、例
えば塩化ナトリウムを含有することができる。

注射のだめの非経口用組成物は、上述の如き無水濃厚物
から、濃厚物を標準的な非経口溶液と混合することによ
って調製することができ、或いは他に蒸留水で再生する
ことができる。代表的な標準非経口溶液は緩衝された食
塩水、ｃｏｃａの溶液、グリセリン化したｃｏｃａの溶
液、等銀塩化す）　ＩＪウム溶液、炭酸水素ナトリウム
溶液、グリセリン食塩水溶液、アルコール食塩水溶液、
デキストロース溶液（５裂）及びデキストロース食塩水
溶液を含む。これらの溶液及びその調製法は本明細書に
参考文献として引用される上述のＲｅｍ　ｉ　ｎ　ｇ　
ｔ　ｏｎ’ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　　５ｃｉ
ｅｎｃｅｓ、　　１３４５　。

１４６１〜１４８７頁のような殆んどの製薬学ハンドブ
ックに記述されている。

アレルゲンを１００．０００活性単位で含有する真空封
入薬ビｙ（Ｆ’ＤＡで推奨をれた標準）を調製する。

１．０日（ｌておいて、３つのアレルゲンの薬ビンを、
発明者Ｅｍａｎｕｅｌ　Ｃａ１ｅｎｏｆｆ、　Ｔｓａｙ
　Ｙｕｈ　−ｇ−ｚｎｇ、　Ｒｕｔｈ　Ｍｃｃｌｕｎｇ
　Ｊｏｎｅｓ　　ａｎｄ　ＪｏｈｎＲｌＳｃｏｔｔによ
る表題”　ｐｌｕｏｒｏｍｅｔｒｉｃ　Ｉｎｈｉ−ｂｉ
ｔｉｏｎ　Ａｓ５ａｙ　”の関連特許願に記述されてい
るＩｇＥ　　ＦＡＳＴ禁止試験により、またＤＵ〜８型
分光器（Ｂｅｃｋｍａｎ　Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ　Ｃｏ
、　）を用いて４　Ｃ’ｌ　Ｏ〜７ＱＱｎｍに亘る透過
光（又は吸光）を測定する透明試験によシ、３回再生し
且つ試験する。同時に６つの薬ビンを３８℃、６つの薬
ビンを２２℃（室温）、１２の菊ビンを３３℃、そして
１２の薬ビンを２８℃の保温器に入れる。

２．８日後に、３８℃、３３℃及び２８℃の各々の保温
器からの１つの薬ビンを再生し、禁止試験及び透明試験
により３回試験する。２２°Ｃ１２８℃及び３３℃の各
保温器からの２つの薬ビンを再生し、２２℃、２８℃及
び３３°Ｃの保温器に戻す。

３、更に２日後、２２℃、２８℃及び３３℃の各保温器
からの予じめ再生した薬ビンを禁止試験及び透明試験に
より３回試験する。

４、全体で１５日（再生した薬ビンに対しては７日）後
、３８℃、３３℃及び２８℃の各保温器からの１つの某
ビンを再生し、禁止試験及び透明試験により３回試験す
る。予じめ再生した２２℃、２８℃及び３３℃の保温器
からの１つの薬ビンも禁止試験及び透明試験によって３
回試験する。

更に、本明細書に参考文献として引用されるＴ。

、ｐｏｕｃａｒｄ　ら、Ｉｎｔ、Ａｒｃｈ、Ａ、Ｉ　Ｉ
ｅｒｇｙ　　ＡＪ）ｐｌ−■ｍ＋ｎｕｎｏ＋、、４３，
３６０；Ｇ、、丁、ＧＩｅｉｃｈら、Ｊ。

１５１に記述されているＲＡＳＴ試験において、能力も
試験することができ２）。

試験では、開封することなしに、次の組成を有するＤｅ
ｌｖｅｃｃ　ｉｏ’ｓ　ＰＢＳ溶液５ｙを用イテ７　ｖ
ルゲンを再生した。

塩化カリウム　　　　　　　　　　０．２０ｇ／を燐酸
二水素カリウム　　　　　　０．２０ｇ／ｌ塩化ナトリ
ウム　　　　　　　　８．０（１／ｌυＢ’＋シニナト
リウム　　　　　　　　２．１６．！７／乙（Ｎａ、、
ＨＰＯ，−７Ｈ２０） 蒸留水　　　　　　　　　　　　　１．００Ａにする量 次の実施例は本発明を更に説明するが、これを限定する
ものではない。

／ 実施例　１ ショート・ラグウイード抽出物 脱脂：ソックスレー抽出器の５ｔの九にフラスコに、ソ
エチルエーテル４　ｏ　ＯＯ、ｔｗｔｉ　及び沸石を入
れた。多年生のショート・ラグウイード（Ｓｈｏｒｔ　
　ｈａｇｗｓｅａ）（Ａｍｂｒｏｓｉａ　　ａｒｔｅ−
ｍｉｓｉｉｆｏｌｉａ）からの花粉３１３．１６　重量
をソックスレー抽出器の抽出Ｆ市ｊ中に入れた。、凝縮
器中に水を流し始め、還流液が透明になるまでエーテル
を（過度に沸とうさせガいて）還流下に加熱した。花粉
を紙皿の上に均一に並べ、認めうるエーテルが存在しな
く在る寸で風乾して脱脂した花粉２７ａ４６ｙを得た。

抽出：抽出容器に、脱脂したショート・ラグウイードの
花粉１００２及び水（Ｕ、Ｓ、Ｐ。級ＷＦ工）１０００
ｍを入れた。抽出を４℃で１７．５時間継絖し、混合物
をセルロースのｐ紙を通過させて固体を除去した。

Ｖ＝過及び超’Ｆ”ａ：Ｐ液を１１．５ミクロンのフィ
ルターを通して清澄させ７゛こ。次いでそれをｉｏｏ、
ｏｏ。

ダルトンの超フィルターを通過させて０ゴ液８００ｍ１
！を得た。

次いで残るＭ液の容量が４００−に減ぜられる壕で１０
００ダルトンのフィルターで超濾過しだ。

この残る浴液に、燐酸塩でｐ　Ｈ７，４に緩衝された食
塩水４　Ｇ　Ｏ＋ｎｌを添加し、次いでこの溶液を、残
る浴液の容量が４００ｍ１となる１で再び超濾過した。

この希釈と１０００ダルトンでの超濾過との操作を更に
２回以上繰返して溶液４００ｍ１の最終容量を有た。

前の工程で得られた溶液５０ｒｎ１部分を、湿った（膨
潤した）テキスト７；ｚ（Ｓ８ｐｈａａｅＸ　Ｇ−２５
゜Ｐｈａｒｍａｃｉａ）２５７及び活性炭６２と混合し
た。この混合物を穏やかに振り、１５分間室温で放直し
、０．２μの無菌濾過装置を通して濾過した。

残渣を燐酸塩で緩衝させた食塩水（ｐ　Ｈ７，４）２５
７でゆすいだ、生成物の浴液は無色であった。

凍結乾燥：紀じいて溶液を、１　：　１０ｗｔ／ｖｏｌ
当量抽出物の５ゴの当に〜即ちｉ　ｏ　ｏ、　ｏ　ｏ　
ｏアレルギ一単位を与えるのに十分な溶液（ＦＤＡの推
奨する標準）の童で薬ビン中に入れた。この薬ビンを一
６０℃に２時間凍結し、真空を適用し、凍結乾燥器の棚
を徐々に２５℃壕で加熱し、一定の重量になる壕で凍結
乾燥を続け、１重量係以下の含水量まで乾燥したショー
ト・ラグウイードの花粉抽出物１　［）　［１，Ｄ　Ｄ
　Ｄ単位を含む薬ビンを得た。

実施例　２ 花粉の抽出物 ショート・ラグウイードの花粉の代シに次の花粉を用い
る以外実施例１の方法を繰返すことによυ、対応する無
色のアレルゲン抽出物を得た。これ１１００〜１００．
００　［１ダルトン範囲以外の分子是の成分を芙質的に
含有せず旧、つ含水量が１％以下であった： パーミューダ・グラ、ｚ、（Ｂｅｒｍｕａａ　　Ｇｒａ
ｓｓ）−Ｃｙｎｏａｏｎ、ａａｃｔ７１０ｎ；ウェスタ
ーン・ラグウイード（Ｗｅｓｔｅｒｎ　　Ｒａｇｗｅｅ
ｄ）−Ａｍｂｒｏｓｉａｐ８ｉ１０ｓｔａｃｈ７ａ；多
年性ライグラス（ｌＲｙｅＧｒａｓｓ）−Ｌｏｌｕｉｍ
　　ｐ８ｒｒｅｎｅ；ヅ’Ｅ３７ソングラス（Ｊｏｈｎ
ｓｏｎ　　Ｇｒａｓｓ）−８ｏｒｇｈｕ、ｍｈａｌｅｐ
ｌｅｓｅ；オオ７’７　＃エリ（ＴｉｍｏｔｈｙＧｒａ
ｓｓ）−Ｐｈｌｅｕｍ　　ｐｒａｔｅｕｓｅ；　トウモ
ロコシ（Ｃｏｒｎ）−Ｚｅａ　　ｍａｙｓ；　マウンテ
ンｏシダー（Ｍｏｕｎｔａｉｎ　　０ｅｄｅｒ）−Ｊｕ
ｎｉｐｅｒｕｓｓａｂｉｎｏｌｄｅｓ；イングリッシュ
・ズ′ラウテン（Ｅｎｇｌｉｓｈ　　Ｐｌａｕｔａｉｎ
）−Ｐｌａｎｔａｇ。

１ａｎｃｅｏｌａｔａ；ホワイト・アッシュ（Ｗｈｉｔ
ｅＡｅｈ）−Ｆｒａｘｉｍｕｓ　　ａｍｌＥｌｒｉｃａ
ｎａ；ホワイト・オーク（Ｖｉ’ｈｉｔｅ　　０ａｋ）
−Ｑｕｅｒｃｕｅ　　ａｌｌ）ａ；ホックス−：Ｉ：　
ルダー（Ｂｏｘ　　Ｅｌｄｅｒ）−ＡｃθＳｎｅｇｕｎ
ｄ−０；ホワイト、　フルク＝　（Ｗｈｉ　ｔｆ３Ａｌ
ｄｅｒ）−Ａｌｎｕｓ　　ｒｈｏｍｌ）１ｆＯ１ｉａ；
　７メリカ＝しくＡｍｅｒｉｃａｎ　Ｅｌｍ）−Ｕｌｎ
ｕｓａｍｅｒ　１ｃａｎａ　；　ハヒ７−　り２　ス（
ＢａｈｉａＧｒａｓｓ）−Ｐａｓｐａｌｕｍ　ｎｏｔａ
ｉ；ｕｍ；　ヨモギ（Ｓａｇｅｂｒｕｓｈ）−Ａｒｔｅ
ｍｅｓｉａ　　ｔｒｉａｅｎｔａｔａ・カモガヤ（Ｏｒ
ｃｈａｒｄ　　Ｇｒａｓｓ）−ＤａｃｔｙｌｉｓｇｌＯ
Ｊ］１ｅｒａｔａｉオカヒソキ（ＲｕｓｓｉａｎＴｈ１
８　ｔｌｅ　）−８ａｌｓｏｌａ　　ｋａｌｉ　　（ｐ
ｅｓｉ；１ｆｅｌｒ）Ｈメ）’　ウＱ７　ニスキュー（
ＭｅａａＯＷ　　Ｆｅ５Ｃｕｅ）−Ｆｅｓｔｕｃａ　　
ｅｌａ’ｅｉｏｒ；オリーブ（０１ｉｖｅ　）　−０１
ｅａ　　ｅｕｒｏｐａｅａ、ブ７７り・す／ぐ−Ｏノ々
−チ（Ｂ’１ａｃｋ　　ｒｉｖｅｒ　　Ｂｉｒｃｈ）−
Ｂｅｔｕｌａ　　ｎｉｇｒａ；ラムズコーターズ（Ｌａ
ｍｂ／ｓ　　Ｑｕａｒｔｅｒｓ）−Ｏｈｅｎｏｐｏａｉ
ｕｍ　　ａｌｂｕｍ７実施例　６ 次の木の花粉、牧草の花粉及び雑草の花粉を用いて実施
例１の方法を繰返すことによりｔ対応する無色の抽出物
を得た： 木の花粉−アカシャ−ＡｃａＣ１ａ　’１０ｎｇｌ−ｆ
Ｏ１１ａ；アカシャ、ベイリーズ独（Ｂａｉｌθｙ　ｒ
　Ｂ　）−Ａｃａｃｉａ　　１）ａｉｌｅｙａｎａ；＝
＋７ウルシ（シンシュを児よ）−Ａｉｌａｎｔｈｕｓ　
　ａｌｔｉｓｓｉｍａ；ハンノキ、７９７７７種（Ｍｏ
ｕｎｔａｉｎ）、（Ｔａｇ）（Ｓｌｅｎｄｅｒ）−ａｉ
ｎｕｓ　　ｔｅｎｕ１ｆｏｌｉａ／１ｎｃａｎａ；　ハ
フツキ、レッド％９　（：Ｒｅ　ｄ　）（ＯｒｅｑＯｎ
）　−Ａｌｎｕｓ　　ｒｕｂｒａ；　ハンノキ、シトカ
種（Ｓｉｔｋａ）−Ａｌｎｕｓ　　Ｂｉｎｕａｔａ；７
−モンドーＰｒｕｎｕｓ　　ａｍ７ｇｄａｌｕＪリンコ
ーＰｙｒｕｅ　　ｍａｌｕｓ　　（Ｍａｌｕｓ　　ｐｕ
ｍｉｌａ）；７７ズーＰｒｕｎｕｓ　　ａｒｍｅｎｉａ
ｃａ；　＝オイヒバへオリエンタル種（Ｏｒｉｅｎｔａ
ｌ）（Ｏｒｎａｍｅｎｔａｌ−）−Ｔｈｕ、ｊａ　　０
ｒｉｅｎｔａ１ｉ８ｉ　）ネリコ、アリシナｆＪ　（Ａ
　ｒ　ｌ　Ｚ　Ｏｎ　ａ　）　（Ｖ　ｅ　Ｉ　Ｖ　ｅ　
ｔ）　−Ｆ　ｒ　ａ　Ｘ　ｌ　ｎ　ｕ　Ｂｖｅｌｕｔｉ
ｎａ；　トネリコ、ブレーク種（Ｂｌａｋｅ）−Ｆｒａ
ｘｉｎｕｓ　　ｎｉｇｒａ、）ネリコ、グリーン種（Ｇ
ｒｅｅｎ）（Ｒｅｄ）−Ｆｒａｘｉｎｕｓ　　Ｐｅｎｎ
５ｙｌ−ｖａｎｌＣａ；トネリコ、オレゴンイｉ（Ｏｒ
ｅｇｏｎ）−Ｆｒａｘｉｎｕｓ　　ｏｒｅｇｏｎａ　　
（ｌａｔｌｆｏｌｉａ）；ポプラ−Ｐｏｐｕ］、ｕｓ　
　ｉ；ｒｅｍｕｌｏｉｄｅｓ；ベイペリツユ（Ｂａｙｂ
ｅｒｒｙ）（Ｓｗｅｅｔ　　Ｇｅｌｅ）−Ｍ　７　ｒ　
ｌ　Ｃａｇ　ａｌ　ｅ　；　７　ｆ　ｓ　７　メ’Ｊ　
力／種（Ａｚｅｒｉｃａｎ）−Ｆａｇｕｓ　　ｇｒａｎ
ａｉｆｏｌｉａ；カバ％チェリ一種（Ｃｈｅｒｒｙ）−
Ｂｅｔｕｂａ’１ｅｎｔａ；カバー１ぺ−４一種（Ｐａ
ｐｅｒ）−Ｂｅｔｕｌａｐａｐｙｒｉｆｅｒａ；カバ、
スプリ７　グ９ｉ（Ｓｐｒｉｎｇ）−Ｂｅｔｕｌａ　　
ｆｏｎｔｉｎａｌｉｓ；カバ、ホワイト種（Ｗｈｉｔｅ
）（Ｗｅｅｐｉｎｇ）−Ｂｅｔｕ’ｌａ　　ｐｅｎｄｕ
ｌａ；カバ、イｘ　ｏ　一種（Ｙｅｌｌｏｗ）−Ｂｅｔ
ｕ：Ｌａ　１ｕｔｅａ；ブルーピーチ（Ｂｌｕｅ　　Ｂ
ｅｅｃｈ）　　（Ａｍ。

Ｈｏｒｎｂｅａｍ）−０ａｒｐｉｎｕｅ　　Ｃａ１７０
１ｉｎｅａｎａ；スギナ−Ｃａｌｌｉｓｔｅｍｏｎ　　
ｃｉｔｒｌｎｕｓ；クルミーＪｕｇｌａｎｓ　　Ｃ１ｎ
ｅｒｅａ；イナゴマメノ木−０ｅｒａｔｏｎｉａ　　５
ｉｌｉｑｕａ；　ス−ｚ、テオダー棟（Ｄｅｏｄａｒ）
−Ｃｅｄｒｕｓ　ａｅｏｄｏｒａ；　スギ、ソヤイ７７
）ｆｍ（Ｇｉａｎｔ）−Ｔｈｕｊ、ａ　　ｐｌｉｃａｔ
ｅ；スギ、インセンス種（工ｎｃｅｎｓｅ　）−Ｌｉｎ
ｏｃｅａｒｕｓｃＬｅｃｕｒｒｅｎｓ；　スギ、日本１
車（Ｊａｐａｎ、ＥＩＳｅ）−Ｏｒｙｐｔｏｍｅｒｉａ
　　ｊａｐｏｎｉｃａ；スギ、ボート・、ｔ−フｔ−）
’種（Ｐｏｒｔ　　０ｒｆｏｒｄ）（王、ａｗｓｏｎＯ
ｙｐｒｅｓｓ）−Ｃｈａｍａｅｃｙｐａｒｉｓ　１ａＷ
ｓＯｎｉａｎａ；スキ、Ｌ／ツｌ’第５（Ｒｅｄ）−Ｊ
ｕｎｉｐｅｒｕｓｖｉｒｇｉｎｉａｎａ；スギ、ロッキ
ーΦマウンテン種（Ｒｏｃｋｙ　Ｍｏｕｎｔａｉｎ）−
Ｊｕｎｉｐｅｒｕｓ８ＣＯｐｕｌＯｒｕｍ；　スギ、ソ
ルト１１（ｓａｉｔ）（Ｔａｍａｒｉｓｋ）−Ｔａｍａ
ｒｉｘ　ｇａｌｌｉｃａ；スＷ　％　ホ’フイ）、　柚
（Ｗｈｉｔｅ）−Ｔｈｕｊａｏｃｃｉｄｅｎｔａｌｉｓ
；サフランｙＪ？−Ｐｒｕｎｕ８ｃｅｒａｓｕｓ；クリ
、アメリカン種（Ａｍｅｒｉｃａｎ）、Ｃａ５ｔａｎｅ
ａ　　ａ８ｎ１：ａ’ｅａ；クリ、ホース種（Ｈｏｒｓ
ｅ）−Ａｅｓｃｕｌｕｓ　　　ｂｉｐｐＯｃａ８ｔａｎ
ｕｍ　；ハコヤナギ、ブランク種（Ｂｌａｃｋ）（ボッ
０ラーＷｅｓｔｅｒｎ　　Ｂａｌｓａｍ）−Ｐｏｐｕｌ
ｕｓｔｒｉｃｈｏｃａｒｐａｉ　ハコヤナギ、普通種（
Ｃｏｍｍｏｎ）−Ｐｏｐｕｌｕｓ　　　ｃｌｅｌｔｏｉ
ｄ、ｅｅ；　　ノー、コヤナギ、フレモント種（Ｆｒｅ
ｍｏｎｔ）−Ｐｏｐｕｌｕｓｆｒｅｍｏｎｔｉｉ；イト
スキ、アリシナ種（Ａｒｉｚｏｎａ）−０ｕｐｒｅｓｓ
ｕｓ　　ａｒｉｚｏｎｉｃａ；イトスキ、ホルト種（Ｂ
ａｌｄ）（Ｗｈｉｔｅ）−Ｔａｘｏｄ、ｉｕｍ　　ａｉ
ｓｔｉｃｈｕｍ；イトスギ、イタリアン鍾（工ｔ　ａ　
１　ｉ　ａ　ｎ　）　−０ｕ　ｐ　ｒ　ｅ　Ｓ　Ｂ　ｕ
　８ｓｅｍｐｅｒｖｉｒｅｎｓ；イトスギ、モンテリ一
種（Ｍｏｎｔｅｒｅｙ）−０ｕｐｒｅｓｓｕｓ　　ｍａ
ｃｒｏｃａｒｐａ；セイヨーウニワトコ−８ａｍｂｕｃ
ｕｓ　　ｇｌａｕｃａ；ニレ、シダーｇ（Ｃｅｄａｒ）
（Ｆａｌｌ　　Ｂｌｏｏｍｉｎｇ）　−Ｕｌｒｎｕｅ　
　ｃｒａｓｓｉｆｏｌｉａ；　＝し、中国種（Ｃｈｉｎ
ｅｅｓ）−Ｕｌｎｕｅ　　ｐａｒＶｉｆｏｌｉａ；　＝
ｌ／、シベリアｉ％（ＳｉｂＳｒｉａｎ）−Ｕｌｍｕｅ
　　ｐｕｍｉｌａ；ニレ、スリッパリ−１１（Ｓｌｉｐ
ｐｅｒｙ）−Ｕｌｍｕｓｆｕｌｖａ　　（ｒｕｂｒａ）
；　ユーカリ（Ｂｌｕｅ’Ｇｕｍ）−Ｅｕｃａｌｙｐｔ
ｕｓ　　ｇｌ、ｏｂｕｌｕｓ；　モミ、ダグラス種、（
Ｄｏｕｇｌａｓ）−Ｐｓｅｕｄｏｔｓｕｇａｍｅｎｚｉ
ｅｓｉｉ；　モミ、Ｌ／７）’ｊＪ（Ｒｅａ）（Ｎｏｂ
ｌｅ）−Ａｂｉｅｅ　　ｎｏｂｉｌｉｓ（ｐｒｏｃｅｒ
ａ）；モミ、ホワイトｆＨｆＨ（Ｗ　ｈ　ｉ　ｔ　ｅ　
）　−Ａ　ｂ１８５Ｃ０１１ＣＯ１０１７；ゴム、スウ
ィートａ（Ｓｗｅｅｔ）−：Ｌｉｑｕｉｄａｍｂａｒ　
　Ｓｉ；７ｒａＣ１ｆｌｕａ；工／−１’−Ｃ！ｅｌｔ
ｉｓ　　０ＣＣ１ａ８ｎｔａｌｉＳ；ハシバミ、アメリ
カ７鍾（Ａｍｅｒｉｃａｎ）−Ｃｉｏｒｙｌｕｓａｍｅ
ｒｉｃａｎａ；アメリカンが、イースタン種（Ｉｉｉａ
ｓｔｅｒｎ）−Ｔｓｕｇａ　　Ｃａｎａａｅｎ８１８；
　　アメリカンが、ウェスタフｆ、ｆｆｉ（Ｗｅｓｔｅ
ｒｎ）−ＴＳｕｇａｈｅｔｅｒｏｐｈｙｌｌａ；　ヒラ
：フリー、ジャグバークｆｍ（Ｓｈａｇｂａｒｋ）−０
ａｒｙａ　　０Ｖａｔａ；　ヒラコリー、シェルパーク
種（Ｓ　ｈ　ｅ　１１１）　ａ　ｒ　ｋ　）　−Ｃａ　
ｒ　７　ａ１ａＣ１ｎｉ０８ａ；ヒラコリー、ホワイト
種（Ｗｈｉｔｅ）−０ａｒｙａ　　ｔｏｍｅｎｔｏｓａ
；アイロンウッド（Ｉｒｏｎｗｏｏｄ）（Ｈｏｐ−Ｈｏ
ｒｎｂｅａｍ）−Ｏｅｔｒｙａ　　ＶｉｒｌＪｉｎｉａ
ｎａ；ネズ、カリフォルニア種（Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ
）−ＪｕｎｉｐｅｒｕｓＣａｌｉｆＯｒｎｉＣａ；ネズ
、中国種（Ｃｈｉｎｅｓｅ）−Ｊｕｎｉｐｅｒｕｓ　　
ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ；ネズ、ワンシード％’ｆ４（Ｏｎ
ｅｓｅｅｄ）−Ｊｕｎｉｐｅｒｕｓ　　ｍｏｎｏｓｐｅ
ｒｍａ；ネズ、ピンチヨツト種（Ｐｉｎｃｈｏｔ）−Ｊ
ｕｎｉｐｅｒｕｓｐｉｎＱｈｏｔｔｉ；ネズ、ユタ種（
Ｕｔａｈ　）　−、Ｔｕｎｉｐ８ｒｕ８　０８ｔｆｌ１
０８ｐｅｒｌｌｌａ（ｊｕｆｌｉｐｅｒｕ８ｕｔａｈｅ
ｎｓｉｓ）；ネズ、ウェスタフｆ’４　（ｗｅｓｔｅｒ
ｎ）−Ｊｕｎｉｐｅｒｕｓ、−ｏｃｃｉｄｅｎｔａｌｉ
ｓ；ライラック−８ｙｒｉｎｇａ　　ｖｕｌｇａｒｉｓ
；　シナツキ（Ｂａｓｓｗｏｏｄ）−Ｔｉｌｉａ　　ａ
ｍｅｒｉｃａｎａ；イナゴマメ１ブランク棟（Ｂｌａｃ
ｋ）−Ｒｏｂｉｎｉａｐｅｅｕｄ、ｏａｃａｃ　１ａ；
カエテ、ヒ）り−’）−７１４（Ｂｉｇ−Ｌｅａｆ）（
Ｃｏａｓｔ）−Ａｃｅｒｍａｃｒｏｐｈｙｌｌｕｍ；カ
エデ、ハード種（Ｈａｒｄ）（Ｓｕｇａｒ）−Ａｃｅｒ
　　ｓａｃｃｈａｒｕｍ；カエデ、レッド（ｉ　（Ｒｅ
ｄ）−Ａｃｅｒ　　ｒｕｂｒｕｍ；カエテ、ソフ　トｌ
ｆｉ　（Ｓｏｆｔ）（Ｓｉｌｖｅｒ）−ＡＣｅｒｓａｃ
ｃｈａｒｉｎ、ｕｍ；メラリュー力（Ｍｅｌａｌｅｕｃ
ａ）（Ｆｕｎｋ　　Ｔｒｅｅ）−Ｍｅｌａｌｅｕｃａｌ
ｅｕｃａｄｅｎｄｒｏｎ；メスカイト（Ｍｅｓｑｕｉｔ
ｅ）−Ｐｒｏｓｏｐｉｓ　　ｊｕｌｉｆｌｏｒａ；パイ
カラツキ（Ｍｏｃｋ　Ｏｒａｎｇｅ）、野生種（Ｗｉ　
ｌｄ　）（Ｓｙｒｉｎｇａ’）−Ｐｈｉｌａｄｓｌｐｈ
ｕｓ　　１ｅＷｉ８ｉ１；クワ、ペーパ一種（Ｐａｐｅ
ｒ）−ＢｒｏｕＢｓｏｎｅｔｉａｐａｐｙｉｆｅｒａ；
クワ、レッド種（Ｒｅａ）−ＭＯｒｕｓｒｕｂｒａ；ク
ワ、ホワイト４ｉ（Ｗｈｉｔｅ）−Ｍｏｒｕｓａｌｂａ
；カシ、アリシナ種（ＡｒｌＺＯｎａ）（、Ｇａｍｂｅ
ｌ）−Ｑｕｅｒｃｕｓ　　ｇａｌｎｂＥ＋１１１；カシ
、アリシナ−スクラブ種（ＡｒｌｚＯｎａ　　５ｃｒｕ
ｂ）（Ｃａｎｙｏｎ）−Ｑｕｅｒｃｕｓ　　ｃｈｒｙｓ
ｏｌｅｐｓｉｓ、；カシ、ブラック種（Ｂｌａｃｋ）（
Ｙｅｌｌｏｗ）−Ｑｕｅｒｃｕｓ　　ｖｅｌｕｔｉｎａ
、カシ、ブラック−ブラック種（Ｂｌａｃｋ　　Ｊａｃ
ｋ）−ＱｕｅｒＣｕｓｍａｒｉｌａｎｄｉｃａ；カシ、
パ一種（Ｂｕｒ）−ＱｕｅｒＣｕ８　　ｍａｃｒｏｃａ
ｒｐａ；カシ、カリフォルニア−ブランク種（Ｏａｌｉ
ｆｏｒｎｉａ　　Ｂｌａｃｋ）−Ｑｕｅｒｃｕｓ　　ｋ
ｅｌｌｏｇｇｉｉ−ｃａｌｉｆｏｒｎｉｃａ；カシ、カ
ルフォルニア・スクラブ種 （Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ　　Ｓｃｒｕｂ）−Ｑｕｅｒｃ
ｕｓｄｕｍｏｓａ；カシ、コースト’フイブ棟（Ｃｏａ
ｓｔＬｉｖｅ）−Ｑｕｅｒｃｕｓ　　ａｇｒｉｆｏｌｉ
ａ；カシ、ｘンｒルマンｆ４（Ｅｎｇｓｌｍａｎｎ）−
Ｑ、ｕｓｒｃｕｓθｎｇｅ１ｍａｎｉｉｉカシ、ガリ一
種（Ｇａｒｒｙ）（Ｗｅｓｔｅｒｎ　　Ｗｈｉｔｅ）−
Ｑ、ｕｅｒｃｕｓ　　ｇａｒｒｙａｎａ；カシ、ホリー
１７４（Ｈｏｌｌｙ）−Ｑｕｅｒｃｕ８　１１８Ｘ；カ
シ、インテリア・ライブ種（工ｎｔｅｒｉｏｒＬ　ｉ　
Ｖ　ｅ　）　−Ｑ　ｕ　ｅ　Ｔ　Ｃｕ　Ｂ　　Ｗ　ＩＳ
　１１　Ｚ　ｅ　０１１　；カシ、ポスト種（Ｐｏｓ−
ｔ）−Ｑｕｅｒｃｕｓ　　５ｔｅｌｌａｔａ；カシ、Ｌ
／７１’種（Ｒｅａ）−Ｑｕｅｒｃｕｓ　　ｒｕｌ）ｒ
ａ；カシ％スワ７プ種（Ｓｗａｍｐ）（Ｐｉｎ）、−Ｑ
ｕｅｒｃｕｓｐａｌｕＩ：＋ｔｒｉｓ；カシ、バリー独
（Ｖａｌｌｅｙ）−Ｑｕｅｒｃｕｓ　　１ｏｂａｔａ、
カシ、パーヅニアＯライブ種ＣＶｉｒｇｉｎａ　　Ｌｉ
ｖｅ）−Ｑ、ｕｅｒｃｕｓｖｉｒｇｉｎｉａｎａ；カシ
、ウォーター鎮（Ｗａｔｅｒ）−Ｑｕｅｒｃｕｓ　　ｎ
ｉ（ｇｒａ；オレンソーＣ１ｔｒｕｓｓｉｎｅｎｓｉｓ
；オーセソオレンソ−Ｍａｃｌｕｒａｐｏｍｉｆｅｒａ
；　ヤシ、デート種（Ｄａｔｅ）−ｐｈｏｅｎｉｘ　　
ｄａｃｔ７１１ｆｅｒａ；　ヤシ、ドウオー７７１ｉ（
Ｄｗａｒｆｌ−Ｃｈａｍａｅｒｏｐｓ　　ｈｕｌｌｌｕ
ｌｉＪヤシ、カナソー・アイランド・デートね（Ｏａｎ
ａｒｙ　　ｌ５ｌａｎｄ　　Ｄａｔｅ）（Ｏｒｎａｍｅ
ｎｔａｌ）、Ｐｈｏｅｎｉｘ　　ｃａｎａｒｉｅｎｓｌ
ｓ；ヤシ、クイーン種（Ｑｕｅｅｎ）−Ｃｏｃｏｓ　　
ｐｌｕｍｏｓａ；　モモ−Ｐｒｕｎｕｓ　　ｐｅｒｓｉ
ｃａ；ナシ−Ｐｙｒｕｓｃｏｍｍｕｎｉｓ　；ペカ７−
０ａｒｙａ　　ｐｅｃａｎ；　ハツカの木、カリ７、ｔ
＃＝７ｆｍ（Ｏａｌｉｆｏｒｎｉａ）−８ｃｈ１ｎｕｓ
　　１１１０１１８；ハツカの木、ブラソリアンオイ！
（Ｂｒａｚｉｌｉａｎ）−８ｃｈｉｎｕｓｔｅｒａｂｉ
ｎｔｈｉｆｏｌｉｕｓ；　マツ、オーストラリア　ｉ４
　（Ａ　ｕ　Ｓ　ｔ　ｒ　ａ　１　ｉ　ａ　ｎ　）　（
Ｂ　ｅ　ｅ　ｆ　Ｗ　ＯＯａ　）　−ＣａＳｕａｒｉｎ
ａ　ｅｑｕｉ８ｅｊｉｆｏ１ｉａ；　マツ、オーストリ
ア種（Ａｕｓｔｒｉａｎ）−Ｐｉｎｕｓ　　ｎｉｇｒａ
；マツ）カナソー・アイランド種（Ｃａ　ｎ　ａ　ｒ　
７エ５ｌａｎｄ）−Ｐｉｎｕｓ　　（！ａｎａｒｉ８ｎ
ｓｉｓ；マツ、ディツガ−ｆｆｆｌ　（Ｄ　ｉ　ｇｇ　
ｅ　ｒ　）　−Ｐｉ　ｎ　ｕＢ５ａｂｌｎｉａｈａ；　
−ｚッ、　ｒ＋ブロリソー５（ＬｏｂｌｐＨｙ）−Ｐｉ
ｎｕｓ　　ｔａｅｄａ；　マツ、ロシンボール（ＬＯｄ
ｌｇｅｐＯｌｅ）−Ｐｉｎｕｓ　　Ｃ０ｎｔＯｒ１；ａ
Ｈマツ、モンテリーａｊ（Ｍｏｎｔｅｒｅｙ）−Ｐｉｎ
ｕ。

（Ｎａｒｗａｙ）−Ｐｉｎｕｓｒｅｆ３ｉｎ０８ａ；−
ｒッ、ショートリーフｊ１４　（Ｓｈｏｒｔｌｅａｆ）
−Ｐｉｎｕｓθｃ　ｈ　ｉ　ｎ　ａ　ｔ　ａ　；マツ、
バーヅニア。スクジプ杜（Ｖ］ｒｇｉｎｉａ　　５ｃｒ
ｕｂ）−Ｐｉｎｕｓ■工ｒｇｉｎｉａｎａ；マツ、ワエ
スクーン・イエロー１４Ｈｌ（Ｗｅｓｔｅｒｎ　　Ｙｅ
ｌｌＯＷ）（ＰＯｎｄｅｒｎＳａ）−Ｐｉｎｕｓ　　ｐ
ｏｎｄｅｒｏｓａ；−ｑッ、ホワイト棟（Ｗｈｉｔｅ）
（Ｅａｓｔｅｒｎ）−Ｐｉｎｕｓ　５ｔｒｏｂｕｓ；マ
ツ、ホワイトｆ！！（Ｗｂｉ　ｔｅ　）　（ＶＶｅＢ　
ｊｅ１７ｎ　）−Ｐｉｎｕｓ　ｍｏｎｔｉｃｏｌａ；　
セイヨウ、ｘ、モモ（Ｐｒｕｎｅ）−Ｐｒｕｎｕｓ　　
ｄｏｍｅｓｔｉｃａ−ポプラ・バルサム％　（Ｂ　ａ　
Ｉ　Ｓ　ａｍ）−ＰＯｐ　ｕ　１　ｕ　８１）ａｌＳａ
ｒｌｌｉｆｅｒａ；ホブ５．ｏンバーデイー独（Ｌｏｍ
ｂａｒｄｙ）−Ｐｏｐｕｌｕｓ　　ｎｉｇｒａ−ｉｔａ
ｌｉｃａ；ウェスタン０バルサＡ　（Ｗｅｉｌｌ　ｔｅ
　ｒ　ｎＢａ１ｓａ！ｎ）（ハコヤナギ）プ２ツク種を
見よ）Ｐｏｐｕｌｕｓ　　ｔｒｉｃｈｏｃａｒｐａ；ボ
ン０う、ポヮイ）、ｌ’１ｉｉ（ｖＹＩｈｉｔｅ）−Ｐ
ｏｐｕｌｕｓ　　ａｌｂａ；イボタノキ−Ｌｉｇｕｓｔ
ｒｕｍ　Ｓｐｐ弓７メリカスギー５ｅｑｕｏｉａ　　５
ｅｒｎｐｅｒｖｉｒｅｎｓ；　ｏ　シャオリーブ−Ｅｌ
ａｅａｇｎｕｓ　　ａｎｉｑｕ８ｊｉｆｏ１１ａ；　ト
ウヒ、Ｌ／７　）４ｆｉ（Ｒｅｄ）−Ｐｉｃｅａ　　ｒ
ｕｂｅｎｓ；　トゥヒ、シトカ枝（Ｓ　ｌ　ｔｋ　ａ　
）　−Ｐ　Ｉ　Ｃｅ　ａ　　Ｓ　ｌ　ｔＣｈ　ｅ　ｎ　
Ｅ３　ｉ　Ｓ　・スズ力τ、アメリカ、Ｊｉ（Ｅａｓｔ
ｅｒｎ）−Ｐｌａｔａｎｕｓ　　ｏｃｃｉｄｅｎｔａｌ
ｉｓ；　スズカケ、メープルリーフ　１１１　（Ｍ　ａ
　ｐ　１　ｅ　１８　ａ　ｆ　）　−Ｐ　１　ａ　ｔ　
ａ　ｎ　ｕ　８ａＣθｒｉｆｏｌｉａ；スズカケ、ウェ
スターン種（Ｗｅｓｔｅｒｎ）−Ｐｌａｔａｎｕｓ　　
ｒａｃｅｍ’ｏｓａ−アノリカカラマフ　（ＬａｒＣ１
’１）−Ｌａｒｉｘ○ｃｃｉｃｌｅ；〕ｔａｌｉｓ；−
７メリカカシマソ（スギ、ンルｌ−イ・；杢を見よ）−
アメリカカラマツ、ガリヵ種（ｇａｌｌｉｃａ）；　シ
ノソ１−Ａｉｌａｎｔｈｕｓａｌｔｊ、Ｆ］ｓｉｍａ；
ウォルナット、アリシナ棟（ＡｒｉｚＯｎａ）−Ｊｕｇ
ｌａｎｓ　　ｒｕｐｅｅｔｒｉｅ；ウオルプーット、フ
゛ラツクオ車（王３１ａＣ）ζ）−Ｊｕｇ’Ｌａｎ５　
　ｎｉｇｒａ；ウォルナット、ハインズ・カリフォルニ
ア・ブランク社Ｃ″Ｈｉｎａ／５Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ
　　Ｂｌａｃｋ）−Ｊｕｇｌａｎｓｈ　〕−ｎ　ｄθユ
］−；ウォルナット、ソ・カリフォルニア・ブラック種
（Ｓｏ−Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ　　Ｂｌａｃｋ）−Ｊｕ
ｇｌａｎＧ　　Ｃａ１ｌｆＯｒｎｉＣａ；タオルナツト
１イギリス４４７　（Ｅ　ｎ　ｇｌｌ　Ｅｌ　ｈ　）　
−Ｊ　ｕ　ｇ　１　ａ　ｎ　Ｓ　　ｒ　ｅ　Ｅ　Ｘ　ａ
　；ヤナギ、アノｏ　ヨ７４（Ａｒｒｏｙｏ）−８ａｌ
ｉｘ１ａＧｉＯ１ｅｐｉＳ；　ヤナギ、プ７７り神（Ｂ
ｌａｃｋ）−８ａｌｉｘ　　ｎｉｇｒａ；ヤナ？、グツ
シ一種（Ｐｕｓｓｙ）、−８ａｌｉｘ　ａｉＳｃＯｌｏ
ｒ；ヤナギ、レツ）ｌ”　榎（Ｒｅｄ）−８ａｌｌＸ　
　ｌａｅＶｉｇａ　ｔａ；ヤナギ、Ｉ工ｏ−［Ｙｅｌｌ
ｏｗ）−８ａｌｊ、ｘ　　１ａｓｉａｎｄｒａ。

牧草及び雑草の花粉−オオムギ〜栽培秤−ｆ（ｏｒａｅ
ｕｍ　ｖｕｌｇａｒｅ　；　ヌカボ、コロニアル種（Ｃ
ｏｌｏｎｉａｌ）−Ａｇｒｏｓｔ工ｓ　　ｔｅｎｕｌｓ
；スズメノカタビラ、−年生−Ｐｏａ　　ａｎｎｕａ；
スズメッカ７　ヒフ　％　力ｆ　タｆｆ、　（Ｃａｎａ
ｄａ　）−Ｐｏａｃｏｍｐｒｅｓｓａ；スズメノカタビ
ラ、ケンタッキｉ％　（Ｋ　ｅ　ｎ　ｔｕ　Ｃｋ　７　
）　（Ｊ　ｕ　１Ｆ−ｅ　）　−Ｐ　Ｏａｐｒａｔｅｎ
ｓｉｓ；スズメノカタビラ、サンドパーダｑ％（Ｓａｎ
ａｂｅｒｇ）−Ｐｏａ　　ｅａｎａｂｅｒｇｉｉ；スズ
メノチャヒキ、ブロンコリプグソト種（Ｂｒｏｎｃｈｏ
−Ｒｉｐｇｔ）−Ｂｒｏｍｕｅ　　ｒｉｇｉｄｕｓ；ス
ズメノチャヒキ、カリフォルニア種 （Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）−Ｂｒｏｍｕｓ　　ｃａｒｌ
ｎａｔｕθ；スズメノチャヒキ１チー）　種（Ｃ！ｈｅ
　ａ　ｊ　）　−Ｂｒ　ｏｍｕ　８：、ｅｃａｌｉｒｕ
８；スズメノチャヒキ、スムーズオ重（ＳｍＯＯｌ；ｈ
）−ＤｒＯｍｕＳ　　１ｎｅｒｌｎ１８；スズメツ５−
　ヤヒ−１’、７’：）ｌ−拳ｆ　−ト１（Ｓｏｆｔ　
　Ｃｈｅａｔ）−Ｂｒｏｍｕｅ　ｍｏｌｌｉｓ　；バン
チ（Ｂｑｎｃｂ）、プル４４　（Ｂｌｕｅ　）　（Ｎ　
Ｏｒ　ｔｈｗｅｓ　ｔｓｒｎ　　Ｂｕｎｃｈ）　−Ａｇ
ｒＯｐｙｒＯｎ　　ＣｐｉＣａｔｕ、Ｄ；カナリヤソウ
−Ｐｈａ：１．ａｒｉｓ　　ＣａｎａｒｉｅｎＳｉＳ；
カナリヤソウ、リードｉ４　（Ｒｅｅａ）−Ｐｈａｌａ
ｒｉｓａ　ｒ　ｕ　ｎ　ｄ、　ｊ、　１１　ａ　Ｃｅ　
ａ　；ウシノケグサ、レッド（ｉ＜　ｅ　ａ　’）　−
Ｆ　ｅ　ｓ℃ｕ　Ｃａ　　ｒ　ｕ　１）　Ｉ’　ｆＬ　
；グラマ。グラス（（）ｒａ＋ｂａ　　Ｃ）ｒａｓ　ｓ
　）　、ブ／ｌ／　−：ｆ上（Ｂｌｕｅ　）（８’Ｌ（
ｌｅ　　０ａｔｓ）−ＢＯｕｉ；ｅｌｏｕａ　　ｇｒａ
ｃ１１１８；クーラーズブラス（ＫＯｅ１ｅｒ’Ｓ　　
Ｆ）ｒａｓｓ）（ＷｅＧｔ；ｅｒｎ　　Ｊｕｎｅｇｒａ
ｓｓ）−ＫｏｅｌｅｒｉａＣｒｉＳｔａｔａ；ラブグラ
ス（ＬｏｖｅｇｒａｓＳ）、７−．９イアン種（Ｈａｗ
ａｉｉａｎ）−ＥｒａＢｒｏｓｔｉｓＶ　ａ　ｒ　ｉ　
ａ　ｂｌｌ　１８　；カラスムギ、普通の栽培種−ＡＶ
ｅｎａ　　５ａｔｉＶａ；’ｌ’セイカラスムキ、１１
１種（Ｔａｌｌ）−Ａｖｅｎａ　　ｏｌａｔｉｏｒ（Ａ
ｒｒｈｅｎａｔｈｅｒｕｍ　　ｅｌａｔｉｕｓ）；ヒメ
カモヅグサーＡｇｒｏｐｙｒｏｎ　　ｒｅｐｅｎｔ；コ
ヌカク９サ−Ａｇｒｏｓｔｉｓ　　ａｌｂａ、ライムギ
、栽培イ■−８ｅｃａｌｅ　　ｃｅｒｅａｌｓ；ホンム
ギ、アルカリ種（Ａｌｋａｌｉ）−Ｋｌｙｍｕｓ　　ｔ
ｒｉｔｉｃｏｉａｅｓ；ホンムギ、ヅヤイアント・ワイ
ルド種（ＧｉａｎｔＷｌｌａ）−Ｅｌｙｍｕｓ　　ｃｉ
ｎｅｒｅｕｓ　；ホソムギｔイクリャ（（（工ｔａｌ−
１ａｎ）−Ｌｏｌｉｕｍｍｕｌ”；ｉｆｌｏｒｕｍ；ホ
ンムギ、ウェア！、タフ種（Ｗ　ｅ　Ｓ　ｔｅ　ｒ　ｎ
　）　−Ｅｌｙ　ｍｕ　Ｓ　　ｇｌａｕ　Ｃｕ８　；ツ
ルトゲラス（Ｓａｌｔ　　Ｇｒａｓｓ）−Ｄｉｓｔｉｃ
ｈｌｉｓＢ　ｉ；　ｒ　ｉＣｊ　ａ　；コウリャン、普
通の栽培種−３ｏｒｇｈｕｍ　　ｖｕｌｇａｒｅ；　ス
ーダ７−グラス（Ｓｕａａｎ　　Ｇｒａｓｓ）−６ｏｒ
ｇｈｕｍ　　Ｖｕｌｇａｒｅｖａｒ、　ｅｕｄａｎｅｓ
ｅ；スィート＋１／ぐ−ナル−０グラス（５Ｗｅｅｔ　
Ｖｅｒｎａｌ　ｇｒａｓｓ）−Ａｎｔｈｏｘａｎｔｈｕ
ｍ　　０ａＯｒａｔｕＩｎ；　ベルペットグラス（ＶＯ
’ｌｅｔｇｒａｓｓ）−Ｈｏｌｃｕｓ　　工ａｎａｔｕ
ｓ；コムギ、−Ｊ、’％培：、ｆ４−　Ｔｒｉｔｉｃｕ
ｍ　　ａｅｓｔｉｖｕｒｎ；力士ソグザ、クレステソド
わ・（Ｏｒｅｓｔｅａ）−Ａｇｒｃｐｙｒｃｎ　　Ｃｒ
ｉＳｔａｔｕｍ；カモジグサ）ウェスタン、ｉ＋′：、
（’Ｊｉｅｓｔｅｒｎ）−Ａ）２ｒｏｐｙｒｏｎｓｍｉ
ｔｈｊ、ｉ；フルフ７．Ｉ＋／ファーＭｅｄｉｃａｇ。

ＦＪａｔｌＶａ；ヨメナシオノ−Ａｓｔｅｒ　　５ｉｎ
ｓｎｓｉｓ；ホウセンカーＤａｌｓａｒｎｏｒｈｉｚａ
　　ｓａｇｉｔｔａｔａ；バッノァ（Ｂａｓｓｉａ）−
Ｂａｓｓｉａ　　上】ｙｓｓＯｐｉ−ｆＯｌｉａ；ピー
−）’−，バー（Ｂｅａｃｈ　　Ｂｕｒ）−＋１ｒａｎ
ｓｅｒ１ａ　　ｂｉｐｉｎｎａｔｉｆｉａａ；　ピュｏ
　Ｏブ７シ（Ｂｕｒｒｏ　　Ｂｒｕｓｈ）（（）ｒｅａ
ｓｅ’ｏｕｓｈ）−Ｈｙｍｓｎｏｃｌｅａ　　５ａ１８
０１ａ；ケアレスＯウイー）’　（Ｃａ　１’　ｅ　ｈ
　ｅ　Ｓ　Ｂ　Ｗ　ｅ　ｅ　ａ　）　−Ａ　ｍ　ａ　ｒ
　ａ　ｎ　ｔ　ｈ　ｕ　８ｐａ］　１ｌ１９ｒ　１；ギ
ヤスター・ビー、７（ｃａｓｔｏｒＢｅａｎ）−、Ｒｉ
ｃｉｎｕＳ　ｃｏｍｍｕｎｉｓ；ガマ、ブロードリーフ
神（Ｂｒｏａｄｌｅａｆ）−Ｔｙｐｈａｌｂｔｉｆｏｌ
ｉａ；クローバ−１ｌ、’７　）’種（：Ｒｅｄ）−Ｔ
ｒｉｆ’ｏｌｉｕｍ　　ｐｒａｔｅｎｓｅ；クローバ−
、スウィートｆｍ　（Ｓ　’Ｗ　ｅ　ｅ　ｔ）、イエロ
ー、１４（Ｙｅ’ｌｌｏｗ）−Ｍｅｌｉｌｏｔｕｓ　　
ｏｆｆｉｃｊ、ｎａｌ゛ｉｓ；クローバ−、ホワイトｆ
Ｊ、ｉ（Ｗｈｉｔｅ）（Ｄｕｔｃｈ）−Ｔｒｉｆｏｌｉ
ｕｍｒｅｐｅｎｓ　　（ａｌｂｕｍ）；オナモミ通常イ
１−Ｘａｎｔｈｉｕｍ　　Ｓｔｒｕｍａｒｉｕｍ；　オ
ナモミ、スビ＝−１）ｉ（ＳｐｉｒｌＪ）−Ｘａｎｔｈ
ｉｕｍ　　ＳｐｉｎＯ８ｕｍ；コスモスーＣｏｓｍｏｓ
　　１）ｉｐｉｎｎａｉ；ｕｓ；ラン／クスイ−ｔ７−
ＮａｒＣｉＳ８ｕ８　　ｐｓｅｕａｏｎａｒｉＳ８ｕ８
；ダリア−Ｄａｈｌｉａ　ｐｉｃｎａｔａ　ｘ、　ｃｏ
ｃｃｉｎｅａ；ヒナギク／　り（Ｏｘｅｙｅｄ　　Ｄａ
ｉｓｙ）−Ｏｈｒｙｓａｎｔｈｅｒｎｕｍ　　１ｅｕＣ
ａｎｔｈ６ｍｕｍ；ダンプリオア　（Ｄａｎｃｌｅｌｉ
ｏｎ　）−Ｔａｒａｘｌｌｃｒｎｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ
；　スカンポ、ヒツター秤（Ｂｉｔｔｅｒ）−Ｒｕｒｎ
ｅｘ　　ｏｂｔｕｓｉｆｏｌｉｕｓ；　スカンポ、イエ
０−　紳（Ｙ　ｅｌｌｏ　Ｗ　）　（Ｃｕ　ｒ　１７　
）　−Ｒｕ　ｍ　ｆ３　ＸＣｒ１ｅｐｕＳ；ドッグ、７
ｘネル（Ｄｏｇ　　Ｆｅｎｎｅｌ）（Ｍａｙｗｅｅｄ）
−Ａｎｔｈｅｍｉｘ　　Ｃ０ｊｕｌａ；ファイアライー
ド、アラスカ種（Ａｌａｓｋａ）−Ｅｐ’ｉｌｏｂｉｕ
ｍ　　ａｎｇｕｓｔｉｆｏｌｉｕｍ；　グラジオラス−
Ｇｌａｄｉｏｌｕｓ　　ＸｈＯｒｔｕｌａｎｕＳ；アキ
ノキリ／ソウ−８ｏ１ｉｄａｇｏ　　ｓｐｐ；グリース
ウッド（ＧｒｅａｓｅＷｏｏａ）−８ａｒｃｏｂａｔｕ
Ｓｖｅｒｎｔｉｃｕ’１ａｔｕｓ；アサ−〇ａｎｎａｂ
ｉｓｓａｔｉｖａ；ホップス−Ｈｕｍｕｌｕｓ　　１ｕ
ｐｕｌｕＥ］；ホプセーヅ（Ｒｏｐｓａｇｓ）−Ｇｒａ
ｙｉａ　５ｐｉｎｏｓａ；アイオデインＯブツシュ（工
ｏａｉｎｅ　　Ｂｕｓｈ）（Ｂｕｒｒｏ　Ｗｅｅａ）−
Ａｌｌｅｎｒｏｌｆｅａｏｃｃｉｄｅｎｔａｌｉｓ　；
　−ｙチア（Ｋｏｃｈｉａ）（Ｍｅｘ。

Ｉｊ’１ｒｅｂｕｓｂ、）−Ｋｏｃｈｉａ　　５ｃｏｐ
ａｒｉａ；ユリ、イースタ一種（Ｅａｓｔｅｒ）−Ｌｉ
ｌｉｕｍｌｏｎｇｉｆｌｏｒｕｍ；−ｑソーゴー／ｌ／
　Ｆ’−Ｔａｇｅｔｅｓｐａｔｕ’ｌａ；　−ｒ−’、
／ｆ−Ａｙグー（Ｍａｒｓｈｅｌｄｅｒ）、。

バー’）　イードｆｆｆｌ　（Ｂｕｒｗｅｅａ）（Ｇｉ
ａｎｔＰｏｖｅｒｔｙ）−工ｖａ　　Ｘａｎｔｈｉｆｏ
ｌｉａ；　−ｑ−シェルタ−、ナローリーフ　Ｊ　（Ｎ
　ａ　ｒ　ｒ　ＯＷ　１８　ａ　ｆ　）（Ａｕｇｕｓｔ
）−工Ｖａ　　ａｆ１ｇｕ１３ｔｉｆｏ１ｉａ−マーシ
ェルタ−１）　ウ／ｌ／−栓（Ｔｒｕｅ）（Ｒｏｕｇｈ
）−Ｉｖａ　　Ｃ１１ｉａｉ；ａ；メキシカン・ティー
（ＭｅＸ　Ｉ　Ｃａ　ｎ　　Ｔｅ　ａ　）　＝　Ｑｈｅ
ｎ　Ｏｐｏｄ　ｉ　ｕＩ＋１ａｍｂｒｏｓｉｏｉｄｅｓ
；カラシナ、ブラック種（Ｂｌａｃｋ）−Ｂｒａｓｓｉ
ｃａ　　ｎｉｇｒａ；カラシナ、カラン６イｚｏ一種（
Ｃｊｏｍｍｏｎ　　Ｙｅｌｌｏｖ）−Ｂｒａｓｓｉｃａ
　　ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓＨイラクサ−Ｕｒｔｉｃａ　
　ｄｉｏｉｃａ　　（ｇｒａｃｉｌｌＢ）；ビックルウ
イード（Ｐｉｃｋｌｅｗｅｅｄ）−８ａｌｉｃｏｒｎｉ
ａａｍｂｉｇｕａ；７カザ、ラフ・レッドルート種（Ｒ
ｏｕｇｈ　Ｒｓｄｒｏｏｔ）−Ａｍａｒａｎｔｈｕｓｒ
ｅｔｒｏｆｌｅＸｕ８：アカザ、スビ＝−釉１ｐｉｎｙ
）−Ａｍａｒａｎｔｈｕｓ　　５ｐｌｎ０８ｕＳ；ケシ
、カリフォルニア（Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）−ＥＥ３Ｃ
ｈＯｓｃｈＯＩＺｉａＣａ　１　ｉ　ｆ　Ｏｒ　ｎ　ｉ
　Ｃａ　；　、ｉ４ハフイーウイード（Ｐｏｖｅｒｔｙ
ｗｅｅｄ）　、ヌモ−７Ｊｌ（Ｓｍａｌｌ）−工ｖａ　
　ａｘｉｌｌａｒｉθ；ラビット０ブラシ（Ｒａｂｂｉ
ｔ　　Ｂｒｕｓｈ）−Ｃｈｒｙｓｏｔｈａｍｎｕｓｎａ
ｕｓｅｏｓｕｓ；　’ｊピント・ブラシ（ＢｕｒＲａｇ
ｗｅｅｄ）−Ｆｒａｎｓｅｒｉａ　　ｄｅｌｔｏｉｄｅ
ｓ；ブタフサ、キャニオン種（Ｏａｎｙｏｎ）−Ｆｒａ
ｎｓｅｒｉａ　　ａｍｂｒ０８１０ｉ（ｌｅｅ；ブクグ
ザ、デザート種（Ｄｅｓｅｒｔ）−Ｆｒａｎｓｅｒｉａ
ｄｕｍｏｓａ、ブタフサ、フォルス種（ＦａｌＳｅ）−
Ｆ’ｒａｎｓｅｒｉａ　　ａｃａｎｔｈｉｃａｒｐａ；
ブタフサ、ソヤイ７７ト種（Ｇｉａｎｔ）−Ａｍｂｒｏ
ｓｉａｔｒｉｆｉｄａ；ブタフサ１シヨート種（Ｓｈｏ
ｒｔ）−Ａｍｂｒｏｓｉａ　　ａｒｔｅｍｉｓｉｉｆｏ
ｌｉａ（ｅｌａｔｉＯｒ）；ブタフサ、ノルバ一種（Ｓ
　ｉ　１ｖｅｒ）−Ｄ：Ｌｃｏｒｉａ　　ｃａｎｅｓｃ
Ｎｎｓ；ブタフサ、スレンダ−ｆ４　（Ｓ　１　ｅ　ｎ
　ａ　ｅ　ｒ　）　−Ｆ　ｒ　ａ　ｎ　８　ｅ　ｒ　ｌ
　ａ　　ｔ８　ｎ　ｕ　ｌ　−ｆｏｌｉａ；ブタフサ、
ササン７１ｉｉ！（Ｓｏｕｔｈｅｒｎ）−Ａｍ’ｂｒｏ
ｓｉａ、ｂｉｄｅｎｔａｔａ；　バラ−Ｒｏｓａｍｕｌ
ｔｌｆｌｏｒａ；　ヨーＥギ、コースト７ｉ（ＣＯａ８
ｔ）−−Ａｒｔｅｍｉｓｉａ　　ｃａｌｉｆｏｒｎｉｃ
ａ・−３モギ、グリーン種（Ｇｒｅｅｎ）（Ｔａｒｒａ
ｇｏｎ）−Ａｒｔｅｍｉｓｉａａｒａｃｕｎｃｕｌｕ８
ｉ　ヨモギ、マグウオート種（Ｍｕｇｗｏｒｔ）−Ａｒ
ｔｅｍｉｓｉａ　　ｖｕｌ、ｇａｒｉｓｈｅｔｅｒｏｐ
ｈ３’ｌｌａ；　ヨモギ、／Ｊ　スツ７　ｒｈ（Ｐａｓ
ｔｕｒｅ）（Ｃａｒｐｅｔ）−Ａｒｔｅｍｉｓｉｆｒｉ
ｇｉａａ；　Ｅモギ、サント・テュン種（ＳａｎｄＤｕ
ｎｅ）−Ａｒｔｅｍｉｓｉａ　　ｐｙｃｎｏｃｅｐｈａ
ｌａ；ヨモギ、ホワイト種（Ｗｈｉｔｅ）（Ｐｒａｉｒ
ｉｅ）−Ａｒｔｅｍｉｓｉａ　　Ｉｕｄｏｖｉｃｉａｎ
ａ；ソルトプッシュ（Ｓａｌ　ｔｂｕｓｈ）　、−年生
−Ａ　ｔ　ｒ　ｉ　ｐ　１　ｅ　ｘｗｒｉｇｈｔｉｉ；
　スケール（ＳＣａ１ｅ）、オール種（Ａｌｌ）−Ａ’
ｅｒｉｐｌｅＸ　　ｐｏ１７ｃａｒｐａ；スケール（５
ｃａｌｅ）、ブラント１Ｊｊ（Ｂｒａｃｔ）−Ａｔｒｉ
ｐｌｅｘｓｅｒｅｎａｎａ　　ｂｒａｃｔｅＯＥｌａ；
スクール、プリュワーズイ７％　（Ｂ　ｒθｗｅｒｓ）
−Ａｔｒｉｐｌｅｘ　　ｌｅｎｔｉ−ｆｏｒｍｉｅ　　
’ｔ）ｒｅＷｅｒｌ；スケール、レンズ化（Ｌｅｎｓ）
−ＡｔｒｉｐｌｅＸ　　１ｅｎｔｉｆＯｒＩ１１ｉＳ；
スケール、レッド独（Ｒｅ　ａ　）−Ａ　ｔｒ　ｌ　ｐ
　ｌ　ｅ　Ｘｒｏｓｅａ；スケール１シルハフｉｉｉ　
（Ｓ　１１　Ｖ　ｅ　’ｒ　）（Ｆｏｇｗｅｓｄ）−Ａ
ｔｒｉｐｌｅｘ　　ａｒｇｅｎｔｅａｅｘｐａｎｓａ；
　スケール、スピア１ｉ（Ｓｐｅａｒ）−Ａｔｒｉｐｌ
ｅｘ　　ｐａｔｕｌａ　　ｈａｓｔａｔａ；　スケール
、ウィング種（Ｗｉｎｇ）（Ｓｈａｄ）−Ａｔｒｉｐｌ
ｅｘＣａｎｅ８Ｃｅｎｉ　ス：７７チ０プＡ／−ム（Ｓ
ｃ　ｏ　ｔｃｈＢｒｏｏｍ）−０ｙｔｉｓｕｓ　　５ｃ
ｏｐａｒｉｕｓ；　シー。

ブライト（１９ｅａ　　Ｂ１１ｔｅ）、Ｃａ１ｉｆｏｒ
ｎｉａ−ｓｕａ　ｅａａ　　Ｃａｌ〕−ｆ　Ｃ１ｒ　ｎ
　ｉ　Ｑ　ａ、；　スｆ　−Ｏａｒ　ｅＸｌ）ａｌ−ｂ
ａｒａ；　７＝７’ｏ　７ア７１−（Ｓｈｅｅｐ　　Ｆ
ａｔ）−Ａｔｒｉｐｌｅｘ　　ｃａｎｆｅｒｔｉｆｏｌ
ｉａ；ヒメスイバーＲｕｍｅｘ　　ａｃＩＢｔＯ８ｅｌ
ｌａ；キ７−ＡＦヨソウーＡｎｔｉｒｒｈｉｎｕｍ　１
ｎａｊｕｌＥ　ｉ　、：ｌ’（アエダ（ＦＥｕａｅｄ、
ａ）（シー・プライトを児よ）；サトウダイコン−Ｂｅ
ｔａ　　ｖｕ：ｔｇａｒｉｓ；　ヒマＩ７リーＨｅ１ｉ
ａｎｔｈｕｅａｌｌｎｕｕ８；ウォーターヘンプ（Ｗａ
ｔｅｒｈｅｍｐ）。

ウェスタン（Ｖ／ｅｓｔｅｒｎ）−Ａｃｎｉａａｔａｍ
ａｒｉ８ｃｉｎａ；ウィンター０フアツト（Ｗｉｎｔｅ
ｒ　　Ｆａｔ）−Ｅｕｒｏｔｉａ　　１ａｎａｔａ；つ
；ｔ−ムシ−）’　（Ｗｏｒｍｓｅｅａ）（Ｊｅｒｕｓ
ａｌｅｍ○ａｋ）−０ｈｅｎｏｐｏｄｉｕｍ　　ｂｏｔ
ｒｙｓ；ウオームシード、アブシンセオ重（Ａｂｓｉｎ
ｔｈｅ）−Ａｒｔｅ−ｍｉｓｌａ　　ａｂｓｉｎｔｈｉ
ｕｍ。

実施例　４ 皮膚及び小線要素 ショート・ラグウイードの代’）　Ｋ　ｓ　猫の毛及び
助層、そして犬の毛を用いて実施例１の方法を繰返し、
対応ラバる抽出物を樗ｆｃ　ｇ −人辷ｌイｉ干（リ　　５ 皮ＪＭ及び小線要素 次の無色の皮膚及び小線要素を用いて実施例１の方法を
繰返すことにより対応する抽出物を得た：ラクグの毛と
木屑；午の毛と人斡屑；鹿の毛と１揄屑；ヒョコの羽；
アヒルの羽；ガンの羽；小型インコの羽；ハトの羽；七
面鳥の羽；キツネの毛皮；力゛゛−ビル（Ｇθｒ　ｂｉ
ｌ　）の毛と皮膚；魚の魚膠；ヤギの毛とｂ１屑；モル
モットの毛と＃＊；ハムスターの毛と皮ＩＮ　、若いヒ
ツジの毛と、鱗屑；馬の毛と、憐屑；人間の毛；ミンク
の毛皮；モヘア；サルの毛と皮闇；マウスの毛と皮膚；
ブードルの毛と麟屑；除虫菊；ワザギの毛と皮膚；ラッ
トの毛と皮膚；アザラシの毛皮；ヒツジ７の羊毛。

実施例　６ アルテルナリア・テヌイスの抽出物 ショート・ラグウイードの代シにカビのアルテルナリア
０テヌイス（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ　　ｔｅｎｕｉｓ）
を用いて実施例１の方法を繰返すことにより対応する無
色の抽出物を得た。

実施例　７ カビと黒糖の抽出物 次のカビと黒糖を用いて実施例１Ω方法を繰返して対応
する無色の抽出物を得た： カビーアスベルギルスＯクラパツス（Ａｓｐｅｒ−ｇｉ
ｌｌｕｓ　　ｃｌａｖａｔｕｓ）；烟色麹菌ケムカビ（
Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　　ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）ｉ乾
来寄生性麹Ｍ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｅ　　ｇｌａｕｃ
ｕｓ）；為巣性麹菌（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　　ｎ１
ａｕｌａｎｓ）；黒色１７ＭＭ＋クロカビ（Ａｓｐｅｒ
（ｚｉｌｌｕＳｎｉｇｅｒ）　；アスペルギルスＯレス
トリクツス（Ａ　ｓ　ｐθｒ　ｇ　ｉ　ｌｌｕｓｒｅｓ
ｔｒｉ’ｃｔｕｓ）；アスペルギルス◇シドゥイ（Ａｓ
ｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　　ｓｙｄｏｗ）；アスペルギルス
心テレウス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　　ｔｅｒｒｅｕ
ｓ）；ボトリチスｃシネレア（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ　　ｃ
ｉｎｅｒｅａ）；：Ｖ＋叡Ｗカンソダ（Ｃａｎ４ｉｄａ
　　ａｌｂｉｃａｎｓ）；セファロスボリウムリアクレ
モニウム （Ｃｅｐｈａｌｏｓｐｏｒｉｕｍ　　ａｃｒｅｍｏｎｉ
ｕｍ）；セファロテシウム（Ｏｅｐｈａｌｏｔｈｅｃｉ
ｕｍ）（Ｔｒｉｃｈｏｔｈｅｃｉｕｍ）ｒｅｓｅｕｍＨ
ケ゛トミウム・グｏＭスム（Ｏｈａｅｔｏｍｉｕｍ　　
ｇｌｏ−ｏｏｓｕｍ）；クリプトコックス０テレウｙ、
　（Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓｔｅｒｒθｕｓ）；カニ
ングハメラ・エレガンス（Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍｅ、１
１ａ　　ｅｌｅｇａｎｓ）；カーブチリア０スビシフイ
ラ（Ｃｕｒｖｕｌａｒｉａｓｐｉｃｉｆｅｒａ）；デマ
チウムリニグルム（Ｄｅｍａｔｉｕｍ　ｎｉｇｒ’ｕｍ
）；　、：ｃピコックム０ニゲＡ／ム（Ｅｐｉｃｏｃｃ
ｕｍ　　ｎｉｇｒｕｍ）；有毛表皮糸状９４　（Ｆｉｐ
ｉａｅｒｒｎｏｐｂ、ｙｔｏｎ　ｆｌｏｃｃｏｓｔｔｍ
）　；ホメスＣリモスス（Ｆｏｍｅｓ　　ｒｉｍｏｓｕ
ｓ）；フーザリウム・バシンフエクツム（Ｆｕｓａｒｉ
ｕｍＶａ　Ｓ工ｎｆｅｃｔｕｍ）Ｈヅオトリウム・カン
ヅズム（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ　ｃａｎｄｉａｕｍ）；
　ヘルミントスボリウム６’？イソス（Ｈｅｌｍｉｎｔ
ｈｏｓｐｏｒｉｕｍＢａｙａｉｓ）　；ヘルミントスボ
リウム（Ｈｅｌｍｉｎｔｈｏｓｐｏｒｉｕｍ）；ホルモ
デンドルム（Ｈｏｒｍｏｄｅｎａｒｕｍ）（Ｃｌａａｏ
ｓｐｏｒｉｕｍ）；七＝リア・シトフィラ（Ｍｏｎｉｌ
ｉａ　　５ｉｔｏｐｈｉｌａ）；−Ｅ７レカビ（Ｍｕｃ
ｏｒ　　ｒａｃｅｍｏｓｕｓ）；ミコ３９７種（Ｍｙｃ
ｏｇｏｎｅ　　ｓｐ、）；　、ｔＲ／カビ（ｎｅｕｒｏ
ｓｐｏｒａ　　ｃｒａｓｓａ）　；　、＝グロスポラ会
スフエリカ（Ｎｉｇｒｏｓｐｏｒａ　　５ｐｈａｅｒｉ
ｃａ）；オイソオテントルム種（Ｏｌｄｉｏａｅｎａｒ
ｕｍＳｐ”）；ペシロマイシス−／Ｓ　＋）　ｆ　オ（
Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ　　ｖａｒｉｏｔｉ）；ペニ
シリウムＯアルトラメントスム（：Ｐｅｎ１ｃｉ工１１
ｕｍａｒｉ：ｒａｌｌｅｎｉ；Ｏ８ｕｍ）；　ぜ＝シリ
ウムｃビボルメ（Ｐｅｎｌｃｉｌｌｉｕｍ　　ｂｉｆｏ
ｒｍｅ）；ペニシリウム・カルミノビオラセウム（Ｐｅ
ｎｉｃｉｌｌｉｕｍｃａｒｍｉｎｏｖｉｃｌａｃｅｕｍ
）；ペニシリウムｏクリソケゝヌム（Ｐｅｎｊ−ｃｉｌ
ｌｊ、ｕｍ　　ｃｈｒｙｓｏｇｅｎｕｍ）；ペニシリウ
ムＯデイソタツｂ、　（Ｐｅｎｌｃｉｌｌｉｕｍｄ１ｇ
　ｉ　ｔ　ａ　ｔ　ｕ　Ｉｌｌ　）　；ペニシリウム・
エクスパンスム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ　ｅｘｐａｎ
ｓｕｍ）；ペニシリウム−グララフＡ（Ｐｓｎｉｃｉｌ
ｌｉｕｍ　ｇｌａｕｃｕｍ）；ペニシリウム・インドリ
カツム（Ｐｅｎ１ｃｉｌｌ工ｕｍｉｎｔｒｉｃａｔｕｒ
ｎ）；ペニシリウムールテウム（Ｐｅｎｃｉｌｌｉｕｍ
　　ｌｕｔｅｕｍ）；ペニシリウム・ツクツム（Ｐｅｎ
ｉｃｉｌｌｉｕｍ　ｎｏｔａｔｕｍ）；ペニシリウム・
ロケホルチ（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｒｏｑｕｅｆｏｒ
ｔ）；ペニシリウム・ロゼラム（Ｐｅｎ　１Ｃ１１１ｘ
ｕｍ　ｒ　０８ｅｕｍ　）　；　７　オマ−ヘルバルム
（Ｐｈｏｍａ　　ｈｅｒｂａｒｕｍ）；プレオスポラｆ
（４（Ｐｌｅｏｓｐｏｒａ　　ｓｐ、）；ボリア独（Ｐ
ｏｒｉａｓｐｏ）；グルラリア・グルランス（Ｐｕｌｌ
ｕ−１ａｒｉａ　　ｐｕｌｌｕｌａｎｓ）；クモノスヵ
ビ（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ　　ｎｉｇｒｉｃａｎｓ）；　ｏ
−ドトルラグルチ＝、：ｘ、（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ
　ｇｌｕｔｉｎｉｓ）；麦酒酵母菌（Ｓａｃｃｈａｒｏ
ｍｙｃｅｓ　　ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）（イースト・ミ
ックスを見よ）；スコグラリオグシスーグレヒカウリス
（Ｓｃｏｐｕｌａｒｉｏｐｓｉｓｂｒｅｖｉｃａｕｌｉ
ｓ）；　スボンヅロクラソウム種（Ｓｐｏｎｄｙｌｏｃ
ｌａｄｉｕｍ　　８ｐ６）；スポロボロマイシスＯサル
モニカラー（ｓｐｏｒｏｂｏ：ｔｏｍｙｃｅｓｓａｌｍ
ｏｎｉｃｏｌｏｒ）；ステンフイリウム＠ボトリオ、Ｘ
、ム（Ｓｔｅｍｐｈｙｌｉｕｍ　ｂｏｔｒｙｏｓｕｍ）
；ストレプトマイシン−グリセウス（Ｓｔｒθｐｔｏ−
ｍｙｃｅｓ　　ｇｒｉｓｅｕｓ）；　）リコテルマ・ヒ
リド（Ｔｒｉｃｂｏｄｅｒｍａ　Ｖｉｒｉｄ１９）；チ
ク７’イダ＊ｘンシス（Ｔｙｐ’ｎｕ１ａ　１ｄａｈｏ
ｅｎｓｌｓ）；バーチシリウムＯアルホアトルム（Ｖ　
ｅ　ｒ　ｔ　ｉ　ｃ　ｉ　１−１、ｉｕｍ　　ａｌｂｏ
−ａｔｒｕｍ）。

黒糖−オオムギの黒糖；バーミュダの黒糖；トウモロコ
シの黒糖；ヅヨンシンの黒糖；カラスムギの黒糖；モロ
コシの黒糖；コムギの黒榎。

実施例　８ 家庭のホコリの抽出物 ショート・ラグウイードの代りに家庭のホコリを用いて
実施例１の方法を繰返すことにより）対応する無色の抽
出物を有だ。

実施例　９ チリ及びその他の抽出物 次のチリを用いて実施例１の方法を繰返すことによシ）
対応する無色の抽出物を伺た：アカシヤゴム；アルファ
ルファの乾草；寒天、クロレラ種；ヵラギーンゴム；ヤ
シの繊維；ヤシのリンター；実線；オオムギのクズ；ト
ウモロコシのクズ；穀物ミルのクズ；マツトレスのホコ
リ；カラスムギのクズ；マメのクズ；ライムギのクズ；
ダイズのクズ；家其のホコリ；コムギのクズ；木材のス
ギ／ネズのクズ；木材のモミ／アメリカツガのクズ；木
材のゴムの木のクズ；木材のマボ゛ガニ−のクズ；木材
のカエデのクズ；木材のカシのクズ；木材のマツのクズ
；木材のアメリカスギのクス；木材ノドウシのクズ；木
材のウオルナットのクズ；シダの胞子；アマの繊維；ア
マの種子；アサ；ソユート；カポック（Ｋ、ａｐＯｋ）
；カラヤゴム；ヒカグノカズラ；ニオイショウブの根；
紙：除虫菊；絹；リュウゼツラン；トラガカントゴム；
オオアワガエリの乾草；パイプタバコ；紙巻きタバコ；
葉巻きタバコ；葉タバコ。

実施例　１０ 食品抽出物 ショート・ラグウィードの代りに次の食品を用いる以外
実施例１の方法を繰返して対応する無色の抽出物を得た
：オールスパイス；アーモンド；リンゴ：アンズ食品；
アロールー）　（Ａｒｒｏｗ−ｒｏｏｔ）；チョウセン
アザミ；アスパラガス；アボガド；バナナ；オオムギ殻
粒；グツケイツユの葉；インケ゛ンマメ；アオイマメ；
シロイ２ケ゛ンマメ；ウズラマメ；ザヤイングンマメ；
牛肉；ダイコン；クロマメ；プル−ぺＩＪ　−、フラソ
ルナッッ；ソバ；ニンシン；カシューナツツ；セロリ；
チェダーチーズ（アメリカ）；パルメザンチーズ；羊乳
チーズ；スイスチーズ；サクランボ；チューイングガム
の基剤；ヒョコ；チコＩＪ　−、ｆ　＋、１ペパー；チ
ョコレート／ココア；シナモン；ハマグリ；チョウソ；
コーラ；ヤシ；タラ；コーヒー；トウモロコシ穀粒；カ
ニ；ンルコケモモ；キュウリ；カレー粉；ナツメヤシ；
イノンド；卵白；全卵；卵黄；ナス；キクチシャ；ニン
ニク；ゼラチン；ショウガ；ブドウ／シーズン；グレー
プフルーツ；タラ；オオヒラメ；ハシバミの実（Ｆｉｌ
ｂθｒｔ）；ニシン；ハチミツ；ホップ食品；西洋ワザ
ビ；ヒツジ肉；レモン；レンズマメ；レクス；ライム果
；牛（Ｄ肝臓、　イセエビ；サバ；モルト；マンゴ；メ
ープルシロップ／砂糖；メロン（マスクメロンを見よ）
；牛乳（全乳）；牛乳（アルブミン）；牛乳（カゼイン
）；牛乳（乳漿）；ミルク（蒸発したもの）；ヤギ乳；
ミント（ペノぐ−ミント／スペアミント）；マツシュル
ーム；カラシ；ナツメグ；カラスムギ殻粒；オクラ；オ
ソーブ；タマネギ；マンダリン／タングリン種オレンヅ
；スィート種オレンヅ；オレガノ；カキ；ノぐパイヤ；
ノぐプリカ；アメリカボウフウ；・クセリ；グリンピー
ス；モモ食品；南京豆；ナシ食品；ベカン食品７黒／白
コシヨウ；ベルペパー（緑／赤）ｉレーク・ぐ−チ（Ｌ
ａｋｅ　　ｐｅｒｃｈ）；パイナツ７’７１ｚｉスモモ
／干しスモモ；ケシの実；豚肉；ソヤガイモ、スィート
／マムＣＹａｍ　）種；ソヤガイモ、ホワイト種；カポ
チャ；ウサギの肉；ハツカダイコン；キイチゴ：スナツ
パ−（５ｎａｐｐｅｒ　）　Ｈ大黄；米；野生稲；ライ
ムギ殻粒；ザフラワーの種子；セーヅ；ザケ；ゴマの種
子；エビ；シタガレイ；ダイズ；ホウレンソウ；カポチ
ャ；イチゴ；砂糖（ダイコン）；砂糖（キビ）；ヒマワ
リの種子；タピオカ；茶；タチソヤコウソウ；トマト；
サケ；マグロ；七面鳥；カブラ；バニラ；クルミ食品、
ブラック種；クルミ食品、英国種；スイカ；コムギ殻粒
；パン用イースト；醸造用イースト；イースト混合物（
パン用／醸造用、ｓａｃｃｈｏｎｏｍｙｃｅｓｃｅｒｓ
ｖｉｏｉａｅ）。

実施例　１１ 昆虫の抽出物 ショート・ラグウイードの代りに昆虫を用いる以外実施
例１の方法を繰返して対応する無色の抽出物を得た：ア
リ（ブラック及びレッド種）；アリ１カーベンター釉；
アリ、ファイア種（Ｆｉｒｅ）；アブラムシ；マルハナ
バチ；ミツノぐチ；クロノぐ工；チョウチョウ；トビケ
ラ；コオロギ；ゴキブリ；ディア−７ライ（Ｄｅｅｒ　
　Ｆ１７）；ノミ（ＦｌｅａＡｎｔｉｇｅｎ）；果実バ
エ；ブヨ種；スズメ／ぐチ、ブラック種及びイエロ一種
；ウマ・ぐ工；イエ・ぐ工；カケ゛ロウ種；ダ、＝（Ｄ
、ｆａｒｉｎａｅ）；力；ミラーモス（Ｍｉｌｌｅｒ　
　Ｍｏｔｈ）；　　シカバチ；スズメバチ。

実施例　１２ 昆虫の毒液の抽出物 ショート・ラグウイードの花粉の代りに、次の昆虫の毒
液を用いる以外実施例１の方法を繰返すことによシ、対
応する無色の抽出物を得た：ミツバチの彷液−Ａｐｉｓ
　　ｍｅｌｌｉｆｅｒａ；ツカバチの荷液蛋白質−Ｐｏ
ｌｉｓｔｅｓ　　ｓｐ。；白顔のスズメバチの毒液蛋白
質−Ｄｏｌｘｃｂ、ｏｖｅｓｐｕｌａｍａｃｕｌａｔａ
；イエロースズメバチの毒液蛋白質−Ｄｏ　１１ｃｈｏ
ｖ　ｅ　５ｐｕｌａ　　ａｒ　ｅ　ｎａｒ　１　ａ　；
　スズメバチの毒液蛋白質−Ｖｅｓｐｕｌａ　　Ｓｐ、
；ミックスト・ベスビド（ＭｉＸｅａ　Ｖｅｓｐｉａ）
の毒液蛋白質。

実施例　１６ ミクロ力価板の調製、多年生ホンムギの抽出物黒色のポ
リスチレン製ミクロ力価板をメタノールできれいにし、
そして乾燥した。実施例２で調製した多年生ホンムギの
花粉の抽出物を燐酸塩で緩衝したｐ　ｆ（７，５の食塩
水で再生し、燐酸塩で緩衝した食塩水り液を用いて１：
２００に希釈した。

希釈した抽出物の１００μを量を〜ミクロ力価板の井戸
にピペットで入れ、室温で２時間保湿し、取り出し１井
戸をスクロース又はソルビトールの５〜１０％水浴液で
３回洗浄し、乾燥して多年生ホンムギの花粉抽出物を表
面に有するミクロ力価板をＡ製した。

実施例　１４ ミクロ力価板の調製 実施例１６の方法に従い、黒色のポリスチレン製ミクロ
力価板をメタノールできれいにし、その選んだ井戸を、
実施例１〜１２に従って製造した希釈再生抽出物と共に
保温し、対応する抽出物を表面に有するミクロ力価板の
井戸を調製した一実施例　１５ ミクロ力価板、アレルゲン抽出物の共有結合ポリリシン
のコーティングを有するミクロ力価板井戸の挿入物を、
実施例１〜１２に従って製造した再生アレルゲン抽出物
の溶液及びグルタルアルデヒドで処理して、対応する抽
出物が共有結合したミクロ力価板井戸のｊη・入物を調
製したつ実施例　１６ ミクロ力価板の製造 実施例１に従って製造したショート・ラグウイードのア
レルケ゛ン抽出物（３ｒｎｙ／ｍｅ　）の溶液に、５重
量類の牛の血清アルブミン（ＢＳＡ）ｉ液１０μｌを添
加した。添加後、この浴液を４℃に保ち、１−エチル−
３−（６〜Ｎ、Ｎ〜ヅメチルアミノプロピル）カルボソ
イミド（ＥＯＤ工）５Ｔｎ！／を添加した。ＢＳＡ及び
ＥＯＤ工の両方の添加を更に６回繰返した。混合物を４
℃で２０分間ゆっくり撹拌した。最終混合物を４℃で夜
通し放置し％ＢＳＡに共有結合したオオアワガエリの花
粉アレルケ゛ンの配合体を生成した。

ショート・ラグウイードのアレルゲンＢＳＡ共役体を燐
酸塩緩衝剤、ｐＨａ５で希釈した。黒色のミクロ力価板
の井戸に一希釈した配合体官液を正確にｉｏｏμＺ　Ｋ
ＪＮ加した。コーティング工程を１で２時間（又は夜通
し）進行させプこ。このコーティング工程の終υに、各
井戸の中の液体を吸引で除去した１次いで井戸を、ンル
ビトール及びＴＲＩＴＯＩＪ　　Ｘ　４０５を含む燐酸
塩洗浄緩衝剤で３回（３Ｘ２００μｔ）で洗浄した。こ
のようにコーディングした井戸を用い、ショート・ラグ
ウイードの花粉のアレルケ“ン特異的工ＦＥ抗体に対す
る患者の血清を評価した。

実施例　１７ 実施例１６の方法に従い、実施例２〜１２に従って得た
アレルケ゛ン抽出物のＢＳＡ配合体でコーティングされ
たミクロ力価板の井戸を調製した。

実施例　１８ ショート・ラグウイードの花粉の抽出物−くもりガラス
の配合体 １００のくもりガラスの管を１アセトン中γ−アミノー
プロビルトソエトキシシランのＯ１５％浴液１０ＬＪｍ
ｌ中に浸した。室瀞で１Ｄ時間保−した後、管を取シ出
し、メタノール、次いで水で洗浄し／ζ、アミノ含有シ
ラン結合剤をそれに結合して有する管を普通の食塩水浴
液４０１ｎｌＫ浸した。生理的食塩水６液ｉｏ７中〜笑
施例１で製造したショート・ラグウイードの花粉からの
アレルケ゛ン抽出物５０〜の溶液及び生理食塩水浴液１
０＋ｎＡ中０２％Ｎ−エチル−Ｎ′−ジメチルアミノプ
ロビルカルボノイミドの浴１佼を添加した。３７℃で２
時間、浸濱下に処理した後、蛋白質が洗浄物に検知され
なくなる才で管を水、１Ｍプロピオン酸水浴液及び水で
連続的に洗浄した。

結合した蛋白質含＠　（ｒｌ　Ｅｌ　、）、４０　Ｏｒ
　ｅ　　ら、ＢｎＸｙｍＯＩＯｑ７　６゜８１９（１９
６３）　　にａ己述されている方法に従って製造できる
。蛋白質−ガラスの配合体の１０片を６ＮのＨＣｌ中に
浸し、全系を減圧下に密閉し、１１０１：）に６０時間
加熱した。蛋白質の含量をニンヒドリンの着色を測定し
た。

実施例　１９ アレルク゛ン抽出物−くもシガラスの結合体ソヨート・
ラグウィードの花粉抽出物の代シに実施例２〜１２で製
造した抽出物を用いる以外実尻例１８の方法を繰返すこ
と（Ｃより、対応する、・それぞれのアレルグジ抽出物
〜ガラス結合体を製造したつ 実施例 アレルケ゛ン抽出物−くもりガラスの結合体２００個の
くモリガラスのビーズを、トルエン中γ−アミノプロピ
ルトリエトキシシランの０．５％溶液１００ゴ甲に浸し
１７時間沸とうさせ７ヒ。

次いでビーズを戸別し、メタノール、更に水で洗浄した
。アミノ含有のシラン結合剤が結合した２００個のくも
シカラスのビーズに、２斧グルタルアルデヒド水浴液１
ρＵｍｌを碓加し／こ、４℃に２１ｉＭ　ｆ＋ｊｊ）ｋ
置した後、グルタルアルデヒドの只いが最早やしなくな
る丑でビーズを４〜６倍の脱イオン水で洗浄した９次い
でこのように処理した２００個のくもりガラスのビーズ
を、普通の食塩水Ｕ敢４０ｍ７！に佼した。これに生理
学的食塩水１０ｍ１中ゴールデン−ｏラド（（）ｏｌｃ
ｌｅｎ　　ｒｏｄ）の花粉のアレルゲン抽出物ｓｏｍｇ
の浴液を添加し／ｊ、反応を６０℃で２時間反応させた
後、蛋白質が洗浄液に検知されなく碌るまで、ガラスピ
ーズを完全に水洗した。

ゴールデン・ロンドの花粉の抽出物の代りに、実施例１
〜１２によって得た抽出物を用いる以外上述の方法を繰
返すことにより、対応するアレルゲン抽出物−ガラスの
結合体を得た。

第１頁の続き 優先権主張　■１９８３年３月１７日■米国（ＵＳ）＠
４７６１８７ （７談発　明　者　ジエラルド・エル・フリーゼンアメ
リカ合衆国カリフォルニア 炒ｌ９５６８８バカビル・エヌアラモ ドライブ３１７ （７■発　明　者　ジエイムズ・エル・ニコルスアメリ
カ合衆国カリフォルニア 州９４０２２０スアルトス・レッド ウッドドライブ１４００ ＝１６

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．３）　　アレルゲン抽出物の水溶液を、１００．０
   ００〜１．０００ダルトンの超フィルターを通過させ、
   そして１．０００〜１゜ｏ、　ｏ　ｏ　ｏの分子量の両
   分を保留させ；ｂ　）　　この保留した画分を１重量％
   よシ少ない含水量寸で乾燥してアレルゲン生成物を生成
   し； Ｃ）　このアレルゲン抽出物を清澄量のカーボン吸収剤
   及びゲル重合体吸収剤と接触させて長期間の貯蔵後に接
   続した透明性を有する抽出物を生成せしめる、 ことを特徴とするアレルゲン抽出物の安定性をＪ、７加
   させる方法。 ２、アレルゲン抽出物が花粉、表皮、小線要素、カビ、
   黒穂、昆虫、昆虫前液及び食品からなる群から選択され
   る１員の脂肪を含まない水性抽出物である特許Ｎ７ｊ求
   の範囲第１項記載の方法。 ３、　アレルゲン抽出物か花粉に由来する特許請求の範
   囲第２項記載の方法。 ４、アレルゲン抽出物が動物の表皮又は小線要素に由来
   する特許請求の範囲第２項記載の方法。 ５、アレルゲン抽出物がカビに由来する特許請求の範囲
   第２項記載の方法。 ６、　アレルゲン抽出物が黒穂に由来する特許請求の範
   囲第２項記載の方法。 ７、アレルゲン抽出物が昆虫に由来する特許請求の範囲
   第２項記載の方法。 ８、　アレルゲン抽出物が昆虫の毒液に由来する特許請
   求の範囲第７項記軟の方法。 ９、アレルゲン抽出物が食品に由来する特許ｍ−ｆｊ釆
   の範面第２項記載の方法。 １０、　カーボン吸収剤が微粉炭、炭又はグラファイト
   である特許請求の範囲第１項記載の方法。 １１、　　カーボン吸収剤が炭である特許請求の範囲第
   １０項記載の方法。 １２　ゲル重合体吸収剤が多糖類吸収剤である特許請求
   の範囲第１項記載の方法。 １３、　　ゲル重合体吸収剤がデキストラン又はアガロ
   ースに由来する特許請求の範囲第、１２項記載の方法。 １４、　ゲル重合体吸収剤がデキストランである特許請
   求の範囲第１３項記載の方法。 １５、　　元の抽出物と実質的に同一のアレルゲン組成
   と１重量％よシも少ない含水量を有し、そして水で再生
   した時、２２°Ｃで１８日間貯蔵した後４．００〜７０
   ０ｎｍの範囲において０．０１０．Ｄ。 よりも小さい吸光度の増加を示す透明で無色の溶液を与
   える精製されプζアレルゲン抽出物。 １６．１，０００〜１００．　ＯＯＯダルトンの範囲外
   の分子景の抽出された成分を実質的に含まない特許請求
   の範囲第１５項記載の精製されたアレルゲン抽出物ノ。 １７　アレルゲン抽出物が花粉、表皮、小膝要素、カビ
   、黒糖、昆虫、昆虫毒液及び食品からなる群から選択さ
   れる１嗅から得られる特許請求の範囲第１５項記載の精
   製され、安定化されたアレルゲン抽出物。 １８、花粉から得られた特許請求の範囲第１７項記載の
   精製されたアレルゲン抽出物。 １９、動物の表皮又は小膝要素から得られた特許請求の
   範囲第１７項記載の精製されたアレルゲン抽出物。 ２０、　　カビから得られた特許請求の範囲第１７項記
   載の精製されたアレルゲン抽出物。 ２１、黒糖から得られた特許請求の範囲第１７項記載の
   精製されたアレルゲン抽出物。 ２２、昆虫から得られた特許請求の範囲第１７項記載の
   精製されたアレルゲン抽出物。 ２３、　昆虫の前液から得られた精製されたアレルゲン
   抽出物。 ２４、食品から得られた特許請求の範囲第１７項記載の
   精製されたアレルゲン抽出物。 ２５、１重量％以下の含水量まで乾燥した特許請求の範
   囲第１項、記載の生成物から実質的になる精製されたア
   レルゲン抽出物。 ２６、　１ｓｙｚ係以下の含水量まで乾燥した特許請求
   の範囲第２項記載の生成物から実質的になる精製された
   アレルゲン抽出物。 ２７、１重量％以下の含水量まで乾燥した特許請求の範
   囲第１０項記載の生成物から実質的になる精製されたア
   レルゲン抽出物。 ２８、１重量％以下の含水量まで乾燥した特許請求の範
   囲第１２項記載の生成物から実質的になる精製されたア
   レルゲン抽出物。 ２９、１重量％以下の含水量まで乾燥した特許請求の範
   囲第１４項記載の凍結乾燥された生成物から実質的にな
   る精製されたアレルゲン抽出物。 ３０、％許請求の範囲第。１５項記載の精製されたアレ
   ルゲン抽出物を付着した不溶性の担体。 ３１、特許請求の範囲第１５項記載の精製されたアレル
   ゲン抽出物と水溶性蛋白の結合体を付着した不溶性の担
   体。