JPS5833843B2 - スイサンヨウ ヤクザイ - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は水産動物、特に魚やエビの細菌性疾病の新規な
予防・治療剤に関する。

近年、淡水魚や海水魚、エビなどの水産動物の飼育や養
殖が盛んとなるにともない細菌性疾病の多発化およびそ
の大きな被害が問題となっている。

すなわち、たとえば、ウナギ、アユ、アマゴマス、コイ
、金魚、ハマチ、タイ、車エビなどの養殖魚類には種々
の疾病が認められるが、中でも細菌性疾病による被害は
大きく、このため、養殖企業家においてはかかる疾病の
有効、適確かつ安全な予防・治療剤の出現が要望されて
いる。

本発明者らは、かかる事情に鑑み、種々研究の結果、副
作用が少なく効果のすぐれた本発明を完成するに至った
。

すなわち、本発明は、 一般式 〔式中、Ｒ１はハロゲンまたは低級アルキル基を、Ｒ２
は水素または低級アルキル基を、Ｒ３は低級アルキル基
を表わす。

〕で示されるチェノ〔２・３−ｂ〕ピリジン−５−カル
ボン酸誘導体を含有してなる水産動物の細菌性疾病の予
防・治療剤である。

前記一般式で示される化合物はいずれも文献未載の新規
化合物であって、先に本発明者らの一人がその合成に成
功し、その製造法の発明については特願昭４８−８２８
６９号、（特開昭５０−３２１９５号）、特願昭４８−
８２８７０号←特開昭５０−３２１９６号）、特願昭４
８ １２９３５２号（特開昭５０−７７３９３号）および特
願昭４８−１２９３５３号（特開昭５０７７３９４号）
として出願されている。

そして、これらの化合物は特にダラム陽性菌、ダラム陰
性菌に対してすぐれた抗菌作用を示すのであるが、本発
明者ら（入さらに種々研究の結果、水産動物、特に魚や
エビの細菌性疾病の予防・治療にかかる本発明を完成す
るに至ったのであり、本発明の薬剤は特に副作用が少な
く著効を発揮しうるというすぐれた特徴を有する。

本発明の対象とする水産動物の細菌性疾病としては、た
とえば、ウナギの鰭赤病、画点病、鰐ぐされ病やアユ、
マス、タイ、車エビのビブリオ病、ハマチの類結節症、
マス、アマゴのせっそう病、※※コイ、金魚の隠ぐされ
病、立鱗病などが代表的なものであり、これら疾病の原
因菌としてはシュードモナス 、エロモナス属、ビブリ
オ属、パスツレラ属、コンドロコツカス属などの細菌が
挙げられる。

本発明の有効成分である前記一般式で示される化合物は
、たとえば下記の工程により容易に製造することができ
る。

〔式中、Ｒ４は低級アルキル基を、Ｘは水素またはカル
ボキシル基を表わし、その他の記号は前記の規定と同一
である。

〕すなわち、一般式（１）で表わされる２−（２・２−
ビスアルコキシカルボニル）ビニルアミノチオフェン誘
導体を適宜の熱伝達性溶媒（たとえばベンゼン、キシレ
ン、テトラリン、ニトロベンゼン、ジクロルベンゼン、
ジフェニルエーテル、ジフェニル）あるいはそれらの混
合溶媒の存在または非存在下、また、必要によりポリリ
ン酸またはポリリン酸エステルの存在下に加熱閉環後一
般式（２）で示される化合物を得、さらに酸またはアル
カリの存在下加水分解して、一般式（３）の化合物とし
、次いでアルキル化剤によりＮ−アルキル化して化合物
（５）が得られる。

なお、通常の場合、化合物（３）をアルカリ（たとえば
、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムなどの水酸化アル
カリ、炭酸水素ナトリウムなどの炭酸アルカリ、ナトリ
ウム水素などのアルカリ金属水素）の存在下、反応に不
活性な適宜の溶媒中、アルキル化剤（たとえば、□アル
キルハライド、ジアルキル硫酸）でアルキル化するとＮ
−アルキル化が起こる。

また、化合物（５）は前記の方法とは逆に化合物（２）
をＮ−アルキル化後、加水分解しても得られる。

また、化合物（３）および（５）はカルボン酸基を有す
るので、通常の方法によりアルカリ金属（たとえば、ナ
トリウム、カリウム）あるいはアルカリ土類金属（たと
えばカルシウム）などの塩を容易に形成する。

なお、前記工程での出発原料化合物（１）はヘミシエ・
ベリヒゲ９８巻、３５７１頁（１９６５年）、同誌９９
巻、９４頁（１９６６年）およびツアイトシュリフト・
７ユールーヘミイ、７巻、１８６頁（１９６７年）に記
載される方法あるいはこれに準する方法により得られる
一般式 〔式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｘは前記の規定と同一である。

〕で表わされる化合物に、アルコキシメチレンマロネー
トを、反応に不活性な溶媒（たとえばベンゼン、トルエ
ンなどの炭化水素類）の存在または非存在下に５００〜
１５０℃、好ましくは９０°〜１３０℃の間開熱反応さ
せて得られる。

なお、Ｒ１がハロゲンの化合物は、後記、参考側記載の
ように通常、化合物Ｒ１が水素の化合物（１）をハロゲ
ン化して製造する。

すなわち、Ｒ１が水素の化合物（６）とアルコキシメチ
レンマロネートと反応させてＲ１が水素の化合物（１）
とし、これをハロゲン化してＲ１がハロゲンの化合物（
１）が容易に製造される。

本発明の有効成分であるチェノ〔２・３−ｂ〕ピリジン
−５−カルボン酸誘導体はもちろん２種以上併用しても
よい。

有効成分の具体例としては、たとえば、７−ニチルー４
・７−シヒドロー２−メチル−４−オキソ−チェノ〔２
・３−ｂ）ピリジン−５−カルボン酸（以下、化合物Ｉ
と略称する。

）、２−プロモー７−ニチルー４・７−シヒドロー４−
オキソ−チェノ〔２・３−ｂ〕ピリジン−５−カルボン
酸（以下、化合物■と略称する。

）、２−クロロ−７−ニチルー４・７−シヒドロー４−
オキソ−チェノ〔２・３−ｂ〕ピリジン−５−カルボン
酸（以下、化合物■と略称する。

）、２−ブロモ−７−ニチルー４・７−シヒドロー３−
メチル−４−オキソ−チェノ〔２・３−ｂ）ピリジン−
５−カルボン酸（以下、化合物■と略称する。

）、７−ニチルー４・７−シヒドロー２−ヨード−４−
オキソ−チェノ〔２・３−ｂ〕ピリジン−５−カルボン
酸（以下、化合物Ｖと略称すも）などが挙げられ、いず
れも後記実験例から明らかなように種々の細菌性魚病の
原因菌に対して、きわめてすぐれた抗菌力を示し、また
、副作用が少ない。

なお、これらの化合物はいずれも前述したようなアルカ
リ金属塩（たとえば、ナトリウム塩、カリウム塩）やア
ルカリ土類金属塩（たとえば、カルシウム塩）などの塩
として使用してもよい。

本発明の水産用薬剤は前記のようなチェノＣ２・３−ｂ
〕ピリジン−５−カルボン酸誘導体（以下、本化学物質
と称することあり。

）そのものでもよいし、これに各種の天然物や添加剤を
加えたものでもよい。

従って、薬剤の形態としては粉剤でも液剤でも粒剤でも
よい。

すなわち、本化学物質を魚やエビなどの水産動物に投与
するには、常用される餌料にその必要量を均一に混和し
経口的に投与するのが最も簡単かつ確実であるが、この
場合における本水産用薬剤の形態としては、本化学物質
そのものでもよいし、また、飼料などに混和しやすいよ
うにするため、本化学物質を乳糖、ブドウ糖、小麦など
の担体で稀釈した倍散剤でもよいし、また、水や飼料用
魚油などによる懸濁液でもよい。

また、水中での薬剤散逸を防止するため、粘着性の飼料
原料、たとえばアルファ化殿粉、小麦グルテンあるいは
これらの粘着性飼料原料を含有する養魚用添加剤などを
混和した本水産用薬剤でもよく、これは魚肉などの生餌
に添加され５る。

また、薬浴処理剤としては、液剤が便利であり、たとえ
ば、水、ジメチルスルホキンドなどの溶剤に溶かした液
剤が挙げられる。

要するに、本発明の目的を有効かつ適確に達成しうる限
り、任意の剤形でよい。

次に、本薬剤の投与方法としては、病気の進行状態、対
象魚種、投与目的などによりやや異なるが、一般に経口
投与の場合には本化学物質５〜２０■程度に相当する薬
剤を、魚体重量１ｋｇ当たりの１日量として３〜５日程
度、餌とともに投与するのが適当である。

また、薬浴処理による投与の場合には、本化学物質ある
いはその塩を１％（重量）程度の割合で含有するジメチ
ルスルホキシド溶液あるいは水溶液（液剤）を使用する
のが簡便であり、かかる液剤を対象飼育水に混和して本
化学物質を１〜１０ｐｐｍ程度含有する水溶液とし、こ
の中に対象動物を数時間以上浸漬すればよい。

本発明の水産用薬剤は副作用がきわめて少な（、簡易、
安価、適確にすぐれた予防・治療効果を奏しうるかも当
業界における有用性はきわめて大きい。

次に、参考例、実験例および実施例を示す。

参考例 １ ２−（２・２〜ビス（エトキシカルボニル ビニル７ミ
／）−５−メチルチオフェン−３−カルボン酸１０Ｐに
、ビフェニルエーテル２０♂を加え、１９００〜２１０
℃で４０分間加熱熔融し、冷後ｎ−ヘキサンで熱時抽出
、抽出液はシリカゲル（９０２使用）のクロマトグラフ
ィーに付し、吸着させる。

これをまずｎ−へキサンでピフェニルエーテルを溶出後
、イソプロピルエーテルを用いて生成物を溶出する。

イソプロピルエーテル溶出液を濃縮、残留結晶をｎ−ヘ
キサンで洗浄１取するとエチル ４−ヒドロキシ−２−
メチル−チェノ〔２・３−ｂ）ピリジン−５−カルボキ
シレートの黄色粒状晶が得られる。

イソプロピルエーテルから再結晶すると黄色粒状晶が得
られる。

融点１２２−１２３℃。

元素分析 Ｃ１１Ｈ１□Ｎ０３Ｓ 計算値 Ｃ５５，６８、Ｈ４，６７、Ｈ５，９０実験値
Ｃ５５，４９、Ｈ４，６４、Ｈ５，８９上記の化合物
はまた次のようにしても製造できる。

ポリリン酸エステル９８２を１５０℃に加熱かき混ぜな
がらこれに２−〔２・２−ビス（エトキシカルボニル）
ビニルアミノコ−５−メチルチオフェン−３−カルボン
酸９．８１を少量ずつ加え、加え終ってからさらに３０
分間かき混ぜながら加熱後、冷却、氷水２５０ＴＩｌｌ
を加えクロロホルムで抽出、クロロホルム抽出液は水洗
、Ｎａ２ＳＯ４乾燥後溶媒を留去、残留物をイソプロピ
ルエーテルで抽出、抽出液を濃縮、析出結晶をＰ取、イ
ソプロピルエーテルとｎ−ヘキサンで洗浄するとエチル
４−ヒドロキシ−２−メチル−チェノ〔２・３−ｂ）
ピリジン−５−カルボキシレートの黄色結晶が得られる
。

融点１１８−１２０℃。本品の赤外部吸収スペクトルは
上記で得た化合物のそれと同一である。

あるいはまた本化合物は前項同様の方法でジエチル（５
−メチル−２−チェニル）アミノメチレンマロネート５
．６７♂をポリリン酸エステル６０♂中に加え、１２０
−１２５℃で加熱反応後、同様に処理するとエチル ４
−ヒドロキシ−２−メチル−チェノ〔２・３−ｂ〕ピリ
ジン−５−カルボキンレートの淡黄色結晶が得られる。

融点１２３−１２５℃。

本品の赤外部吸収スペクトルは上記で得られたもののそ
れと同一である。

ここに得られたエチル ４−ヒドロキシ−２−メチル−
チェノ〔２・３−ｂ）ピリジン−５−カルボキシレート
１．１’、１０％水酸化カリウム水溶液３０ＴＬｌの混
液を３０分間沸とう水浴上で加熱後、冷却、酢酸を加え
て酸性とし析出物を１取すると４−ヒドロキシ−２−メ
チル−チェノ〔２・３−ｂ〕ピリジン−５−カルボン酸
の結晶が得られる。

本品は炭酸水素ナトリウム水に溶解後、ふたたび酢酸酸
性とし析出結晶をＰ取、水、メタノールで充分洗浄、乾
燥すると精製品が得られる。

無色微細針状晶。

融点２４３−２４４℃（分解）元素分析 Ｃ０Ｈ７ＮＣ
３Ｓ 計算値 Ｃ５１，６６、Ｈ３，３７、Ｈ６，７０実験値
Ｃ５１，５２、Ｈ３，１８、Ｈ６，７０次いで下記の
反応によりＮ−アルキル化が行なわれる。

すなわち、上記で得られたエチル ４−ヒドロキシ−２
−メチル−チェノ〔２・３−ｂ）ピリジン−５−カルボ
キシレート１．４１に１０％水酸化カリウム水溶液１２
ｒｎ１１エタノール４８７７１１水６０ｒｒＬｌ、ヨー
化エチル１．８ｒｒＬｌを加え、約３時間還流後冷却し
、濃塩酸３ｒｒＬｌを含む水６０ｒｒＬｌ中に加え析出
結晶をＰ取すると７−ニチルー４・７−シヒドロー２−
メチル−４−オキソ−チェノ〔２・３−ｂ〕ピリジン−
５−カルボン酸の無色結晶が得うれる。

クロロホルム−エタノールから再結晶すると無色粒状晶
が得られる。

融点２２９−２３０’Ｇ。

元素分析 Ｃ０Ｈ７ＮＣ３Ｓ 計算値 Ｃ５５，６８、Ｈ４，６７、Ｈ５，９０実験値
Ｃ５５，６６、Ｈ４，４９、Ｈ５，６３あるいは遊離
の５−カルボン酸を用いてもＮアルキル化できる。

４−ヒドロキシ−２−メチル−チェノ〔２・３−ｂ）ピ
リジン−５−カルボン酸０．２Ｎ／、４％水酸化カリウ
ム水溶液５ｒｒＬｌの溶液にかき混ぜなからジメチル硫
酸０．２４ｍ１を加え一夜室温でかき混ぜたのち、酢酸
酸性とし析出物を１取すると４・７−シヒドロー２・７
−シメチルー４−オキソ−チェノ〔２・３−ｂ〕ピリジ
ン−５−カルボン酸の結晶カ得られる。

クロロホルム−エタノールから再結晶すると無色針状晶
が得られる。

融点２８８−２９０℃。

元素分析 Ｃ１ｏＨ０ＮＯ３Ｓ 言慎ｆ直 Ｃ５３，８０１Ｉ（４，０６、Ｈ６，２７
実験値 Ｃ５３，６２、Ｈ４，０６、Ｈ６，６１前記と
同様の方法でジメチル硫酸の代りにジエチル硫酸を４−
ヒドロキシ−２−メチル−チェノ〔２・３−ｂ 〕〕ピ
リジンー５−カルボンの水酸化カリウム水溶液に反応さ
せ同様に処理すると７−ニチルー４・７−シヒドロー２
−メチル−４−オキソ−チェノ〔２・３−ｂ〕ピリジン
−５−カルボン酸の結晶が得られる。

クロロホルム−エタノールから再結晶すると無色粒状晶
が得られる。

融点２２９−２３０℃。

上記参考例の製造原料である（５−メチル−２−チェニ
ル）アミノメチレンマロン酸ジエチルエステル類は、た
とえば次に記すような反応で製造できる。

すなわち、２−アミノ−５−メチルチオフェン−３−カ
ルホン酸１５．７１？、ジエチル エトキシメチレンマ
ロネート２３？の混合物を１１０℃で１時間加熱、冷後
イソプロピルエーテルを加え、析出結晶をＰ取スると２
−〔２・２−ビス（エトキシカルボニル）ビニルアミノ
コ−５−メチルチオフェン−３−カルボン酸の結晶が得
られる。

エーテルから再結晶すると淡黄色針状晶が得られる。

融点１８０−１８５℃。

元素分析 Ｃ１４Ｈ１□Ｎ５Ｏ６ 計算値 Ｃ５１，３６、Ｈ５，２３、Ｈ４，２７実験値
Ｃ５１，１２、Ｈ５，１４、Ｈ４，３２上記結晶をｒ
取後の母液をシリカゲル１００１？のカラムに加え、イ
ソプロピルエーテルで溶出される画分を濃縮、残留油状
物を少量のエタノールに溶解、ドライアイス−アセトン
浴で冷却すると結晶化、ｒ取、冷エタノールで洗浄する
とジエチル（５−メｆルー２−チェニル）アミノメチレ
ンマロネートの結晶が得られる。

淡黄色針状晶。融点５４−５５．５℃。

元素分析 ｃｔｓＩ（ｉ□Ｎ０４Ｓ 計算値 Ｃ５５，１０、Ｈ６，０５、Ｈ４，９４実験値
Ｃ５５，１５、Ｈ５，９８、Ｈ５，０９参考例 ２ ポリリン酸エチルエステル１１２Ｌｉ！を１２０〜１３
０℃に加熱、かき混ぜなから２−（２・２−ビスエトキ
シカルボニル）ビニルアミノ−５−フロモチオフエン−
３−カルボン酸５．６９を少しずつ加え、さらに３０分
反応させる。

冷却後氷水３００ｒＩ′ｌｌを加えりｒ：Ｉｅｒホルム
で抽出、クロロホルム層は水洗、Ｎａ２ ＳＯ４乾燥後
活性炭で脱色し溶媒を留去するとエチル ２−ブロモ−
４−ヒドロキシ−チェノ〔２・３−ｂ）ピリジン−５−
カルボキシレートの結晶が得られる。

エタノールで洗浄後クロロホルム−エタノールから再結
晶すると黄色微細結晶が得られる。

融点２０１−２０３℃。元素分析 Ｃ１ｏＨ３ＢｒＮＯ
３Ｓ 計算値 Ｃ３９，７５、Ｈ２，６７、Ｈ４，６４実験値
Ｃ３９，７９、Ｈ２，４３、Ｈ４，５７上記で得うレ
タエチル ２−フロモー４−ヒドロキシ−チェノ〔２・
３−ｂ〕ピリジン−５−カルボキシレート１．５１を２
Ｎ水酸化力リウム１５ｍ１に加え、９０〜９５℃で４０
分加熱、冷後メタノール３０−を加え酢酸を加えて中和
すると２−ブロモ−４−ヒドロキシ−チェノ〔２・３−
ｂ）ピリジン−５−カルボン酸の結晶が析出する。

これを１取し、水洗抜水酸化カリウム水溶液−酢酸から
再結晶すると無色針状晶が得られる。

融点２６２−２６３℃。

元素分析 Ｃ３Ｈ４ＢｒＮＯ３Ｓ 計算値 Ｃ３５，０５、Ｈｌ、４７、Ｈ５，１１実験値
Ｃ３４，９２、Ｈｌ、２３、Ｈ４，９６上記で得られ
た２−フロモー４−ヒドロキシチェノ〔２・３−ｂ〕ピ
リジン−５−カルボン酸２７４１ｎ９の２Ｎ水酸化力リ
ウム３ｍｌ溶液をかき混ぜながらジエチル硫酸０．４ｄ
を加え、３時間かき混ぜる。

２Ｎ水酸化カリウム１．５就とジエチル硫酸０．４ｒｎ
ｌｌを追加し、さらに３時間後２Ｎ水酸化カリウム１．
５ＴｒＬｌとジエチル硫酸Ｑ、 ４ 就を追加、これを
２時間かき混ぜたのち１夜放置し、酢酸酸性とすると２
−ブロモ−７−ニチルー４・７−シヒドロー４−オキソ
−チェノ〔２・３−ｂ、）ピリジン−５−カルボン酸の
結晶が析出する。

Ｐ取、水洗後クロロホルム−エタノールから再結晶する
と無色板状晶が得られる。

融点２３９−２４０℃。元素分析 Ｃ１ｏＨ３Ｂ ｒ
Ｎｏ ３ Ｓ計算値 Ｃ３９，７５、Ｈ２，６７、Ｈ４
，６４実験値 Ｃ３９，８Ｌ Ｈ２，６７、Ｈ４，５３
本化合物を当モルの水酸化カリウム水溶液で処理後濃縮
しメタノールから再結晶するとカリウム塩（１／２水和
物）が得られる。

融点２６〇−２６２℃（分解）。

上記化合物はまた先にアルキル化後、加水分解しても製
造できる。

すなわち、エチル ２−ブロモ−４−ヒドロキシ−チェ
ノ〔２・３−ｂ）ピリジン−５−カルホキシレー）３０
２１ｎｆｌ、粉末状炭酸カリウム８３０■、ジメチルホ
ルムアミド６ｍＡの混合物を１００℃で１時間かき混ぜ
ながら加熱後ジエチル硫酸０１３ｒｒＬｌを加え、さら
に３０分加熱下にかき混ぜる。

不溶物を１去しＰ液を減圧下に濃縮乾固し、残留物をク
ロロホルムで抽出しクロロホルムを留去後残留物を酢酸
エチルから再結晶スルトエチル ２−ブロモ−７−ニチ
ルー４・７−シヒドロー４−オキソ−チェノ〔２・３−
ｂ〕ピリジン−５−カルボキシレートの結晶が得られる
。

無色針状晶。融点１５３−１５６℃。元素分析 Ｃｌ２
Ｈ１２ＢｒＮＯ３Ｓ 計算値 Ｃ４３，６５、Ｈ３，６６、Ｎ ４．２４実験
値 Ｃ４３，７１、Ｈ３，６９、Ｈ４，２９本化合物は
上記加水分解工程と同様２Ｎ水酸化カリウムで氷解処理
すると２−ブロモ−７−ニチルー４・７−シヒドロー４
−オキソ−チェノ〔２・３−ｂ〕ピリジン−５−カルボ
ン酸の結晶が得られる。

融点２３９−２４０℃。上記参考例２での出発原料２−
（２・２−ビスエトキシカルボニル）ビニルアミノ−５
−フロモチオフエン−３−カルボン酸は、たとえば次の
ようにして製造できる。

メチル ２−アミノチオフェン−３−カルホキシレー）
３１．４Ｐ、ジエチル エトキシメチレンマロネート４
３．２？の混合物を１１０〜１１５℃の油浴上で１．５
時間加熱するとジエチル（３−メトキシカルボニル−２
−チェニル）アミノメチレンマロネートの結晶が得られ
る。

エタノールから再結晶すると淡黄色針状晶が得られる。

融点１３７−１３８℃。

元素分析 Ｃ１４Ｈ１□Ｎ０３Ｓ 計算値 Ｃ５１，３６、Ｈ５，２３、Ｈ４，２８実験値
Ｃ５１，３０，Ｈ５，３６、Ｈ４，１７得られた化合
物１６．４Ｓ’を３Ｎエタノール性水酸化カリウム溶液
３００ＴＩＬｌに加え、沸とう水浴上で数分間かき混ぜ
ると原料は溶解し新たに結晶（カリウム塩）が析出する
。

さらに室温で２時間放置後結晶を１取し、希塩酸で中和
すると２−（２・２−ビスエトキシカルボニル）ビニル
アミノチオフェン−３−カルボン酸の結晶が得られる。

エタノールから再結晶すると淡黄色針状晶が得られる。

融点１６７−１６９℃。元素分析 Ｃ１３Ｈ１５ＮＯ６
Ｓ 計算値 Ｃ４９，８３、Ｈ４，８３、Ｈ４，４７実験値
Ｃ４９，７２、Ｈ４，９２、Ｈ４，２２ここに得られ
た２−（２・２−ビスエトキシカルボニル）ビニルアミ
ノチオフェン−３−カルボ７酸９．４ｆｔをクロロホル
ム９０ＴＬｌとピリジン１２−に溶解し、かき混ぜなが
ら臭素１．６ＴｒＬｌを少しずつ滴下する。

室温で４０分かき混ぜたのち減圧下溶媒を留去、残留物
に水を加え希塩酸で酸性にすると２−（２・２−ビスエ
トキシカルボニル）ビニルアミノ−５−７０モチオフエ
ン−３−カルボン酸の結晶が得られる。

メタノールから再結晶すると淡黄色針状晶が得られる。

融点１９１１９３℃。

元素分析 Ｃ１３Ｈ１４ＢｒＮＯ６Ｓ 計算値 Ｃ３９，８１、Ｈ３，６０、Ｎ３．５７実験値
Ｃ３９，４７、Ｈ３，２１、Ｎ３．２７ある〜）は上
記で得られたジエチル （３−メトキシカルボニル−２
−チェニル）アミノメチレンマロネート３．３２をクロ
ロホルム２０１７１Ａ’とピリジン４ｙｄに溶解し、か
き混ぜながら臭素０．６ｒｒＬｌを滴下する。

室温でさらに１５分かき混ぜたのち反応液を希塩酸、炭
酸水素ナトリウム水、水の順に洗浄しＮ ｅ ２ Ｓ
０４ で乾燥し溶媒を留去するとジエチル （５−７”
ロモー３−メトキシカルボニル−２−チェニル）アミノ
メチレンマロネートの結晶が得られる。

エタノールから再結晶すると淡黄色針状晶が得られる。

融点１２９−１３０′ｃ。元素分析 Ｃ１４Ｈ１６Ｂ
ｒ ＮＯ６Ｓ計算値 Ｃ４１，３９、Ｈ３，９７、Ｎ３
．４５実験値 Ｃ４１，３１、Ｈ３，７２、Ｎ３．１５
得られたジエチル （５−ブロモ−３−メトキシカルボ
ニル−２−チェニル）アミノメチレンマロネートを前記
と同様の条件で加水分解すると２−（２・２−ビスエト
キシカルボニル）ビニルアミノ−５−フロモチオフエン
−３−カルボン酸カ得られる。

融点１９１−１９３℃。水晶は前項で得られたものと同
一である。

以下前記参考例１および２記載の各相当する工程と同様
あるいはこれに準する方法、操作により次の参考例を実
施できる。

参考例 ３ ２−（２・２−ビスエトキシカルボニル）ビニルアミノ
−５−クロロチオフェン−３−カルボン酸をポＩＪ Ｉ
Ｊン酸エチルエステルで閉環処理するとエチル ２−ク
ロロ−４−ヒドロキシ−チェノ〔２・３−ｂ）ピリジン
−５−カルボキシレートが得られる。

融点１８８−１９０℃。ここに得られた化合物を２Ｎ水
酸化カリウムで加水分解すると２−クロロ−４−ヒドロ
キシ−チェノ〔２・３−ｂ）ピリジン−５−カルボン酸
が得られる。

融点２５５−２５６℃。ライで、この化合物をジエチル
硫酸でエチル化するト２−クロロ−７−ニチルー４・７
−シヒドロー４−オキソ−チェノ〔２・３−ｂ）ピリジ
ン−５−カルボン酸が得られる。

融点２４４−２４５℃。

本反応の原料２−（２・２−ビスエトキシカルボニル）
ビニルアミノ−５−クロロチオフェン−３−カルボン酸
＆Ｌ たとえば次のようにして製造できる。

メチル ２−アセトアミドチオフェン−３−カルボキシ
レート４グのクロロホルム８０ｍ１１ピリジン１２ＴＬ
ｌ溶液にかき混ぜながら１０％（Ｗ／Ｖ）塩素／四塩化
炭素溶液２０ＴｆＬｌを滴下、さらに３０分間かき混ぜ
る。

これを炭酸水素ナトリウム水溶液ついで水で洗浄、溶媒
を留去、残留物をメタノールから再結晶するとメチル
２−アセトアミド−５−クロロチオフェン−３−カルボ
キシレートの結晶が得られる。

無色針状晶。融点１１０−１１０．５℃。

メチル ２−アセトアミド−５−クロロチオフェン−３
−カルボキシレート９．５ｙ、メタノール４００ｍ１、
メタンスルホン酸８１の混合溶液を３時間加熱還流後濃
縮、濃縮液に炭酸水素ナトリウム溶液を加え析出結晶を
ｒ取、水洗後インフロパノールから再結晶するとメチル
２−アミノ−５−クロロチオフェン−３−カルボキシ
レートが無色結晶として得られる。

融点９９−１０１℃。ここに得られた化合物をジエチル
エトキシメチレンマロネートと反応させるとジエチル
（５−クロロ−３−メトキシカルボニル−２−チェニル
）アミノメチレンマロネートが得られる。

融点８９．５−９０．５℃。

ここに得られた化合物を３Ｎエタノール性水酸化カリウ
ム溶液を用い加水分解すると２−（２・２−ビスエトキ
シカルボニル）ビニルアミノ−５−クロロチオフェン−
３−カルボン酸が得られる。

融点１８４−１８６℃。

参考例 ４ ５−フロモー２−（２・２−ビスエトキシカルボニル）
ビニルアミノ−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸
をポリリン酸エチルエステルで閉環スるとエチル ２−
ブロモ−４−ヒドロキシ−３−メチル−チェノ〔２・３
−ｂ〕ピリジン−５−カルボキシレートが得られる。

融点２０６−２０８°ｃ。

ここに得られた化合物を水酸化カリウムで加水分解する
と２−ブロモ−４−ヒドロキシ−３−メチル−チェノ〔
２・１Ｌｂ）ピリジン−５−カルボン酸が得られる。

融点２５３−２５４℃０次いで、ここに得られる化合物
をジエチル硫酸チェチル化スルと２−ブロモ−７−ニチ
ルー４・７−シヒドロー３−メチル−４−オキソニチェ
ノ〔２・３−ｂ〕ピリジン−５−カルボン酸が得られる
。

融点２４５−２４６℃。本反応の出発原料である５−ブ
ロモ−２−（２２−ビスエトキシカルボニル）ビニルア
ミノ−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸は、たと
えば次のようにして製造できる。

メチル ２−アミノ−４−メチルチオフェン３−カルボ
キシレートとジエチルエトキシメチレンマロネートを反
応させるとジエチル （３−メトキシカルボニル−４−
メチル−２−チェニル）アミノメチレンマロネートの結
晶が得られる。

融点１０５．５−１０６℃。

ここに得られた化合物を３Ｎエタノール性水酸化カリウ
ムで加水分解すると２−（２・２−ビスエトキシカルボ
ニル）ビニルアミノ−４−メチルチオフェン−３−カル
ボン酸の結晶が得られる。

融点１８０−１８５℃。

ここに得られた化合物をクロロホルム−ピリジン中臭素
で臭素化すると５−フロモー２−（２・２−ビスエトキ
シカルボニル）ビニルアミノ−４−メチルチオフェン−
３−カルボン酸の結晶が得られる。

融点１８８−１９０℃。参考例 ５ ２−（２・２−ビスエトキシカルボニル）ビニルアミノ
−５−ヨードチオフェン−３−カルボン酸をポＩＪ Ｉ
Ｊン酸エチルエステルで閉環するとエチル ４−ヒドロ
キシ−２−ヨード−チェノ〔２・３−ｂ〕ピリジン−５
−カルボキシレートが得られる。

クロロホルム−酢酸エチルから再結晶すると黄色プリズ
ム晶が得られる。

融点２１０２１２℃。

ここに得られた化合物を水酸化カリウム水溶液で加水分
解すると４−ヒドロキシ−２−ヨード−チェノ〔２・３
−ｂ）ピリジン−５−カルボン酸が得られる。

融点２４９−２５０℃。ここに得られた化合物３２１■
を用い、ジエチル硫酸でエチル化すると７−ニチルー４
・７−シヒドロー２−ヨード−４−オキソ−チェノ〔２
・３−ｂ）ピリジン−５−カルボン酸が得られる。

クロロホルムメタノールから再結晶すると淡黄色プリズ
ム晶が得られる。

融点２４３−２４５℃。元素分析 ＣＩｏＨ８■Ｎ０３
Ｓ 計算値 Ｃ３４，４０，Ｈ２，３１、Ｎ４．０１実験値
Ｃ３４，５２、Ｈ２，２１、Ｎ４．０７本反応の出発
原料である２−（２・２−ビスエトキシカルボニル）ビ
ニルアミノ−５−ヨードチオフェン−３−カルボン酸は
、たとえば次のよう＊＊にして製造できる。

ジエチル （３−メトキシカルボニル−２−チェニル）
アミノメチレンマロネート９．８？、ヨウ素７．８り、
酸化第二水銀７．４Ｐ１クロロホルム１２０ｒＩＬｌの
混合物を室温で激しくかき混ぜる。

１時間後濾過し、Ｐ液は５％ヨウ化カリウム水溶液つい
で水で洗浄し濃縮、残留結晶をメタノールから再結晶す
るとジエチル （５−ヨード−３−メトキシカルボニル
−２−チェニル）アミノメチレンマロネートが黄色針状
晶として得られる。

融点１６３−１６４°ｃ。

ここに得られた化合物を３Ｎ−エタノール性水酸化カリ
ウム液で加水分解すると２−（２・２ビスエトキシカル
ボニル）ビニルアミノ−５−ヨードチオフェン−３−カ
ルボン酸が得られる。

融点１９５−１９７℃。

実験例 １ ■、試験方法 液体培地（ハート・インフュージョン）稀釈法により、
次表に示される各種の魚病菌に対する前記、化合物■〜
Ｖの最小発育阻止濃度（γ／１１１１）をしらべた。

なお、対照薬剤としては一般に有効な薬剤として使用さ
れるナリジクス酸を用いた。

２、試験結果 試験の結果は次表に示すとおりであり、本発明のすぐれ
ていることが明白に認められた。

すなわち、本化学物質を添加する場合、対照薬剤たるナ
リジクス酸と同等以上のすぐれた抗菌力を示し、十分、
実用性のあることが認められた。

実験例 ２ ■、試験方法 ウナギの鰭赤病やコイ科魚類の立鱗病の原因菌テアルエ
ロモナス・リクエファシエンス（Ｙ−６２株）を和会（
約３５１、体重）の背部筋肉内に湿菌量として１尾当た
り０．２■あて接種し、菌接種後、直ちに次表に示され
る各薬剤について、表示の投与量で強制経口投与（金属
ゾンデによる強制投与、１回のみ）または薬浴処理（液
温２５℃において８時間浸漬する。

）し、飼育水（２５℃程度）中で８日間観察した。

なお、対照区として、薬剤を全く投与しないもの＊およ
びナリジクス酸やクロラムフェニコール、テトラサイク
リンにつき、それぞれ同様に投与または薬浴処理した場
合を比較した。

２、試験結果 試験の結果は次表に示すとおりであり、本発明のすぐれ
ていることが明白に認められた。

すなわち、本化学物質はクロラムフェニコールやテトラ
サイクリンよりも一般とすぐれた効果が認められ、また
、ナリジクス酸と同等もしくはそれ以上の有効性を示し
十分実用性のあることが認められた。

実験例 ３（副作用についての試験） ■、試験方法 和金およびウナギに対して次表に示すごとく各薬剤を長
期間餌に混合して与え、その副作用について観照した。

なお、対照区として、薬剤を全（投与しないものおよび
ナリジクス酸を同様に投与したものについて比較した。

なお、テストの際の水温は２５〜２７℃であり、また魚
体重量１ｋｇ当たり１日量として各表示の■に相当する
薬剤を餌に混合して投与した。

＊＊ また、餌料として、和金の場合は北洋魚粉７０部（重量
）、α−殿粉スターチ１０部、小麦粉２０部の割合より
なる飼料を、また、ウナギの場合は市販のウナギ用飼料
を、使用した。

２、試験結果 試験の結果は次表に示すとおりであり、本発明のすぐれ
ていることが明白に認められた。

すなわち、本化学物質は従来使用されているナリジクス
酸に比較して、副作用がきわめて少なく安全性が著しく
高いことが認められた。

実施例 １ ７−ニチルー４・７−シヒドロー２−メチル−４−オキ
ソ−チェノ〔２・３−ｂ〕ピリジン−５−カルボン酸（
化合物■）の乳糖による２０倍散剤。

本薬剤をビブリオ病が発生して斃死するものが１日に１
５０〜２００尾程度認めら程度アユの群（平均体重、２
０グ程度で６０００尾程度０群）に１日量として３６グ
あて４日間、餌に均一に混和して投与したところ、３日
後には斃死するものが十数層に減少し、また５日後には
斃死をほとんど認めなくなった。

また、化合物Ｉの代りに７−ニチルー４・７−シヒドロ
ー２−ヨード−４−オキソ−チェノ〔２・３−ｂ）ピリ
ジン−５−カルボン酸（化学物質■）を使用し、同様に
投与したところ同様なすぐれた効果が認められた。

実施例 ２ ２−クロロ−７−ニチルー４・７−ジヒドロ４−オキソ
−チェノ〔２・３−ｂ〕ピリジン−５−カルボン酸（化
合物ｍ）２Ｐを市販の養鱒用配合飼料粉末２ｋｇに均一
に混和したのち、飼料の半量程度の水を加えて練合し、
チョッパーを用いて成形した軟質成形飼料。

せっそう病が発生しているアマゴの飼育池（収容層数３
５００程度度、平均体重２８２程度、日間斃死数２２〜
３６尾）に前記成形飼料の全量を１日量として５日間続
けて投与したところ、投薬開始３日後より斃死数は２〜
３尾程度に減少し、７日後より斃死は全く認めなくなっ
た。

また、前記化合物■の代りに２−ブロモ−７−ニチルー
４・７−シヒドロー４−オキソ−チェノ〔２・３−ｂ）
ピリジン−５−カルボン酸（化合物■）を使用し、同様
に投与したところ同様なすぐれた効果が認められた。

実施例 ３ ２−−ｆロモー７−エチル−４・７−シヒドロー３−メ
チル−４−オキソ−チェノ〔２・３−ｂ〕ピリジン−５
−カルボン酸（化合物■）を１重量％の割合でジメチル
スルホキシドに溶解した液剤。

鰭赤病の発生しているクロコウナギの飼育水槽（収容屋
敷５０００程度度、平均体重３ｙ程度、日間斃死数４０
尾程度）の飼育水１トン当たりに前記液剤を１００′？
の割合で添加し均一に混和して８時間エアーレーション
をして放置したのち、流水とした。

この薬浴処理の翌日には斃死数が半減し、２日後よりは
ほとんど斃死が認められなくなった。

また、前記化合物■の代りに、化合物Ｉ〜■およびＶを
使用し、同様に薬浴処理上たところ同様なすぐれた効果
が認められた。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １一般式 〔式中、Ｒ１はハロゲンまたは低級アルキル基を、Ｒ２
   は水素または低級アルキル基を、Ｒ３は低級アルキル基
   を表わす。 〕で示されるチェノ〔２・３−ｂ〕ピリジン−５−カル
   ボン酸誘導体を含有してなる水産動物の細菌性疾病の予
   防・治療剤。