JPS58154064A - リンパ球ｔ細胞百分率測定方法 - Google Patents
リンパ球ｔ細胞百分率測定方法Info
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- JPS58154064A JPS58154064A JP57036250A JP3625082A JPS58154064A JP S58154064 A JPS58154064 A JP S58154064A JP 57036250 A JP57036250 A JP 57036250A JP 3625082 A JP3625082 A JP 3625082A JP S58154064 A JPS58154064 A JP S58154064A
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- G06M—COUNTING MECHANISMS; COUNTING OF OBJECTS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- G06M11/00—Counting of objects distributed at random, e.g. on a surface
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-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
- G01N15/10—Investigating individual particles
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-
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は画偉処理技術を利用したリンパ球Ｔ細砲百分率
測定方法に関する。
測定方法に関する。
白血球の１種であるリンパ球の増減や異型は古（から百
日咳など感染症の診断に役立ってきたが、近年で□はリ
ンパ球の分析が進むにつれて免疫不全症をはじめとする
新しい病気の解明が進行しつつある。
日咳など感染症の診断に役立ってきたが、近年で□はリ
ンパ球の分析が進むにつれて免疫不全症をはじめとする
新しい病気の解明が進行しつつある。
リンパ球は、その機能から’ｒＭｌｋｔ ！ｌ細胞。
Ｎｕｌｌ 細胞に分けられる。
正常の人ではこの比率が安定しているが、疾患があると
変化する。
変化する。
リンパ球Ｔ細胞百分率測定検査は、リンパ球の中のＴ細
胞の百分率を求める検査であり、本発明はこの検査を自
動化するための方法である。
胞の百分率を求める検査であり、本発明はこの検査を自
動化するための方法である。
リンパ球Ｔ細胞百分軍測定検査は、新しい検査であるた
め自動化装置はまだ発表されていない。現在性われてい
る検査の代表的方法は、検査技師がＥロゼツト法で作成
された検体を顕微鏡観察し、検査を行うものであり検査
工程は次の通りである。
め自動化装置はまだ発表されていない。現在性われてい
る検査の代表的方法は、検査技師がＥロゼツト法で作成
された検体を顕微鏡観察し、検査を行うものであり検査
工程は次の通りである。
ａ）りンバ球抽出：採血し、ヘパリンを添加した血ＫＰ
ＢＢとＣｏｎｒａｙ−Ｆｉｅｏｌを加え遠心分離を行い
リンパ球を抽出する。
ＢＢとＣｏｎｒａｙ−Ｆｉｅｏｌを加え遠心分離を行い
リンパ球を抽出する。
ｂ） ９ンパ球数調整：血算板でリンパ球数をカウン
トし、検体のリンパ球数を調整する。
トし、検体のリンパ球数を調整する。
Ｃ）ロゼツト形成：ヒツジ赤血球を加えた後、培養し、
丁細胞にロゼツトを形成させる。
丁細胞にロゼツトを形成させる。
ｄ）スライドグラス塗付ニスライドグラスにスメアを引
いた後、乾燥し、す７ラニン染色を行う。
いた後、乾燥し、す７ラニン染色を行う。
・）顕微鏡検査：検査技師が顕微鏡観察を行いリンパ球
を２００コカｊントシ、そのうちヒツジ赤血球が付着し
たＴ細胞の百分率を求める。
を２００コカｊントシ、そのうちヒツジ赤血球が付着し
たＴ細胞の百分率を求める。
本発明は上記工程の・）顕微鏡検査工程の自動化をはか
るものである。
るものである。
さらに１本発明は本発明省らが先に提案した「す／パ球
Ｔ細胞百分率測定装置」（特願１８５６−１７４０１５
号）の改良に関するものである。
Ｔ細胞百分率測定装置」（特願１８５６−１７４０１５
号）の改良に関するものである。
検体の顕微鏡観察を行うと、対象物は次の３種九色分け
されていることがわかる。
されていることがわかる。
■ 無色の背景
■ 淡黄褐色のヒツジ赤血球、ヒト赤血球θ 赤色のリ
ンパ球、顆粒球 細胞判別を精度よ（行うためＫは、前記ラインスキャン
型固体撮ｇＩ素子などの撮像装置で検体を読み取って出
力された映倫信号を、前記ΦＯθに相当する出力で３値
化し、そのうちＯθの領域を測定することが必要となる
。
ンパ球、顆粒球 細胞判別を精度よ（行うためＫは、前記ラインスキャン
型固体撮ｇＩ素子などの撮像装置で検体を読み取って出
力された映倫信号を、前記ΦＯθに相当する出力で３値
化し、そのうちＯθの領域を測定することが必要となる
。
ところが、従来は次の３つの問題点があった。
■ 検体に含まれる細胞数は、リンパ球２００コに対し
てヒツジ赤血球１５０００コ、その他数百コ程度である
。このため本来はθについた＠を検知すれば足りるにも
かかわらす＠θを同時に測定する方法では、検体全面に
わたって存在する非常に多いヒツジ赤血球を測定し跣け
ればならない。
てヒツジ赤血球１５０００コ、その他数百コ程度である
。このため本来はθについた＠を検知すれば足りるにも
かかわらす＠θを同時に測定する方法では、検体全面に
わたって存在する非常に多いヒツジ赤血球を測定し跣け
ればならない。
■ 検体に含まれる細胞のうち、Ｔ細胞は集合しやすい
、このためＯθの領域を同時に測定する方法では複数個
のθが＠を介して接触し一つの集団となっている場合、
その集団の中にいくつＴ細胞が含まれているかをカウン
トすることが離しく検出誤差となり易い。また゛これを
正確に判別しよらとすると面倒な操作が必要となる。
、このためＯθの領域を同時に測定する方法では複数個
のθが＠を介して接触し一つの集団となっている場合、
その集団の中にいくつＴ細胞が含まれているかをカウン
トすることが離しく検出誤差となり易い。また゛これを
正確に判別しよらとすると面倒な操作が必要となる。
■ 映像信号を３値化した場合、出力は■〈＠〈θであ
る。θに相当するリシバ球の周囲にヒツジ赤血球（＠）
がない場合でも、θの境界領域の画素が一部分θ、一部
分Φで占められることが多々あり、゛そのθとΦの面積
比率によっては該画素の出力がＯの場合の出力と同等と
なり、Ｏの領域を検知したとの誤情報を発生する場合が
ある。
る。θに相当するリシバ球の周囲にヒツジ赤血球（＠）
がない場合でも、θの境界領域の画素が一部分θ、一部
分Φで占められることが多々あり、゛そのθとΦの面積
比率によっては該画素の出力がＯの場合の出力と同等と
なり、Ｏの領域を検知したとの誤情報を発生する場合が
ある。
パ本発明は撮像装置で検体を読み敗って出力された映像
信号を前記ΦＯθに相当する出力で３値化した後、θに
相当する領域のみを測定し、その領域の領域情報からリ
ンパ球と判別されたときのみ該リンパ球に相当する領域
の周辺にあるＯの領域を測定することにより、従来技術
の問題点を解決したものである。
信号を前記ΦＯθに相当する出力で３値化した後、θに
相当する領域のみを測定し、その領域の領域情報からリ
ンパ球と判別されたときのみ該リンパ球に相当する領域
の周辺にあるＯの領域を測定することにより、従来技術
の問題点を解決したものである。
すなわち本発明は、撮像装置で検体を読み取って出力さ
れた映像信号の出力レベルおよび腋信号の領域情報から
、前記検体に含まれる細胞のうち前記θＫｌ＊ａする領
域即ちりンバ球を判別した後、リンパ球と判別された細
胞データの周辺のデータ忙ついて＠に＃轟する領域を示
す画素の数を測定し、該リンパ球のうちＴ細胞を判別す
ることを特徴とするリンパ球Ｔｌ１１１百分率測定方法
である。
れた映像信号の出力レベルおよび腋信号の領域情報から
、前記検体に含まれる細胞のうち前記θＫｌ＊ａする領
域即ちりンバ球を判別した後、リンパ球と判別された細
胞データの周辺のデータ忙ついて＠に＃轟する領域を示
す画素の数を測定し、該リンパ球のうちＴ細胞を判別す
ることを特徴とするリンパ球Ｔｌ１１１百分率測定方法
である。
なお、本発明において領域情報とは該領域の面積、総濃
度すなわち該領域の出力合計値などリンパ球と顆粒球と
を判別するために必要な情報を示すものである。
度すなわち該領域の出力合計値などリンパ球と顆粒球と
を判別するために必要な情報を示すものである。
以下本発明を図面により詳細に説明する。
ｑ
るための図、６１図は本発明の詳細な説明するための図
である。
である。
検体ｌはｌ：ＥＩゼット法で作成され１〜２■幅の線状
に塗布して固定後、染色したものを採用した。
に塗布して固定後、染色したものを採用した。
検体１ｔ−自動焦点機構９で焦点位置を調整しなから自
動送り機構７で光学系２の視野を通過させる。ラインス
中ヤン型固体撮偉素子３は検体ｌを光学系２を通して読
み散り、その明るさに応じた映倫情報を出力する。測定
回路４ではライｙＸ中ヤン型固体撮僚素子３から出力さ
れたアナログ情報をディジタル化し、その値、領域情報
から検体１に含まれる細胞をリンパ球とその他の細胞の
区別及びリンパ球中のＴ細胞とその他のリンパ球の区別
を行う。カウンタ回路、′１ ５ではテ細ｍおよび〒細胞以外のリンパ球をカウントす
る。両省を２００コカ９ントした後、Ｔ細膓数の−をＴ
細胞百分率表示回路６へ出力する。制御部８では各部の
処理速度のタイ建ングを合わせる。
動送り機構７で光学系２の視野を通過させる。ラインス
中ヤン型固体撮偉素子３は検体ｌを光学系２を通して読
み散り、その明るさに応じた映倫情報を出力する。測定
回路４ではライｙＸ中ヤン型固体撮僚素子３から出力さ
れたアナログ情報をディジタル化し、その値、領域情報
から検体１に含まれる細胞をリンパ球とその他の細胞の
区別及びリンパ球中のＴ細胞とその他のリンパ球の区別
を行う。カウンタ回路、′１ ５ではテ細ｍおよび〒細胞以外のリンパ球をカウントす
る。両省を２００コカ９ントした後、Ｔ細膓数の−をＴ
細胞百分率表示回路６へ出力する。制御部８では各部の
処理速度のタイ建ングを合わせる。
次に本発明の細胞判別方法を説明する。
測定ではまずＯを無視し、θの領域についての測定を行
ない、その領域情報からその画素がリンパ球に属するか
どうかの判別を行う。次にリンパ球と判別されたものＫ
ついてその周辺にヒツジ赤血球が付着しているかどうか
を調べるに際し、リンパ球の領域より２画素分外側の画
素が＠の領域であるかどうかを調べる。ここで１画素分
間隔をあけたのは、１画素中にリンパ球領域（θ）と背
景（Φ）を含んで、その画素がＯＫ属すると誤認される
場合でも、その画素はリンパ球領域に隣接する画素のみ
で、１つ間隔をあければ前記問題点の■が解決される。
ない、その領域情報からその画素がリンパ球に属するか
どうかの判別を行う。次にリンパ球と判別されたものＫ
ついてその周辺にヒツジ赤血球が付着しているかどうか
を調べるに際し、リンパ球の領域より２画素分外側の画
素が＠の領域であるかどうかを調べる。ここで１画素分
間隔をあけたのは、１画素中にリンパ球領域（θ）と背
景（Φ）を含んで、その画素がＯＫ属すると誤認される
場合でも、その画素はリンパ球領域に隣接する画素のみ
で、１つ間隔をあければ前記問題点の■が解決される。
本発明において撮儂素子で読みとる画素の大きさは第１
図における光学系２の拡大率と撮儂素子の大きさの組合
せで、測定の目的にあわせて種々の大きさに設定するこ
とができるが、ヒツジ赤血球１つを読みとるのに一方向
あたり２個以上の画素な畳する程度に小さいことが望ま
しく、ヒツジ赤血球の大きさが３〜４μｍであることか
ら、画素として１μ常程度であることが好ましい、ただ
し、ヒツジ赤血球がＴ型リンパ球のまわりに大量に付着
することを考慮すれば画素の大きさがこの範囲に限定さ
れないことは明らかである。
図における光学系２の拡大率と撮儂素子の大きさの組合
せで、測定の目的にあわせて種々の大きさに設定するこ
とができるが、ヒツジ赤血球１つを読みとるのに一方向
あたり２個以上の画素な畳する程度に小さいことが望ま
しく、ヒツジ赤血球の大きさが３〜４μｍであることか
ら、画素として１μ常程度であることが好ましい、ただ
し、ヒツジ赤血球がＴ型リンパ球のまわりに大量に付着
することを考慮すれば画素の大きさがこの範囲に限定さ
れないことは明らかである。
リンパ球の領域の２画素分外側の画素を調べる方法な第
２図および第３図を用いて説明する。
２図および第３図を用いて説明する。
第２図および第３図において基盤目状にきった細い破線
でかこまれた四角形の一つが一つの画素である。■は背
景、＠はヒツジ赤血球、θはリンパ球の領域を示す画素
群であり、２本の太い破線で囲まれた部分はθの画素群
中で同図における縦軸方向での最小値を３１１．最大値
をｙｅとし、横軸方向での最小値をｘ−１最大値をＸ・
とするとき、第２図ｔは頂点（Ｘト雪、 ｙｍ−ｔ ）
、（Ｊｓ−＊、ｙ・中音 ）、 （Ｘ・＋ｔ、 ｙ
ｓ−驚 ）、 （Ｘ・中音。
でかこまれた四角形の一つが一つの画素である。■は背
景、＠はヒツジ赤血球、θはリンパ球の領域を示す画素
群であり、２本の太い破線で囲まれた部分はθの画素群
中で同図における縦軸方向での最小値を３１１．最大値
をｙｅとし、横軸方向での最小値をｘ−１最大値をＸ・
とするとき、第２図ｔは頂点（Ｘト雪、 ｙｍ−ｔ ）
、（Ｊｓ−＊、ｙ・中音 ）、 （Ｘ・＋ｔ、 ｙ
ｓ−驚 ）、 （Ｘ・中音。
ｙ・中音）で表示される四角形の辺および頂点に該当す
る画素を示しており、第３図ではθの領域の２画素分外
側をより正確にフォローするため第２図の四角形の頂点
部分を内側にいれこんだ領域の画素を示している。
る画素を示しており、第３図ではθの領域の２画素分外
側をより正確にフォローするため第２図の四角形の頂点
部分を内側にいれこんだ領域の画素を示している。
これらの太い破線でかこまれた領域の画素についてその
中Ｏに該当する出力を示す、即ち赤血球に属するものか
どうかを調べ、その数が一定数以上あるかどうかにより
該リンパ球がＴ細胞であるかどうかの判別を行なうもの
である。
中Ｏに該当する出力を示す、即ち赤血球に属するものか
どうかを調べ、その数が一定数以上あるかどうかにより
該リンパ球がＴ細胞であるかどうかの判別を行なうもの
である。
第２図に示した方法と第３図に示した方法とでは後者の
方がより精度が高くなる傾向にあり、前者は処理が迅速
に行なえるという特徴を有する。
方がより精度が高くなる傾向にあり、前者は処理が迅速
に行なえるという特徴を有する。
次に第４図により本発明の詳細な説明する。
る。
第４図ｂ）は撮像装置の映倫信号を３値化した細胞デー
タをモデル化したものである。１）ではＯの領域１コに
θの領域２コあることＫなるが、まずθの領域を測定す
るため、２コとしてカウントできる。また、周辺はヒツ
ジ赤血球に相当するＯの領域が多いため、Ｔ細胞と判別
できる。
タをモデル化したものである。１）ではＯの領域１コに
θの領域２コあることＫなるが、まずθの領域を測定す
るため、２コとしてカウントできる。また、周辺はヒツ
ジ赤血球に相当するＯの領域が多いため、Ｔ細胞と判別
できる。
ｉ）はθの領域の周辺ＶＣ１画素分の幅で［相］と誤認
された領域が発生したものである。まずθの領域を測定
するため、リンパ球としてカウントできる。１画素分間
隔をあけて＠の領域を測定するため周辺にある＠の領域
がカウントされない。
された領域が発生したものである。まずθの領域を測定
するため、リンパ球としてカウントできる。１画素分間
隔をあけて＠の領域を測定するため周辺にある＠の領域
がカウントされない。
以上説明したように本発明は、リンパ球Ｔ細胞百分率測
定に適した方法であり、その効果は多大である。
定に適した方法であり、その効果は多大である。
第１ａｉ！１は本発明の詳細な説明するだめの流れ図で
ある。 第２図、第３図は本発明の細胞判別方法を説明するため
の図である。 第４図は本発明の詳細な説明するための図である。 ａ）は顕微鏡像、ｂ）は３値讐ヒした細胞データである
。 １一検体、２−光学系、３−ラインスキャン型固体撮儂
素子、４−測定回路、５−カウンタ回路、６−Ｔ細胞百
分率表示回路、７−自動送り機構、８−制御部、９−自
動焦点機構、０−外のリンパ球。 肯 ２ ソ ー？３目
ある。 第２図、第３図は本発明の細胞判別方法を説明するため
の図である。 第４図は本発明の詳細な説明するための図である。 ａ）は顕微鏡像、ｂ）は３値讐ヒした細胞データである
。 １一検体、２−光学系、３−ラインスキャン型固体撮儂
素子、４−測定回路、５−カウンタ回路、６−Ｔ細胞百
分率表示回路、７−自動送り機構、８−制御部、９−自
動焦点機構、０−外のリンパ球。 肯 ２ ソ ー？３目
Claims (3)
- （１） 撮像装置で検体を読み取って出力された映
３・僚儒号の出力レベルおよび該信号の領域情報から
前記検体に含まれる細胞のうちリンパ球を判別した後、
リンパ球と判別された細胞データの周辺のデータを調べ
、リンパ球を示す映像信号出力ないし背景を示す出力の
いずれとも異なる出力を示すｉｊ索の数から該リンパ球
のうち！細胞を判別することを特徴とするリンパ球！細
胞百分率測定方法。 - （２） リンパ球と判別された細胞データの周辺のデ
ータとして、リンパ球を示す画素から２画素分外側のデ
ー−について鯛べることを特徴とする特許請求の範囲第
１項記載のリンパ球〒ａｍ百分率測定方法。 - （３） リンパ球と判別された細胞データの周辺のデ
ータとして、リンパ球を示す画素の外接正方形または長
方形から２画素分外側のデータについて調べることを特
徴とする特許請求の範囲第１項記載のリンパ球Ｔａｊｌ
ｉ！百分率測定方法。
Priority Applications (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57036250A JPS58154064A (ja) | 1982-03-08 | 1982-03-08 | リンパ球ｔ細胞百分率測定方法 |
| US06/470,945 US4562593A (en) | 1982-03-08 | 1983-03-01 | Method for determination of percentage T cell content of lymphocyte |
| CA000422829A CA1194597A (en) | 1982-03-08 | 1983-03-03 | Method for determination of percentage t cell content of lymphocyte |
| EP83301180A EP0088610B1 (en) | 1982-03-08 | 1983-03-04 | Method for determination of percentage t cell content of lymphocyte |
| DE8383301180T DE3364602D1 (en) | 1982-03-08 | 1983-03-04 | Method for determination of percentage t cell content of lymphocyte |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57036250A JPS58154064A (ja) | 1982-03-08 | 1982-03-08 | リンパ球ｔ細胞百分率測定方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS58154064A true JPS58154064A (ja) | 1983-09-13 |
Family
ID=12464523
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
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