JPS5849311A - 安全なるリポソ−ムの製造法 - Google Patents
安全なるリポソ−ムの製造法Info
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- JPS5849311A JPS5849311A JP14758781A JP14758781A JPS5849311A JP S5849311 A JPS5849311 A JP S5849311A JP 14758781 A JP14758781 A JP 14758781A JP 14758781 A JP14758781 A JP 14758781A JP S5849311 A JPS5849311 A JP S5849311A
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- liposome
- ester
- acid
- liposomes
- polysaccharide
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- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
- A61K9/127—Liposomes
- A61K9/1271—Non-conventional liposomes, e.g. PEGylated liposomes, liposomes coated with polymers
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- Veterinary Medicine (AREA)
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明はリポソーム膜の表面を多糖質と脂肪酸とのエス
テルによって被覆することを４１１１とする安定なリポ
ソームの製造法に関する。
テルによって被覆することを４１１１とする安定なリポ
ソームの製造法に関する。
医学、薬学の分野において、いわゆる臓器指向型製剤へ
の関心が徐々に高まるに伴ない、この目的を達成するた
めの一つの手段としてリポソームを利用する技術が菖要
視されるに至っている。すなわち、リポソームは臓器毎
にそれぞれ固有のすボソームとして存在しているという
点に着目し。
の関心が徐々に高まるに伴ない、この目的を達成するた
めの一つの手段としてリポソームを利用する技術が菖要
視されるに至っている。すなわち、リポソームは臓器毎
にそれぞれ固有のすボソームとして存在しているという
点に着目し。
所定の薬物を所定のリポソームに含有せしめて投与する
ことにより、薬物を目標臓器に選択的かつ集中的に運搬
せしめようと意図する技術が開発されつつあるのである
。
ことにより、薬物を目標臓器に選択的かつ集中的に運搬
せしめようと意図する技術が開発されつつあるのである
。
リポソームを薬物運搬体として利用する手段は従来から
知られており９例えば特開昭５２−１４３２１８、ｑ！
ｉ開昭５２−１５１７１８．特開昭５３−１３３６１６
．特公昭５５−８４８８における発明を挙げることがで
きる。いずれもリポソームを担体として、これに特定の
生体成分あるいは医薬成分を保持させる技術に関する発
明であり。
知られており９例えば特開昭５２−１４３２１８、ｑ！
ｉ開昭５２−１５１７１８．特開昭５３−１３３６１６
．特公昭５５−８４８８における発明を挙げることがで
きる。いずれもリポソームを担体として、これに特定の
生体成分あるいは医薬成分を保持させる技術に関する発
明であり。
いずれこれらの技術は医学薬学における他の生体成分、
医薬成分にまで応用されるものと予想される。
医薬成分にまで応用されるものと予想される。
しかしながら、当該技術における一つの問題点として２
次のごとき課題が従来より指摘されている。すなわち、
生体成分または医薬成分を含有するリポソームは、それ
が目標臓器に到達する以前に、生体内ホスホリパーゼの
攻撃により破壊し。
次のごとき課題が従来より指摘されている。すなわち、
生体成分または医薬成分を含有するリポソームは、それ
が目標臓器に到達する以前に、生体内ホスホリパーゼの
攻撃により破壊し。
内容成分を放出してしまうということである。事実、後
記実施例の対照試料におけるごと＜、リポソームの破壊
による内容成分の放出は着しいものであることが観察さ
れる。従って、生体内ホスホリパーゼの攻撃によるリポ
ソームの破壊を適当な方法により防止することのできる
手段が提示されることが必要であり、さらには当該手段
によって目標臓器における内容成分の放出が急速なもの
にも、あるいは緩徐なものにもそれぞれ適宜制御される
ことが望まれるのである。つまり当該技術が医学薬学の
分野において実用的に完成されるためには２．リポソー
ム自体を生体内過程において安定に維持し、かつ必要に
応じ目標臓器における内容成分の放出を計画的に制御す
ることのできる手段が提供されなく【はならないのであ
る。
記実施例の対照試料におけるごと＜、リポソームの破壊
による内容成分の放出は着しいものであることが観察さ
れる。従って、生体内ホスホリパーゼの攻撃によるリポ
ソームの破壊を適当な方法により防止することのできる
手段が提示されることが必要であり、さらには当該手段
によって目標臓器における内容成分の放出が急速なもの
にも、あるいは緩徐なものにもそれぞれ適宜制御される
ことが望まれるのである。つまり当該技術が医学薬学の
分野において実用的に完成されるためには２．リポソー
ム自体を生体内過程において安定に維持し、かつ必要に
応じ目標臓器における内容成分の放出を計画的に制御す
ることのできる手段が提供されなく【はならないのであ
る。
かかる実情にかんがみ本発明者はリポソーム。
とりわけリポソーム中のリン脂質を外部攻撃から保穫す
る方法について検討し、その結果、リポソームを多糖質
と脂肪酸とのエステルによって被覆することにより、所
期の目的が達成されることを知り２本発明を完成した。
る方法について検討し、その結果、リポソームを多糖質
と脂肪酸とのエステルによって被覆することにより、所
期の目的が達成されることを知り２本発明を完成した。
従って９本発明は多糖質と脂肪酸とのエステルによって
被覆することを特徴とする安定なるリポソームを製造す
る方法である。
被覆することを特徴とする安定なるリポソームを製造す
る方法である。
以下に本発明を説明する。
本発明においてリポソームとは、脂質、とりわけリン脂
質のみよりあるいはリン脂質とステロールより構成され
る単層リポソームおよび多重層リポソームであり、リポ
ソームの製造法として従来公知の方法により調整された
ものを言う。従って例えばナス型フラスコに卵黄レシチ
ンの薄膜を作成し、ガラスピーズな入れてはがし、リポ
ソーム膜な形成させて得られるリポソームなどが含まれ
る。
質のみよりあるいはリン脂質とステロールより構成され
る単層リポソームおよび多重層リポソームであり、リポ
ソームの製造法として従来公知の方法により調整された
ものを言う。従って例えばナス型フラスコに卵黄レシチ
ンの薄膜を作成し、ガラスピーズな入れてはがし、リポ
ソーム膜な形成させて得られるリポソームなどが含まれ
る。
リポソームに担持される内容物質は、水溶性および脂溶
性のいずれでもよい。ただし、水溶性物質はリポソーム
の内腔に、また脂溶性物質はリポソームｌＩ［Ｋそれぞ
れ収納される。
性のいずれでもよい。ただし、水溶性物質はリポソーム
の内腔に、また脂溶性物質はリポソームｌＩ［Ｋそれぞ
れ収納される。
次に本発明に係る多糖質とは分子量が４万以上のポリサ
ッカライドを言い、具体的にはデキストラン、アイロペ
クチン、プルラン、デキストランｉｉ＊、キト酸、プル
ラン硫酸等である。本発明において多糖質は分子量の異
なる二′！ｔｉ類以上のものの組合わせあるいはアミロ
ペクチンとデキストランの組合わせのごとく、複数の多
糖質を合わせて使用してもよい。
ッカライドを言い、具体的にはデキストラン、アイロペ
クチン、プルラン、デキストランｉｉ＊、キト酸、プル
ラン硫酸等である。本発明において多糖質は分子量の異
なる二′！ｔｉ類以上のものの組合わせあるいはアミロ
ペクチンとデキストランの組合わせのごとく、複数の多
糖質を合わせて使用してもよい。
また本発明に係る脂肪酸はラウリン酸、ミリスチン酸、
バルミチン酸、ステアリン酸からなる群より選択される
１乃至４種の組合わせである。本発明に係るエステルを
もってリポソームを被覆した場合−２脂肪酸のアルキル
鎖はリポソームの脂質層に＊ｍに配向することが推定さ
れる。従って上記脂肪酸が特に好ましいとされるのは、
そのアルキル鎖の長さがリポソーム脂質層への楔形配向
にとって適当なものであるためであると考えられる。
バルミチン酸、ステアリン酸からなる群より選択される
１乃至４種の組合わせである。本発明に係るエステルを
もってリポソームを被覆した場合−２脂肪酸のアルキル
鎖はリポソームの脂質層に＊ｍに配向することが推定さ
れる。従って上記脂肪酸が特に好ましいとされるのは、
そのアルキル鎖の長さがリポソーム脂質層への楔形配向
にとって適当なものであるためであると考えられる。
次に多糖質と脂肪酸とのエステルの製造は、概略以下の
ごとくおこなうことができる。まず、多糖質を無水ジメ
チルホルムア亭ドに６０〜７０℃で加温溶解する。無水
ピリジンと無水ジメチルホルムアナドに脂肪酸塩化ぐを
あらかじめ溶解したものを加え、６０〜１０℃で数時間
、続いて室温で２４時間攪拌する。反応終了後１反応混
合物にエタノールを加えると白色沈澱が析出するので、
これをＰ取し、エタノールで洗浄し、さらにエーテルに
分散して再びｒ取する。減圧乾燥し、所定のエステルを
得る。
ごとくおこなうことができる。まず、多糖質を無水ジメ
チルホルムア亭ドに６０〜７０℃で加温溶解する。無水
ピリジンと無水ジメチルホルムアナドに脂肪酸塩化ぐを
あらかじめ溶解したものを加え、６０〜１０℃で数時間
、続いて室温で２４時間攪拌する。反応終了後１反応混
合物にエタノールを加えると白色沈澱が析出するので、
これをＰ取し、エタノールで洗浄し、さらにエーテルに
分散して再びｒ取する。減圧乾燥し、所定のエステルを
得る。
ここに得られるエステルは、ＩＲスペクトル（ＫＢｒ＋
法）、ｎ’−ＮＭＢスペクトル（溶媒ｄ＠−〇ＭＳＯ，
内部標準ＴＭ８）によって特定することができるが、さ
らに脂肪酸置換度を求めることができる。
法）、ｎ’−ＮＭＢスペクトル（溶媒ｄ＠−〇ＭＳＯ，
内部標準ＴＭ８）によって特定することができるが、さ
らに脂肪酸置換度を求めることができる。
脂肪酸置換度とは糖単位１００個に対する脂肪酸の導入
個数を言い、これは以下のよ５ＫＨ’−ＮＭＲによって
測定される。例えばバルミトイル基が導入されている場
合、その導入量はＨ’−ＮＭＲスペクトルにおいて０．
９ｐｐｍおよび１．２８ｐｐｍに現われるバルミトイル
基のプロトンのピーク面積と３．５〜５．２ ｐｐｍ
Ｋ３Ｊわれる糠中のプロトンのピーク面積との比によっ
て与えられる。すなわち糖単位１００１１ｍ中にＸ個の
バルミトイル基が置換されている場合には、糖のプロト
ン数は９ｘ＋１０（１００−ｘ）であり、またバルミト
イル基のプロトン数は３１ｘである。従ってＨ’ −Ｎ
Ｍ Ｒスペクトルの積分曲線から求められる糖のプロ
トン数なｙ。
個数を言い、これは以下のよ５ＫＨ’−ＮＭＲによって
測定される。例えばバルミトイル基が導入されている場
合、その導入量はＨ’−ＮＭＲスペクトルにおいて０．
９ｐｐｍおよび１．２８ｐｐｍに現われるバルミトイル
基のプロトンのピーク面積と３．５〜５．２ ｐｐｍ
Ｋ３Ｊわれる糠中のプロトンのピーク面積との比によっ
て与えられる。すなわち糖単位１００１１ｍ中にＸ個の
バルミトイル基が置換されている場合には、糖のプロト
ン数は９ｘ＋１０（１００−ｘ）であり、またバルミト
イル基のプロトン数は３１ｘである。従ってＨ’ −Ｎ
Ｍ Ｒスペクトルの積分曲線から求められる糖のプロ
トン数なｙ。
またバルミトイル基のプロトン数を２とすると。
１．０００ｚ
である。かくのごとくして求められる置換度を本発明に
おいて使用されるエステルについて測定してみると、置
換度は低い方が好ましい結果を与えることが判明し２例
えば０．コル５程度で十分である。
おいて使用されるエステルについて測定してみると、置
換度は低い方が好ましい結果を与えることが判明し２例
えば０．コル５程度で十分である。
また０本発明に係るエステルをリポソームに被覆させる
には、リポソームが形成している水溶液にエステル含有
水溶液を加えて攪拌すればよい。
には、リポソームが形成している水溶液にエステル含有
水溶液を加えて攪拌すればよい。
被覆に当たっては単一のエステルを被覆すればよいが、
２種以上の本発明に係るエステルを組合わせ、いわゆる
複合エステルとして１！１種し−てもよい。
２種以上の本発明に係るエステルを組合わせ、いわゆる
複合エステルとして１！１種し−てもよい。
以下に記載する実施例をもって１本発明並びにリポソー
ムを安定化する本発明の効果をさらに詳細に説明する。
ムを安定化する本発明の効果をさらに詳細に説明する。
１！施例１
試料
リポソームに担持される水溶性物質として６−カルポキ
シフルオレツセイン（以下６−ＣＦと略）を使用した。
シフルオレツセイン（以下６−ＣＦと略）を使用した。
この６−ＣＦは、高濃度において濃度消光によリケイ元
を発しない。従って、高濃度（２００ｍＭ）の６−ＣＦ
をリポソーム内水相にトラップすれヲモケイ光の増加を
観測することにより６−ＯＦのリポソーム内水相から外
水相への漏れを調べることができる。
を発しない。従って、高濃度（２００ｍＭ）の６−ＣＦ
をリポソーム内水相にトラップすれヲモケイ光の増加を
観測することにより６−ＯＦのリポソーム内水相から外
水相への漏れを調べることができる。
次に６−ＣＦを内水相に含むリポソームは、以下のごと
く調製した。
く調製した。
卵黄レシチン３０１１ｇを５０ｉｕ容ナス型フラスコに
クロロホルム２１１１と共に加えて、完全に溶解してか
らロータリー・エバポレーターで減圧下溶媒を完全に除
去し、卵黄レシチンの薄−を作製した。
クロロホルム２１１１と共に加えて、完全に溶解してか
らロータリー・エバポレーターで減圧下溶媒を完全に除
去し、卵黄レシチンの薄−を作製した。
これｔ減圧デシケータ−中で一夜乾燥すせ、クロロホル
ムを完全に除去した。次にこのフラスコに数個のオラス
ビーズを入れて２００ｍＭ６−ＣＦ水溶液（ｐ Ｈ８，
６Ｎａ０Ｂで調整）２１１７を加えてから。
ムを完全に除去した。次にこのフラスコに数個のオラス
ビーズを入れて２００ｍＭ６−ＣＦ水溶液（ｐ Ｈ８，
６Ｎａ０Ｂで調整）２１１７を加えてから。
Ｖｏｒｔ＠ｘ岨翼・ｒで薄膜をはがしてリボノーム紗を
形成させた。この操作を２回くりかえして計４ｄｋ分散
した。次に水上で窒素雰囲気下、超音波処理（２５Ｗｅ
１分ごとに３０秒停止）を２０分行なった。ここに得ら
れたリポソームに表１記絨のごとき５種拳のエステルａ
ＰＪｅ・を被覆した。
形成させた。この操作を２回くりかえして計４ｄｋ分散
した。次に水上で窒素雰囲気下、超音波処理（２５Ｗｅ
１分ごとに３０秒停止）を２０分行なった。ここに得ら
れたリポソームに表１記絨のごとき５種拳のエステルａ
ＰＪｅ・を被覆した。
表 １
被覆は以下のごとくおこなった。超音波処理してリポソ
ームが形成している６−ＣＦ溶液（２００ｍＭｐＨ８，
６）４ｉ１にエステル水溶液（３０〜／ｄ）ｔｄを加え
て２０℃で１時間スターラーで攪拌した。
ームが形成している６−ＣＦ溶液（２００ｍＭｐＨ８，
６）４ｉ１にエステル水溶液（３０〜／ｄ）ｔｄを加え
て２０℃で１時間スターラーで攪拌した。
次にこれをＳ＠ｐｈａｒｏｓ＠４ Ｂカラム（ｆＩｉ１
８ｍＸ６００ｍ）で２００ｍＭ ＮａＣｊ、 ２０ｍＭ
Ｔｒｉｓ −ＨＣｌ ｂｕｆｆｅｒ（ｐＨ８，６゜）
を展開溶媒としてゲル濾過を行なった。
８ｍＸ６００ｍ）で２００ｍＭ ＮａＣｊ、 ２０ｍＭ
Ｔｒｉｓ −ＨＣｌ ｂｕｆｆｅｒ（ｐＨ８，６゜）
を展開溶媒としてゲル濾過を行なった。
溶媒の滴下速度は５秒に１滴とし、フラクシＷ／４０ま
で採取した。フラクシ冒ン単位当たり１２０滴で約４−
であった。その溶出過程を６−ＣＦの５１０ ｎｍの吸
収を紫外可視分光光度計で追跡することにより溶出曲縁
を得た。これより多重層および１軟膜リポソームを含む
フ２クシッンを採取した。溶出曲線を図１ｋ示す。
で採取した。フラクシ冒ン単位当たり１２０滴で約４−
であった。その溶出過程を６−ＣＦの５１０ ｎｍの吸
収を紫外可視分光光度計で追跡することにより溶出曲縁
を得た。これより多重層および１軟膜リポソームを含む
フ２クシッンを採取した。溶出曲線を図１ｋ示す。
以上のどと＜ＫＬ、て調製された被覆リポソーム含有水
溶液を検体試料として、以下に記載する方法によりリポ
ソーム内水相から流出した６−ＣＦの経時的変化を求め
た。なお、対照試料として被覆処理をおこなわすに上記
ゲル濾過をおこなって得られたものを使用した。
溶液を検体試料として、以下に記載する方法によりリポ
ソーム内水相から流出した６−ＣＦの経時的変化を求め
た。なお、対照試料として被覆処理をおこなわすに上記
ゲル濾過をおこなって得られたものを使用した。
方法
（１） まず卵黄レシチン３０１１９に対してエステ
ル３０ダを用いてリポソーム膜をコーティングした際の
６−ＣＦの流出を経時的に測定した。測定は５０℃で行
い６−Ｃ１１’の５２０ｎｍのケイ光の増加−ｘ を追跡した（←４７０ｎｍ）。
ル３０ダを用いてリポソーム膜をコーティングした際の
６−ＣＦの流出を経時的に測定した。測定は５０℃で行
い６−Ｃ１１’の５２０ｎｍのケイ光の増加−ｘ を追跡した（←４７０ｎｍ）。
なお、リポソーム内水相にトラップされた６−ＣＦの量
は１１１１のリポソーム溶液にｌ Ｑ ｖｏ１％のＴｒ
１ｔｏｔ＋Ｘ−１００水溶液を３０４加えることにより
リポソーム膜を壊し、その時の６−ＣＦの５２０ｎｍの
ケイ光強度を測定することにより求めた。このケイ光強
度の値を１００とし、６−ＣＦの流出によるケイ光強度
の増加な嘩単位で算出した。
は１１１１のリポソーム溶液にｌ Ｑ ｖｏ１％のＴｒ
１ｔｏｔ＋Ｘ−１００水溶液を３０４加えることにより
リポソーム膜を壊し、その時の６−ＣＦの５２０ｎｍの
ケイ光強度を測定することにより求めた。このケイ光強
度の値を１００とし、６−ＣＦの流出によるケイ光強度
の増加な嘩単位で算出した。
（２）次に表１記載のエステ羨畠を用いて６−ＣＦの流
出に対するエステルの濃度効果を検討した。
出に対するエステルの濃度効果を検討した。
（この実験においては、卵黄レシチン３０９に対シテエ
ステルａ ヲ６０■、３０〜，１０■コーテイングした
ものを用いた。） 結果 結果を図２乃至図４に示す。図２はリポソームが多重層
リポソームである場合９図３はリポソームが単層（１軟
膜）リポソームである場合における６−ＣＦｆ）流出を
示す図であり１図中、Ｏ印線は対照試料、■印線はエス
テルａ、Δ印線はエステルｂ、ム印線はエステルＣ２・
印線はエステル６をそれぞれ被覆した検体試料について
のものである。
ステルａ ヲ６０■、３０〜，１０■コーテイングした
ものを用いた。） 結果 結果を図２乃至図４に示す。図２はリポソームが多重層
リポソームである場合９図３はリポソームが単層（１軟
膜）リポソームである場合における６−ＣＦｆ）流出を
示す図であり１図中、Ｏ印線は対照試料、■印線はエス
テルａ、Δ印線はエステルｂ、ム印線はエステルＣ２・
印線はエステル６をそれぞれ被覆した検体試料について
のものである。
図２および図３より１本発明に係るエステルによってリ
ポソーム膜な被覆することにより、内容成分の放出を急
速なるものに、あるいは緩徐なるものにそれぞれ適宜に
制御できることが判明した。
ポソーム膜な被覆することにより、内容成分の放出を急
速なるものに、あるいは緩徐なるものにそれぞれ適宜に
制御できることが判明した。
図４はリポソームがエステル１を被覆した多重層リポソ
ームである場合の６−ＣＦの放出を示す図であり９図中
０印線は対照試料、ム印巌はエステル量が卵黄レシチン
に対して２倍、Δ印線は１倍、・印線は１ｉ３倍である
各検体試料についてのものである。図４より、卵黄レシ
チン３０ダに対してエステル畠を１０〜３０ダの範囲で
調節することにより、内容成分の放出を適宜コントロー
ル出来ることが判明した。
ームである場合の６−ＣＦの放出を示す図であり９図中
０印線は対照試料、ム印巌はエステル量が卵黄レシチン
に対して２倍、Δ印線は１倍、・印線は１ｉ３倍である
各検体試料についてのものである。図４より、卵黄レシ
チン３０ダに対してエステル畠を１０〜３０ダの範囲で
調節することにより、内容成分の放出を適宜コントロー
ル出来ることが判明した。
実施例２
（ホスホリパーゼの攻撃に対する安定化）試料
実施例１試料の項の記載において２００ｍＭ６−ＣＦ水
溶液（ｐＨ８，６ＮａＯＨで調整）の代わりに緩衝液（
ｐ）ｊ８，６）２ｉｕを加えた点を除いて同項記載にお
けると同じ方法により被覆リポソーム（１軟膜リポソー
ム）含有水溶液を調製して検体試料とした。なお、エス
テルとしては表１記載のエステル１を使用し、その添加
量は卵黄レシチン３．４×１０−’ Ｍ （０，２６卸
／ｍ）Ｋ対しテ０，５ｙ／３．２ｓｕ トした。また対
照試料としては、上記検体試料の調製において、被覆処
理をおこなわずに、そのままゲル濾過をおこなって得ら
れたものを使用した。
溶液（ｐＨ８，６ＮａＯＨで調整）の代わりに緩衝液（
ｐ）ｊ８，６）２ｉｕを加えた点を除いて同項記載にお
けると同じ方法により被覆リポソーム（１軟膜リポソー
ム）含有水溶液を調製して検体試料とした。なお、エス
テルとしては表１記載のエステル１を使用し、その添加
量は卵黄レシチン３．４×１０−’ Ｍ （０，２６卸
／ｍ）Ｋ対しテ０，５ｙ／３．２ｓｕ トした。また対
照試料としては、上記検体試料の調製において、被覆処
理をおこなわずに、そのままゲル濾過をおこなって得ら
れたものを使用した。
方法と定量
試料を３７℃、 ｐＨ８，０（２００ｍＭ Ｔｒｉ＠
−ＨＣ１緩衝液）Ｋｉｉｉ１節し、ここにホスホリパー
ゼ−〇（ＰＬＤと略記する）を加え、ＰＬＯにより卵黄
レシチンが加水分解を受けてリポソームが破壊する状態
を経時的に追跡した。Ｉｌ定は８−アテリノ−１−ナフ
タレンスルホン酸ナトリウム（ＡＮＳと略記する）を指
示薬としてあらかじめ試料中に加え【おき、その４９０
ｎｍにおけるケイ光光度を経時的に測定しておこなっ
た。すなわちＡＮＳは水溶液中ではほとんどケイ光を発
しない物質であるが、水浴液中にリポソームが存在する
と、その膜表面に吸着して強いケイ光を発するようにな
る。
−ＨＣ１緩衝液）Ｋｉｉｉ１節し、ここにホスホリパー
ゼ−〇（ＰＬＤと略記する）を加え、ＰＬＯにより卵黄
レシチンが加水分解を受けてリポソームが破壊する状態
を経時的に追跡した。Ｉｌ定は８−アテリノ−１−ナフ
タレンスルホン酸ナトリウム（ＡＮＳと略記する）を指
示薬としてあらかじめ試料中に加え【おき、その４９０
ｎｍにおけるケイ光光度を経時的に測定しておこなっ
た。すなわちＡＮＳは水溶液中ではほとんどケイ光を発
しない物質であるが、水浴液中にリポソームが存在する
と、その膜表面に吸着して強いケイ光を発するようにな
る。
従ってＰＬＤによりリポソームが破壊を受けるとＡＮＳ
は膜表面から水中へ放出されてケイ光強度が減少するよ
うになる。この現象を利用して前記のごとき−ｊ定をお
こなった。
は膜表面から水中へ放出されてケイ光強度が減少するよ
うになる。この現象を利用して前記のごとき−ｊ定をお
こなった。
結果
結果を図５に示す。図中、０印縁は対照試料。
・印線は検体試料におけるものを示す。図５より明らか
なようにエステルでコーティングしたリポソームのケイ
光強度の減少はコーティングされていないリポソームの
ものに比べておさえられている。これはエステルでリポ
ソーム誤表面をコーティングすることにより、卵黄レシ
チンをＰＬＤ攻撃から保護しているためであることが判
明する。
なようにエステルでコーティングしたリポソームのケイ
光強度の減少はコーティングされていないリポソームの
ものに比べておさえられている。これはエステルでリポ
ソーム誤表面をコーティングすることにより、卵黄レシ
チンをＰＬＤ攻撃から保護しているためであることが判
明する。
図１は実施例１記載における図１Ｋ相当する図面であり
、ゲルｒ過における溶出曲嶽を示す。 図・２および図３は実施例１記載における図２および図
３に相当する図面であり、リポソームが多重層リポソー
ムおよび単層リポソームであるそれぞれの場合における
６−ＣＦの流出を示す。 図４は実施例１記載における図４に相当する図面であり
、リポソームがエステルａを被覆した多重層リポソーム
である場合の６−ＣＦの流出を示す。 図５は実施例２記載における図５に相当する図面であり
、ホスホリパーゼ−〇によってリポソームが破壊される
結果、ケイ光強度が減少する状況を示す。 図１ ｆｒａｃｔｉｏｎ ｎｕｍｂｅｒ Ｔｉｍｅ （＋ｎｉｎ） ２１３ 図 ４ ρ ｌＱ −ＩＪ ３ρ手続補正＊（
自発） 昭和５６年ｌθ月２７日 特許庁長官島田春樹殿 １、事件の表示 昭和５６年特許願第１４７５８７号 ２、発明の名称 安定なるリポソームの製造法 ３、補正をする者 事件との関係 特許出願人 名称 （０２１） エーザイ株式会社（１） 明細
書の発明の詳細な説明の欄（２）明細書全文 ５、補正の内容 （１） 第１１真下から４行目の「０Ｍ８０．Ｊとあ
るのをｌ−ＤＭ８０ＪＫ禰正する。 （２）明細書の浄書（上記（１）以外の内容に変更なし
）
、ゲルｒ過における溶出曲嶽を示す。 図・２および図３は実施例１記載における図２および図
３に相当する図面であり、リポソームが多重層リポソー
ムおよび単層リポソームであるそれぞれの場合における
６−ＣＦの流出を示す。 図４は実施例１記載における図４に相当する図面であり
、リポソームがエステルａを被覆した多重層リポソーム
である場合の６−ＣＦの流出を示す。 図５は実施例２記載における図５に相当する図面であり
、ホスホリパーゼ−〇によってリポソームが破壊される
結果、ケイ光強度が減少する状況を示す。 図１ ｆｒａｃｔｉｏｎ ｎｕｍｂｅｒ Ｔｉｍｅ （＋ｎｉｎ） ２１３ 図 ４ ρ ｌＱ −ＩＪ ３ρ手続補正＊（
自発） 昭和５６年ｌθ月２７日 特許庁長官島田春樹殿 １、事件の表示 昭和５６年特許願第１４７５８７号 ２、発明の名称 安定なるリポソームの製造法 ３、補正をする者 事件との関係 特許出願人 名称 （０２１） エーザイ株式会社（１） 明細
書の発明の詳細な説明の欄（２）明細書全文 ５、補正の内容 （１） 第１１真下から４行目の「０Ｍ８０．Ｊとあ
るのをｌ−ＤＭ８０ＪＫ禰正する。 （２）明細書の浄書（上記（１）以外の内容に変更なし
）
Claims (6)
- （１） リポソーム膜の表面を多糖質と脂Ｕ５酸との
エステルによって被覆することを特徴とする安定なるリ
ポソームの製造法。 - （２）多糖質がデキストラン、アミロペクチン。 プルラン、デキストラン硫酸、キト酸、プルラン硫酸か
らなる群より選択されるｌ乃至６檜の組合せである特許
請求の範囲第１項記載の安定なるリポソームの製造法。 - （３）脂肪酸がラウリン酸、ミリスチン酸、ノくルミチ
ン酸、ステアリン酸からなる群より選択されるｌ乃至４
１１ｉの組合わせである特許請求の範囲第１項または第
２項記載の安定なるリポソームの製造法。 - （４） リポソーム膜が脂質またはｌｎＩ質とステロー
ルより構成されるリポソーム膜である特許請求の範囲第
１項乃至第３項記載の安定なるリポソームの製造法。 - （５）ｋ質がホスファチデルコリンである特許請求の範
囲第４項記載の安定なるリポソームの製造法。 - （６）ホスファチデルコリン１重量部に対してプルラン
とバルミチン酸とのエステルが１／３〜１重量部である
特許請求の範囲第５項記載の安定なるリポソームの製造
法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP14758781A JPS5849311A (ja) | 1981-09-18 | 1981-09-18 | 安全なるリポソ−ムの製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP14758781A JPS5849311A (ja) | 1981-09-18 | 1981-09-18 | 安全なるリポソ−ムの製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5849311A true JPS5849311A (ja) | 1983-03-23 |
| JPS6332329B2 JPS6332329B2 (ja) | 1988-06-29 |
Family
ID=15433714
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP14758781A Granted JPS5849311A (ja) | 1981-09-18 | 1981-09-18 | 安全なるリポソ−ムの製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5849311A (ja) |
Cited By (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS61112021A (ja) * | 1984-11-06 | 1986-05-30 | Dai Ichi Seiyaku Co Ltd | 脂質膜構造体 |
| US4636381A (en) * | 1982-05-19 | 1987-01-13 | Eisai Co., Ltd. | Coated ubidecarenone-containing liposome |
| WO1987007503A1 (en) * | 1986-06-09 | 1987-12-17 | Cell Technology, Inc. | Biologic response modifier |
| JPS63107742A (ja) * | 1986-05-20 | 1988-05-12 | Wako Pure Chem Ind Ltd | 新規な機能性リポソ−ム及びその製造法 |
| JPH01197431A (ja) * | 1988-01-30 | 1989-08-09 | Lederle Japan Ltd | 感染症治療剤 |
| JPH02144140A (ja) * | 1988-11-25 | 1990-06-01 | Nippon Oil & Fats Co Ltd | 多糖誘導体によって安定化された脂肪乳剤 |
| US4971801A (en) * | 1986-06-09 | 1990-11-20 | Cell Technology, Inc. | Biologic response modifier |
| WO1991014424A1 (en) * | 1990-03-28 | 1991-10-03 | Yunis Adel A | Methods for protecting against chemotherapy-induced hair loss |
| WO1992008448A1 (en) * | 1990-11-09 | 1992-05-29 | Cell Technology, Inc. | Method for preventing drug-induced or radiation myelosuppression |
| EP0818989A1 (en) * | 1995-04-05 | 1998-01-21 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Novel compositions of lipids and stabilizing materials |
| JP2002534566A (ja) * | 1999-01-15 | 2002-10-15 | コーオペラティーベ、ベルコープ‐アン、プロドゥクティーベレニギング、バン、アルダペルメール、アン、デリバーテン、アベベ、ベー．アー． | 疎水性デンプン誘導体 |
| US6710038B1 (en) | 1999-12-14 | 2004-03-23 | Kibun Food Chemifa Co., Ltd. | Emulsification method using propylene glycol hyaluronate |
| JP2005298407A (ja) * | 2004-04-12 | 2005-10-27 | Masahiko Abe | ポリカチオン修飾リポソームおよびその製造法 |
| KR100965088B1 (ko) * | 2004-12-07 | 2010-06-23 | (주)아모레퍼시픽 | 유효성분의 안정화를 위한 다층 라멜라 베지클 및 그제조방법 |
| JP2011032336A (ja) * | 2009-07-31 | 2011-02-17 | Kansai Paint Co Ltd | プルラン誘導体及び有機溶剤型塗料組成物 |
-
1981
- 1981-09-18 JP JP14758781A patent/JPS5849311A/ja active Granted
Cited By (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4636381A (en) * | 1982-05-19 | 1987-01-13 | Eisai Co., Ltd. | Coated ubidecarenone-containing liposome |
| JPH055811B2 (ja) * | 1984-11-06 | 1993-01-25 | Daiichi Seiyaku Co | |
| JPS61112021A (ja) * | 1984-11-06 | 1986-05-30 | Dai Ichi Seiyaku Co Ltd | 脂質膜構造体 |
| JPS63107742A (ja) * | 1986-05-20 | 1988-05-12 | Wako Pure Chem Ind Ltd | 新規な機能性リポソ−ム及びその製造法 |
| WO1987007503A1 (en) * | 1986-06-09 | 1987-12-17 | Cell Technology, Inc. | Biologic response modifier |
| US4971801A (en) * | 1986-06-09 | 1990-11-20 | Cell Technology, Inc. | Biologic response modifier |
| JPH01197431A (ja) * | 1988-01-30 | 1989-08-09 | Lederle Japan Ltd | 感染症治療剤 |
| JPH02144140A (ja) * | 1988-11-25 | 1990-06-01 | Nippon Oil & Fats Co Ltd | 多糖誘導体によって安定化された脂肪乳剤 |
| WO1991014424A1 (en) * | 1990-03-28 | 1991-10-03 | Yunis Adel A | Methods for protecting against chemotherapy-induced hair loss |
| WO1992008448A1 (en) * | 1990-11-09 | 1992-05-29 | Cell Technology, Inc. | Method for preventing drug-induced or radiation myelosuppression |
| EP0818989A1 (en) * | 1995-04-05 | 1998-01-21 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Novel compositions of lipids and stabilizing materials |
| EP0818989A4 (en) * | 1995-04-05 | 2000-09-13 | Imarx Pharmaceutical Corp | NEW COMPOSITIONS OF LIPIDS AND STABILIZATION MATERIALS |
| JP2002534566A (ja) * | 1999-01-15 | 2002-10-15 | コーオペラティーベ、ベルコープ‐アン、プロドゥクティーベレニギング、バン、アルダペルメール、アン、デリバーテン、アベベ、ベー．アー． | 疎水性デンプン誘導体 |
| US6710038B1 (en) | 1999-12-14 | 2004-03-23 | Kibun Food Chemifa Co., Ltd. | Emulsification method using propylene glycol hyaluronate |
| JP2005298407A (ja) * | 2004-04-12 | 2005-10-27 | Masahiko Abe | ポリカチオン修飾リポソームおよびその製造法 |
| KR100965088B1 (ko) * | 2004-12-07 | 2010-06-23 | (주)아모레퍼시픽 | 유효성분의 안정화를 위한 다층 라멜라 베지클 및 그제조방법 |
| JP2011032336A (ja) * | 2009-07-31 | 2011-02-17 | Kansai Paint Co Ltd | プルラン誘導体及び有機溶剤型塗料組成物 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6332329B2 (ja) | 1988-06-29 |
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