JPS58167963A - 潜血の測定方法およびその方法を実施するのに適した多層材料 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は潜血の測定方法およびその方法ｔ”実施するの
に適し九多層構造の一定材料に関するものである。

従来試験紙などを用い九便潜血テストは血液を有する便
検体を試験紙０上にこすりっけ塗抹し溶血させ血色素が
有するペルオｄＰターゼ様活性を利用し呈色反応を生じ
させて（以下、潜血反応という。）一定している。叉試
験紙法で便中の血液を検出する丸め便を試験紙の上にｔ
ｏ４ｓｔ化水素水溶液で発色させている。

ととるで、上部消化管（胃、十二指腸）などよシ出血し
喪血液は便として***される時点迄に殆ど溶血している
。これに対し下部消化管（直腸、大腸）などよｐ出血し
九皇涼は便として***される時点でなお赤血球の１１存
在してｉる。

便潜皇反応を利用して直腸、大腸などの腫瘍による出血
を検査することが従来性われてｉるが前述の試験紙を用
いる方法で唸赤血球を溶血して測定しているので赤血球
と法皇０匡別が出来ないし、又試験紙の上に規定され喪
量ｔｊｋりつけることは操作的に非常に困難であ抄測定
結果のパラツキが大暑〈結果が不正確であるという解決
されるべ自問電点がある。

本発明は便潜血反応の測定によ如上部消化管と下部消化
管の出血を区別する方法及びそれに適する多層構造を有
する新しい潜血反応材料を縄供することＫある。

便潜嵐反応は凝陽性を出来るだけ少なく出来るような材
料が要望されているが本発明によれば上部消化管出血と
下部消化管出血を判別出来るので凝陽性を激減すること
が出来る。

本発明は、 （１）　　＃血の測定方法において、 ■　検体液１１九は検体を赤血球を溶血しない溶媒で稀
釈し九検体稀釈液から赤血球を除去し、■赤血球を除去
して得られ九液中の血色票を一定する過程を含むことを
特徴とする潜血の測定方法。

（２）　　前記血色素を測定する過程が呈色反応による
色を測定する過程である（１）に記載の方法。

（３）　　前記赤血球を除去する過１が、＠　前記稀釈
により得られた液から赤血球を分離しうる分離層、 Ｃ赤血球が分離されて得られ丸液を展開しうるｊ１Ｍ層
、 ■　血色素を呈色反応により一定しうる試薬を含む試薬
層を有し、 かつ前記分離層と前記展開層が前記赤血球が分離されて
得られ丸液を透過しうる接着剤によ如接着されて一体に
なっているかまたは一つの分−一展開層からなっておシ
、前記ＩＩｋｌｌ！層と前配試条層は実質的に密接して
いるが分離しうるように構成されてなる多層材料の前記
分離層に検体＃ｉＬまたは検体を赤血球を溶血しない溶
媒で稀釈した検体稀釈液を点着することにより行われる
（２）に記載の方法。

（４）　　前記赤血球を溶血しない溶媒が水性液体であ
る（１）Ｋ記載の方法。

（５）　　前記水性液体が生湯的食塩水ｉ九は生湯的塩
類水溶液である（４）に記載の方法。

（６ン　　前記検体が便である（１）に記載の方法。

（７）　　前記検体液が生物起源の水性液体または粘敵
である（１）に記載の方法。

（８）　　前記呈色反応による色を測定する過程が前記
展開層を前記試薬層から分離し死後に前記賦条層で実施
される（３）に記載の方、、法。

（９）前記呈色反応による色を測定される過程が前記試
薬層に発色賦業を適用することにより実施される（８）
に記載の方法。

する向と反対側に支持体を有する多層材料である（３）
に記載の方法・ （ロ）［株］　赤血球と嵐色素を含む検体液を九は検体
稀釈液から赤血球を分離しうる分一層、■　赤血球が分
離されて得られ九液を展開しうる展開層、 ■　血色嵩ｔｍ色反応により測定しうる試薬を有する試
薬層を有し、 この順に積層されており、かつ前記分離層と展開層が前
記赤血球が分離されて得られ友液を透過しうる接着剤に
より接着されて一体になっているか、を九は前記分離層
と前記展開層が一つの分１１１４一層からなっておシ、
前記展開層と前記試薬層は実質的に密接しているが分離
しうるように構成されていることを特徴とする潜血測定
用多層材料。　　５ （６）前記試薬層が呈色反応用の試薬組成物からなる（
口）に記載の多層材料。

（ロ）前配試蘂層の前記展開層に接する面と反対飼に支
持体を有する（口）に記載の多層材料。

である。

本−明においで検体の稀釈に用いられる溶媒は赤血球が
溶血現象を起さないような水性液を用いることができ、
その具体例として生理的食塩水および生理的塩類水溶液
をあげられる。

検体液または検体を稀釈して得られた水性液から公知の
方法により赤血球を分離除去して血色素を溶解または分
散して含有する水性液体（以下、血色素含有液という。

）を得ることができる。血色素含有液を得るのに好適な
材料は本発明の材料の分離層である。

本発明の材料において分一層は血色素、水および水に溶
解している成分は通過させるが赤血球は実質的に通過さ
せない層である１分離層は単一の多孔性層からなる場合
と一つの多孔性層と血色素、水および水に溶解している
成分を通過させうる接着剤（以下、単に血色素通過性接
着剤という、）の層からなる場合がある。分離層に用い
られる単一の多孔性層はまず、続空隙を有し、実質的に
赤血球を通過させない孔径（孔経約２μｍ以下、好まし
くは約０．７μ簿以下）を有する高分子物質からなる多
孔性層、フィルムを九はシートがある。

このような高分子物質からなる多孔性層、フィルムｔｉ
はシートの例として、メンブランフィルタ−（またはプ
ラッシュポリマー（ｂｌｕｓｈｅｄｐｏｌｙａｘ＠ｒ）
膜、フィルムを九はシート）、合成ポリマーからなる合
成紙ま九は２紙がある。合成紙としては、合成ポリマー
繊維からなるパルプから抄造した紙、合成Ｉリマーに発
泡剤を含有させて膜、フィルムを九はシートに成形して
から発泡剤を発泡させて連続空隙となるような多孔性を
付与することによｈａ造し良紙、および合成ポリマーに
水溶性の微粒子状の充填剤を含有させて膜、フィルム重
たはシートに成形してから水により充填剤を溶解除去し
て連続空隙となるような多孔性金付与することによ１製
造した紙が包含される。

′合成ポリマーからなる一紙は合成ポリマー繊維からな
るパルプから抄造し九−紙である。合成ポリマー繊維か
らなるパルプから抄造し良紙またはＰ砥の場合には体積
でパルプの約１０４をこえない範囲で天然パルプ（例、
木材パルプ）を含有させることがで自る。その他に綿ま
たは綿繊維と合成ポリマー（例、ポリエチレンテレフタ
レート、ナイロン）繊維との混紡糸からなり約ｔｏ番手
を九はそれよシ大きい数値の番手数を有する平織物があ
る。単一の多孔性層として用いられるこれらの多孔性膜
、フィルムを九はシートは後述する展開層としての機能
をも゛あわせてもつものであり、それゆえに本明細書で
は分離−展開層という。

分離層として多孔性層と血色素透過性接着剤の層からな
る場合には、多孔性層としては孔径約ｌｊ０μｍ以下、
好ましくは約１００μｍ以下の孔または連続空隙、約７
０メツシユ、好ましくは約７００メツシユ以上の細網目
、ｔ４は約ＪＯ番手以上、好ましくは約参〇番手以上の
織目を有する種々の多孔性績、フィルム鷹たは７−ト秋
物を用いることができる。その例として、各種の織物（
例、綿布、ナイロン布、ポリエチレンテレフタレート布
、アクリル系ポリマー布、ナイロンメツシュ（綱状物）
、ポリエチレンテレフタレートメツシュ、アクリル系ポ
リ！−メツシュ）、不織布、紙、−紙、合成紙、ガラス
繊維紙ｔ６げることができる。

次に血色嵩透過性接着剤としてはゼラチン、アガロース
などの親水性の天然ポリオ−まえは天然ポリマー由来物
質、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポ
リアクリルアミド、ポリビニルベンインスルホン鐵ナト
リウムなどの親水性の合成ポリマーを用いる仁とができ
る。

展開層は血色素含有液をその血色素含有率をほぼ一定に
保つ九ままその液量にほぼ比例し九面積に展開する機能
を膚する連続空隙を含有する多孔性層で、従って展開層
でａｉ４″：５れ九血色素含有液は単位面積ｍ！Ｄｆｉ
は一定量の血色素含有液が！ｊｋｒ１４層に実質的に書
接する試薬層に供給される。

展開層として用いることかで龜る多孔性膜、フィルムま
たはシー□ド゛１としては前述の分一層として用いられ
る単一の多孔性の膜で孔径が約０．１μｍから約Ｊ）＃
廓、好ましくは約ｌ＃肩から約ＩＯμ簿の範囲のもの、
および前述の平織布で約λ０番手から約ｌ−〇番手の範
囲のものである。

分離層、展開層、または分離−展開層は親水性を有する
ことが好ましく、素材が有する親水性が不十分な場合に
は特開昭ｚｚ−ｉｔ参７Ｊ４明細書に開示されている水
洗、または他の親水化処理、特願−１ｓ−ｉ参ＯＪＪコ
（４１開昭ｊ７−）明細書に開示されている物理的活性
化錫塩によ如適当な親水性を付与することができる。

分離層と展開層が前述の血色素透過性接着剤で接着され
ている場合、接着剤は分離層および展開層の連続９諏を
全部充填することなく、それぞれの層の連続空隙が実質
的にそれぞれの機能を失わないように接着剤は用いられ
る。この丸めには、好壇しくは両層の間に約０．２μ調
から約ｉｏμｍ１特に好ましくは約ｌμ陶から約Ｉμ調
の１！囲の接着層とな、るように設ける。分離層の厚さ
は約Ｊ０μ網から約１００μｍ１好ましくは約２０μｍ
から約１００Ｈｆｌｌζ展開層の厚さは約ｊ０μ調から
約２００μｍ１好ましくは約ｔｏμｍから約ＪＯＯｐｍ
の範囲である。分離−展開層の厚さは約１０μｍから約
１１０００ｐ、好ましくは約１００μｍから約２００μ
ｍの範囲である。

試薬層は展開層から供給される血色本のペルオキシダー
ゼ様活性により発色を九は色変化を生じうる試薬または
試薬組成物を含む層である。試薬層に含ませることがで
きる試薬または試薬組成物（以下、単に試薬組成物とい
う、）としてはベルオキンダーゼ活性鷹九はイルオ中シ
ダーゼ活ａＫより過酸化水素の存在下で着色物質を生成
するかまたは色変化をする化合物を九は（複数の）化合
物からなる組成物がある。このような化合物または組成
物の例として特開昭参デーｔｏｙりｌに開示されている
（Ｐ）０−ジアニシジ／またはその酸塩φ）〇−トリジ
ン壕九はその酸塩　（Ｃ）０−フェニレンシアきンｔａ
はその酸塩　（ｄ）グアヤク　（ｅ）アドレナリン　（
ｆ）　フェノールフタレイン　（２）コ、コＩ−アジノ
ジ（Ｊ−エチルベンゾチアゾリン−６−スルホン酸）ア
ンモニウム塩　（ｈ）　７エロシアン化物　（り参−ア
ミノアンチピリン、そ装置ａｍ導体ま九はそれらの酸塩
とフェノールまたはナフトールミ九はそれらの酵導体と
の組合せ、特開昭１０−／Ｊ７／ターに開示されている （１）　　アニソ／およびその一導体、オルト−トルイ
ジンパラ−トルイジン等のモノアミン類（２）　　ｒル
トー７ェニレンジアミン、ｔｓＩ、Ｎ／−、）メチル−
ハラ−７エニレンジアミン、Ｎ、Ｎ／−シｘ　５−ルフ
ェニレンジアミン、べフラボン（宵色ないしは褐色を呈
する）、ジアニシジン（緑変ないし褐変ｊ等のシアξ）
類 （３）　　フェノールそれ自体（黄色を呈する）、チモ
ール、オルト−、メタ−およびパラ−クレゾール（それ
七れ緑黄色、桃色、乳白＆Ｙｌ摘を呈す）、アルファー
ナフトール（深紅色を呈する）、ヘ−ｆｉ−ｔ７　）−
ル（自沈を生テる）等のフェノール類 （４）　　カテコール、グアヤコール（橙色を呈する）
、オーシノール、ピロガロール、、（赤色又は黄色ヲ呈
する）、ｐ＝ｐ−ジヒドロキレジフェニルジよび７０ロ
グルシノールのようなポリｙｘ）　−ル類 （５）　　サリチル酸、ピロカテキン酸、没食子績のよ
うな芳香族の酸 （６）　　ロイコマラカイトグリーン（マラカイトグリ
ーンを呈する）、ロイコフェノールフタレイン（アルカ
リ性媒質中で使うことがＵｔｔ、い）のようなロイコ染
料 （７）　コ、４−ジクロロフェノールインドフェノール
のような着色染料 （８）エピネフリに　フラボン類、チロシン、ジヒドロ
キシフェニルアラニン（橙赤色を呈する）およびトリプ
トファンの様な種々の生化学物質（旬　その他、グアヤ
ゴム、グアヤコン酸、ヨウ化カリウム、ヨウ化カリウム
および他の水溶性ヨウ化物、ならびにビリルビン（緑色
を帯びた色となる。）のような物質 および ｕＩＪ　　コ、λ′−アジノジ（３−エチル−４−スル
ホベンゾチアゾリン）またｉその塩、および３゜Ｊ／−
シア建ノベンジジンのような特殊染料（ロ）　≠−アミ
ノアンチピリン、その置換−導体またはその酸塩と／、
７−シヒドロキシナフタレン壕九はその鱒導体との組合
せ をあげることがで龜る。

試薬層は前述の試薬組成物を多孔性支持体の表ｍまえは
内部に保持させるか壕九はゼラチン、アガロース、ポリ
ビニルアルプール、ポリアクリル酸に代表される親水性
ポリオ−バインダーの中に分散含有させた層である。親
水性ポリマー・（イングーの中Ｋｉ嬢組成物が分散含有
されてなる試薬層は後述する適当な支持体の表面に塗布
により設けることができる。この場合の試薬層の乾燥時
の厚さは約１μｍから約２００μｍ、好ましくは約２μ
肩から約ｊ０μｍの範囲である。

試薬組成物をその表面またはその内部に保持させる多孔
性支持体は前述の分離層、展開層または分−一展開層に
用い九のと同じ多孔性膜、フィルムを九はシート状物質
を用いることができる。多孔性支持体の厚さは約／′σ
μ調から約ｌ謂ｍミ好ましくは約／ｌｌＡ１１ｇから約
２００μ肩の範囲である。多孔性支持体の機械的強度が
弱いかまたは不十分な場合、多孔性支持体がやわら゛か
い（ｌｌか弱い）場合、を九は本発明の材料の取扱いや
保管の便利を求める場合には多孔性支持体を後述する支
持体に重ねあわせるか接着して積層するか、あるいは開
口を有する支持体の開口部に貼着することができる。

試薬層と展開層ま九は分離−展開層は少なくとも潜血の
測定を実施する間においてその表面が実質的に密接して
φて、展開層または分離−展開層から試薬層に血色素が
移動しうるように構成されているが、展開層ま九は分離
−展開層は試薬層から容具に剥離除去できるようにも構
成されている。

この丸めには通常展開層または分離−展開層と試薬層が
実質的に密接して相互に移動しないように重ねあわせる
ことかで龜るほか、展開層または分離−展開層と試薬層
の間に前述の水性液体透過性接着剤を用いて接着するこ
とができる。接着剤を用いる場合、分離層と展開層を接
着する接着剤の接着力よシ展開層（を九は分離−展開層
）と試薬層を接着する接着剤の接着力が小さいように構
成する。このような接着剤の組合せの例として分離層と
展開層の接着にゼラチン、展開層（または分離−展開層
）と試薬層の接着にポリアクリルアミドをそれぞれ用い
る例をあげられる。展開層（壕九は分離−展開層）と試
薬層との実質的な密着のためには水性液透過性の接着剤
を用いることが好ましい。

本発明の試薬層は血色素が供給され九ときに、発色試薬
を適用することによυ発色ま九は色変化が生ずる。通用
しうる発色試薬として過酸化水素または過酸化水素化物
の水性溶液がある。水性溶液に含まれる過酸化水素また
は過酸化水素化物中の過酸化物の量は約７５１から約ｌ
０−１好ましくは約Ｊ−から約４嚢の範囲である。好ま
しい発色試薬は約コ、ｊから約Ｊ　、　ｊ　Ｗ　／　Ｖ
　Ｌ１４の過酸化水素水溶液である。発色試薬中には公
知の安定剤のうちでカタラーゼ活性、ペルオキシダーゼ
活性１、・１ を九は血色素のもつ（ルオキシダーイ様活性を阻害しな
いものを約０．１Ｗｔ−以下含むことができる。

支持体は水不浸透性の素材からなるものであれば透明、
半透明、不透明な無色壕九は着色されたものいずれをも
用いることがで會る。支持体の例としてポリマーフィル
ムまたはシート（例、セルロース（再生セルロースから
なるセロハンなト）、セルリースアセテート、セルロー
スアセテートプロピオネート、ポリエチレンテレフタレ
ート、ビスフェノール人のポリカルボネート、ポリスチ
レン、ポリビニルクロリド、コポリビニルクロリド−ビ
ニリデンクロリド、ポリメチルアクリレートまたはナイ
ロンからなるフィルム壕九はシート）、ガラスプレート
、各種の紙、金属シートなどがあげられる。支持体は単
なる試薬層の支持体として機能させるだけでなく、操作
を便利にする丸めの把手部分を突出させた）、保管やフ
ァイルを容Ｉ゛にするために開口部を設は九カード状に
しｆＩ−シ（本発明の材料の試薬層は開口部にはめこむ
か貼着される。）、綴己穴を設は九余白部分を設けるな
どの変形をすることがで自る。

試薬層が透＠または半透明な場合に、試薬層の発色ま九
は色変化の測定を容器にするために支持体をパラフグ２
クンドと唸るような着色素材からなる奄のから選択する
ことができる。具体例として白色パックグラウンドを与
える支持体として二酸化チタン微粉末、硫酸バリウム倣
粉末、酸化亜鉛微粉末を混線し九ポリ！−フィルムまた
はシート、マえはガラスプレート、これらの微粉末を抄
きこんだ紙、黒色パックグラウンドを与える支持体とし
てカーボンブラック微粉末を混練し九ポリマーフィルム
ｉ九はシート、まえはガラスプレート、カーボンブラッ
ク微粉末を抄きこんだ紙、青色パックグラウンドを与え
る支持体としてフタロシアニン銅餉料を混線し九ポリマ
ーフィルムま九はシート、フタロシアニン鋼拳料を抄龜
こんだ紙などをあげる゛ことができ暮。

次に本発明の材料を用いて潜血の一１定を実施する方法
を便潜血の測定の場合を代表例として説明する。便検体
を適当な容器にと９、これに赤血球を溶血させない溶媒
（生理的食摸水または生理的塩類水溶液）を注いで稀釈
する。用いる溶媒の量は検体の重量の約等倍から約ｉｏ
倍、好ましくは約２倍から約７倍の範囲である。検体が
生物起源の水性液体（例、尿）の場合には溶媒による稀
釈は不要な場合がある。ついで稀釈され九検体を含む液
を本発明の材料の分離層ま九は分離−展開層にミクロビ
（ット、ピペット、シリンジなどの適当な器具を用いて
適用する。検体を含む液の適用に際しては分離層を九は
分離−展開層の外表面と内表面に対して圧力差を加える
（例、吸引、外表面から圧力をかける）ことは望ましく
ない、なぜならば圧力差を加えることにより検体液中の
赤血球が溶血しやすいからである。適用の具体的方法と
しては検体を含む液の液滴を適用するための器具の先端
に作らせ、その液滴を分離層壕九は分離−展開層の外表
面に静かに落下させるか、器具の先端１＋は材料のいず
れかを静かにそれぞれ下方ま九は上方に移動させて液滴
を分離層ま九は分−開展間層に接触させる操作があり６
、これらの操作が好ましい。適用する検体を含む液の量
は約Ｉμｌから約２００μｍ、好ましくは約７μｍから
約ＪＯＯｐｌの範囲である。

このように本発明の材料の分離層ｍＡは分離−展開層に
検体を含む液を適用させるどとにより、赤血球は分離層
を九は分−開展間層の外表面ま友は内部の空隙に残留し
、潜血、すなわち血色素を含む水性液が分離される。つ
いで血色素を含む水性液は分離層および接着剤の層を通
過して展ｇｍに達して展開されるか、または分離−展開
−の内部で展開され、展開層を九は分離−展開層に密接
している試薬層に単位面積当り＃１は一定量の割合で拡
散して供給される。試薬層への血色素を含む水性液の拡
散供給が終るか一定割合に達し時点で試薬層から展開層
を含む上部層または分離−展開層を剥離除去して試薬層
を露出させる。

ついで、露出し九試薬層の血色票を含む水性液が浸透し
ている領域に発色試薬を適用するか、試薬層全体を発色
試薬に浸漬することによシ、試薬層に発色または色変化
が生ずるので、比色法を九は標準色−寂表との目視比較
にｘ９潜血の測定を行う。試薬層への発色試薬の適用は
噴きつけ、液滴付着、ぬシつけ、その他の公知方法によ
ることかで龜る。比色ｔｃｔ九は目視比較は試薬層の展
開層側から行うのが容易であるが、試薬層が透明ま九は
半透明で透明支持体の上に設けられている場合には支持
体側から比色または目視比較することかで龜る。

本発明の潜血の測定方法は赤血球が溶血しないようにし
て赤血球を分離除去してから潜血の測定を行うので、潜
血の検出または潜血量の定量が確実で再現性がよいとい
う４ＩＩｌｌｋがある。本発明の潜血測定用材料は簡単
な操作により赤血球ｔ−溶血させることなしに分−除去
することができるので、潜血の検出または潜血量の定量
が簡単な操作により確実に再現性よ〈実施できるという
特徴がある。

さらに本発明の潜血測定用材料は検体液または検体稀釈
液を展開する機能を有する展開層または分□、。

随一展開層が組こまれていることにより検体液または検
体稀釈液の量を正確に秤量することなしに、すなわち検
体−を九は検体稀釈液の量が多少変動しても展開作用に
より検体液を九は検体稀釈液がその液量にほぼ比例した
面積に広げられて試薬層に供給されるので、試薬層にお
ける発色または色変化は検体液または検体稀釈液中の血
色素の量に比例することにな９、検体液または検体稀釈
液の量の正確な秤量なしに潜血の定量が実施できる特徴
がある。

本発明の潜血測定方法およびそのための材料について、
半固形物である便を生物起源の検体の代表例として説明
してきたが、本発明の方法および材料は生物起源の液状
検体（検体液）である尿、リン／（液、羊水、諸種の粘
液中分必液に適用できることはいうまでもない。検体液
に本発明の方法を適用する場合には検体液を稀釈するこ
となく本発明の方法を実施できる場合が多いが、検体液
を稀釈して実施することもできる。

さらに本発明の方法お□よび材料は血色素蛋白で標識し
た化合物、抗原、を九は抗体を用いる免疫分析に適用で
きる。

以下に本発明の方法および材料を実施例により具体的に
説明する。

実施例　１ 赤血球と血色素の分離層としてナイロン布（ｌコＯメツ
シュ）を用いた展開層として孔径Ｊ、０μｍのセルロー
スジアセテートとセルローストＩＪアセテートの混合よ
抄なる連続多孔シート（メンブランフィルタ−厚さｌ参
Ｏμｍ）を用いた。試薬層とぽ厚さ／１０μ調のＰ紙に
ｏ−）リジンを含浸させたものを使用した。

分離層と展開層はゼラチンにより接着させた展開層と試
薬層はポリアクリルアミドで接着させ全体の三層を圧着
後固定化し多層シートに一体化した。

発色試薬として７Ｉｓの過酸化水素水を用いた。

検体はｉｏｏグラムの便を採取後直ちに２００グラムの
生態食塩水で稀釈し混合均一化しその１００μｌを上記
多層シートの分離層に常温にてピペットを用いて滴下し
友。

滴下後試薬層に検体が浸透後試薬層を剥離した１０分後
発色液を１滴試薬層に滴下し１分後の発色光学一度を調
べ基準Ｉｌｋ度との比較対照により陽性、陽性ｔ−判定
した。

実施例２および比較例１ 対照用シートは分離層に代るものとしてナイロン布（１
０メツシユ）゛及びＭｇ２層に代るものとして孔径３０
μｍのセルロースジアセテートと七ルローストリアセテ
ートの混合物よりなる連続多孔性シート（メンブランフ
ィルタ−１厚さ１００μ譚）を使用しその他の材料及び
製法は実施例１と同様にして作成した。

測定用検体として隙性便稀釈液に予め■赤血球のみ、■
赤血球及び血色素、◎血色素のみ、Ｑ非添加の参種の検
体１Ｉｌｋ１に作成し実施例Ｉの本発明の多層シートと
対照用シートを用いてテストに供した。

測定結果を下表に示す（陽性＋、陽性−）上表からもわ
かるように赤血球と血色素の分離が明確に達成できかつ
、血色素の有無を明確に判定で・きた。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）　　Ｉｔ血の測定方法において、■　検体液ま九
   は検体を赤血球を潜血しない溶媒で稀釈し九検体稀釈箪
   から赤血球を除去し、 ■　赤血球を除去して得られ丸液中の血色素を測定する
   過程を含むこと４−特徴とする潜血Ｏ測定方法。 （幻　前記血色素を測定する過程が呈色反応による色を
   測定する過程である特許請求の範Ｈｉに記載の方法。 （３）　　前記赤血球を除去する過程が、［相］　前記
   稀釈により得られ九液から赤血球を分−しうる分離層、 ・　赤血球が分離されて得られ丸液を展開しうる展開層
   、 ■　皇色素ｔＭ色反応により測定しうる試薬を含む試薬
   層を有し、 かつ前記分離層と前記展開層が前記赤血球が分−堪れて
   得られ九箪を透過しうる接着剤によ〉纏着されて一体に
   なっているかまたは−一つ０分−一展一層からなってお
   ９、前記展開層と前記試薬層は実質的に密接しているが
   分離しうるように構成されてなる多層材料の前記分離層
   に検体１［ま九は検体を赤血球を溶血しない溶媒で稀釈
   し九検体稀釈液を点着することによ）行われる特許請求
   の範囲コに記載の方法。 （４）前記赤血球を筒車しない溶媒が水性液体である特
   許請求の總１Ｉｌｌに記載の方法。 （ｉ）　　前配水性漉体が生理的食塩水または生理的塩
   類水溶液である特許請求の範Ｓ参に記載の方法。 （＠）　　１ｍ１１記検体が饅である特許請求の範ｓｌ
   に記載の方法。 （１）前記検体液が生物ｍｓの水性液体または粘液であ
   る特許請求の範囲ｌに記載の方法。 （８）　　前記呈色反応による色を一定する過程が前記
   展開層１に前記試薬層から分離し比価に前記試薬層で実
   施される特許請求のＩｌｌ！ＪＫ記載の方法。 （９）前記呈色反応による色を測定される過程が前記試
   薬層に発色試薬を適用することにより実施される特許請
   求の範ｓｌに記載の方法。 （至）前記多層材料が前記試薬層の前記展開層に接する
   面と反対側に支持体を有する多層材料である特許請求の
   範囲Ｊに記載の方法。 （ロ）［株］　赤血球と血色素を含む検体液を九は検体
   稀釈液から赤血球を分離しうる分一層、■　赤血球が分
   離されて得られた液を展開しうる展開層、 Ｃ皇色素を呈色反応により測定しうる試薬を有する試薬
   層を有し、 このＩＩＫ積層されてお夛、かつ前記分離層と展開層が
   前記赤血球が分離されて得られ友液を透過しうる接着剤
   によｐ＊着されて一体になっているか、ま丸線前記分離
   層と前記展開層が一つの分離−展開層からなっており、
   前記展開層と前記試薬層は実質的に密接しているが分−
   しうるように構成されていることを畳黴とする潜血ｌｌ
   １５ｉｉ！用多層材料。 （ロ）前記試薬層が呈色反応用の試薬組成物からなる特
   許請求の＠＠／／に記載の多層材料。 ｎ＊記試薬層の前記展開層に接する面と反対側に支持体
   を有する特許請求の範ｓｌｌに記載の多層材料。