JPS5828868B2 - Method for producing caerulein and its analogs - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はセルレインおよびその類縁体の製造法に関する
。DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION The present invention relates to a method for producing caerulein and its analogs.

さらに詳しくは、本発明は、一般式（１）〔式中、Ｘｌ
はＨまたはア□）基の保護基、Ｙｌ、Ｙ２はカルボキシ
ル基の保護基であり、両者は、同一でも異っていてもよ
く、Ｙ３はＮＨ２またはカルボキシル基の保護基、ｚｌ
はＨまたは側鎖水酸基の保護基または−５Ｏ３Ｘ（Ｘは
に、 Ｎａなとのアルカリ金属または、トリエチルアミ
ン、シクロヘキシルアミンなどの塩基またはＨを意味す
る）を示し、Ｚ２はＨまたは側鎖水酸基の保護基を示し
、Ｐｙｒ、、Ｇｉｎ、、Ａｓｐ、 Ｔｙｒ、 Ｔｈｒ、
、Ｇｌｙ、 Ｔｒｐ。More specifically, the present invention relates to general formula (1) [wherein Xl
is a protecting group for H or a□) group, Yl and Y2 are protecting groups for a carboxyl group, and both may be the same or different, Y3 is a protecting group for NH2 or a carboxyl group, zl
represents H or a protecting group for a side chain hydroxyl group, or -5O3X (X means an alkali metal such as Na, a base such as triethylamine or cyclohexylamine, or H), and Z2 represents H or a protecting group for a side chain hydroxyl group. Indicates a group, Pyr, , Gin, , Asp, Tyr, Thr,
, Gly, Trp.

Ｍｅ ｔおよびＰｈｅはそれぞれピログルタミン酸、グ
ルタ□ン、アスパラギン酸、チロシン、スレオニン、グ
リシン、トリプトファン、メチオニンおよびンエニルア
ラニン残基を示す）で示されるデカペプチド誘導体また
はその塩を脱保護することを特徴とするセルレインおよ
びその類縁体の製造法に関する。Met and Phe represent pyroglutamic acid, glutane, aspartic acid, tyrosine, threonine, glycine, tryptophan, methionine and enylalanine residues, respectively) or their salts are deprotected. The present invention relates to a method for producing caerulein and its analogs.

セルレイン東生理活性ペプチドとして知られており、一
般名 セルレチド・ジエチルアミン〔化学名：Ｌ−ピロ
グルタミル−Ｌ−グルタミニルーＬ−７スパルチルー〇
−スルホ−Ｌ−チロシル−Ｌ−スレオニル−グリシル−
Ｌ−トリクトファニルーＬ−メチオニル−Ｌ−７スパル
チルーＬ−フェニルアラニンア□ド・トリジエチルアミ
ン塩・三水和物（Ｐｙｒ −Ｇｉｎ −Ａｓｐ −Ｔｙ
ｒ −Ｔｈｒ −Ｇｌｙ −Ｔｒｐ −Ｍｅｔ −Ａｓ
ｐ −Ｐｈｅ −ＮＩ（２・〔（Ｃ２Ｈ５）２ＮＨ〕３
・３ Ｈ２０） ）の慣用名であり、※※胆道、膵の機
能検査薬などとして有用な物質である。Cerulein East is known as a physiologically active peptide, and its common name is ceruletide diethylamine [chemical name: L-pyroglutamyl-L-glutaminyl-L-7 spalty--Sulfo-L-tyrosyl-L-threonyl-glycyl-
L-trictophanyl-L-methionyl-L-7 spartyl-L-phenylalanine ado tridiethylamine salt trihydrate (Pyr-Gin-Asp-Ty
r-Thr-Gly-Trp-Met-As
p -Phe -NI(2・[(C2H5)2NH]3
・3H20) ) is a common name for ※※It is a useful substance as a biliary tract and pancreatic function test drug.

従来、該セルレインの製法としては、式 で示されるテトラペプチドアジドを、 式 （式中、Ａｃは、１〜４個の炭素原子を有する脂肪酸の
アシル残基を示す）で示されるヘキサペグチドと縮合さ
せて、式 で示されるデカペプチドを得、 これを無水ピリジ ン 無水硫酸複合体で、低温で処理し、 式 を得、これを温和な条件下でアルカリ加水分解すること
によってセルレインを得る方法が知られている（特公昭
４４−２５０７９号公報）。Conventionally, the method for producing caerulein involves condensing a tetrapeptide azide represented by the formula with a hexapegtide represented by the formula (wherein Ac represents an acyl residue of a fatty acid having 1 to 4 carbon atoms). A known method is to obtain the decapeptide shown by the formula, treat this with an anhydrous pyridine sulfuric anhydride complex at low temperature to obtain the formula, and then obtain caerulein by alkaline hydrolysis under mild conditions. (Special Publication No. 44-25079).

この従来法においては、ラセミ化、副反応の生起、目的
物の精製が困難などの難点があり、さらにすぐれたセル
レインの製造法の開発が望まれている。This conventional method has drawbacks such as racemization, occurrence of side reactions, and difficulty in purifying the target product, and there is a desire to develop an even better method for producing caerulein.

本発明者らは、種々デカペプチド誘導体について研究し
た結果、例えばセルレインの合成に関してはたとえば、
前記一般式（Ｉ）においてＸ、 ＝／＜ンジルオキシカ
ルボニル基（ｚ ）、Ｙｔ ＝Ｙ２−ベンジル基（Ｂｚ
ｌ）、Ｙ３−ＮＨ２、Ｚ１＝Ｓ０３Ｈ。As a result of research on various decapeptide derivatives, the present inventors found that, for example, regarding the synthesis of caerulein,
In the general formula (I), X, =/<ndyloxycarbonyl group (z), Yt = Y2-benzyl group (Bz
l), Y3-NH2, Z1=S03H.

Ｚ２ ＝ Ｂｚｌであるデカペプチド誘導体Ｚ −Ｐｙ
ｒ −ペプチド誘導体Ａ〕を還元することによって、脱
保護する場合には従来法におけるラセミ化副反応の生起
、などの問題が改良され、かつ容易にセルレインの精製
を行うことができることを見い出した。The decapeptide derivative Z-Py where Z2 = Bzl
It has been found that by reducing r-peptide derivative A], problems such as the occurrence of racemization side reactions in conventional methods can be overcome when deprotecting, and caerulein can be easily purified.

さらに、本発明者らは、Ｚ −Ｐｙｒ −Ｇｉｎ −Ａ
ｓｐ −Ｐｈｅ−ＯＢｚｌを脱保護することによって、
式 で示されるセルレインの類縁体が得られることを見い出
した。Furthermore, we have determined that Z -Pyr -Gin -A
By deprotecting sp -Phe-OBzl,
It has been found that an analogue of cerulein represented by the formula can be obtained.

前記デカペプチド誘導体Ａは、メチオニン残基と、チロ
シン残基の水酸基に化学的に不安定な硫酸エステル基を
同時に含むペプチド誘導体であるが、従来、該メチレン
なとの金儲アミノ酸を含むペプチド誘導体の場合、接触
還元による保護基の脱離は困難とされており、また、メ
チオニン残基と硫酸エステル基を同時に含むペプチド誘
導体から接触還元によって保護基を脱離させた例は皆無
である。The decapeptide derivative A is a peptide derivative that simultaneously contains a methionine residue and a chemically unstable sulfate group in the hydroxyl group of a tyrosine residue. In this case, it is considered difficult to remove the protecting group by catalytic reduction, and there are no examples of removing the protecting group by catalytic reduction from a peptide derivative containing both a methionine residue and a sulfate group.

本発明者らは、意外なことに、メチオニン残基とチロシ
ン残基に硫酸エステルを同時に含むデカペプチド誘導体
Ａから接触還元によって、不安定な硫酸エステルの脱離
を伴うことなく選択的に保護基を脱保護し、円滑に例え
ば目的物の一つであるセルレインが高収率で得られるこ
とを見い出したものである。Surprisingly, the present inventors were able to selectively remove protective groups from decapeptide derivative A containing sulfate esters at both methionine and tyrosine residues by catalytic reduction without removing unstable sulfate esters. It was discovered that one of the target products, caerulein, can be smoothly obtained in high yield by deprotecting the compound.

本来、硫酸エステルは、酸にきわめて不安定であり、通
常用いられる酸による保護基の脱離は、硫酸エステルを
含むペプチド誘導体の保護基の脱離には適用が困難であ
るため、前記の従来法においては、アルカリによるＯ−
アシル基の脱離法を採用している。Originally, sulfuric acid esters are extremely unstable to acids, and the removal of protective groups using acids, which is commonly used, is difficult to apply to the removal of protective groups from peptide derivatives containing sulfuric acid esters. In the method, O-
An acyl group elimination method is adopted.

しかし、アルカリ条件下では一部のアミノ酸残基のラセ
ミ化およびアスパラギン酸残基に由来する副反応を避け
ることができず、高純度のセルレインを得ることは困難
※※であった。However, under alkaline conditions, racemization of some amino acid residues and side reactions originating from aspartic acid residues cannot be avoided, making it difficult to obtain highly pure caerulein.

この点１、一般式（Ｉ）で示される、デカペプチド誘導
体、たとえば、デカペプチド誘導体Ａの接触還元による
セルレインの合成は、副反応が少（、精製が容易で高純
度、高活性のセルレインが得られる点で、従来法をはる
かに上まわるものである。Regarding point 1, the synthesis of caerulein by catalytic reduction of a decapeptide derivative represented by the general formula (I), for example, decapeptide derivative A, has few side reactions (easy purification, high purity, and highly active caerulein). The results obtained are far superior to conventional methods.

以下一般式（Ｉ）で示されるデカペプチド誘導体および
その塩ならびにそれらの製法ならびに、本発明における
デカペプチド誘導体またはその塩がらセルレインおよび
その類縁体の製法についてそれぞれ説明する。The decapeptide derivative represented by the general formula (I), its salt, and its production method, as well as the production method of the decapeptide derivative or its salt, caerulein, and its analogs in the present invention will be explained below.

本発明において用いられるデカペプチド誘導体は、一般
式（Ｉ） で示される新規物質である。The decapeptide derivative used in the present invention is a new substance represented by general formula (I).

一般式（ｉ）中、ＸｌはＨまたはベンジルオキシカルボ
ニル基（Ｚ）、ｐ−メトキシベンジルオキシカルボニル
基（ＰＭＺ）、ｐ−二トロベンジルオキシカルポニル基
などの置換ベンジルオキシカルボニル基、１−ブチルオ
キシカルボニル基（ＢＯＣ）、などのアミノ基の保護基
、Ｙｌ、Ｙ２は、同一でも異ってもよ＜、メチルおよび
エチルエステル、ベンジルエステル、ｔ−ブチルエステ
ル、ｐ−ニトロベンジルエステルなどのカルボキシル基
の保護基、Ｙ３は、ＮＨ３またはＹｌ、Ｙ２と同様カル
ボキシル基の保護基、ｚｌ はＨまたはアセチル、トリ
フルオロアセチル、ｔ−ブチル、ベンジル、ｐ−二トロ
ベンジル、ジフェニルメチル、トリチルなどの側鎖水酸
基の保護基または一８Ｏ３Ｘ（Ｘは、Ｋ、 Ｎａなとの
アルカリ金属またはトリエチルアミン、シクロヘキシル
アミンなどの塩基またはＨを意味する）、Ｚ２は、Ｈま
たはアセチル、トリフルオロアセチル、ｔ−ブチル、ベ
ンジル、ｐ−ニトロベンジル、ジフェニルメチル、トリ
チルなどの側鎖水酸基の保護基をそれぞれ示す。In the general formula (i), Xl is H or substituted benzyloxycarbonyl group such as benzyloxycarbonyl group (Z), p-methoxybenzyloxycarbonyl group (PMZ), p-nitrobenzyloxycarbonyl group, 1-butyloxy Protecting groups for amino groups such as carbonyl group (BOC), Yl and Y2 may be the same or different, carboxyl groups such as methyl and ethyl esters, benzyl esters, t-butyl esters, p-nitrobenzyl esters, etc. , Y3 is NH3 or Yl, a carboxyl group protecting group like Y2, zl is H or a side chain hydroxyl group such as acetyl, trifluoroacetyl, t-butyl, benzyl, p-nitrobenzyl, diphenylmethyl, trityl, etc. or -8O3X (X means K, an alkali metal such as Na or a base such as triethylamine, cyclohexylamine, or H), Z2 is H or acetyl, trifluoroacetyl, t-butyl, benzyl, Protecting groups for side chain hydroxyl groups such as p-nitrobenzyl, diphenylmethyl, and trityl are shown.

一般式（Ｉ）で示されるデカペプチド誘導体には、保護
基（Ｘｌ、Ｙｌ、Ｙ２、Ｙ３、Ｚｌ、Ｚ２）の種類に応
じて多数の誘導体が含まれるが、代表例としては、一般
式（■）において、Ｘ１＝ｚ（ベンジル上記の物質（以
下、デカペプチド誘導体Ｂ）の理化学的性質は以下の通
りである。The decapeptide derivative represented by the general formula (I) includes many derivatives depending on the type of protecting group (Xl, Yl, Y2, Y3, Zl, Z2), but as a representative example, the decapeptide derivative represented by the general formula ( (2), X1=z (benzyl) The physicochemical properties of the above substance (hereinafter referred to as decapeptide derivative B) are as follows.

（１） 融点 ２０２〜２０４℃ （２）〔α）２２−２．６°（Ｎ−Ｎ−ジメチルホルム
アミド、Ｃ＝０．０９８） （３）元素分析値（％） ＨＮ 分析値 ６１．５２ ５．８３ １０．６０計算値 ６
１．６４ ５．９０ １０．７４（４）ア□ノ酸分析値
（６ＮＨＣ１中、１１０℃で２４時間加水分解） Ａｓｐ （２，０） （数値は分子の数を示す）、Ｔｈ
ｒ （１，１）、ｃｌｎ（２−０）、Ｇｕｙ（１，２）
、Ｍｅｔ （０，８）、Ｔｙｒ（０，９）、Ｐｈｅ （
１，２）。(1) Melting point 202-204°C (2) [α) 22-2.6° (N-N-dimethylformamide, C = 0.098) (3) Elemental analysis value (%) HN analysis value 61.52 5 .83 10.60 Calculated value 6
1.64 5.90 10.74 (4) Annoic acid analysis value (hydrolyzed in 6NHC1 at 110°C for 24 hours) Asp (2,0) (number indicates the number of molecules), Th
r(1,1), cln(2-0), Guy(1,2)
, Met (0,8), Tyr (0,9), Phe (
1, 2).

さらに、他のデカペプチド誘導体としては、前記のデカ
ペプチド誘導体Ａ（Ｚ−Ｐｙｒ−Ｇｉｎ −Ａｓｐ −
ＰＴｈｅ −ＮＨ２・（（Ｃ２Ｈ５）２ＮＨ）Ｈ２Ｏ，
）があけられる。Further, as other decapeptide derivatives, the above decapeptide derivative A (Z-Pyr-Gin-Asp-
PThe -NH2・((C2H5)2NH)H2O,
) can be opened.

一般式（Ｉ）で示されるデカペプチド誘導体はたとえば
次の方法によって製造することができる。The decapeptide derivative represented by general formula (I) can be produced, for example, by the following method.

すなわち、一般式（ｎ）（式中、Ｘｌ、Ｙｌ、Ｚｌは前
記と同義であり、Ｙ４はＯＨまたはメチルエステル、エ
チルエステルなどのカルボキシル基の保護基を示す）で
示されるテトラペプチド誘導体と、一般式（ｍ）（式中
、Ｙ２、Ｙ３、ｚ２は前記と同義）で示されるヘキサペ
プチド誘導体もしくはその酸塩とをフラグメント縮合さ
せることによって一般式（Ｉ）で示されるデカペプチド
誘導体を得ることができる。That is, a tetrapeptide derivative represented by the general formula (n) (wherein, Xl, Yl, and Zl have the same meanings as above, and Y4 represents OH or a carboxyl group-protecting group such as methyl ester or ethyl ester); Obtaining a decapeptide derivative represented by general formula (I) by fragment condensation of a hexapeptide derivative represented by general formula (m) (wherein Y2, Y3, and z2 are the same as defined above) or an acid salt thereof; I can do it.

原料に用いられる、一般式（Ｉ［）で示されるテトラペ
プチド誘導体は新規物質であり、その代表的なものとし
て東一般式（Ｉ［）において、Ｘ□−ベンジルオキシカ
ルボニル基（Ｚ）、Ｙｌ−ベンジル基（Ｂｚｌ ）、Ｙ
４＝ＯＣＨ３（ＯＭｅ）、Ｚ１＝Ｈのもの、すなわち、
式 で示されるテトラペプチド誘導体（テトラペプチド誘導
体Ｉ）があげられる。The tetrapeptide derivative represented by the general formula (I[) used as a raw material is a new substance, and a representative example thereof is the Higashi general formula (I[), in which X□-benzyloxycarbonyl group (Z), Yl -benzyl group (Bzl), Y
4=OCH3(OMe), Z1=H, i.e.
A tetrapeptide derivative (tetrapeptide derivative I) represented by the formula is mentioned.

このテトラペプチド誘導体■は、通常のペプチド合成法
によって合成することができるが、具体的には、後記の
参考例６において示す方法によって製造することができ
る。This tetrapeptide derivative (1) can be synthesized by a conventional peptide synthesis method, and specifically, it can be produced by the method shown in Reference Example 6 below.

テトラペプチド誘導体■以外の他のテトラペプチド誘導
体も参考例６に準じて製造することができる。Tetrapeptide derivatives other than tetrapeptide derivative (1) can also be produced according to Reference Example 6.

また他方の原料として用いられる、一般式（ｍ）で示さ
れるヘキサペプチド誘導体も新規物質であり、その代表
的なものとしては、一般式（Ｉｎ）において、Ｙ２−ベ
ンジル基（Ｂｚｌ）、Ｙ３＝ＮＨ２、Ｚ２−ベンジル基
（Ｂｚｌ）のもの、すなわち、式で示されるヘキサペプ
チド誘導体（ヘキサペプチド誘導体■）があげられる。In addition, the hexapeptide derivative represented by the general formula (m) used as the other raw material is also a new substance, and representative examples thereof include, in the general formula (In), Y2-benzyl group (Bzl), Y3= Examples include those with NH2, Z2-benzyl group (Bzl), that is, hexapeptide derivatives represented by the formula (hexapeptide derivative ①).

このヘキサペプチド誘導体■は通常のペプチド合成法に
よって合成することができるが、具体的には後記の参考
例７において示す方法によって製造することができる。This hexapeptide derivative (1) can be synthesized by a conventional peptide synthesis method, and specifically can be produced by the method shown in Reference Example 7 below.

ヘキサペプチド誘導体■以外の他のへキサペプチド誘導
体も参考例７に準じて製造することができる。Hexapeptide derivatives other than hexapeptide derivative (1) can also be produced according to Reference Example 7.

本発明におけるデカペプチド誘導体を製造するためのフ
ラグメント縮合に際しては、一般式（ＩＩＩ）で示され
るヘキサペプチド誘導体を、一般式（ｎ）で示されるテ
トラペプチド誘導体に対して等モル−２倍モル使用する
ことによって効果的に目的とするデカペプチド誘導体を
得ることができる。In the fragment condensation for producing the decapeptide derivative in the present invention, the hexapeptide derivative represented by the general formula (III) is used in equimolar to 2 times the molar amount of the tetrapeptide derivative represented by the general formula (n). By doing so, the desired decapeptide derivative can be effectively obtained.

反応は、０．１〜０．５ミリモルのテトラペプチド誘導
体およびヘキサペプチド誘導体もしくはその塩を、プロ
テイナーゼの存在下、ｐＨ２，０〜１１．０の水性媒体
中、酵素の失活しない温度下、通常室温で約数十秒ない
し２０時間行うかまたは通常のペプチド合成法に従って
フラグメント縮合を行う。The reaction is usually carried out by adding 0.1 to 0.5 mmol of tetrapeptide derivatives and hexapeptide derivatives or their salts in the presence of a proteinase in an aqueous medium with a pH of 2.0 to 11.0 at a temperature that does not inactivate the enzyme. Fragment condensation is carried out at room temperature for about several tens of seconds to 20 hours or according to a conventional peptide synthesis method.

酵素を用いる方法においては、グロテイナーゼとしては
、たとえば、酸性グロテアーゼ應３０６ （Ａｇｒ、Ｂ
ｉｏｌ、 Ｃｈｅｍ、３９．４２３（１９７５） ）
（Ａｃｒｏｃｙｌｉｎｄｒｉｕｍ種、協和醗酵工業■製
）、ペプシン、サーモライシン、ゾロリシン、トリプシ
ン、α−キモトリプシン、ハハインなどの酸性、中性、
アルカリ性のいずれのプロテアー七も使用できる。In the method using an enzyme, the groteinase is, for example, acid grotease 306 (Agr, B
iol, Chem, 39.423 (1975))
acidic, neutral,
Any alkaline protease can be used.

グロテイナーセの使用量は、反応原料などに応じて任意
に決定することができる。The amount of groteinase to be used can be arbitrarily determined depending on the reaction raw materials and the like.

反応は、水またはメタノール、エタノール、ジオキサン
、Ｎ−Ｎ−ジメチルホルムアミドなどの如き水と相溶性
のある有機溶媒を含む水性溶媒中で円滑に進行し、生成
物は通常、沈でん物として得られる。The reaction proceeds smoothly in an aqueous solvent containing water or a water-compatible organic solvent such as methanol, ethanol, dioxane, N-N-dimethylformamide, etc., and the product is usually obtained as a precipitate.

反応物からの生成物（デカペプチド誘導体）の回収は、
沈でんを常法によってｒ取し、これを適宜に、弱酸性水
溶液、弱アルカリ性水溶液および水で洗滌することによ
って高純度のデカペプチド誘導体導体を得ることができ
る。Recovery of the product (decapeptide derivative) from the reactant is as follows:
A highly purified decapeptide derivative conductor can be obtained by collecting the precipitate by a conventional method and washing it with a weakly acidic aqueous solution, a weakly alkaline aqueous solution, and water as appropriate.

もちろん、グロテイナーセを用いないで、通常のペプチ
ド合成法に用いられる縮合法を用いてデカペプチド誘導
体を得ることができる。Of course, decapeptide derivatives can be obtained using the condensation method used in conventional peptide synthesis methods without using groteinase.

さらに、一般式（１）で示されるデカペプチド誘導体は
、一般式（ＩＶ） （式中、Ｙ５ はＯＨまたはメチルエステル エチルエ
ステルなどのカルボキシル基の保護基、他の記号は前記
と同義）で示されるヘプタペプタイド誘導体と、一般式
（Ｖ） ９秒で示されるトリペプタイド誘導体もしくはその酸塩
とを前記の方法と同様の条件下でフラグメント縮合させ
ることによっても製造することができる。Furthermore, the decapeptide derivative represented by the general formula (1) is represented by the general formula (IV) (wherein Y5 is OH or a carboxyl group protecting group such as methyl ester and ethyl ester, and other symbols are the same as above). It can also be produced by fragment condensation of a heptapetide derivative represented by the formula (V) and a tripeptide derivative represented by the general formula (V) or an acid salt thereof under conditions similar to the above-mentioned method.

一般式（ＩＶ）中で示されるヘプタペプタイド誘導体は
、新規物質であり、その代表的なものとしては、式 で示されるヘプタペプタイド誘導体（ヘプタペプタイド
誘導体■）があげられる。The heptapetide derivative represented by the general formula (IV) is a new substance, and a representative example thereof is the heptapetide derivative represented by the formula (heptapetide derivative ■).

このヘプタペプタイド誘導体■は通常のペプチド合成法
によって合成することができるが、具体的には後記の参
考例８において示す方法によって製造することができる
。This heptapeptide derivative (1) can be synthesized by a conventional peptide synthesis method, and specifically, it can be produced by the method shown in Reference Example 8 below.

ヘプタペプタイド誘導体■以外の他のへブタペプタイド
誘導体も参考例８に準じて製造することができる。Heptapeptide derivatives other than heptapeptide derivative (1) can also be produced according to Reference Example 8.

一般式（Ｖ）で示されるトリペプタイド誘導体としてＯ
東たとえば、Ｍｅｔ −Ａｓｐ −Ｐｈｅ −ＮＨ２（
トリペプタイド誘導体■）があげられる。O as a tripeptide derivative represented by general formula (V)
For example, Met-Asp-Phe-NH2(
Examples include tripeptide derivatives (■).

このトリペプタイド誘導体■は既知物質（Ｊｏｕｒｎａ
ｌｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ ５ｏｃｉｅｔｙ ｐ、
５５５ （１９６６）であり、たとえば後記の参考例
７において示す方法によって製造することができる。This tripeptide derivative ■ is a known substance (Journa
lof Chemical 5ociety p,
555 (1966), and can be produced, for example, by the method shown in Reference Example 7 below.

前記のトリペプタイド誘導体Ｉ以外のものも、参考例７
の方法に準じて製造することができる。Reference Example 7 also includes tripeptide derivatives other than the above tripeptide derivative I.
It can be manufactured according to the method of

一般式（ＩＶ）で示されるヘプタペプタイド誘導体゛と
、一般式（Ｖ）で示されるトリペプタイド誘導体もしく
はその酸塩とのフラグメント縮合は、前記のテトラペプ
チド誘導体とへキサペプチド誘導体との縮合における条
件に準じて行うことができる。The fragment condensation of the heptapetide derivative represented by the general formula (IV) and the tripeptide derivative represented by the general formula (V) or its acid salt is carried out under the conditions for the above-mentioned condensation of the tetrapeptide derivative and the hexapeptide derivative. This can be done in accordance with the above.

かくして得られるデカペプチド誘導体またはその塩から
セルレインおよびその類縁体の合成は次のようにして行
うことができる。The synthesis of caerulein and its analogs from the thus obtained decapeptide derivative or its salt can be carried out as follows.

すなわち、一般式（Ｉ）で示されるデカペプチド誘導体
の脱保護は、該誘導体中、ｚｌ が硫酸エステル（−８
Ｏ３Ｘ ’）の誘導体、ｔことえば、前記のデカペプチ
ド誘導体Ａについては、そのまま接触還元によって行う
ことができるが、ｚｌ が−８Ｏ３Ｘ以外の誘導体、た
乏えば、前記のデカペプチド誘導体Ｂについては、Ｚｌ
を−ＳＯ３Ｘとしたのち、そのまｋもしくはその塩を
接触還元することによってセルレインを得ることができ
る。That is, deprotection of the decapeptide derivative represented by general formula (I) is performed when zl is sulfate ester (-8
For example, the above-mentioned decapeptide derivative A can be directly subjected to catalytic reduction, but for derivatives in which zl is other than -8O3X, if possible, for the above-mentioned decapeptide derivative B, Zl
After converting into -SO3X, caerulein can be obtained by directly catalytically reducing k or its salt.

後者のＺ１＝−８Ｏ３Ｘ以外の誘導体の場合、デカペプ
チド誘導体のチロシン残基の水酸基の−ＳＯ３Ｘ、たと
えば−５Ｏ３Ｈへの変換は、たとえば次のようにして行
うことができる。In the case of the latter derivatives other than Z1=-8O3X, the hydroxyl group of the tyrosine residue of the decapeptide derivative can be converted to -SO3X, for example, -5O3H, for example, as follows.

デカペプチド誘導体Ｂを無水のＮ−Ｎ−ジメチルホルム
アミド：無水エーテル（１：１．５）（容量比）の混合
溶液に溶解し、これに、無水ピリジン−無水硫酸複合体
を、デカペプチド誘導体Ｂに対して３〜１０倍量加え、
常圧下、室温で通常８〜２４時間反応を行う。Decapeptide derivative B was dissolved in a mixed solution of anhydrous N-N-dimethylformamide:anhydrous ether (1:1.5) (volume ratio), and anhydrous pyridine-sulfuric anhydride complex was added to the decapeptide derivative B. Add 3 to 10 times the amount of
The reaction is usually carried out for 8 to 24 hours at room temperature under normal pressure.

ついで使用した無水ピリジン−無水硫酸複合体を中和す
るに必要な量のジエチルアミンを含むＮ−Ｎ−ジメチル
ホルムアミド溶液に、水冷下、前記の反応液を滴ｆする
。Next, the above reaction solution was added dropwise under water cooling to an N-N-dimethylformamide solution containing diethylamine in an amount necessary to neutralize the anhydrous pyridine-sulfuric anhydride complex used.

かくしてデカペプチド誘導体（Ｂ）のチロシン残基の酸
基を、硫酸エステル（−８Ｏ３Ｈ’）に変えることがで
きる。In this way, the acid group of the tyrosine residue of the decapeptide derivative (B) can be changed to a sulfuric acid ester (-8O3H').

チロシン残基の水酸基への硫酸エステルの導入の確認は
、ＩＲスペクトルにおける特性吸収（１２５０および１
０５０ｃｘ ’）によって行う。Confirmation of the introduction of the sulfate ester into the hydroxyl group of the tyrosine residue was confirmed by the characteristic absorption in the IR spectrum (1250 and 1
050cx').

Ｍｅｔ −Ａｓｐ Ｐｈｅ −ＮＨ２・（（Ｃ２’Ｈ
５）２ＮＨ）〔デカペプチド誘導体Ａ〕の精製は後記の
実施例において例示する如く、セファデックスＬＨ２０
を用いるカラムクロマトグラフィーによって行うことが
できる。Met-Asp Phe-NH2・((C2'H
5) 2NH) [Decapeptide derivative A] was purified using Sephadex LH20 as exemplified in the Examples below.
It can be carried out by column chromatography using .

なお、上記の方法において用いられる、無水ピリジン−
無水硫酸複合体は、たとえば次の方法によって得ること
ができる。In addition, anhydrous pyridine used in the above method
The sulfuric anhydride complex can be obtained, for example, by the following method.

無水クロロホルム３２０１′Ｌｌと無水ピリジン８０Ｔ
Ｌｌを混合し、−５℃に冷却し、これに、クロロスルフ
オニツクアシッド２７．２ＴＬｌを攪拌下に３０分間で
徐々に滴下する。Anhydrous chloroform 3201'Ll and anhydrous pyridine 80T
LL is mixed and cooled to -5 DEG C., and 27.2 TL of chlorosulfonic acid is gradually added dropwise thereto over 30 minutes while stirring.

ついで、０°Ｃで１５分攪拌し、生じる白色結晶をＰ取
し、冷クロロホルム２００ｒＩＬｌで数回洗い、真空乾
燥することによって、無水ピリジン−無水硫酸複合体を
得ることができる。Then, the mixture is stirred at 0° C. for 15 minutes, and the resulting white crystals are collected, washed several times with 200 rIL of cold chloroform, and dried in vacuum to obtain an anhydrous pyridine-sulfuric acid anhydride complex.

一般式（Ｉ）で示されるデカペプチド誘導体中、Ｚｌ−
−ＳＯ３Ｘである。Among the decapeptide derivatives represented by general formula (I), Zl-
-SO3X.

デカペプチド誘導体の脱保護はペプチド化学における保
護基の通常の脱離法に準じて行うことができる。Deprotection of the decapeptide derivative can be carried out according to the usual method for removing protecting groups in peptide chemistry.

好適な具体的な一例を示すと、デカペプチド誘導体Ａを
溶媒に溶解もしくは懸だくし、水素雰囲気下、適当な触
媒の存在下に還元する。To give a specific example, decapeptide derivative A is dissolved or suspended in a solvent and reduced in a hydrogen atmosphere in the presence of a suitable catalyst.

溶媒としては、たとえば、Ｎ・Ｎ−ジメチルホルムアミ
ド、水などが単独もしくは混合して用いられる。As the solvent, for example, N.N-dimethylformamide, water, etc. may be used alone or in combination.

触媒としては、パラジウム−炭素（Ｐｄ−Ｃ）、パラジ
ウム黒、パラジウム−硫酸バリウムなどが好適である。Suitable catalysts include palladium-carbon (Pd-C), palladium black, palladium-barium sulfate, and the like.

反応は、デカペプチド誘導体Ａを、０，２〜２０１、好
ましくは１〜１Ｍ’を溶媒１００ｒ／ｌｌに溶解もしく
は懸だくし、デカペプチド誘導体Ａに対して約１０倍量
以下の触媒の存在下、通常常圧下で行う（必要ならば加
圧してもよい）。The reaction is carried out by dissolving or suspending decapeptide derivative A in an amount of 0.2 to 201, preferably 1 to 1 M', in 100 r/l of a solvent, and in the presence of a catalyst in an amount of about 10 times or less relative to decapeptide derivative A. , usually under normal pressure (pressurization may be applied if necessary).

反応温度は、通常０〜５０°Ｃで行われろ。The reaction temperature is usually 0 to 50°C.

反応時間は、原料の使用濃度、反応温度などにより左右
されるが通常１０〜２４時間である。The reaction time depends on the concentration of the raw materials used, the reaction temperature, etc., but is usually 10 to 24 hours.

反応液からのセルレインの精製は、セファデックスなど
を利用するカラムクロマＩ・グラフィーなどによって行
うことができろ。Purification of caerulein from the reaction solution can be carried out by column chroma I/graphy using Sephadex or the like.

その他デカペプチド誘導体の保護基の脱保護に際しては
、ペプチド化学における常法、例えば、トリス（トリフ
ルオロ酢酸）ホウ素法〔Ｊ 、 Ｄｌｅｓｓ ＆Ｗ、
Ｂａｕｒ 。In addition, when deprotecting the protecting group of the decapeptide derivative, conventional methods in peptide chemistry, such as the tris (trifluoroacetic acid) boron method [J, Dless & W.
Baur.

Ａｎｇｅ ｗ、 Ｃｈｅｍ 、 Ｉ ｎｔｅｒｎａｌ
、 Ｅｄ ０．１２．１４７（１９７３））や、トリフ
ルオロ酢酸法などが適用できる。Angew, Chem, Internal
, Ed 0.12.147 (1973)), trifluoroacetic acid method, etc. can be applied.

尚、一般式（Ｉ）で示されるデカペプチド誘導体の脱保
護基において、Ｚｌ の５Ｏ３Ｈ基が脱離するような脱
保護法を採用するときには、他の保護基Ｙ１、Ｚ２、Ｙ
２などを脱保護後、５Ｏ３Ｈを導入してもよい。In addition, in the deprotection group of the decapeptide derivative represented by general formula (I), when adopting a deprotection method in which the 5O3H group of Zl is eliminated, other protecting groups Y1, Z2, Y
After deprotecting 2, etc., 5O3H may be introduced.

次に実施例および参考例を示す。Next, examples and reference examples will be shown.

実施例 デカペプチド誘導体Ｂからセルレインの製造：デカペプ
チド誘導体Ｂ（参考例１）１４２■を、Ｎ−Ｎ−ジメチ
ルホルムアミド（ＤＭＥｉ’）（無水）２ｍｌに溶解し
、これにピリジン２ｍｌを加え、ついで、無水ピリジン
−無水硫酸コンプレックス（結晶）８００ｍＬ？を、Ｄ
ＭＦ’ ４ＴＬｌと、ピリジ７４ ｍａｔに溶解したも
のを混合し、室温で１０時間攪拌する（かくして、デカ
ペプチド誘導体Ｂのチロシン残基の水酸基が硫酸エステ
ル（Ｓ０３Ｈ）となる。Example Production of caerulein from decapeptide derivative B: 142 ml of decapeptide derivative B (Reference Example 1) was dissolved in 2 ml of N-N-dimethylformamide (DMEi') (anhydrous), 2 ml of pyridine was added thereto, and then , anhydrous pyridine-anhydrous sulfuric acid complex (crystal) 800mL? ,D
MF' 4TLl and the solution dissolved in pyridi74 mat are mixed and stirred at room temperature for 10 hours (thus, the hydroxyl group of the tyrosine residue of decapeptide derivative B becomes a sulfuric acid ester (S03H).

ついで、この反応液を、ジエチルアミン０．３８ｒをＤ
ＭＦ ５ｍｌに溶解した液に滴下して中和する。Then, this reaction solution was mixed with 0.38r of diethylamine.
Neutralize by adding dropwise to a solution dissolved in 5 ml of MF.

生成するゲル状の沈でんを遠心分離によって除去し、上
清をとる。The resulting gel-like precipitate is removed by centrifugation, and the supernatant is taken.

この上清液を、Ｎ−Ｎ−ジメチルホルムアミドで平衡化
したセファデックスＬＨ−２００カラムに通す。The supernatant is passed through a Sephadex LH-200 column equilibrated with N-N-dimethylformamide.

一番始めに流出する活性区分を集めて濃縮した後、無水
エーテル（５０ｍｌ）を加えて白色の沈でんを析出させ
これを集め、真空乾燥することによりＺ −Ｐｙｒ −
Ｇｉｎ −ＮＨ２・（（Ｃ２Ｈ５）２ ＮＨ） ）Ｃデ
カペプチド誘導体Ａ）１３９■を得た。After collecting and concentrating the first active fraction flowing out, anhydrous ether (50 ml) was added to precipitate a white precipitate, which was collected and vacuum dried to give Z -Pyr -
Gin-NH2.((C2H5)2NH))C decapeptide derivative A) 139■ was obtained.

収率９０％。デカペプチド誘導体ＡのＩＲスペクトル（
第１３図）における特性吸収は１２５０および１０５０
ｃｒｒＬ’に特徴的に観察され、チロシン残基の水酸基
が５Ｏ３Ｈになっていることが確認された。Yield 90%. IR spectrum of decapeptide derivative A (
The characteristic absorption in Fig. 13) is 1250 and 1050.
It was observed characteristically in crrL' that the hydroxyl group of the tyrosine residue was 5O3H.

デカペプチド誘導体Ａ３０ｍ９、Ｐｄ−Ｃ（パラジウム
炭素）３００ｍＩ？を、Ｎ−Ｎ−ジメチルホルムアミド
５Ｔｎｌに加え、１９時間、水素雰囲気下、常圧下、室
温で還元する。Decapeptide derivative A30m9, Pd-C (palladium on carbon) 300mI? is added to 5 Tnl of N-N-dimethylformamide and reduced at room temperature under hydrogen atmosphere and normal pressure for 19 hours.

ついで溶液部を１取し、Ｎ−Ｎ−ジメチルホルムアミド
で平衡化したセファデックスＬＨ−２００カラムに通す
。One aliquot of the solution was then taken and passed through a Sephadex LH-200 column equilibrated with N-N-dimethylformamide.

初めに出てくる活性区分３０Ｔｒｌｌ（フラクション雁
６−８．１０ｍ１ずつのフラクション３本分）にメタノ
ール１０ｍ１を加える。Add 10 ml of methanol to the first 30 ml of active section (3 fractions each containing 6-8.10 ml of fractions).

ついで生じる不溶物を１去し、１液にエーテル１０ｍ１
を加える。Then, remove the resulting insoluble matter, and add 10 ml of ether to the 1 solution.
Add.

生成する沈でんを遠心分離により採取する。The resulting precipitate is collected by centrifugation.

該沈でんを水に溶かし、凍結乾燥する。The precipitate is dissolved in water and freeze-dried.

このようにして得られたセルレインをイオン交換樹脂〔
アンバーライトＣＧ−５０（Ｈ＋））で処理し脱イオン
化を行った。The thus obtained caerulein was transferred to an ion exchange resin [
Amberlite CG-50 (H+)) was used to deionize the sample.

かくして得られるセルレイン含有水溶液を濃縮し、残渣
を真空乾燥することによって３６．７ｍ９（収率９０．
７％）の製品を得た。The resulting aqueous cerulein-containing solution was concentrated, and the residue was vacuum-dried to yield 36.7 m9 (yield: 90.
7%) product was obtained.

得られた化合物の理化学的性質は次の通りである。The physicochemical properties of the obtained compound are as follows.

（１）元素分析値（％） ＨＮ 分析値 ５１．４ ５．３ １３．６ 計算値 ５１．５ ５．４ １３．５ （２）ＩＲスペクトルを第１図に示す。(1) Elemental analysis value (%) HN Analysis value 51.4 5.3 13.6 Calculated value 51.5 5.4 13.5 (2) The IR spectrum is shown in FIG.

（３）核磁気共鳴スペクトルを第２図に示ス。(3) Figure 2 shows the nuclear magnetic resonance spectrum.

（４）薄層クロマトグラフィーでのＲｆ値プレートとし
て、シリカゲル（Ｅ 、Ｍｅｒｃｋ製）、溶媒として、
■クロロホルム：メタノール：酢酸：水−１：１ ：０
．１ ：０．５（容量比）の下層を用いての薄層クロマ
トグラフィーにおける標品および本法において得られた
製品のＲｆ値はそれぞれＯ（原点動かず）であり、■ク
ロロホルム：メタノール：２８％アンモニア水：水−１
：１：０．１：０．１を用いてのＲｆ値は、共に０．７
３（ＵＶ吸収およびＨＢｒ／ニンヒドリン発色）であっ
た。(4) As an Rf value plate in thin layer chromatography, silica gel (E, manufactured by Merck), as a solvent,
■Chloroform: methanol: acetic acid: water - 1:1:0
．． The Rf values of the standard sample in thin layer chromatography using a lower layer of 1:0.5 (volume ratio) and the product obtained by this method are O (origin does not move), and ■Chloroform: methanol: 28 %Ammonia water: Water-1
The Rf value using :1:0.1:0.1 is both 0.7
3 (UV absorption and HBr/ninhydrin color development).

（５）Ｐ紙電気泳動 １紙として、東洋１紙Ａ、５１ Ａを用い、溶媒として
、ピリジン：酢酸：水−３二６：１．４１（容量比）を
用いて電圧２．４ ＫＶ、約２時間の電気泳動において
、標品には３つのバンド、本法における製品には１つの
バンドが観察された。(5) P paper electrophoresis Using Toyo 1 paper A and 51 A as the 1 paper, using pyridine:acetic acid:water-326:1.41 (capacity ratio) as the solvent, voltage 2.4 KV, During electrophoresis for about 2 hours, three bands were observed in the standard sample and one band in the product produced by this method.

（６）セルレンの生理活性試験（Ｂ １ｏａｓｓａｙ
）■ 被検薬物として、本件の実施例で得られた製品、
対照として標品を用い、被検薬物を生理食塩水に溶解し
、１０００ｎ２力価／ｍｌ（推定値）の液を調製し、こ
れを原液として溶封アンプルに小分けして用時開封して
使用した。(6) Bioactivity test of cerulene (B 1oassay
) ■ As the test drug, the product obtained in this example,
Using the standard product as a control, dissolve the test drug in physiological saline to prepare a solution with a titer of 1000 n2/ml (estimated value), divide this into liquid-sealed ampoules as a stock solution, and use by opening when ready for use. did.

＠ 使用動物として、モルモツｈ Ｈａｒｔｌｅｙ系雄
性３００〜４００′？のものを用いた。@ The animal used is a male Mosquito h Hartley strain 300-400'? I used the one from

Ｏ試験方法 試料原液（１０００μＺ力価／ ｍｌ推定値）を生理食
塩水で正確に希釈して、０．２μＺ力価／ｒｎｌＱ、
１ μ’？力価／ｍｌ（推定値）とし、それぞれ高用量
試料液（ＴＨ）及び低用量試料液（ＴＬ）とした。O Test method: Accurately dilute the sample stock solution (1000 μZ titer/ml estimated value) with physiological saline to obtain 0.2 μZ titer/rnlQ,
1 μ'? The titer was expressed as a titer/ml (estimated value), and these were defined as a high-dose sample solution (TH) and a low-dose sample solution (TL), respectively.

標品のセルレインも同様に調製し、胆のう摘出標本およ
びマグヌス操作法はすべて１１セルレインのバイオアッ
セイ（Ｂｉｃａｓｓａｙ）” （応用薬理、Ｖｏｌ、８
．８６５〜８７０．１９７４）に従って行った。The standard caerulein was prepared in the same way, and the cholecystectomy specimen and Magnus procedure were all performed using the 11 caerulein bioassay (Bicassay) (Applied Pharmacology, Vol. 8).
．． 865-870.1974).

■ 試験結果 μグカ価／ｒｖ 被検薬物（本件製品） １１４９ 標品（対照） １０００ 参考例 １ デカペプチド誘導体Ｂの合成： Ｚ −Ｐｙｒ −Ｇｉｎ −Ａｓｐ （０Ｂｚｌ ）
−Ｔｙｒ （参考例６ ） １８９１ｎ９（０，２５ｍ
ｍｏｌｅ）とＴｈｒ （Ｂｚｌ ）Ｇｌｙ −Ｔｒｐ
−Ｍｅｔ −Ａｓｐ （０Ｂｚｌ ） −Ｐｈｅ −Ｎ
Ｈ２・ｌ−リフルオロ酢酸塩（参考例７）２６０ｍ９（
０，２５ｍｍｏｌｅ ）を、Ｎ−Ｎ−ジメチルムアミド
（ＤＭＦ ） ２ ｒｄに溶かし、ｐＨ４，０の０．２
Ｍ酢酸緩衝液５ｒＩｌｌとＩＮ ＮａＯＨＯ，２５ｍ
１を加えた後、さらに酸性プロテアーゼＡ、 ３０６
（Ａｃｒｏｃｙｌｉｎｄｒｉｕｍ種、協和醗酵工業（株
）製）２Ｃ１９を加えて、３０°Ｃで１９時間振とうし
た。■ Test result μg value/rv Test drug (this product) 1149 Standard (control) 1000 Reference example 1 Synthesis of decapeptide derivative B: Z -Pyr -Gin -Asp (0Bzl)
-Tyr (Reference Example 6) 1891n9 (0.25m
mole) and Thr (Bzl)Gly-Trp
-Met -Asp (0Bzl) -Phe -N
H2.l-Lifluoroacetate (Reference Example 7) 260m9 (
0.25 mmole) was dissolved in N-N-dimethylmamide (DMF) 2rd at pH 4.0.
5ml of M acetate buffer and 25ml of IN NaOHO
After adding 1, further acidic protease A, 306
(Acrocylindrium species, manufactured by Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd.) 2C19 was added, and the mixture was shaken at 30°C for 19 hours.

かくして析出してくる白色性でんを１取し、これを、０
．５Ｍクエン酸、水、４％ＮａＨＣＯ３、水の順で洗滌
し、真空乾燥した。Take 1 part of the white starch precipitated in this way and add it to 0
．． It was washed with 5M citric acid, water, 4% NaHCO3, and water in this order, and dried under vacuum.

ついで、これをＮ−Ｎ−ジメチルホルムアミド５ＴｒＬ
ｌに溶かし、これに酢酸エチルを加えた。Then, this was converted into N-N-dimethylformamide 5TrL.
1, and ethyl acetate was added thereto.

かくして生成する沈でんを汗取し、これを真空乾燥して
目的物のＺ −Ｐｙｒ −ＧｉｎＡｓｐ （０Ｂｚｌ
） Ｔｙｒ −Ｔｈｒ （Ｂｚｌ ） −ＧｌｙＴｒ
ｐ −Ｍｅｔ −Ａｓｐ （０Ｂｚｌ ） −ＰｈｅＮ
Ｈ２・Ｈ２Ｏ１５，７■を得た。The precipitate thus produced is sweated off and vacuum dried to obtain the target product Z -Pyr -GinAsp (0Bzl
) Tyr −Thr (Bzl ) −GlyTr
p-Met-Asp(0Bzl)-PheN
15.7 cm of H2.H2O was obtained.

このものの理化学的性質は前述した通りであった。The physical and chemical properties of this product were as described above.

参考例 ２ Ｚ −Ｐｙｒ −Ｇｉｎ −Ａｓｐ （０Ｂｚｌ ）
−ＴｙｒＯＭｅ （参考例６ ） １９３７％ｌ（０
，２５ｍｍｏｌｅ）と、Ｔｈｒ （Ｂｚｌ ） −Ｇｌ
ｙ −Ｔｒｐ −Ｍｅｔ −Ａｓｐ（ＯＢＺｌ）−Ｐｈ
ｅ−ＮＨ２・トリフルオロ酢酸塩（参考例７ ） ２６
０ｍ？ （０，２５ｍｍｏｌｅ ）をＮ・Ｎ−ジメチル
ホルムアミド５ｍｌに溶かし、ｌＮＮａＯＨ０，２５ｒ
ｎｌ、０．２Ｍ ＣａＣｌ２０．５７７１１゜ｐＨ９
，０の０．２ＭＨス塩酸緩衝液５ｍＡを加えた後、α−
キモ） ＩＪプシン（結晶）〔ウオージントン社製、ｌ
００００Ｕ／ｍ９（活性）、）１０ｍ９を加え、室温で
約５分聞損とうする。Reference example 2 Z -Pyr -Gin -Asp (0Bzl)
-TyrOMe (Reference Example 6) 1937%l(0
, 25 mmole) and Thr (Bzl) -Gl
y-Trp-Met-Asp(OBZl)-Ph
e-NH2/trifluoroacetate (Reference Example 7) 26
0m? (0.25 mmole) was dissolved in 5 ml of N.N-dimethylformamide,
nl, 0.2M CaCl20.57711゜pH9
After adding 5 mA of 0.2 MH S hydrochloric acid buffer of 0.
Kimo) IJ Pushin (crystal) [manufactured by Worthington Co., l
Add 10 m9 of 0000 U/m9 (active) and incubate for about 5 minutes at room temperature.

５ＮＥ（Ｃ１ｏ、 ０５ ｒｎｌを加え、反応を停＋ｈ
した後、さらに反応終了液に対し、２倍量の水を加える
と白色性でんを生ずる。Add 5NE (C1o, 05rnl and stop the reaction +h
After that, twice the amount of water is added to the reaction solution to produce white starch.

この沈でんを１取し、０．５Ｍクエン酸、水、４％Ｎ
ａＨＣｏ ３、水の順で十分洗滌し、ついでＮ−Ｎ−ジ
メチルホルムアミドに溶かし、酢酸エチルを加え、生成
する沈でんをｆ取し、これを真空乾燥することによって
参考例１における同一の目的物１３１ｍ９を得た（収率
３１％）。Take one portion of this precipitate, add 0.5M citric acid, water, 4%N
aHCo 3 and water, then dissolved in N-N-dimethylformamide, added ethyl acetate, collected the resulting precipitate, and vacuum-dried it to obtain 131 m9 of the same target material in Reference Example 1. was obtained (yield 31%).

参考例 ３ Ｚ −Ｐｙｒ −Ｇｌｎ −Ａｓｐ （０Ｂｚｌ ）−
Ｔｈｒ （参考例６）３０４７７２ｐ、Ｔｈｒ （Ｂｚ
ｌ ） −Ｇｌｙ −Ｔｒｐ−Ｍｅｔ −Ａｓｐ （０
Ｂｚｌ ） −Ｐｈｅ−ＮＨ２・）リフルオロ酢酸塩（
参考例７）３８８ｍ９をＮ−Ｎ−ジメチルホルムアミド
４ ｍ、ｌに溶かし、この溶液にメチルモルホリン０．
４ｍ１（０，４０５′？）を加え、−１０℃に冷却し、
■−ハイドロキシベンゾトリアゾール９２ｍｙ、Ｎ −
Ｎ−ジシクロへキシルカルボジイミド９２ｍｙを加え、
２時間攪拌する。Reference example 3 Z -Pyr -Gln -Asp (0Bzl)-
Thr (Reference Example 6) 304772p, Thr (Bz
l) -Gly-Trp-Met-Asp (0
Bzl ) -Phe-NH2・)lifluoroacetate (
Reference Example 7) Dissolve 388m9 in 4m, l of N-N-dimethylformamide, and add 0.0m of methylmorpholine to this solution.
Add 4 ml (0,405'?) and cool to -10°C.
■-Hydroxybenzotriazole 92my, N-
Add 92my of N-dicyclohexylcarbodiimide,
Stir for 2 hours.

ついで４８時間−１５℃の冷蔵庫に放置した。Then, it was left in a refrigerator at -15°C for 48 hours.

生成する不純物（Ｎ−Ｎ’−ジシクロヘキシル尿素）を
１去し、Ｐ液に酢酸エチル２０ｍ１を滴下し、冷室に１
８時間放置する。The generated impurity (N-N'-dicyclohexylurea) was removed, 20 ml of ethyl acetate was added dropwise to the P solution, and the mixture was placed in a cold room.
Leave for 8 hours.

かくして生成する沈でんを１取し０．５Ｍクエン酸水溶
液約１００ｒＩｌｌで洗い、次イテ、水、４％Ｎａ Ｈ
ＣＯｓ、水 各５０ｍ１で順に洗い、次にエーテル１０
ｍ１で洗って乾燥する。One portion of the precipitate thus formed was washed with about 100 liters of 0.5M citric acid aqueous solution, and then washed with water and 4% NaH.
Wash with 50ml each of COs and water, then 10ml of ether.
Wash with m1 and dry.

かくして参考例１におけると同様のデカペプチド誘導体
Ｂが得られる。In this way, a decapeptide derivative B similar to that in Reference Example 1 is obtained.

収量３６０■（収率５４％）。参考例 ４ Ｚ −Ｐｙｒ −Ｇｉｎ −Ａｓｐ （０Ｂｚｌ ）
−Ｔｙｒ −Ｔｈｒ −Ｇｌｙ −Ｔｒｐ −ＯＭｅ
（後記参考例８）５８．９■（０，０５ｍｍｏｌｅ）と
Ｍｅｔ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ ）−Ｐｈｅ−ＮＨ２・ＨＣ
ｌ （後記参考例７）２６．８５ｍ１ （０，０５ｍｍ
ｏｌｅ ） をＮ−Ｎ−ジメチルホルムアミド１ｍｌ
に溶かし、この溶媒に０．２ＭＣａＣ１。Yield: 360 cm (yield: 54%). Reference example 4 Z -Pyr -Gin -Asp (0Bzl)
-Tyr -Thr -Gly -Trp -OMe
(Reference Example 8 below) 58.9■ (0.05 mmole) and Met-Asp(OBzl)-Phe-NH2・HC
l (Reference example 7 below) 26.85m1 (0.05mm
ole ) in 1 ml of N-N-dimethylformamide
and 0.2M CaCl in this solvent.

０．０５ ｒａｉｌとｐＨ９，０の０．２Ｍトリス塩酸
緩衝液１ｒｎｌを加えた後、さらにα−キモトリプシン
２．５ｍ９を加え、室温で１０分間激しく振とうして反
応を行い、反応液から参考例１と同様の方法でデカペプ
チド誘導体８４．７ｍ９を得た。After adding 0.05 rail and 1 rnl of 0.2M Tris-HCl buffer with pH 9,0, 2.5 m9 of α-chymotrypsin was added, and the reaction was carried out by shaking vigorously at room temperature for 10 minutes. Decapeptide derivative 84.7m9 was obtained in the same manner as in Example 1.

参考例 ５ 原料として、参考例４におけると同様の２−Ｐｙｒ −
Ｇ ｉｎ −Ａｓｐ （０Ｂｚｌ ） −Ｔｙｒ −Ｔ
ｈｒ （Ｂｚｌ ） −Ｇｌｙ −Ｔｒｐ −ＯＭｅと
Ｍｅ ｔＡｓｐ （０Ｂｚｌ ） −Ｐｈｅ−ＮＨ３・
’ＨＣｌを用い、参考例３における合成法に準じて反応
精製を行い、参考例１におげろと同様のデカペプチド誘
導体Ｂを得た。Reference Example 5 As a raw material, 2-Pyr − similar to that in Reference Example 4 was used.
G in -Asp (0Bzl) -Tyr -T
hr (Bzl) -Gly -Trp -OMe and MetAsp (0Bzl) -Phe-NH3・
Reaction and purification was carried out using HCl according to the synthesis method in Reference Example 3 to obtain a decapeptide derivative B similar to Gero in Reference Example 1.

参考例 ６ Ｚ −Ｐｈｒ −Ｇｉｎ −Ａｓｐ （０Ｂｚｌ ）
−Ｔｙｒ −ＯＭｅ およびＺ −Ｐｙｒ −Ｇｉｎ
−Ａｓｐ （ＯＢｚｌ ）Ｔｙｒの合成： （イ） Ｚ−Ｐｙｒ −Ｇｉｎ −ＯＨ（製法は後記
）３．９１？ （１０ｍｍｏｌｅ）とＨ−Ａｓｐ （Ｏ
Ｂｚｌ ） −ＴｈｒＯＭｅ・トリフルオロ酢酸塩ＣＲ
ｏＨ，Ｍａｚｕｒ、Ｊ、 Ｍ、 ５ｃｈｌａｔｔｅｒ
ａｎｄ Ａ、 Ｈ９Ｇｏｌｄｋａｍｐ 、 Ｊ 。Reference example 6 Z -Phr -Gin -Asp (0Bzl)
-Tyr -OMe and Z -Pyr -Gin
Synthesis of -Asp (OBzl)Tyr: (a) Z-Pyr -Gin -OH (manufacturing method will be described later) 3.91? (10 mmole) and H-Asp (O
Bzl) -ThrOMe trifluoroacetate CR
oH, Mazur, J, M, 5chlatter
and A, H9Goldkamp, J.

Ａ、Ｃ，Ｓ、９１．２６８４（’６９））５．１５ｆ（
１０ｍｍｏｌｅ）をＮ−Ｎ−ジメチルホルムアミド１５
７７１１に溶かす。A, C, S, 91.2684 ('69)) 5.15f (
10 mmole) of N-N-dimethylformamide 15
Dissolve in 7711.

この溶液にメチルモリホリン１．０１Ｐを加え、−２０
℃に冷却した後、１−ハイドロキシベンゾトリアゾール
２．３（１、Ｎ−Ｎ’−シンクロヘキシルカルボジイミ
ド（ＤＣＣ） ２．２７１を加え、一晩攪拌した。Add 1.01P of methylmorpholine to this solution and -20
After cooling to <RTIgt;C,</RTI> 2.3 of 1-hydroxybenzotriazole (2.271 of 1, N-N'-synchrohexylcarbodiimide (DCC)) was added, and the mixture was stirred overnight.

生成する不溶物（Ｎ−Ｎ’−ジシクロヘキシル尿素）を
除去し、かくして得られる上清液を、０．５Ｍクエン酸
１００ｍ１に滴下する。The generated insoluble matter (N-N'-dicyclohexylurea) is removed, and the supernatant liquid thus obtained is added dropwise to 100 ml of 0.5M citric acid.

かくして生成する白色性でんを１取し、０．５Ｍクエン
酸、水、４％ＮａＨＣＯ３、水の順で十分洗滌した後、
Ｎ・Ｎ′−ジメチルホルムアミドに溶かし水を加えて晶
出し、Ｚ −Ｐｙｒ −Ｇｉｎ −Ａｓｐ （０Ｂｚｌ
）−Ｔｙｒ−ＯＭｅを得た。One portion of the white starch thus produced was thoroughly washed with 0.5M citric acid, water, 4% NaHCO3, and water in that order.
Dissolved in N・N'-dimethylformamide and added water to crystallize, Z -Pyr -Gin -Asp (0Bzl
)-Tyr-OMe was obtained.

収量４．５４Ｓ’（収率５９％）。Yield: 4.54 S' (yield: 59%).

このテトラペプチド誘導体の融点は１９９〜２０１℃、
〔α）１）−＋４２．９°（Ｎ−Ｎ−ジメチルホルムア
ミド、Ｃ＝２．０４）元素分析値（％）は、分析値 Ｃ
：６０．５０．Ｈ：５．７１、Ｎ：９．１１ 計算値
Ｃ：６０．５４、Ｈ： ５．６０．Ｎ： ９．０５で
あり、赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ 錠剤法による）
（以下、ＩＲスペクトル）を第３図に、核磁気共鳴スペ
クトル（ＮＭＲスペクトル）を第４図に示す。The melting point of this tetrapeptide derivative is 199-201°C,
[α) 1) -+42.9° (N-N-dimethylformamide, C = 2.04) Elemental analysis value (%) is analysis value C
:60.50. H: 5.71, N: 9.11 Calculated value C: 60.54, H: 5.60. N: 9.05, infrared absorption spectrum (by KBr tablet method)
(hereinafter referred to as an IR spectrum) is shown in FIG. 3, and a nuclear magnetic resonance spectrum (NMR spectrum) is shown in FIG.

（ロ） Ｚ −Ｐｙｒ −Ｇｉｎ −Ａｓｐ
（０Ｂｚｌ ） −ＴｙｒＯＭｅ からＺ −Ｐｙｒ
−Ｇ ｉｎ −Ａｓｐ （０Ｂｚｌ ）Ｔｙｒへの変
換は、次のようにして行った。(b) Z -Pyr -Gin -Asp
(0Bzl) -TyrOMe to Z -Pyr
-G in -Asp (0Bzl)Tyr was converted as follows.

Ｚ −Ｐｙｒ −Ｇｉｎ −Ａｓｐ （０Ｂｚｌ ）
−Ｔｙｒ −ＯＭｅ２．５０ ？ （３，２ｍｍｏｌｅ
）をＮ−Ｎ−ジメチルホルムアミド５０ｍ１に溶かし
、これを０．２ ＭＣａＣ１２５ｒｒＬｌ、 ｐＨ８
，７の０．２Ｍ）リス塩酸緩衝液５０ ｒｎｌと混合し
た。Z -Pyr -Gin -Asp (0Bzl)
-Tyr -OMe2.50? (3.2 mmole
) was dissolved in 50 ml of N-N-dimethylformamide, and this was dissolved in 0.2 MCaC125rrLl, pH 8.
, 7 of 0.2M) Lis-HCl buffer.

これにズブチリシンＢＰＮ’ （商品名 ナガゼ、長潮
産業社製）（１０２Ｘ １ ｏ’ＰＵ／ｍ９） ２０ｙ
ｎ９を加え、数分間室温で攪拌した後、ｐＨを５Ｎ−Ｈ
ＣＩ で２に調整すると白色法でんを生成する。To this, subtilisin BPN' (trade name Nagase, manufactured by Nagaushi Sangyo Co., Ltd.) (102X 1 o'PU/m9) 20y
After adding n9 and stirring at room temperature for several minutes, the pH was adjusted to 5N-H.
When CI is adjusted to 2, white color is produced.

これを１取し、十分水洗した後、熱メタノールから再結
晶することにより、Ｚ −Ｐｙｒ −Ｇｉｎ −Ａｓｐ
（０Ｂｚｌ ）−Ｔｙｒを得た。One portion of this was taken, thoroughly washed with water, and then recrystallized from hot methanol to give Z -Pyr -Gin -Asp.
(0Bzl)-Tyr was obtained.

収量２．３５Ｓ’（収量９７％）。Yield 2.35S' (97% yield).

このものの理化学的性質は次の通りである。The physical and chemical properties of this substance are as follows.

（１）融点 ２０３〜２０４℃ （２）〔α〕貧−−２５．３°（Ｎ −Ｎ−ジメチルホ
ルムアミド、Ｃ＝１．０２） （３）元素分析値（％） ＣＨＮ 分析値 ５９．８３ ５．４５ ９．０６計算値 ６０
．０７ ５．４４ ９．２２（４） ＩＲスペクトル
を第５図に示す。(1) Melting point 203-204°C (2) [α] poor -25.3° (N -N-dimethylformamide, C = 1.02) (3) Elemental analysis value (%) CHN analysis value 59.83 5.45 9.06 Calculated value 60
．． 07 5.44 9.22 (4) The IR spectrum is shown in FIG.

（５）ＮＭＲスペクトルを第６図に示す。(5) The NMR spectrum is shown in FIG.

←） Ｚ −Ｐｙｒ −Ｇｉｎ −ｏＨの合成：Ｚ
−Ｐｙｒ −ＯＨ２５Ｐ、 Ｎ、−オキンコハク酸イミ
ド１０．９１？、 Ｎ−Ｎ’−ジシクロへキシルカルボ
ジイミド１９．５７？に、ジオキサン１７５ｍ１および
クロロホルム２５Ｔｔｌを加えて、−１０℃下、一夜攪
拌した。←) Synthesis of Z -Pyr -Gin -oH: Z
-Pyr -OH25P, N, -oxinsuccinimide 10.91? , N-N'-dicyclohexylcarbodiimide 19.57? 175 ml of dioxane and 25 Ttl of chloroform were added thereto, and the mixture was stirred at -10°C overnight.

生成する不溶物（Ｎ−Ｎ’−ジシクロヘキシル尿素）を
除去し、涙液を蒸発乾固し、残渣を酢酸エチルに溶かし
、不溶物を除いて、涙液を濃縮することにより結晶を得
た。The resulting insoluble matter (N-N'-dicyclohexylurea) was removed, the tear fluid was evaporated to dryness, the residue was dissolved in ethyl acetate, the insoluble matter was removed, and the tear fluid was concentrated to obtain crystals.

収量２７．１１（収率７９．２％）。上記で得られた結
晶全量をアセトニ） ＩＪル４００ｍ１に溶かし、この
溶液に、Ｇ ｉｎ （グルタミン）１３．８８ｆとＮａ
ＨＣＯ３７，９８Ｆを含有する水溶液を滴下し、室温で
一夜攪拌する。Yield: 27.11 (79.2% yield). Dissolve the entire amount of the crystals obtained above in 400 ml of acetonate, add 13.88f of G in (glutamine) and Na
Add dropwise an aqueous solution containing HCO37,98F and stir overnight at room temperature.

ついで、この反応液のｐＨを５Ｎ ＨＣＩ で１に調
整し、濃縮すると白色の沈でんが生ずる。The pH of the reaction solution was then adjusted to 1 with 5N HCI and concentrated to produce a white precipitate.

該沈でんを一夜、水冷下に保ち、ついで濾過し、冷エー
テルで結晶を洗滌する。The precipitate is kept under water cooling overnight, then filtered and the crystals washed with cold ether.

該結晶を、熱メタノールに溶かし、−夜水冷下を保ち、
１過し、涙液を減圧下で濃縮することにより１５．７６
Ｐ（収率５４．０％）のＺ −Ｐｙｒ −Ｇｌｎ −Ｏ
Ｈを得た。The crystals were dissolved in hot methanol and kept under water cooling overnight.
15.76 by filtration and concentrating the lachrymal fluid under reduced pressure.
Z -Pyr -Gln -O of P (yield 54.0%)
I got H.

このものの理化学的性質は次の通りであった。The physical and chemical properties of this product were as follows.

（１）融点 １８１〜１８２℃ （２）〔α〕冒−−１７．７°（Ｎ−Ｎ−ジメチルホル
ムアミド、Ｃ＝１．０１） （３）元素分析値（％） ＨＮ 分析値 ５４．９６ ５．４９ １０．５２計算値 ５
５．２４ ５．４１ １０．７４参考例 ７ （イ） Ｔｈｒ （Ｂｚｌ ）−Ｇｌｙ −Ｔｒ
ｐ −ＭｅｔＡｓｐ （０Ｂｚｌ ） −Ｐｈｅ−ＮＨ
２の合成：Ｂｏｃ −Ｔｈｒ （Ｂｚｌ ） −Ｇｌｙ
−Ｔ ｒｐ （後記の方法により製造） ５２４７ｎ
９（１ｍｍｏｌｅ ） とＭｅｔ −Ａｓｐ （０Ｂ
ｚｌ ） −Ｐｈｅ−ＮＨ２・ＫＣ１（後記の方法によ
り）５３７■（１汎ｍｏｌｅ ）を、Ｎ−Ｎ−ジメチル
ホルムアミド２ＴＬｌに溶かし、ＩＮ ＮａＯＨ１ｍ
ｌ、０．０２゛Ｍ Ｃａ （ＯＣＯＣＨｓ ） ２１ ｍｌ、 ｐＨ７，０
のＭｃ Ｉ Ｌｉｎｅ緩衝液５ｍｌを加えた後、サー
モライシン（中性プロテアーゼ）（゛犬和化或社製）（
９３９０ＰＵ／Ｔ／ｖ？） ２００ｍ９を加え、３０°
Ｃで２０時間聞損５した。(1) Melting point 181-182°C (2) [α] -17.7° (N-N-dimethylformamide, C = 1.01) (3) Elemental analysis value (%) HN analysis value 54.96 5.49 10.52 Calculated value 5
5.24 5.41 10.74 Reference example 7 (a) Thr (Bzl)-Gly-Tr
p-MetAsp(0Bzl)-Phe-NH
Synthesis of 2: Boc-Thr(Bzl)-Gly
-Trp (manufactured by the method described below) 5247n
9 (1 mmole) and Met-Asp (0B
zl) -Phe-NH2・KC1 (by the method described below) 537■ (1 pan mole) was dissolved in 2TL of N-N-dimethylformamide, and 1 m of IN NaOH was added.
l, 0.02゛M Ca (OCOCHs) 21 ml, pH 7.0
After adding 5 ml of Mc I Line buffer, thermolysin (neutral protease) (manufactured by Inuwaka Co., Ltd.) (
9390PU/T/v? ) Add 200m9, 30°
I lost 5 for 20 hours on C.

かくして析出した白色法でんを１取し、該沈でんを０．
５Ｍクエン酸、水、４％ＮａＨＣＯ３、水の順で洗滌し
、ついでＮ−Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶かし、これ
に酢酸エチルを加えて晶出し、Ｂｏｃ −Ｔｈｒ （Ｂ
ｚｌ ）Ｇｌｙ −Ｔｒｐ −Ｍｅｔ −Ａｓｐ （０
Ｂｚｌ ） ＰｈｅＮＨ２を得た。One portion of the white precipitate thus precipitated was taken, and the precipitate was reduced to 0.
It was washed with 5M citric acid, water, 4% NaHCO3, and water in that order, then dissolved in N-N-dimethylformamide, and crystallized by adding ethyl acetate to obtain Boc-Thr (B
zl ) Gly -Trp -Met -Asp (0
Bzl) PheNH2 was obtained.

収量４６１ｍ９（収率４５％）。このものの理化学的性
質は次の通りである。Yield: 461 m9 (yield: 45%). The physical and chemical properties of this substance are as follows.

（１）融点 ２０４〜２０５°Ｃ （２）〔α〕宕−−２６．９° （Ｎ −Ｎ−ジメチル
ホルムアミド、Ｃ−１） （３）元素分析値（％） ＨＮ 分析値 ６２．５３ ６．４２ １０．６１計算値 ６
２．４１ ６．５１ １０．６２（４）アミノ酸分析値
（６ＮＨＣ１中、１１０℃で２４時間加水分解） Ａｓｐ（１，０３） （分子）、Ｔｈｒ （１，０）、
Ｇｕｙ（１，０）、Ｍｅｔ （０，８６）、Ｐｈｅ（１
，０８）。(1) Melting point 204-205°C (2) [α] -26.9° (N -N-dimethylformamide, C-1) (3) Elemental analysis value (%) HN analysis value 62.53 6 .42 10.61 Calculated value 6
2.41 6.51 10.62 (4) Amino acid analysis value (hydrolyzed in 6NHC1 at 110°C for 24 hours) Asp (1,03) (molecule), Thr (1,0),
Guy (1,0), Met (0,86), Phe (1
, 08).

（ロ） Ｂｏｃ−Ｔｈｒ （Ｂｚｌ ）−Ｇｌ
ｙ−Ｔｒｐ −Ｍｅｔ−Ａｓｐ （ＯＢｚｌ ）−Ｐｈ
ｅ−ＮＨ２からＴｈｒ （Ｂｚｌ ） −Ｇｌｙ−Ｔｒ
ｐ −ＭｅｔＡｓｐ （０Ｂｚｌ ） −Ｐｈｅ −Ｎ
Ｈ２の合成：Ｂｏｃ −Ｔｈｒ （Ｂｚｌ ） −Ｇｌ
ｙ−Ｔ ｒｐ −ＭｅｔＡｓｐ （０Ｂｚｌ ） −Ｐ
ｈｅ−ＮＨ２Ｏ，５１？をギ酸５０ｒｒＬｌに溶かし、
室温で、減圧下２時間攪拌する。(b) Boc-Thr (Bzl)-Gl
y-Trp-Met-Asp (OBzl)-Ph
e-NH2 to Thr (Bzl) -Gly-Tr
p-MetAsp(0Bzl)-Phe-N
Synthesis of H2: Boc-Thr(Bzl)-Gl
y-Trp-MetAsp(0Bzl)-P
he-NH2O,51? Dissolve in 50rrLl of formic acid,
Stir at room temperature under reduced pressure for 2 hours.

ついで室温で蒸発乾固し、残渣にエーテル（無水）を加
えて粉末とし、ついでこれを真空乾燥する。It is then evaporated to dryness at room temperature, and ether (anhydrous) is added to the residue to form a powder, which is then dried in vacuo.

かくしてＴｈｒ （Ｂｚｌ ） −ＧｌｙＴｒｐ −Ｍ
ｅｔ −Ａｓｐ （０Ｂｚｌ ）Ｐｈｅ−ＮＨ２・ＨＣ
ＯＯＨを得た。Thus Thr (Bzl) −GlyTrp −M
et -Asp (0Bzl)Phe-NH2・HC
Got OOH.

収量０．３６Ｐ（収率７４％）。Yield 0.36P (yield 74%).

このもののＩＲスペクトルを第７図に示す。The IR spectrum of this product is shown in FIG.

←→ Ｂｏｃ −Ｔｈｒ （Ｂｚｌ ） −Ｇｌｙ−Ｔ
ｒｐの合成：Ｂｏｃ −Ｔｈｒ （Ｂｚｌ ） −Ｇｌ
ｙ −Ｔｒｐ −ＯＭｅ（後記）２．４３ＰをＮ−Ｎ−
ジメチルホルムアミド２５Ｍに溶解し、これに０．２
Ｍ トリス塩酸緩衝液（ｐＨ８，８） ５ Ｑｍｌを加
え、さラニナカーゼ（長潮産業社製）（１０２×１０４
ＰＵ／／Ｔｎ９）１０■を加え、室温で約２時間攪拌す
る。←→ Boc -Thr (Bzl) -Gly-T
Synthesis of rp: Boc-Thr(Bzl)-Gl
y -Trp -OMe (later) 2.43P to N-N-
Dissolved in 25M dimethylformamide and added 0.2
Add 5 Qml of M Tris-HCl buffer (pH 8.8) and add Saraninacase (manufactured by Nagashio Sangyo Co., Ltd.) (102 x 104
Add 10 cm of PU//Tn9) and stir at room temperature for about 2 hours.

ついで、水冷下で、溶液のｐＨを５ＮＨＣ１で２に調整
し、酢酸エチル５００ｍ１で抽出する。Then, under water cooling, the pH of the solution was adjusted to 2 with 5N HCl and extracted with 500 ml of ethyl acetate.

抽出酢酸エチル層を無水硫酸ソーダで乾燥する。The extracted ethyl acetate layer is dried with anhydrous sodium sulfate.

ついでこの酢酸エチル層液を濃縮し、無水エーテルでト
リチュレート（ｔｒｉｔｕｒａｔｅ ）する。The ethyl acetate layer is then concentrated and triturated with anhydrous ether.

得られた白色粉末を汗過し、真空下に乾燥すると、Ｂｏ
ｃ −Ｔｈｒ （Ｂｚｌ ） −Ｇｌｙ −Ｔｒｐが得
られる。The resulting white powder is sweated and dried under vacuum, resulting in Bo
c-Thr(Bzl)-Gly-Trp is obtained.

収量１．７１’（収率５５．７％）。このもののＩＲス
ペクトル、ＮＭＲスペクトルを第８図、第９図にそれぞ
れ示す。Yield 1.71' (yield 55.7%). The IR spectrum and NMR spectrum of this product are shown in FIGS. 8 and 9, respectively.

に）Ｂｏｃ −Ｔｈｒ （Ｂｚｌ ） −Ｇｌｙ −Ｔ
ｒｐ −ＯＭｅの合成： Ｂｏａ −Ｇｌｙ −ＯＨＯ，３５０？、Ｈ−Ｔｒｐ−
ＯＭｅ −ＨＣｌ ０．４７３ ？を５ｍｌのＮ−Ｎ−
ジメチルホルムアミドに溶解し、これにＮ−メチルモル
ホリン０．１１０１ｎｌ、ハイドロキシベンゾトリアゾ
ール０．２３０グ、ＤＣＣｏ、２７７１を加え、−１５
℃で２時間攪拌する。) Boc -Thr (Bzl) -Gly -T
Synthesis of rp-OMe: Boa-Gly-OHO,350? , H-Trp-
OMe-HCl 0.473? 5 ml of N-N-
Dissolve in dimethylformamide, add 0.1101 nl of N-methylmorpholine, 0.230 g of hydroxybenzotriazole, DCCo, 2771, -15
Stir at ℃ for 2 hours.

ついで室温で一夜放置し、生成した不溶物（Ｎ −Ｎ’
−ジシクロヘキシル尿素）を汗過する。Then, it was left to stand overnight at room temperature, and the formed insoluble matter (N-N'
-dicyclohexylurea) through sweating.

層液を濃縮乾固し、残渣を酢酸エチルに溶解する。The layer solution is concentrated to dryness and the residue is dissolved in ethyl acetate.

ついで、酢酸エチル溶液を０．５Ｍクエン酸溶液、水、
４％ＮａＨＣＯ３、水の順で洗滌する。Then, the ethyl acetate solution was mixed with 0.5M citric acid solution, water,
Wash with 4% NaHCO3 and water in this order.

酢酸エチル溶液を無水硫酸ソーダで乾燥し、ついで濃縮
し、無水エーテルでトリチュレートする。The ethyl acetate solution is dried over anhydrous sodium sulfate, then concentrated and triturated with anhydrous ether.

得られる沈でんを１過し、真空下に乾燥することにより
、Ｂ ｏｃ −Ｇ ｌｙ −Ｔ ｒｐ −ＯＭｅを得た
。The resulting precipitate was filtered once and dried under vacuum to obtain Boc-Gly-Trp-OMe.

収量０．４６４Ｐ（収率６５，１％）。Yield 0.464P (yield 65.1%).

このものの理化学的性質は次の通りである。The physical and chemical properties of this substance are as follows.

（１）融点 １３０〜１３２℃ （２）〔α：］’、；’−＋１２．８°（メタノール、
Ｃ−１，０） （３）元素分析値（％） ＨＮ 分析値 ６０．７６ ６．７８ ］、１．１８計算値
６０．７８ ６．７１ １１．１９上記において得ら
れたＢｏａ −Ｇｌｙ−Ｔｒｐ −ＯＭｅ （約０．
４６４Ｐ）を９８％のギ酸に溶解し、室温で２時間攪拌
する。(1) Melting point 130-132°C (2) [α:]',;'-+12.8° (methanol,
C-1,0) (3) Elemental analysis value (%) HN analysis value 60.76 6.78 ], 1.18 Calculated value 60.78 6.71 11.19 Boa-Gly-Trp obtained above -OMe (approximately 0.
464P) in 98% formic acid and stirred at room temperature for 2 hours.

ついで室温で減圧下蒸発乾固し、これに無水エーテルを
加えてトリチュレートし、得られる白色の粉末をと刑し
、これを集めて真空下で乾燥する。It is then evaporated to dryness under reduced pressure at room temperature, triturated with anhydrous ether, and the resulting white powder is burnt and collected and dried under vacuum.

かくしてＨ−Ｇｌｙ −Ｔｒｐ−ＯＭｅ −ＨＣｏＯＨ
０，３２１？ （収率８４．６％）を得た。Thus H-Gly-Trp-OMe-HCoOH
0,321? (yield 84.6%).

ついで上記の如くして得られたＢｏｃ Ｔｈｒ （Ｂｚｌ ） −ＯＨ３，０９？、Ｈ−Ｇｕｙ
Ｔｒｐ−ＯＭｅ −ＨＣｏＯＨ２，９１？をＮ−Ｎ−ジ
メチルホルムアミド２０ｍ１に溶かしこれにＮ−メチル
モルホリン１．１Ｑ１ｒＬｌ、ハイドロキシベンゾトリ
アゾール２．３０グ、ＤＣＣ２，２７グを加え、−１０
℃で５時間攪拌する。Then, Boc Thr (Bzl) -OH3,09? obtained as above. , H-Guy
Trp-OMe-HCoOH2,91? was dissolved in 20 ml of N-N-dimethylformamide, and 1.1 Q1 rL of N-methylmorpholine, 2.30 g of hydroxybenzotriazole, and 2.27 g of DCC were added to give -10
Stir at ℃ for 5 hours.

ついで室温で一夜攪拌し、生成した不溶物（Ｎ−Ｎ’−
ジシクロヘキシル尿素）を１過する。Then, it was stirred at room temperature overnight to remove the formed insoluble matter (N-N'-
dicyclohexylurea).

Ｐ液を濃縮乾固し、残渣を酢酸エチル２００ ｒｎｌに
溶解し、ついで０．５Ｍクエン酸溶液、水、４％ＮａＨ
ＣＯ３、水の順で洗滌する。The P solution was concentrated to dryness, the residue was dissolved in 200 rnl of ethyl acetate, and then 0.5M citric acid solution, water, 4% NaH
Wash with CO3 and water in that order.

酢酸エチル溶液を、無水硫酸ソーダで乾燥し、ついで濃
縮し、無水エーテルでトリチュレートする。The ethyl acetate solution is dried over anhydrous sodium sulfate, then concentrated and triturated with anhydrous ether.

得られる白色粉末をｐ別し、これを集めて真空下で乾燥
することにより、Ｂｏｃ −Ｔｈｒ （Ｂｚｌ ） −
Ｇｌｙ −Ｔｒｐ −ＯＭｅ を得た。The resulting white powder was separated, collected and dried under vacuum to produce Boc-Thr (Bzl)-
Gly-Trp-OMe was obtained.

収量（５，３２Ｐ（収率９８．８％）。このものの理化
学的性質は次の通りである。Yield (5,32P (yield 98.8%). The physical and chemical properties of this product are as follows.

（１）融点 ２２４〜２２５°Ｃ （２）〔α）２２ ＝＝ ９．１° （メタノール、Ｃ
＝１．０）（３）元素分析値（％） ＣＨＮ 分析値 ６９．３２ １０．９６ １２．３３計算値
６９．３１ １０．６６ １２．５１（４）ＮＭＲスペ
クトルを第１０図に示す。(1) Melting point 224-225°C (2) [α)22 == 9.1° (methanol, C
=1.0) (3) Elemental analysis value (%) CHN Analysis value 69.32 10.96 12.33 Calculated value
69.31 10.66 12.51 (4) The NMR spectrum is shown in FIG.

」二記の方法において得られたＢｏｃ Ｔｈｒ （Ｂｚｌ ） −Ｇｌｙ −Ｔｒｐ−ＯＭｅか
らのＴｈｒ （Ｂｚｌ ） −Ｇｌｙ −Ｔｒｐ−ＯＭ
ｅの合成は、上記のＢ ｏｃ −Ｇ ｌｙ −Ｔ ｒｐ
−ＯＭｅからＨＧ ｌｙ −Ｔ ｒｐ −ＯＭｅの合
成法に準じて行った。Thr(Bzl)-Gly-Trp-OM from Boc Thr(Bzl)-Gly-Trp-OMe obtained by the method described in ``2.
The synthesis of e is the above B oc -G ly -T rp
This was carried out according to the method for synthesizing HG ly -T rp -OMe from -OMe.

（ｎ Ｍｅｔ −Ａｓｐ （０Ｂｚｌ ） −Ｐｈｅ
−ＮＨ２・ＨＣｌの合成： ｐＭｚ −Ｍｅｔ −Ａｓｐ （０Ｂｚｌ ） −Ｐｈ
ｅＮＨ２（後記の方法にまり合成）０．４０５Ｐを１０
ｍ１の３．２ Ｎ ＨＣｌ −酢酸エチルに溶かし
、室温で約１時間攪拌する。(nMet-Asp(0Bzl)-Phe
-NH2・HCl synthesis: pMz -Met -Asp (0Bzl) -Ph
eNH2 (synthesized by the method described below) 0.405P to 10
Dissolve in ml of 3.2 N HCl-ethyl acetate and stir at room temperature for about 1 hour.

ついでこの溶液を濃縮し、濃縮液を無水エーテルでトリ
チュレートする。The solution is then concentrated and the concentrate is triturated with anhydrous ether.

得られる粉末を濾過し、真空乾燥すると、Ｍｅｔ −Ａ
ｓｐ （０Ｂｚｌ ） −Ｐｈｅ−ＮＨ２・ＨＣ１０，
２８６１（収率８７，４％）が得られる。The resulting powder was filtered and dried under vacuum to give Met-A
sp (0Bzl) -Phe-NH2・HC10,
2861 (yield 87.4%) is obtained.

このものの理化学的性質は次の通りである。The physical and chemical properties of this substance are as follows.

（１）融点 ２０１〜２０２℃ （２）〔α） ２２−ｓ、 ７°（Ｎ−Ｎ−ジメチルホ
ルムアミ ド、Ｃ＝１．０） （３）元素分析値（％） ＨＮ 分析値 ５５．６４ ６．１６ １０．２３割１値 ５
５．９１ ６．１９ １０．４３（４）ＮＭＲスペクト
ルを第１１図に示す。(1) Melting point 201-202℃ (2) [α) 22-s, 7° (N-N-dimethylformamide, C=1.0) (3) Elemental analysis value (%) HN analysis value 55. 64 6.16 10.23% 1 value 5
5.91 6.19 10.43 (4) The NMR spectrum is shown in FIG.

ＨＰｍｚ −Ｍｅｔ −Ａｓｐ （０Ｂｚｌ ） −Ｐ
ｈｅ −ＮＨ２０合成： Ｐｍｚ −Ａｓｐ （０Ｂｚｌ ） −ＯＨ３，７０？
、ＨＰｈｅ−ＮＨ４Ｉ、 ６４ ？を１． □ ｍｌの
Ｎ−Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解し、これにヒドロ
キシベンゾトリアゾール２．３１’、ジシクロヘキシル
カルボジイミド２．２１’を加え、−１０°Ｃで約４時
間攪拌する。HPmz -Met -Asp (0Bzl) -P
he -NH20 synthesis: Pmz -Asp (0Bzl) -OH3,70?
, HPhe-NH4I, 64? 1. □ Dissolve in mL of N-N-dimethylformamide, add 2.31' of hydroxybenzotriazole and 2.21' of dicyclohexylcarbodiimide, and stir at -10°C for about 4 hours.

ついでさらに室温で１夜攪拌する。Then, the mixture was further stirred at room temperature overnight.

生成した不溶物を１去し、１液を室温で濃縮する。The generated insoluble matter is removed, and the resulting solution is concentrated at room temperature.

残渣を約３００ｍＡの酢酸エチルに溶解し、この酢酸エ
チル溶液を３００ｍ１の０．５Ｍクエン酸水溶液、４０
０ｒｎｌの水、３００ｍ１の４％ＮａＨＣＯ３溶液、４
００ｍ１の水で洗滌する。The residue was dissolved in ethyl acetate at about 300 mA, and the ethyl acetate solution was mixed with 300 ml of 0.5 M citric acid aqueous solution, 40
0rnl water, 300ml 4% NaHCO3 solution, 4
Wash with 00ml of water.

ついで、この酢酸エチル溶液を無水硫酸ソーダで乾燥し
た後、濃縮乾固し、残渣を約４０ｍ１の熱メタノールに
溶解する。The ethyl acetate solution is then dried over anhydrous sodium sulfate, concentrated to dryness, and the residue is dissolved in about 40 ml of hot methanol.

この溶液を一夜、冷蔵庫中（５℃）に保存すると結晶が
晶出する。If this solution is stored in the refrigerator (5°C) overnight, crystals will crystallize.

これを濾過して真空乾燥する。収量３．９８１（収率７
７．２％）。This is filtered and vacuum dried. Yield 3.981 (yield 7
7.2%).

上記で得られた結晶３９８ｚをトリフロロ酢酸４０ｍ１
、アニソール８ｍｌの混合溶液に溶解し、室温で約１時
間攪拌する。The crystal 398z obtained above was mixed with 40ml of trifluoroacetic acid.
, dissolved in a mixed solution of 8 ml of anisole, and stirred at room temperature for about 1 hour.

ついでこの溶液を室温で濃縮する。The solution is then concentrated at room temperature.

濃縮残渣を２００ｍ１の無水エーテルでトリチュレート
して得られた結晶を濾過し、真空乾燥すると、３３６グ
のＨ−Ａｓｐ （０Ｂｚｌ ） −Ｐｈｅ −ＮＨ２ト
リフルオロ酢酸塩が得られる。The concentrated residue is triturated with 200 ml of anhydrous ether, and the resulting crystals are filtered and dried in vacuo, yielding 336 g of H-Asp (0Bzl) -Phe -NH2 trifluoroacetate.

収率９３．４％。ＮＭＲスペクトルを第１２図に示す。Yield 93.4%. The NMR spectrum is shown in FIG.

上記で得られたＨ −Ａｓｐ （０Ｂｚｌ ）Ｐｈｅ−
ＮＨ２・トリフルオロ酢酸塩０．４６１’。H-Asp(0Bzl)Phe- obtained above
NH2.trifluoroacetate 0.461'.

Ｐｍｚ −Ｍｅｔ −ＯＨ０，２９６’ｉｆ、Ｎ−メチ
ルモルホリンＱ、ｌｌＱｍｌ、ハイドロキシベンゾトリ
アゾール０．２３０グ、ＤＣＣＯ，２２７Ｌｉ？、Ｄ■
’ ５．Ｑｌｎｌを加え、−１０’Ｃで１０時間攪拌
する。Pmz -Met -OH0,296'if, N-methylmorpholine Q, 11Qml, hydroxybenzotriazole 0.230 g, DCCO, 227Li? , D ■
'5. Add Qlnl and stir at -10'C for 10 hours.

不溶物を戸去し、ｒ液を室温で濃縮する。残渣を１００
縦の酢酸エチルに溶解し、２００ｍ１の０．５Ｍクエン
酸水溶液、２００ｍ１の水、２００ｒｒＬｌの４％重曹
水、２００ｍＡの水で洗浄し、次いで酢酸エチル層を無
水硫酸ソーダで乾燥後、濃縮する。Insoluble materials were removed and the r solution was concentrated at room temperature. 100% residue
Dissolve in vertical ethyl acetate, wash with 200ml of 0.5M citric acid aqueous solution, 200ml of water, 200rrLl of 4% sodium bicarbonate solution, and 200mA of water, then dry the ethyl acetate layer over anhydrous sodium sulfate and concentrate.

濃縮残渣を１ｏｍ、ｌの熱メタノールにとかし、一夜冷
蔵庫（＋５℃）中で保存すると結晶化する。The concentrated residue is dissolved in 1 om, l hot methanol and crystallized when stored overnight in the refrigerator (+5°C).

この結晶を濾過し、真空乾燥する。１０ｍ１の熱メタノ
ールで同様に再結晶をくり返すと、０．４０５Ｐのｐｍ
ｚ −Ｍｅｔ Ａｓｐ （ＯＢ ｚｌ ） −Ｐｈｅ −ＮＨ２が得ら
れる。The crystals are filtered and dried under vacuum. When recrystallization is repeated in the same manner with 10ml of hot methanol, the pm of 0.405P is obtained.
z-Met Asp (OB zl )-Phe-NH2 is obtained.

（収率６０．９％） このものの埋でヒ学的性質は次の通りである。(yield 60.9%) The theoretical properties of this are as follows.

（１）融点 １８１〜１８２℃ （２）〔α）２２−＋１４．５° （メタノール、Ｃ１
，０） （３）元素分析値（％） ＣＨＮ 分析値 ６１．４５ ６，０２ ８．４３計算値 ６１
．３６ ６．０１ ８．５２参考例 ８ Ｚ −Ｐｙｒ −Ｇｌｎ −Ａｓｐ （０Ｂｚｌ ）
−Ｔｙｒ −Ｔｈｒ （Ｂｚｌ ） −Ｇ ｌｙ −Ｔ
ｒｐ−ＯＭｅの合皮：Ｚ−Ｐｙｒ −Ｇｌｎ −Ａｓ
ｐ （０Ｂｚｌ ） −Ｔｙｒ （参考例６ ） ７６
■（０，１ｍｍｏｌｅ ）とＴｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｇｌｙ
−Ｔｒｐ −ＯＭｅ−ｐ −トルエンスルボン酸塩（参
考例７ ） ６４ｍｐ（０，１ｍｍｏｌｅ ）をＮ−Ｎ
−ジメチルホルムアミド０．６ ｍｌに溶がし、この溶
液にｐＨ４，０のＭｅ Ｉ １ｖａｉｎ緩衝液１．．２
ｍｌを加えた後、さらに酸性プロテアー−Ｍｎ２Ｏ３１
０■を加え、３０℃で１２時間聞損う下、反応を行った
。(1) Melting point 181-182°C (2) [α)22-+14.5° (methanol, C1
,0) (3) Elemental analysis value (%) CHN Analysis value 61.45 6,02 8.43 Calculated value 61
．． 36 6.01 8.52 Reference example 8 Z -Pyr -Gln -Asp (0Bzl)
-Tyr -Thr (Bzl) -G ly -T
rp-OMe synthetic leather: Z-Pyr -Gln -As
p (0Bzl) -Tyr (Reference Example 6) 76
■(0,1mmole) and Thr(Bzl)-Gly
-Trp -OMe-p -Toluenesulfonate (Reference Example 7) 64mp (0.1 mmole) was added to N-N
- Dissolved in 0.6 ml of dimethylformamide, and added 1.0 ml of Me I 1 vain buffer at pH 4.0 to this solution. ．． 2
After adding ml, further acidic protea-Mn2O31
The reaction was carried out at 30° C. for 12 hours without heating.

かくして析出する白色法でんを汗取し、これを０．５Ｍ
クエン酸、水、４％ＮａＨＣＯ３，水の順で洗滌し、Ｎ
−Ｎ−ジメチルホルムアミドで平衡ｆヒしたセファデッ
クスＬＨ−２０によりカラムクロマトグラフィーを行い
、活性区分を濃縮し、残渣を凍結乾燥し、４．０ ｍ９
（収率３２，８％）の２Ｐｙｒ −Ｇ］、ｎ −Ａｓｐ
（０Ｂｚｌ ） ＴｙｒＴｈｒ （Ｂｚｌ ） −
Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−ＯＭｅ −Ｈ２Ｏを得た。Sweat off the precipitated white starch and add it to 0.5M
Wash in the order of citric acid, water, 4% NaHCO3, and water, and
Column chromatography was performed using Sephadex LH-20 equilibrated with -N-dimethylformamide, the active fraction was concentrated, and the residue was lyophilized to 4.0 m9
(yield 32.8%) of 2Pyr-G], n-Asp
(0Bzl) TyrThr (Bzl) −
Gly-Trp-OMe-H2O was obtained.

このものの理ｆヒ学的性状は次の通りであった。（１）
〔α）２２−５．６° （Ｃ＝１．０、Ｎ−Ｎ−ジメチ
ルホルムアミド） （２）元素分析値（％） ＨＮ 分析値 ６１．６４ ５．８１ １０．１４計算値 ６
１．７０ ５．８４ １０．２８（３）アミノ酸分析値
（６ＮＨＣ１中、１１０℃で２４時間加水分解） Ｇ、Ａ ２．０９（分子）、Ａ８ｐ １．０６、Ｔｙ
ｒ Ｏ，６５、Ｔｈｒ １．００、ｃｘｙ １．
００゜上記の方法において、Ｔｈｒ （Ｂｚｌ ） −
ＧｌｙＴ ｒｐ −ＯＭｅ −ｐ −）ルエンスルホン
酸塩の代りに、Ｔｈｒ −Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−ＯＭｅ−ｐ
＝トルエンスルホン酸塩を用いた他は同様に反応を行い
、ＺＰｙｒ −ＧＩｎ−Ａｓｐ （０Ｂｚｌ ） −Ｔ
ｙｒ −Ｔｈｒ −Ｇｌｙ −Ｔｒｐ −ＯＭｅ−Ｈ２
Ｏを得た。The theoretical properties of this product were as follows. (1)
[α) 22-5.6° (C=1.0, N-N-dimethylformamide) (2) Elemental analysis value (%) HN Analysis value 61.64 5.81 10.14 Calculated value 6
1.70 5.84 10.28 (3) Amino acid analysis value (hydrolyzed in 6NHC1 at 110°C for 24 hours) G, A 2.09 (molecule), A8p 1.06, Ty
r O, 65, Thr 1.00, cxy 1.
00° In the above method, Thr (Bzl) −
Thr -Gly-Trp-OMe-p instead of GlyT rp -OMe -p -)luenesulfonate
The reaction was carried out in the same manner except that = toluenesulfonate was used, and ZPyr -GIn-Asp (0Bzl) -T
yr -Thr -Gly -Trp -OMe-H2
I got an O.

このものの埋ｆヒ学的性質は次の通りであった。The mechanical properties of this material were as follows.

（１）融点 １９６〜２０１’Ｃ （２） Ｃａ〕”：＝−１，４，７°（Ｃ＝１．０．Ｎ
−Ｎ−ジメチルホルムアミド） （３）元素分析値（％） ＨＮ 分析値 ５９．０２ ５．５９ １０．８２計算値 ５
９．２０ ５．７７ １１．０９(1) Melting point 196-201'C (2) Ca〕":=-1,4,7°(C=1.0.N
-N-dimethylformamide) (3) Elemental analysis value (%) HN Analysis value 59.02 5.59 10.82 Calculated value 5
9.20 5.77 11.09

【図面の簡単な説明】[Brief explanation of drawings]

第１図、第２図は、本件の実施例で得られたセルレイン
のそれぞれＩＲスペクトル、ＮＭＲスペクトルを示す。 第３図、第４図は、Ｚ−ＰｙｒＧｌｎ −Ａｓｐ （０
Ｂｚｌ ） −Ｔｙｒ −ＯＭｅのそれぞれＩＲスペク
トル、ＮＭＲスペクトルを示す。 第５図、第６図は、Ｚ −Ｐｙｒ −Ｇｉｎ −Ａｓｐ
（０Ｂｚｌ ）−ＴｙｒのそれぞれＩＲスペクトル、
ＮＭＲスペクトルを示す。 第７図は、Ｔｈｒ （Ｂｚｌ ） −Ｇｌｙ −Ｔｒｐ
−Ｍｅｔ −Ａｓｐ （０Ｂｚｌ ） −Ｐｈｅ −
ＮＨ２・ＨＣＯＯＨのＩＲスペクトルを示す。 第８図、第９図は、Ｂｏｃ −Ｔｈｒ （Ｂｚｌ ）
−Ｇｌｙ −ＴｒｐのそれぞれＩＲスペクトル、ＮＭＲ
スペクトルをボす。 第１０図は、Ｂｏｃ −Ｔｈｒ （Ｂｚｌ ） −Ｇｌ
ｙ −Ｔ ｒｐ −ＯＭｅのＮＭＲスペクトルを示す。 第１１図は、Ｍｅｔ −Ａｓｐ （０Ｂｚｌ ） −Ｐ
ｈｅＮＨ２・ＨＣＩのＮＭＲスペクトルを示す。 第１２図は、Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｐｈｅ−ＮＨ２・Ｈ
ＣｌのＮＭＲスペクトルを示す。 第１３図は、デカペプチド誘導体ＡのＩＲスペクトルを
示す。FIG. 1 and FIG. 2 show the IR spectrum and NMR spectrum of caerulein obtained in the present example, respectively. FIGS. 3 and 4 show Z-PyrGln-Asp (0
The IR spectrum and NMR spectrum of Bzl ) -Tyr -OMe are shown, respectively. FIGS. 5 and 6 show Z-Pyr-Gin-Asp
IR spectra of (0Bzl)-Tyr,
The NMR spectrum is shown. Figure 7 shows Thr (Bzl) -Gly -Trp
-Met -Asp (0Bzl) -Phe -
The IR spectrum of NH2.HCOOH is shown. Figures 8 and 9 show Boc-Thr (Bzl)
IR spectrum and NMR of -Gly-Trp, respectively
Drop the spectrum. Figure 10 shows Boc -Thr (Bzl) -Gl
The NMR spectrum of y-Trp-OMe is shown. Figure 11 shows Met-Asp(0Bzl)-P
The NMR spectrum of heNH2.HCI is shown. Figure 12 shows Asp(OBzl)-Phe-NH2.H
The NMR spectrum of Cl is shown. FIG. 13 shows the IR spectrum of decapeptide derivative A.

Claims (1)

【特許請求の範囲】 １ 一般式（Ｉ） （式中、Ｘｌ はベンジルオキシカルボニル基、ｐメト
キシベンジルオキシカルボニル基又はｐ −ニトロベン
ジルオキシカルボニル基を表わし、ＹｌおよびＹ２は同
一もしくは異なってベンジルエステル基又はｐ−ニトロ
ベンジルエステル基ヲ表わし、Ｚ２はベンジル基又はニ
トロベンジル基を表わす）で示されるデカペプチド誘導
体またはそ＊＊の塩を接触還元することを特徴とするセ
ルレインの製造法。[Scope of Claims] 1 General formula (I) (wherein, Xl represents a benzyloxycarbonyl group, p-methoxybenzyloxycarbonyl group, or p-nitrobenzyloxycarbonyl group, and Yl and Y2 are the same or different and represent a benzyl ester or a p-nitrobenzyl ester group, and Z2 represents a benzyl group or a nitrobenzyl group) or a salt thereof** is catalytically reduced.