JPS5830032B2 - ビフイダス菌の増殖剤 - Google Patents
ビフイダス菌の増殖剤Info
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- JPS5830032B2 JPS5830032B2 JP56022620A JP2262081A JPS5830032B2 JP S5830032 B2 JPS5830032 B2 JP S5830032B2 JP 56022620 A JP56022620 A JP 56022620A JP 2262081 A JP2262081 A JP 2262081A JP S5830032 B2 JPS5830032 B2 JP S5830032B2
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- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
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Description
【発明の詳細な説明】
本発明はビフィズス菌の増殖剤に関する。
ここで謂う”ビフィズス菌″はビフィドバクテリウム属
（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）に属する細菌の総
称であって、ヒトの腸管内に生育する有用な細菌として
知られている。
（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）に属する細菌の総
称であって、ヒトの腸管内に生育する有用な細菌として
知られている。
すなわち、ビフィズス菌は腸内感染を防ぎ、アミン、ア
ンモニアのごとき有害物質を生産せず且つ栄養を付与す
る等のヒトの健康維持に重要な役割を果すことが種々報
告されている。
ンモニアのごとき有害物質を生産せず且つ栄養を付与す
る等のヒトの健康維持に重要な役割を果すことが種々報
告されている。
特に、人工乳幼児においては母乳幼児に比較して腸管内
のビフィズス菌が少ないため罹患率や死亡率が高くなる
といわれており、ビフィズス菌の腸管内における増殖が
強く要望されるようになった。
のビフィズス菌が少ないため罹患率や死亡率が高くなる
といわれており、ビフィズス菌の腸管内における増殖が
強く要望されるようになった。
一方、上述したごときビフィズス菌の有用性に鑑み、近
年、ビフィズス菌自体を薬剤として体内に投与すること
が提案され、各種のビフィズス菌含有製品も市販される
に至っている。
年、ビフィズス菌自体を薬剤として体内に投与すること
が提案され、各種のビフィズス菌含有製品も市販される
に至っている。
しかしながら、一般にビフィズス菌は不安定であって長
期保存中に死滅することが多く、したがって、上記製品
中に一定の生菌数を維持することが困難とされている。
期保存中に死滅することが多く、したがって、上記製品
中に一定の生菌数を維持することが困難とされている。
本発明者は上述したごとき現状に鑑み、ヒトの腸管内に
おけるビフィズス菌の増殖について検討した結果、シク
ロデキストリンをヒトに投与すると腸管内における他の
細菌類に影響を与えることなくビフィズス菌の増殖のみ
が極めて顕著になるこ゛との知見を得て本発明をなすに
至った。
おけるビフィズス菌の増殖について検討した結果、シク
ロデキストリンをヒトに投与すると腸管内における他の
細菌類に影響を与えることなくビフィズス菌の増殖のみ
が極めて顕著になるこ゛との知見を得て本発明をなすに
至った。
すなわち、本発明はビフィズス菌を外部から体内へ与え
るのではなく、体内においてビフィズス菌を増殖させる
ことを目的とするものである。
るのではなく、体内においてビフィズス菌を増殖させる
ことを目的とするものである。
以下本発明の詳細な説明する。
本発明に係るビフィズス菌の増殖剤はシクロデキストリ
ンを有効成分とすることを特徴とする。
ンを有効成分とすることを特徴とする。
本発明でビフィズス菌の増殖剤の有効成分として用いる
シクロデキストリンは公知物質であってαβ及びγ型を
包含する。
シクロデキストリンは公知物質であってαβ及びγ型を
包含する。
それらの理化学的性質を参考として示すと下記表１のと
おりである。
おりである。
次にシクロデキストリンの体内への投与適性について説
明する。
明する。
（１）急性毒性
マウス並びにラットの試験動物にシクロデキストリン（
α、β並びにγ）をそれぞれ投与してそのＬＤ、ｏを測
定した結果下記表２に示す。
α、β並びにγ）をそれぞれ投与してそのＬＤ、ｏを測
定した結果下記表２に示す。
上記表にみられるごとく、シクロデキストリンはα、β
及びγ型のいずれも同称なＬＤ、ｏ値を示し、急性毒性
がないことが確認された。
及びγ型のいずれも同称なＬＤ、ｏ値を示し、急性毒性
がないことが確認された。
（２）抗菌活性
シクロデキストリンの抗菌活性を日本化学療法学会標準
法に準拠して寒天平板希釈法により、測定した結果は下
記のとおりである。
法に準拠して寒天平板希釈法により、測定した結果は下
記のとおりである。
試験方法
イ）好気性菌に対する抗菌活性
上記３菌株を増菌用培地としてのトリプトソーヤブイヨ
ン培地にそれぞれ接種し、３７°Ｃで１８時間培養した
後、培養物の濃度を１０３／ｍｌに調整して供試菌液と
した。
ン培地にそれぞれ接種し、３７°Ｃで１８時間培養した
後、培養物の濃度を１０３／ｍｌに調整して供試菌液と
した。
シクロデキストリンを４００ ｆｉｇ７ｍｌ、 ８００
μｇ／ｍｌ並びに１６００ｄ／ｙｄの各濃度の溶液に調
整したものを薬剤感受性測定用培地としてのＨｅａｒｔ
Ｉｎｆｕｓｉｏｎ Ａｇａｒ培地に対してそれぞれ
１／９量加え、よく混合したものをシャーレに分注して
平板とした。
μｇ／ｍｌ並びに１６００ｄ／ｙｄの各濃度の溶液に調
整したものを薬剤感受性測定用培地としてのＨｅａｒｔ
Ｉｎｆｕｓｉｏｎ Ａｇａｒ培地に対してそれぞれ
１／９量加え、よく混合したものをシャーレに分注して
平板とした。
上記供試菌液を各平板に白金耳にて接種し、平板に２σ
程画線塗沫した後、３７℃で１８時間培養を行ない、完
全に菌の発育が阻止された濃度をもって最小発育阻止濃
度とした。
程画線塗沫した後、３７℃で１８時間培養を行ない、完
全に菌の発育が阻止された濃度をもって最小発育阻止濃
度とした。
口）嫌気性菌に対する抗菌活性
供試菌
増菌用培地としてＧＡＭブイヨン培地を、感受性測定用
培地としてＧＡＭ寒天培地をそれぞれ使用し、ガスパッ
ク法（ＣＯ２５φ）により３７℃で２４時間培養する以
外は好気性菌の場合と同様にして測定した。
培地としてＧＡＭ寒天培地をそれぞれ使用し、ガスパッ
ク法（ＣＯ２５φ）により３７℃で２４時間培養する以
外は好気性菌の場合と同様にして測定した。
結果は下記表３のとおりである。
上記表にみられるごとく、シクロデキストリンは供試菌
に対する最小発育阻止濃度が１６００μｇ／−以上であ
って、抗菌活性が無いことが確認される。
に対する最小発育阻止濃度が１６００μｇ／−以上であ
って、抗菌活性が無いことが確認される。
（３）突然変異誘起性
”微生物を用いる変異原性試験ガイドブック″（労働省
安全衛生部化学物質調査課編）に準拠して下記のように
して測定した。
安全衛生部化学物質調査課編）に準拠して下記のように
して測定した。
エームス等によって分離されたＳａｌｍｏｎｅｌｌａｔ
ｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ ＴＡ９８及びＳａｌｍｏｎｅｌ
ｌａｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ ＴＡｌｏｏ （国立
遺伝学研究所より譲受）を供試菌として用い、この各画
の菌液０．１−、シクロデキストリン溶液０．０５ｒｒ
１１、及び希釈液（リン酸緩衝液）０．５ｍｌを混合し
て得られる混合液を３７℃で２０分間インキュベートし
た後、最小培地に重層して３７℃で４８時間培養し、培
養物中の復帰変異コロニー数を計数した。
ｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ ＴＡ９８及びＳａｌｍｏｎｅｌ
ｌａｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ ＴＡｌｏｏ （国立
遺伝学研究所より譲受）を供試菌として用い、この各画
の菌液０．１−、シクロデキストリン溶液０．０５ｒｒ
１１、及び希釈液（リン酸緩衝液）０．５ｍｌを混合し
て得られる混合液を３７℃で２０分間インキュベートし
た後、最小培地に重層して３７℃で４８時間培養し、培
養物中の復帰変異コロニー数を計数した。
なお、シクロデキストリンはα、β及びγ−型をそれぞ
れ最高５０００μｇ／プレート添加した。
れ最高５０００μｇ／プレート添加した。
その結果シクロデキストリンを添加したものはいずれも
対照（シクロデキストリンの代りに水を添加）に比し復
帰変異コロニーの数の増力口はみられなかった。
対照（シクロデキストリンの代りに水を添加）に比し復
帰変異コロニーの数の増力口はみられなかった。
上記（１）〜（３）の測定結果から明らかなごとく、シ
クロデキストリンは体内への投与適性を有することが認
め得る。
クロデキストリンは体内への投与適性を有することが認
め得る。
本発明におけるシクロデキストリンのビフィズス菌に対
する増殖能は下記のごとき測定結果から確認し得る。
する増殖能は下記のごとき測定結果から確認し得る。
試験方法
シクロデキストリンを試験動物用マウスに１日当り２ｇ
１ｋｇの投与量で２週間連日経口投与し、投与後７白目
にマウスの糞便を採取し、糞便中のビフィズス菌、大腸
菌、乳酸桿菌及びバクテロイデス菌の生菌数を常法にし
たがって測定した。
１ｋｇの投与量で２週間連日経口投与し、投与後７白目
にマウスの糞便を採取し、糞便中のビフィズス菌、大腸
菌、乳酸桿菌及びバクテロイデス菌の生菌数を常法にし
たがって測定した。
その結果、シクロデキストリンはビフィズス菌のみを特
異的に生体内で９０倍以上も増殖することが認められた
。
異的に生体内で９０倍以上も増殖することが認められた
。
すなわち、本発明の増殖剤を生体内に投与すると腸管内
の菌叢を乱すことなく、ビフィズス菌のみを増殖するこ
とが可能となる。
の菌叢を乱すことなく、ビフィズス菌のみを増殖するこ
とが可能となる。
したがって、本発明の増殖剤はヒト及び動物の腸管系疾
患の症状である下痢、腸カタル、消化不良及び便秘の改
善効果をもたらすものであり、又抗肝性脳症剤としても
有用である。
患の症状である下痢、腸カタル、消化不良及び便秘の改
善効果をもたらすものであり、又抗肝性脳症剤としても
有用である。
更に、本発明に係るシクロデキストリンは食品、飲物、
嗜好品に添加することにより、生体内のビフィズス菌の
増殖を図ることも可能である。
嗜好品に添加することにより、生体内のビフィズス菌の
増殖を図ることも可能である。
シクロデキストリンをビフィズス菌の増殖剤として適用
するには、それ単独で又は医薬上許容し得る希釈剤或は
他の薬剤との混合物として用いるとよく、医薬に準じた
投薬単位形態で提供し得る。
するには、それ単独で又は医薬上許容し得る希釈剤或は
他の薬剤との混合物として用いるとよく、医薬に準じた
投薬単位形態で提供し得る。
例えばシクロデキストリンの有効量を含有する散剤、顆
粒、錠剤、糖衣錠、カプセル、懸濁剤、液剤、乳剤、ア
ンプル等の形態をとり得る。
粒、錠剤、糖衣錠、カプセル、懸濁剤、液剤、乳剤、ア
ンプル等の形態をとり得る。
なお、希釈剤としては固体、液体、半固体、あるいは摂
取し得るカプセルでもよく、例えば賦形剤、増量剤、結
合剤、湿潤化剤、潮解剤、表面活性剤、滑沢剤、分散剤
、緩衝剤、香料、保存料、溶解補助剤、溶剤などである
。
取し得るカプセルでもよく、例えば賦形剤、増量剤、結
合剤、湿潤化剤、潮解剤、表面活性剤、滑沢剤、分散剤
、緩衝剤、香料、保存料、溶解補助剤、溶剤などである
。
さらにこれらの１種または１種以上を混合して使用し得
る。
る。
本発明の増殖剤は活性成分としてのシクロデキストリン
を通常０．０１乃至１００重量φ含有しており、経口的
投与又は非経口的投与で適用されるが経口的投与が好ま
しい。
を通常０．０１乃至１００重量φ含有しており、経口的
投与又は非経口的投与で適用されるが経口的投与が好ま
しい。
又本発明の増殖剤の投与量は対象がヒトか動物により、
また、年令、症状、個人差により異なるが、一般にヒト
を対象とする経口的投与の場合はシクロデキストリンと
して１日当り０．０１〜１ｇ／体重−１好ましくは０．
１〜０．５ｇ／体重−を１〜４回に分けて投与するとよ
い。
また、年令、症状、個人差により異なるが、一般にヒト
を対象とする経口的投与の場合はシクロデキストリンと
して１日当り０．０１〜１ｇ／体重−１好ましくは０．
１〜０．５ｇ／体重−を１〜４回に分けて投与するとよ
い。
以下に実施例を例示して本発明の効果を具体的に説明す
る。
る。
実施例 １
α−並びにγ−シクロデキストリンの２０多濃度水溶液
及びβ−シクロデキストリンの２０℃濃度懸濁液をそれ
ぞれ調製した。
及びβ−シクロデキストリンの２０℃濃度懸濁液をそれ
ぞれ調製した。
比較としてデキストリンの２０饅濃度水溶液を併せて調
製した。
製した。
上記の合剤をＣ３Ｈ／Ｈｅ系雌マウス（８週令）５匹を
１群とするもの（計４群）に固形物として１日当り２．
０ｇ／に９になるごとくそれぞれ２週間連日経口投与し
た。
１群とするもの（計４群）に固形物として１日当り２．
０ｇ／に９になるごとくそれぞれ２週間連日経口投与し
た。
上記投与前並びに投与後７日目に各マウスの糞便を採取
して、該糞便を１００倍量の嫌気性稀釈液（リン酸緩衝
液）で稀釈して磨砕し、その各０、１ ｍｌを下記表４
に示す各被測電画の培地に塗布し、３７℃で１〜５日間
好気培養並びに嫌気培養（嫌気性グローブボックス法）
を行なって、ビフィズス菌、大腸菌、乳酸桿菌及びバク
テロイデス菌の各菌数を測定した。
して、該糞便を１００倍量の嫌気性稀釈液（リン酸緩衝
液）で稀釈して磨砕し、その各０、１ ｍｌを下記表４
に示す各被測電画の培地に塗布し、３７℃で１〜５日間
好気培養並びに嫌気培養（嫌気性グローブボックス法）
を行なって、ビフィズス菌、大腸菌、乳酸桿菌及びバク
テロイデス菌の各菌数を測定した。
その結果は下記表５〜表８に示すとおりである。
なお、各表中の数値はマウス５匹の平均値で示す。
上記表５〜７にみられるごとくシクロデキストリンは生
体内でビフィズス菌のみを特異的に増殖（９０倍以上）
させることが認められる。
体内でビフィズス菌のみを特異的に増殖（９０倍以上）
させることが認められる。
これに対し表８にみられるごとくデキストリンではビフ
ィズス菌の増殖活性は全く認められない。
ィズス菌の増殖活性は全く認められない。
又、シクロデキストリンの各投与群では投与前に比し糞
便の外観に変化はみられなかった。
便の外観に変化はみられなかった。
実施例 ２
本例は本発明に係る増殖剤の製剤化を例示したものであ
る。
る。
シクロデキストリン １０重量部重質酸化マ
グネシウム １５／／／／乳 糖
７５〃 〃を均一に混合して粉末状（又
は細粒状）の散剤を調製した。
グネシウム １５／／／／乳 糖
７５〃 〃を均一に混合して粉末状（又
は細粒状）の散剤を調製した。
更にこの散剤をカプセル容器に入れてカプセル剤を調製
した。
した。
実施例 ３
実施例２に記載の手順に従って調製したβ−シクロデキ
ストリンを有効成分とするカプセル剤を健康成人３人に
β−シクロデキスｌ−ＩＪンの投与量が１日当り１０ｇ
になるごとく２週間連日投与した後、各人の糞便を彩取
し、実施例１に記載の手順に準拠して糞便中のビフィズ
ス菌及びその他の菌の菌数を測定し、上記カプセル剤の
投与前の糞便中の菌数と対比した。
ストリンを有効成分とするカプセル剤を健康成人３人に
β−シクロデキスｌ−ＩＪンの投与量が１日当り１０ｇ
になるごとく２週間連日投与した後、各人の糞便を彩取
し、実施例１に記載の手順に準拠して糞便中のビフィズ
ス菌及びその他の菌の菌数を測定し、上記カプセル剤の
投与前の糞便中の菌数と対比した。
その結果、ビフィズス菌の菌数は投与後約ｌＯ〜１００
倍に増加したことが認められた。
倍に増加したことが認められた。
なお、投与前におけるビフィズス菌の菌数が元来多いヒ
トでは大きな増殖はみられなかった。
トでは大きな増殖はみられなかった。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ シクロデキストリンを有効成分とするビフィズス菌
の増殖剤。 ２ シクロデキストリンはβ−シクロデキストリンであ
る特許請求の範囲第１項記載の増殖剤。
Priority Applications (9)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP56022620A JPS5830032B2 (ja) | 1981-02-18 | 1981-02-18 | ビフイダス菌の増殖剤 |
| CA000396000A CA1179265A (en) | 1981-02-18 | 1982-02-10 | Bifidobacteria-proliferating agent |
| US06/347,726 US4451457A (en) | 1981-02-18 | 1982-02-10 | Cyclodextrin and method for promoting the proliferation of intestinal bifidobacteria |
| DE3205018A DE3205018C2 (de) | 1981-02-18 | 1982-02-12 | Verwendung von Cyclodextrin als Bifidobakterien vermehrendes Mittel |
| AU80569/82A AU556379B2 (en) | 1981-02-18 | 1982-02-16 | Cyclodextrin bifidobacteria proliferating agent |
| IT19704/82A IT1150191B (it) | 1981-02-18 | 1982-02-17 | Agente di proliferazione per bifidobatteri |
| GB8204627A GB2092890B (en) | 1981-02-18 | 1982-02-17 | Cyclodextrin compositions |
| FR8202637A FR2499854B1 (fr) | 1981-02-18 | 1982-02-17 | Medicament contenant de la cyclodextrine utile notamment pour provoquer la proliferation des bifidobacteries intestinales |
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