JPH1160598A

JPH1160598A - オピオイド様ペプチド

Info

Publication number: JPH1160598A
Application number: JP9220471A
Authority: JP
Inventors: Jun Sasaki; 潤佐々木; Masataka Ooba; 優孝大場; Yasushi Matsumura; 靖松村
Original assignee: Asahi Glass Co Ltd
Current assignee: AGC Inc
Priority date: 1997-08-15
Filing date: 1997-08-15
Publication date: 1999-03-02

Abstract

(57)【要約】【課題】エンドモルフィンに対し作動活性を示すととも
にタヒキニン受容体に対し拮抗活性を示すオピオイド様
ペプチドを提供する。【解決手段】下記式（１）で表されるペプチドまたはそ
の塩［式（１）中、ＸおよびＹはそれぞれアミノ酸残
基、ペプチド残基または単結合を表し、アミノ酸残基は
Ｄ体であってもよい。］。【化１】Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｘ−Ｐｈｅ−Ｙ−ＮＨ₂

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は優れた薬理作用を有
する新規な神経伝達ペプチドおよびその塩に関する。特
に、エンドモルフィン受容体に対し作動活性を示すとと
もにタヒキニン受容体に対し拮抗活性を示すペプチドに
関する。

【０００２】

【従来の技術および発明が解決しようとする課題】従来
より、オピオイドレセプターの作用物質としては、モル
ヒネが知られている。また、臨床的にも、癌性疼痛など
の重い痛みに用いられている。モルヒネにはこのような
強力な鎮痛作用がある反面、耐性形成や依存症の発症な
どの欠点がある。

【０００３】最近オピオイド受容体の内因性結合物質と
してエンドモルフィンが発見された（Nature, 386, 499
-502 (1997) ）。エンドモルフィンは、ミューオピオイ
ドレセプターに作用活性をもつ内因性物質として発見さ
れたテトラペプチドで、鎮痛作用を有している。このペ
プチドは、モルヒネの欠点である耐性形成や依存症など
を克服する化合物として期待されている。

【０００４】一方、ニューロキニン−２（ＮＫ−２）受
容体などのタヒキニン受容体の拮抗剤も鎮痛作用を有し
ており、例えば、特開平６−７３０９３やＷＯ９６０５
１９３に記載の化合物が知られている。しかし、これら
では充分な鎮痛活性が得られていず、最終的に鎮痛薬と
はなっていない。

【０００５】

【課題を解決するための手段】本発明者は、タヒキニン
受容体に対する拮抗活性とオピオイド受容体に対する作
用活性を併せて有するペプチドを見いだした。このペプ
チドは、両活性を併有していることよりサブスタンスＰ
などの内因性の痛み伝達物質の作用を遮断し鎮痛作用を
示すと同時にオピオイド受容体に作用してモルヒネ様の
鎮痛作用を示す。これにより本発明のペプチドは鎮痛薬
として、また種々の神経疾患の予防薬または治療薬とし
て有用である。

【０００６】本発明はこのペプチドまたはその塩にかか
わる下記発明である。下記式（１）で表されるペプチド
（ただし、下記式（２）および（３）で表されるペプチ
ドを除く）、またはその塩。

【０００７】

【化２】Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｘ−Ｐｈｅ−Ｙ−ＮＨ₂ ・・・（１）Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−ＮＨ₂ ・・・（２）Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−ＮＨ₂ ・・・（３）

【０００８】［式（１）中、ＸおよびＹはそれぞれ非天
然型であってもよいアミノ酸残基、ペプチド残基または
単結合（ただし、Ｘ、Ｙは同時に単結合ではない）を表
し、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、ＸまたはＹであるアミノ酸残基、
および、ＸまたはＹであるペプチド残基中の１個以上の
アミノ酸残基はＤ体であってもよい。なお、式（２）お
よび（３）で表されるペプチド残基中のアミノ酸残基は
すべてＬ体である。］

【０００９】なお、式（２）で表されるペプチドはエン
ドモルフィン−２であり、式（３）で表されるペプチド
はエンドモルフィン−１であり、いずれも公知である。

【００１０】

【発明の実施の態様】以下の説明において、特に言及し
ない限り、アミノ酸とは天然型のＬ体のアミノ酸をい
う。また、特に言及しない限り、ペプチドとは天然型の
Ｌ体のアミノ酸が２以上連結したものをいう。天然型の
アミノ酸とは、天然に存在するペプチドや蛋白質の構成
要素であるα−アミノ酸をいう。天然型アミノ酸の三文
字記号の頭にＤを付したものは対応するアミノ酸のＤ体
を表す。なお、Ｄ体のアミノ酸を以下Ｄ−アミノ酸とも
いう。また、ペプチドの表記においては、通則に従い左
側末端がＮ末端、右側末端がＣ末端を表す。

【００１１】式（１）で表される本発明のペプチドにお
いて、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、ＸまたはＹであるアミノ酸残
基、および、ＸまたはＹであるペプチド残基中の１個以
上のアミノ酸残基はＤ体であってもよく、特にこれらの
うちの少なくとも１個のアミノ酸残基はＤ体であること
が好ましい。そのうちでもＸまたはＹのいずれか少なく
とも一方は、Ｄ−アミノ酸残基であるか少なくとも１個
のＤ−アミノ酸残基を含むペプチドであることが好まし
い。なお、Ｘ、Ｙは同時に単結合となることはない。

【００１２】Ｘはアミノ酸残基またはアミノ酸残基数３
以下のペプチド残基であることが好ましい。そのうちで
も、Ｘはアミノ酸残基であることが好ましく、特にＬ体
またはＤ体のＰｈｅまたはＴｒｐであることが好まし
い。Ｙはアミノ酸残基数５以下（特に３以下）のペプチ
ド残基またはアミノ酸残基であることが好ましい。さら
に好ましいＹは、アミノ末端側よりＨｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍ
ｅｔなる配列を有するペプチド残基またはこの配列より
任意の１〜２個のアミノ酸残基を除いた配列を有するペ
プチド残基またはアミノ酸残基であることが好ましい。
このうち、Ｈｉｓ、および、Ｈｉｓを有するペプチド残
基中のＨｉｓはＤ体であることが好ましい。最も好まし
いＹは、ＤＨｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔなる配列を有するペ
プチド残基である。

【００１３】式（１）で表される本発明のペプチドとし
て最も好ましいペプチドは下記式（Ａ）〜（１Ｄ）で表
されるペプチドである。

【００１４】

【化３】Ｔｒｙ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−ＤＨｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ₂ ・・・（１Ａ）Ｔｒｙ−Ｐｒｏ−ＤＰｈｅ−Ｐｈｅ−ＤＨｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ₂ ・・・（１Ｂ）Ｔｒｙ−Ｐｒｏ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−ＤＨｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ₂ ・・・（１Ｃ）Ｔｒｙ−Ｐｒｏ−ＤＴｒｐ−Ｐｈｅ−ＤＨｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ₂ ・・・（１Ｄ）

【００１５】式（１）で表されるペプチドの塩として
は、このペプチドと無機酸または有機酸から誘導される
酸付加塩がある。このような塩としては、例えば、塩酸
塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩、メタンスルホン
酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、シュウ酸塩、酒石酸
塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、コハク酸
塩、乳酸塩、グルタル酸塩、酢酸塩、トリフルオロ酸
塩、種々のアミノ酸塩などがある。

【００１６】また、式（１）で表されるペプチドの塩と
しては、このペプチドと塩基とから形成される塩があ
る。このような塩としては、例えば、アルカリ金属（例
えば、ナトリウム、カリウム）、アルカリ土類金属（例
えば、カルシウム、マグネシウム）、アンモニウムおよ
び置換アンモニウム（例えば、ジメチルアンモニウム、
トリエチルアンモニウム）などから形成される塩があ
る。

【００１７】式（１）で表されるペプチドは、例えば、
「ペプチド合成の基礎と実験」（丸善株式会社）、に記
載されているような一般的なペプチド合成法により製造
することができる。即ち、ペプチド液相合成法またはペ
プチド固相合成法によりペプチドカルボキシル末端より
順次アミノ酸の縮合反応を行うことにより式（１）で表
されるペプチドを製造することができる。または、ペプ
チド液相合成法またはペプチド固相合成法により目的の
ペプチドの断片を製造した後、これらをペプチド液相合
成法またはペプチド固相合成法により式（１）で表され
るペプチドを製造することができる。

【００１８】用いるアミノ酸原料としては、アミノ酸の
アミノ基が、例えば、ｔ−ブチルオキシカルボニル基
（Ｂｏｃ）や９−フルオレニルメチルオキシカルボニル
基（Ｆｍｏｃ）などの保護基で保護されているものが好
ましい。また、用いるアミノ酸原料の側鎖官能基はそれ
ぞれ好ましい保護基で保護されているものが好ましい。
これらアミノ酸側鎖保護基としては、例えば、ｔ−ブチ
ルオキシカルボニル基（Ｂｏｃ）、ｔ−ブチル基（ｔＢ
ｕ）、トリチル基（Ｔｒｔ）、ベンジル基（Ｂｚｌ）、
２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマンスルフォニ
ル基（Ｐｍｃ）などがあげられる。

【００１９】ペプチド結合を形成するための縮合剤とし
ては、例えば、Ｎ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボジイミ
ド（ＤＣＣ）、１−エチル−３−（３’−ジメチルアミ
ノプロピル）カルボジイミド（ＷＳＣ）、１Ｈ−ベンゾ
トリアゾール−１−イル−オキシ−トリス−（ジメチル
アミノ）−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート
（ＢＯＰ）、１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル−オ
キシ−トリス−ピロリジノ−ホスホニウムヘキサフル
オロホスフェート（ｐｙＢＯＰ）、２−（１Ｈ−ベンゾ
トリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメ
チルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴ
Ｕ）、２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−
１，１，３，３−テトラメチルウロニウムテトラフル
オロボレートなどがあげられる。また、Ｎ−ヒドロキシ
ベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）と上記縮合剤を好まし
い割合で混合して用いることもできる。

【００２０】また、ペプチド結合の形成にはカルボキシ
ル末端を活性化する方法を用いてもよく、その活性化剤
としては、例えば、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、ｐ
−ニトロフェニルエステルやペンタフルオロフェニルエ
ステルがある。ペプチド結合を形成する際に用いる塩基
としては、例えば、トリエチルアミン、ジイソプロピル
エチルアミン（ＤＩＥＡ）などがあげられる。ペプチド
結合形成反応に用いる溶媒としては、例えば、クロロホ
ルム、塩化メチレン、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ−ジメチ
ルホルムアミド（ＤＭＦ）やジメチルスルホキシドなど
がある。

【００２１】ペプチドまたはアミノ酸のアミノ末端アミ
ノ基の保護基であるＢｏｃおよびＦｍｏｃは、それぞれ
トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）またはピペリジンにより除
去することができる。ペプチドのアミノ酸残基の側鎖官
能基の保護基は、例えば、ＴＦＡ、フッ化水素（Ｈ
Ｆ）、トリフルオロメタンスルホン酸などにより除去す
ることができる。

【００２２】また、ペプチド固相合成法において、ペプ
チドまたはアミノ酸残基の側鎖官能基に保護基が付いて
いるペプチドをペプチド固相合成樹脂より脱離させる方
法としては、例えば、ＴＦＡを用いることができる。ペ
プチド固相樹脂からのペプチドの脱離と、アミノ酸残基
の側鎖官能基の保護基の脱離は、それぞれ同一反応系内
で同時に行うこともできる。あるいは、それぞれ独立に
行うこともできる。ペプチド固相合成用のペプチド固相
合成樹脂としては、例えば、４−ヒドロキシメチル−３
−メトキシフェノキシ酪酸−ベンズヒドリルアミン−ポ
リスチレン樹脂、ｐ−ベンジルオキシベンジルアルコー
ル−ポリスチレン樹脂やオキシム樹脂などの通常市販さ
れているものを用いることができる。

【００２３】目的のペプチドまたはその中間体は、例え
ば、イオンクロマトグラフィー、ゲル濾過クロマトグラ
フィー、逆相クロマトグラフィー、順相クロマトグラフ
ィー、再結晶、抽出、分別結晶化など、種々の方法によ
り単離、精製を行うことができる。また、こうして得ら
れた目的化合物である式（１）で表されるペプチドは、
常法によってそれぞれの塩に変換できる。

【００２４】本発明の目的化合物である式（１）で表さ
れるペプチドおよびその塩は新規であり、オピオイド受
容体に対し作用活性を有すると同時にタヒキニン受容体
に対し拮抗活性を有する。

【００２５】鎮痛薬または神経系の疾患の予防または治
療のために本発明の化合物を用いる場合、本発明の化合
物を活性成分とし、経口投与、非経口投与あるいは外用
に適した有機あるいは無機固体または液体賦形剤等の医
薬として許容しうる担体との混合物として該化合物を含
有する慣用的医薬製剤の形で用いる。医薬製剤は、錠
剤、顆粒、散剤、カプセル等の固形状であってもよく、
液剤、懸濁液、シロップ、乳剤、レモナーデ剤の液状で
あってもよい。必要ならば、上記製剤に補助剤、安定化
剤、湿潤剤、その他の常用添加剤、例えば、乳糖、クエ
ン酸、酒石酸、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウ
ム、白土、蔗糖、トウモロコシ澱粉、タルク、ゼラチ
ン、寒天、ペクチン、落花生油、オリーブ油、カカオ
油、エチレングリコール等を配合してもよい。

【００２６】本発明の目的化合物の用量は、患者の年
齢、症状、疾患または病状の種類、適用せんとする本発
明の化合物等によっても変動するが、一般的には１日あ
たり０．０１ｍｇ〜５００ｍｇの範囲の量を、あるいは
さらに多量を患者に投与すればよい。諸疾患の処置に当
たって、本発明の目的化合物の平均１回量を０．０５ｍ
ｇ、０．１ｍｇ、０．２５ｍｇ、０．５ｍｇ、１ｍｇ、
２０ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ等として用いればよ
い。

【００２７】以下本発明を実施例により具体的に説明す
るが、本発明はこれら実施例に限定されるものではな
い。なお、以下の例に用いた混合溶媒の組成比（％等）
は容量比を表す。

【００２８】

【実施例】

［例１］Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−ＤＨｉｓ−Ｌｅｕ−
Ｍｅｔ−ＮＨ₂ の酢酸塩の合成。

【００２９】（合成例１）Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−ＤＨｉｓ
（Ｔｒｔ）−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−アミド樹脂の合成。

【００３０】置換率が０．４９ｍｍｏｌ／ｇの４−
（２，４−ジメトキシフェニル−Ｆｍｏｃ−アミノメチ
ル）−フェノキシアセトアミド−ノルロイシルアミノメ
チル樹脂約０．５ｇをアミド樹脂として使用した。２０
％のピペリジンを含有するＤＭＦ（以下、２０％ピペリ
ジン／ＤＭＦという）２０ｍｌによりアミド樹脂のＦｍ
ｏｃ除去を行った。以下、このアミド樹脂上で順次、ア
ミノ酸の縮合を行った。Ｆｍｏｃの除去には２０％ピペ
リジン／ＤＭＦを、ペプチド結合形成反応には、ＰｙＢ
ｏｐ１６６ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ１９
ｍｇ（０．１２５ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ１７２μｌ
（１ｍｍｏｌ）を用いた。それぞれ用いるＦｍｏｃアミ
ノ酸を縮合に用いる順序で表１に示す。

【００３１】最終的にアミノ末端のＦｍｏｃを２０％ピ
ペリジン／ＤＭＦ２０ｍｌで除去した後、溶媒を除去
して目的物である、Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ
−Ｐｈｅ−ＤＨｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−アミ
ド樹脂を得た。

【００３２】

【表１】

【００３３】（合成例２）Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−ＤＨｉｓ−Ｌｅｕ−
Ｍｅｔ−ＮＨ₂ のＴＦＡ塩の合成。

【００３４】合成例１で得られた、Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−
Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−ＤＨｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｌｅｕ
−Ｍｅｔ−アミド樹脂を充分に乾燥させた後、ＴＦＡ：
トリイソプロピルシラン：水＝９４：２：４の混合液３
０ｍｌを加え、室温下で約１時間反応させた。固体を除
去した後、残った溶液を減圧留去して得られた残渣にジ
エチルエーテル約３０ｍｌを加え白色の固体を１７０ｍ
ｇ得た。この固体を２０％酢酸水溶液に溶解させ０．１
％ＴＦＡ水溶液、０．１％ＴＦＡ水溶液／アセトニトリ
ル混合溶媒を用いたＣ１８カラム逆相クロマトグラフィ
ーにより精製を行い、目的物であるＴｙｒ−Ｐｒｏ−Ｐ
ｈｅ−Ｐｈｅ−ＤＨｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ₂ のＴ
ＦＡ塩を１３０ｍｇ得た。

【００３５】（合成例３）Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−ＤＨｉｓ−Ｌｅｕ−
Ｍｅｔ−ＮＨ₂ の酢酸塩（以下、ペプチド塩ａという）
の合成。

【００３６】合成例２で得られたＴｙｒ−Ｐｒｏ−Ｐｈ
ｅ−Ｐｈｅ−ＤＨｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ₂ のＴＦ
Ａ塩１３０ｍｇを５％酢酸水溶液に溶解させ、予め２０
％酢酸水溶液で処理しておいた強塩基交換樹脂カラムに
て酢酸塩型に置換した。得られた酢酸溶液を凍結乾燥す
ることにより、本例１の目的化合物である、Ｔｙｒ−Ｐ
ｒｏ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−ＤＨｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｎ
Ｈ₂ の酢酸塩を１２０ｍｇ得た。

【００３７】［例２］Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−ＤＨｉｓ−Ｌｅｕ−
Ｍｅｔ−ＮＨ₂ の酢酸塩のアミノ酸分析による同定。

【００３８】例１で得られた、Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ
−Ｐｈｅ−ＤＨｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ₂ の酢酸塩
の一部を６ＮのＨＣｌで１４０℃、４時間で加水分解し
た後、そのアミノ酸組成を分析した。その結果を表２に
示す。

【００３９】

【表２】

【００４０】［例３］Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−ＤＰｈｅ−Ｐｈｅ−ＤＨｉｓ−Ｌｅｕ
−Ｍｅｔ−ＮＨ₂ の酢酸塩の合成。

【００４１】（合成例４）Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｐｒｏ−ＤＰｈｅ−Ｐｈｅ−ＤＨｉ
ｓ（Ｔｒｔ）−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−アミド樹脂の合成。

【００４２】置換率が０．４９ｍｍｏｌ／ｇの４−
（２，４−ジメトキシフェニル−Ｆｍｏｃ−アミノメチ
ル）−フェノキシアセトアミド−ノルロイシルアミノメ
チル樹脂約０．５ｇをアミド樹脂として使用した。２０
％ピペリジン／ＤＭＦ２０ｍｌによりアミド樹脂のＦ
ｍｏｃ除去を行った。以下、このアミド樹脂上で順次、
アミノ酸の縮合を行った。Ｆｍｏｃの除去には２０％ピ
ペリジン／ＤＭＦを、ペプチド結合形成反応には、Ｐｙ
Ｂｏｐ１６６ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ１９
ｍｇ（０．１２５ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ１７２μｌ
（１ｍｍｏｌ）を用いた。それぞれ用いるＦｍｏｃアミ
ノ酸を縮合に用いる順序で表３に示す。

【００４３】最終的にアミノ末端のＦｍｏｃを２０％ピ
ペリジン／ＤＭＦ２０ｍｌで除去した後、溶媒を除去
して目的物である、Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｐｒｏ―ＤＰｈ
ｅ−Ｐｈｅ−ＤＨｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ア
ミド樹脂を得た。

【００４４】

【表３】

【００４５】（合成例５）Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−ＤＰｈｅ−Ｐｈｅ−ＤＨｉｓ−Ｌｅｕ
−Ｍｅｔ−ＮＨ₂ のＴＦＡ塩の合成。

【００４６】合成例４で得られた、Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−
Ｐｒｏ−ＤＰｈｅ−Ｐｈｅ−ＤＨｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｌｅ
ｕ−Ｍｅｔ−アミド樹脂を充分に乾燥させた後、ＴＦ
Ａ：トリイソプロピルシラン：水＝９４：２：４の混合
液３０ｍｌを加え、室温下で約１時間反応させた。固体
を除去した後、残った溶液を減圧留去して得られた残渣
にジエチルエーテル約３０ｍｌを加え白色の固体を１５
０ｍｇ得た。この固体を２０％酢酸水溶液に溶解させ
０．１％ＴＦＡ水溶液、０．１％ＴＦＡ水溶液／アセト
ニトリル混合溶媒を用いたＣ１８カラム逆相クロマトグ
ラフィーにより精製を行い、目的物であるＴｙｒ−Ｐｒ
ｏ−ＤＰｈｅ−Ｐｈｅ−ＤＨｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｎ
Ｈ₂ のＴＦＡ塩を１００ｍｇ得た。

【００４７】（合成例６）Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−ＤＰｈｅ−Ｐｈｅ−ＤＨｉｓ−Ｌｅｕ
−Ｍｅｔ−ＮＨ₂ の酢酸塩（以下、ペプチド塩ｂとい
う）の合成。

【００４８】合成例５で得られたＴｙｒ−Ｐｒｏ−ＤＰ
ｈｅ−Ｐｈｅ−ＤＨｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ₂ のＴ
ＦＡ塩１３０ｍｇを５％酢酸水溶液に溶解させ、予め２
０％酢酸水溶液で処理しておいた強塩基交換樹脂カラム
にて酢酸塩型に置換した。得られた酢酸溶液を凍結乾燥
することにより、本例３の目的化合物である、Ｔｙｒ−
Ｐｒｏ−ＤＰｈｅ−Ｐｈｅ−ＤＨｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ
−ＮＨ₂ の酢酸塩を９７ｍｇ得た。

【００４９】［例４］Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−ＤＰｈｅ−Ｐｈｅ−ＤＨｉｓ−Ｌｅｕ
−Ｍｅｔ−ＮＨ₂ 酢酸塩のアミノ酸分析による同定。

【００５０】例３で得られた、Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−ＤＰｈ
ｅ−Ｐｈｅ−ＤＨｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ₂ 酢酸塩
の一部を６ＮＨＣｌで１４０℃、４時間で加水分解し
た後、そのアミノ酸組成を分析した。その結果を表４に
示す。

【００５１】

【表４】

【００５２】［例５］Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−ＤＨｉｓ−Ｌｅｕ−
Ｍｅｔ−ＮＨ₂ 酢酸塩の合成。

【００５３】（合成例７）Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｐｒｏ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｐｈｅ
−ＤＨｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−アミド樹脂の
合成。

【００５４】置換率が０．４９ｍｍｏｌ／ｇの４−
（２，４−ジメトキシフェニル−Ｆｍｏｃ−アミノメチ
ル）−フェノキシアセトアミド−ノルロイシルアミノメ
チル樹脂約０．５ｇをアミド樹脂として使用した。２０
％ピペリジン／ＤＭＦ２０ｍｌによりアミド樹脂のＦ
ｍｏｃ除去を行った。以下、このアミド樹脂上で順次、
アミノ酸の縮合を行った。Ｆｍｏｃの除去には２０％ピ
ペリジン／ＤＭＦを、ペプチド結合形成反応には、Ｐｙ
Ｂｏｐ１６６ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ１
９ｍｇ（０．１２５ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ１７２μｌ
（１ｍｍｏｌ）を用いた。それぞれ用いるＦｍｏｃアミ
ノ酸を縮合に用いる順序で表５に示す。

【００５５】最終的にアミノ末端のＦｍｏｃを２０％ピ
ペリジン／ＤＭＦ２０ｍｌで除去した後、溶媒を除去
して目的物である、Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｐｒｏ―Ｔｒｐ
（Ｂｏｃ）−Ｐｈｅ−ＤＨｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｌｅｕ−Ｍ
ｅｔ−アミド樹脂を得た。

【００５６】

【表５】

【００５７】（合成例８）Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−ＤＨｉｓ−Ｌｅｕ−
Ｍｅｔ−ＮＨ₂ ＴＦＡの合成。

【００５８】合成例７で得られた、Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−
Ｐｒｏ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｐｈｅ−ＤＨｉｓ（Ｔｒ
ｔ）−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−アミド樹脂を充分に乾燥させた
後、ＴＦＡ：トリイソプロピルシラン：水＝９４：２：
４の混合液３０ｍｌを加え、室温下で約１時間反応させ
た。固体を除去した後、残った溶液を減圧留去して得ら
れた残渣にジエチルエーテル約３０ｍｌを加え白色の固
体を１６０ｍｇ得た。この固体を１Ｎ塩酸溶液に溶解さ
せ凍結乾燥を行い白色の粉末を約１５０ｍｇ得た。この
粉末を２０％酢酸水溶液に溶解させ０．１％ＴＦＡ水溶
液、０．１％ＴＦＡ水溶液／アセトニトリル混合溶媒を
用いたＣ１８カラム逆相クロマトグラフィーにより精製
を行い、目的物であるＴｙｒ−Ｐｒｏ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ
−ＤＨｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ₂ ＴＦＡを１３０
ｍｇ得た。

【００５９】（合成例９）Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−ＤＨｉｓ−Ｌｅｕ−
Ｍｅｔ−ＮＨ₂ 酢酸塩（以下、ペプチド塩ｃという）の
合成。

【００６０】合成例８で得られたＴｙｒ−Ｐｒｏ−Ｔｒ
ｐ−Ｐｈｅ−ＤＨｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ₂ ＴＦ
Ａ１３０ｍｇを５％酢酸水溶液に溶解させ、予め２０％
酢酸水溶液で処理しておいた強塩基交換樹脂カラムにて
酢酸塩型に置換した。得られた酢酸溶液を凍結乾燥する
ことにより、本例５の目的化合物である、Ｔｙｒ−Ｐｒ
ｏ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−ＤＨｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ
₂ 酢酸塩を１１５ｍｇを得た。

【００６１】［例６］Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−ＤＨｉｓ−Ｌｅｕ−
Ｍｅｔ−ＮＨ₂ 酢酸塩のアミノ酸分析による同定。

【００６２】例５で得られた、Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｔｒｐ
−Ｐｈｅ−ＤＨｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ₂ 酢酸塩の
一部を６ＮＨＣｌで１４０℃、４時間で加水分解した
後、そのアミノ酸組成を分析した。その結果を表６に示
す。

【００６３】

【表６】

【００６４】［例７］ＮＫ−２受容体結合活性試験ヒトＮＫ−２受容体を発現しているチャイニーズハムス
ターオバリー（Chinese Hamster Ovary ）細胞を用い
て、本発明化合物（前記ペプチド塩ａ〜ｃ）の受容体に
対する親和性を測定した。親和性は、［ ¹²⁵Ｉ］ニュー
ロキニン−Ａを用い、結合競合試験によって決定した。
結果を表７に示す。なお、数値はペプチド塩の濃度１．
０×１０^-6Ｍにおける阻害率（％）を表す。

【００６５】

【表７】

【００６６】

【発明の効果】本発明のペプチドは、エンドモルフィン
に対し作動活性を示すとともにタヒキニン受容体に対し
拮抗活性を示す構造を有する、オピオイド様ペプチドで
ある。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】下記式（１）で表されるペプチド（ただ
し、下記式（２）および（３）で表されるペプチドを除
く）、またはその塩。【化１】Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｘ−Ｐｈｅ−Ｙ−ＮＨ₂ ・・・（１）Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−ＮＨ₂ ・・・（２）Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−ＮＨ₂ ・・・（３）［式（１）中、ＸおよびＹはそれぞれ非天然型であって
もよいアミノ酸残基、ペプチド残基または単結合（ただ
し、Ｘ、Ｙは同時に単結合ではない）を表し、Ｐｒｏ、
Ｐｈｅ、ＸまたはＹであるアミノ酸残基、および、Ｘま
たはＹであるペプチド残基中の１個以上のアミノ酸残基
はＤ体であってもよい。なお、式（２）および（３）で
表されるペプチド残基中のアミノ酸残基はすべてＬ体で
ある。］
【請求項２】Ｘがアミノ酸残基であり、Ｙがアミノ酸残
基またはアミノ酸残基数３以下のペプチドである、請求
項１記載のペプチドまたはその塩。
【請求項３】ＸがＰｈｅまたはＴｒｐであり（ただし、
いずれもＤ体であってもよい）、Ｙがアミノ末端側より
Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ（ただし、ＨｉｓはＤ体）であ
る、請求項１または２記載のペプチドまたはその塩。
【請求項４】請求項１、２または３記載のペプチドまた
はその塩を有効成分とする医薬。